Name: אמצעי ספונטנית עורר הכאב במודלים מאתר של כאבי ברכיים Monoarticular (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: למדו פרוטוקול רגיש וניתן לשחזור למדידת כאב מעורר וספונטני במודלים של דלקת פרקים בעכברים. השיטה מאפשרת הערכת טיפולים אנלגזיים ורגנרטיביים בחקר הכאב.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

במימון הקרן מחלקה של חיילים משוחררים לענייני למלגות 2 I01 RX000379-05.

כל ההליכים בבעלי חיים והפרוטוקולים היו אושרה על ידי מיניאפוליס ותיקי לענייני בריאות מערכת (VAHCS) טיפול בעלי חיים מוסדיים שימוש הוועדה, תאמו את "מדריך עבור טיפול והשתמש של חיות מעבדה" (הלאומית האקדמי לתקשורת, ארה ב) 12.
1. בחירה של בעלי חיים
הערה: C57Bl6 עכברים משמשים עבור כל הדגמים שלושה פרקים.
<ol><li>להשתמש עכברים זכר או נקבה, אך שים לב כי התגובה כאבי מפרקים עשויים להשתנות בהתאם בפתוגנזה של המודל נבדק ומגדר.</li>
	<li>בחר עכברים שלא הגיעו לבגרות מינית, אינם עוד במהירות גוברת ולא מספיק מבוגר כדי פיתחו פרקים ספונטנית כי יכול לבלבל כאב מדידות. הערה: שנים עשר שבועות הוא גיל אידיאלי למדידה כאב הדגמים שתוארו, אבל זה תלוי תכנון המחקר. גיל קבלת חניכה של דלקת מפרקים תלוי משך הזמן שהמודל לוקח לפתח. דלקת מפרקים דלקתיות חריפה (מודל קרגינאן) דורש 3 h כדי לפתח, ולכן בעלי 12 שבועות של גיל בזמן האינדוקציה. דלקת מפרקים דלקתיות כרוניות (מודל פרנק) דורש 3 שבועות כדי לפתח, ולכן בעלי החיים הישן בזמנו של אינדוקציה 9 שבועות. דלקת מפרקים ניוונית כרונית (מודל collagenase) דורש 4 שבועות לפתח, ולכן בעלי 8 שבועות בזמן האינדוקציה. מודל יותר כרוניים של דלקת מפרקים ניוונית יכול לשמש על ידי גרימת דלקת מפרקים רוב בגיל 6 שבועות. דבר זה מאפשר 6 שבועות של התפתחות נזק משותף. עם זאת, דלקת מפרקים ניוונית כרונית בעכברים אינו מייצר כאב עורר משמעותית.</li>
	<li>להשיג חיות ממקור לאומי מגדל מסחרי.</li>
	<li>חיות הבית בקבוצות של עד 8 בעלי חיים בכלובים פוליקרבונט סטנדרטי עם דיאטה מכרסמים ad libitum ומים.</li>
	<li>לשמור על תנאים סביבתיים-72 מעלות צלזיוס ± 1 ° C ו- 33% ± 1% לחות עם מחזורים/כהה 12 שעות.</li>
</ol>2. תוך-מפרקיות זריקות לתוך הברך
<ol><li>צור 30 G 2.5 מ מ סטרילי על-ידי כיסוי אורך מחט 0.5 אינץ עם נדן עשוי צינורות פוליאתילן עם פנימי בקוטר 0.38 מ מ, קוטר חיצוני של מ מ שוקל 1.09, עוזב רק 2.5 מ מ המחט בולטות. פעולה זו מונעת החדרת המחט עמוק מדי והיוצאים המפרק posteriorly.</li>
	<li>לבחור ברך אחת כדי להזריק, לגלח אותו באמצעות כל טרימר שיער פנים חשמליים זמינים מסחרית, לחטא עם שיחים providone-יוד.</li>
	<li>עזים ומתנגד את העכבר עם 3% איזופלוריין 100% O2 ב- 1 ליטר/דקה במשך 3 דקות ± תחזוקה מינימלית 1 הרדמה באמצעות nosecone במהלך ההליך. לאשר הרדמה עומק על ידי צביטה הבוהן. לטפל כדי לפקח על מצב הנשימה ולצמצם את החשיפה הרדמה כדי לשמור על הנשימות נאותה.</li>
	<li>הזן את הג'וינט בקו האמצע דרך הגיד ברך רק נחות לקצה התחתון עצם הפיקה באמצעות מחט סטרילית sheathed ברגע העכבר הוא מורדם לחלוטין. גישה זו קו האמצע קדמי הגדלת דיוק להזנה המפרק של הזרקת החומר של ריבית.</li>
	<li>לשימוש הזרקת חומרים בתדר דלקת מפרקים והן הספוגות אותה גישה. פקדים המזויפים מיוצרים על ידי החדרת המחט כמו לעיל, אך ללא הזרקת חומר כלשהו.</li>
</ol>3. ייצור של דלקת מפרקים
<ol><li>עזים ומתנגד חיה כמו שלב 2.3 לעיל.</li>
	<li>לשקול את הכמויות המתאימות (ראו להלן) של קרגינאן, של שלמה פרוינד אדג'וונט ואת הסוג הרביעי Collagenase, לדלל את הריכוז המתאים עם תמיסת מלח בתוך תא למינארי עקרות ובטיחות.</li>
	<li>מזריקים µl 10 של 2.5% קרגינאן מדולל ב- 0.9% מלח סטרילית הברך כמו לעיל באמצעות מזרק המילטון לייצר דלקת מפרקים דלקתיות חריפה. דלקת מפרקים פסגות 3 שעות לאחר ההזרקה.</li>
	<li>להזריק, 30 µL (30 µg) של שלמה פרוינד אדג'וונט (CFA) לתוך הברך כדי לייצר דלקת מפרקים דלקתיות כרוניות. זה השלב הראשוני דלקתית חריפה זה במעבר־ההרים 1 שבוע ואז תקופה כרונית. פסגות ב- 3 שבועות לאחר ההזרקה.</li>
	<li>מזריקים µL 10 המכילות IU 10 סוג IV Collagenase לייצר דלקת מפרקים ניוונית כרונית. כאבי מפרקים פסגות 4 שבועות לאחר ההזרקה.</li>
</ol>4. מדידה של עורר כאבי פרקים
<ol><li>תמיד לבדוק את הברך השוואה רגילה קודם כדי למזער את התגובה צולבות על כאב (מסכם) של הברך כואבת13.</li>
	<li>הרכבת הבודק כדי להחיל לחץ עקבי של gf/ס מ 7002 = 10 psi באמצעות Palpometer רמה 4; המכשיר פולט צפצופים 4 כאשר רמה זו של הלחץ מוחל. זה כמות הלחץ עקבי מביאות לתגובה כאב גדול מ arthritic משותפת מאשר מג'וינט נורמלי. הערה: המכשיר מכויל במפעל שמעודדים 4 צפצופים בעת החלת את רמת הלחץ המתאימה. להשתמש בהתקן להכשרת בלבד; אין להשתמש על החיות אבל כשבוחנים את החיות, להחיל את כמות הלחץ ללמוד את האימונים.</li>
	<li>לרסן את העכבר חזק מספיק כדי למנוע תנועה מזדמנים על ידי מחזיק את עורפה של הצוואר עם האגודל והאצבע באמצעות 4 אתth ואצבעותth 5 כדי לרסן את הזנב. העכבר אמור להיות מסוגל לבצע תנועות דיסקרטית, קצרה עם מאמץ, אחרי גירוי, אבל לא צריך להיות מסוגל לנוע בחופשיות או ללא הרף.</li>
	<li>לנהל חוזרות palpations (Palpometer רמה 4) המשרד במקביל את הצדדים לרוחב ו המדיאלי של הברך כל על קו משותף עם האגודל, האצבע המורה. של יד חופשית פעם בשנייה במשך דקה תוך הרחקה העכבר. אל תשתמש Palpometer את העכבר לבדיקת; הוא משמש רק עבור אימונים.</li>
	<li>יש משקיף השני לספור את מספר הפעמים החיה vocalizes ונלחם כדי להימלט הריסון במהלך פרק הזמן זה דקה. הסכום של קרבות, vocalizations התוצאה עורר הכאב.</li>
	<li>תמיד אותנו הבודק אותו לאורך כל תקופת המחקר, לאשר הבוחן וגם הצופה עיוורות לגבי תנאי הניסוי.</li>
</ol>5. מידת הכאב משותף ספונטנית.
הערה: המכשיר מתקדם דינמי משקל הנושאת (ADWB) מחשבת את אחוז הזמן הכולל שהחיה מקדיש כל איבר, את אחוז המשקל הכולל הנישאת על כל איבר.
<ol><li>למלא גביע פלסטיק 2 ל' מים. מקם את ספוג ואת בינוני צפיפות fiberboard כלולים עם הציוד יחד עם. הספל מלא בקנה מידה מעבדה ולתעד את המשקל משולב.</li>
	<li>פתח את התוכנית ADWB ובחר סוג חיישן עכברים .</li>
	<li>לכייל את המערכת לפני ניסוי:<ol>
<li>בחר כיול מלא תחת תפריטים כיול . הזן 0.00 טרה ערך ומשקל של ספוג, בינוני צפיפות fiberboard, גביע פלסטיק, מים כמו משקל כיולולאחר מכן בחר הבא.</li>
		<li>בחר טרה לפני הצבת כל דבר על החיישן. לפני בחירת לקבל תצוגה מקדימה, לכסות משטח חיישן עם ספוג שסופקו, בינוני צפיפות fiberboard, גביע פלסטיק מלא עם 2 ליטר מים, לפי הסדר הזה. בחר לקבל תצוגה מקדימה , ברגע המשקל כיול על החיישן.</li>
		<li>התאם את המשקל כיול, כך זה מופץ באופן שווה לרוחב של חיישנים נפרדים, כאשר הערך של כיול מחוון היא מעל 95, בחר לקבל הגדרה. תהליך זה מייצר ממוצע מנורמל החיישנים בודדים ומבטיחה את תקינות חיישנים נפרדים. לבסוף, בחר הבא.</li>
		<li>שמור את הקובץ כיול לתוך התיקיה כיול.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ניו לבחור ואיפה סיפק להזין את שם הפרוייקט ואת שם בעל חיים אחר העכבר הראשון להבדק.</li>
	<li>בחר לגלוש ופתח את הקובץ כיול שנוצר עבור הפרוייקט. בחר הבא, להבטיח לאפשר לכידת וידאו מסומנת ובחר אישור.</li>
	<li>שוקל את החיה, בחר ללכודולהקליט את המשקל בתוכנה. בחר ב'אישור '.</li>
	<li>לא חבל עכברים אל התא לפני האוסף של נתונים כי התקן זה מודד את הספונטניות.</li>
	<li>הנח את העכבר בבית הבליעה למשך 5 דקות של בדיקה. כאשר בעל-החיים בבית הבליעה בחר להשיק. התוכנה להקליט את הפעילות של החיה במהלך תקופה זו, לכידת וידאו לסנכרן עם הנתונים חיישן ו אוטומטית למחיצות וידאו זה לתוך בקופסאת וקטעים שאינם בקופסאת. הערה: התוכנה מביאה בחשבון מקטעי בקופסאת כאשר מזוהה אזור יציב אחד לפחות. שטח יציבה נוצר כאשר החיישן ≥2 g-חיישן אחד עם מינימום של חיישן סמוכים אחד גילוי ≥1 g וכאשר אזור חלוקת משקל יציב יותר 0.38 s.</li>
	<li>לפני הניתוח הראשון בסדרה בחר הבקיע קל שעצמאית הכפות הגדרה. הערה: ניקוד קל מאפשר אימות איטרציה של מקטעי איפה אזור יציב לא משנה המבוסס על האימות של אזור יציב הראשון של קטע זה. כפות רגליים עצמאית הגדרת מספק את הצופה עם גישה קיצורי המקשים המאפשרים זיהוי אישי של כל כף הרגל. אזורי מקצה הצופה בקריטריונים מינימליים כמו הינד נכון, עזב האחוריות, נכון, והטיפוס עזב פור, שני forepaws, חלק גוף אחר, או להתעלם אזור על-ידי שימוש בקיצורי מקשים תוך החזקת המצביע מעל המקטע לפי המפה שקנה המידה שלה השתנה ווידאו של הופעל חיישנים.</li>
	<li>בחר >> לעבור קטע בקופסאת ראשון. אם שטח יציבה לא הכפה הנכונה מזוהה ולאחר מכן החזק את הסמן מעל אזור זה הקש את קיצור המקשים (נכון הינד, s; הינד השמאלי, ; זכות ביטוי, wשמאל פור, q; שני forepaws, e; מקטע אחר של הגוף, z, התעלם אזור, x) המתאים עם חלק גוף נכונות. הערה: מינימום של 1.5 דקות של זמן בקופסאת נדרש להכיר ספי ניתוח. מקטעי שנותחה הוסיף, בממוצע באופן אוטומטי עבור פלט לכל paw(s) על ידי התוכנה.</li>
	<li>התוכנה ADWB ואז מחשב באופן אוטומטי כאשר אחוזי הזמן שנותחה והאחוזים של משקל הגוף (g), מניחים על כל אחת מהאפשרויות ארבע הגפיים. ייצוא ערכים אלה לתוך גיליון אלקטרוני חדשה על ידי בחירת תוצאות, ייצוא, בחירת כן שאלה בקשה מבקש אם רק לייצא את שורות הערסל חמישה, ולאחר בחירת המיקום של הפלט.</li>
	<li>המתת חסד בבעלי חיים על ידי שאיפת CO2 ואחריו ניקור חזה בסוף תקופת המחקר.</li>
	<li>עבור כל חיה נוספים באותה קבוצה, בחר החדשה , הזן שם ייחודי בעל חיים אך אינם משנים את שם הפרוייקט. בחר הבא, להבטיח לאפשר לכידת וידאו מסומנת ובחר אישור. בצע את שלבים 5.5 עד 5.12 באשר החיה הראשונה.</li>
</ol>

<ol><li>Neggi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+and+impact+of+pain+in+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">The epidemiology and impact of pain in osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 21, 1145-1153 (2013).</li>
<li>Center for Disease Control and Prevention. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+doctor-diagnosed+arthritis+and+arthritis-attributable+activity+limitation+-+United+States%2C+2007-2009%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Prevalence of doctor-diagnosed arthritis and arthritis-attributable activity limitation - United States, 2007-2009.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 59, 1261-1265 (2010).</li>
<li>Kaye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prescription+Opioid+Abuse+in+Chronic+Pain%3A+An+Updated+Review+of+Opioid+Abuse+Predictors+and+Strategies+to+Curb+Opioid+Abuse%3A+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Physician%22%5BJournal%5D)">Prescription Opioid Abuse in Chronic Pain: An Updated Review of Opioid Abuse Predictors and Strategies to Curb Opioid Abuse: Part 1.</a> Pain Physician. 20, 93-109 (2017).</li>
<li>Maheu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+we+should+definitely+include+intra-articular+hyaluronic+acid+as+a+therapeutic+option+in+the+management+of+knee+osteoarthritis%3A+Results+of+an+extensive+critical+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Arthritis+and+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Why we should definitely include intra-articular hyaluronic acid as a therapeutic option in the management of knee osteoarthritis: Results of an extensive critical literature review.</a> Seminars in Arthritis and Rheumatism. , (2018).</li>
<li>Malfait, A. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+we+should+study+pain+in+animal+models+of+rheumatic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">Why we should study pain in animal models of rheumatic diseases.</a> Clinical and Experimental Rheumatology. 35, 37-39 (2017).</li>
<li>Piel, M. J., Kroin, J. S., van Wijnen, A. J., Kc, R., Im, H. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+Assessment+in+Animal+Models+of+Osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Pain Assessment in Animal Models of Osteoarthritis.</a> Gene. 537, 184-188 (2014).</li>
<li>Dorman, C. W., Krug, H. E., Frizelle, S. P., Funkenbusch, S., Mahowald, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+DigiGait%E2%84%A2+and+TreadScan%E2%84%A2+imaging+systems%3A+assessment+of+pain+using+gait+analysis+in+murine+monoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of DigiGait™ and TreadScan™ imaging systems: assessment of pain using gait analysis in murine monoarthritis.</a> Journal of Pain Research. 7, 25-35 (2013).</li>
<li>Barton, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+application+measurement+%28PAM%29%3A+A+novel+behavioural+technique+for+measuring+hypersensitivity+in+a+rat+model+of+joint+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Pressure application measurement (PAM): A novel behavioural technique for measuring hypersensitivity in a rat model of joint pain.</a> Journal of Neuroscience Methods. 163, 67-75 (2007).</li>
<li>Bert, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+Treatment+with+Resiniferatoxin+and+Capsaicin+on+Dynamic+Weight+Bearing+Measures+and+Evoked+Pain+Responses+in+a+Chronic+Inflammatory+Arthritis+Murine+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Internal+Medicine+Review%22%5BJournal%5D)">The Effect of Treatment with Resiniferatoxin and Capsaicin on Dynamic Weight Bearing Measures and Evoked Pain Responses in a Chronic Inflammatory Arthritis Murine Model.</a> Internal Medicine Review. 2016 (6), 89(2016).</li>
<li>Abdullah, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+intra-articular+vanilloid+receptor+agonists+on+pain+behavior+measures+in+a+murine+model+of+acute+monoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pain+Research%22%5BJournal%5D)">The effect of intra-articular vanilloid receptor agonists on pain behavior measures in a murine model of acute monoarthritis.</a> Journal of Pain Research. 9, 563-570 (2016).</li>
<li>Anke, T. T., Kuner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+ongoing+and+spontaneous+pain+in+rodents+-+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Studying ongoing and spontaneous pain in rodents - challenges and opportunities.</a> European Journal of Neuroscience. 39, 1881-1890 (2014).</li>
<li>National Research Council. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , National Academies Press. (2011).</li>
<li>Kuner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+mechanisms+of+pathological+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Central mechanisms of pathological pain.</a> Nature Medicine. 16, 1258-1266 (2010).</li>
<li>Banik, R., Woo, Y., Park, S., Brennan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+and+Sex+Influence+on+Pain+Sensitivity+after+Plantar+Incision+in+the+Mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Strain and Sex Influence on Pain Sensitivity after Plantar Incision in the Mouse.</a> Anesthesiology. 105, 1246-1252 (2006).</li>
<li>Mogil, J. S., Chesler, E., Wilson, S. G., Juraska, J. M., Sternberg, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+thermal+nociception+and+morphine+antinociception+in+rodents+depend+on+genotype%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+%26+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">Sex differences in thermal nociception and morphine antinociception in rodents depend on genotype.</a> Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 24, 375-389 (2000).</li>
<li>Mogil, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heritability+of+nociception+I%3A+Responses+of+11+inbred+mouse+strains+on+12+measures+of+nociception%5BTitle%5D)+AND+%22Pain+Physician%22%5BJournal%5D)">Heritability of nociception I: Responses of 11 inbred mouse strains on 12 measures of nociception.</a> Pain Physician. 80, 67-82 (1999).</li>
<li>Meziane, H., Ouagazzal, A. -M., Aubert, L., Wietrzych, M., Krezel, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrous+cycle+effects+on+behavior+of+C57BL%2F6J+and+BALB%2FcByJ+female+mice%3A+implications+for+phenotyping+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%2C+Brain%2C+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Estrous cycle effects on behavior of C57BL/6J and BALB/cByJ female mice: implications for phenotyping strategies.</a> Genes, Brain, and Behavior. 6, 192-200 (2007).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

מדידה של כאבי פרקים במודלים פרה של דלקת מפרקים דלקתיות, מחלת מפרקים ניוונית היא כלי יקר יותר ויותר כדי להעריך טיפולים חדשים עבור כאבי מפרקים, שיקום תפקוד המפרקים9,10. מדידת כאב התנהגויות אצל עכברים עם מחלת מפרקים ניוונית כרונית הוא מאתגר. כמו quadrupeds, הם יכול לבצע את איבר כואב על כל שילוב של שלושת האיברים אחרים או הזנב. הפונקציה ירד באיבר אחד עשוי לא להיות מוצג כמובן גם ככה בבני אדם צריחים. כמו חיות טרף, עכברים יש יתרון הישרדות כדי למזער את הכאב התנהגויות.
דו ח זה מדגים כי כאבי פרקים של מנגנונים שונים פיפטות ניתן למדוד אצל עכברים עם שיטות פשוטה וזולה יחסית. כאבי פרקים דלקתיות גורם לשינויים גדולים יותר משקל הנושאת זמן והפצה, לכן ייתכן מודל רגיש יותר עבור הגילוי של שיכוך כאבים. עם זאת, מודלים אחרים של כאבי פרקים יהיה חשוב בעת הערכת משככי כאבים פוטנציאליים חדשים שכן מנגנוני הכאב חניכה ותחזוקה צפויים שונה עם פתולוגיות שונות. מצאנו הבדלים בדפוסי ההעברה האמורה בין זכרים ונקבות ובין מודלים שונים של כאבי מפרקים.
חשוב לזהות שיש יכול להיות זן כמו גם מגדר ההבדלים בהתנהגות כאב עכברים14,15,16. זה ידוע גם כי ישנם הבדלים ברורים למתח סף הכאב. מצאנו כי בעכברים C57/Bl6, נשים המחישו באופן משמעותי יותר ספונטנית כאב התנהגויות (משקל מוגבר וזמן על forelimbs) מאשר עכברים זכרים עם כאבי פרקים ניוונית כרונית (איור 2 , איור 3). אנחנו לא לקבוע השלב ייחום של אלו עכברים נקבה, אז אנחנו לא יכולים. לומר אם זה השפיעה על התוצאות שלנו, אבל אחרים קבעו שלב ייחום זה לא הסביר המיניים שנצפה עכברים C57/Bl617.
התנהגות עורר הכאב הוא רגיש לכל סוגי כאבי פרקים נבדק ויש הפארמצבטית טוב. זה הכרחי כי הבודק שאומן לספק לחץ עקבי, מתוקננת מישוש ולהשתמש בשיטות איפוק עקביים המאפשרת טווח התנהגות הכאב כדי לזהות גם כאב וגם שיכוך כאבים. חשוב לבחון תמיד את הברך רגילה קודם כדי למזער את התגובה לכאב בברך רגילה בשל אפקט מוצלב ולמקסם את ההבדל בתגובה לכאב בין הברך נורמלי וכואב. באמצעות משקיף השנייה יחשב את תגובות הכאב המרכיבות את קובצי EPS הכרחי כך הבודק מתמקד עקבי מישוש ועל כך vocalizations וקרבות מחושבות באופן עקבי. יתכן צורך לתרגל את השיטה איפוק בפרט כדי להבטיח החיה יכול להגיב כאב שלמאחה אבל אינו מגיב בקלות רבה מדי על מנת לדלל את התגובה לכאב. יתרון של המדידה EPS היא שזה מקביל מדידה רוך משותפת בחולים אנושיים.
אנחנו מרגישים שיטות אלה נעלים על שיטות קיימות כי הם ישירות למדוד כאב שמקורו המפרקים בברך של עכברים, ניתן להשתמש במודלים שונים של כאב monoarthritis, הם כוללים שתי התגובות כאב ספונטנית, עורר, והם יחסית אבל אמינה וזולה לשחזור. כמו טיפולים מפותחים המופרש באופן יעיל יותר, שיטות אלו יהיו שימושיים המאשרת אם טיפולים יעילים למעשה התוצאה השבתת ביותר של דלקת פרקים, כאבים.
השיטות שלנו יש מספר מגבלות. בעיקר, המדד EPS מוגבל על ידי הדרישה שופט יחיד וגם הצופה והצורך טכניקה מאוד עקבי. האמצעים עורר הכאב הן אוטומטיות יותר וכפופות לא כמו ההבדלים בין הצופה. עידון נוספת של המדד EPS עשוי לכלול בשיטות אוטומטיות עבור ספירה vocalizations בתגובה מישוש, כגון שימוש של גלאי בת קולי לספור vocalizations. שיטה זו יהיה צורך להשוות את השיטה הנוכחית שלנו כדי לאשר רגישות לפני זה יכול להיות מיושם.
לסיכום, אנו מתארים שני אמצעי התנהגות הכאב שונה עבור לכימות כאבי פרקים בעכברים. יש לקחת בחשבון הבדלים זן ומגדר לפני בחירת מדגם ניסיוני. מדדים של כאב עורר דורשים הכשרה זהיר ויישום עקבית על ידי הבודק. שתי התנהגויות ספונטנית וכאב עורר, מומלץ להעריך את חומרת כאב והגבלה תפקודית, צריך להיות מנוצל כדי להעריך במלואו את ההשפעות של משככי כאבים פוטנציאלי חדש.

כאב הוא הגורם העיקרי של נכות דלקת מפרקים1,2. כיום זמינים משככי כאבים הם לעתים קרובות לא יעיל, רעילים ולאחר פוטנציאל לתרום הבעיה נרקוטיים ארצי3. ניתוח הוא לא תמיד אופציה עבור דלקת פרקים בשלב הסופי, במיוחד אצל הקשישים, ייתכן morbidities שיתוף מרובים. סטרואידים תוך-מפרקיות של viscosupplementation עשוי להיות יעיל המחלה מוקדם אבל בדרך כלל מאבדים את יעילותם שלב מאוחר המחלה4. יש צורך גדול-קליניות משככי כאבים יעיל עבור כאבי מפרקים יכולות להתבצע עם טיפולים זמין כרגע.
מודלים קליניים שימושי להבנת מנגנון הפעולה של כאבים טיפולים עבור חוזים מגבילים רעילות, אך הכאב מדידה בבעלי חיים הוא מאתגר5. אמצעים הכאב יכול להיות ישיר וספונטני (סטטי או דינמי משקל ברינג, רגל יציבה, והרצתי ניתוח, תנועה ספונטנית ורגישות מכני או תרמית) או עקיף/עורר (מבחן הנסיגה האיבר הינד, כוח דחיסה הברך או הדמיה מוחית) 6. עבור טפסים מתון של monoarthritis, והרצתי ניתוח חסר רגישות, חסר עקביות7. נשיאת משקל סטטי שימושי למדידת קוץ עכברוש hindlimbs אבל יכול להיות קשה בעכברים. אמצעי מכני רגישות כגון הבחינה פון פריי בעקיפין לזהות רגישות עולה של כרית כף הרגל בסביבה של דלקת מפרקים בברך, אבל לא למדוד ישירות כאבים בברך, מסורבל לבצע. כוח דחיסה הברך כפי שנמדד עם המכשיר P.A.M. (לחץ היישום מדידה) יכול לשמש אצל חולדות, אך המכשיר גדול קשה להשתמש בעכברים מבלי לייצר התנהגויות שליליות אינן משקפות בהכרח כאב8.
פיתחנו שיטות מדידה כאב ספונטנית, עורר שלושה דגמים שונים של דלקת מפרקים מאתר כי הם רגישים לשחזור למדידת חומרת הכאב ואת ההשפעות להרגעה של טיפולים תוך-מפרקיות9, 10. אנו גם יכולים לתאם לשיכוך כאבים עם סמנים אחרים היסטולוגית של סמים לניסויים קליניים כאב ומסך זה לא יהיה אפשרי אצל בני אדם. אנחנו יכולים להעריך הסינרגטיות של משככי כאבים יעיל בצניעות כדי לזהות טיפולים משולבים יעיל יותר. על ידי ניצול שיטות מוכחות לכאב עורר והן ספונטנית, נוכל להימנע מהמלכודת של כשל לזהות כאב זה משתקף סוג אחד של התנהגות הכאב. אבל לא השני ומדידה יותר מקרוב מראה כאב בני11. על ידי הגבלת כאב להערכה שתי מתודולוגיות, להקטין את הלחץ על בעלי החיים, אשר יכול להשפיע על התנהגות הכאב, ולהגביר את התפוקה של המעבדה.

<table><tbody><tr><td>מכשיר נשיאת משקל דינמי מתקדם</td><td>Bioseb In Vivo מכשירי מחקר, ויטרול, צרפת</td><td>דגם: BIO-DWB-M - לעכברים</td><td></td></tr><tr><td>עכברי C57/Bl6 (זכר ונקבה)</td><td>Jackson Labs, Bar Harbor ME</td><td>מס' מלאי:&nbsp; 000664&nbsp;|&nbsp; Black 6</td><td></td></tr><tr><td>Carrageenan</td><td>Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב</td><td>22049-5G-F</td><td></td></tr><tr><td>Complete Freund's Adjuvant</td><td>Sigma-Aldrich, סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב</td><td>F5881</td><td></td></tr><tr><td>Palpometer Palpometer</td><td>Systems, Inc. ויקטוריה, קולומביה הבריטית</td><td>לא זמין - כבר לא זמין - כבר לא בעסק</td><td></td></tr><tr><td>סוג IV Collagenase</td><td>Worthington Biomedical Corp, לייקוויל, ניו ג'רזי</td><td>LS004210</td><td></td></tr></tbody></table>

אמצעי ספונטנית עורר הכאב במודלים מאתר של כאבי ברכיים monoarticular

Spontaneous and Evoked Measures of Pain in Murine Models of Monoarticular Knee Pain

כאב הוא הגורם העיקרי של נכות של דלקת מפרקים. אין כרגע צורך טיפולי הולם עבור כאבי מפרקים. מודלים קליניים הם נחוץ ושימושי ללמוד על מנגנוני הכאב להערכת היעילות של טיפולים דלקת מפרקים. מדידת כאב במודלים חייתיים של דלקת מפרקים הוא מאתגר. פיתחנו שיטות למדידת קוץ שלושה דגמים של דלקת מפרקים מאתר עורר וספונטני. אנחנו quantitate את התגובות עורר הכאב של עכברים נתון מישוש המשרד ברך כואבת. אנחנו גם להעריך כאב ספונטנית על ידי היחס של משקל והניח כמות הזמן בכל אחד הגפיים 4 שלהם לאחר אינדוקציה של דלקת מפרקים כאב ברך אחת. כאבי פרקים אלה דגמים העכבר מייצרת לעליה משמעותית בכאב עורר תגובות שינוי נשיאת משקל. מאז עכברים הם quadrupeds, הם של העברת את האיבר כואב אל האיבר contralateral, את forelimbs, או שילוב. שיטות אלה הם פשוטים, דורשים ציוד מינימלי, רגיש לגילוי כאב הדירים. הם שימושיים עבור הלומדים הן מחלות שינוי טיפולי דלקת מפרקים, משככי כאבים בעכברים.

אקוטי וכרוני דלקתיים ניווניים מפרקים וכאבים כרוניים הופק על ידי הזרקת IA לתוך הברך השמאלית של עכברים זכרים ונקבות C57BL/6J לפני הערכת כאב באמצעות פרוטוקול שפורטו לעיל. כאבי פרקים נמדדה עורר הכאב ציונים (EPS), כאב ספונטנית התנהגויות נמדד עם מכשיר מתקדם משקל דינמי הנושאת (ADWB). למטרות של דו ח זה, נעשו השוואות בודדות באמצעות בדיקות t של סטודנט. לניסויים איפה מינונים כאבים שביניהם נערכת ההשוואה, ANOVA עשוי להיות מתאים יותר השוואה סטטיסטית.
EPS (הסכום של קרבות נספרים פלוס vocalizations) גדל עם שלושת סוגי כאבי פרקים (איור 1). ADWB למדידת אחוז משקל הנושאת על האיבר השמאלי הינד בהשוואה לעכברים תמים הצטמצם ב כאבי פרקים דלקתיות כרוניות וחמורות. נקבות אבל לא זכרים עם כרונית ניוונית משותף הפחתות דומה לכאב (COL) הראה ADWB אמצעים (איור 2א). זכרים עם כאבי פרקים דלקתית חריפה להעביר משקל יותר forelimbs מבהמות תמים. משקל הנושאת על forelimbs גדל בעכברים נקבה לעומת תמים אבל לא אצל גברים עם כאבי פרקים ניוונית כרונית (COL) (איור 2B). ADWB מודד זמן אחוז על שמאל הינד המשותק ירד לעומת תמים בעכברים עם כאבי פרקים דלקתיות כרוניות וחמורות, אבל זה לא היה משמעותי סטטיסטית. בעלי חיים אלה באופן משמעותי פחות זמן על האיבר השמאלי הינד יותר על האיבר הינד הנכון. זכרים והן נקבות עם כאבי פרקים ניוונית כרונית, לא היה הבדל בזמן המושקע הגפיים האחוריות שמאל לעומת תמים. נשים עם כאבי פרקים ניוונית כרונית מבלה יותר זמן על האיבר nonarthritic הינד נכון בהשוואה תמימה (איור 3א). עכברים עם חריפה דלקתית משותפת כאב ונקבות עם כרונית כאבי פרקים ניוונית בילה באופן משמעותי יותר זמן על forelimbs בעלי חיים תמימים (איור 3ב).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59024/59024fig1.jpg"> איור 1 . עורר הכאב הציונים של הגפיים האחוריות ימין (עמודה אדומה) ועל שמאל (עמודה כחולה). נכון הגפיים האחוריות שימש בקרה פנימית, לא עברה כל זריקות IA. מדידות נלקחו במצבים הבאים: uninjected תמים (זכרים ונקבות), חריפה קרגינאן-induced דלקת מפרקים דלקתיות (מכונית), השלמה דלקתית כרונית דלקת מפרקים הנגרמת אדג'וונט של פרוינד (CFA) כרונית noninflammatory Collagenase-induced מפרקים (COL - זכר ונקבה). בבעלי חיים תמים EPS האחוריות לברך שמאל לא היה שונה סטטיסטית מצד ימין אצל זכרים, רק מינימלית שונה אצל נקבות (* *P = 0.038) ככל הנראה בעקבות גדל תגובת כאב בברך בחן השני (משמאל) עקב כאב מוצלב תגובה. בכל קבוצות הניווניים בברך השמאלית הניווניים EPS היה גדול יותר באופן משמעותי מאשר לברך הימנית contralateral nonarthritic. בעת השוואה בין קובצי EPS של הברך השמאלית של דלקת מפרקים קבוצות בעלי חיים תמימים, כל הקבוצות דלקת מפרקים היו ציונים EPS גדול משמעותית בברך שמאל הניווניים בהשוואה הברכיים השמאלי תמים. זה היה נכון גם זכרים ונקבות. P &lt; 0.05 לעומת זכר תמים, #P &lt; 0.05 לעומת נקבה תמים. כל קווי השגיאה הם SEM כל הדמויות. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59024/59024fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59024/59024fig2.jpg"> איור 2 : כאב ספונטנית התנהגות נמדדת משקל הגוף אחוז הנישאים על הגפיים. (א) כאב ספונטנית התנהגות נמדדת לפי משקל הגוף אחוז הכולל בצד ימין (עמודה כחולה) וגם הגפיים האחוריות ימין (עמודה אדומה). שתי החיות תמים זכר ונקבה, היה הבדל משמעותי בין אחוז משקל נישא על הגפיים האחוריות ימינה ושמאלה. עכברים זכרים במכונית עם פרנק המושרה כאבי פרקים, נקבות עם כאבי פרקים COL המושרה נשא באופן משמעותי פחות משקל על האיבר הינד שמאל לעומת נאיבי. P &lt; 0.05 לעומת זכר תמים, #P &lt; 0.05 לעומת נקבה תמים. התנהגות כאב ספונטנית (B) נמדד לפי משקל הגוף אחוז הכולל מונחת על forelimbs. עם כאבי פרקים חריפה המכונית המושרה ולגברים עם כאבי פרקים כרונית COL המושרה, הייתה עלייה משמעותית בכמות המשקל הנישאת על forelimbs. זה שלא נראתה אצל זכרים עם פרנק או COL המושרה כאבי פרקים. נקבות תמים נטו לשאת משקל נוסף על forelimbs מן הזכרים naïve (P = 0.02). משקל נוסף עשוי יקבעו על-ידי חלקי גוף אחרים כגון הזנב או עכוז. אלה היו בדרך כלל מינימלי, לא תרמו באופן משמעותי להבנת התגובה לכאב, ולכן מוצגים לא. P &lt; 0.05 לעומת זכר תמים, #P &lt; 0.05 לעומת נקבה תמים, שבוע 4 זכר COL ב- forelimb weightbearing. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59024/59024fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59024/59024fig3.jpg"> איור 3: כאב ספונטנית התנהגות נמדדת אחוז הזמן בילה על הגפיים. (א) כאב ספונטנית התנהגות נמדדת אחוז הזמן הכולל שהושקע לימין (עמודה כחולה) ואת הגפיים האחוריות ימין (עמודה אדומה). היה הבדל משמעותי בין הגפיים האחוריות ימינה ושמאלה בעכברים תמים זכר ונקבה מבחינת הזמן המושקע האיבר. עכברים זכרים במכונית עם פרנק המושרה דלקת מפרקים הופיע לבלות פחות זמן weightbearing עם arthritic האיבר הינד שמאל לעומת תמימה, אבל זה היה לא משמעותי סטטיסטית והגדילה סביר עקב השתנות זו מידה בעכברים אלו. היה הבדל משמעותי בבעלי חיים אלה השוואת מימין לשמאל כמו האיבר הינד נכון בילה weightbearing הזמן הכולל יותר מהשמאלית. אצל נקבות עם דלקת מפרקים COL המושרה, האיבר הינד נכון היה weightbearing חלק גדול יותר של זמן מאשר בנקבות תמים. P &lt; 0.05 השוואת זכות 0.05 &lt; #P שמאלה, בהשוואה תמים נקבה, זכר 4 שבועות COL בזמן המושקע forelimbs. (B) כאב ספונטנית התנהגות נמדדת משך הזמן הכולל שהושקע forelimbs. עם דלקת מפרקים המכונית המושרה ולגברים עם דלקת מפרקים COL המושרה העכברים בילה יותר באופן משמעותי weightbearing זמן על הגפיים פור מאשר החיות תמים. נקבה תמים עכברים בילה יותר זמן על forelimbs חיות זכר תמים. P &lt; 0.05 לעומת זכר תמים, #P &lt; 0.05 לעומת נקבה תמים. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59024/59024fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

יש פיתח מדד עורר של כאבי מפרקים ואנו יחד זה עם שיטה סטנדרטית למדידת ספונטנית קוץ מאתר מודלים שונים של דלקת מפרקים כימית המושרה. אמצעים אלה הם רגישים לשחזור עבור סוגים שונים של כאבי פרקים.

אמצעי ספונטנית עורר הכאב במודלים מאתר של כאבי ברכיים Monoarticular

Pain is the main cause of disability from arthritis. There is currently an unmet need for adequate treatments for arthritis pain. Pre-clinical models are ...

מדידת הכאב במודלים פרה-קליניים של דלקת פרקים היא קשה, אך היא חיונית להערכת טיפולים רגנרטיביים ומדכאי כאבים. הפרוטוקול שלנו רגיש ובלתי ניתן לשחזור למדידת התנהגויות כאב מעוררות וספונטניות. וזה פשוט וזול יחסית.דלקת פרקים היא התורמת הגדולה ביותר לנכות, וכאב הוא הגורם העיקרי לנכות. הטיפול בדלקת פרקים אינו מספיק כרגע. מודלים פרה-קליניים הם חלק חשוב בפיתוח הטיפול.הדגימו את ההליך הזה יהיו כריסטופר דורמן, טכנאי, וסנדרה פריזל, מדענית צוות מהמעבדה שלי. כדי למנוע את המחט מלהיות מוכנס עמוק מדי ולצאת מהמפרק האחורי, לכסות מחט נקודה 5 אינץ ' עם נדן של צינורות פוליאתילן עד רק 2.5 מילימטרים של המחט לבוט מתוך נדן. לאחר מכן, לגלח את הפרווה מן הברך של העכבר הרדמה להיות מוזרק, ולעקר את העור החשוף עם קרצוף יוד povidone.ואז להכניס את המחט נדן לתוך המפרק בקו האמצע דרך גיד patellar רק נחות לקצה התחתון של פתלה, ולהזריק את החומר של עניין. לפני הערכת כאבי המפרקים המעוררים, השתמש ברמה 4 של אורך כדי לתרגל החלת שבעה מאות כוחות גרם בסנטימטר בריבוע של לחץ עקבי ומוצק. המכשיר יהיה לפלוח 4 צפצופים כאשר רמת הלחץ המתאימה מוחלת.כאשר הלחץ המתאים יכול להיות מיושם באופן אמין, לקשקש את העכבר בצוואר עם האצבע המורה והאגודל בחוזקה מספיק כדי למנוע תנועה מזדמנים. ולהשתמש באצבעות הרביעית והחמישית כדי לרסן את הזנב. העכבר צריך להיות מסוגל לעשות דיסקרטי, תנועות קצרות עם מאמץ וכאשר מגורה, אבל לא צריך להיות מסוגל לנוע בחופשיות או ברציפות.לנהל דפיקות לב מוצקות חוזרות ונשנות בו זמנית לצדדים הצדדיים והמתיאליים של כל ברך עם האגודל והאצבע המורה של היד החופשית בערך בקו המפרקים פעם בשנייה למשך דקה אחת. ויש לי משקיף לספור את מספר הפעמים החיה מזמרת ונלחם כדי להימלט האיפוק במהלך תקופת יישום לחץ זו 1 דקה. סכום הנשיכות והקולות נחשב לציון הכאב המעורר.פתח את תוכנת נשיאת המשקל הדינמית המתקדמת ובחר עכברים כסוג החיישן. לפני כל ניסוי, בחר כיול מלא"תחת תפריט הכיול. והזן אפס"עבור ערך הטרה.ואת המשקל של כרית קצף, לוח סיבים בצפיפות בינונית, פלסטיק, ומים כמשקל הכיול. בחר הבאו tareולכסות את כרית החיישן עם כרית קצף, לוח סיבים בצפיפות בינונית, פלסטיק של מים. כאשר כל החומרים הונחו על משטח החיישן, בחר תצוגה מקדימה של רווח"והתאם את משקל הכיול עד שיופץ באופן שווה על פני החיישנים הבודדים.כאשר הערך של מחוון הכיול הוא מעל תשעים וחמש, בחר הגדרת רווח"כדי לייצר ממוצע מנורמל עבור החיישנים הבודדים ולאשר את שלמות החיישנים. לאחר מכן, בחר הבא" ושמור את קובץ הכיול בתיקיית הכיול. בחר חדש" והזן את שמות הפרוייקט ובעלי החיים עבור העכבר הראשון שנבדק.בחר עיון"ופתח את קובץ הכיול שנוצר עבור הפרוייקט. לאחר מכן, בחר הבא"לאשר כי לאפשר לכידת וידאו"נבחר, ובחר אישור "הבא, לשקול את החיה. בחר לכידה" והתעד את המשקל בתוכנה.לאחר בחירת אישור"מקם את העכבר בתא במשך 5 דקות. ובחר להשיק "התוכנה תתעד את פעילות החיה, ללכוד וידאו, ולסנכרן עם נתוני החיישן, באופן אוטומטי לחלק את הווידאו לתוך מקטעים הניתנים לניתוח ולא ניתן לניתוח. בסוף תקופת ההקדמה, בחר ניקוד קל"והגדרת השהיה עצמאית"ובחר מהר קדימה" כדי לעבור למקטע הראשון הניתן לניתוח.אם לא מזוהה אזור יציב, החזק את הסמן מעל אזור זה והקש על מקש הקיצור המתאים המתאים לחלק הגוף הנכון. תוכנת נשיאת המשקל הדינמית המתקדמת תחשב באופן אוטומטי את אחוז הזמן המנותח שהושקע, ואת אחוז משקל הגוף המוצב על כל אחד מ-4 הגפיים. לאחר מכן בחר תוצאות "ייצוא" וכן"כדי לייצא את 5 שורות הסיכום הראשונות של נתונים לתוכנית הגיליון האלקטרוני המתאימה.עבור כל בעל חיים נוסף באותה קבוצה, בחר חדש והזן שם ייחודי של בעל חיים מבלי לשנות את שם הפרויקט. ואז ללכוד את הפעילות של כל חיה בתא כפי שהוכח רק. ציוני כאב מעוררים לטיפול דלקתי חריף-a-גן-דלקת פרקים המושרה, דלקת כרונית מלאה f-roy-nes להוסיף-jav-ent דלקת פרקים המושרה, כרונית לא דלקתית קול-ag-in-in-דלקתית המושרה עלייה מעל אלה שנצפו עבור בעלי חיים נאיביים לא מוזרקים עבור כל שלושת סוגי כאבי פרקים.נקבות, אך לא זכרים עם כאבי מפרקים ניווניים כרוניים, מדגימות הפחתות דומות בצעדי נשיאת משקל דינמיים מראש בהשוואה לעכברים נאיביים בכאבי מפרקים דלקתיים חריפים וכרוניים. זכרים עם כאבי פרקים דלקתיים חריפים מעבירים משקל רב יותר ל-4 הגפיים מאשר לבעלי חיים תמימים. משקל הנושא את 4 הגפיים עולה בעכברים נקביים בהשוואה לבעלי חיים נאיביים, אך לא אצל זכרים עם כאבי מפרקים ניווניים כרוניים.הן אצל זכרים והן אצל נקבות עם כאבי פרקים ניווניים כרוניים, אין הבדל בזמן על הגפיים האחוריות השמאליות בהשוואה לבעלי חיים תמימים. ונקבות עם כאבי פרקים ניווניים כרוניים מבלים יותר זמן על האיבר האחורי הימני הלא דלקתי בהשוואה לעכברים לא מוזרקים. לבסוף, עכברים זכרים עם כאבי פרקים דלקתיים חריפים, ונקבות עם כאבי פרקים ניווניים כרוניים, מבלים זמן רב יותר באופן משמעותי על 4 הגפיים שלהם מאשר בעלי חיים תמימים.זיהוי נכון של אחורי כפות הרגליים של החיה ביחס לגוף שלה חשוב מאוד. תתמקד ב אחורי החיה ולא בראשה. בשיטה זו, אנו מסוגלים לבחון את הרגשיות של משככי כאבים בין-פרקיים חדשים.

spontaneous-evoked-measures-pain-murine-models-monoarticular-knee

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

אוסטיאוארתריטיס (OA), או מחלת מפרקים ניוונית, הוא מצב מתישה הקשורים כאב נשאר רק מבוקרת חלקית משככי כאבים זמינים. במודלים של בעלי חיים מפותחים כדי לשפר את ההבנה שלנו של מנגנוני הכאב הקשורות OA. כאן אנו מתארים את המתודולוגיה מודל monoiodoacetate כאב OA בתוך העכבר.

מודל Monoiodoacetate של אוסטיאוארתריטיס כאב העכבר

במאמר זה אנו מספקים פרטים עבור שיטות ייצור, בקרת איכות של חלבון רקומביננטי פיוז'ן IL4-10. אנו גם מראים כיצד לבחון את היעילות של חלבון זה כדי לפתור כאבים במודל של עכברים של כאבים דלקתיים.

פיתוח חומרים לטיפול בכאב כרוני

מחקר זה מתאר את השיטה של הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות ודן בהתנהגויות הקשורות לכאב כתוצאה מכך ובשינויים היסטופתולוגיים, המספקים סימוכין ליישומים עתידיים.

מודל כאב אוסטאוארתריטיס המושרה על ידי הזרקה תוך-מפרקית של מונו-יודואצטט בחולדות

הניתוח המותאם הוא שיטה פשוטה למודל פגיעה עצבית חסכנית של עכבר או חולדה הדורשת רק קשירה אחת וחתך אחד כדי לפגוע הן בעצבים הפרוניאליים והן בעצבים הסוראליים.

מודל שונה של פגיעה עצבית ניצלת של כאב נוירופתי בעכברים

הבדיקה המכנית למניעת קונפליקטים משמשת כקריאה לא רפלקסיבית של רגישות לכאב בעכברים, שבה ניתן להשתמש כדי להבין טוב יותר תגובות רגשיות-מוטיבציוניות במגוון מודלים של כאב עכברים.

בדיקת הימנעות מקונפליקט מכני למדידת התנהגות כאב בעכברים

כדי לפתח התערבויות טיפוליות חדשניות למניעה וניהול של כאבי גב, נדרשים מודלים של בעלי חיים לבחון את המנגנונים והיעילות של טיפולים אלה מנקודת מבט תרגומית. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את בדיקת BMS, שיטה סטנדרטית להערכת רגישות מכנית אחורית בחולדה.

הערכת רגישות מכנית של הגב בחולדה לחקירה מכניסטית של כאבי גב כרוניים

שיטות להשראת מודל כאב גב פשוטה ומהירה בעכברים ניתנות כאן באמצעות הזרקה תוך רצועה של מפעיל פלסמינוגן בשתן.

מודל כאב גב עכבר הנגרם על ידי מפעיל אורוקינאז

קשירת עצבים סיאטית חלקית גורמת לכאב נוירופתי כרוני מתמשך, המאופיין בתגובות מוגזמות לגירויים תרמיים ומכניים. מודל עכברי זה של כאב נוירופתי משמש בדרך כלל לחקר טיפולים חדשניים לניהול כאב. מאמר זה מתאר בפירוט את ההליך הכירורגי לשיפור התקינה והשחזור.

קשירת עצבים סיאטית חלקית: מודל עכברי של כאב נוירופתי כרוני לחקר ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של טיפולים חדשניים

כאן, אנו מציגים מודל כאב דלקתי שונה עם הזרקת קרגינן שתי כפות אחוריות כדי להעריך את אפקט משכך הכאבים.

מודל כאב דלקתי שונה כדי ללמוד את אפקט משכך כאבים בעכברים

פרוטוקול זה מתאר כיצד מדידת כוח הנשיכה וסף נסיגת הראש יכולה ללכוד התנהגות כאב בכאב דלקתי של מפרק טמפורומנדיבולרי (TMJ) המושרה על ידי אדג'ובנט (CFA).

מדידת כאבי מפרק טמפורומנדיבולרי על ידי כוח נשיכה ומבחני נימה פון פריי בעכברים

הפרוטוקול מתאר כיצד למדוד היפרלגזיה בברך בעכברים. אנו מראים דוגמאות במודלים של עכברים לכאבי ברכיים חריפים כמו גם במודלים של דלקת מפרקים ניוונית (OA).

הערכת היפרלגזיה בברך בעכברים באמצעות מדידת יישום לחץ

למדו פרוטוקול רגיש וניתן לשחזור למדידת כאב מעורר וספונטני במודלים של דלקת פרקים בעכברים. השיטה מאפשרת הערכת טיפולים אנלגזיים ורגנרטיביים בחקר הכאב.

אמצעי ספונטנית עורר הכאב במודלים מאתר של כאבי ברכיים Monoarticular

גלה סרטונים נוספים