Name: חדש נייד במבחנה חשיפה קלטת לדיגום אירוסול (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: למדו את שיטת PIVEC לחשיפת תאים לאירוסולים סביבתיים בזמן אמת. מערכת ניידת זו מאפשרת דיגום אוויר בנקודות נגישות ומדידת תגובות תאיות כמו מתח חמצוני ורעילות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצה להודות בוריס סולומונוב, החנות המכונה החדשנות של חבר העמים הבריטי וירג'יניה לעזרה עם שטנץ מהירה המכשיר. המחברים רוצה גם להודות Cristian רומרו-פואנטס של קבוצת Lewinski, ד ר Vitaliy Avrutin, ד ר דמיטרי Pestov, וירג'יניה קהיליה ננו הליבה אפיון המתקן על עזרתם עם איפיון חלקיקים. עבודה זו נתמכה על ידי קרנות הפעלה סופק לו ד ר Lewinski על ידי המכללה האקדמית להנדסה באוניברסיטת וירג'יניה.

לשיוך המחברים הוא כפי שמוצג בעמוד השער. המחברים נתמכים כלכלית על ידי אוניברסיטת וירג'יניה חבר העמים, לאן שהעבודה הושלמה בריצ'מונד, va המחברים יש אחריות מלאה הכתיבה והתוכן של המאמר. המחברים מצהירים כי ישנם אין אינטרסים מתחרים.

מסנן קלטות מספקות שיטה פשוטה, זולה של איסוף אירוסולים באזור נשימה; עם זאת, תרסיס מופק מסננים לא מייצגים את תרסיס כולו (כלומר גזים שיכללו חומרים נדיפים, חלקיקים) ודוגמאות כתוצאה מכך להגביל את ההערכה של השפעות ביולוגיות קשורים. באמצעות העיצוב הראשוני בקלטת מסנן 37 mm, PIVEC נועד לשמור על ניידות ומחקים את ויוו הפקדת חלקיקים משאיפת. PIVEC הוא קטן באופן משמעותי יותר הנוכחי עלי חשיפה למערכות, בערך בגודל של תיבת רקמת עם בקרת טמפרטורה ולחות כלל. הגודל הוא דומה impactors אשד אישי תוך מתן נתונים על התגובה התאית בתרסיס בנו...

דגימה אישי תוך שימוש בטכניקות במבחנה יכול לספק מידע מקיף על האפקטים הביולוגיים של אירוסולים במקום העבודה. 1 חשיפות מזהמים באוויר כוללים חשיפות הכימיקל עצמו, את הדגימות שנאספו אוויר, בתנאים המשוקע שבו הגז היא הציגה התליה תא, חשיפות לסירוגין באמצעות מכשיר כמו כיסא נדנדה, או ישירה חשיפות-הממשק אוויר נוזלי (עלי). 2 רבים של טכניקות אלה מבוצעים עם תאים גדל ההשעיה או האוסף של דוגמאות לפני החשיפה, שכל אחד מהם יכול להשפיע על המחקר רעילות עקב שינויים פוטנציאליים בתרסיס. 3 כדי למנוע שינויים אלה, המעבדה ניתן להביא לשדה באמצעות מספר במבחנה עלי תרבות החשיפה מערכות המשמשות בספרות,4,5,6,7, 8,9,10,11,12,13 . עם זאת, מעטים הם זמינים מסחרית. 8 , 9 , 12 מערכות אלה לעיתים קרובות מגושם, במיוחד כאשר כולל מכשירים לווסת טמפרטורה, לחות של הסביבה התאית, קצב הזרימה של מדגם בתרסיס. באמצעות את PIVEC, תרסיס חשיפות ניתן לבצע מחוץ סביבה מעבדה מסורתי או בתוך האזור הנשימה בזמן מחקה שאיפה תנאים.
הקביעה של תרסיס התצהיר במבחנה חשובה החקירה של השפעות בריאותיות כתוצאה מהשאיפה. אזור הנשימה, שטחה של 30 ס מ הפה והאף,14 חיוני להבנת את החשיפה חלקיקים ולשם קישור בין האפקטים הביולוגיים של הריאות. 2 לעתים קרובות, התצהיר על תאים מוגדר על יעילות התצהיר, החלקיקים הנמסרים, נלקח על ידי התאים מחולק החלקיקים מנוהל מערכת ה-6,15 או על בסיס המוני של כמויות זהה. 4 , 16 השיטות למדידת אירוסולים באזור נשימה הן מסנן המבוסס, לכידת חלקיקי על פני תקופה דגימה נתון ושימוש המסננים לערוך בדיקה נוספת. 17 ניטור אישי מחייב מערכת קטנה שמגיע עם עסקת החליפין של דגימות פחות.
קיימות גישות רבות כדי לקבוע את ההשפעות הבריאותיות מחשיפה תרסיס. המודל עלי מאפשר בתרסיס להינתן ישירות לתאים באוויר כמו תרחיש חשיפה אמיתית, אך היא חסכונית יותר, פחות זמן אינטנסיבי יותר ויוו לומד תוך כדי לחקות את המחסומים אוויר נוזלי כגון העיניים, העור והריאות. ריאות תאים גדל את עלי יש את היכולת ליצור שכבה מכשול מקוטב,18,19 אשר מייצרת תכונות פיזיולוגיות הדומות ויוו ריאות האפיתל, כולל ייצור ריר, חומרים פעילי שטח ספציפי שורות תאים הסמפונות או מכתשי, cilia מכות, צמתי צר19 , קיטוב20 ותא19,. 18 משתנה כגון אלה יכולים להשפיע על התגובה התאית נמדד מחקרי רעילות. 21 . בנוסף, עלי במבחנה דגם תוצאות הם לעתים קרובות יותר רגישה תאים נחשפו באמצעות מודלים ההשעיה22 ואין מסוגלות כדי דגם חריפה ויוו שאיפת רעילות. 23 , 24 . לפיכך, מערכת חשיפה עלי כי הוא מסוגל לבצע מדידות בתוך האזור נשימה היא צעד הבא טבעי.
על ידי חשיפת התאים תרסיס ישירות על מקור פליטה, חקירת ההשפעות של גזים, תרכובות נדיפות למחצה, וכל חלקיקי מעורב בתערובת מתרחשת. כאשר התערובת נאסף על מסנן, תרכובות נדיפות של גזים לא נתפס, לא יכול לחקור את כל התערובת. בנוסף, שיחזור של חלקיקי אבקה או השעיה נוזלי יכול להוביל צבירת או אינטראקציות חלקיקים-נוזל, כגון פירוק, ההשעיה נוזלי. 25 , 26 כאשר חלקיקי אירוסול מתווספים הנוזל, קיים פוטנציאל גבוה יותר עבור הצטברות,25,27 היווצרות של חלבונים קורונה,28 או אינטראקציה עם תרכובות בתוך הנוזל, אשר יכול להשפיע על התצהיר, להשפיע על התגובה הביולוגית. 29 , 30
חשיפה-עלי מבוססת על שלושה פרופילים תרסיס הראשי, ענן שיקוע, במקביל זרימה וזרימה בניצב. ענן להתיישב, בשימוש על ידי חשיפה תא ממשק אוויר נוזלי (אליס),4 היא מערכת אצווה שבו חלקיקים להפקיד באמצעות כוח הכבידה, diffusional מסתדר כמו בתרסיס היא כאל יחידה אחת. זרם מקבילים, המשמש את תרסיס אלקטרוסטטית במבחנה חשיפה מערכת (המרזבים)5 ו Multiculture חשיפה קאמרית (MEC) II,6 מאפשר התצהיר באמצעות התוספת של תנועה בראונית דרך הפרופיל זרימה. זרימת בניצב, בשימוש על ידי microsprayer,7 ננו תרסיס קאמרית In-Vitro רעילות (NACIVT),11 , מסחרי עלי מערכות8,9,10,12, מוסיף את פקק של חלקיקים בתוך אזור התצהיר. רבות ממערכות אלה חשיפה וגדולים מגושם, הדורשים מערכות עודף עבור תרסיס מראש מיזוג, משאבות הזרימה, או אפילו חימום לשכות דגירה של תאים. גודל גדול זה מקטין הניידות של המערכת. במקום דגימה ישירות על מקור פליטה, מערכות אלו לעתים קרובות יש דוגמאות הובא אירוסולים מעבדה או מודל שנוצר לצורך ניתוח. אסור לאבד את המורכבות בתרסיס הנפלט בתרגום מן השדה למעבדה. PIVEC הוא קטן יותר מאשר המערכות הקיימות, עם שטח פני השטח החיצוניים של 460 ס מ2 , במשקל 60 גרם בלבד, עם חום ולחות שולבו מערכת המאפשרת להתקן נייד במיוחד. ירידה בגודל ובמשקל לאפשר למערכת להיות שחוקים או נלקח למקור של חשיפה, המתיר דגימה ישירה.
גודלו של מערכות החשיפה הנוכחית גם פוחתת היכולת לבצע דגימה לחקור את מרחבי מעברי צבע בריכוזים. החלטה זו היא המפתח בעת החלטה על תופעות רעילות של פוטנציאל סביבתיים רבים, סיכון מקצועי כגון פליטה לרכבים חלקיקי החומר או מקום העבודה פעילויות שבו מתרחשת חשוד. מיד לאחר פליטה, הופך שם שונות מרחבית בריכוז החלקיקים. זה גדל עם הזמן כפי החלקיקים לפזר ברחבי האטמוספירה ולשנות אפקטים אלה בהתבסס על תנאי הסביבה, כגון טמפרטורה, לחץ, רוח, שמש. חלקיקים יכולים להתחיל בגיל, נישחק גם פעם הנפלט31,32 , פיזור המחירים המושפעים הטופוגרפיה; ריכוז גבוה ניתן למצוא קניונים ומנהרות, שבו פיזור האפקטים הם האטה, ריכוז נמוך יותר ניתן למצוא איפה יש אזור גדול עבור פיזור. 33 שינויים אלה של פיזור המחירים יכול להיות השפעות משמעותיות על בריאות האדם, ניתן לראות כאשר משווים את המספר של אסתמה מבוגרים המתגוררים עירוני לעומת הכפרי. 34 בעוד מערכות חשיפה רבות לספק דוגמאות מרובים בבת אחת, מערכות מרובות נחוצים עם שפע של ציוד גדול לביצוע רזולוציה מרחבית.
על ידי הבאת מהמעבדה לשדה, הניתנות להפחתה הזמן של ניתוח על-ידי שימוש את כל התא חיישן. בעקבות מנגנונים ביולוגיים ידוע ונקודות קצה יכול לסייע בקביעת הרכב תרסיס ואת גודל. בשל שיטות הסיווג איטי, לרבות בשחרור ליחה, phagocytosis רוברטסונית, חלקיקים אלה לעיתים קרובות אינטראקציה עם תאים כ ימים עד שבועות3 יוצר סטרס חמצוני, דלקת, אפילו מוות של תאים. אלה נקודות קצה ביולוגי יכול להיות נקודות המוצא עבור תוצאה שלילית מסלולים עבור מחלות לב וכלי דם או מחלת ריאות חסימתית כרונית. בנוסף, Wiemenn. et al. לבצע מגוון של מבחני במבחנה כדי להשוות ערכים ספרות לטווח קצר ויוו שאיפת רעילות. 35 In vivo התגובה היה חזה עם שניים מתוך ארבעת תוצאות חיוביות של בדיקות cytotoxicity באמצעות שחרור לקטט דהידרוגנאז, סטרס חמצוני של הפחתת גלוטתיון היווצרות מימן על-חמצני ושחרור, דלקת אפשרית מן הגן הגידול נקרוזה מקדם אלפא. מתוך עשר nanosized תחמוצות מתכת נבדק, שש נבדק כמו פעיל (טיטניום אוקסיד, תחמוצת אבץ ו תחמוצת צריום שונות ארבעה) באמצעות חשיפות בתוך חוץ גופית עם אישור ויוו. 
על מנת לחקור את ההשפעות של אירוסולים בסביבה תעסוקתית, המעבדה שלנו פיתח את PIVEC עבור חשיפות בשטח. בנוסף, PIVEC יכול להיות משוחק על דגימה אישי לפקח ולחקור שאיפת חשיפה כמו קלטת מסנן36 37 mm או מערכות מרובות ניתן להשיג רזולוציה מרחבית בתוך אזור נתון. ב פרוטוקול זה, אפיון ושימוש PIVEC הנדונה. לאחר החשיפה, השפעות ביולוגיות הם נצפו דרך מבחני cytotoxicity.

<table><tbody><tr><td>סריקת גודל חלקיקי ניידות (SMPS)</td><td>TSI, Inc.</td><td>3910</td><td>NanoSMPS</td></tr><tr><td>גודל חלקיקים אופטי (OPS)</td><td>TSI, Inc.</td>צינור נירוסטה <td>3330</td><td></td></tr><tr><td>, 4 אינץ' ארוך</td><td>McMaster-Carr</td><td>4830K116</td><td>קיר סטנדרטי 304/304L, מושחל בשני הקצוות, 1/8 גודל צינור</td></tr><tr><td>שסתום כדור פליז עם ידית מנוף</td><td>McMaster-Carr</td><td>4112T12</td><td>דירוג קומפקטי בלחץ גבוה, צינור פלדה נקבה 1/8 NPT</td></tr><tr>, קיר סטנדרטי<td>2 אינץ' ארוך</td><td>McMaster-Carr</td><td>7753K121</td><td>, מושחל בקצה אחד, 1/8 גודל</td></tr><tr><td>צינור HEPA filter</td><td>GE Healthcare</td><td>09-744-12</td><td>HEPA-Cap חד פעמי סינון אוויר קפסולה</td></tr><tr><td>מחולל ואקום</td><td>PISCO ארה"ב</td><td>VCH10-018C</td><td></td></tr><tr><td>PIVEC</td><td>VCU</td><td></td><td>לעיצוב אנא צור קשר עם</td></tr><tr><td>מחברים מחמם</td><td></td><td></td><td></td>התנגדות</tr><tr><td>1/4 אינץ' מחברים דוקרניים</td><td>Zefon International, Inc.</td><td></td><td></td>459743</tr><tr><td>צינורות נקבוביים</td><td>Scientific Commodities, Inc.</td><td>BB2062-1814A</td><td>הידרופילי 10 אום נקבוביות</td></tr><tr><td>סוללה בנק</td><td></td><td></td><td></td>כוח סוללה</tr><tr><td>הכנס תרבית תאים</td><td>פישרברנד</td><td>353095</td><td>24 באר הכנסת צלחת</td></tr><tr><td>מלקחיים מסנן</td><td>פישרברנד</td><td>09-753-50</td><td></td></tr><tr><td>העברת פיפטה</td><td>ThermoScientific</td><td>13-711-27</td><td></td></tr><tr><td>מסנני סיבי זכוכית</td><td>SKC</td><td>225-7</td><td>סוג ללא קלסר מסנן AE 37 מ"מ 1.00 אום נקבוביות</td></tr><tr><td>Ultra Micro Balance</td><td>A& D</td><td>BM-22</td><td>שוכנת בתא סביבתי</td></tr><tr><td>קלטת מסנן 37 מ"מ</td><td>SKC</td><td>225-3250</td><td>קלטת מסנן ריקה, 37 מ"מ,</td></tr><tr><td>משאבת ואקום בזרימה משתנה</td> של סטירן שקוף <td>SKC</td><td>220-5000TC</td><td>AirChek TOUCH, 5 עד 5000 מ"ל לדקה</td></tr><tr><td>חלקיקי נחושת</td><td>U.S. Research Materials, Inc.</td><td>US1090</td> חלקיקי נחושת <td>40 ננומטר</td></tr><tr><td></td><td>U.S. Research Materials, Inc.</td><td>US1088</td> חלקיקי נחושת <td>100 ננומטר</td></tr><tr><td></td><td>U.S. Research Materials, Inc.</td><td>US1117M</td><td>800 ננומטר</td></tr></tbody></table>

חדש נייד במבחנה חשיפה קלטת לדיגום אירוסול

A New Portable In Vitro Exposure Cassette for Aerosol Sampling

פרוטוקול זה מציג במבחנה חשיפה מערכת חדשה, מסוגל להיות שחוקים, כולל אפיון והביצועים שלו. ממשק אוויר נוזלי (עלי) במבחנה חשיפה מערכות לעיתים קרובות מגושם, יצירת תחבורה שדה ומבצע במקור של פליטת או בתוך האזור נשימה קשה וגדולים. דרך המזעור של מערכות אלה, ניתן להביא את המעבדה לשדה, לזירוז זמן עיבוד ואספקת שיטה מתאימה יותר חשיפה זה אינו משנה את תרסיס לפני פנייה אל התאים. הנייד במבחנה חשיפה קלטת (PIVEC), מסתגל קלטת מסנן 37 מ מ כדי לאפשר במבחנה רעילות בדיקות מחוץ סביבה מעבדה מסורתיים. PIVEC התאפיינה באמצעות שלושה גדלים של חלקיקים נחושת כדי לקבוע יעילות התצהיר בהתבסס על gravimetric ניתוח ריכוז מספר החלקיקים. Cytotoxicity הראשונית הניסויים בוצעו עם תאי הריאות חשופות כדי לקבוע את היכולת של המערכת הפקדת חלקיקים תוך שמירה על התא הכדאיות. PIVEC מספק יעילות דומה או מוגבר התצהיר בהשוואת להתקני זרימה בניצב זמין במבחנה חשיפה. למרות התפוקה דגימה נמוך יותר, גודל קטן נותן כמה יתרונות ה הנוכחי במבחנה עלי חשיפה מערכות. אלה כוללים את היכולת להיות משוחק לניטור אישי, ניידות מהמעבדה כדי מקור פליטה, ואת האפשרות שיבנו מערכות מרובות עבור רזולוציה מרחבית תוך שמירה על משתמש התחתון עולה. PIVEC הוא מסוגל איסוף אירוסולים בשדה, בתוך האזור נשימה אל אוויר-לממשק, במבחנה מודל מערכת.

תעסוקתית במבחנה הרעלים כוללת שמירה על יכולת הקיום הסלולר תוך כדי ביצוע החשיפה תרסיס. מערכת PIVEC מוצג באיור 2, לרבות הטמפרטורה, בקרת לחות, את PIVEC שחוקים. הטמפרטורה נשמר באמצעות תנור resistive המופעלים באמצעות סוללות והגדילה תרסיס humidified באמצעות לחות טבעי דרך צינור נקבובי, שנרטבו. תרסיס מבוקרת הגדרת בתוך מעבדה, PIVEC יכולה להיות הגדרת חשיפה המוצג באיור1. אפיון המערכת מאפשרת קביעת המינון הופקדו על גבי התאים אשר ישויך...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לבצע חשיפות תרסיס סלולרי נייד ולמדוד את תגובת תאי. השיטה משתמשת בתאים, גדל הממשק אוויר נוזלי, מחקה ויוו פיזיולוגיה. תגובה תאית nanoparticle נחושת אירוסולים נצפתה כמו לחץ חימצוני באמצעות הדור מינים חמצן תגובתי cytotoxicity כמו שחרור לקטט דהידרוגנאז.

This protocol introduces a new in vitro exposure system, capable of being worn, including its characterization and performance. Air-liquid interface (ALI) ...

פרוטוקול זה הוא משמעותי, כמו PIVEC מאפשר חשיפה ישירה של תרבות התא כדי אירוסולים בעולם האמיתי. ניתן להזהיר את המערכת לדגום את אותו אוויר שאדם נושם, מה שמאפשר סוג חדש של ניטור איכות אוויר. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא הקלות של לכידת אירוסולים על תאי ריאות מתורבתים במקומות שאינם נגישים למערכות ספסל העליון, כגון במקור הכניסה או בתוך אזור הנשימה.הדגימו את ההליך יהיו ד"ר לין סונו, בוגרת המעבדה שלי לאחרונה, ונתנאל ויגאל, סטודנט לתואר ראשון מהמעבדה שלי. לניסוי זה, חומרי בדיקה מאוחסנים וסביבה מבוקרת במשך 24 שעות לפני הבדיקה. כדי להרכיב את מערכת הפיזור היבשה, לחבר את שסתום הכדור לקצה אחד של צינור אורך ארבעה אינץ ', 1/8 גודל מושחל.זה משמש כהופר החלקיק. דרך הקצה הפתוח של הופר החלקיקים, לשים את הכמות הרצויה של חלקיקי נחושת. ואז לסגור את הופר החלקיק עם שסתום כדור אחר.חבר את צינור שני אינץ' ארוך, 1/8 גודל לשסתום. מניחים צינורות בקוטר חיצוני באורך 3 אינץ', בקוטר 1/2 אינץ' סביב צינור שני אינץ'. הכנס מסנן HEPA בתוך צינורות קצרים, הבטחת כיוון הזרימה הוא דרך שסתום הכדור.באמצעות השחלה, לחבר את מחולל ואקום לשסתום הכדור השני. לאחר מכן, חבר את גנרטור הוואקום למיכל האוויר. שים צינורות בקוטר חיצוני 1/4 אינץ ' מעל השקע של גנרטור ואקום כדי לחבר אותו ההתקנה הניסיונית.הפעל את שסתום הראשי שסתומי וסת על מיכל האוויר כדי להגדיר את הזרימה הרצויה. פתח את שסתום הכדור, הקרוב ביותר למסנן HEPA ולאחר מכן פתח את שסתום הכדור הקרוב ביותר לגנרטור ואקום. השאר אותם פתוחים במהלך האפיון או החשיפה לפני סגירתם.ראשית שסתום הכדור הקרוב ביותר לגנרטור ואקום, ולאחר מכן שסתום הכדור הקרוב ביותר למסנן HEPA. סגור שסתומים ראשיים וסת על מיכל אוויר כדי לעצור את הזרימה. כדי לנקות, השתמש 70% אתנול לשטוף שסתומי כדור גנרטור ואקום.שים צינורות מתכת במקלבה אוטומטית לסטריליזציה. לאחר culturing תאים בממשק נוזלי אוויר, לאפשר לתאים לצייד במשך 24 שעות. כדי להרכיב, קח את בסיס PIVEC עם הבאר הפונה כלפי מעלה וחבר את מתאם הכנסת תרבות התאים בחלק העליון.הוסף ארבעה מיליליטר של מדיה לתרבות התאים ל הבאר של הבסיס של PIVEC באמצעות micropipette. השתמש פינצטה כדי למקם את תרבות התא להוסיף בתוך המתאם. כאשר החלק הצר של החלק העליון של PIVEC פונה כלפי מעלה, התחבר למתאם.בזהירות, לעטוף PIVEC עם שכבה אחת של סרט דביק. דחוף כדי לחבר חתיכות קלטת 37 מילימטר על החלק העליון והתחתון של PIVEC. מניחים 1/4 מתאמים דוקרניים אינץ' לתוך מגירה ושקע.לעטוף תנור התנגדות סביב PIVEC עם החוטים בבסיס. קלטת לאבטח. לעטוף PIVEC עם שמונה סיבובים של רדיד אלומיניום לבידוד, ומאובטח עם סרט הדבקה.חבר צינורות בקוטר חיצוני בגודל 1/2 אינץ' למתאם בחלק העליון של PIVEC. מוציאים צינורות נקבוביים ממים סטריליים וממקמים בתוך צינורות על גבי PIVEC. העבר את המערכת למכסה המנוע של האדים והדק את ה- PIVEC על מעמד הטבעת ומאובטח.חבר PIVEC למערכת תרסיס על ידי חיבור צינורות בקוטר 1/4 אינץ 'בשקע של גנרטור תרסיס אל צינורות נקבובי. חבר את היציאה של PIVEC צינורות בקוטר 1/4 אינץ' המחובר למסנן HEPA ומשאבת ואקום על ידי מחבר Y. הפעל את השסתומים והגדר את קצב זרימת המשאבה ל 0.5 ליטר לדקה.חשוף את התאים לננו-חלקיקי נחושת במשך עשר דקות לפני סגירת השסתומים וכיבוי המשאבה. הסר PIVEC ממערכת תרסיס. מוציאים את תרבות התאים מוסיפים באמצעות פינצטה ומכניסים אותה לצלחת הבאר הסטרילית כדי להתחיל את ההתמדה הביולוגית הרצויה.נקודות זמן חשיפה מוצעות, להחזיר את המוסף לאנקובטור פחמן דו חמצני. שאף מדיה מ- PIVEC באמצעות טפטפת. השתמש 70% אתנול לשטוף PIVEC ולעקר אותו עם אור אולטרה סגול לפחות 30 דקות לפני הניסוי הבא.PIVEC התאפיין בשלושה גדלים של חלקיקי נחושת כדי לקבוע יעילות תצהיר. תצהיר מוגבר נצפתה בסך הכל עבור 24 עיצוב היטב, אז שישה עיצוב היטב. זה פוחת מעט עבור 100 ננומטר בהשוואה 40 ננומטר ו 800 חלקיקי נחושת ננומטר.ריכוז מספר חלקיקים של אירוסולים ננו-חלקיקי נחושת נקבע על ידי מסננת מבוססי סריקה של מייזר חלקיקי ניידות, כמו גם מדידות sizer חלקיקים אופטיים. ניתוח שלאחר החשיפה יכול להיות מזורז על ידי קביעת יחסי המינון בין מסנן 37 מילימטר לבין לתוספת תרבות התא. ההשוואה מראה מתאם חזק עבור חלקיקי נחושת 800 ננומטר עם ערך p פחות מ 0.05.בהשוואה לתזרים בניצב במערכות חשיפה במבחנה לאורך הספרות, יעילות התצהיר של PIVEC על פני טווח גדלי החלקיקים שנבדקו דומה לערכים המדווחים או גדלה. הדבר החשוב ביותר שיש לזכור הוא שלמרות שפרוטוקול זה מדגים את השימוש ב- PIVEC בסביבה מעבדתית, הוא נועד למדוד תגובות תאיות לתרסיסים באתר החשיפה. בעת ביצוע בדיקות באתר, חשוב לאפיין את יעילות התצהיר של תרסיס הבדיקה.יעילות התצהיר קובעת את המינון המופקד של חלקיקים שאליהם נחשפים התאים. ניתן לבצע בדיקות ביולוגיות נוספות כדי לחקור נקודות קצה נוספות של תגובה תאית עקב חשיפה. PIVEC שימש כדי להעריך את התגובה התאית עקב אירוסולים שנוצרו במהלך תהליכי הדפסה בתלת-ממד, כגון סילון קלסר מתכת, ייצור סיבי מותך.שימוש בננו-חלקיקים, במיוחד בצורת תרסיס, יכול להיות מסוכן וכל חשיפה צריכה להתבצע במכסה המנוע של האדים. עבודה סלולרית צריכה להיעשות בארון בטיחות ביולוגית.

a-new-portable-in-vitro-exposure-cassette-for-aerosol-sampling

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

Source: Schaeffer, J. W., Chandler, et al. Detection of Viruses from Bioaerosols Using Anion Exchange Resin. J. Vis. Exp. (2018).This video demonstrates the detection of viruses from bioaerosols using an anion exchange resin. A liquid impinger containing the resin is used to capture viruses from the air. The resin is collected and treated with a virus lysis buffer containing carrier RNA. The lysate is transferred to a microcentrifuge tube for viral RNA isolation, followed by qRT-PCR to amplify...

Anion Exchange Resin–Based Detection of Viruses from Bioaerosols

סרטון זה מדגים את הייצור של אירוסולים של תרופות ואת ההעברה הממוקדת של אירוסולים אלה לעכברים באמצעות יחידת שאיפה המצוידת במחולל אירוסולים. העכבר מרוסן בריסון אף בלבד ומחובר ליחידת השאיפה, המעבירה את התרופה ישירות לחלל האף של העכבר. לאחר מכן, התרופה עוברת דרך קנה הנשימה ונכנסת לריאות.

טכניקה לייצור והעברת אירוסולים תרופתיים ישירות לריאות עכברים

מתקן משאיפת תרסיס nanoparticle כל גוף חשיפה נבנה עבור תחמוצת טיטניום בגודל ננו...

כיווני שאיפת תרסיס Nanoparticle כל הגוף

אנו מציגים את VacuSIP, שיטה פשוטה, לא פולשנית ואמינה לדגימה נקודתית נקייה ומדויקת של מים. המערכת פותחה והוערכה לאיסוף בו-זמני של המים הנשאפים והנשפים על ידי מזיני תרחיף בנתיים באתרם, כדי למדוד בצורה נקייה הסרה והפרשה של חלקיקים ותרכובות מומסות.

VacuSIP, שיטת INEX משופרת<em&gt; באתרו</em&gt; מדידה של חלקיקים מומס תרכובות מעובד על ידי האכלת השעית Active

קביעת המגוון פטרייתי בתוך סביבה היא שיטה מנוצל בלימודי בריאות תעסוקתית לזהות את הסכנות הבריאותיות. פרוטוקול זה מתאר מיצוי DNA מדגימות האוויר תעסוקתית עבור הגברה ורצף של אזורים ITS פטרייתי. גישה זו מזהה הרבה מינים פטרייתי זה ניתן להתעלם על ידי שיטות הערכה מסורתית.

אוסף והפקת האוויר תעסוקתית דוגמאות לניתוח של DNA פטרייתי

סיגריה אלקטרונית (e-סיגריה) משתמשים הן הגוברת ברחבי העולם. מעט, עם זאת, ידוע על ההשפעות הבריאותיות המושרה על ידי אירוסולים בשאיפה e-סיגריה. מאמר זה מתאר שיטת דור תרסיס e-cig מתאים חשיפות בעלי חיים, מחקרים מאוחרים יותר רעילות. פרוטוקולים כזה נדרש להקים מערכות חשיפה מתוקננת הדירים השפעול e-סיגריה.

דור של תרסיס סיגריה אלקטרונית על ידי מכשיר הדור השלישי המכונה-Vaping: יישום מחקרים רעילות

אניון להחליף שיטה מבוססת-שרף, הותאם לנוזל הוכח bioaerosol מבוסס-impingement דגימה של וירוסים. כאשר יחד עם זיהוי מולקולרי במורד הזרם, השיטה מאפשרת גילוי נתיישב ורגיש של וירוסים bioaerosols.

זיהוי של וירוסים Bioaerosols באמצעות אניון Exchange שרף

אנו מציגים חזקה, להעברה וניבוי מערכת חשיפה מחוץ למערכת להקרנה וניטור של חלקיקים מוטס בנוגע לרעילות חריפה של הריאות שלהם על ידי חשיפת מעובד בתאי הריאה האנושיים בממשק האוויר-נוזלי (ALI).

הערכת הרעלת שאיפת חריפה של חלקיקי מוטס על ידי חשיפת תאי ריאה אנושיים בממשק האוויר-נוזלי

הפרוטוקול מתאר את ההגדרות והשימוש במחולל תרסיס נימי לייצור רציף של אירוסול מבוקר מתמיסה נוזלית רב-מינית, המתאימה למתן תרסיסים יציבים בנפח גדול (למשל, מחקרי שאיפה in vivo ).

שימוש במחולל תרסיס נימי בייצור רציף של תרסיס מבוקר למחקרים לא קליניים

המתוארת היא תרבות התא ושיטת החשיפה של מודל הסימפונות במבחנה לחשיפה מציאותית וחוזרת ונשנית לשאיפת חלקיקים לבדיקות רעילות.

מודל אפיתל ממשק נוזלי אוויר לחשיפה מציאותית וחוזרת ונשנית לחלקיקים מוטסים לבדיקות רעילות

אנו מקימים מודל מבחנה סטנדרטי לחקר חשיפה לאדי קנאביס בממשק אוויר-נוזל. מודל זה מספק גישה שיטתית לבחינת ההשפעות של קנאביס מאודה, תוך התייחסות לעניין הגובר במכשירי אידוי קנאביס כחלופה לעישון.

במבחנה חשיפות קנאביס של תאי אפיתל ריאה בממשק אוויר-נוזל

למדו את שיטת PIVEC לחשיפת תאים לאירוסולים סביבתיים בזמן אמת. מערכת ניידת זו מאפשרת דיגום אוויר בנקודות נגישות ומדידת תגובות תאיות כמו מתח חמצוני ורעילות.

חדש נייד במבחנה חשיפה קלטת לדיגום אירוסול

גלה סרטונים נוספים