Name: ניתוח עצבי הפנים במודל חולדה כדי ללמוד עיכוב Axonal והתחדשות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 s
Description: למדו ניתוח עצבי פנים במודל חולדה לחקירת פציעות עצביות והתחדשות. השיטה משלבת הדמיה חיה והיסטומורפומטריה להערכת שיקום עצבי ופיתוח טיפולים לשיתוק פנים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

S.A.A. ממומנת על ידי האקדמיה האמריקנית לפלסטיקה הפנים וניתוח שיחזור לזלי ברנשטיין תוכנית מענקים.

כל התערבויות בוצעו בהתאמה קפדנית עם הנחיות המכון הלאומי לבריאות (NIH). הפרוטוקול הניסיוני אושר על ידי המועצה לטיפול בעלי חיים מוסדיים של אוניברסיטת מישיגן & השימוש הוועדה (IACUC) לפני היישום. מבוגרת בת 10 שבועות. שהיו משתמשים בחולדות
1. לפני היום הפעיל
<ol><li>להבטיח מלאי המתאים של כלי ניתוח מעוקר, תרופות משכך כאבים, תרופות הרדמה, וחמצן לפני יום הפעולה. נא עיין בטבלת החומרים לקבלת רשימה מלאה.</li>
</ol>2. התקנה מראש
<ol><li>הקפידו על מרחב עבודה נאות, כולל מקום לשני אנשים לפחות (המנתח ועוזר). הערה: יש צורך בשולחן הפעלה ייעודי, מקום להתקנת מכונת ההרדמה, ומקום אחסון הולם לאספקה מחוטאת וגיבוי.</li>
	<li>כיול מיקרוסקופ הפעלה לשימוש במהלך ההליכים. ודא כי המנתח יש את היכולת להתאים את ידיות של המיקרוסקופ ואת לחצני זום/מיקוד על ידי הצבת כיסוי מעוקר על ידיות/לחצנים הערה: אנו מנוצל רדיד אלומיניום מעוקר על ידיות/כפתורים.</li>
</ol>3. הרדמה והכנה
<ol><li>מניחים את החיה בתא ההרדמה ולגרום הרדמה כללית באמצעות 1.8% isofלוריאן ו 0.9 L/min חמצן.<ol>
<li>לאשר מטוס הרדמה נאותה באמצעות הערכה של נשימה ספונטנית והערכה של התודעה על ידי הערכת תגובת בעלי החיים של החיה צביטה בבוהן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>החלת סיכה עין בקיעים להגן מפני גירוי הקרנית או יובש.</li>
	<li>גלח את האתר (ים) הפעיל עם תער או קוצץ אוטומטי.<ol>
<li>הקמת שיטה לזיהוי עכברים בשלב זה, בין אם באמצעות תגית אוזן או באמצעות תווית/סימון זנב.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ניהול הזרקה תת עורית של 0.05 מ"ג/ק"ג בופרינורטין לאורך גבו של בעל החיים לצורך מניעה נגד כאבי הניתוח.</li>
</ol>4. גישה כירורגית ודפוסי פציעה
<ol><li>להעביר את החיה לשולחן ההפעלה ולהמשיך את זרימת הגז באמצעות nosecone. ודא כי כרית ההתחממות ממוקמת מתחת לבעל החיים והשדה הסטרילי כדי לשמור על טמפרטורת הגוף שלו.</li>
	<li>המקום גזה מעוקר (מגולגל ומהודק עם קלטת) להשתמש כמו גליל הצוואר עבור העכברוש; זה יספק חשיפה משופרת של השדה הכירורגי. שימו לב כי המיקום המתאים של בעל החיים הוא בעל חשיבות עליונה לזיהוי עצבי ולניתוח יעיל.</li>
	<li>הכינו את עור הפנים של בעל החיים לפרוצדורה. השימוש כלורקסדין או פתרון יוד מבוסס לקרצף את האתר כירורגי 3x, לסירוגין עם 70% אתנול, כדי להבטיח חיטוי.</li>
	<li>לתכנן ולסמן את החתך כירורגי במידת הצורך. לתמרן את האוזן התסילבת בכיוון האחורי הקדמי כדי לקבוע את קיפול טבעי של העור החותמות.</li>
	<li>אופנה 4-5 מילימטר החתך בקמט משני באמצעות קשתית חדה מספריים או להב מספר 15. ניתן להרחיב זאת מאוחר יותר בשגרה בהתאם לצורך.</li>
	<li>במיומנות לנתח דרך הfascia תת עורית מיידית ולמקם מיקרו-Weitlaner מפסק כדי לשפר את החשיפה. שימו לב כי ייתכנו כלי דם קטנים בקוטר באזור זה; הדרך הטובה ביותר למנוע את הירי באמצעות מפסק הוואיטלנר.</li>
	<li>לזהות את השריר דיקיבה הקדמי כפי שהוא נוסע בכיוון נחות למעלה לכיוון ההוספה שלה לאורך בסיס הגולגולת.<ol>
<li>להתפשט בעדינות דרך בטן השריר לאורך נקודת הכניסה שלה כדי לחשוף את הגיד של בטן digastric הקיבה הקדמית. שימו לב כי הגיד מופיע כתהליך לבן אריג הנובע השריר עם החדרת מוצק על בסיס הגולגולת.</li>
	</ol></li>
	<li>לאחר זיהוי של שריר הקיבה הקדמי והגיד שלה, להתאים את מפסק Weitlaner לשוב לסגת הבטן שריר. שימו לב שהאזור שנחשף לאחר מכן הוא המרחב התלת-מימדי שבו נמצא העורק הראשי של עצב הפנים. הערה: אזור זה מוגבל על ידי בסיס הגולגולת, באופן מיידי על ידי שריר הקיבה הקדמי, הפומאדילי על ידי תעלת האוזן, ובאופן מכריע על ידי המבנים של הצוואר, כולל עורק הרקה השטחית.</li>
	<li>לאחר חשיפה נאותה, לזהות את המטען העיקרי של עצב הפנים כפי שהוא נוסע מתחת לגיד של שריר הקיבה digastric שם הוא יוצא את stylomastoid מבסיס הגולגולת. שים לב כי העצב מופיע כמו חוט לבנה פנינה, עטוף הfascia מעסים של בעל החיים ללעיסה. נהג בזהירות בעת חשיפת העצב, מהסיבות הבאות.<ol>
<li>להימנע מניתוח אגרסיבי, או כפולות הניצב, כדי למנוע מתיחה למתוח מתווך פציעה נוירופראקסיה.</li>
		<li>הימנע מבחינה אגרסיבית ומכוונת לניתוח מונחה כדי להגן מפני הפרה של רקמות דקות על תעלת האוזן כמו זה יכול להחדיר פלורה האוזן התיכונה לתוך השדה כירורגי.</li>
		<li>הימנע מפגיעה בעורק הזמני השטייתי באמצעות מדיה רחבה וניתוח מכוון. שימו לב שהפציעה תזוהה באמצעות דימום מרענן.<ol>
<li>אם העורק נפצע, להחיל לחץ הבקשה עם המוליך משופעת כותנה או גזה סטרילי דרך מלקחיים. סוכני הומוסטטי או איטום נוזלי של הפיברוב ניתן להציב בסמיכות. זכרו כי החיה עשויה לדרוש הזרקה תת עורית של 0.9% תמיסת מלח סטרילי לייצוב נוזלים.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>עקוב אחר המטען הראשי באמצעות מבתר לאורך העצב בכיוון נחות, קרוב מן היציאה של stylomastoid foramen.<ol>
<li>הארך את החתך המקורי כדי לאפשר חשיפה מלאה של העצב והענפים שלה. לטפל כדי למנוע הפרעה של בלוטת הפרוטיד כמו זה יכול לגרום sialocele postאופרטיבית.</li>
	</ol></li>
	<li>לגרום לדפוסי הפציעה הרצויים כדלקמן.<ol>
<li>עבור פציעה למחוץ, השתמש מלקחיים חלקה הצורף של התכשיטן כדי לתפוס בחוזקה את העצב ולדחוס אותו9. החלת לחץ קבוע ומתמשך על העצב לתקופה של 30 s כדי להבטיח פציעת התאהבות מתאימה.</li>
		<li>עבור העברה פשוטה, לתפוס את הfascia על העצב, או את הקולטן המיידית, עם מלקחיים בעלי שיניים משובחות, ולהשתמש מיקרו מספריים חדים כדי לשנות את העצב בנקודה הרצויה עם חתך אחד. לדאוג למנוע המתיחה עודפת על העצב עם מלקחיים.</li>
		<li>עבור מודל הפער העצבי, ליצור את הפער העצבי הרצוי באמצעות שיטה דומה הפציעה רוחבי פשוט. השתמש פיר מעוקר של המוליך כותנה משופעת-גזור את הפער עצב הרצוי אורך-תוך הקפדה על מנת להבטיח דמיון של דפוס פציעה בין בעלי חיים.</li>
	</ol></li>
</ol>5. סגירת הפצע
<ol><li>מייבשים את הפצע בתמיסת מלח סטרילית. וייבוש אותו בגזה סטרילית</li>
	<li>משוער את קצות העור בצורה פשוטה, משנית עם תפרים נספגים, או להשתמש דבק העור או הפצע קליפים, אשר גם מקובלים על סגירת הפצע. מניחים תפר קבור על ידי נטילת נשיכה עמוקה-שטחית של קצה אחד של העור ולאחר מכן לאחר מכן שטחית-עמוק לנשוך את הקצה השני של העור.</li>
</ol>6. שחזור שלאחר הניתוח
<ol><li>ניהול הזרקה תת עורית של כאבים אנטי דלקתיות נגד דלקת (כגון 0.05 מ"ג/ק"ג של בופרנורפין ו 0.5 mg/ק"ג Carprofen) עבור בקרת כאב הניתוח. הניחו את הזריקה לאורך גבו של בעל החיים.</li>
	<li>הפסיקו את הניהול של סוכן ההרדמה והניחו לבעל החיים לשאוף חמצן במשך 1 דקות נוספות.</li>
	<li>מניחים את החיה ב מחומם (דרך מנורת חום), כלוב אספטי נטול חומר מצעים כדי למנוע בליעה מקרית. שים לב כי החיה יהיה בדרך כלל להפגין סימנים של התאוששות בתוך 1-2 דקות יכול להיראות מבולבל, עם התאוששות מושהית של הרגל האחוריות.</li>
	<li>להחזיר את בעלי החיים לכלובים שלהם ביחידת הדיור המתאים ולנהל משככי כאבים שלאחר הניתוח ביום שלאחר הניתוח #1 כדי להבטיח המשך מניעה מפני כאב.</li>
	<li>עקוב אחר בעלי החיים 2x ליום כדי להעריך סימנים של מלריה, גירוי הקרנית, או זיהום באתר כירורגי, ולשמור על יומני ניתוח המתאימים.<ol>
<li>ניהול 0.9% תמיסת מלח סטרילית בצורה תת עורית אם יש ירידה במשקל משמעותי.</li>
		<li>החל משחה עין סיכה מדי יום עד רפלקס המצמוץ של בעל החיים נוצר מחדש.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

מודל פציעה הפנים חולדה הגוף התפתחה כמערכת המגוונת ביותר עבור הערכה של גורמים neurotrophic בשל נגישות כירורגית שלה, מסעף דפוס, ומשמעות פיזיולוגית27,29,33,34,35,36. השילוב של הדגמת וידאו ויישום של נתוני בעלי חיים טרנסגניים פותח אפשרויות חדשות עבור המחקר המדעי של תופעות התחדשות עצבים. מודל זה מאפשר אפיון שיטתי ומפורט של התגובה ה...

פגיעה בעצב הגולגולת בראש ובצוואר יכול להיות משני כדי מולדות, זיהומיות, אידיופטית, iatrogenic, טראומטי, נוירולוגי, אונולוג'יק, או חבלות מערכתית1. עצב הגולגולת השביעי, או עצב הפנים, מושפע בדרך כלל. השכיחות של תפקוד עצבי הפנים יכול להיות משמעותי, כפי שהוא משפיע על 20 כדי 30 לכל 100,000 אנשים בכל שנה2. ענפי המנוע העיקריים של עצב הפנים הם הזמן, הנזיזים, הלסת התחתונה, שוליים וענפים בצוואר הרחם; בהתאם לענף מעורב, ההשלכות יכולות לכלול יכולת למניעת הדלקת ריר אוראלי, יובש הקרנית, חסימה בשדה ויזואלי משני כדי ptosis לדיסאראז, או הפנים א-סימטרי2,3. תחלואה ארוכת טווח כוללת תופעה של synkinesis, או תנועה בלתי רצונית של קבוצה אחת של שריר הפנים, עם ניסיון התכווצות מרצון של קבוצת שריר הפנים ברורים. הsynkinesis אוראלית-אוראלי הוא הנפוץ ביותר של התחדשות חריגה כמו הסקוויה של פגיעה בעצב הפנים וגורם ליקוי פונקציונלי, מבוכה, הערכה עצמית פחתה, ואיכות העניים של החיים3. פגיעה בענפים בודדים מכתיבה את הפונקציות הנמצאות בסיכון סלקטיבי.
הטיפול הקליני של פציעה בעצב הפנים אינו מתוקננת היטב והוא זקוק למחקר נוסף כדי לשפר את התוצאות. סטרואידים יכולים להקל על נפיחות בעצב הפנים חריפה, בעוד בוטוקס הוא שימושי עבור התנועות התחביטיים בתנועה; אבל, האפשרויות השיחזור העיקריות בארמנטריום של המטפל כרוכות בהתערבות כירורגית באמצעות תיקון עצבי, החלפה או הנפשה מחודשת3,4,5,6. בהתאם לסוג של פגיעה בעצב הפנים מתמשכת, מנתח עצבי הפנים עשוי לנצל מספר אפשרויות. עבור transection פשוט, החיבור העצבי הוא שימושי בעוד תיקון השתל כבל מתאים יותר לפגם עצבי; עבור שחזור של פונקציה, המנתח יכול לבחור את הליכים סטטי או דינמי הפנים מחדש. במקרים רבים של פגיעה בעצב הפנים ותיקון הבאים, גם בידי מנתחים מנוסים עצב הפנים, התוצאה הטובה ביותר עדיין התוצאות של אי-סימטריה הפנים מתמשך פשרה תפקודית7.
התוצאות האופטימליות הללו דרזו מחקר נרחב על התחדשות עצבי הפנים. נושאים נרחבים של הריבית כוללים לשכלול וחדשנות טכניקות תיקון עצבי, קביעת ההשפעה של גורמים שונים התחדשות העצבים, ולהעריך את הפוטנציאל של מעכבי עצביים ספציפיים כדי לעזור להילחם את התוצאה לטווח ארוך של synkinesis8,9,10,11. בעוד מודלים בתחום החוץ ניתן להשתמש כדי להעריך מאפיינים מסוימים של הפרו-צמיחה או מעכבות, מחקר הטרנסלtional אמיתי על נושא זה הוא הטוב ביותר באמצעות מודלים בעלי חיים לתרגום.
ההחלטה של איזה מודל בעלי חיים לנצל יכול להיות מאתגר, כמו חוקרים השתמשו הן בעלי חיים גדולים, כגון כבשים ומודלים בעלי חיים קטנים, כגון עכברים12,13. בעוד דגמי בעלי חיים גדולים מציעים הדמיה אנאטומית אידיאלית, השימוש בהם מצריך ציוד מיוחד ואנשי צוות לא בקלות או זמין. יתר על כן, הפעלת מחקר כדי להפגין אפקט יכול להיות מאוד חסכוני ובלתי אפשרי בתוך הטווח הריאלי של מרכזים מדעיים רבים. לפיכך, המודל החי הקטן מנוצל לעתים קרובות. מודל העכבר יכול להיות מנוצל להערכת מספר תוצאות הקשורות לניתוח עצבי הפנים; עם זאת, אורך מוגבל של העצב יכול להגביל את יכולתו של המדען לדגמן דפוסים מסוימים, כגון פגיעה בפער גדול14.
כך, אב טיפוס חולדה murine התפתחה בתור מודל סוס עבודה שדרכו המדען יכול לבצע הליכים כירורגיים חדשניים או לנצל מעכבות או פרו-צמיחה גורמים ולהעריך את האפקט על פני מגוון רחב של פרמטרים התוצאה. האנטומיה של עצב הפנים של החולדה היא בדרך-כצפוי ובקלות מתקרב באופן שאינו ניתן לעיצוב. בקנה מידה גדול יותר, בהשוואה למודל העכבר, מאפשר מידול של מגוון רחב של פגמים כירורגיים, החל רוחבי פשוטה 5 מ"מ פערים15,16. זה עוד מאפשר את היישום של התערבויות מורכבות באתר פגם, כולל מיקום אקטואלי של פקטור, intraneural זריקות של פקטור, ואת המיקום של איזושתלים או גשרים17,18,19,20,21,22,23.
האופי הצייתן של העכברוש, האנטומיה האמינה שלה, ואת הנטייה שלה להתחדשות העצב יעיל מאפשר את האוסף של צעדים רבים התוצאות בתגובה לדפוסי ניתוח כאמור של פציעה24. דרך המודל חולדה, מדען עצבי הפנים הוא מסוגל להעריך את התגובות אלקטרופיזיולוגיות לפציעה, עצב ושריר היסטולוגיים התוצאות באמצעות אימונוהיסטוכימיה, תוצאות פונקציונליות דרך מעקב אחר התנועה של הלוח vibrissal והערכת סגירת העין, ו מיקרו-ומקרוסקופי שינויים באמצעות פלורסנט או קונפוקלית מיקרוסקופ, בין השאר11,22,23,25,26,27,28,29 לפיכך, הפרוטוקול הבא מתווה גישה כירורגית לעצב הפנים של החולדה ולדפוסי הפציעה שיכולים להיגרם.

<table><tbody><tr><td>1.8% איזופלורן</td><td>VetOne</td><td>13985-030-40</td><td></td></tr><tr><td>11-0 מיקרו-תפרים ניילון</td><td>AROSuture</td><td>TK-117038</td><td></td></tr><tr><td>4-0 תפר מונוקריל</td><td>VWR</td><td>75982-084</td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין SR</td><td>ZooPharm</td><td>MIF 900-006</td><td></td></tr><tr><td>קרפרופן</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>MFCD00079028</td><td></td></tr><tr><td>כלורהקסידין</td><td>VWR</td><td></td><td></td>IC19135805</tr><tr><td>מלקחיים תכשיטנים</td><td>VWR</td><td>21909-458</td><td></td></tr><tr><td>מפסק מיקרו Weitlaner</td><td>VWR</td><td>82030-146</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיקרו</td><td>VWR</td><td>100492-348</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיני טנוטומיה</td><td>VWR</td><td>89023-522</td><td></td></tr><tr><td>מספר 15 להב אזמל</td><td>VWR</td><td>102097-834</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ הפעלה</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ג'ל עיניים וזלין</td><td>Pharmaderm</td><td>B002LUWBEK</td><td></td></tr><tr><td>מים סטריליים</td><td>VWR</td><td>89125-834</td><td></td></tr><tr><td>דבק רקמות</td><td>Vetbond, 3M</td><td>NC9259532</td><td></td></tr><tr><td>כרית מוליך מים</td><td>Aqua Relief System</td><td>ARS2000B</td><td></td></tr><tr><td>Bupivacaine</td><td></td><td></td><td>השתמש כמשכך כאבים מקומי</td></tr></tbody></table>

ניתוח עצבי הפנים במודל חולדה כדי ללמוד עיכוב axonal והתחדשות

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

פרוטוקול זה מתאר שיטות עקביות ומתחדשות כדי ללמוד להתחדשות האקאליות ועכבות במודל של פגיעה בעצב הפנים חולדה. עצב הפנים יכול להיות מניפולציות לאורך כל אורכו, מפלח התוך-גולגולתי שלה אל המסלול החיצוני שלה. ישנם שלושה סוגים עיקריים של פגיעה בעצב המשמש למחקר ניסיוני של מאפייני רגנרציה: התאהבות עצבים, transection, ופער העצבים. מגוון התערבויות אפשריות הוא עצום, כולל מניפולציה כירורגית של העצב, משלוח של ריאגנטים נוירואקטיבי או תאים, או מניפולציות מרכזי או איברים הקצה. היתרונות של מודל זה ללימוד התחדשות עצבים כוללים פשטות, התמדה, עקביות בין מינים, שיעורי הישרדות אמין של החולדה, ו בגודל אנטומי מוגבר ביחס מודלים murine. המגבלות שלה כרוכות מניפולציה גנטית מוגבלת יותר לעומת מודל העכבר ואת יכולת ההתחדשות של החולדה, כגון מדען עצבי הפנים חייב להעריך נקודות זמן להתאוששות ואם לתרגם את התוצאות לבעלי חיים גבוהים יותר ולימודי אדם. מודל החולדה לפגיעה בעצב הפנים מאפשר פונקציונליות, אלקטרופיסיולוגית, ופרמטרים היקמריים לפרשנות והשוואה של התחדשות העצב. הדבר מתגאה בפוטנציאל עצום לקידום ההבנה והטיפול בהשלכות ההרסניות של פגיעה בעצב הפנים בחולים אנושיים.

לאחר הליך הניתוח הראשוני, ישנם שני סוגים עיקריים של מדדי התוצאה: מדידות סדרתיות בעלי חיים ומדידות הדורשות הקרבת החיה. דוגמאות של מדידות טוריות כוללות אלקטרופיזיולוגיה assays כגון פעולה שרירים מורכבים המדד הפוטנציאלי30, הערכות של תנועת שריר הפנים דרך באמצעות לייזר או וידאו פירושו9, או אפילו הדמיה חיה חוזרת של לצמיחה מחודשת של עצב הפנים בעלי חיים מונגניים פלורסנט31,32. <strong class="x...

פרוטוקול זה מתאר גישה מגובשת לניתוח עצבי הפנים במודל החולדה, כולל תיאורים של דפוסים inducible שונים של פציעה.

ניתוח עצבי הפנים במודל חולדה כדי ללמוד עיכוב Axonal והתחדשות

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...

פרוטוקול זה יכול לעזור למדענים לחקור תוצאות לאחר פגיעה בעצב הפנים ושיטות לשיפור ההתחדשות על פני פרמטרים רבים ושונים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי האנטומיה של החולדה מאפשרת גישה קלה לעצב הפנים, ואת קנה המידה הגדול שלה מאפשר לנו ללמוד את כל דפוסי הפציעה הרלוונטיים. היישומים של טכניקה זו להרחיב לקראת שיקום של המטופלים לאחר פגיעה עצבית בפנים.כפוטנציאל הרגנרטיבי החולדה מספקת מודל ניסיוני מתרבה ותמציתי. שיטה זו יכולה לספק תובנה על טיפולים כירורגיים ורפואיים עבור ניתוח עצב הפנים או שיתוק. וזה ניתן לתרגום לדגמי ראש וצוואר אחרים או לעצבים היקפיים אחרים.לפעול תחת מיקרוסקופ באמצעות שתי הידיים יכול להיות מאתגר. אני ממליץ להתאמן באמצעות גרסה משקפת תחת המיקרוסקופ לפני שתנסה ניתוח עצב הפנים. לאחר אישור חוסר תגובה קמצוץ בוהן, להחיל משחה על העיניים של החולדה לגלח את האזור הכירורגי.להקים שיטה לזיהוי חולדה ולה מניחים גליל גזה מתחת לצוואר. לחטא את העור החשוף עם שלושה כלורקסידין לסירוגין ו 70% קרצוף אתנול ולהניח את החולדה תחת מיקרוסקופ סטריאו. לתפעל את האוזן ipsilateral בכיוון אחורי-anterior כדי לקבוע את הקיפול הטבעי של העור postauricular.השתמש בלהב מספר 15 כדי לבצע חתך של שניים עד שלושה מילימטרים בקמט הפוסט-אורקולרי. התכנון ומיקום החתך הם הצעדים הקריטיים ביותר להבטחת זיהוי אמין של עצב הפנים תוך מזעור גודל הפצע. לנתח בבוטות דרך fascia תת עורי מיידית ולה מניחים מפשק מיקרו-Weitlaner כדי לשפר את החשיפה לרקמות.זהה את שריר digastric לפני שהוא נע בכיוון נחות עד מעולה לכיוון החדרתו לאורך בסיס הגולגולת. מורחים בעדינות דרך בטן השריר לאורך נקודת החדרת השריר כדי לחשוף את הגיד של הבטן digastric לפני. הגיד יופיע כתהליך לבן מצולם שנושר מהשריר עם הכנסה מוצקה לבסיס הגולגולת.לאחר זיהוי של שריר digastric anterior והגיד שלה, להתאים את מפשק Weitlaner כדי להמשיך לסגת בטן השריר. האזור החשוף הוא החלל התלת מימדי שבו נמצא הגזע הראשי של עצב הפנים. לנתח לאורך העצב בכיוון נחות distally מהיציאה של foramen stylomastoid.כדי לגרום לדפוס פגיעה במחוץ, השתמש במדפים של תכשיטן חלק כדי לתפוס היטב ולדחוס את העצב החלת לחץ קבוע לשחזור במשך 30 שניות כדי להבטיח פציעת ריסוק מתאימה. עבור transection פשוט, לתפוס את האפינוריום המיידי overlying העצב עם מטלאים דק שיניים, ולהשתמש microscissors חדים כדי לחתוך את העצב בצורה נקייה בנקודה הרצויה עם חתך אחד. עבור מודל פער עצבי, השתמש calipers מתכוונן כדי להגדיר את אורך פער העצבים הרצוי כדי להבטיח דפוסי פציעה דומים בין בעלי חיים ולהפוך את העצב כפי שהוכח רק.לאחר הפציעה הניסיונית נמסר, להשקות את הפצע עם מלוחים סטריליים ולייבש את הרקמה עם גזה סטרילית. לפני סגירת חתך העור על פי הנחיות מוסדיות. כאן, הדמיה חיה של תא המטען הראשי של עצב הפנים עם פציעת ריסוק בערך שניים עד שלושה מילימטרים דיסטלי עד לנקודת הענף של PES הראשון בחולדת Thy1-GFP מהופנטת בוגרת מוצגת.הערכה של החזרה ההדרגתית של פלואורסצנטיות בשבוע אחד, שניים, שלושה וארבעה שבועות לאחר פציעה יכולה לשמש כסמן לניטור התחדשות העצבים בבעלי חיים מהו מהומנים אלה. ניתוח היסטומורפי ניתן להשתמש כדי להשיג תמונות חתך של חלוקת הלסת השולית המאפשר כימות של קוטר האקסונאלי, כמות פסולת, סיבי עצב, אחוז העצב, ומדידות צפיפות. חשוב לעתים קרובות להתאים את המיקום של המפשק לפי הצורך כדי להבטיח כי העצבים האנטומיים הרלוונטיים גלויים בעת זיהוי עצב הפנים.בעקבות הליך זה ניתן לקצור את העצבים והשרירים הרלוונטיים לניתוח אימונוהיסטוכימי כדי להעריך את מידת ההתחדשות ביחס לקבוצות ניסיוניות אחרות. בעקבות התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בחקר התוצאות התפקודיות לאחר פגיעה בעצב הפנים. באופן ספציפי, כיצד להשפיע על תופעת הסינקינזה.

facial-nerve-surgery-rat-model-to-study-axonal-inhibition

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מדגים פרוטוקול כירורגי על מודל חולדה, המפרט שלבים מהכנה להרדמה ועד השראת פגיעה בעצב הפנים. פרוטוקול זה שימושי לחקר התחדשות עצבית וטכניקות כירורגיות במחקר רפואי.

גרימת פגיעה בעצב הפנים במודל חולדה

סרטון זה מדגים את השראת כאב נוירופתי פה ופנים במודל חולדה על ידי קשירת העצב האינפרא-אורביטלי. התוצאה היא נזק עצבי ודלקת, הגורמים לאיתות כאב חריג ומחקים מצבי כאב כרוניים, שניתן להשתמש בהם כדי לחקור את מבחן הכאב הפה והפנים.

גרימת כאב נוירופתי אורו-פנים במודל חולדה באמצעות קשירת עצבים אינפרא-אורביטלית

מקור: Deseure, K., et al. פגיעה כרונית בהתכווצות של העצב האינפרא-אורביטלי של החולדה (IoN-CCI) לחקר כאב נוירופתי טריגמינלי. J. Vis. Exp. (2015). סרטון זה מדגים שיטה לגרימת כאב נוירופתי במודל חולדה על ידי כיווץ העצב האינפרא-אורביטלי. לאחר חשיפת העצב האינפרא-אורביטלי וקשירת קשירה כדי לכווץ אותו, התגובה החיסונית באתר הפגיעה מגבירה את הריגוש של נוירונים שכנים, המעבירים אותות כאב למוח.

אינדוקציה של כאב נוירופתי במודל חולדה על ידי כיווץ העצב האינפרא-אורביטלי

מקור: Olmstead, D. N., et al., אקסוטומיה של עצב הפנים בעכברים: מודל לחקר תגובת הנוירונים המוטוריים לפציעה. J. Vis. Exp. (2015). סרטון זה מדגים את הליך ריסוק עצב הפנים בעכבר, שבו דיסקציה קהה דרך ציוני דרך מרכזיים חושפת את תא המטען של עצב הפנים בנקב הסטילומסטואיד. לאחר מכן משתמשים במלקחיים כדי לדחוס את תא המטען של העצב, לגרום לנזק אקסונלי ולשבש את העברת האותות העצביים.

ביצוע אקסוטומיה של ריסוק על עצב הפנים במודל עכבר

מקור: Cheah, M.,  et al. הזרקת גנגליון שורש גבי ופגיעת ריסוק שורש גבי כמודל להתחדשות אקסון חושי. J. Vis. Exp. (2017). סרטון זה מדגים הליך שלב אחר שלב להזרקת תרחיף ויראלי לגרעיני השורש הגבי (DRGs) וגרימת פגיעה אקסונלית מבוקרת באמצעות ריסוק שורש הגב בחולדה מורדמת. הפרוטוקול כולל חשיפת ה-DRGs, אספקת וקטור ויראלי מקדם צמיחה כדי להקל על התחדשות אקסונלית, וניתוק קשרים אקסונליים לחוט השדרה כדי לדגמן פגיעה עצבית חושית והתחדשות.

מידול התחדשות אקסון חושי בחולדה באמצעות הזרקת גנגליון שורש גבי ופגיעה בריסוק שורש הגב

תאי ensheathing חוש ריח (OECs) הם תאי רכס עצביים המאפשרים צמיחה של תאי עצב ההרחה הראשוניים. נכס ספציפי זה יכול לשמש להשתלת תאים. אנו מציגים כאן מודל של השתלה סלולרית המבוסס על השימוש בOECs במודל פציעת עצב בגרון.

השתלה של תאי ensheathing חוש ריח להערכת החלמה תפקודית לאחר פגיעה עצבית היקפית

אנו מציגים פרוטוקול כירורגי המפרט כיצד לבצע אקסוטומיה של חתך או ריסוק על עצב הפנים בעכבר. ניתן להשתמש באקסוטומיה של עצב הפנים כדי לחקור את התגובה הפיזיולוגית לפגיעה עצבית ולבדוק טכניקות טיפוליות.

Axotomy פנים עצב של עכברים: דגם לחקר תגובת Motoneuron לפגיעה

פרוטוקול זה מציג את השימוש בהזרקת גנגליון שורש גבי (DRG) עם וקטור ויראלי ופגיעת ריסוק שורש גבי במקביל בחולדה בוגרת כמודל לחקר התחדשות אקסון חושי. מודל זה מתאים לחקירת השימוש בריפוי גנטי לקידום התחדשות אקסון חושי.

הזרקת גנגליון שורש הגבה ו שורש הגבה Crush פגיעה כמודל להתחדשות החושית אקסון

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המשלב אלקטרופורציה in vivo וניתוק עצבים של שריר levator auris longus (LAL). הליך זה מאפשר לחקור את התפקיד הפוטנציאלי של חלבונים שמקורם בשריר בהתחדשות הסינפסה העצבית-שרירית.

משולב באלקטרופורציה של Vivo ועצבוב מחדש לטווח קצר של שריר השלד של שריר השלד Auris longus

פרוטוקול זה מראה כיצד retrogradely תווית בתאי הגנגליון ברשתית, וכיצד לאחר מכן לבצע פגיעה בעצב הראייה לרסק על מנת לנתח הגנגליון ברשתית בתא הישרדות אפופטוזיס. זהו מודל מחלה ניסויית עבור סוגים שונים של נוירופתיה אופטית, כולל גלאוקומה.

עצב הראייה קראש פגיעה דגם Murine לחקר הישרדות רשתית תא גנגליון

למדו ניתוח עצבי פנים במודל חולדה לחקירת פציעות עצביות והתחדשות. השיטה משלבת הדמיה חיה והיסטומורפומטריה להערכת שיקום עצבי ופיתוח טיפולים לשיתוק פנים.

ניתוח עצבי הפנים במודל חולדה כדי ללמוד עיכוב Axonal והתחדשות

גלה סרטונים נוספים