Name: דימות תהודה מגנטית הערכה של גידולים המושרה מסרטן שלפוחית השתן מאתר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 19 s
Description: למד פרוטוקול MRI מהיר להערכת גידולי שלפוחית השתן בעכברים מושרים ב-BBN. שיטה זו מאפשרת דימות אמין של נטל הגידול באיכות אבחנתית גבוהה עם מצוקה מינימלית לבעלי החיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ג'יי ג'יי מ ממומן על ידי ותיקי בריאות המינהל בזכות להעניק BX0033692-01. ג'יי ג'יי מ נתמך גם על ידי קרן הנסון ג'ון פ לחקר הסרטן באוניברסיטת רוברט ה' לוריא מקיף סרטן מרכז באוניברסיטת נורת'ווסטרן. אנו מודים למרכז הדמיה Translational מתן רכישת MRI ועיבוד. מקורות מימון היה אין תפקיד בכתב של כתב היד או ההחלטה להגיש לפרסום.

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של אוניברסיטת נורת'ווסטרן.
1. אינדוקציה של גידולים עם BBN
<ol><li>להשיג את זכר C57/BL6 עכברים, כל אחד לפחות בן 6 שבועות. הערה: עכברים זכרים לפתח סרטן שלפוחית השתן יותר במהירות ובאופן עקבי מאשר עכברים הנשי14,15.</li>
	<li>הוסף N-nitrosobutyl(4-hydroxybutyl) אמין (BBN) במינון של 0.05% למים. לשמור אותם בכלי אטום לאוויר, מספקים זה ad libitum כמו שתיית מים עכברים16. הערה: אחסון הפתרון BBN במיכל נקי תגרע מסרטן ה-17.</li>
	<li>להחליף את המים BBN 0.05% פעמיים בשבוע.</li>
	<li>נטר את החיות באמצעות בדיקת סימנים של מצוקה הקשורים גידולים בשלפוחית השתן כולל המטוריה, המשרד שלפוחית השתן וגושים. לבדוק את העכברים פעמיים בשבוע או לפי הנחיות IACUC מקומיים.</li>
	<li>מצפה גידולים לפתח בין 16 ל 24 שבועות של חשיפה18.</li>
</ol>2. MRI ההתקנה
<ol><li>לבצע זריקה תת עורית של מלח סטרילית (0.1-0.2 מ"ל באמצעות מזרק ומחט 1 מ"ל 25 – 27 גרם) 10 דקות לפני MRI כדי להקל על מילוי השלפוחית.</li>
	<li>עזים ומתנגד לכל עכבר עם תערובת גז של 100% או2 ואיזופלוריין (2%-4% לפי הצורך). ודא מטוס נאותה של הרדמה על-ידי בדיקת רפלקס הנסיגה (הבוהן צביטה) לפני שתמשיך. משחת עיניים סטרילי חלות על החיה.</li>
	<li>להעביר את העכבר בעל הדמיה לבוש עם nosecone עבור מסירת בשאיפה איזופלוריין (0.5%-3%).</li>
	<li>לפקח על טמפרטורת הגוף, הנשימה באמצעות בדיקה טמפרטורה רקטלית מחובר למחשב הקלטה פיזיולוגיים. הערה: טמפרטורת גוף נורמלית (36-37 מעלות צלזיוס) נשמר באמצעות המעגל מים חמים recirculating בנוי לתוך המחזיק מר חיים. הטמפרטורה נמדדת באמצעות חיישן רקטלי, נרשם במחשב פיקוח פיזיולוגיים באמצעות תוכנת מעקב פיזיולוגי ייעודי. באותה המערכת משמש כדי להקליט את האותות נשימה ומערכת רל נמדד באמצעות כרית פנאומטית תחת כלוב הצלעות, באמצעות אלקטרודות רל 3-עופרת. האות הנשימה משמש גם מפעילה רכישת MRI והפחתת חפצים הקשורים להנשמה תנועה.</li>
</ol>3. ייבוא תמונות אר. איי
<ol><li>לנצל את סליל הגוף quadrature עבור עירור.</li>
	<li>במקום סליל מקלט 4 ערוצים על הבטן התחתונה של העכבר מתבצעת סריקה כדי לאפשר זיהוי אופטימיזציה של אותות מן האזור עניין.</li>
	<li>ליזום שינויים אוטומטיים באמצעות התוכנה הדמיה משולבת לרכוש מערכת tri-צירית תמונות של העכבר כל הגוף. הפניה זו סט של תמונות, לזהות את האזור של הריבית (במקרה זה, אזור שלפוחית השתן).</li>
	<li>לרכוש שלושה סטים של תמונות אורתוגונלית פרוסים לאורך המטוסים צירית, הילתית ואת הווריד באמצעות מסגרות התייחסות רדיולוגית.</li>
	<li>לנצל את FISP האמיתית הדמיה ברצף (כלול כאחת התכונות בתוכנת הדמיה משולב) עם מר בפרמטרים הבאים: TR = 900 מילי-שניות, טה = 2 מילי-שניות, הפא = 70, ממוצעים 14. הערה: קבוצה זו של פרמטרים מאפשר הדמיה מהירה עם איכות אבחון גבוהה, לרבות שקלול T1/T2 ב- < 10 דקות לכל העכבר.</li>
	<li>עובי הפרוסה של רזולוציה מרחבית נקבעים לפי פרמטרים גיאומטריים שנבחרו על-ידי המשתמש באמצעות ממשק גרפי של פלטפורמת הדמיה משולב. התוצאה היא סדרה של פרוסות על פני כל שלפוחית השתן של 0.5 מ מ עובי עם פתרון בתוך המטוס של 0.148 מ מ.</li>
</ol>4. מר וניתוח תמונות
<ol><li>לזהות את קבוצת פרוסות בעובי 0.5 מ מ והרזולוציה בתוך המטוס של 0.148 מ מ המכסה כל שלפוחית השתן.</li>
	<li>לייצא תוכנת ניתוח תמונה רפואית על-ידי בחירת התיקיה עם תמונות המתאים בתבנית נתח.</li>
	<li>בחר "מבט צירי נציג" במרכזו של שלפוחית השתן עבור ניתוח כמותי על-ידי גלילה באמצעות הדימויים שנוצר וזיהוי פרוסה אל נקודת האמצע של שלפוחית השתן, המאפשר ויזואליזציה של שלפוחית השתן לקיר, לומן. הערה: הפרוסה מרכז צריך להיות הנבחרת בקוטר הגדול.</li>
	<li>בזהירות ניסחו את האזור של הריבית (ROI) ע י איתור באופן ידני את גבולות סביב הקצה החיצוני של שלפוחית השתן (BLAהחוצה) וליד לומן הפנימי (BLAב) של שלפוחית השתן (ראה דמויות סכמטית והייצוגיות באיור2) בתצוגה ' ' נבחר הנציגה צירית.</li>
	<li>להחסיר לומן הפנימי מהקצה החיצוני כדי לחשב את פני השטח של הקיר שלפוחית השתן. בלהקיר = בלההחוצה - בלהב הערה: פני השטח של שלפוחית השתן שליטה עם שום גידול צפוי להיות פחות מזה עם גידול בשלפוחית השתן.</li>
</ol>5. המתת חסד, דיסקציה של שלפוחית השתן
<ol><li>לאחר 20 שבועות של חשיפה BBN, המתת חסד העכברים באמצעות נהלי לפי הנחיות IACUC מקומיים.</li>
	<li>לנקות את האזור. של החתך עם 70% אתנול, ואז אחוז והרם את העור דופן הבטן עם מלקחיים.</li>
	<li>עושים חתך קו האמצע של symphysis הערווה אל הסרעפת.</li>
	<li>בחדות פצעים וחתכים חלל הצפק על ידי האוחז עם מלקחיים אם עם מספריים.</li>
	<li>לזהות שלפוחית השתן, אשר ממוקם בבטן התחתונה קו האמצע.</li>
	<li>לזהות, לחתוך רצועה הטבור החציוני חיבור הכיפה של שלפוחית השתן הטבור דופן הבטן.</li>
	<li>לתפוס את הכיפה של שלפוחית השתן עם מלקחיים כדי לספק countertraction ומנתחים שלפוחית השתן מן המקיפים מבנים, לרבות vesicles הזרע, פי הטבעת, שומן.</li>
	<li>לזהות את ureters הזנת שלפוחית השתן, לגזור עם מספריים קרוב שלפוחית השתן.</li>
	<li>הרמת שלפוחית השתן cephalad, לחתוך את השופכה עם מספריים ולהסיר את שלפוחית השתן.</li>
	<li>מיד שוקלים שלפוחית השתן לאחר שטיפה זה עם PBS.</li>
</ol>6. בבדיקה היסטולוגית של רקמה בשלפוחית השתן
<ol><li>לתקן את הרקמות שלפוחית השתן בפורמלין במאגר נייטרלי 10% עבור 36-48 שעות בטמפרטורת החדר (RT).</li>
	<li>להטביע את הרקמה בבלוקים פרפין, לחתוך את השקופיות לבדיקה עוקבות, מכתים את השקופיות ועם hematoxylin אאוזין לבדיקה מיקרוסקופית כפי שתואר לעיל19,20.</li>
	<li>לבצע בדיקה מיקרוסקופית של שלפוחית השתן העכבר-נמוך (2.5 x ו- 10 x), הגדלה גבוהה (20 x ו- 40 x), בחינה מאקרוסקופית נגעים, היפרפלזיה, קרצינומה בחיי עיר, papillomas, גידולים papillary של neoplasms פולשנית19 , 21.</li>
</ol>

<ol><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+Statistics%2C+2017%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Cancer Statistics, 2017.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (1), 7-30 (2017).</li>
<li>Abdollah, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence%2C+survival+and+mortality+rates+of+stage-specific+bladder+cancer+in+United+States%3A+a+trend+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">Incidence, survival and mortality rates of stage-specific bladder cancer in United States: a trend analysis.</a> Cancer Epidemiology. 37 (3), 219-225 (2013).</li>
<li>Rosenberg, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atezolizumab+in+patients+with+locally+advanced+and+metastatic+urothelial+carcinoma+who+have+progressed+following+treatment+with+platinum-based+chemotherapy%3A+a+single-arm%2C+multicentre%2C+phase+2+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Atezolizumab in patients with locally advanced and metastatic urothelial carcinoma who have progressed following treatment with platinum-based chemotherapy: a single-arm, multicentre, phase 2 trial.</a> The Lancet. 387 (10031), 1909-1920 (2016).</li>
<li>Sharma, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nivolumab+monotherapy+in+recurrent+metastatic+urothelial+carcinoma+%28CheckMate+032%29%3A+a+multicentre%2C+open-label%2C+two-stage%2C+multi-arm%2C+phase+1%2F2+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Nivolumab monotherapy in recurrent metastatic urothelial carcinoma (CheckMate 032): a multicentre, open-label, two-stage, multi-arm, phase 1/2 trial.</a> The Lancet Oncology. 17 (11), 1590-1598 (2016).</li>
<li>Bellmunt, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pembrolizumab+as+Second-Line+Therapy+for+Advanced+Urothelial+Carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pembrolizumab as Second-Line Therapy for Advanced Urothelial Carcinoma.</a> New England Journal of Medicine. 376 (11), 1015-1026 (2017).</li>
<li>Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+orthotopic+models+for+bladder+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Mouse orthotopic models for bladder cancer research.</a> BJU International. 104 (9), 1286-1291 (2009).</li>
<li>Zhang, N., Li, D., Shao, J., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+bladder+cancer%3A+The+model+establishment+and+evaluation+%28Review%29%5BTitle%5D)+AND+%22Oncology+Letters%22%5BJournal%5D)">Animal models for bladder cancer: The model establishment and evaluation (Review).</a> Oncology Letters. 9 (4), 1515-1519 (2015).</li>
<li>Patel, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transabdominal+micro-ultrasound+imaging+of+bladder+cancer+in+a+mouse+model%3A+a+validation+study%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Transabdominal micro-ultrasound imaging of bladder cancer in a mouse model: a validation study.</a> Urology. 75 (4), 799-804 (2010).</li>
<li>Chin, J., Kadhim, S., Garcia, B., Kim, Y. S., Karlik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+for+detecting+and+treatment+monitoring+of+orthotopic+murine+bladder+tumor+implants%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging for detecting and treatment monitoring of orthotopic murine bladder tumor implants.</a> The Journal of Urology. 145 (6), 1297-1301 (1991).</li>
<li>Jurczok, A., Fornara, P., Soling, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging+to+monitor+bladder+cancer+cell+adhesion+in+vivo%3A+a+new+approach+to+optimize+a+syngeneic%2C+orthotopic%2C+murine+bladder+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging to monitor bladder cancer cell adhesion in vivo: a new approach to optimize a syngeneic, orthotopic, murine bladder cancer model.</a> BJU International. 101 (1), 120-124 (2008).</li>
<li>Vandeveer, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+Immunotherapy+of+Non-Muscle+Invasive+Mouse+Bladder+Cancer+with+Avelumab%2C+an+Anti-PD-L1+Immune+Checkpoint+Inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Systemic Immunotherapy of Non-Muscle Invasive Mouse Bladder Cancer with Avelumab, an Anti-PD-L1 Immune Checkpoint Inhibitor.</a> Cancer Immunology Research. 4 (5), 452-462 (2016).</li>
<li>Kikuchi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+and+quantitative+analysis+of+early+stage+orthotopic+murine+bladder+tumor+using+in+vivo+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Detection and quantitative analysis of early stage orthotopic murine bladder tumor using in vivo magnetic resonance imaging.</a> Journal of Urology. 170, 1375-1378 (2003).</li>
<li>Chung, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T2-weighted+fast+MR+imaging+with+true+FISP+versus+HASTE%3A+comparative+efficacy+in+the+evaluation+of+normal+fetal+brain+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">T2-weighted fast MR imaging with true FISP versus HASTE: comparative efficacy in the evaluation of normal fetal brain maturation.</a> American Journal of Roentgenology. 175 (5), 1375-1380 (2000).</li>
<li>Miyamoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+bladder+cancer+development+and+progression+by+androgen+receptor+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Promotion of bladder cancer development and progression by androgen receptor signals.</a> Journal of the National Cancer Institute. 99 (7), 558-568 (2007).</li>
<li>Bertram, J. S., Craig, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+induction+of+bladder+cancer+in+mice+by+butyl-%284-hydroxybutyl%29-nitrosamine+and+the+effects+of+hormonal+modifications+on+the+sex+difference+in+response%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Specific induction of bladder cancer in mice by butyl-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine and the effects of hormonal modifications on the sex difference in response.</a> European Journal of Cancer. 8 (6), 587-594 (1972).</li>
<li>Nagao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutagenicity+of+N-butyl-N-%284-hydroxybutyl%29nitrosamine%2C+a+bladder+carcinogen%2C+and+related+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Mutagenicity of N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine, a bladder carcinogen, and related compounds.</a> Cancer Research. 37, 399-407 (1977).</li>
<li>Hirose, M., Fukushima, S., Hananouchi, M., Shirai, T., Ogiso, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+susceptibilities+of+the+urinary+bladder+epithelium+of+animal+species+to+three+nitroso+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Gan.+Gann%3B+The+Japanese+Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Different susceptibilities of the urinary bladder epithelium of animal species to three nitroso compounds.</a> Gan. Gann; The Japanese Journal of Cancer Research. 67 (2), 175-189 (1976).</li>
<li>Shin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+origin+of+bladder+neoplasia+and+tissue+dynamics+of+its+progression+to+invasive+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Cellular origin of bladder neoplasia and tissue dynamics of its progression to invasive carcinoma.</a> Nature Cell Biology. 16 (5), 469-478 (2014).</li>
<li>Epstein, J. I. Chapter 17: Immunohistology of the Bladder, Kidney, and Testis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aEpstein%2C+JI+%22Diagnostic+Immunohistochemistry%22">Diagnostic Immunohistochemistry</a>. , Fifth Edition, 624-661 (2019).</li>
<li>Cohen, S. M., Ohnishi, T., Clark, N. M., He, J., Arnold, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigations+of+rodent+urinary+bladder+carcinogens%3A+collection%2C+processing%2C+and+evaluation+of+urine+and+bladders%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Investigations of rodent urinary bladder carcinogens: collection, processing, and evaluation of urine and bladders.</a> Toxicologic Pathology. 35 (3), 337-347 (2007).</li>
<li>Wood, D. P. Jr Tumors of the bladder. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWood%2C+DP+%22Campbell-Walsh+Urology%22">Campbell-Walsh Urology</a>. 11 (92), 2184-2204 (2016).</li>
<li>Zitvogel, L., Pitt, J. M., Daillere, R., Smyth, M. J., Kroemer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+in+oncoimmunology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Mouse models in oncoimmunology.</a> Nature Reviews Cancer. , (2016).</li>
<li>Kaneko, S., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+chromosome+protects+against+bladder+cancer+in+females+via+a+KDM6A-dependent+epigenetic+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">X chromosome protects against bladder cancer in females via a KDM6A-dependent epigenetic mechanism.</a> Science Advances. 4 (6), eaar5598(2018).</li>
<li>Smilowitz, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodistribution+of+gold+nanoparticles+in+BBN-induced+muscle-invasive+bladder+cancer+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Biodistribution of gold nanoparticles in BBN-induced muscle-invasive bladder cancer in mice.</a> International Journal of Nanomedicine. 12, 7937-7946 (2017).</li>
<li>Dai, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+of+arsenic+and+N-butyl-N-%284-hydroxybutyl%29nitrosamine+on+urothelial+carcinogenesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The interaction of arsenic and N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine on urothelial carcinogenesis in mice.</a> PLoS One. 12 (10), e0186214(2017).</li>
<li>Williams, P. D., Lee, J. K., Theodorescu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+Credentialing+of+Rodent+Bladder+Carcinogenesis+Models%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Molecular Credentialing of Rodent Bladder Carcinogenesis Models.</a> Neoplasia. 10 (8), (2008).</li>
<li>Fantini, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Carcinogen-induced+mouse+model+recapitulates+the+molecular+alterations+of+human+muscle+invasive+bladder+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">A Carcinogen-induced mouse model recapitulates the molecular alterations of human muscle invasive bladder cancer.</a> Oncogene. 37 (14), 1911-1925 (2018).</li>
<li>Network, N. C. C. NCCN Guidelines in Clinical Oncology - Bladder Cancer 5.2018. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/bladder.pdf">https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/bladder.pdf</a> (2018).</li>
<li>Costa, M. J., Delingette, H., Novellas, S., Ayache, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automatic+segmentation+of+bladder+and+prostate+using+coupled+3-D+deformable+models%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Image+Computing+and+Computer-Assisted+Intervention%22%5BJournal%5D)">Automatic segmentation of bladder and prostate using coupled 3-D deformable models.</a> Medical Image Computing and Computer-Assisted Intervention. 10 (Pt 1), 252-260 (2007).</li>
<li>Rosenkrantz, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utility+of+quantitative+MRI+metrics+for+assessment+of+stage+and+grade+of+urothelial+carcinoma+of+the+bladder%3A+preliminary+results%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Utility of quantitative MRI metrics for assessment of stage and grade of urothelial carcinoma of the bladder: preliminary results.</a> American Journal of Roentgenology. 201 (6), 1254-1259 (2013).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

הדמיה מדויקת של מודלים הגידול הוא הכרחי עבור המתאים היערכות מראש המתת חסד, אקראיות בעלי חיים לפני אתחול של טיפול ניסיוני. באמצעות ההליך המובאת כאן, נדגים מתודולוגיה ליצירה (1) גידולים בשלפוחית השתן באמצעות גורם מסרטן את BBN (2) stratify נטל גידול בשלפוחית השתן באמצעות מר מר-derived אזור בקורלציה מדידה (BLAקיר) באופן משמעותי עם ex-vivo שלפוחית השתן משקל והיא קשורה עם שלב הגידול פיפטות.
על ידי אימוץ בגישה הדמיה מהירה עם רכישת קצר פעמים ב רזולוציה מרחבית גבוהה (נכון FISP) ואיכ...

סרטן שלפוחית השתן הוא הסרטן השכיח ביותר החמישי. באופן כללי, אחראי כ 80,000 מקרים חדשים 16,000 מקרי מוות בארה ב 20171. לאחר 30 שנה ללא התקדמות משמעותית בטיפול מערכתי של סרטן שלפוחית השתן2, האחרונות מחסום אנטי-PD-1 ו- anti-PD-L1 מעכב ניסויים הראו תגובות מרגשות ועמיד מדי פעם בחולים עם מתקדם urothelial קרצינומה של3,4,5. עם זאת, רק כ-20% מהחולים להציג מענה אובייקטיבי טיפולים אלה, עוד יותר נדרשים מחקרים כדי להרחיב את השימוש היעיל חיסוני בחולים עם סרטן שלפוחית השתן.
מודלים סרטן שלפוחית השתן מאתר הם כלים קריטיים בהערכה פרה של טיפולים חדשניים6,7. על מנת לשלוט על גודל הגידול בעת סידור אקראי של עכברים לטיפולים שונים, נטל הגידול חייב להיות מוערך ומבוקר בין קבוצות הטיפול. מחקרים קודמים השתמשו אולטראסאונד או ביולומינסנציה להעריך orthotopic תא מבוססי-קו שלפוחית השתן סרטן מודלים8,9,10,11. עם זאת, בשתי הטכניקות להציג מספר חסרונות. מדידות אולטרסאונד שיכול להיות מושפע מיומנויות של המפעיל, חוסר רזולוציה מרחבית גבוהה ותכונות תלת מימדי. ביולומינסנציה שיטות רק יכול לספק הערכה כמותית למחצה של תאי הגידול, אינם מאפשרים ויזואליזציה של שלפוחית השתן אנטומיה, מורפולוגיה. יתר על כן, ניתן להשתמש ביולומינסנציה רק עם תא מבוססי-קו דגמים, המבטאים גנים מייצרים אור עכברים שיער או עכברים עם חלוק לבן.
דימות תהודה מגנטית (MRI), מצד שני, מציע גמישות ייחודית על רכישת תמונות אנטומיות ברזולוציה גבוהה, המציגות מגוון רחב של ניגודיות רקמות המאפשרת הדמיה מדויקת והערכה כמותית של נטל הגידול ללא צורך להביע את מאפייני ביולומנאסן. מר תמונות בקלות רבה יותר לשחזור עם הצינורות ניתוח המתאים, מובטח ויזואליזציה תלת-ממדי של שלפוחית השתן. המגבלות הגדולות של MRI הן משך הזמן הדרוש בדיקה, עלויות גבוהות המגבילות מבחני תפוקה גבוהה. עם זאת, מספר מחקרים הראו כי מר רצפים יכול לספק תמונות אבחון באיכות גבוהה יכול לשמש ביעילות לאתר ולפקח על גידולים בשלפוחית השתן מבוססי-קו תא; לפיכך, הם עשויים לשמש תפוקה גבוהה-ניתוח-9,-12.
כאן, אנו מתארים שיטה לא פולשנית המבוססת על מר לאפיין בצורה אמינה ויעילה גידולים המושרה מסרטן שלפוחית השתן בעכברים. כדי לעשות זאת, אנו משתמשים הדמיה מהיר עם מצב יציב נקיפה מר טכניקה (נכון FISP), אשר מבטיח הפעלות סריקה קצרה תוך מתן באיכות גבוהה, רזולוציה מרחבית גבוהה (~ 100 מיקרון) זיהוי, מדידה של שלפוחית השתן גידולים13. יתר על כן, כדי לאשר את הדיוק של זה וזמינותו MRI לא פולשנית, נתאר את המתאם בין פרמטרים נגזר MRI ו- ex-vivo שלפוחית השתן משקל, כמו גם שלב הגידול אישר באופן פתולוגי.

<table><tbody><tr><td>עכברי C57BL/6</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>664</td><td>עכברים</td></tr><tr><td>N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine מסרטן (BBN)</td> <td>TCI אמריקאי</td><td>B0938</td><td>מסרטן</td></tr><tr><td>0.9% תמיסת מלח רגילה</td><td>Hospira, Inc</td><td>NDC 0409-488-02</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal HealthCare</td><td>60307-120-25</td><td>חומר הרדמה</td></tr><tr><td>7Tesla ClinScan MRI</td><td>Bruker</td><td>NA</td><td>ייעודי להדמיית בעלי חיים קטנים MRI</td></tr><tr><td>Syngo</td><td>Siemens</td><td>NA</td><td>MR תוכנת הדמיה משולבת</td></tr><tr><td>דגם 1030 ניטור & מערכת שער</td><td>מכשירים לבעלי חיים קטנים, בע"מ (SAII)</td><td>NA</td><td>ניטור פיזיולוגי של בעלי חיים קטנים</td></tr><tr><td>פורמלין, חוצץ ניטרלי, 10%</td> <td>סיגמא</td><td>HT501128</td><td>מקבע</td></tr><tr><td>Eosin Y</td><td>Fisher NC1093844 חומר</td><td></td><td>צביעה היסטולוגי</td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Fisher Scientific</td><td>23-245651</td><td>חומר צביעה היסטולוגי</td></tr><tr><td>Jim7</td><td>Xinapse Systems</td><td>תוכנת ניתוח תמונות</td> <td>רפואית</td></tr><tr><td>NA GraphPad Prism v7.04</td><td>Graphpad</td><td>NA</td><td>Graphing software</td></tr><tr><td>R v3.4.2</td><td>The R Project for Statistical Computing</td><td>NA</td><td>תוכנה סטטיסטית</td></tr><tr><td>חבילת R pROC v1.10.0.</td><td>פרויקט R לחישוב סטטיסטי</td><td>ניתוח NA</td><td>ROC</td></tr></tbody></table>

דימות תהודה מגנטית הערכה של גידולים המושרה מסרטן שלפוחית השתן מאתר

Magnetic Resonance Imaging Assessment of Carcinogen-induced Murine Bladder Tumors

מודלים גידול שלפוחית השתן מאתר הם קריטיים עבור הערכת אפשרויות טיפוליות חדשות. גידולים בשלפוחית השתן המושרה עם מסרטן nitrosamine (BBN) N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) הם יתרון על מודלים מבוססי-קו תא כי הם לשכפל מקרוב את הפרופילים גנומית של גידולים אנושיים, ו, בניגוד מודלים של התא, xenografts, הם מספקים הזדמנות טובה עבור המחקר של immunotherapies. עם זאת, דור גידול שלפוחית השתן היא הטרוגנית; לכן, הערכה מדויקת של נטל הגידול יש צורך לפני אקראיות לטיפול ניסיוני. המתוארים כאן הוא דגם העכבר BBN פרוטוקול כדי להעריך את שלפוחית השתן סרטן גידול הנטל ויוו באמצעות רצף תהודה מגנטית מהירה ואמינה (MR) (נכון FISP). שיטה זו היא פשוטה ואמינה כי, שלא כמו אולטרסאונד, מר אינו תלוי-המפעיל והיא מאפשרת עיבוד תמונה שלאחר רכישה ישירה של סקירה. באמצעות תמונות ההדמיה של שלפוחית השתן, ניתוח של אזורים מעניינים לאורך קיר השלפוחית, הגידול מאפשרים החישוב של קיר השלפוחית ואזור הגידול. מדידה זו עולה בקנה אחד עם ex-vivo שלפוחית השתן משקל (rs= 0.37, p = 0.009), שלב הגידול (p = 0.0003). לסיכום, BBN גידולים הטרוגנית הינם אידיאליים עבור הערכה של immunotherapies ולאחר MRI יכול במהירות ולהעריך באופן אמין נטל הגידול לפני אקראיות לנשק טיפול ניסיוני.

גידולים בשלפוחית השתן באמצעות פרוטוקול המתואר (איור 1), היו המושרה בעכברים זכרים C57/B6. MRI בוצעה ב 16 שבועות, עכברים היו מורדמים ב 20 שבועות. Ex-vivo שלפוחית השתן משקולות (BW) עבור כל עכבר נרשמו. שקופיות, היו מוכתמים hematoxylin ואאוזין ולאחר כל השקופיות היסטולוגיה נבחנו על שלב הגידול.
כדי לנתח את נטל הגידול באמצעות מר, שלפוחית השתן הקיר הפנימי לומן (BLAב) היה המופחת שלפוחית הש...

גידולים בשלפוחית השתן מאתר הם המושרה עם גורם מסרטן nitrosamine N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) (BBN). שלפוחית השתן גידול דור הוא. הטרוגניות; לכן, הערכה מדויקת של נטל הגידול יש צורך לפני אקראיות לטיפול ניסיוני. כאן אנו מציגים פרוטוקול MRI מהיר, אמין כדי להעריך את גודל הגידול ועל הבמה.

Murine bladder tumor models are critical for the evaluation of new therapeutic options. Bladder tumors induced with the N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) ...

מתודולוגיה זו יכולה לשמש כדי לשכפל גידולים בשלפוחית השתן באמצעות המסרבן BBN כדי דימוי הגודל וההרחבה של נטל הגידול בשלפוחית השתן באמצעות MRI. טכניקה זו משתמשת בגישה של הדמיה מהירה עצמאית של מפעיל עם זמני רכישה קצרים באיכות אבחון גבוהה כדי לבצע בדיקות תפוקה גבוהה של עכברים בשלבי ביניים של התפתחות הגידול. כדי לגרום להיווצרות גידול סרטן שלפוחית השתן, להוסיף 0.05%BBN למיכל מי שתייה אטום ולספק את המים 6 שבועות שחור C57 שישה עכברים עד ליביום.לאחר מכן לפקח על בעלי החיים פעמיים בשבוע עבור סימן של מצוקה הקשורים גידולים בשלפוחית השתן בהתאם להנחיות IACUC המקומי. 16 עד 24 שבועות לאחר החשיפה, לטעון מזרק מיליליטר אחד מצויד מחט 25 כדי 27 מד עם 100 כדי 200 microliters של מלוחים סטריליים ולהזריק את מלוחים תת עורית לתוך בעל חיים שטופלו BBN. לאחר 10 דקות, להעביר את העכבר לתוך מחזיק ההדמיה של דימוי תהודה מגנטית ולהכניס בדיקה טמפרטורה רקטלי מחובר למחשב הקלטה פיזיולוגית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף של החיה.לאחר מכן, מניחים סליל מקלט מרובע 4 ערוצים מעל הבטן התחתונה של העכבר וליזום התאמות אוטומטיות בתוכנת ההדמיה המשולבת כדי לרכוש קבוצה טריאקסיאלית של תמונות של גוף העכבר כולו. מערכת התייחסות זו של תמונות, לזהות את האזור של עניין לרכוש שלושה סטים של תמונות חתוכים אורתוגונל לאורך המישורים הסרסיאליים, קורונל, sagittal. באמצעות ההדמיה המהירה האמיתית עם רצף דימות התקדמות במצב קבוע, הגדר את ה- TR ל- 900 אלפיות שניה, את ה- TE לשתי אלפיות שניה ואת ה- FA ל- 70, 14 ממוצעים.לאחר מכן בחר את הפרמטרים הגיאומטריים המתאימים בתוכנת פלטפורמת ההדמיה כדי לקבל סדרה של פרוסות על פני כל שלפוחית השתן בעובי של 0.5 מיליליטר ורזולוציה בתוך המטוס של 0.148 מילימטרים. כאשר כל התמונות הושגו, לייצא את קבוצה של פרוסות המכסה את שלפוחית השתן כולה כדי תוכנה לניתוח תמונה רפואית מתאימה לגלול דרך התמונות שנוצרו כדי לאתר פרוסה במרכז שלפוחית השתן המאפשרת הדמיה של קיר שלפוחית השתן ולומן לבחור את התצוגה האקסיאלית המייצגת במרכז שלפוחית השתן לניתוח כמותי. לאחר מכן עקבו אחר הגבולות סביב הקצה החיצוני והלומן הפנימי של שלפוחית השתן כדי לתייג בזהירות את אזור העניין בתוך התצוגה האקסיאלית הייצוגית שנבחרה ולהחסיר את הלומן הפנימי מהקצה החיצוני כדי לחשב את שטח הפנים של קיר שלפוחית השתן.20 שבועות לאחר החשיפה BBN, לנקות את האזור של חתך עם 70% אתנול ולהשתמש מדפים כדי להרים את עור דופן הבטן. בצע חתך קו האמצע מן הסימפיזיס הערווה לתהליך xiphoid ולתפוס את peritoneum כדי לאפשר חתך חד של חלל הלידה. זהה את שלפוחית השתן בבטן התחתונה של קו האמצע, תוך שימוש במדפים כדי לתפוס את כיפת שלפוחית השתן.לנתח את שלפוחית השתן מן המבנים שמסביב כולל שלפוחיות שלפוחית, פי הטבעת, ושומן. חותכים את הרצועה הטבורית החציונית המחברת את כיפת שלפוחית השתן לקיר הטבור והבטן. חותכים את השופכים קרוב לשלפוחית השתן ומרימים את צפלאד שלפוחית השתן, חותכים את השופכה כדי להסיר את שלפוחית השתן.לאחר מכן לשטוף את שלפוחית השתן excised עם PBS ומיד לשקול את הרקמה על איזון. כאן, הדמיה מהירה אמיתית מייצגת עם תמונות תהודה מגנטית של התקדמות מצב יציב של שחזורים תלת-ממדיים של קיר שלפוחית השתן ותמונות פתולוגיות של עכבר עם גידול גדול ועכבר בקרה ללא גידול מוצגות. עובי קיר שלפוחית השתן כפי שנגזר מהדמיית התהודה המגנטית מתואם מדי שבוע עם מדידות משקל שלפוחית השתן שהושגו לשעבר.בדיקה של עובי קיר שלפוחית השתן הנגזרת MRI ונתונים לשעבר vivo קיבל משקל שלפוחית השתן גם להדגים קשר עם שלב הגידול, כמו גם קשר כאשר ריבוד הפתולוגיה על ידי סרטן שלפוחית השתן פולשנית שאינם שרירים וסרטן שלפוחית השתן פולשנית שריר. זכור כי עדיף לרכוש את התמונות בעכברים כאשר יש להם שלפוחית מלאה. בעקבות הדמיית MR של גידולים בשלפוחית השתן, ניתן לפצל עכברים לקוהורטות עם מאפייני גידול דומים, בהתאם לצורך.טכניקה זו מאפשרת לחוקרים לחקור immunotherapies חדשים וטיפולים אחרים כדי לשפר את התוצאות עבור המטופלים שלנו. חשוב לזכור כי BBN הוא מסרטן, כי אמצעי הזהירות המתאים תמיד יש לנקוט בעת טיפול במתחם זה.

magnetic-resonance-imaging-assessment-carcinogen-induced-murine

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

שלפוחית ​​השתן עכבר הזרקת הקיר היא גישה יעילה orthotopically מחקר גזע שלפוחית ​​השתן התא וביולוגיה סרטן. שיטה זו microsurgical עדין ניתן לשלוט בטכניקה תרגול זהיר.

שלפוחית ​​השתן עכבר וול Injection

גידולים בשלפוחית ​​השתן הן הוקמה בשנת נקבות העכברים בצורה פולשנית דרך צנתור, צריבה המקומי, בעקבות הידבקות של תאים קרצינומה לאתרים לשרוף.

דגם orthotopic של סרטן שלפוחית ​​השתן Murine

הקמת מודל orthotopic גידול בשלפוחית ​​השתן להעריך את ההשפעות נוגדות הגידולים של סרנה נמסר intravesically וצמיחה ניטור הגידול והדמיה על ידי אולטרסאונד bioluminescent.

שלפוחית ​​השתן Orthotopic גידול דגם ואת הערכת טיפול סרנה השלפוחית

השתלה של תאים סרטניים לתוך האיבר ממוצא יכולה לשמש מודל פרה שימושי כדי להעריך את הטיפולים חדשניים. ניתן לגדל תאי קרצינומה של שלפוחית ​​השתן MB49 בתוך שלפוחית ​​השתן בעקבות החדרת שלפוחית. פרוטוקול זה מדגים צנתור של שלפוחית ​​השתן בעכבר לצורך השתלת גידול ואספקת adenoviral.

סרטן שלפוחית ​​השתן לדגם orthotopic ג&#39;ין משלוח לימודים

כדי להדגים הדמיה מולקולרית סרטן MR עם פפטיד קטן ממוקד חומר ניגוד MRI ספציפי לחלבוני פלזמה קרוש בstroma גידול במודל עכבר של סרטן ערמונית.

MR הדמיה המולקולרית של סרטן הערמונית עם חומר ניגוד ממוקד המולקולרי קטן CLT1 פפטיד

N-בוטיל-N-(4-hydroxybutyl) ניטרוזמין-Induced מודל סרטן שלפוחית ​​השתן פותח בmucin האנושי 1 (MUC1) עכברים מהונדסים לצורך בדיקות MUC1 מכוון החיסוני. לאחר מתן חיסון פפטיד MUC1 ממוקד, תגובת הלימפוציטים T ציטוטוקסי לMUC1 אושרה על ידי רמות ציטוקינים בסרום ופעילות תאי T ספציפית מדידה.

אינדוקציה של קרצינומה של תאי מעבר שלפוחית ​​השתן פולשנית בMUC1 עכברים הטרנסגניים חיסוניים אנושיים שלמים: מודל לפיתוח חיסוני

הטכניקה המבוססת לחסן xenografts orthotopic פולשנית העיקרית לסרטן שלפוחית ​​השתן דורשת laparotomy והתגייסות של שלפוחית ​​השתן. הליך זה גורם תחלואה משמעותית בעכברים, הוא מאתגר מבחינה טכנית ודורש זמן רב. לפיכך, אנו פיתחנו דיוק גבוה, בגישה מלעורית ניצול הנחיית אולטרסאונד.

פולשנית הקמת Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן xenografts

כאן מתוארת השיטה להקמת מודל עכבר סינגני של גידול אורתוטופי בשלפוחית השתן כדי להעריך את היעילות האנטי-גידולית של החלבון החיידקי HP-NAP.

הערכת היעילות של<em&gt; H. פילורי</em&gt; חלבון HP-NAP ככלי טיפולי לטיפול בסרטן שלפוחית ​​השתן בדגם Murine Orthotopic

פרוטוקול זה מתאר את הדור של גידולים בשלפוחית ​​השתן בעכברים orthotopic אצל נקבות עכברים C57BL / 6J ועל ניטור של הגידול.

מודל גידול Murine Orthotopic שלפוחית ​​השתן סרטן מערכת איתור

פרוטוקול זה משתמש במיטה רב-תאית להדמיית תהודה מגנטית מקבילה (MRI) של עד ארבעה בעלי חיים לזיהוי גידולי אדנוקרצינומה בלבלב במודלים מהונדסים גנטית. פרוטוקול MRI רב-בעלי חיים זה מהיר וחסכוני לזיהוי ומדידת גידולים, ומקל על בחירת בעלי חיים למחקרים פרה-קליניים ומעקב לאורך זמן אחר צמיחת הגידול.

הדמיית תהודה מגנטית רב-בעלי חיים למדידות גידולים במודלים של עכברים סרטן לבלב

למד פרוטוקול MRI מהיר להערכת גידולי שלפוחית השתן בעכברים מושרים ב-BBN. שיטה זו מאפשרת דימות אמין של נטל הגידול באיכות אבחנתית גבוהה עם מצוקה מינימלית לבעלי החיים.

דימות תהודה מגנטית הערכה של גידולים המושרה מסרטן שלפוחית השתן מאתר

גלה סרטונים נוספים