הדמיה קונאפוקלית של זוגיות גדילי RNA ודפוס זיהוי רצפטורים להדבקת וירוס RNA שלילי-סנס

כפול גדילי RNA שהופק במהלך שכפול וירוס רנ א ניתן לזהות על ידי קולטנים זיהוי תבנית כדי ליצור תגובה חיסונית מולדת. וירוסים RNA שלילי-סנס, האינטראקציה בין dsRNA ברמה נמוכה PRRs עדיין לא ברור. פיתחנו שיטה מיקרוסקופיה קונפוקלית להמחיש arenavirus dsRNA ו- PRR בתאים בודדים.

מסורתי כפול גדיל RNA זיהוי הראיה בדרך כלל אינו רגיש מספיק כדי לזהות RNA כפול גדיל נוצר זיהום וירוס RNA במובן שלילי. לכן האינטראקציה בין RNA כפול תקוע קולטני זיהוי דפוס המארח נשאר חמקמק במידה רבה עבור וירוסים אלה. באמצעות פרוטוקול זה אנו מסוגלים לדמיין ולאפיין את האינטראקציה בין חלבון גרעיני ויראלי, RNA כפול גדיל ולארח PRRs ברמה של תא יחיד עבור וירוס RNA תחושה שלילית. זוהי תכשיר מולטיפלקס המאפשר הכתמות בו זמנית של רנ"א דו-תקע ושני מטרות חלבון ויראליות או מארחות בתאים בודדים. שלא כמו בדיקת RNA-FISH טכניקה זו היא עצמאית רצף RNA ובדרך כלל תואם עם זיהוי נוגדנים של מטרות חלבון. התחל 24 שעות לפני ההדבקה על ידי זריעת 200, 000 תאי אפיתל ריאות אנושיים A549 על גבי כיסוי זכוכית מצופה פולי-D-לי לסין בצלחות 12 בארות והגידול שלהם ב 37