Name: Agrobacterium tumefaciens , Agrobacterium rhizogenes-מתווכת טרנספורמציה של תפוחי אדמה, יזם פעילות של גן Suberin על ידי גאס Staining (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-29T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: למד שיטות טרנספורמציה מוּתוַכּת Agrobacterium לתפוחי אדמה באמצעות Agrobacterium tumefaciens ו-Agrobacterium rhizogenes. הפרוטוקולים מאפשרים הערכת פעילות מקדם באמצעות צביעת GUS בשורשים טרנסגניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי y Ministerio דה Innovación Ciencia (AGL2009-13745, FPI מענק PB), Ministerio דה Economía y Competitividad פדר מימון (AGL2012-36725, AGL2015-67495-C2-1-R), ואת אוניברסיטת ז'ירונה (PhD גרנט SF, גרנט SING11/1). המחברים מודים Inge ד ר ברואר (המכון לחקר שימושי קרקע, באוניברסיטת רוסטוק, רוסטוק, גרמניה), ד ר Salomé פרת (Centro נאסיונאל דה Biotecnología, מדריד, ספרד) למתן את rhizogenes א ואת המתח tumefaciens א , בהתאמה, ד ר מקסים סולר ואת ד ר אנה פלסנסיה בעזרה ותמיכה קיבל ב ייזום הניסויים טרנספורמציה rhizogenes א (Toulouse השלישי פול סבטייה אוניברסיטת — CNRS, צמח מחקר מעבדה (LRSV), Castanet Tolosan, צרפת). המחברים תודה שרה גומז (Departament de Biologia, UdG, גירונה) שלה סיוע חשוב בביצוע העבודה מעבדה, מטפל של צמחים, ואת Ferran Fontdecaba Sánchez קרלה שעזר בחלק מהניסויים בעוד הם עושים הפרויקטים התואר הסופי שלהם.

<ol><li>Gelvin, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traversing+the+Cell%3A+Agrobacterium+T-DNA%27s+journey+to+the+host+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Traversing the Cell: Agrobacterium T-DNA's journey to the host genome.</a> Frontiers in Plant Science. 3, 1-11 (2012).</li>
<li>Lacroix, B., Citovsky, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+roles+of+bacterial+and+host+plant+factors+in+Agrobacterium-mediated+genetic+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">The roles of bacterial and host plant factors in Agrobacterium-mediated genetic transformation.</a> The International Journal of Developmental Biology. 57 (6-8), 467-481 (2013).</li>
<li>Lee, L. Y., Gelvin, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-DNA+binary+vectors+and+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">T-DNA binary vectors and systems.</a> Plant Physiology. 146 (2), 325-332 (2008).</li>
<li>Ishida, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+efficiency+transformation+of+maize+%28Zea+mays+L.%29+mediated+by+Agrobacteriumtumefaciens%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">High efficiency transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacteriumtumefaciens.</a> Nature Biotechnology. 14 (6), 745-750 (1996).</li>
<li>White, F. F., Taylor, B. H., Huffman, G. A., Gordon, M. P., Nester, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+genetic+analysis+of+the+transferred+DNA+regions+of+the+root-inducing+plasmid+of+Agrobacterium+rhizogenes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Molecular and genetic analysis of the transferred DNA regions of the root-inducing plasmid of Agrobacterium rhizogenes.</a> Journal of Bacteriology. 164 (1), 33-44 (1985).</li>
<li>Dinh, P. T. Y., Brown, C. R., Elling, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+Interference+of+effector+gene+Mc16D10L+confers+resistance+against+Meloidogyne+chitwoodi+in+Arabidopsis+and+Potato%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">RNA Interference of effector gene Mc16D10L confers resistance against Meloidogyne chitwoodi in Arabidopsis and Potato.</a> Phytopathology. 104 (10), 1098-1106 (2014).</li>
<li>Horn, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Composite+potato+plants+with+transgenic+roots+on+non-transgenic+shoots%3A+a+model+system+for+studying+gene+silencing+in+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Composite potato plants with transgenic roots on non-transgenic shoots: a model system for studying gene silencing in roots.</a> Plant Cell Reports. 33 (12), 1977-1992 (2014).</li>
<li>Plasencia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eucalyptus+hairy+roots%2C+a+fast%2C+efficient+and+versatile+tool+to+explore+function+and+expression+of+genes+involved+in+wood+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Eucalyptus hairy roots, a fast, efficient and versatile tool to explore function and expression of genes involved in wood formation.</a> Plant Biotechnology Journal. 14 (6), 1381-1393 (2015).</li>
<li>Ron, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hairy+root+transformation+using+Agrobacteriumrhizogenes+as+a+tool+for+exploring+cell+type-specific+gene+expression+and+function+using+tomato+as+a+model%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Hairy root transformation using Agrobacteriumrhizogenes as a tool for exploring cell type-specific gene expression and function using tomato as a model.</a> Plant Physiology. 166 (2), 455-469 (2014).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+application+of+a+universal+and+simplified+multiplex+RT-PCR+assay+to+detect+five+potato+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">Development and application of a universal and simplified multiplex RT-PCR assay to detect five potato viruses.</a> Journal of General Plant Pathology. 83 (1), 33-45 (2017).</li>
<li>Almasia, N. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+production+of+the+potato+antimicrobial+peptide+Snakin-1+in+baculovirus-infected+insect+cells+and+development+of+specific+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Successful production of the potato antimicrobial peptide Snakin-1 in baculovirus-infected insect cells and development of specific antibodies.</a> BMC Biotechnology. 17 (1), 1-11 (2017).</li>
<li>Serra, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+StKCS6+in+potato+periderm+leads+to+reduced+chain+lengths+of+suberin+and+wax+compounds+and+increased+peridermal+transpiration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">Silencing of StKCS6 in potato periderm leads to reduced chain lengths of suberin and wax compounds and increased peridermal transpiration.</a> Journal of Experimental Botany. 60 (2), 697-707 (2009).</li>
<li>Serra, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYP86A33-Targeted+gene+silencing+in+potato+tuber+alters+suberin+composition%2C+distorts+suberin+lamellae%2C+and+impairs+the+periderm%27s+water+barrier+function%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">CYP86A33-Targeted gene silencing in potato tuber alters suberin composition, distorts suberin lamellae, and impairs the periderm's water barrier function.</a> Plant Physiology. 149 (2), 1050-1060 (2008).</li>
<li>Serra, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+feruloyl+transferase+involved+in+the+biosynthesis+of+suberin+and+suberin-associated+wax+is+required+for+maturation+and+sealing+properties+of+potato+periderm%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%22%5BJournal%5D)">A feruloyl transferase involved in the biosynthesis of suberin and suberin-associated wax is required for maturation and sealing properties of potato periderm.</a> The Plant Journal. 62 (2), 277-290 (2010).</li>
<li>Boher, P., Serra, O., Soler, M., Molinas, M., Figueras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potato+suberin+feruloyl+transferase+FHT+which+accumulates+in+the+phellogen+is+induced+by+wounding+and+regulated+by+abscisic+and+salicylic+acids%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">The potato suberin feruloyl transferase FHT which accumulates in the phellogen is induced by wounding and regulated by abscisic and salicylic acids.</a> Journal of Experimental Botany. 64 (11), 3225-3236 (2013).</li>
<li>Serra, O., Chatterjee, S., Figueras, M., Molinas, M., Stark, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deconstructing+a+plant+macromolecular+assembly%3A+chemical+architecture%2C+molecular+flexibility%2C+and+mechanical+performance+of+natural+and+engineered+potato+suberins%5BTitle%5D)+AND+%22Biomacromolecules%22%5BJournal%5D)">Deconstructing a plant macromolecular assembly: chemical architecture, molecular flexibility, and mechanical performance of natural and engineered potato suberins.</a> Biomacromolecules. 15 (3), 799-811 (2014).</li>
<li>Vulavala, V. K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+genes+related+to+skin+development+in+potato%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Identification of genes related to skin development in potato.</a> Plant Molecular Biology. 94 (4-5), 481-494 (2017).</li>
<li>Landgraf, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ABC+transporter+ABCG1+is+required+for+suberin+formation+in+potato+tuber+periderm%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">The ABC transporter ABCG1 is required for suberin formation in potato tuber periderm.</a> The Plant Cell. 26 (8), 3403-3415 (2014).</li>
<li>Verdaguer, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+the+potato+StNAC103+gene+enhances+the+accumulation+of+suberin+polyester+and+associated+wax+in+tuber+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">Silencing of the potato StNAC103 gene enhances the accumulation of suberin polyester and associated wax in tuber skin.</a> Journal of Experimental Botany. 67 (18), 5415-5427 (2016).</li>
<li>Molina, I., Li-Beisson, Y., Beisson, F., Ohlrogge, J. B., Pollard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+an+Arabidopsis+feruloyl-coenzyme+A+transferase+required+for+suberin+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Identification of an Arabidopsis feruloyl-coenzyme A transferase required for suberin synthesis.</a> Plant Physiology. 151 (3), 1317-1328 (2009).</li>
<li>Gou, J. Y., Yu, X. -H., Liu, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hydroxycinnamoyltransferase+responsible+for+synthesizing+suberin+aromatics+in+Arabidopsis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A hydroxycinnamoyltransferase responsible for synthesizing suberin aromatics in Arabidopsis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (44), 18855-18860 (2009).</li>
<li>Banerjee, A. K., Prat, S., Hannapel, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+production+of+transgenic+potato+%28S.+tuberosum+L.+ssp.+andigena%29+plants+via+Agrobacterium+tumefaciens-mediated+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Efficient production of transgenic potato (S. tuberosum L. ssp. andigena) plants via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation.</a> Plant Science. 170 (4), 732-738 (2006).</li>
<li>Sunil Kumar, G. B., Ganapathi, T. R., Srinivas, L., Revathi, C. J., Bapat, V. a <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+hepatitis+B+surface+antigen+in+potato+hairy+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Expression of hepatitis B surface antigen in potato hairy roots.</a> Plant Science. 170 (5), 918-925 (2006).</li>
<li>Schmidt, J. F., Moore, M. D., Pelcher, L. E., Covello, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+efficiency+Agrobacteriumrhizogenes-mediated+transformation+of+Saponariavaccaria+L.+%28Caryophyllaceae%29+using+fluorescence+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">High efficiency Agrobacteriumrhizogenes-mediated transformation of Saponariavaccaria L. (Caryophyllaceae) using fluorescence selection.</a> Plant Cell Reports. 26 (9), 1547-1554 (2007).</li>
<li>Petti, C., Wendt, T., Meade, C., Mullins, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+genotype+dependency+within+Agrobacteriumtumefaciens+in+relation+to+the+integration+of+vector+backbone+sequence+in+transgenic+Phytophthorainfestans-tolerant+potato%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bioscience+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Evidence of genotype dependency within Agrobacteriumtumefaciens in relation to the integration of vector backbone sequence in transgenic Phytophthorainfestans-tolerant potato.</a> Journal of Bioscience and Bioengineering. 107 (3), 301-306 (2009).</li>
<li>Gaudin, V., Vrain, T., Jouanin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+genes+modifying+hormonal+balances+in+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Bacterial genes modifying hormonal balances in plants.</a> Plant Physiology and Biochemistry. 32 (1), 11-29 (1994).</li>
<li>Nemoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+of+the+aux+and+rol+genes+of+the+Ri+plasmid+in+plant+cell+division+in+vitro.+Plant+Signaling+%26amp%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior%22%5BJournal%5D)">Function of the aux and rol genes of the Ri plasmid in plant cell division in vitro. Plant Signaling &amp.</a> Behavior. 4 (12), 1145-1147 (2009).</li>
<li>Visser, R. G. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+inheritance+of+inserted+markers+in+binary+vector+carrying+Agrobacteriumrhizogenes-transformed+potato+%28Solanumtuberosum+L.%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theoretical+and+Applied+Genetics%22%5BJournal%5D)">Expression and inheritance of inserted markers in binary vector carrying Agrobacteriumrhizogenes-transformed potato (Solanumtuberosum L.).</a> Theoretical and Applied Genetics. 78 (5), 705-714 (1989).</li>
<li>Guillon, S., Trémouillaux-Guiller, J., Pati, P. K., Rideau, M., Gantet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hairy+root+research%3A+recent+scenario+and+exciting+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Hairy root research: recent scenario and exciting prospects.</a> Current Opinion in Plant Biology. 9 (3), 341-346 (2006).</li>
<li>Georgiev, M. I., Agostini, E., Ludwig-Müller, J., Xu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+transformed+roots%3A+from+plant+disease+to+biotechnological+resource%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Genetically transformed roots: from plant disease to biotechnological resource.</a> Trends in Biotechnology. 30 (10), 528-537 (2012).</li>
<li>Ooms, G., Lenton, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-DNA+genes+to+study+plant+development%3A+precocious+tuberisation+and+enhanced+cytokinins+in+A.+tumefaciens+transformed+potato%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">T-DNA genes to study plant development: precocious tuberisation and enhanced cytokinins in A. tumefaciens transformed potato.</a> Plant Molecular Biology. 5 (4), 205-212 (1985).</li>
<li>de Vries-Uijtewaal, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fate+of+introduced+genetic+markers+in+transformed+root+clones+and+regenerated+plants+of+monohaploid+and+diploid+potato+genotypes%5BTitle%5D)+AND+%22TAG.+Theoretical+and+applied+genetics%22%5BJournal%5D)">Fate of introduced genetic markers in transformed root clones and regenerated plants of monohaploid and diploid potato genotypes.</a> TAG. Theoretical and applied genetics. 78 (2), 185-193 (1989).</li>
<li>Bird, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Arabidopsis+ABCG11%2FWBC11%2C+an+ATP+binding+cassette+%28ABC%29+transporter+that+is+required+for+cuticular+lipid+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%3A+For+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Characterization of Arabidopsis ABCG11/WBC11, an ATP binding cassette (ABC) transporter that is required for cuticular lipid secretion.</a> The Plant Journal: For Cell and Molecular Biology. 52 (3), 485-498 (2007).</li>
<li>Luo, B., Xue, X. Y., Hu, W. L., Wang, L. J., Chen, X. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+ABC+transporter+gene+of+Arabidopsis+thaliana%2C+AtWBC11%2C+is+involved+in+cuticle+development+and+prevention+of+organ+fusion%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">An ABC transporter gene of Arabidopsis thaliana, AtWBC11, is involved in cuticle development and prevention of organ fusion.</a> Plant and Cell Physiology. 48 (12), 1780-1802 (2007).</li>
<li>Panikashvili, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Arabidopsis+DESPERADO%2FAtWBC11+transporter+is+required+for+cutin+and+wax+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">The Arabidopsis DESPERADO/AtWBC11 transporter is required for cutin and wax secretion.</a> Plant Physiology. 145 (4), 1345-1360 (2007).</li>
<li>Panikashvili, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Arabidopsis+DSO%2FABCG11+transporter+affects+cutin+metabolism+in+reproductive+organs+and+suberin+in+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Plant%22%5BJournal%5D)">The Arabidopsis DSO/ABCG11 transporter affects cutin metabolism in reproductive organs and suberin in roots.</a> Molecular Plant. 3 (3), 563-575 (2010).</li>
<li>Bjelica, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatty+acid+%CF%89-hydroxylases+from+Solanum+tuberosum%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Fatty acid ω-hydroxylases from Solanum tuberosum.</a> Plant Cell Reports. 35 (12), 2435-2448 (2016).</li>
<li>Ding, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abscisic+acid+coordinates+nod+factor+and+cytokinin+signaling+during+the+regulation+of+nodulation+in+Medicago+truncatula%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">Abscisic acid coordinates nod factor and cytokinin signaling during the regulation of nodulation in Medicago truncatula.</a> The Plant Cell. 20 (10), 2681-2695 (2008).</li>
<li>Isayenkov, S., Mrosk, C., Stenzel, I., Strack, D., Hause, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+allene+oxide+cyclase+in+hairy+roots+of+Medicagotruncatula+reduces+jasmonate+levels+and+the+degree+of+mycorrhization+with+glomus+intraradices+1%5Bw%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Suppression of allene oxide cyclase in hairy roots of Medicagotruncatula reduces jasmonate levels and the degree of mycorrhization with glomus intraradices 1[w].</a> Plant Physiology. 139 (3), 1401-1410 (2005).</li>
<li>Dalton, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+roles+of+glutathione+S-Transferases+in+soybean+root+Nodules+1%5BC%5D%5BW%5D%5BOA%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">Physiological roles of glutathione S-Transferases in soybean root Nodules 1[C][W][OA].</a> Plant Physiology. 150 (1), 521-530 (2009).</li>
<li>Limpens, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+interference+in+Agrobacteriumrhizogenes-transformed+roots+of+Arabidopsis+and+Medicago+truncatula%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Botany%22%5BJournal%5D)">RNA interference in Agrobacteriumrhizogenes-transformed roots of Arabidopsis and Medicago truncatula.</a> Journal of Experimental Botany. 55 (399), 983-992 (2004).</li>
</ol>

המחברים יש שאין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תפוחי אדמה, המערכת השכיחה ביותר להשגת יציבה הצמחים הטרנסגניים מלאה משתמשת הטרנספורמציה על ידי זנים Agrobacterium tumefaciens הדורשים organogenesis באמצעות phytohormones אקסוגני. למרות שהפרוטוקולים Agrobacterium מבוסס יש פוטנציאל להשתלב וקטור הלא-T-DNA רצף25, מתודולוגיה זו זמינה עדיין הכי קל ופחות יקר להפוך את תפוחי האדמה צמחים. במהלך השנים האחרונות, האינטרס rhizogenes א-שינוי בתיווך יש את תשומת לבם של החוקרים ומאפשר להשיג שורשים הטרנסגניים בתקופות קצרות יותר מאשר שימוש <...

מלבד האינטרס הכלכלי, הדור של הצמחים הטרנסגניים כולל הרלוונטיות שלה במחקר כדי להדגים את הפונקציה האולטימטיבי של גנים, להבין טוב יותר את פיזיולוגיה של הצמח ופיתוח. הנפוצים ביותר שיטה עבור צמח DNA ההכנסה הוא Agrobacterium-מתווכת טרנספורמציה. Agrobacterium tumefaciens הוא מסוגל לייצר עפצים הכתר הרקמה הנגועה מיני צמחים רבים על ידי הפעולה של שלה פלסמיד (Ti) בתדר הגידול. פלסמיד מכיל אזור T-DNA עם קבוצה של גנים אשר ניתן לשלב הגנום צמח, זירוז רקמת dedifferentiation1,2. ההחלפה של גנים אלה בתוך T-DNA על ידי transgene אפשרה את הדור של שינויים צמח מסוים הימנעות אפקטים פנוטיפי3. כדי להקל את transgene שיבוט לתוך T-DNA, האזור T-DNA יש כבר חתכתם ב פלסמיד עצמאי הנקרא פלסמיד בינארי, בעוד ששאר הגנים של פלסמיד Ti (הגנים התקפה אלימה לאפשר את מנגנוני העברת והוספה של T-DNA) היה להציב אותם פלסמיד המסייע. לחקר הביוטכנולוגיה צמח, שינוי על-ידי tumefaciens א יש מספר יתרונות: זה אינו צריך מכשירים יקרים, הוא מסוגל לייצר טרנספורמציה צמח ארעית ויציבה, והן מספר נמוך של ג'ין עותקים משולבים כרומוזום4. עם זאת, רוב הצמחים, אבל לא תודרנית, הדור של transformants יציב דורשת התחדשות הצמח בודד או מספר תאים באמצעות phytohormones אקסוגני, ביצוע תהליך זה מפרך וצורכת זמן. Rhizogenes א הוא גם מסוגל לשנות את הגנום צמח, בהפקת שורשים שעירים או שורשים adventitious באתרים זיהום עקב הביטוי של גנים rol ( לוקוסיםכבסיס) המקודדת בתדר שורש (Ri) פלסמיד5. למרות פחות למד יותר tumefaciens א, א rhizogenes משמש גם לקבלת הטרנסגניים שורשים. במקרה זה, rhizogenes א מכיל את המקורי T-DNA על פלסמיד רי ו פלסמיד בינארי עם השנייה T-DNA נושא את transgene. כאשר האתר זיהום גבעולים או hypocotyls, צמח מורכב ניתן להשיג, עם שורשים חדשים שעיר הטרנסגניים הבוקע פראי סוג יורה. לחלופין, שורשים טרנספורמציה שעיר יכול לגדול באופן עצמאי במבחנה בתקשורת עם כניסות מקור פחמן. השימוש rhizogenes א במקום tumefaciens א כדי לייצר רקמות הטרנסגניים הוא צובר רלוונטיות כאשר הבסיס הוא איבר המטרה, כי התחדשות הצמח לא נדרש, מכאן זה יותר מהר ויקרות פחות. מחקרים קודמים הדגימו מתודולוגיה זו הופקעו עבור אפיון פנוטיפי שורש גנים ספציפיים6,7,8,9.
תפוחי האדמה (יכולת להתקשר אלי סולנום) הוא היבול הרביעי החשוב ביותר בעולם על פי המזון והחקלאות של האו ם (FAO) מאז פקעת יש רלוונטיות התזונתיות לצריכה אנושית על היותך מקור טוב של ויטמינים ומינרלים. מסיבה זו, תפוחי אדמה מוקם באור הזרקורים של ביוטכנולוגיה חקלאית, ונחשב גם כמו מודל ביולוגיים גנטיים, התפתחותית מחקרים10,11. תפוחי אדמה טרנספורמציה תרמה בצורה משמעותית להבנת המנגנונים המולקולריים שבבסיס הרקמות suberized דרך אפיון גנים המעורבים suberin, שעווה ביוסינטזה12,13,14 ,15,16,17, suberin מונומר התחבורה18 ו שעתוק בתקנה19. Suberin feruloyl טרנספראז הגן, לריב, הוא אחד הגנים biosynthetic הוחלף נגזר מאופיין האלה; downregulation שלה מעורר ליקוי חזקה של ההגנה periderm, אשר הוא מתואם עם ירידה חזקה אסטרים ferulate של suberin, שעוות פקעות תפו א14. / ת, שורשים, זרעים של תודרנית, הסתרה באמצעות של שלו בשם orthologue (ASFT/RWP1) הפגינו גם תפקידה בהפקת אלקיל ferulates20,suberin21. תפוחי אדמה, הקו כתב תעתיק לריב , הנוגדן לריב הראה בהתאמה כי הפעילות יזם החלבון נמצאים את exodermis, endodermis, phellogen-הנגזרים, רקמות הפצועים15.
בעבודה זו, אנחנו פירוט נוהל באמצעות rhizogenes א כדי לייצר שורשים שעירים הטרנסגניים נשמרים ביורה פראי סוג, תפוחי אדמה ללא הפרדות צבע מפעלים לייצור או טוחנות לגדול באופן עצמאי בתוך חוץ גופית. אנו מספקים גם את הפרוטוקול באמצעות tumefaciens א כדי לקבל תפוחי אדמה הטרנסגניים מלאה צמחים. כמקרה, rhizogenes א tumefaciens א טרנספורמציה עם וקטור בינארי זהה משמשים להשגת שורשים עם האמרגן לריב נהיגה גאס כתב גנים. התוצאות שדווחו, בהשוואה.

<table><tbody><tr><td> אצטון </td><td> Panreac </td><td> 1.310.071.21 </td><td></td></tr><tr><td> Acetosyringone </td><td> Acros </td><td> 115540050 </td><td></td></tr><tr><td> משאבת אקווריום </td><td> Prodac </td><td> MP350 </td><td></td></tr><tr><td> Autoclave </td><td> Ragpa Strelimatic </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> אגר בקטריולוגי </td><td> Lab Conda </td><td> 1800 </td><td></td></tr><tr><td> BAP </td><td> Duchefa </td><td> B0904 </td><td></td></tr><tr><td> תמצית בקר </td><td> Lab Conda </td><td> 1700 </td><td></td></tr><tr><td> ארון גידול צמחים </td><td> Nuaire </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Carbenicillin </td><td> Duchefa </td><td> C0109 </td><td></td></tr><tr><td> Cefotaxime sodium </td><td> Duchefa </td><td> C0111 </td><td></td></tr><tr><td> DMSO </td><td> Merck </td><td> 1029310161 </td><td></td></tr><tr><td> Ecotron infors </td><td> HT </td><td> 29378 </td><td></td></tr><tr><td> Ethanol </td><td> Merck </td><td> 1,009,831,011<> </td><td></td></tr><tr><td> צינור פלקון </td><td> Control tecnica </td><td> CFT011500 </td><td></td></tr><tr><td> Ferricyanate </td><td> Sigma </td><td> 101001081 </td><td></td></tr><tr><td> Ferrocyanate </td><td> Sigma </td><td> 100979088 </td><td></td></tr><tr><td> בקבוק (קוטר 8.06 ס"מ וגובה 11.3 ס"מ) ומכסה פלסטיק לתרבית in vitro </td><td> Apiglass </td><td> ref16 </td><td></td></tr><tr><td> GA3 </td><td> Sigma </td><td> G7645 </td><td></td></tr><tr><td> Gamborg B5 media </td><td> Duchefa </td><td> G0210 </td><td></td></tr><tr><td> Gelrite </td><td> Duchefa </td><td> G1101 </td><td></td></tr><tr><td> Glucosa </td><td> Sigma </td><td> G5767 </td><td></td></tr><tr><td> Kanamycin </td><td> Sigma </td><td> K1377 </td><td></td></tr><tr><td> Leukopor tape </td><td> BSN Leukopor </td><td> BDF47467 </td><td></td></tr><tr><td> Lupe </td><td> Wild-Heerbrugg </td><td> M420 </td><td></td></tr><tr><td> שייקר מגנטי </td><td> Agimatic </td><td> 7000243 </td><td></td></tr><tr><td> MES hydrate </td><td> Sigma </td><td> M2933-25G </td><td></td></tr><tr><td>MgSO4</td><td> Panreac </td><td> 131404 </td><td></td></tr><tr><td> מיקרוסקופ </td><td> Olympus </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Minufugue 5415R </td><td> Eppendorf </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Murashige and Skoog media </td><td> Duchefa </td><td> M0254.0050 </td><td></td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td> Panreac </td><td> 131679 </td><td></td></tr><tr><td> NAA </td><td> Duchefa </td><td> N0903 </td><td></td></tr><tr><td> NaCl </td><td> Panreac </td><td> 131659 </td><td></td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td> Sigma </td><td> 58282 </td><td></td></tr><tr><td> NightSea Stereo </td><td> SFA Moonting Adapter </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Parafilm </td><td> Anorsa </td><td> PRFL-001-001 </td><td></td></tr><tr><td> Peptone </td><td> Lab Conda </td><td> 1616 </td><td></td></tr><tr><td> <pp> </td><td> Anorsa </td><td> 200200 </td><td></td></tr><tr><td> pHmetre </td><td> Crison </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Phytotron </td><td> Inkoa </td><td> RFTI-R5485 </td><td></td></tr><tr><td> Plant Agar </td><td> Duchefa </td><td> P1001 </td><td></td></tr><tr><td> Refrigeratot </td><td> Liebherr Medline </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> Rifampicin </td><td> Duchefa </td><td> R0146 </td><td></td></tr><tr><td> Spectinomycin </td><td> Sigma </td><td> 59007 </td><td></td></tr><tr><td> ספקטרופוטומטר </td><td> Shimadzu </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> לוחות מרובעים (120 x 120) </td><td> Deltalab </td><td> 200204 </td><td></td></tr><tr><td> Streptomycin </td><td> Sigma </td><td> S6501 </td><td></td></tr><tr><td> Sucrose </td><td> Panreac </td><td> 131621 </td><td></td></tr><tr><td> להבים כירורגיים<td> > Swann-Morton </td><td> 201 </td><td></td></tr><tr><td> מחט כירורגית</עמ> </td><td> NIPRO </td><td> 015/0204 </td><td></td></tr><tr><td> Triptone </td><td> Lab Conda </td><td> 1612 </td><td></td></tr><tr><td> Triton </td><td> Serva </td><td> 37240 </td><td></td></tr><tr><td> Unimax 1010 shaker </td><td> Heidolph </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> ואקום </td><td> Dinko </td><td> </td><td></td></tr><tr><td> x-GlcA (5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronic acid, נתרן מלח נטול מים) </td><td> Biosynth </td><td> B-7398 </td><td></td></tr><tr><td> תמצית שמרים </td><td> Lab Conda </td><td> 1702.00 </td><td></td></tr><tr><td> Zeatin riboside </td><td> Sigma </td><td> 1001042850 </td><td></td></tr></tbody></table>

agrobacterium tumefaciens , agrobacterium rhizogenes-מתווכת טרנספורמציה של תפוחי אדמה, יזם פעילות של גן suberin על ידי גאס staining

Agrobacterium tumefaciens and Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation of Potato and the Promoter Activity of a Suberin Gene by GUS Staining

Agrobacterium sp. הוא אחד מהשיטות הנפוצה ביותר כדי להשיג את הצמחים הטרנסגניים כפי זה יש את היכולת להעביר ולשלב משלו-T-DNA הגנום של הצמח. כאן, אנו מציגים שתי מערכות טרנספורמציה לשינוי גנטית צמחים תפוחי אדמה (סולנום יכולת להתקשר אלי). בשינוי tumefaciens א , עלים נגועים, התאים טרנספורמציה נבחרו, מפעל חדש טרנספורמציה מוחלטת נוצר מחדש באמצעות phytohormones ב- 18 שבועות. בשינוי rhizogenes א , נובעת נגועים על ידי הזרקת החיידקים עם מחט, חדשים המתגלים טרנספורמציה שעיר השורשים מזוהים באמצעות סמן ניאון אדום, השורשים הלא-טרנספורמציה יוסרו. ב- 5-6 שבועות, המפעל וכתוצאה מכך הוא שילוב של צילומים פראי סוג עם שורשים שעירים טרנספורמציה מפותחת. להגברת ביומסה, שורשים שעירים טרנספורמציה יכול להיות טוחנות, מופצות עצמית. אנחנו מוחלים הן Agrobacterium -מתווכת שינוי שיטות להשגת שורשים לבטא את גן מדווח גאס מונחה על ידי יזם ג'ין biosynthetic הוחלף נגזר suberin. ההליך מכתימים גאס מסופק ומאפשר תא לוקליזציה של אינדוקציה יזם. שתי השיטות, הראו השורשים תפוחי אדמה טרנספורמציה מכתים suberized endodermis, exodermis, ובנוסף, בשורשים rhizogenes א הפכה הפעילות גאס גאס זוהה גם הופעתה של השורשים הצדדיים. תוצאות אלו מראים כי rhizogenes א יכול להיות כלי אלטרנטיבי מהר ללמוד הגנים מבוטאים שורשים.

Agrobacterium rhizogenes -מתווכת תפוחי אדמה טרנספורמציה
כתב יד זה, מוצג התהליך צעד אחר צעד כדי להשיג root טרנספורמציה עם rhizogenes א . איור 1 מציג סקירה של ההליך, אשר בסך הכל לוקח כ 5-6 שבועות (מתוך הזרקה של rhizogenes א להשגת שורשים שעירים מפותחת). לאחר מכן, ניתן יהיה ללמוד את הצמח ללא הפרדות צבע (פראי סוג לירות, שורש הטרנסגניים) או השור...

כאן, אנו מציגים שני פרוטוקולים להפוך את תפוחי האדמה צמחים. הטרנספורמציה Agrobacterium tumefaciens מוביל צמח מהונדס מלאה בעוד Agrobacterium rhizogenes מייצרת הטרנסגניים שורשים שעירים יורה פראי סוג זה יכול להיות עצמי שעבר בירושה. אנחנו מכן לזהות יזם פעילות על-ידי גאס צביעת שורשים טרנספורמציה.

Agrobacterium tumefaciens , Agrobacterium rhizogenes-מתווכת טרנספורמציה של תפוחי אדמה, יזם פעילות של גן Suberin על ידי גאס Staining

Agrobacterium sp. is one of the most widely used methods to obtain transgenic plants as it has the ability to transfer and integrate its own T-DNA into ...

השינוי התווך בגרובקטריום הוא שיטה קלה לייצור צמחי תפוחי אדמה מהונדסים גנטית. על מנת להבין תפקודי גנים ספציפיים ותרומתם לפיזיולוגיה של האיברים. טרנספורמציה על ידי רזוגנים אגרובקטריום הוא כלי חזק להערכת במהירות שורשים תפקוד גנים, כמו תוצאות דומות ניתן להשיג על ידי טרנספורמציה tumefaciens אגרובקטריום.הדגימו את ההליך הזה יהיו סנדרה פרננדז-פינן, פוסט-דוק, וג'ניפר לופז, סטודנטית של maste5r מהמעבדה שלנו. התחל בגידול מושבת אגרובקטריום אחת בן לילה בחמישה מיליליטר של מרק תמצית שמרים, או בינוני YEB, בתוספת אנטיביוטיקה בצינור צנטריפוגה 50 מיליליטר ב 28 מעלות צלזיוס, ב 200 סיבובים לדקה. לטרנספורמציה א-tumefaciens, למדוד את הצפיפות האופטית למחרת בבוקר.כאשר הצפיפות האופטית ב 600 ננומטר, או OD 600 מגיע 0.6 לאחד, צנטריפוגה מיליליטר אחד של תרבות האגרובקטריום resuspend את גלולה במיליליטר אחד של מדיום YEB טרי ללא אנטיביוטיקה. לאחר הכביסה השנייה, יש להשתמש מחדש את גלולה במדיום YEB טרי ללא אנטיביוטיקה, לריכוז המתאים כדי לקבל OD סופי 600 של 0.8, ולמקם את התאים החיידקיים על קרח. עבור טרנספורמציה צמחית באמצעות A.rhizogenes, בזהירות להעביר צמח תורם מתרבות בינונית 2MS ל 120 על ידי 120 מילימטרים צלחת מרובעת, ולהשתמש מחט כירורגית להזריק שלושה microliters מתרבות A.rhyzogenes ל internodes גזע שונים ככל האפשר.לאחר מכן מיד להעביר את הצמח כולו לצלחת מרובעת חדשה המכילה מדיום MS מוצק, בתוספת 0.1 מילימולר אצטוסירינגון. לאחר הנחת צמח שני על אותה צלחת, הפך באותו אופן, לאטום את הצלחת עם סרט כירורגי, ומניחים את הצלחת אנכית בתוך ארון צמיחה במשך ארבעה ימים. מעבירים את הצמח לצלחת מרובעת עם מדיום MS בתוספת נתרן cefotaxime להרוג את A.rhizogenes ולהמקם את הצלחת אטומה אנכית בתוך ארון צמיחה במשך ארבעה ימים.לאחר 10 עד 12 ימים, שורשים שעיר חדש יופיע. השינוי שלהם יכול להיות מאושר על ידי מיקרוסקופ סטריאו פלואורסצנטי. בשלב זה, excise השורשים המקומיים של כל צמח, ולהעביר את הצמחים לצלחת מרובעת חדשה עם מדיום MS, בתוספת נתרן cefotaxime להרוג את A.rhizogenes.כדי להשיג צמח מרוכב, תן שורשים שעיר מהונדס לגדול עוד שלושה עד ארבעה שבועות במדיום MS, בתוספת נתרן cefotaxime. לשינוי צמחים באמצעות A.tumefaciens. חותכים ומ מניחים עלה מצמח בן שלושה עד ארבעה שבועות בצלחת פטרי, ולהשתמש באזמל לעשות אחד עד שלושה חתכים רוחביים ממרכז העלה לקצוות מבלי לחתוך את חתיכות העלה.ולהוציא את הפטיול. מיד מניחים את העלה לתוך צלחת פטרי המכיל 10 מיליליטר של טרי 2MS נוזלי בינוני, צד abaxial למעלה, ולכסות את הצלחת. מוסיפים במהירות 80 מיקרוליטרים של תרבות ה-A.tumefaciens למדיום הנוזלי ומערבבים בעדינות את המדיום במשך דקה אחת כדי להפיץ הומוגנית את הפתרון החיידקי.לאחר מכן לאטום בזהירות ולכסות את הצלחת עם רדיד אלומיניום עבור דגירה של יומיים בתא 24 מעלות צלזיוס. בתום תקופת הטרנספורמציה, מעבירים את העלים לצד העבקסיאלי למעלה, למדיום הנודע, מגרדים פינצטה עבור דגירה של שבוע בקבינט הצמיחה. בסוף הדגירה, להעביר את העלים, בצד abaxial למעלה, על פינצטה גירד לירות גרימת בינוני, ודגירה העלים בקבינט צמיחה.כאשר המצנחים הגיחים הם בגובה של כשני ס"מ, חותכים שלושה מצנחים מגיחים מכל אחד מהם. מניחים עד חמישה אירועי טרנספורמציה שונים מצנח לתוך flasks תרבות בודדים המכילים מדיום MG בתוספת נתרן cefotaxime כדי לאפשר השתרשות, ולתייג את תת הקבוצה בהתאם מתאים דגירה שלושה עד ארבעה שבועות בארון הצמיחה עד המצנחים הם נמרצים. בסוף הדגירה, לבחור את הצמח הנמרץ ביותר של כל אירוע, לחתוך את מקטעי apical של המצנח עם שלושה עד ארבעה internodes מכל צמח.מניחים את הקטעים לתוך בקבוקון תרבות המכיל 2MS בינוני בתוספת נתרן cefotaxime ולגדל את הצמחים עד שהם מפתחים מצנחים נמרצים ושורשים. כדי לבצע בדיקה גנטית של בטא-גלוקוקונידס או GUS, תקן את השורשים מתרבות צמחית של שבועיים עד שלושה שבועות במבחנה עם אצטון מקורר של 90% במשך 20 דקות על קרח. בסוף ההתקבעות, לשטוף את השורשים פעמיים במים מזוקקים ולטפל השורשים עם פתרון טרי GUS מכתים תחת ואקום במשך 20 דקות.בסוף הטיפול בוואקום, מניחים את השורשים על 37 מעלות צלזיוס בחושך במשך כארבע שעות. כאשר צבע כחול גלוי, לשטוף את השורשים פעמיים עם 70%אתנול, ולהמחיש את הכתמים תחת מיקרוסקופ שדה בהיר. שורשים שערים שהשתנו מפגינים פלורציה אדומה כאשר הם מוארים באור ירוק, בעוד ששליטה שלילית על אגרובקטריום לא מעוצב אינה מדגימה פלורציה כזו, מה שמצביע על התאמת סמן הטרנספורמציה האדומה של DS לזיהוי שורשים שערים מהומנים.כאן, כתמי GUS בשורשים של צמחים מהומשים המתקבלים על ידי A.tumefaciens ושורשים שערים מהו מהודרים המתקבלים על ידי A.rhizogenes מוצגים. כפי שנצפה, שורשים שהשתנו עם A, tumefaciens וגדל במבחנה, להפגין כתמים כחולים endodermis, שכבת תא בין קליפת המוח ואת stele. בשורשים מפותחים יותר, התיוג הכחול הוא מטושטש בשכבה החיצונית, המתאים exodermis.בשורשים שערים שעברו טרנספורמציה שהושגו על ידי A.rhizogenes, וגדל הידרופוניקה, סמן GUS ממוקם במיוחד בתוך אנדודרמה בהופעתם של שורשים לצדד באזורים הפצועים וב exodermis. בנוסף להיותה שיטה מהירה, השורשים הטרנסגניים המתקבלים עם קנה שורשים אגרובקטריום נשאו גם את ה- DNA מהפלסמיד מעורר השורש, אשר עשוי לרוקן כמה תהליכים הנשלטים ישירות. השורשים השעירות הטרנסגניים המתקבלים עם קנה שורשים אגרובקטריום ניתן לשמור בזמן שהם יורים, אבל לחילופין יכול להיות באתר עד מופץ במבחנה לייצור תחבורה מסיבית.טרנספורמציית תפוחי האדמה מספקת כלי טוב לבדיקה של תפקוד הגנים והפעלת האמרגן, וגם כדי לייצר כללים מתודולוגיים במין בעל עניין אגרונומי גבוה. האורגניזם מהונדס גנטית צריך להיות מושלך בבטחה לאחר השימוש כדי למנוע זיהום סביבתי. כמו כן, פתרון גז מכיל נגזרת ציאניד רעיל, כך ללבוש הגנה להשליך את הפתרון בבטחה.

agrobacterium-tumefaciens-agrobacterium-rhizogenes-mediated

Research

JoVE Journal

Environment

סביבה

מאמר זה ממחיש את הפרחים, טובלים...

Floral-לטבול טרנספורמציה של ארבידופסיס thaliana לבדיקת PTSO2: β-glucuronidase Gene Expression Reporter

אגרואינפיציה ו- PVX agroinfection הם מבחנים תפקודיים שגרתיים לביטוי חוץ רחמי חולף של גנים בצמחים. שיטות אלה הן מבחנים יעילים באסטרטגיות אפקטאורומיות (התנגדות מהירה ותגלית גנים ארסית) וחיוניות למחקר מודרני בפתולוגיה של צמחים מולקולריים. הם עונים על הביקוש לניתוח תפקודי חזק בעל תפוקה גבוהה בצמחים.

אגרוינפינציה ו- PVX אגרוינבינציה בתפוח אדמה וניקוטיאנה בנתאמיאנה

שינוי בתיווך Agrobacterium באמצעות שיטת פרחוני-מח ש יכול להיות מועסק בהצלחה כדי ליצור שורות הטרנסגניים יציב של המודל extremophyte Schrenkiella parvula. אנו מציגים פרוטוקול שונה מזו עבור תודרנית לבנה, בהתחשב גידול שונים והרגלי הפיזיולוגיות של extremophyte.

צמח צמיחה ושינוי בתיווך Agrobacterium פרחוני-מח ש של Extremophyte Schrenkiella parvula

כאן, אנו מתארים את הדור, יישום של קבוצת הטרנסגניים תודרנית לבנה קווי המאפשרת ביטוי inducible, רקמות ספציפיות את meristems הראשי שלוש, את meristem apical לירות, meristem apical את שורש ו את cambium.

Inducible, תאים ייחודיים לסוג ביטוי תודרנית לבנה בתיווך דרך LhGR טרנס-הפעלה

גנים מורפולגניים הצמח יכול לשמש כדי לשפר את הטרנספורמציה גנטית של גנוטיפים הסרבן. המתואר כאן הוא Agrobacterium-תיווך הטרנספורמציה גנטית (quickcorn) פרוטוקול עבור שלושה חשובים הציבור תירס שורות.

Agrobacterium-תיווך המעבר העובר בלתי בוגר של הסרבן מתוך תירס שורות באמצעות גנים מורפולגניים

אנו מתארים שיטה של גרימת שורשים שעירים על ידי Agrobacterium ריזוגנים-שינוי מתווך של כוסמת טרארי (Fagopyrum tataricum). זה יכול לשמש כדי לחקור פונקציות גן וייצור של מטבוליטים משני ב כוסמת טרארי, להיות מאומץ עבור כל שינוי גנטי, או משמש צמחי מרפא אחרים לאחר שיפור.

שורש שעירים על ידי Agrobacterium ריזוגנים-שינוי מתווך בתוך הטאררי כוסמת (Fagopyrum טאטארנום)

בגלל היישום הרב-תכליתי שלו כמין מודל בתחומי מחקר שונים, יש צורך בארגז כלים לשינוי גנטי בפלנטיין צר עלים (Plantago lanceolata).  כאן, באמצעות טרנספורמציה בתיווך Agrobacterium tumefaciens, מוצג פרוטוקול שמביא לקווים טרנסגניים יציבים עם יעילות טרנספורמציה של 20%.

Agrobacterium tumefaciens-Mediated Genetic Transformation of Narrowleaf Plantain

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצור יעיל של שורשים שעירים סויה מהונדסים.

טרנספורמציה של שורש סויה שעיר לניתוח תפקוד גנים

כאן, אנו מספקים את הפרוטוקול המפורט של שיטת טרנספורמציה חד-שלבית בתיווך Agrobacterium tumefaciens לייצור צמחים מרוכבים.

שיטה יעילה וניתנת לשחזור לייצור צמחים מרוכבים על ידי טרנספורמציית שורשים שעירים מבוססי קנה שורש אגרובקטריום

אנו מציגים פרוטוקול פשוט, יעיל וניתן לשכפול לטרנספורמציה בתיווך אגרובקטריום של Phytophthora palmivora, שמתאים גם ל-P. capsici.

שיטה מפושטת לטרנספורמציה בתיווך אגרובקטריום של Phytophthora palmivora

למד שיטות טרנספורמציה מוּתוַכּת Agrobacterium לתפוחי אדמה באמצעות Agrobacterium tumefaciens ו-Agrobacterium rhizogenes. הפרוטוקולים מאפשרים הערכת פעילות מקדם באמצעות צביעת GUS בשורשים טרנסגניים.

Agrobacterium tumefaciens , Agrobacterium rhizogenes-מתווכת טרנספורמציה של תפוחי אדמה, יזם פעילות של גן Suberin על ידי גאס Staining (וידאו) | JoVE Journal

Agrobacterium tumefaciens , Agrobacterium rhizogenes-מתווכת טרנספורמציה של תפוחי אדמה, יזם פעילות של גן Suberin על ידי גאס Staining

גלה סרטונים נוספים