פרוטוקול Rhizobox ממוטבת כדי להמחיש צמיחה השורש והיענות לצרכי מזינים לשפות אחרות

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום המדע שורש Rhizosphere, כגון איך שורשים מגיבים טלאים מקומיים של חומרים מזינים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שהיא מאפשרת מדידות חוזרות ונשנות ולא פולשניות של מערכת שורשים אחת באדמה, אך היא אינה דורשת ציוד מיוחד והיא זולה יחסית. לאסוף את החלקים עבור Rhizobox להרכבה.

אלה כוללים לוחות קדמיים וגביים עשויים אקריליק ברור על 40 ס"מ על ידי 61 ס"מ. בשלב זה, ישנם רווחים בצד ובתחתית על גבי הלוח האחורי. המרחבים מיושרים עם חורים שנקדחו בעבר בלוחות.

חותכים אורך של ריפוד פוליאסטר ללכת לאורך החלק התחתון של Rhizobox. הנח את המרווח בלוח האחורי ישירות מעל המרווח התחתון כדי לסייע במניעת דליפה. מקם את החלונית העליונה במיקום במרווחים כדי להחזיק את המרווח במקומו.

עכשיו קבל חומרה להרכיב את תיבת Rhizobox. השתמש בורג, שני מדחיינים, ואגוז כיש עבור כל אחד החורים שנקדחו. מניחים מכונת כביסה על הלוח הקדמי ומהדקים את הבורג דרכו אל הלוח האחורי.

עוד מכונת כביסה ואגוז הכיף. כדי למנוע אובדן אדמה, ודא כי כל הברגים הם הדוקים מאוד. כמו כן, ליצור שני רווחים כדי ליצור את תיקוני הטיפול והבקרה.

הפוך אותם עם יריעות פוליאתילן בצפיפות גבוהה ולאבטח בורג בחלק העליון כדי לאפשר הכנסה חלקית בלבד. לקבלת מחסור באור וצמצום חום, הכינו מארז מגן שיכול להקיף את הקופסה. לבסוף, לבנות מסגרת כדי לעודד שורשים לגדול נגד הלוח האחורי.

מסגרת PVC זו מחזיקה את התיבה בזווית של כ-55 מעלות. הכינו תערובת הומוגנית של אדמה וחול שדה. התחל עם שקית גדולה המכילה את תערובת המצע עבור כל Rhizobox.

סמן שתי שקיות רוכסן קטנות לכל תיבה עבור תיקוני הטיפול והבקרה. השתמש בסולם ולשקול 30 גרם של מצע חול הקרקע. העבר את המצע לתיק הבקרה.

באותו אופן, להוסיף 30 גרם של מצע לתיק הטיפול. לאחר מכן לשקול גרם אחד של חנקן 15 מקור חנקן שכותרתו ולהוסיף אותו לשקית הטיפול. מערבבים היטב את המצע ואת מקור החנקן.

עבוד עם תיבת ריזו-בוקס אחת וזה חללי טלאים. הכנס את שני המ רווחים לתוך תיבת Rhizobox עד הבורג מונע תנועה נוספת. סמן את עומק הקצה התחתון של הרווחים בצד תיבת הריזובוקס.

לאחר מכן הסר את הרווחים עבור השלבים הבאים. באמצעות משפך, למלא את Rhizobox משקית גדולה של מצע לעומק המסומן. הזז את המשפך קדימה ואחורה לאט ובאיזון כדי למלא את תיבת הריזובוקס באופן אחיד.

כאשר המצע נמצא בעומק המסומן, הכנס את הרווחים לתיבה. הם צריכים להיות חמישה סנטימטרים מהצד השמאלי והימין של התיבה. המשך למלא את התיבה עד שהמצע יהיה בערך חמישה סנטימטרים מהחלק העליון של התיבה.

לאחר מכן, לארגן השקיה איטית של המצע בתיבה עם 150 מיליליטר של מים עם פולטי טפטוף או ביד. תן לו לנוח כמה שעות או לילה, כך המים מתפזרים ואת האזור סביב כל ספייסר רטוב ביסודיות. בשלב זה, הסר את הרווחים כדי להשאיר חלל ריק עבור התיקונים.

עכשיו, סרט שקיפות קלטת מחוץ לקופסה. השתמש בשקיפות כדי לתייג תיקון אחד כטיפול והשני כפקד. לאחר מכן השתמש במשפך ובמצע הבקרה המוכן כדי למלא את תיקון הפקד.

זהו תיקון הפקד המסווים לאחר מילויו. להמשיך ולמלא את תיקון הטיפול במצע הטיפול המוכן באותו אופן. לאחר שתסיים, השתמש בסמן קבוע כדי לעקוב אחר הגבול של כל תיקון בסרט השקיפות.

לאחר מכן, למלא את Rhizobox באופן שווה עם המצע הנותר מהתיק הגדול. סיים על-ידי מעקב אחר החלק העליון של המצע בשקיפות. ברגע שהתיבה מוכנה, להשתיל זרע נבט.

ראשית, השתמש מרית צרה לחפור בור במרכז Rhizobox. החור צריך להיות בעומק 2.5 ס"מ. מניחים את הזרע הנבט בפנים ומבטיחים שהרדיקל מכוון ישירות כלפי מטה.

עקוב אחר מיקום הזרע בשקיפות המצורפת לתיבה. מכסים את הזרע, ואז להשקות אותו עם עד 50 מיליליטר של מים deionized. לאחר מכן, לתקף את התיבה במקרה שלה כדי למנוע אור אינטראקציה עם השורשים במהלך הצמיחה.

קח את התיבה למסגרת מוכנה לזה. מניחים את Rhizobox על המסגרת כדי לעודד צמיחה לכיוון המסגרת האחורית. לאחזר את התיבה לאחר כל שלושה עד ארבעה ימים של גידול צמחים.

עם המקרה הוסר, לעקוב אחר שורשים גלויים הצמחים באמצעות עט צבע שונה בכל פעם. כמו בדוגמה זו, להיות עקבי ושיטתי עבור שלב זה. החזירו את התיבה המשובתת לעמוד שלה והבטיחו שהיא נמצאת בכיוון המקורי שלה.

כאן, אורכי השורש הכוללים של השורשים שנעקבו על הגב של 24 Rhizoboxes הם התוויה נגד אורכי השורש נמדד באמצעות סורק ותופס מחשב. עלילה דומה לדפוסי שורשים נעוצים בחלק הקדמי של הקופסה מדגימה שהשורשים גדלו בצורה מועדפת על גב הקופסה. המדרונות העקביים בחלקה זו של לוגריתם של אורך השורש הכולל כפונקציה של ימי צמיחה מצביעים על כך ששיעורי הצמיחה היו דומים בין הקופסאות השונות.

להלן נתונים עבור צפיפות אורך הבסיס עבור גנוטיפ תירס אחד. הצפיפות עבור תיקון הבקרה קטנה יותר מהצפיפות של התיקון שטופל בחנקן. הניסוי השווה את צפיפות אורך השורש לשישה גנוטיפים נפרדים של תירס.

בכל המקרים, צפיפות אורך השורש הייתה גדולה יותר בתיקון הטיפול עם התווית חנקן 15 לעומת תיקון הבקרה. פרוטוקול זה יכול להיות משולב עם שיטות אחרות כגון sphygmography או florescence בהכלאה situ על מנת לדמיין את ההפצה spacial של פעילות אנזים או חיידקים.