Name: יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 22 s
Description: למדו את פרוטוקול השקת המעי הגס בעכברים לחקר מנגנוני הריפוי ומניעת דליפות אנאסטומוטיות. השיטה מחקה תרחישים קליניים ומאפשרת ניתוח היסטולוגי מפורט.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

להלן כללי התנהגות אושרה על ידי האוניברסיטה של אוקלהומה מדעי מרכז מוסדי חיות בריאות הוועדה להשתמש (IACUC), תואם כל המוסדיים הנחיות אתיות לגבי מחקר בבעלי החיים. בנוסף, כל הניסויים בוצעו על פי תקנות מוסדיים, מדיני ופדראלי לגבי מחקר בבעלי חיים ניסיוני.
הערה: עבור פרוטוקול זה, השתמשנו congenic הנקביים והזכריים הישנות C57BL6/J עכברים בגיל 12-72 שבועות של גיל. כל העכברים המשמשים בהליך זה הוחזקו במתקן שלנו ללא מכשול לפחות שבוע לפני הפעולה כדי להתאים biome מקומיים. חיות הורשו כדי להאכיל את הזמן של המבצע, השתמשנו הכנה המעי מכני בעל פה וגם שטיפה פי הטבעת לפני ההליך.
1) יצירת חיבור
<ol><li>אוטוקלב מכשירי הניתוח, לחמם את הפתרון מלוחים השקיה ולנקות ביסודיות כל המשטחים פעיל עם 70% אתנול.</li>
	<li>כדי לגרום הרדמה, במקום העכבר בתיבת אינדוקציה מחובר אליו מכשיר אידוי. לספק 2-3% איזופלוריין ב 1-2 L/דקה עד עכברים הם תרופות הרגעה.</li>
	<li>במקום החיה על התקן התחממות כדור הארץ, כגון כרית החימום, כדי למנוע היפותרמיה.</li>
	<li>Subcutaneously להזריק אחד זמן במינון של 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין (3 µg עכבר 30 g) על שיכוך כאבים לאחר הניתוח, פעם אחת במינון של 10 מ"ג/ק"ג של enrofloxacin עבור טיפול מונע אנטיביוטי לפני הניתוח. הערה: למרות אנטיביוטיקה מראש, לאחר הניתוח אינם נדרשים עבור פעולה זו, המוסדיים הנחיות והחיה רבה ושימוש ועדה במוסד שלנו מומלץ השימוש במתקן שלנו.</li>
	<li>מקם את קונוס האף הרדמה סביב האף של העכבר. במהלך המבצע, בזהירות את קצב הנשימה של בעל החיים, להתאים את קצב הזרימה הרדמה כנדרש. לשמור על קצב הנשימה ב- 30-40 נשימות לדקה.</li>
	<li>השתמש שיער clipper ואחריו סוכן depilatory להסרת השיער מעל פני העור כולו של הבטן. ביסודיות להסיר את הסוכן depilatory עם גזה שנרטבו עם מים או 70% אתנול. יבש ביסודיות את החיה.</li>
	<li>לפני מכינים את הבטן, להקליט את הגפיים של העכבר על כרית החימום או סוכן השטח בקצה של כל רגל כדי למנוע את העכבר ומזיזה במהלך הניתוח. לחטא את הבטן chlorhexidine. כוללים האזור מגולח כולו, כמו גם את השיער בקצוות של האזור המגולח. הצב תלוי סטרילי על העכבר (איור 1 א').<ol>
<li>לפני רפוי, חלון קטן אובאלית או מלבנית וחותכים את הכיסוי ותאבטחי לחשוף את הבטן שומר. על פרופיל הערה: החלון צריך לחשוף את הבטן כל של העכבר אך לכסות את הגפיים, הזנב, הראש ואת החזה. חתכנו חלון2 4 x 3 ס"מ לפעולות שלנו (איור 1B).</li>
		<li>לעשות חתך קטן לאורך הקו האמצעי מאסו, מהקצה התחתון לכיוון החלון אובאלית או מלבני, כדי לאפשר גישה אל פי הטבעת במהלך ההליך (איור 1C).</li>
	</ol></li>
	<li>עושים חתך בעור. להתחיל לאורך הקו האמצעי של הבטן התחתונה, פצעים וחתכים בעור עם מספריים אנכית כדי מצאתי. פצעים וחתכים רק את העור ולמנוע חיתוך את מערכת השרירים של דופן הבטן (איור 2 א).</li>
	<li>אחוז האמצע של קיר הבטן עם מלקחיים והרם מן התכנים בטן. מטפל שלא לפצוע מבנים intraabdominal, תחתכי את אורך קו האמצע בבטן fascia אנכית עם מספריים חדות. להאריך את אורך החתך בעור (איור 2B).</li>
	<li>כאשר המעיים חשופים, לאתר את המעי האטום ואת המעי הגס קטן, וסובב את הקרביים צד שמאל medially לחשוף את יורד ואת המעי הגס. מעיל קצה המקדח בוטה עם שימון ג'לי ולהתקדם בזהירות את החללית לתוך פי הטבעת כדי לסייע בזיהוי של המעי הגס היורד/סיגמואידי (איור 3). הערה: בניגוד לבני אדם, המעי העכבר נמצא בדרך כלל ברבע העליון השמאלי של הבטן. הקפידו לא לנקב בקיר המעי עם החללית בשלב זה. אם המעי קיר הוא מחורר, לסיים את ההליך, המתת חסד העכבר.<ol>
<li>הימנע האוחז את המעי האטום עם מלקחיים או שיניים חדות. במקום להשתמש מלקחיים atraumatic, כותנה המוליך משופעת, או אצבע עדינה מניפולציה כדי לסובב מעיים.</li>
		<li>שימוש חימם מלח סטרילית כדי להבטיח שהמעי הגס חשוף נשמרת לחות לאורך כל ההליך.</li>
		<li>המעי הגס יהיה בצד השמאל של קו האמצע, מצורף מקבץ דרך את מצע המעי. לאחר זיהוי, תיסוג המכשיר הקהה חלקית כדי להקל על colotomy.</li>
	</ol></li>
	<li>לבצע colotomy רוחבי של המעי העקול.<ol>
<li>לאחוז בעדינות המעי העקול מעולה לים האגן עם מלקחיים atraumatic (איור 4A).</li>
		<li>באמצעות מיקרו-מספריים חדות, לבצע חתך לאורך המעי העקול בניצב לכיוון של המעי הגס והארכת על פני 80-90% הרוחב של המעי הגס. זה יעזור למנוע הכחשה של קצה אחד של המעי הגס לעבוד בשטח כירורגית, וכדי להקל על תיקון (איור 4B).</li>
		<li>אם וריד מצע המעי העליון הוא נפגע במהלך הסיבוב מהבטן או colotomy, בעדינות להחזיק לחץ למשך עד 2 דקות עם גזה או של המוליך שקצהו כותנה. אם הדימום נמשך אחרי הזמן הזה, מקם את הספרה של-שמונה 8-0 בתפר monofilament סביב הנקודה של דימום. הערה: אם המעי הגס מראה סימנים של נמק או פגיעה. אחרי זה, לסיים את ההליך, המתת חסד העכבר באמצעות שיטה הומאנית אושרה על ידי הוועדה המוסדית שימוש בבעלי חיים שלך.</li>
	</ol></li>
	<li>לתקן את colotomy סיגמואיד.<ol>
<li>באמצעות מנהל התקן המחט Castroviejo, מקום 5-6 פשוט קטע 8-0 nonabsorbable תפרים פוליפרופילן לתקן את למעי הגס. במקום תפרים 1 מ מ אחד מהשני, עם עקיצות 0.5 מ מ.<ol>
<li>לטפל כדי למנוע לגלגל את קצות המעי התיקון על ידי לקיחת serosa מעט יותר מאשר רירית עם כל תפר. . עזוב את הזנב באורך 5 מ מ הקפידו לא בטעות המעי שמסביב לתפוס לתוך התפר (איור 4C). הערה: מומלץ להתחיל תפירת בבית ליד הגבול מצע המעי העליון של colotomy, חיסכון של אנטי-mesenteric-רוב חלק colotomy לסוף.</li>
			<li>בהמשך לתיקון, בדיקה לנתיחה שקצהו בלאנט מראש טרנס-אנאלי כדי להתפרס התיקון לפני התפרים הסופי ממוקמים. זה יעזור למנוע צר מדי תיקון ולהקטין את שערי anastomotic stricture.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>באמצעות מזרק 10 מ"ל מלא מי מלח ומחוממת, להשקיית הבטן מספר פעמים. אם השטח מתחת העכבר הופך רטוב, לייבש את העכבר או הזז את העכבר על משטח יבש על מנת למנוע היפותרמיה.<ol>
<li>להשתמש גזה סטרילי הניח על החתך כדי לספוג עודף השקיה.</li>
		<li>ב ההשקייה הסופי, למלא את הבטן עם מלח סטרילית. בקפידה מראש angiocatheter 18 גרם משומנים לתוך פי הטבעת ונפח עם 0.5-1 ס מ3 של אוויר. זה תדגים הדלפות בשנת ההשקה, ממה אפשר לתקן עוד בתפר פוליפרופילן קטעה באמצעות המכשיר סטרילי כדי להתפרס ההשקה.</li>
		<li>השטחת קצה המעי הגס באמצעות את angiocatheter לפני ההסרה.</li>
	</ol></li>
	<li>ודא כי קיים אין דימום פעיל. אם יש, הפעילו לחץ עדין ישירות על גבי הדם במשך 1-2 דקות במקום תפרים hemostatic, כמתואר לעיל, אם הדימום ממשיך.</li>
	<li>בעדינות להחזיר את הקרביים medialized למיקומו אנטומי נורמלי (איור 5A).</li>
	<li>סגירת החתך בבטן (איור 5B).<ol>
<li>באמצעות 4-0 נספגים קלועה, מקום suture הריצה לאורך השכבה שרירים לקיר הבטן מתחילה בחלק העליון של החתך וגימור -ההיבט נחות של החתך. התקן עניבה, לחתוך את התפר להשאיר זנבות 5 מ מ. הערה: לא לשלב בטעות המעי לסגירת דופן הבטן.</li>
		<li>חזור על 4-0 בתפר monofilament לסגור את העור (איור 5C).</li>
	</ol></li>
	<li>ודא כי החיה כולו חם ויבש, כדי למנוע היפותרמיה לאחר הניתוח.</li>
	<li>לפקח בקפידה על החיה כפי זה מתאושש מן ההרדמה. לנהל 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין כל 72 h 2-3 ימים לאחר הניתוח לבקרת כאב.  במהלך תקופת ההחלמה, עכברים צריך בזהירות להיבדק מדי יום סימנים של מורסה או אלח דם הצפק.  תצפית שלאחר הניתוח עבור כאב ומצוקה צריכה לכלול: הגבלות על תנועה כולל hunching סוג של התנוחה, חוסר אכילה או שתייה, לא ראוי לטפח, דלקת מופרזת סביב הפצע, חוסר ריפוי תקין באתר של החתך, או קינון לא נורמלי.  כל חיה הוכחת באחד מהמעשים האלה צריך להרדימם באופן מיידי על ידי חנק2 CO למשך תקופה מינימלית של 10 דקות ולאחריו ניקור חזה דו צדדיים.</li>
	<li>מערבבים 0.1 מ"ג/מ"ל של enrofloxacin עם מי השתייה של העכבר במשך 7 ימים לאחר הניתוח כדי למנוע זיהום אינטרה-בטן או אלח דם עקב זיהום צואתי המשויך הפעולה.</li>
</ol>2) קצירת רקמות Anastomotic
<ol><li>רגע לפני excising רקמה anastomotic, המתת חסד העכבר באמצעות שיטה הומאנית אושרה על ידי הוועדה המוסדית שימוש בבעלי חיים. הערה: על סמך מדיניות מוסדית, אנחנו המתת חסד החיות שלנו על-ידי הצבתם בחדר פחמן דו-חמצני עם 100% פחמן דו-חמצני אינפוזיה גז ב 2 ל'/דקה במשך 5 דקות לפני ביצוע ניקור חזה דו צדדיים.</li>
	<li>לעקר את הבטן עם chlorhexidine ואחריו 70% אתנול.</li>
	<li>מחדש פצעים וחתכים החתך קו האמצע המקורי עם מספריים חדות. מתחילים בקוטב התחתון של החתך הקודמות ולהרחיב את החתך הזה עליונית כדי מצאתי (איור 6A).</li>
	<li>באמצעות מספריים, לחתוך אל שכבת שרירים, לאחר הזנת את חלל הצפק, להרחיב את החתך העליון והתחתון של החתך. לטפל כדי למנוע ופצעו המעי הגס בעת הזנת הבטן או שיבוש ההשקה, שכן ייתכנו מעיים דבקה החתך או את אתר anastomotic.</li>
	<li>בזהירות לבצע סיבוב הקרביים המדיאלי השמאלי חשיפת המעי העקול המתוקן (איור 6B). סביר להניח יהיה הדבקויות מעיים כדי המעי המקיפים התיקון. בלשון בוטה ובעדינות לנתח אלה הדבקויות מן האתר של תיקון. . שמור על עצמך לא להפריע ההשקה.<ol>
<li>זהה את האתר לתקן על-ידי איתור זנבות התפר פוליפרופילן. נעשה שימוש עבור התיקון. באמצעות מספריים ואני מתחיל proximal לתיקון, 1 ס מ באופן רוחבי transect דרך המעי הגס. חזור על שלב זה 1 ס מ דיסטלי לאתר של ההשקה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להסיר את קטע sigmoidal על ידי בחדות לנתח המעי הגס מ מצע המעי צמוד לאורך הגבול האחורי של המעי הגס במספריים בסדר (איור 7).</li>
	<li>לזהות את הגבול מצע המעי העליון של הדגימה קולון ושימוש בסדר מספריים לחתוך לאורך הגבול מצע המעי העליון בצורה אורכית. פעולה זו תיצור חתך מרובע או מלבני של המעי הגס מן הדגימה גלילי בעבר הוסרו (איור 8).</li>
	<li>השתמש בעט סימון לתיחום הגבול אנטי-מצע המעי העליון של המעי הגס לפני להסרת מקטע המעי הגס. לאחר ההסרה, לבצע חתך אורכי לאורך המעי הגס מול הסימון. לתקן, להטביע על דגימת רקמות לחתוך לפי הצורך עבור היסטולוגיה ו/או immunostaining.</li>
</ol>

<ol><li>Murrell, Z. A., Stamos, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reoperation+for+anastomotic+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Clinics+in+colon+and+rectal+surgery%22%5BJournal%5D)">Reoperation for anastomotic failure.</a> Clinics in colon and rectal surgery. 19, 213-216 (2006).</li>
<li>Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perforated+Diverticulitis%3A+To+Anastomose+or+Not+to+Anastomose%3F+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+surgery+%28London%2C+England%29%22%5BJournal%5D)">Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis.</a> International journal of surgery (London, England). , (2018).</li>
<li>Chambers, W. M., Mortensen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postoperative+leakage+and+abscess+formation+after+colorectal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Best+practice%2C+research.+Clinical+gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery.</a> Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).</li>
<li>Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgery+-+Oxford+International+Edition%5BTitle%5D)+AND+%22Intestinal+Anastomosis%22%5BJournal%5D)">Surgery - Oxford International Edition.</a> Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).</li>
<li>Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Our+20-year+experience+with+experimental+colonic+anastomotic+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+medicine+and+life%22%5BJournal%5D)">Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing.</a> Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).</li>
<li>Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choosing+the+best+animal+species+to+mimic+clinical+colon+anastomotic+leakage+in+humans%3A+a+qualitative+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22European+surgical+research.+Europaische+chirurgische+Forschung.+Recherches+chirurgicales+europeennes%22%5BJournal%5D)">Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review.</a> European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).</li>
<li>Komen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorectal+anastomotic+leakage%3A+a+new+experimental+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+surgical+research%22%5BJournal%5D)">Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model.</a> The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).</li>
<li>Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+ileocolic+bowel+resection+with+primary+anastomosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+visualized+experiments+%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106(2014).</li>
<li>Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colon+anastomotic+leakage%3A+improving+the+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+today%22%5BJournal%5D)">Colon anastomotic leakage: improving the mouse model.</a> Surgery today. 44, 933-939 (2014).</li>
<li>Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorectal+anastomotic+healing%3A+why+the+biological+processes+that+lead+to+anastomotic+leakage+should+be+revealed+prior+to+conducting+intervention+studies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies.</a> BMC Gastroenterology. 15, 180(2015).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.

ישנם מספר שלבים מרכזיים כדי להבטיח ההצלחה של ולצמצם את התחלואה/התמותה הקשורים בהליך זה. ראשית, להבטיח טיפול זהיר של רקמת המעי, לטפל כדי למנוע פגיעה המתיחה כשהוא מסתובב את הקרביים לחשוף את המעי הגס. מתח מיותר על המעי או מצע המעי יכול פציעה לנמק המעי המעי או להערכת ולגרום מן האתר של ההשקה. בנוסף, מלקחיים חדה או מלקחיים עם שיניים לא ישמש כדי להתמודד עם המעי הגס.
פגיעה המעי הגס נפרד מאתר של ההשקה המתוכנן, או במהלך הסיבוב מהבטן או על ידי ניקוב עם המכשיר הקהה, צריך לגרום המתת חסד של החיה. מניסיוננו,...

סיבוך המפחידים ביותר של ניתוחי השקה של המעי היא התמוטטות anastomotic או דליפה. דליפה anastomotic, אשר גורמת זליגת התכנים intraluminal לתוך חלל הבטן, היא סכנת והוא יכול להוביל במהירות אלח דם אינטרה-בטן; הלם המחירים משתנים בין 0.3% ל- 5.5% בעקבות חיבור המעי הגס קטן, לעלות בין 0.5% ל- 26% עבור חיבור חוקן1,2. שיעורי התמותה עקב דליפות יכול להיות גבוה ככל 39% בשל תחילתה מהירה של אלח דם והתקדמות מהירה למוות בעקבות זיהום intraabdominal3. אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול כיום מבוססות על פתופיזיולוגיה זה אינה מובנת במלואה.
כיום, ריפוי anastomotic מושווה לעתים קרובות למד באופן נרחב יותר עורית ריפוי הפצע, אשר היא להוכיח להיות עני יחסית פקסימיליה. ריפוי מתרחש בסדרה של שלבים חופפים, החל השלב הראשוני השהיה. במהלך ימים 0-4 לאחר היצירה של ההשקה מעיים, השלב השהיה מוגדר על-ידי לתגובה דלקתית חריפה שמנקה את הפצע של פסולת הסלולר. בשלב הבא, בימים 3-4, התפשטות fibroblastic, ייצור של קולגן מאפיינת את שלב fibrophasia. לבסוף, אחרי 10 יום תקופה ממושכת של קולגן שיפוץ מכונה שלב ההבשלה. חשוב שימו לב כי הכוח anastomotic הוא נמוך למדי, תלוי תמיכה חיצונית של סיכות שמוקם בניתוח או תפר עד קולגן הופקדו4. להבין את התפקיד והעיתוי כל שכבה של הקיר מעי משחקת ריפוי הפצע anastomotic ומעורבות סוגי תאים דלקתיים בתיווך כגון מקרופאגים, כמו גם סמנים הפונדקאית שחקרתי לחזות כשל anastomotic או הצלחה במידה רבה להפחית תחלואה, תמותה, הוצאות בריאות בעקבות פעולות המעי הגס5.
המודל מאתר הוכח במחקרים קודמים כדי להיות שימושי מחקה השקה האנושי6. אמנם יש דוגמאות פופולרי, מוכחות, למד היטב של המודל מאתר anastomotic מעי, במיוחד השיטה המתוארת על ידי Komen. et al. 7, מודלים אלה מעדיפות ileocecal או בסדר עולה colocolonic טכניקות anastomotic8. מחקרים קודמים של בני אדם חולים הראו הבדל משמעותי בשיעורי דליפה בין ileocecal, colocolonic, חיבור המעי הגס, המדגיש את הצורך בהמשך ניסיוניות אנטומיים במקומות שונים. שיטות נוספות, בשימוש העממי מכוונים לפיתוח מודל אשר במכוון יוצר דליפת anastomotic במקום להבהיר את המנגנונים התאיים הדרושים עבור ריפוי9הפצע anastomotic רגילה. מודלים עכברוש נוסו בעבר אבל המחירים של התבקעות anastomotic ו/או סימנים של דליפה (קרי, היווצרות מורסה) נמוך משמעותית מאשר בני אדם ו עכברים6,7. בנוסף, קווים ניסיוני יותר מהונדסים זמינים בעכברים מחולדות. זה הופך את המודל עכברוש פחות שימושי עבור מודל anastomotic. בנוסף, חזירי דגמים הכלבים היו החקירה קליני פחות מ-6,המודל מאתר7.
אנו מציעים הליך בטוח מבחינה טכנית פשוטה, בקלות ובמהירות לשחזור להקמת חוקן. חיבור במודל מאתר זה אמור להקל על חקירה נוספת מנגנון underreported שלריפוי הפצע anastomotic 10 .

<table><tbody><tr><td>עכברי C57BL6/J</td><td>מעבדות ג'קסון</td> <td>#00664&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>רפידות תחתונות סופגות של פישרברנד, 20 אינץ' x 24 אינץ'</td> <td>פישר סיינטיפיק</td><td>14-206-62</td><td></td></tr><tr><td>שדה סטרילי פולילי, 18 אינץ' x 24 אינץ'</td> <td>חד פעמי לבית חולים</td><td>696</td><td>חותכים חור מלבני&nbsp;</td></tr><tr><td>איזותזיה איזופלורן הנרי</td><td>שיין&nbsp;</td><td>50033</td><td></td></tr><tr><td>פישרברנד כרית גזה כותנה סטרילית, 4 אינץ' x 4 אינץ'</td> <td>פישר סיינטיפיק</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>משחת עיניים Puralube petrolatum, 1/8 אונקיות צינור</td><td>Dechra מוצרים וטרינריים</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>קרם אפילציה של נאיר</td><td>כנסייה & דווייט ושות'</td><td>22339-05</td><td></td></tr><tr><td>בופרנקס בופרנורפין&nbsp; 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>רקיט בנקיזר פארמה בע"מ</td><td>NDC 12496-0757-5</td><td></td></tr><tr><td>מזרק אינסולין 1 סמ"ק, 27&nbsp; G</td><td>Becton Dickinson</td><td>329412</td><td></td></tr><tr><td>Chloraprep שמפו</td><td>Medline</td><td>APL82287</td><td></td></tr><tr><td>Webcol ספוגיות הכנה לאלכוהול</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td></td></tr><tr><td>BioGel PI כפפות כירורגיות</td><td>M&ouml; lnlycke Health Care</td><td>ALA42675Z</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים עם שיניים</td><td>Roboz</td><td>RS-5150</td><td></td></tr><tr><td>מספריים עדינים- חד</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים משוננים ישרים</td><td>Fine Science Tools</td><td>11050-10</td><td></td></tr><tr><td>נהג מחט קסטרו-וייחו</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>0.9% השקיית</td> <td>נתרן כלורידבקסטר</td><td>BHL2F7121</td><td>חם ל-37 מעלות; C לפני השימוש</td></tr><tr><td>מזרק 10 מ"ל</td><td>Becton Dickinson</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>תפר קלוע נספג 4-0 Vicryl, 18 אינץ', מחט PS-2</td><td>הנרי שיין&nbsp;</td><td></td><td></td>6546037</tr><tr><td>תפר מונופילמנט כחול 24 אינץ' מחט BV-1</td><td>הנרי שיין&nbsp;</td><td>8305H</td><td>מגיע בדרך כלל עם זרוע כפולה. חותכים את התפר בנקודת האמצע כדי ליצור שני תפרים שמישים.</td></tr><tr><td>מספריים מיקרו של Cole-Parmer, כיתה סטנדרטית, ישרה, 4 ".</td><td>Cole- Parmer</td><td>EW-10818-06</td><td></td></tr><tr><td>Medline ג'ל סיכה סטרילי</td><td>Medline</td><td>MDS032273H</td><td></td></tr></tbody></table>

יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים

Creation of Colonic Anastomosis in Mice

. חיבור מעיים מבוצעים בדרך כלל בפעולות בחירה והן מתהווה. למרות זאת, דליפות anastomotic סיבוכים המפחידים ביותר של ניתוחי המעי הגס והוא יכול להתרחש עד 26%. חיבור כירורגי, עם תמותה להיות עד 39% עבור חולים עם דליפה כזאת. כעת, נותר במחסור של נתונים המפרט את המנגנונים התאיים של ריפוי anastomotic. להמציא אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול עבור הנזילה anastomotic יכול להיות מאוד potentiated על ידי הבנה טובה יותר של ריפוי anastomotic המתאים.
מודל מאתר אידיאלי כפי שמחקרים קודמים הראו כי ההשקה מאתר המקרה האנושי לעומת דגמים אחרים בעלי חיים דומה ביותר מבחינה רפואית. אנו מציעים מודל מאתר בקלות לשחזור של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים אשר יאפשרו להמחשה נוספת של ריפוי anastomotic.

ב 7 ימים לאחר הניתוח, ההשקה צריך גם להירפא. ניתן לקצור ההשקה בנקודות זמן לפני ואחרי שבעה ימים טוב יותר להמחיש את שלבי ריפוי anastomotic. איור 9, הניתוח היסטולוגית מראה שהותירה (קולגן דמיינו ידי מכתימה trichrome) התגובה מתווכת על-ידי שריר חלק אלפא-אקטין myofibroblasts חיובי. עם זאת, מצאנו כי תוצאות מניתוחי היסטולוגית משתנות בין עכברים, במיוחד את מידת epithelialization מחדש וריכוז של myofibroblasts באתר anastomotic. . מדווחים התמותה הליך זה להיות פחות מ-10%, עם...

דליפה anastomotic או התמוטטות לאחר הניתוח היא הגורם העיקרי לזיהום לאחר הניתוח. הניתוח ליצירת השקה של המעי הגס הוא שיטה לשחזור ואמין ללמוד את מנגנוני הריפוי של חיבור.

Intestinal anastomoses are commonly performed in both elective and emergent operations. Even so, anastomotic leaks are a highly feared complications of ...

שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח על מנגנוני הריפוי של anastomoses קולו-המעי הגס, ועשוי לספק מודל להפחתת שיעורי דליפה anastomotic ואת ההשלכות ההרסניות שלהם. הטכניקה שלנו מציעה שיטה פשוטה יחסית לשחזור לביצוע אנסטומוזיס קולו-קולוני או קולו-רקטלי במודל של בעלי חיים עם שיעורי דליפה קליניים דומים לחולים אנושיים. התחל על ידי הבטחת הגפיים של עכבר הרדמה על פני השטח הכירורגיים, וחיטוי הבטן החשופה עם כלורקסידין.לאחר מכן מניחים וילון סטרילי מעל החיה, ולעשות חתך בעור לאורך קו האמצע של הבטן התחתונה כדי xiphoid. השתמש ממטרות כדי להרים את קו האמצע של דופן הבטן, ולדאוג לא לפגוע מבנים תוך בטן לשרוף את אורך fascia הבטן קו האמצע. כאשר המעיים נחשפים, לאתר את cecum ומעיים קטנים, ולסובב את הקרביים בצד שמאל מתווך כדי לחשוף את המעי הגס יורד סיגמואיד.ואז לכסות את הקרביים עם גזה לחה, סטרילית. מצפים קצה בדיקה קהה עם ג'לי סיכה, בזהירות לקדם את החללית לתוך פי הטבעת כדי לסייע בזיהוי של המעי הגס סיגמואיד יורד. לאחר המעי הגס זוהה, חלקית למשוך את החללית, ולהשתמש מטחנים אטראומטיים לתפוס בעדינות את המעי הגס סיגמואיד מעולה על התוך האגן.באמצעות מספריים מיקרו חדים, לעשות חתך לאורך המעי הגס סיגמואיד, בניצב לרקמת המעי, ולהרחיב 80 עד 90% לרוחב המעי הגס. אם כלי דם mesenteric נפצע במהלך הסיבוב הקרביים, או קולוטומיה, ב

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

שתי טכניקות שניתן להשתמש בהם כדי לבסס את המודל הזה: הזרקה של השעיה תא סרטני בקיר cecal או השתלה של פיסת גידול תת עורי על cecum. מודל זה שימושי לחקר התפתחות טבעית של סרטן המעי הגס בדיקות סוכני טיפולית חדשה נגד סרטן המעי הגס.

עכבר דגם orthotopic של סרטן המעי הגס

סרטון זה מדגים את יצירתו של מודל לולאה איליאלית לחקר חדירות המעי במודל עכבר. שיטה זו מספקת מודל חי להבנת תפקוד מחסום האפיתל והתגובה החיסונית הנובעת ממנו.

מודל Mouse Ileal Loop: מודל כירורגי לחקר חדירות המעי בעכבר

בסרטון זה, אנו מתארים הליך כירורגי ליצירת לולאת מעי גס פרוקסימלית של עכבר או קטע pcLoop ואחריו הזרקה intraluminal של סמנים פלואורסצנטיים לתוך קטע כדי לחקור את חדירות אפיתל המעי.

יצירת מודל לולאת מעי גס פרוקסימלי של עכבר: הליך כירורגי ליצירת לולאת מעי גס פרוקסימלית ומדידת חדירות המעי על ידי זיהוי סמנים פלואורסצנטיים בסרום לאחר הזרקה תוך לומינלית

במהלך השנים האחרונות, אנדוסקופים דור חדשים צמחו כעזרי מחקר אבחונים חשובים להערכת קוליטיס העכברי וגידולי מעי גס. אנו מציגים במסמך פרוטוקול מפורט לשיטת ניקוד חדשה שמשתמשת במזהים עשרוניים לתעד את החומרה אנדוסקופית של קוליטיס וגידולי מעי גס הערכה אנדוסקופית של דלקת וגידולי מעי גס בעכברים, כמו גם.

קולונוסקופיה גמישה בעכברים כדי להעריך את חומרת קוליטיס ומעי הגס גידולים באמצעות מערכת Validated אנדוסקופי ניקוד

כריתה אילאוקולית מבוצעת בדרך כלל במספר מחלות אנושיות; עם זאת, מעט ידוע על השפעת כריתת המעי על מחלות כירורגיות. מאמר זה מספק הדרכה לביצוע ההליך בעכברים בהצלחה גבוהה, ומספק אמצעי לחקר ההשפעות של כריתה אילאוקולית במודלים של מחלות.

עכברי Ileocolic מעי כריתה עם השקה ראשונית

פרוטוקול להקמת מודל עכבר מהונדס גנטית של סרטן המעי הגס על ידי זיהום adeno-cre קטע ו מעקב שלה באמצעות קולונוסקופיה ברזולוציה גבוהה מוצג.

דגם עכבר מהונדס גנטית של סרטן המעי הגס ספוראדי

מאתר למעי הגס דיסטלי מספק מודל מאתר הסחה האנושי קוליטיס, קוליטיס בעיקר לימפוציטית קטע המעי הגס נכללו הנחל צואה.

מאתר למעי הגס הדיסטלי, מודל הרומן של הסחה קוליטיס בעכברים C57BL/6

הפרוטוקול המוצג מתאר הסרה כירורגית נתיישב של התוספתן (טלאי caecal) בעכבר ואחריו אינדוקציה של מחלת המעי הגס מחלות הקיבה הקשורים סרטן. המודל להסרת התוספתן של murine מאפשר חקירה של התפקיד הביולוגי של התוספתן בפתוגנזה של מחלת העיכול האנושית.

מורנה הנדנדקטומיה מודל של קוליטיס כרונית הקשורים סרטן המעי הגס על ידי לוקליזציה מדויקת של תיקון Caecal

תפקוד מחסום אפיתל מעיים Dysregulated ותגובות חיסוניות הם סימני היכר של מחלות מעי דלקתיות שנותרו נחקרות בצורה גרועה בשל מחסור במודלים פיזיולוגיים. כאן, אנו מתארים מודל לולאת מעיים של עכברים המעסיק מקטע מעיים בעל כלי דם וחיצוניים כדי לחקור חלחיליות רירית וגיוס לויקוציטים ב- vivo.

הערכה תפקודית של חלחיליות מעיים ונדידה טרנס-אפיתלית נויטרופילית בעכברים באמצעות מודל לולאת מעיים מתוקננת

מעקף יחיד anastomosis duodeno-ileal (SADI-S) הוא הליך בריאטרי מתפתח עם השפעות מטבוליות חשובות. במאמר זה, אנו מציגים מודל אמין וניתן לשחזור של SADI-S בעכברים.

מעקף Duodeno-Ileal יחיד Anastomosis עם שרוול Gastrectomy דגם בעכברים

אנו מתארים מודל מורין של אילאוס לאחר הניתוח שנוצר באמצעות מניפולציה במעיים. תפקוד המעבר במערכת העיכול, שינויים פתולוגיים והפעלת תאי מערכת החיסון הוערכו 24 שעות לאחר הניתוח.

מודל Ileus Murine לאחר הניתוח

למדו את פרוטוקול השקת המעי הגס בעכברים לחקר מנגנוני הריפוי ומניעת דליפות אנאסטומוטיות. השיטה מחקה תרחישים קליניים ומאפשרת ניתוח היסטולוגי מפורט.

יצירה של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים

גלה סרטונים נוספים