Name: אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח של התפתחות עוברית היפרדות In Vivo (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-08T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 43 s
Description: למדו אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח התפתחות עוברית בעכברים. שיטה זו מאפשרת מעקב בלתי פולשני אחרי עוברים וניתוח פרמטרים שלייתיים וזרימת דם לאורך כל ההריון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

רבים בזכות החברה מכשיר הדמיה (במיוחד כדי מגדלנה שטיינר, קתרין Suppelt ו מאייר סנדרה) עבור תמיכה נעימה ומהירה, עונה על כל שאלותינו בנוגע מערכת הדמיה ואת השימוש מיד לחלוטין. אנו אסירי תודה פרופסור הנס-ריימר Rodewald, ד ר תור Feyerabend (DKFZ היידלברג, גרמניה) למתן את המושבה Cpa3. בנוסף, אנו מודים סטפני Langwisch, מי היה אחראי על המושבות העכבר ואת מי שנוצר התמונות באיור 1.
העבודה ומערכת הדמיה במימון מענקים מ דויטשה פתוח (DFG) A.C.Z. (ZE526/6-1 ו- AZ526/6-2) היו פרויקטים נעוץ DFG עדיפות תוכנית 1394 "תאי פיטום על בריאות ומחלה."

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על-ידי "אנהלט Sachsen Landesverwaltungsamt: 42502-2-1296UniMD."
1. ניתוח ניסיוני
<ol><li>חבר 6 עד 8 בת נקבה חשוכת-MC C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) עכברים ו- MC-מספיק C57BL/6J-Cpa3+/+ (פקדי המושבה; Cpa3+/+) עם זכרים BALB/c.</li>
	<li>להגדיר היום ההיריון (gd) 0 לאחר אישור של התקע הנרתיק, להתייחס הנקבות מיד לאחר אישור הכנס. הערה: פקק הוא הזרע של הגבר, פתח הנרתיק של האישה.<ol>
<li>מזריקים µL 250 ל- PBS intraperitoneally בשליטה Cpa3+/+ נקבות.</li>
		<li>מזריקים µL 250 של אנטי-CD122 (0.25 מ ג) intraperitoneally ב Cpa3 חשוכת-MCCre /+ נקבות. הערה: זריקה של 0.25 מ"ג של אנטי-CD122 מכלה תודה היקפיים ו uNKs ב Cpa3 חשוכת-MCCre /+ נקבות כפי שתואר לעיל22.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לחכות עד gd5. הערה: gd5, יש האפשרות המוקדם ביותר לניתוח ההשתלה.<ol>
<li>להמשיך עם שלבים 2-5 לבדיקת אולטרסאונד.</li>
	</ol>
</li>
	<li>לבצע את אולטראסאונד הדמיה ב gd5, 8, 10, 12 ו 14.</li>
</ol>2. הכנה של מערכת סאונד
<ol><li>להפעיל את המערכת (איור 1A; החשמל הראשי על הגב או על המחשב המתנה באתר השמאלי), פלטפורמת מחוממת (איור 1B; על משטח שליטה), ג'ל חם (איור 1C). הערה: אולטרסאונד ג'ל צריך לחמם עד כ 0.5 h.</li>
	<li>להבטיח כי יחידת איזופלוריין מילוי דיו (איור 1D).</li>
	<li>פתח חדש ללמוד או סדרה חדשה מחקר קיים בדפדפן. למלא את כל המידע הנדרש (בעלים, לימוד שם, שמות סדרות, נתונים בעלי חיים) בחלון פרטי ללמוד . לחץ על אישור.</li>
	<li>לאחר לחיצה על אישור, ודא החלון הדמיה B-מצב מופיע ההדמיה ב B-מצב מתחיל באופן אוטומטי.</li>
</ol>3. העכבר טיפול
<ol><li>ההרדמה של העכבר<ol>
<li>הנח את העכבר בתיבת תמונות ציפורים (איור 1E), לסגור את תיבת, פתח הצינור איזופלוריין לתיבה תמונות ציפורים, והפעל את איזופלוריין (ריכוז 3.5%).</li>
		<li>כאשר העכבר הוא מורדם, נמוך יותר (כדי ריכוז 1.5%) ו לנתב מחדש את הזרימה איזופלוריין על-ידי פתיחת הצינור בכיוון של פלטפורמת חימום וסגור את הזרימה אל תיבת תמונות ציפורים. הערה: כדי להגיע הרדמה מספקת, לחכות עשר נוספים s אחרי העכבר זז כבר לא.</li>
		<li>להעביר את העכבר מהר מהתיבה נוקאאוט פלטפורמת חימום (איור 1F) בעמדה הגבי ומקם בעדינות אפה בצינור האף הרדמה שממוקם בראש הפלטפורמה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>קיבעון, אפילציה, הכנה של העכבר למדידת<ol>
<li>במקום הגנה העין קרם בכל עין של העכבר כדי למנוע יובש בעיניים.</li>
		<li>במקום טיפת ג'ל אלקטרודה אחת על כל אחד מארבעת האזורים נחושת על פלטפורמת מחוממת (איור 1F).</li>
		<li>הקש על הידיים עם הדבקה על אלקטרודה מצופה ג'ל אזורים של פלטפורמת חימום.</li>
		<li>בדיקת אק ג [ערך אופטימלי = 450-550 פעימות לדקה (BPM)], פיזיולוגיה של מערכת הנשימה בכל עת. הערה: באמצעות בדיקה רקטלית, מדידת טמפרטורת הגוף הוא אפשרי, אבל לא הכרחי.</li>
		<li>המקום דפילציה קרם בבטן של העכבר, לשפשף השמנת עם מטלית כותנה, רגע בסביבות 1 מינימלית להסיר את השמנת עם קומפרס ספוגי מים. חזור על שלב זה, אם לא כל השערות נעלמו.</li>
		<li>להחיל את הג'ל אולטרסאונד ומחוממת מראש על העור depilated.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. מדידות ורכישה של סרטי וידאו ותמונות
<ol><li>להחזיק המתמר (איור 1 ג'י) ביד או. תהדק את זה במכשיר אחזקות (איור 1 H; מחזיק המכשיר מומלץ).</li>
	<li>לזהות שלפוחית השתן עם המתמר ולהשתמש בה כנקודת התייחסות. להעביר את המתמר האתרים ימין ועל שמאל של הבטן כדי מעקב השתלות.</li>
	<li>B-מצב עבור ויזואליזציה של מבנים אנטומיים בתמונה בגווני אפור 2D<ol>
<li>הזז המתמר או חימום טבלה פלטפורמה העכבר איפה מקובעים עד ההשתלה הראשונה מוצגת על המסך בגודל הגדול ביותר שלה.<ol>
<li>בחר תווית תמונה והזן שם או מסגרת החנות (אחסון ללא שם) כדי לאחסן מסגרות יחיד או חנות Cine לאחסון של cineloop עבור ההשתלה כל המידות.</li>
		</ol>
</li>
		<li>הזז את מתמר או הטבלה כדי להביא את השליה למיקום שבו זרימת הדם ב- UmA יהיה גלוי. לאחסן מסגרת בודדת או cineloop (ראה שלב 4.3.1.1) למדידות היפרדות. הערה: מדידות היפרדות אפשריים בין gd10 ואילך.</li>
		<li>להמשיך עם כל השתלות באמצעות אותה שיטה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מצב דופלר צבע כדי להמחיש ולקבוע את כיוון זרימת הדם<ol>
<li>לחץ על לחצן צבע .</li>
		<li>הזיזו את תיבת צבע (באזור זה, האות הוא גלוי) לעמדת הנדרש על-ידי שימוש על כדור העקיבה. במידת הצורך, לשנות את הגודל של תיבת על ידי לחיצה על עדכן ולעבור על כדור העקיבה (על צד ימין/כלפי מעלה = גדול; השמאלי בצד/כלפי מטה = קטן יותר). כאשר תיבת בגודל המתאים, לחץ על בחר.</li>
		<li>לאחסן מסגרות יחיד או cineloops כפי שמתואר בשלב 4.3.1.1.</li>
	</ol>
</li>
	<li>דופק-גל (PW) במצב דופלר לכמת את זרימת הדם דרך כלי ב ארטריה uterina (עורק הרחם, UA), אומה<ol>
<li>אתר את האזור עניין ברכישת דופלר צבע. הערה: UA ממוקם סימטרית על שלפוחית השתן, והוא UmA ממוקם בין העובר לבין השליה.</li>
		<li>יופיעו העיתונות PWשל קו מקווקו. לעבור את הקו הזה כלי הדם עניין ולהתאים את הזווית של הקו באמצעות הידית "זווית דופלר" עולה בקנה אחד עם זרימת הדם. לחץ על עדכן. הערה: הזווית בין כיוון זרימת הדם לבין המתמר חייב להיות עקבי בתוך כל בעלי החיים, במיוחד בעת שימוש בזוויות של יותר מ 60 ° צלזיוס (כאן, ° 70 עבור UAs 45° UmAs שימשו).</li>
		<li>חנות של cineloop של הקווים דופלר המופיעים בחלון רכישה דופלר PW.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. סקירת גימור והקפאה-אחזקה ושמירה על סדרה
<ol><li>כדי לסקור נתונים, הקש ניהול מחקר. גלול אל התמונה הממוזערת של הריבית ולחץ פעמיים על העדכון.</li>
	<li>הקש ראשית ניהול מחקר ולאחר מכן סגור בחלון הדפדפן כדי לסיים את הנתונים ולשמור את סידרה מוקלטת. הערה: לאחר סגירת סדרה, אין אפשרות לאחסן מסגרות או cineloops בסדרה זו יותר.</li>
</ol>6. העכבר טיפול בעקבות רכישת נתונים
<ol><li>להסיר את הג'ל החיה anaesthetized בעזרת קומפרסים יבש.</li>
	<li>הסר את הקלטת כירורגי בקפידה כפות רגליו.</li>
	<li>סגור את הצינור איזופלוריין (ריכוז 0%).</li>
	<li>. המשך עם אולטראסאונד הבאים ב- gd5, 8, 10 ו- 12.<ol>
<li>מקם את החיה לבד בכלוב למשך תקופה מינימלית של 5 דקות אז זה הזמן להתעורר, להתמצא.</li>
		<li>הנח את העכבר חזרה לכלוב המקורי. הערה: אל תכבה את איזופלוריין לפני הסרת את ג'ל ואת הסרט כירורגי, כמו עכברים להתעורר מהר מאוד (בסביבות 20 s) לאחר כיבוי של איזופלוריין.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להמשיך עם הניתוח האולטרסאונד הבאות ב- gd14.<ol>
<li>להקריב את הנקבה לפני שהוא מתעורר מאת נקע בצוואר הרחם. פתח את החיה, להסיר את הרחם, להפריד את העוברים ואת מאחד לשני, ומדידת משקולות עוברית, היפרדות.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. העתקה של ייבוא הנתונים
<ol><li>לסמן סדרה אחת או יותר על-ידי לחיצה על ייצוא ל ובחר את שטח האחסון כדי להעתיק נתונים על גבי דיסק קשיח.</li>
	<li>לפתוח את התוכנה במחשב, לחץ על העתק מן ובחר הסדרה/המחקר מהדיסק הקשיח כדי לייבא סדרה/מחקר לתוך התוכנה.</li>
	<li>לנתח את הנתונים עם התוכנה.</li>
</ol>

<ol><li>Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. <a target="_blank" href="https://www.thieme-connect.com/products/ejournals/abstract/10.1055/s-0032-1312759">Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren?</a> Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).</li>
<li>Jones, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echolocation%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Echolocation.</a> Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).</li>
<li>Simmons, J. A. <a target="_blank" href="https://nyaspubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/j.1749-6632.1971.tb13095.x">The sonar receiver of the bat.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 188, 161-174 (1971).</li>
<li>Zala, S. M., Reitschmidt, D., Noll, A., Balazs, P., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-dependent+modulation+of+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice+%28Mus+musculus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Public+Library+of+Science+ONE%22%5BJournal%5D)">Sex-dependent modulation of ultrasonic vocalizations in house mice (Mus musculus musculus).</a> Public Library of Science ONE. 12 (12), e0188647(2017).</li>
<li>Wöhr, M., Seffer, D., Schwarting, R. K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+Socio-Affective+Communication+in+Rats+through+Playback+of+Ultrasonic+Vocalizations%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Studying Socio-Affective Communication in Rats through Playback of Ultrasonic Vocalizations.</a> Current Protocols in Neuroscience. 75, 1-8 (2016).</li>
<li>Hasiniaina, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+frequency%2Fultrasonic+communication+in+a+critically+endangered+nocturnal+primate%2C+Claire%27s+mouse+lemur+%28Microcebus+mamiratra%29%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">High frequency/ultrasonic communication in a critically endangered nocturnal primate, Claire's mouse lemur (Microcebus mamiratra).</a> American Journal of Primatology. , e22866(2018).</li>
<li>Yeo, L., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Color+and+power+Doppler+combined+with+Fetal+Intelligent+Navigation+Echocardiography+%28FINE%29+to+evaluate+the+fetal+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Obstetrics+%26+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Color and power Doppler combined with Fetal Intelligent Navigation Echocardiography (FINE) to evaluate the fetal heart.</a> Ultrasound in Obstetrics & Gynecology. 50 (4), 476-491 (2017).</li>
<li>Teichholz, L. E. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0033062075800193">Echocardiography in valvular heart disease.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 17 (4), 283-302 (1975).</li>
<li>Zechner, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.springerlink.com/index/570nn04566572457.pdf">Lungensonographie in der Akut- und Intensivmedizin.</a> Der Anaesthesist. 61 (7), 608-617 (2012).</li>
<li>Blank, W., Schuler, A. <a target="_blank" href="https://econtent.hogrefe.com/doi/full/10.1024/1661-8157/a002703">Sonografie der Schilddrüse - Update 2017.</a> Praxis. 106 (12), 631-640 (2017).</li>
<li>Hansen, K. L., Nielsen, M. B., Ewertsen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonography+of+the+Kidney%3A+A+Pictorial+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostics%22%5BJournal%5D)">Ultrasonography of the Kidney: A Pictorial Review.</a> Diagnostics. 6 (1), Basel, Switzerland. (2015).</li>
<li>Older, R. A., Watson, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+anatomy+of+the+normal+male+reproductive+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Ultrasound anatomy of the normal male reproductive tract.</a> Journal of Clinical Ultrasound. 24 (8), 389-404 (1996).</li>
<li>Reeves, J. J., Rantanen, N. W., Hauser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transrectal+real-time+ultrasound+scanning+of+the+cow+reproductive+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Transrectal real-time ultrasound scanning of the cow reproductive tract.</a> Theriogenology. 21 (3), 485-494 (1984).</li>
<li>Sharma, M., Somani, P., Sunkara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+gall+bladder+by+endoscopic+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Imaging of gall bladder by endoscopic ultrasound.</a> World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 10 (1), 10-15 (2018).</li>
<li>Weskott, H. -P. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s00117-011-2254-3">Ultraschall in der Diagnostik maligner Lymphome.</a> Der Radiologe. 52 (4), 347-359 (2012).</li>
<li>Shirinifard, A., Thiagarajan, S., Johnson, M. D., Calabrese, C., Sablauer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+Absolute+Blood+Perfusion+in+Mice+Using+Dynamic+Contrast-Enhanced+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Measuring Absolute Blood Perfusion in Mice Using Dynamic Contrast-Enhanced Ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 43 (8), 1628-1638 (2017).</li>
<li>Quaia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+tissue+perfusion+by+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22European+Radiology%22%5BJournal%5D)">Assessment of tissue perfusion by contrast-enhanced ultrasound.</a> European Radiology. 21 (3), 604-615 (2011).</li>
<li>Saw, S. N., Poh, Y. W., Chia, D., Biswas, A., Zaini Mattar, C. N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+hemodynamic+wall+shear+stresses+in+human+umbilical+vessels+from+normal+and+intrauterine+growth+restricted+pregnancies%5BTitle%5D)+AND+%22Biomechanics+and+Modeling+in+Mechanobiology%22%5BJournal%5D)">Characterization of the hemodynamic wall shear stresses in human umbilical vessels from normal and intrauterine growth restricted pregnancies.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. , (2018).</li>
<li>Kessler, J., Rasmussen, S., Godfrey, K., Hanson, M., Kiserud, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+growth+restriction+is+associated+with+prioritization+of+umbilical+blood+flow+to+the+left+hepatic+lobe+at+the+expense+of+the+right+lobe%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Research%22%5BJournal%5D)">Fetal growth restriction is associated with prioritization of umbilical blood flow to the left hepatic lobe at the expense of the right lobe.</a> Pediatric Research. 66 (1), 113-117 (2009).</li>
<li>Laurin, J., Lingman, G., Marsál, K., Persson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+blood+flow+in+pregnancies+complicated+by+intrauterine+growth+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Fetal blood flow in pregnancies complicated by intrauterine growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 69 (6), 895-902 (1987).</li>
<li>Arduini, D., Rizzo, G., Romanini, C., Mancuso, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+blood+flow+velocity+waveforms+as+predictors+of+growth+retardation%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Fetal blood flow velocity waveforms as predictors of growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 70 (1), 7-10 (1987).</li>
<li>Meyer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chymase-producing+cells+of+the+innate+immune+system+are+required+for+decidual+vascular+remodeling+and+fetal+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Chymase-producing cells of the innate immune system are required for decidual vascular remodeling and fetal growth.</a> Scientific Reports. 7, 45106(2017).</li>
<li>Meyer, N., Schüler, T., Zenclussen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Ablation+of+Uterine+Natural+Killer+Cells+and+Uterine+Mast+Cells+in+Mice+Leads+to+Poor+Vascularization+and+Abnormal+Doppler+Measurements+That+Compromise+Fetal+Well-being%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Ablation of Uterine Natural Killer Cells and Uterine Mast Cells in Mice Leads to Poor Vascularization and Abnormal Doppler Measurements That Compromise Fetal Well-being.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1913(2017).</li>
<li>Evans, D. H., Jensen, J. A., Nielsen, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasonic+color+Doppler+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Interface+Focus%22%5BJournal%5D)">Ultrasonic color Doppler imaging.</a> Interface Focus. 1 (4), 490-502 (2011).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

באמצעות המערכת שלנו אולטרסאונד, להדגים גידול העובר ההגבלה של אמהות MC/NK-לקויה של gd10 על. יתר על כן, ב- gd10 ו- 12, הבחנו מידות היפרדות מופחתת, ו- gd14 העדר או לדוגמות של זרימת הדיאסטולי סוף UmAs של עוברים מסוימים של עכברים uMC/uNK-לקויה. זה סימן vascularization המסכן היה קשור עם מדד בהתנגדות משמעותית של העורקים המציין IUGR. תוצאות לאשר את תפקידה החשוב של uMCs ו- uNKs על ההריון ועל העובר רווחה, להבנת הקורס של IUGR.
הפרוטוקול הוא ישים על כל יום ההיריון מ gd5 ואילך (לאחר ההשתלה). ישנם כמה שלבים...

אולטרסאונד היא גלי קול בתדירויות מעל שמיע של האוזן האנושית, גבוה 20 kHz1. חיות כמו עטלפים, ויילס, דולפינים2,3, עכברים4, חולדות5ולהשתמש בעכבר הלמורים6 כל אולטרסאונד של התמצאות או תקשורת. בני האדם לנצל אולטראסאונד עבור מספר יישומים טכניים, רפואיים או. מכשיר אולטרה סאונד הוא מסוגל ליצור גל הקול להפיץ, מייצגים את האות. אם אולטרסאונד נתקל מכשול, הצליל משתקף, נספג או לעבור דרכו. היישום של אולטרסאונד כמו שיטת הדמיה, הנקרא sonography, משמשת לניתוח של רקמות אורגניות-אנוש או רפואה וטרינרית כמו הלב (אקוקרדיוגרפיה)7,8, לונג9בלוטת התריס10 , הכליות11, וספינלי השתן וההולדה12,13; גילוי אבני מרה14 וגידולים15; הערכת זלוף16,של כלי הדם או אברים-17. אולטרסאונד היא שיטה סטנדרטית בלידתי במהלך ההריון, העובר התפתחותיות או ליקויי ניתן לזהות מוקדם. באופן ספציפי, הצמיחה של העובר מנוטר בקפדנות במרווחי זמן קבועים כדי לזהות של IUGR אפשרי. בסופו של דבר, יהיה פיקוח זרימת הדם העוברי, כמו זה יכול להצביע צמיחה הגבלות18,19,20,21.
היתרון העיקרי של אולטראסאונד הדמיה לעומת שיטות אחרות כמו רדיוגרפיה היא אנטיוירוסים של הצליל של רקמות כדי להיות מנותח. שיטה זו קלה ומהירה בלתי פולשני, ללא כאבים, וניתן להשתמש מספר פעמים. להוצאה הראשונית של מכשיר אולטרה סאונד הוא יקר; עם זאת, חומרים הדרושים הם זולים. מערכת סאונד בשימוש כתב יד זה מתאים למגוון רחב של מודלים בעלי חיים (קרי, עכברים ודגים) ואילו לבני מכשיר אולטרה סאונד דורש תדירות של 3-15 מגה-הרץ, תדירות של 15-70 מגה-הרץ נדרש עבור עכברים.
היד מתאר פרוטוקול לשימוש של B-מצב, מצב דופלר צבע ומצב פולס-גל דופלר. התיאור כולל הכנה של עכברים וכן ביצועים, נתוני רכישה, אחסון. שיטה זו כבר העכבר בהצלחה יישומית שונים זנים ימים בכלל הריונית, יכול לשמש כדי לחקור את התפתחות עוברית היפרדות, כמו גם פרמטרים דם אימהי ו עוברית. כאן, כל היישומים מוסברים בהתבסס על המחקרים שלנו העסקת עכברים MC/NK-לקויה ושליטה בהריון.

<table><tbody><tr><td>LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)</td><td>BioLegend</td><td>123204</td><td>Klon TM-&beta; 1; 500 ומיקרו; </td></tr><tr><td>g מערכת Vevo 2100</td><td>&nbsp; פוג'י פילם ויז'ואלסוניקס בע"מ</td><td></td><td>מתמר&nbsp; MS550D-0421</td></tr><tr><td>תוכנת Vevo LAB</td><td>&nbsp; פוג'י פילם ויז'ואלסוניקס בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Baxter</td><td>PZN: ג'ל</td> אלקטרודה 6497131 <td></td></tr><tr><td></td><td>Parker</td><td>12_8</td><td></td></tr><tr><td>סרט כירורגי</td><td>3M Transpore</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>קרם עיניים</td><td>Bayer</td><td>PZN: אפליקטורים עם</td> קצה כותנה 1578675 <td></td></tr><tr><td></td><td>Raucotupf</td><td>11969</td><td>100 חתיכות</td></tr><tr><td>קרם אפילציה</td><td>רקיט בנקיזר</td><td></td><td></td>2077626</tr><tr><td>קומפרסים</td><td>Nobamed Paul Danz AG</td><td>856110</td><td>10 x 10 ס"מ</td></tr><tr><td>ג'ל אולטרסאונד</td><td>Gello GmbH</td><td>246000</td><td></td></tr></tbody></table>

אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח של התפתחות עוברית היפרדות in vivo

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

אולטראסאונד הדמיה היא שיטה נפוצה כדי לזהות חריגות איברים וגידולים ברקמות האדם ושל בעלי החיים. השיטה היא לא פולשנית, לא מזיק, ללא כאבים, היישום הוא קל, מהיר, והוא יכול להיעשות בכל מקום, אפילו עם מכשירים ניידים. במהלך ההריון, אולטראסאונד הדמיה משמש standardly כדי לעקוב מקרוב אחר התפתחות העובר. הטכניקה חשוב להעריך את ההגבלה גדילה תוך רחמי (IUGR), סיבוך הריון עם קצר - ארוכת בריאות תוצאות עבור האם והעובר. הבנת התהליך של IUGR היא הכרחית לפיתוח אסטרטגיות טיפוליות אפקטיביות.
מערכת סאונד בשימוש כתב היד הזה הוא מכשיר אולטרסאונד שיוצרו לניתוח של חיות קטנות, והוא יכול לשמש בתוך תחומי המחקר השונים, כולל הריון מחקר. כאן נתאר את השימוש של המערכת לניתוח ויוו של עוברים מתא טבעי רוצח (NK) תא/תורן (MC)-לקוי מהאמהות ללדת מוגבלת גידול הגורים. הפרוטוקול כולל הכנה של המערכת, טיפול של העכברים לפני ובמהלך מדידות, ודרך השימוש B-המצב, צבע דופלר מצב ומצב דופלר דופק-גל. גודל העובר, בגודל היפרדות אספקת הדם לעובר נותחו. מצאנו השרשה מופחתת וגדלים קטן מאחד לשני בעכברים NK/MC-לקויה של אמצע ההיריון ואילך. בנוסף, MC/NK-מחסור שאימן נעדר וביטל זרימה הדיאסטולי סוף עוברית ארטריה umbilicalis(UmA), אינדקס ההתנגדות מוגברות. ניתן להשתמש בשיטות המתוארות הפרוטוקול בקלות עבור נושאי מחקר בנושא ואינו שאינם קשורים.

רכיבים בודדים של מערכת סאונד בשימוש כתב יד זה מוצגים באיור1. איור 2 מציג נציג תמונות אולטרסאונד רכשה ב B-מצב gd5, 8, 10 ו- 12 (B) , מדידת השטח השרשה המתאימים תוצאות (א), הוכחת אזור ההשתלה מופחתת משמעותית Cpa3 אנטי-CD122-טיפולCre / + עכברים מן gd10 ואילך.
איור 3 מראה אחד חלקי ההשתלה (basalis רותמי...

כאן נתאר את הטכניקה של אולטראסאונד בתדירות גבוהה עבור ויוו ניתוח של העוברים בעכברים. שיטה זו מאפשרת את המעקב של עוברים הניתוח של היפרדות פרמטרים, כמו גם זרימת דם אימהי ו העובר במהלך ההריון.

אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח של התפתחות עוברית היפרדות In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

שיטה זו חשובה מאוד לענות על שאלות מפתח בתחומי האונקולוגיה, נוירו-ביולוגיה, קרדיולוגיה ופיתוח עוברי, וכמובן גם זה חשוב בתחום חקר הרבייה. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא לא פולשנית, ללא כאבים, קלה, מהירה ומאפשרת מעקב אחר עוברים בנקודות זמן הריון רלוונטיות לאורך כל ההריון. לפחות חצי שעה לפני הליך ההדמיה, הפעל את מערכת האולטרסאונד, את הפלטפורמה המחוממת ואת חם הג'ל.פתח מחקר חדש או סדרה חדשה במחקר קיים בדפדפן. הזן את כל המידע הדרוש בחלון פרטי המחקר. לחץ על אישור ואשר שחלון הדימות במצב B מופיע.כאשר האולטרסאונד מוכן, לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר הרדמה, ולהחיל משחה על העיניים של החיה. מניחים טיפה אחת של ג'ל אלקטרו על כל אחד מ-4 חלקי הנחושת של הפלטפורמה המחוממת, ומאבטחים את הכפות לחלקים מצופים ג'ל האלקטרו של הרציף. מוציאים את השיער מהבטן של החיה עם קרם depilatory ו ספוג כותנה, לשטוף את השמנת מן העור depilated לאחר דקה אחת עם דחיסה ספוגה במים.לאחר מכן להחיל ג'ל אולטרסאונד מחומם מראש על האזור החשוף. אחת הסיבות לעוצמת אות נמוכה יכולה להיות הכמות הנמוכה של ג'ל הממוקם בין העכבר לבין קרן אולטרסאונד. מניסיונו, כמות גדולה למדי של ג'ל נחוצה לאיכות אות טובה.כאשר החיה מוכנה, מניחים את המתמר מעל שלפוחית השתן לשימוש כנקודת התייחסות, ומזיזים את שולחן פלטפורמת החימום לצד שמאל וימינה של הבטן כדי לעקוב אחר השתלות העובר במצב B דו-מימדי, התאמת המתמר או הפלטפורמה לפי הצורך עד שההשתלה הראשונה נראית על המסך, בגודלה הגדול ביותר. בחרו 'תווית תמונה' והזינו שם לקובץ התמונה. התאימו את מיקום התמונה, עד שזרימת הדם בתוך הטבור העורקי של שליה נמצאת בתצוגה, ואחסנו מסגרת אחת או cineloop למדידות שליה.כדי שהדמיית דופלר צבעונית תקבע את כיוון זרימת הדם, לחץ על לחצן צבע ולהשתמש בכדור הרצועה כדי להזיז את תיבת הצבע למיקום המתאים, לחיצה על עדכן כדי להתאים את גודל התיבה לפי הצורך. כאשר התיבה בגודל הנכון, לחץ על בחר ואחסן את התמונה בהתאם לצורך הניסיוני. לכימות דופלר גל פעמו של זרימת הדם דרך כלי הדם, לאתר את האזור של עניין במצב רכישת דופלר צבע ולחץ על גל הדופק.יופיע קו מקווקו. הזיזו את הקו לכלי הדם המעניינים ולהשתמש ב ידית הזווית של דופלר כדי להתאים את זווית הקו כדי להתיישר עם זרימת הדם. עבור מדידות דופלר גל פעמו, חשוב לראות את הזווית בין כיוון זרימת הדם לבין קרן אולטרסאונד.זוויות גבוהות מדי, או זוויות שונות בין בעלי חיים באותו ניסוי עלולות להוביל למדידות מהירות לא מדויקות. לאחר מכן, לחץ על עדכן ואחסן cineloop של קווי דופלר המופיעים בחלון הרכישה דופלר גל פעום. כדי לסקור את הנתונים, לחץ על ניהול לימודים, גלול לתמונה הממוזערת של עניין ולחץ פעמיים על עדכן, לאחר מכן לחץ שוב על ניהול לימודים ולחץ על סגור כדי לסגור את חלון הדפדפן, כדי לסיים את רכישת הנתונים ולשמור סידרה מוקלטת.כדי לייצא את הנתונים, חבר דיסק קשיח, לחץ על יצא אל, כדי לסמן סידרת נתונים אחת או יותר ובחר את שטח האחסון להעתקת הנתונים לדיסק הקשיח. כאן, תמונות אולטרסאונד ייצוגיות שנרכשו במצב B בימי הריון 5, 8, 10 ו -12, ותוצאות מדידת אזור ההשתלה המתאימות שלהם מוצגות, וחושפות ירידה משמעותית באזור ההשתלה בעכברים נגד CD122 שטופלו בעכברים לקויי תאי פיטום מיום ההריון 10 ואילך. הדמיה במצב B מקלה על הדמיה ומדידה של חלקים בודדים של השתלה.לדוגמה, בעלי חיים לקויי תאי פיטום שטופלו נגד CD122 מדגימים ירידה משמעותית באזור שליה, עובי וקוטר בהשוואה לעכברים לא מטופלים בימי הריון 10 ו -12. לעומת זאת, אזור שליה וקוטר דומים בין הקבוצות ביום ההריון 14, ואת עובי שליה, עלייה משמעותית נגד CD122 בעלי חיים מהומשים מטופלים לעומת עכברים מטופלים ביום ההריון 14. הדמיה דופלר גל פעמו של הרחם העורקים למדידה של מהירות סיסטולי שיא מהירות דיסטולית, מדד התנגדות מחושב, לחשוף ערכים דומים בין בעלי חיים מטופלים ולא מטופלים.מדד ההתנגדות של הטבור arteria ב נגד CD122 מטופלים בעלי חיים לקוי תא התורן, עם זאת, הוא גדל באופן משמעותי בהשוואה לעכברים מטופלים. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור, כי אתה צריך לעשות את זה כל יומיים ולא כל יום, כדי למנוע את הלחץ, ואת הסיכון של נרקוטיזציה חוזרת ונשנית של בעלי החיים. בעקבות הליך זה, מדידות אחרות, כמו מדידה תלת מימדית, הדמיה וכמות של תנועת רקמות לאורך זמן, מדידות לחץ דם, וגם זריקות מונחות אולטרסאונד יכול להתבצע.לאחר התפתחותו, שיטה זו סללה את הדרך לרופאים וחוקרים בתחום הטיפול המיילד והטרום לידתי, מכיוון שניתן לעקוב אחר התפתחות העובר ולזהות חריגות אפשריות במהלך ההריון.

high-frequency-ultrasound-for-analysis-fetal-placental-development

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

ביולוגיה התפתחותית

מוות עובר ולידה הוא תכונה נפוצה כאשר לומדים שינויים גנטיים המשפיעים על התפתחות לב. הדמית אולטרסאונד בתדר גבוה השתפרה רזולוצית 2-D ויכולה לספק מידע מצוין על התפתחות מוקדמת ולב היא שיטה אידיאלית כדי לזהות את ההשפעה על מבנה ותפקוד לב לפני המוות.

אקו העוברי Murine

בסרטון זה, אנו מדגימים אולטרה-סאונד בתדירות גבוהה כדי לדמיין אתרי השתלת עוברים במודל מורין בהריון. טכניקת הדמיה זו מזהה בהצלחה הריון בר קיימא ומאפיינת אתרי השתלת עוברים במהלך הריון מורין מוקדם.

אולטרה-סאונד בתדירות גבוהה מבוסס אפיון הריון מוקדם: טכניקה לחקר השתלת עוברים והתקדמות הריון במודל מורין בהריון

אנו מתארים בדיקה של תפקוד לב העובר עם אקו העוברי הפונקציונלי העכשווי ואולטרסאונד דופלר fetoplacental באמצעות microultrasound VisualSonics VEVO 2100 במודל מושרה בניתוח של הגבלת צמיחה העוברית תוך רחמי בארנב.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

אולטרסאונד בתדירות גבוה במיוחד הוא כלי הדמיה חיה רב עוצמה כדי לבחון מומים לב בבעלי חיים קטנים. noninvasiveness שלו מאפשר שמירה על המצב הפיזיולוגי של עוברים. בזאת, אנו מציגים את השימוש באולטרסאונד M-mode כדי למדוד את קצב הלב של עוברים בE18.5 ברחם.

במדידת רחם של קצב לב בעכבר על ידי אקו M-המצב פולשנית

אולטרסאונד גולגולתי (CUS) הוא כלי רב ערך להדמיית מוח ביילודים חולים קשה. סרטון זה מציג גישה מקיפה ל-CUS יילודים (דופלר) למטרות קליניות ומחקריות כאחד, כולל הדגמה ליד המיטה של הטכניקה.

מדינת אולטראסאונד ההדמיה אמנות הגולגולת בילודים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להזריק סוכני אולטרסאונד ניגוד microbubble לחיים, עוברים עכברי שלב מאוחר-הריון מבודד. שיטה זו מאפשרת הלימוד של פרמטרים זלוף ושל סמנים מולקולריים של כלי דם בתוך העובר באמצעות הדמיה אולטרסאונד בתדר גבוה חומר ניגוד.

הדמיה ניגודיות בעכבר עוברים באמצעות תדר גבוהים אולטראסאונד

עכברים נמצאים בשימוש נרחב ללמוד ביולוגיה הריונית. עם זאת, סיום ההריון נדרשת עבור מחקרים כאלה אשר מונע חקירות האורך, מחייבת השימוש במספר גדול של בעלי חיים. לכן, אנו מתארים שיטה לא פולשנית של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה לגילוי מוקדם ומעקב אחר האירועים שלאחר ההשתלה העכבר בהריון.

שימוש הרומן של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה תלת מימדי אפיון בתחילת ההריון העכבר

אולטראסאונד בתדירות גבוהה הדמיה של העכבר עוברית השתפרה דימות ברזולוציה, יכול לספק אפיון פולשני מדויק של התפתחות הלב, פגמים מבניים. פרוטוקול המתוארים במסמך זה מיועדת לביצוע בזמן אמת עוברי עכברים אקוקרדיוגרפיה ויוו.

הדמיה באמצעות מערכת סאונד בתדירות גבוהה (30 / 45MHZ) וכלי דם עוברי העכבר

נתאר מערכת אשר מנצל שלוש שיטות כדי להעריך את הבטיחות והיעילות של תרופות ממוקדות השליה: ויוו הדמיה כדי לפקח nanoparticle הצטברות, אולטרסאונד בתדירות גבוהה כדי לעקוב אחר ההתפתחות העוברית של היפרדות , ו- HPLC לכמת משלוח סמים לרקמות.

הערכה מקיפה של היעילות והבטיחות של משלוח סמים, ממוקדות השליה באמצעות שלוש שיטות משלימות

במחקר זה, אנו מתארים שיטה פשוטה לביצוע ניתוח צבע כחול של אוונס (EBD) על זחלי דג הזברה.  טכניקה זו היא כלי רב עוצמה לאפיון שלמות שרירי השלד ותיחום מודלים של דג זברה של ניוון שרירים, והיא שיטה רבת ערך לפיתוח טיפולים חדשים.

ניתוח של יושרה שריר שלד דג הזברה זחלים עם אוונס הכחול צבע

למדו אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח התפתחות עוברית בעכברים. שיטה זו מאפשרת מעקב בלתי פולשני אחרי עוברים וניתוח פרמטרים שלייתיים וזרימת דם לאורך כל ההריון.

אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח של התפתחות עוברית היפרדות In Vivo

גלה סרטונים נוספים