Name: שיטה מעבדה למדוד מדבק מפהק בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 49 s
Description: למד שיטה לא פולשנית למדידת מדבק מפהק בזכרי חולדות באמצעות רמזים חזותיים ואולפקטוריים. פרוטוקול זה מאפשר לחוקרים לחקור מנגנונים חושיים של התנהגות חברתית בבעלי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

א. מ. מומן באופן חלקי על ידי הווירסיטורייה דה דוסנצ'ה, בנאריטה באוניברסיצ'איאז דה פואבלה. אנו חבים במיוחד לצוות המתקן החי "קלוד ברנרד" לשימוש בחולדות לירי. אנו מודים לשופטים אנונימיים על הערותיהם בגרסאות מוקדמות של כתב היד. המצגת קטנה יותר ומאוזנת יותר בשל הערותיהם המתחערות

הפרוטוקולים הניסיוניים והגידול בבעלי חיים נערכו בהתאם להנחיות המוסדיים.
1. חומרים
<ol><li>מצא רשימה מלאה של החומרים המשמשים למימוש השיטה בטבלת החומרים. השתמש באיור 1 וחפש ייעוץ מומחה לבניית שולחן הפוך בצורת T, כלובי תצפית וחוצצים בכלוב. בצע את אינדיקציות בטיחות לשימוש של כלים חדים וחומרים העלולים להיות מסוכנים.</li>
	<li>הפוך שולחן בצורת T הפוך על-ידי הדבקת שני ברים מעץ דמוי המעקה (45 ס מ אורך, מופרדים 0.6 ס מ זה מזה) אל החלק העליון באמצע פיסת עץ (100 ס"מ x 45 ס"מ x 1.5 ס"מ). לאחר מכן, מניחים פיסת עץ שנייה (50 ס"מ x 45 ס"מ x 0.6 ס"מ) אנכית בין הסורגים כמו מסילות. ודא כי פיסת עץ השני מונעת את זוג חולדות בצד אחד מלראות את זוג אחר בצד השני (איור 1).</li>
	<li>השתמשו בזכוכית ואקריליק ליצירת שמונה כלובי תצפית. ודא כי כל כלוב (19 ס"מ רוחב, 19 ס"מ, 10 ס"מ גבוה, 3 מ"מ עבה) יש 24 חורים רחוקים (5 מ"מ קוטר) מסודרים בשלוש שורות באמצע אחד הצדדים שלה. להפוך בצד זה של אקריליק (3 מ"מ עבה) ולקצר את הגובה של הצד הנגדי על ידי 0.7 ס מ כדי לאפשר לעכברוש לנשום.<ol>
<li>ודא שכל כלוב התצפית כולל מכסה החלקה עשוי אקריליק כדי למנוע את החולדה מגידול ולהסיח את עצמו במהלך תקופת התצפית 60 דקות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>להפוך ארבעה חוצצים של אקריליק (19 ס"מ רוחב, 30 ס"מ גבוה, 3 מ"מ עבה). מקדחה 24 חורים (קוטר 5 מ"מ) המתאימים לאלה שבכלובים התצפית, כל אחד במפריד אחד ברור ומפריד אחד אטום.</li>
	<li>הכן גיליונות נתונים מראש כדי לתעד את התרחשות הצרחה. כלול, בכותרת של כל גליון נתונים, את שם המתבונן, מצב ניסיוני (כלומר, חולדות מוכרות או לא מוכרות), מצב מבחן רלוונטי (OC, VC, VOC, NVOC), התאריך, והמועדים הראשוניים והסופיים של ההתבוננות. חלק את שאר גיליון הנתונים לשתי עמודות, כל אחד עם מספר החולדה נכתב בחלק העליון, כדי להקליט את התנהגות מפהק של החולדות.</li>
</ol>2. נוהל
<ol><li>בית 144 חולדות גברים בקבוצות של ארבעה בכלובים פלסטיים (בית כלובים) מן הגמילה עד שהם מגיעים 2.5 חודשים בגיל. אין להשתמש בחולדות נשיות, משום שהן נוטות להראות וריאציה גדולה יותר בהתנהגות עקב מחזורים הורמונליים, אשר עשויים להתבלבל עם ההשפעות של מצב הבדיקה. ודא כי החולדות בכל כלוב אינם אחים. הערה: ייתכן שיהיה קשה להשיג את כל העכברושים יחד. במקרה זה, ליצור בלוקים של לפחות 8 חולדות מוכרות 8 חולדות לא מוכר כך כל מצב מבחן מיוצג פעם אחת בכל מצב ניסיוני30.</li>
	<li>כדי לזהות את העכברושים, סמנו אותם במספרים סמליים על הזנבות באמצעות סמן מסחרי. לדוגמה, מייצגים את המספרים 1 עד 4 על-ידי שילוב נקודות וקווים (לדוגמה, נקודה אחת עבור מספר 1 ושורה אחת עבור מספר 4). זיהוי חולדות מוכרות ולא מוכרות באמצעות צבעים שונים. הערה: לטפל בחולדות בעקבות כיווני הבטיחות המסופקים על ידי צוות מתקן בעלי חיים, ולציית להמלצות לגבי השימוש הנכון בבעלי חיים מעבדתיים במוסד שבו יבוצעו ניסויים.</li>
	<li>באופן אקראי לבחור אילו כלובים בבית יהיה בית הקבוצה של חולדות מוכרות אשר יהיה לבית הקבוצה לא מוכר. לדוגמה, נניח שקיימים 16 חולדות זמינות המתגוררים בארבעה כלובים ביתיים: מספר כלובי הבית 1 עד 4, ולאחר מכן השתמש ב-R (הורד אותו ב-http://cran.r-project.org/) כדלקמן [לאחר הבקשה (>)]: > לדוגמה (4, 4) [1] 4 3 2 1<ol>
<li>לקבץ את העכברושים המוכרים (או לא מוכרים) בכלובים ביתיים 4 ו-3, ולקבץ את העכברושים לא מוכרים (או מוכרים) בכלובים ביתיים 2 ו-1. ודאו שצוות המתקן בעל החיים שומר על זהותו של כל כלוב ומטפל בחולדות באותו אופן כמו כל העכברושים האחרים במתקן החי.</li>
		<li>השתמש בתוכנית R שוב באופן אקראי לבחור חולדות כדי ליצור כל זוג בכל מצב ניסיוני. ודא כי חולדות בכל זוג חולדות מוכרות מקורם באותו כלוב, ולהבטיח כי ההיפך הוא נכון עבור זוגות בקבוצה לא מוכר. באופן אקראי לבחור זוגות של חולדות עבור כל מצב בדיקה בכל מצב ניסיוני.</li>
	</ol></li>
	<li>בצע שני הפעלות בדיקה ביום עם שניים מתוך שמונה מצבי בדיקה אפשריים (ארבעה עבור כל חולדות מוכר ולא מוכר) לכל הפעלה (כלומר, 60 מינימום תקופת התצפית). בצע את שני מפגשי הבדיקה ברציפות בתוך 3 שעות. הערה: הקפידו לערוך את כל הפעלות הבדיקה (ארבע זוגות חולדות ליום) בבוקר או בשעות אחר הצהריים כדי להימנע מכל גורם מייסד. הפעל שכפול מלא (שמונה מצבי מבחן) של הניסוי במשך שני ימים רצופים.<ol>
<li>הקפד להשתמש במצבי הבדיקה ברצף אקראי עבור כל שכפול של הניסוי. לדוגמה, השתמש במספרים 1 עד 8 כדי לזהות כל אחד ממצבי הבדיקה, ולאחר מכן השתמש ב-R באופן הבא: > לדוגמה (8, 8) [1] 8 7 4 6 5 1 2 3</li>
		<li>הקצה מצבי מבחן 8 ו -7 כדי לבדוק את ההפעלה 1, מצבי בדיקה 4 ו-6 כדי לבדוק את ההפעלה 2, וכן הלאה. אז, באקראי לבחור את הצד של השולחן בצורת T הפוך שבו כל זוג חולדות (מצב הבדיקה) ימוקמו.</li>
	</ol></li>
	<li>חזור על אותו ההליך (שלבים 2.3 to 2.4.2) עבור שכפול שני (כלומר, בלוק) של הניסוי. הערה: אם מטרת המחקר היא לבחון את ההשפעות של מצבו החברתי (כלומר, שני חולדות מובחנות) על תדר מפהק, השתמשו בעכברוש אחד הממוקם בכלוב תצפית ליד כלוב תצפית ריק כפקד לכל אחד מארבעת מצבי המבחן. בצע את הניסוי 2x עבור כל מצב בדיקה עבור קבוצת שליטה של שמונה חולדות.</li>
	<li>הגדר את הפעלת המבחן על ידי העברת ארבעת החולדות הראשונות ממתקן החי לחדר התצפית, שם הם יישארו עבור 15 דקות כדי התאקלם לסביבה הרומן. להעביר את החולדות בכלובים בודדים ולשמור אותם מופרדים זה מזה במהלך התחבורה בחדר התצפית. הערה: בצע את הוראות הבטיחות להובלת בעלי חיים המסופקים על ידי צוות המתקן של בעל החיים והשתמש בבגדים המצוינים לעבודה עם בעלי חיים במעבדה. לחולדות לא תהיה גישה למזון ולמים בזמן שהם נמצאים בחדר התצפית.</li>
	<li>לאחר שתקופת ההסתגלות חלפה, הצב את הטבלה ההפוכה בצורת T על שולחן מלבני גדול יותר. ודא שיש מנורת תקרה הגורמת לתאורה מספקת של החדר בעת ביצוע התצפיות.</li>
	<li>לשים נייר סינון על החלק התחתון של כל כלוב התצפית ולמקם את הכלובים בזוגות בכל צד של השולחן בצורת T הפוכה. הצב את המפריד המתאים בין כל זוג כלובים. הערה: נייר הסינון מקל על ניקוי הכלובים ומספק משטח מחוספס שעליו יכולים החולדות לנוע מבלי לחמוק.</li>
	<li>אסטרטגית מקום שני מצלמות וידיאו דיגיטליות כגון כל רשומה התנהגות מפהק של כל זוג חולדות. ודא כי מצלמות וידיאו קבועות בבטחה לטריפודים ומיועדים כראוי לכלובים התצפית. לחבר את מצלמות וידאו למחשב שולחני במקביל לפקח על התנהגות של חולדות. הערה: אחסן את המידע הדיגיטלי בכונני flash כדי לאחסן בארכיון לצמיתות את ההפעלות הנסיוניות. השתמש בכונני flash עם קיבולת אחסון גבוהה.</li>
	<li>בעקבות תקופת ההסתגלות, הציבו את העכברושים בכלובים התצפיות לפי ההקצאה שנקבעה קודם לכן. להגדיר את הפוקוס האוטומטי של מצלמת וידאו ולהתחיל את הקלטת וידיאו בו זמנית עם סטופר. הפסק את הקלטת הווידאו בסוף תקופת התצפית 60 דקות. הערה: בעוד שהנסחנים עשויים להיות מחוץ לחדר במהלך הבחינה ולהתבונן מרחוק, מומלץ לאדם אחד להיות בחדר התצפית (רחוק ככל האפשר מן ההגדרה הניסיונית) תוך פיקוח על התנהגות החולדות ל ודא שהפעלת הבדיקה ממשיכה ללא הפרעה.</li>
	<li>כאשר התצפית מסתיים, החזר את העכברושים לכלובים הבית שלהם במתקן החי. בקשו מצוות מתקן החיות להבטיח שיהיו לחולדות גישה לאוכל ולמים שוב. נקה ביסודיות את כלובי התצפית באמצעות חומרי ניקוי לא רעילים והכינו את הערכה הניסיונית לביצוע הבדיקות השניות והסופיות של היום. הערה: נקו את העץ כדי להסיר את כל הריחות שנותרו על ידי החולדות כאשר מניחים בכלובים התצפית, אשר יכול להשפיע על ההתנהגות של זוג העכברושים הבא שנבדק.</li>
	<li>הרכבת אחד לשני מתנדבים עיוור באופן חלקי לטיפולים שהוקצו כדי לזהות ולהקליט מפהק באמצעות שיטת דגימה כל התרחשות. ודאו שהמשקיפים משתמשים בהגדרת הפיהוק המתואר בסעיף המבוא.</li>
	<li>הפעל בחזרה והצג כל וידאו על מסך מחשב באמצעות כל מערכת הפעלה סטנדרטית. בקשו מהצופה להציג כל סרטון וידאו ולהתבונן ולהקליט התנהגות מפהק באמצעות גיליונות הנתונים שהוכנו בעבר, ולאחר מכן לאפשר לו/לה לסקור את קטעי הווידאו במהירויות איטיות יותר כדי לשפר את היכולת להתבונן ולמדוד מפהק.<ol>
<li>בקשו מהמשבאים להבקיע באמצעות מערכת סימון דומה: השתמש בקווים אנכיים בדקה שנכתבה ככתב עילי כדי לייצג את ההתרחשות של פיהוק (לדוגמה, | 3 | | 6 | 9, המציין אחד פיהוק בדקה 3, שני מפהק בדקה 6, ואחד פיהוק בדקה 9). הציון מפהק כרצף (לדוגמה, 1.2, 2.2, 3.2, 5.0, 5.8) כדי להקליט אותו עם דיוק רב יותר (דקות מעוגלות למקום עשרוני אחד).</li>
		<li>לחלופין, הקלט נתונים ישירות מסרטוני הווידאו למחשב באמצעות תוכניות איסוף נתונים סטנדרטיות. ודא שמתבונן מכיר תוכניות כאלה. הערה: במידת הצורך, אפשר למתבונן להציג כל סרטון וידאו ביותר מהפעלה אחת. ודא שמתבונן אחד צופה בכל הסרטונים התואמים לבלוק ניסויים אחד. אם שני משקיפים שונים צפו קטעי וידאו אלה, יכול להיות סיכון כי הבדלים ביכולות שלהם להתבונן ולהקליט מפהק יהיה לבלבל את ההשפעות של מצבי בדיקה. חשוב להבקיע את האמינות פנים-המתבונן בין משקיפים שונים על 10%-20% של קטעי וידאו כדי להבטיח כי מפהק מסומן באותו אופן.</li>
	</ol></li>
</ol>3. עיבוד נתונים
<ol><li>תעתור את הרצף הזמני של הפיהוק בכל חולדה מדפי הנתונים לגיליון אלקטרוני. ודא שיש עמודה אחת לכל חולדה עם כותרת קצרה (למשל, fr1. l ו-fr1 r כדי לציין את זוג העכברושים הראשונים בצדדים השמאליים והימניים, בהתאמה). ודא שכל העמודות הן באותו אורך על-ידי מילוי התאים הריקים עם 0 או NA (ראה להלן). הערה: השתמש במדריך הכללי כמסמך משלים כדי להבין באופן מלא את השלבים הבאים כדי לעבד את הנתונים, למדוד מפהק מדבק ולהשיג עקומות פיהוק מדבקות.<ol>
<li>אם הוא הוקלט בדקה הקרובה ביותר, הקלד את מספר הפיהוק בכל דקה רלוונטית והשתמש ב -0 (אין פיהוק) כדי למלא את התאים כאשר לא התרחשה פיהוק בדקה נתונה. שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט (. txt).</li>
		<li>אם הפיהוק הוקלט לנקודה העשרונית הקרובה ביותר של דקה, הקלד את החלק העליון של הרצף והשתמש ב-"NA" כדי למלא את החללים הריקים של עמודות (חולדות) שבהן מספר הפימות (שורות) נמוך מזה של העמודה עם המספר המירבי (שורות) של פיטים שנרשמו עבור r ב. שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט (. txt). הערה: כ-R יש אפשרות לעבוד עם תאים ריקים, ניתן לשמור את גליון העבודה עם עמודות באורכים שונים. השתמש באפשרויות העזרה שסופקו על-ידי R כדי לטפל בנתונים חסרים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הפעל את R. יבא את הנתונים מהקובץ שבו הם אותרו בעבר.</li>
	<li>שמור את קודי התוכנית עם הסיומת ". R "(מסופק כחומר משלים) ולאחר מכן הורד את קוד התוכנית הספציפי (ראה מדריך כללי), בהתאם לשאלה אם הפיהוק הוקלט כמספרים שלמים או כמספרי שברים. הפעל את התוכנית עבור כל זוג חולדות ואת המספר הרצוי של מסגרות זמן.<ol>
<li>הפעל שוב את התוכנית, כעת באמצעות התפלגות אקראית של מספר הפיהוק מכל חולדה (ראה מדריך כללי). בצע את אותם צעדים (צעדים 3.3 כדי 3.3.1) עבור כל התנאים הניסיוניים (כלומר, חולדות מוכרות ולא מוכרות) ו/או כל מצבי הבדיקה. המשך כמצוין במדריך הכללי וייצא את התוצאות ל-Excel. הערה: במקום לייבא תוכנית שנשמרה בעבר, כפי שהוצע לעיל באמצעות עורך טקסט, העתק והדבק ישירות את התוכנית בסביבת העבודה של R.</li>
	</ol>
</li>
	<li>כדי ליצור עקומות הדבקה מפהק, השתמש בנתונים שנשמרו בעבר בגיליון אלקטרוני. הפחת את שיעורי אי-ההידבקות מקצבי ההידבקות עבור כל זוג חולדות, חלון זמן ומצב בדיקה. הפרד בין הניתוחים של הנתונים הנצפים והנתונים המלאכותית (המופצים באופן אקראי).<ol>
<li>לאחר מכן, חשב מרווחי ביטחון (CI) עבור כל חלון זמן ובדיקת מצב באמצעות הליך אתחול (עיין במדריך הכללי). הפרידו את הניתוחים לעכברושים מוכרים ולא מוכרים. לאחר מכן, שלב את הנתונים המלאכותית מארבעת מצבי הבדיקה עבור כל תנאי ניסיוני ולחשב את CI עבור כל חלון זמן באמצעות הליך אתחול.</li>
		<li>לאחר מכן, ליצור מגרשים עבור כל מצב בדיקה ומצב ניסיוני (ראה איור 2 ואיור 3). לבסוף, בצע ניתוח רגרסיה מרובה כדי להשוות את עוצמת הפיהוק בין מצבי בדיקה (ראה להלן).</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Cézilly, F. A. History of Behavioural Ecology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aC%C3%A9zilly%2C+FA+%22Behavioural+Ecology%22">Behavioural Ecology</a>. Danchin, E., Giraldeau, L. A., Cézilly, F. , Oxford University Press. 3-27 (2008).</li>
<li>Medina, L. M., Garcia, C. M., Urbina, A. F., Manjarrez, J., Moyaho, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+vibration+discourages+male+courtship+behaviour+in+the+Amarillo+fish+%28Girardinichthys+multiradiatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Processes%22%5BJournal%5D)">Female vibration discourages male courtship behaviour in the Amarillo fish (Girardinichthys multiradiatus).</a> Behavioural Processes. 100, 163-168 (2013).</li>
<li>Mekdara, P. J., Schwalbe, M. A., Coughlin, L. L., Tytell, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+lateral+line+ablation+and+regeneration+in+schooling+giant+danios%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The effects of lateral line ablation and regeneration in schooling giant danios.</a> Journal of Experimental Biology. 221 (8), 175166(2018).</li>
<li>Walusinski, O. Contagious Yawning. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWalusinski%2C+O+%22Encyclopedia+of+Animal+Cognition%22">Encyclopedia of Animal Cognition</a>. Vonk, J., Shackelford, T. K. , Springer Nature. Switzerland. 1-5 (2018).</li>
<li>Baenninger, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+comparative+aspects+of+yawning+in+Bettasplendens%2C+Homosapiens%2C+Pantheraleo%2C+and+Papio+sphinx%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Psychology%22%5BJournal%5D)">Some comparative aspects of yawning in Bettasplendens, Homosapiens, Pantheraleo, and Papio sphinx.</a> Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 349-354 (1987).</li>
<li>Gallup, A. C., Church, A. M., Pelegrino, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yawn+duration+predicts+brain+weight+and+cortical+neuron+number+in+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Yawn duration predicts brain weight and cortical neuron number in mammals.</a> Biology Letters. 12, 20160545(2016).</li>
<li>Baenninger, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+yawning+and+its+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Psychonomic+Bulletin+and+Review%22%5BJournal%5D)">On yawning and its functions.</a> Psychonomic Bulletin and Review. 4 (2), 198-207 (1997).</li>
<li>Anías, J., Holmgren, B., Urbá-Holmgren, R., Eguíbar, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+variation+of+yawning+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiologiae+Experimentalis%22%5BJournal%5D)">Circadian variation of yawning behavior.</a> Acta Neurobiologiae Experimentalis. 44 (4), 179-186 (1984).</li>
<li>Holmgren, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+anticipatory+yawning+rhythm+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurobiologiae+Experimentalis%22%5BJournal%5D)">Food anticipatory yawning rhythm in the rat.</a> Acta Neurobiologiae Experimentalis. 51 (3-4), 97-105 (1991).</li>
<li>Byrne, R. W. The evolution of intelligence. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aByrne%2C+RW+%22Behaviour+and+Evolution%22">Behaviour and Evolution</a>. Slater, P. J. B., Halliday, T. R. , Cambridge University Press. Cambridge. 223-265 (1994).</li>
<li>Provine, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yawning+as+a+stereotyped+action+pattern+and+releasing+stimulus%5BTitle%5D)+AND+%22Ethology%22%5BJournal%5D)">Yawning as a stereotyped action pattern and releasing stimulus.</a> Ethology. 72 (2), 109-122 (1986).</li>
<li>Provine, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Faces+as+releasers+of+contagious+yawning%3A+An+approach+to+face+detection+using+normal+human+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+the+Psychonomic+Society%22%5BJournal%5D)">Faces as releasers of contagious yawning: An approach to face detection using normal human subjects.</a> Bulletin of the Psychonomic Society. 27 (3), 211-214 (1989).</li>
<li>Anderson, J. R., Myowa-Yamakoshi, M., Matsuzawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contagious+yawning+in+chimpanzees%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Contagious yawning in chimpanzees.</a> Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 271 (Suppl 6), S468-S470 (2004).</li>
<li>Palagi, E., Leone, A., Mancini, G., Ferrari, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contagious+yawning+in+gelada+baboons+as+a+possible+expression+of+empathy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Contagious yawning in gelada baboons as a possible expression of empathy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (46), 19262-19267 (2009).</li>
<li>Romero, T., Ito, M., Saito, A., Hasegawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+contagious+yawning+in+wolves%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Social modulation of contagious yawning in wolves.</a> PLoS One. 9 (8), e105963(2014).</li>
<li>Yonezawa, T., Sato, K., Uchida, M., Matsuki, N., Yamazaki, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Presence+of+contagious+yawning+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Science+Journal%22%5BJournal%5D)">Presence of contagious yawning in sheep.</a> Animal Science Journal. 88 (1), 195-200 (2017).</li>
<li>Miller, M. L., Gallup, A. C., Vogel, A. R., Vicario, S. M., Clark, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+contagious+behaviors+in+budgerigars+%28Melopsittacus+undulatus%29%3A+an+observational+study+of+yawning+and+stretching%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Process%22%5BJournal%5D)">Evidence for contagious behaviors in budgerigars (Melopsittacus undulatus): an observational study of yawning and stretching.</a> Behavioral Process. 89 (3), 264-270 (2012).</li>
<li>Moyaho, A., Rivas-Zamudio, X., Ugarte, A., Eguíbar, J. R., Valencia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smell+facilitates+auditory+contagious+yawning+in+stranger+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Cognition%22%5BJournal%5D)">Smell facilitates auditory contagious yawning in stranger rats.</a> Animal Cognition. 18 (1), 279-290 (2015).</li>
<li>Moyaho, A., Flores Urbina, A., Monjaraz Guzmán, E., Walusinski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yawning%3A+a+cue+and+a+signal%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Yawning: a cue and a signal.</a> Heliyon. 3 (1), e00437(2017).</li>
<li>Gallup, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+do+we+yawn%3F+Primitive+versus+derived+features%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%26BiobehavioralReviews%22%5BJournal%5D)">Why do we yawn? Primitive versus derived features.</a> Neuroscience&BiobehavioralReviews. 35, 765-769 (2011).</li>
<li>Gallup, A. C., Clark, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commentary%3A+Yawning%2C+acute+stressors%2C+and+arousal+reduction+in+Nazca+booby+adults+and+nestlings%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Psychology%22%5BJournal%5D)">Commentary: Yawning, acute stressors, and arousal reduction in Nazca booby adults and nestlings.</a> Frontiers in Psychology. 6, 1654(2015).</li>
<li>Fentress, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+grooming+in+mice+with+amputated+forelimbs%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Development of grooming in mice with amputated forelimbs.</a> Science. 179 (4074), 704-705 (1973).</li>
<li>Nicoletto, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+roles+of+vision+and+the+chemical+senses+in+predatory+behavior+of+the+skink%2C+Scincella+lateralis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Herpetology%22%5BJournal%5D)">The roles of vision and the chemical senses in predatory behavior of the skink, Scincella lateralis.</a> Journal of Herpetology. 19 (4), 487-491 (1985).</li>
<li>Fehér, O., Wang, H., Saar, S., Mitra, P. P., Tchernichovski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((De+novo+establishment+of+wild-type+song+culture+in+the+zebra+finch%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">De novo establishment of wild-type song culture in the zebra finch.</a> Nature. 459 (7246), 564-568 (2009).</li>
<li>Kapitány, R., Nielsen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+yawns+really+contagious%3F+A+critique+and+quantification+of+yawn+contagion%5BTitle%5D)+AND+%22Adaptive+Human+Behavior+Physiology%22%5BJournal%5D)">Are yawns really contagious? A critique and quantification of yawn contagion.</a> Adaptive Human Behavior Physiology. 3 (2), 134-155 (2017).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+modulation+of+pain+as+evidence+for+empathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social modulation of pain as evidence for empathy in mice.</a> Science. 312 (5782), 1967-1970 (2006).</li>
<li>Gallup, A. C., Swartwood, L., Militello, J., Sackett, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+evidence+of+contagious+yawning+in+budgerigars+%28Melopsittacus+undulatus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Cognition%22%5BJournal%5D)">Experimental evidence of contagious yawning in budgerigars (Melopsittacus undulatus).</a> Animal Cognition. 18, 1051-1058 (2015).</li>
<li>Campbell, M. W., de Waal, F. B. Methodological Problems in the Study of Contagious Yawning. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCampbell%2C+MW+%22The+mystery+of+yawning+in+physiology+and+disease%22">The mystery of yawning in physiology and disease</a>. Walusinski, O. , Karger Publishers. Basel. 120-127 (2010).</li>
<li>R Development Core Team. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22R%3A+A+language+and+environment+for+statistical+computing%22">R: A language and environment for statistical computing</a>. , R Foundation for Statistical Computing. Vienna, Austria. http://www.R-project.org (2009).</li>
<li>Moyaho, A., Beristain-Castillo, E. Experimental Design: Basic Concepts. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMoyaho%2C+A+%22Encyclopedia+of+Animal+Behavior%22">Encyclopedia of Animal Behavior</a>. Choe, J. C. 3, Second Edition, Academic Press. 471-479 (2019).</li>
<li>Urbá-Holmgren, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genotypic+dependency+of+spontaneous+yawning+frequency+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Genotypic dependency of spontaneous yawning frequency in the rat.</a> Behavioral Brain Research. 40 (1), 29-35 (1990).</li>
<li>Smith, M. L., Hostetler, C. M., Heinricher, M. M., Ryabinin, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+transfer+of+pain+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Social transfer of pain in mice.</a> Science Advances. 2, e1600855(2016).</li>
<li>Joly-Mascheroni, R. M., Senju, A., Shepherd, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dogs+catch+human+yawns%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Dogs catch human yawns.</a> Biology Letters. 4 (5), 446-448 (2008).</li>
<li>Barthalmus, G. T., Zielinski, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenopus+skin+mucus+induces+oral+dyskinesias+that+promote+escape+from+snakes%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Xenopus skin mucus induces oral dyskinesias that promote escape from snakes.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 30 (4), 957-959 (1988).</li>
</ol>

המחברים אינם מצהירים על ניגודי אינטרסים.

ישנם שלבים קריטיים בשיטה שיש לקחת בחשבון כדי להשיג תוצאות מוצלחות. חולדות מוכרות חייב לחלוק בכלובים בבית לפחות 1.5 חודשים לאחר הגמילה ולפני הפעלת ניסויים. עם זאת, חולדות לא מוכרות חייבות לחיות בכלובים ביתיים נפרדים. בשני המקרים, זוגות העכברושים חייבים לבוא מתוך מטות שונות, אך להיות דומים ככל האפשר לגילם. לגבי כלובי התצפית, החורים שלהם צריכים להתאים לאלה שבחוצצים, כי זו הדרך היחידה לערוב למגע הריח בין העכברושים. החוצצים, מצד שני, צריכים להיות ברורים מספיק כדי להבטיח מגע חזותי או אטום מספיק כדי להבטיח שום קשר חזותי. מחיצת ...

באופן מסורתי, התנהגות התקשורת נחקרה משתי נקודות מבט. מנקודת מבט אחת, ethologists להתבונן ולתעד את ההתנהגות של בעלי חיים בהגדרות טבעיות ולנסות לזהות את הערך האדפטיבית שלה1. התחושה המסוימת או החושים המעורבים לא היו האינטרס העיקרי של מחקרים אלה. מנקודת מבט אחרת, פיזיקולוגים מעוניינים יותר להתיר את המנגנונים שבהם בעלי החיים מתקשרים1; מכאן, לימודי מעבדה סיפקו שיטות להתמודדות עם התפקיד שדפוסי החישה מנגנים בתקשורת2,3. שתי הפרספקטיבות הללו אכן משלימות, משום שהידע הן על הערך הגמיש והן על מנגנונים מיידיים יש צורך להבין הבנה מקיפה של התנהגויות תקשורת בחיי החברה.
התנהגות מפהק היא מרכיב בולט ברפרטואר התנהגותי במספר מינים של בעלי חוליות4, החל מדגים לפרימטים5. ניתן לתאר אותה כפתיחה איטית של הפה והתחזוקה של העמדה הפתוחה שלה, ולאחריה סגירה מהירה יותר של הפה5. משך כל הרצף תלוי במין; לדוגמה, פרימטים מפהק למשך זמן רב יותר מאשר מינים שאינם פרימטים6. במינים רבים, כאשר בני האדם הם יוצאי דופן, הזכרים נוטים לפהק בתדירות גבוהה יותר מאשר נקבות7. תכונה זו עשויה להיות מתחת לפונקציית התקשורת האפשרית של הפיהוק, למרות שדפוסים רגילים של הפיהוק והתדר היומי שלה עשויים גם הם להציע פונקציה פיזיולוגית. בחולדות, הפיהוק הספונטני עוקב אחר קצב מעגלי, עם פסגות של תדר גבוה המתרחשים בבוקר ואחר הצהריים8,9.
תכונה מעניינת אחת של התנהגות מפהק היא שזה יכול להיות מעשה מדבק (כאשר הגירוי שחרור של התנהגות במקרה היא חיה אחרת המתרחשת באותה הדרך10) בכמה מינים של בעלי חוליות11,12, 13,14,15,16, כולל ציפורים17 ו מכרסמים18. יתר על כן, הראיות האחרונות הראו כי מפהק מדבקת עשוי לשקף תפקיד בתקשורת, כי הפיהוק של עכברוש אחד יכול להשפיע על המצב הפיזיולוגי של האחר כאשר נחשף הריח רמזים19. עם זאת, בין אם לפהק יש תפקיד מתקשר הוא עדיין תחת הדיון20,21, וניתוח מפהק מדבקת הוא צעד ראשון חיוני כדי לפתור את הבעיה.
מצד שני, הפיהוק המדבק נקשר ליכולת של בעל חיים להזדהות עם הפרספקטיבות של בעלי חיים אחרים; מכאן, אנשים קרובים יותר סביר יותר להראות הזיהום4. השערה זו נבדקה לעתים קרובות במצבי מעבדה שבהם בעלי חיים מוצגים עם גירויים מפהק בוידאו12,13; לכן, הזיהום יכול להתרחש רק באמצעות רמזים חזותיים. חקירות אחרות העריכו פיהוק מדבקת בתנאים טבעיים יותר באמצעות קבוצות של בעלי חיים14,15. הבעיה העיקרית לכך היא שבעלי חיים בעלי אינטראקציה חברתית מגיבים לעתים קרובות לרמזים ולאותות החלפה המעבירים דרך שילובים של שיטות חישה. לשלול את החושים הממשיים המעורבים בהתנהגות נתונה מההשפעות המשולבות שלהם היא לא תמיד משימה קלה. בדרך כלל, חוקרים פרמקואובולוגית או בניתוח לעכב את השימוש של בעל חיים במובן נתון, ולאחר מכן להסיק את התפקיד של התחושה הזאת בהתנהגות הרלוונטית2,3,18,22. למרבה המזל, ישנן שיטות נוספות בהן רק מחסומים פיזיים משמשים כדי לאפשר או לעכב את התקשורת בין בעלי חיים23,24,25, ובכך להשיג תוקף ביולוגי גדול יותר.
השיטה המוצעת כאן תוכננה במיוחד כדי ללמוד מפהק מדבקת בחולדות מוכרות ולא מוכרות בסביבה חברתית. על פי ההשערה האמפטית, הקבוצה הקודמת צריכה להיות חשופה יותר לפיהוק מדבק. השיטה אינה דורשת מבעלי החיים להיות מונעים באופן כירורגי או תרופתי של כל החושים. במקום זה, זה עובד על ידי הצבת חולדות בכלובים סמוכים עם חורים ומפריעה פיזית התקשורת שלהם באמצעות חוצצים ברורים או אטומים עם או בלי חורים. כך, ארבעה מבחנים ניתן לבחון: (1) הריח תקשורת (OC, מחורר המפריד אטום), (2) תקשורת חזותית (VC, מפריד ברור לא מחורר), (3) תקשורת חזותית וריח (VOC, מחורר ברור מנוקב), ו (4) לא תקשורת חזותית ולא ריח (NVOC, מפריד אטום ללא מחורר). לכן, החוקרים יכולים להשוות את התרומה היחסית של חוש הריח, ויזואלית, ובמידה מסוימת, רמזים שמיעתי הדבקה מפהק. גישה זו אינה חדשה, כמו שיטות דומות שימשו כדי לבודד את החושים הכרוכים בתקשורת מסויימת בבעלי חיים כגון לטאות23 ועכברים26. למעשה, גאלופ ועמיתים27 השתמשו בשיטה דומה כדי להדגים את התפקיד של רמזים חזותיים מדבקת מפהק ב budgerigars. התכונות העיקריות של שיטות אלה הן הדמיה של הקשר החברתי ואת הלחץ המינימלי שנגרם על החיות. יתרה מזאת, השימוש בבעלי חיים באינטראקציה מגביר את תוקפו הביולוגי של המסקנות.
ישנן מספר דרכים למדוד מדבק מפהק25,28. ד ר סטפן א. ג. לאה (תקשורת אישית, 2015) עזר לנו להתאים מספרית שיטה שעבדה בעבר על ידי primatologists13,14 עבור ניתוח מוקדם יותר של הנתונים המשמשים כאן18. המוצג בפרוטוקול זה הוא גרסה משופרת של שיטה זו עם מגוון רחב יותר של יישומים. הוא כולל שקלול את המספר הכולל של הצרחה של החולדה, בתוך ומחוץ לחלון זמן נתון, ביחס לזמן ההתבוננות המתאים לפיהוק בתוך ומחוץ לחלון הזמן.
לדוגמה, אם מניחים שחולדות A ו-B נצפו במשך 12 דקות, הפיהוק שלהם נרשם לדקה הקרובה ביותר, וחלון 3 דקות של זמן מוגדר למדוד מדבק מידבק. לאחר מכן, רצפי הפיהוק הבאים עבור כל אחד מאותם חולדות נחשבים: עכברוש A (0, 0, 0, 1, 0, 0, 2, 0, 0, 0, 2, 1) ו-B עכברוש (0, 1, 1, 0, 1, 1, 0, 0, 0,0, 0, 3). יש לציין כי כל מספר (0-3) מקביל למספר הפיהוק הבקיע בכל דקה. עבור עכברוש A, במהלך הדקות 1, 10, ו -11 (מספרים באותיות מודגשות), עכברוש B אינו מפהק בתוך 3 דקות לפני (חלון הזמן שנבחר) או בתוך אותו דקה. . בדקות האלה, עכברוש. מפהק לגמרי 2 פעמים לכן, שיעור פיהוק של עכברוש ללא גירוי מפהק (שיעור הפיהוק לא לאחר הפיהוק) הוא 2/3 (כלומר, 0.67 פיאנס/מינימום). ב 9 דקות הנותרות, עכברוש B מפהק לפחות פעם אחת באותה דקה או 3 הדקות הקודמות. חולדה-הצרחה הכוללת ארבע פעמים ב -9 הדקות הללו. לכן, שיעור הפיהוק של חולדה A בתגובה גירוי מפהק (שיעור הפיהוק לאחר הפיהוק) הוא 4/9 (כלומר, 0.44 פיאנס/דקות). היישום של אותו הליך כדי עכברוש B תשואות שיעור שאינו לאחר הפיהוק מפהק של 2/3 (כלומר, 0.66) ושיעור הפיהוק לאחר הפיהוק של 5/9 (0.55).
מצד שני, אם מפהק נרשם לנקודה העשרונית הקרובה ביותר של דקה, הדבקת הפיהוק תגרום לזמן מותאם לאחר הפיהוק. לדוגמה, אם שעות הפיהוק הבאות נרשמות לאורך 12 דקות של תצפית על חולדות A ו-B: עכברוש A (2.3, 5.1, 5.8, 10.4, 10.8, 11.1) ו-rat B (1.2, 2.4, 4.5, 5.1, 11.2, 11.6, 11.8). עבור עכברוש A, תקופות הזמן שבהן עכברוש B לא מפהק בתוך העבר 3 דקות טווח מ -0 עד 1.2 דקות ו מ 8.1 ל 11.2 דקות (כלומר, 3.1 דקות), אשר מניב סך של כ-4.3 מינימום של זמן שאינו לאחר הפיהוק. מספר הפעמים שעכברוש מפהק בתקופה הזאת הוא שלושה (מספרים באותיות מודגשות), כך שיעור הפיהוק שאינו לאחר הפיהוק הוא 3/4.3 (כלומר, 0.69), ואילו שיעור הפיהוק לאחר הפיהוק הוא 3/7.7 (כלומר, 0.38; המכנה מ-12-4.3 דקות). באופן דומה, עבור עכברוש B, תקופות הזמן שבהן עכברוש A לא מפהק בתוך העבר 3 דקות טווח מ -0 עד 2.3 דקות ו מ 8.8 ל 10.4 min, אשר מניב סך של 3.9 min. מספר פעמים עכברוש B מפהק בתוך תקופות אלה הוא אחד, כך שיעור הפיהוק שאינו לאחר הפיהוק הוא 1/3.9 (כלומר, 0.25). לפיכך, שיעור הפיהוק לאחר הפיהוק הוא 6/8.1 (כלומר, 0.74).
בעוד התאמה כמעט ההסכמה בהתנהגות הוא קריטריון אידיאלי כדי להדגים את הנוכחות של המצאות, היבטים כגון האילוצים על מה אדם משתתף, זמן התגובה גירוי, התפלגות ההתנהגות לאורך זמן (למשל, מפהק עלול להתרחש בפרקים), והזמן להפוך את ההגדרה הניסיונית כל להצמיח הבדלים המינים, מה שמקשה על השימוש בחלון זמן ייחודי. זו עשויה להיות הסיבה מדוע החוקרים השתמשו בחלונות זמן שמשתנים בין שניות5 למספר דקות11, אשר יוצר בעיות בעת השוואת תוצאות28. בגלל זה, הוא מוצע לחזור על ההליך המתואר לעיל עבור מגוון של חלונות זמן לקבל עקומות הדבקה מפהק ולהשוות את העקומות הדבקה הפיהוק בין המינים.
עקומות הדבקה מקבילה של פיהוק ניתן להשוות על ידי הפצת באופן אקראי את מספר הפימות שנצפו עבור כל חולדה על פני תקופת התצפית. כך, השיטה המוצעת כדי למדוד הדבקה פיהוק מציעה שני סוגים של פקדים: שיעור הפיהוק (1) המתרחשים מחוץ לחלון הזמן (זמן שאינו לאחר הפיהוק) ו (2) עקומת מלאכותי הדבקה השיגה מתוך התפלגות אקראית של מספר הצרחה. לפיכך, גישה זו לניתוח הדבקה מפהק היא צעד קדימה מהליכים אחרים, כגון אלה המשווה בין אחוז או תדירות הפיהוק בתוך חלון זמן בודד שמתרחש מחוץ לחלון זה25, מבלי לקחת בחשבון את ה מסגרות לפעמים בפועל. השיטה משלימה תוכנית מבוססת R29 כדי לחשב בנוחות ובאופן אובייקטיבי את ההסתברות לפיהוק מדבק עבור חלון זמן אחד או יותר.
כדי להמחיש את השימושיות של שיטה זו והיתרונות של התוכנית מבוססת R, ערכת נתונים ממחקר שפורסם בעבר18 משמש. המצב הניסיוני כללה 144 עכברים זכרים שהוקצו למצב מוכר או לא מוכר. החולדות בכל מצב ניסיוני היו מחולקת לארבע קבוצות של תשעה זוגות ונחשפו לכל אחד מארבעת מצבי המבחן שתוארו לעיל. התנהגויות מפהק של החולדות בכל מצב ניסיוני ומצב בדיקה נרשמו לאחר מכן על פני תקופה של 60 דקות.

<table><tbody><tr><td>מחיצות אקריליות</td><td>בעבודת יד</td><td>לא זמין</td><td>לשני חוצצים, אחד שקוף ואחד אטום, יהיו 24 חורים כל אחד. בשני המחיצות האחרות, אחת שקופה ואחת אטומה, לא יהיו חורים. ראה את הטקסט הראשי לפרטים על הבנייה.</td></tr><tr><td>תוכנית מבוססת R</td><td>Benem&eacute; ריטה אוניברסיטה אוטית; נומה דה פואבלה</td><td>לא זמין</td><td>זוהי התוכנה המשמשת להערכת הדבקת פיהוק בחולדות. עיין בטקסט הראשי לקבלת מידע אודות אופן השימוש בתוכנית.</td></tr><tr><td>דפי נתונים</td><td>המשתמש יכול לפרט אותם</td><td>לא זמין</td><td>טפסים אלה ישמשו את הצופה לתעד את תדירות התנהגות הפיהוק על ידי צפייה בהקלטות הווידאו. לחלופין, ניתן להשתמש במחברת בתנאי שתעקבו אחר ההצעות שניתנו בטקסט הראשי.</td></tr><tr><td>מחשב שולחני</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>ודא שלמחשב יש כרטיס מסך המסוגל לעבד בנוחות את הקלטות הווידאו של התנהגות הפיהוק.</td></tr><tr><td>מצלמות וידיאו דיגיטליות</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>הן ישמשו להקלטת וידאו של התנהגות הפיהוק של כל זוג חולדות; יהיו 2 זוגות חולדות בכל מפגש ניסוי.</td></tr><tr><td>כונן הבזק</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>כל הפעלה ניסיונית תימשך 60 דקות, ולכן תזדקק לזיכרון מספיק כדי לאחסן את הקלטת הווידאו.</td></tr><tr><td>כלובי זכוכית</td><td>בעבודת יד</td><td>לא זמין</td><td>לכל כלוב (19 X 19 X 10 ס"מ גובה) יהיו 24 חורים (קוטר 0.5 ס"מ) היוצרים שלוש שורות באמצע אחד הצדדים שלו. ראה את הטקסט הראשי לפרטים נוספים על בנייתם. מומלץ לייצר כלוב אחד נוסף למקרה שאחד מהם נשבר בטעות.&nbsp;</td></tr><tr><td>טושים</td><td>שארפי או כל יצרן אחר</td><td>לא זמין</td><td>טושים קבועים למספור החולדות. ראו את הטקסט הראשי כדי לראות דרך אחת להשתמש בסמלי ציור על זנב החולדה.</td></tr><tr><td>עפרונות</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>הם משמשים את הצופה כדי לתעד את תדירות הפיהוק. חשוב שהצופה הוכשר בעבר לזהות התנהגות פיהוק ולהפעיל את מערכת נגן הווידאו.</td></tr><tr><td>R תוכנה</td><td>R פיתוח צוות ליבה</td><td>לא זמין</td><td>להורדה R בכתובת: http://cran.r-project.org/&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>מוטות עץ דמויי מסילה</td><td>בעבודת יד</td><td>אינם זמינים</td><td>הם יתקבעו באמצע יריעת העץ המלבנית&nbsp; ויוצרים מסילה, שם מונחת יריעת עץ שנייה. ראה את הטקסט הראשי להוראות נוספות לבנייה.</td></tr><tr><td>שולחן מלבני</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>זהו השולחן (כ-2X1 מ') שבו יוצב השולחן ההפוך בצורת T לביצוע התבוננות בהתנהגות הפיהוק.</td></tr><tr><td>חולדות זכר Sprague-Dawley</td><td>כל ספק מקומי של חיות מעבדה</td><td>לא זמין</td><td>תשעה זוגות של חולדות זכרים לכל מצב בדיקה נחוצים לכל קבוצה, חולדות מוכרות ולא מוכרות, מכיוון שעם גודל מדגם זה השונות הבין-אישית שעלולה להתקיים בתדירות הפיהוק לא תשפיע באופן חמור על המסקנות הנובעות מהניתוח הסטטיסטי שבוצע לנתונים. &nbsp; &nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>תוכנת הגיליונות האלקטרוניים</td><td>Microsoft</td><td>לא זמינה</td><td>Excel תהיה התוכנה המשמשת לאחסון הקלטות הפיהוק שהוקלטו בתחילה בגיליונות הנתונים. תקן את הטקסט הראשי לקבלת הוראות לגבי הדרך המומלצת לביצוע התמלול.</td></tr><tr><td>ניירות סינון מרובעים</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>הם משמשים לכיסוי תחתית הכלוב.</td></tr><tr><td>חצובות</td><td>כל יצרן</td><td>לא זמין</td><td>הם ישמשו לקיבוע מצלמות הווידאו מול כל זוג כלובי תצפית.</td></tr><tr><td>שולחן עץ הפוך בצורת T</td><td>בעבודת יד</td><td>לא זמין</td><td>קרא את ההוראות בטקסט הראשי כדי לראות את דרך בנייתו. אם מעדיפים, ניתן להשתמש בחומר שונה מעץ. ודא שכל חומר עמיד ככל האפשר להעברת אולטרסאונד, שבו החולדות עשויות להשתמש לתקשורת. &nbsp;</td></tr></tbody></table>

שיטה מעבדה למדוד מדבק מפהק בחולדות

A Laboratory Method to Measure Contagious Yawning in Rats

תקשורת היא היבט חיוני של חיי חברה בעלי חיים. בעלי חיים יכולים להשפיע אחד על השני ולהתאחד בבתי ספר, להקות ועדרים. תקשורת היא גם דרך המינים אינטראקציה במהלך חיזור ואיך יריבים ליישב סכסוכים בלי להילחם. עם זאת, יש כמה דפוסי התנהגות שקשה לבחון את קיומו של הפעילות הכרוכה בתקשורת, משום שכמה סוגים של שיטות חישה מעורבות. לדוגמה, הפיהוק המדבק הוא מעשה תקשורת ביונקים שעלולים להתרחש באמצעות ראייה, שמיעה, ריח או שילוב של חושים אלה, בהתאם לשאלה אם החיות מוכרות זו לזה. לכן, כדי לבחון השערות על התפקיד האפשרי של התנהגויות כאלה, יש צורך בשיטה מתאימה כדי לזהות את השיטות התחושתיות המשתתפות.
השיטה המוצעת כאן מבקשת לקבל עקומות הדבקה מפהק לחולדות מוכרות ובלתי מוכרות ולהעריך את ההשתתפות היחסית של השיטות החושיות החזותיות והריח. השיטה משתמשת בחומרים זולים, ובשינויים משניים, ניתן להשתמש בה גם עם מינים אחרים של מכרסמים כגון עכברים. באופן כללי, השיטה כרוכה בהחלפת חוצצים ברורים (עם או בלי חורים) עם חוצצים אטומים (עם או בלי חורים) המאפשרים או למנוע תקשורת בין חולדות הנמצאות בכלובים סמוכים עם חורים בצדדים סמוכים. בהתאם, ניתן לבחון ארבעה תנאים: תקשורת הריח, תקשורת חזותית, הן תקשורת חזותית וריח, וגם תקשורת חזותית ולא ריח. כאשר האינטראקציה החברתית מתרחשת בין העכברושים, תנאי הבדיקה הללו מדמות מה שעלול להתרחש בסביבה טבעית. במובן זה, השיטה המוצעת כאן יעילה יותר מאשר שיטות מסורתיות המסתמכות על מצגות וידאו שתוקפם הביולוגי יכול לעורר חששות. עם זאת, הוא אינו מפלה בין התפקיד הפוטנציאלי של שמיעה ותפקידים של ריח וחזון בפיהוק מדבקת.

העכברושים נבחרו משושלת משנה שנוצרה בעבר משני עכברי הג-דאולי שנבחרו לפיהוק תדיר (כ -22 פינקרים לשעה31). עם זאת, תשעה זוגות של מוכר ותשעה זוגות של חולדות גברים מוכרות (בין 2.5 ו-3 חודשים של גיל) השתמשו בכל מצב מבחן פיהק כ 12 פעמים בשעה, בממוצע18. לכן, מצבי הבדיקה כדי למדוד הדבקה הדבקת מפהק חלקית מעכבות התנהגות.
הזיהום הפיהוק נמדד על פני מגוון של חלונות זמן שונים מ 1 עד 10 דקות. <stro...

השיטה המתוארת כאן שואפת להשיג עקומות הדבקה מפהק בזוגות של חולדות גבריות מוכרות או לא מוכרות. כלובים עם חורים המופרדים באמצעות מחיצות ברורות או אטומות עם (או ללא) חורים משמשים כדי לזהות אם חזותי, חוש הריח, או שני סוגי הרמזים הסנסוריים יכולים לעורר מדבקת פיהוק.

Communication is an essential aspect of animal social life. Animals may influence one another and come together in schools, flocks, and herds. ...

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי כי הוא מספק דרך קלה לחקור אילו חושים עשויים להיות מעורבים פיהוק מדבק בחולדות. השימוש בהליך לא פולשני והזמינות של תוכנת היישום, אשר מאיץ את החישוב למדידת פיהוק מדבק, הם היתרונות העיקריים של טכניקה זו. אנשים שמעולם לא ביצעו טכניקה זו לא צריכים להתמודד עם קשיים גדולים ביישום, בתנאי שהם באופן שיטתי בצע כל צעד ולבקש ייעוץ מקצועי בעת בניית מקרה התצפית.הדגמה חזותית של שיטה זו מסייעת בהבנת ההסדר המרחבי של כלובי התצפית במהלך הניסוי. עוזר למנוע טעויות ייעוד של הטיפולים. הפגנת הליך זה תהיה אוולין Beristain-קסטילו, פוסטדוק מהמעבדה שלי.כדי לקבוע מפגש מבחן, העבר ארבעה חולדות לחדר התצפית בכלובים בודדים. בזמן שבעלי החיים מסתגלים, מניחים שולחן הפוך בצורת T על שולחן מלבני גדול יותר מתחת למנורת תקרה שמדליקה מספיק את החדר. מניחים נייר סינון בתחתית כלוב תצפית, ומ מניחים את הכלובים בזוגות בכל צד של השולחן ההפוך בצורת T.מקם מחיצה בין כל זוג כלובים, והצב אסטרטגית שתי מצלמות וידאו דיגיטליות, כך שכל אחת מהן מתעדת את התנהגות הפיהוק של כל זוג חולדות. לאחר אישור כי מצלמות ההצגמה קבועות גם חצובה מכוונת כראוי לכלובי התצפית, לחבר את מצלמות ההצגמה למחשב שולחני כדי לפקח בו זמנית על ההתנהגות של החולדות. כאשר בעלי החיים התאקלמו במשך 15 דקות, מניחים אותם בכלובי התצפית בהתאם להקצאה שנקבעה קודם לכן, ומגדירים את המיקוד האוטומטי לכל מצלמת וידאו.התחל את הקלטת הווידאו ואת סטופר באותו זמן, לעצור את הקלטת הווידאו בסוף תקופת התצפית 60 דקות. כשהתצפית נגמרת, החזירו את החולדות לכלובי הבית שלהן במתקן החיות עם גישה למזון ומים. לאחר מכן לנקות ביסודיות את כלובי התצפית עם חומר ניקוי רעיל לפני הכנת הניסוי להגדיר לבצע את הפעלות הבדיקה הבאות ליום.לאחר ההפעלה האחרונה, הפעל כל סרטון וידאו על מסך מחשב באמצעות כל מערכת הפעלה רגילה עבור צופה. תן לצופה להציג תחילה כל סרטון כדי להתבונן ולהקליט את התנהגות הפיהוק על גליונות נתונים פעם אחת במהירות רגילה, ואחריו צפייה נוספת במהירויות איטיות יותר כדי להקל על ההתבוננות והדהמה של הפיהוק. כדי להבקיע את הפיהוק, השתמש בקווים אנכיים כדי לייצג את המופע של פיהוק עם הדקה הכתובה ככתב עילי.כאשר כל הפיהוקים כבר הבקיע, לתמלל את רצף הזמן של פיהוקים בכל חולדה לגיליון אלקטרוני. אם הפיהוק נרשם עד הדקה הקרובה ביותר, הזן את מספר הפיהוקים בכל דקה רלוונטית ושתמש באפס כדי למלא את התאים כאשר לא התרחש פיהוק בדקה נתונה. לאחר מכן שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט.אם הפיהוק נרשם למספר העשרוני הקרוב ביותר של דקה, הקלד את הרצף מלמעלה למטה. השתמש ב- NA כדי למלא את החללים הריקים של עמודות העכברוש שבהן מספר הפיהוקים בשורות נמוך מזה של העמודה. עם המספר המרבי של שורות של פיהוקים שתועדו עבור חולדה.לאחר מכן שמור את גליון העבודה כקובץ טקסט. לאחר הזנת כל הנתונים, יבא את קובץ הטקסט לתוך R.Save קודי התוכנית עם קוד הסיומת R והורד את קוד התוכנית הספציפי בהתאם לשאלה אם הפיהוקים נרשמו כמספרים שלמים או כמספרי שבר. לאחר מכן הפעל את התוכנית עבור כל זוג חולדות ואת המספר הרצוי של מסגרות זמן.בסוף הריצה, הפעל את התוכנית שוב באמצעות הפצה אקראית של מספר הפיהוקים מכל חולדה. כדי ליצור עקומות הדבקה מפהקים, השתמש בנתונים שנשמרו בעבר בגיליון האלקטרוני כדי להפחית את שיעורי אי ההדבקה מתעריפי ההדבקה של כל זוג חולדות, חלון הזמן ומצב הבדיקה, תוך הפרדת ניתוח הנתונים שנצפו ונתונים מלאכותיים. בניסוי מייצג זה נמדדה ההדבקה הפיהוק בין חולדות זכריות לא מוכרות על פני מגוון חלונות זמן שנעים בין 1 ל-10 דקות.עקומות ההדבקה הפיהוק האלה מצביעות על כך שרק תקשורת חוש הריח בין חולדות בכלובים עם מחיצה אטומה מחוררת הציגה הדבקה מפהק. מה שניכר מחלון הזמן הרביעי והלאה, שכן מרווח הביטחון של הממוצעים אינו חופף למרווח הביטחון של מספר הפיהוקים שהוקצה באופן אקראי במהלך 60 הדקות. הלהקה ציינה, כצפוי, כי הקצאה אקראית של מספר הפיהוקים בכל חולדה בתקופת התצפית, הפיקה שיעורי פיהוק שהתנווו בערך באפס מבלי להדגים דפוס נראה לעין.בניסוי מייצג זה עם חולדות זכר מוכרות, אף אחד מארבעת מצבי הבדיקה לא עורר הידבקות פיהוק מכיוון שמרווחי הביטחון שלהם חופפים עם רצועת מרווחי הביטחון שנוצרה באופן אקראי. יתר על כן, לא היו הבדלים בין ארבעת מצבי הבדיקה למרות העלייה הכוללת בהדבקה פיהוק על פני 10 חלונות זמן שונה מדרון אפס. זכור לעקוב אחר הזהויות המוכרות והלא מוכרות של החולדות לפרשנות נכונה של התוצאות, ולנקות את כלובי התצפית בין הניסויים.הליך תרופתי עשוי לשמש כדי לחסום תקשורת שמיעתית, ולהפריד לחלוטין את השפעות השמיעה על פיהוק מדבק מן ההשפעות מן החושים האחרים. טכניקה זו סללה את הדרך להשוואת פיהוק מדבק בין המינים הן מבחינת החושים המעורבים והן מבחינת עוצמת התגובה על ידי השוואת עקומות הפיהוק המדבקות. זכור לטפל בזהירות בכלובי התצפית כי הם יכולים בטעות לשבור ולגרום לפציעות.

a-laboratory-method-to-measure-contagious-yawning-in-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

בתגובה לאותות מזון או תרופות לזווג עליות במהלך תקופה של התנזרות זה עשוי להתייחס רגישות מוגברת להתנהגויות הישנות. כאן אנו פרט בהליך להערכת זה "דגירה של השתוקקות" אצל חולדות אשר למילוי עצמי סוכרוז.

שיטה כללית להערכת דגירה של השתוקקות סוכרוז בחולדות

הסרטון מדגים הקלטה של אותות אלקטרואנצפלוגרם (EEG) מגורי חולדות הנגרמים על ידי התקפים. קחו גור שנע בחופשיות עם אלקטרודות המחוברות למערכת איסוף נתונים. רעלן עצבי מנוהל כדי לגרום להתקפים אפילפטיים, ופעילות ההתפוצצות החשמלית המתקבלת מנוטרת באמצעות אות EEG.

רישום התקפים מושרים באמצעות אלקטרואנצפלוגרפיה בגורי חולדות הנעים בחופשיות

מאמר זה מדגים את הביצועים של דיקור סיני, מודלים של אפילפסיה וניתוח שינה במכרסמים. מתוארים הליך הדיקור וזיהוי נקודות הדיקור. פילוקרפין או פנטילנטרזול (PTZ) משמשים לגרימת אפילפסיה. אלקטרוקורטיקוגרמה (ECoG), אלקטרומיוגרמה (EMG), טמפרטורת המוח ורישומי פעילות תנועתית משמשים לניתוח שינה.

מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

פרוטוקול זה מתאר מודל חדש שבאמצעותו חולדות בריא יכול חוזה דיכאון על נתון periodthrough הדבקה על ידי חשיפה כרונית בלתי צפויות הדגיש חולדות (CUS).

שיטה חדשה עבור גרימת התנהגות כמו דיכאון אצל חולדות

מאמר זה מדגים יישום מתוקננת של טיפול שובבה, טכניקה דגדוגים כחיקוי עכברוש התגוששות. טכניקה זו נמצא יעיל להפחתת התגובות מחריד לבני, יצירת חיובית להשפיע כאשר חולדות מטופלות לביצוע פעולות נפוצות גידול וטיפול רפואי ומחקר הליכים כגון הזרקה.

מדגדג, טכניקה להשראת השפעה חיובית בעת טיפול חולדות

בלוטת הרוק hypofunction הוא תוצאה תכופים של מחלות אוטואימוניות והקרנות. לשחזור הערכה של תפקוד בלוטת הרוק במודלים של העכבר המחלות האלה היא אתגר טכני. . הנה, מתוארת שיטה פשוטה למדידה מדויקת, לשחזור של ייצור רוק בעכברים.

שיטת המדידה של תפקוד בלוטת הרוק בעכברים

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול להציג מודל עכברוש של מרכזי עייפות בעזרת שונה פלטפורמה מרובים שיטה (MMPM).

חולדה מודל מרכזי עייפות בעזרת ששונה שיטת פלטפורמה מרובים

אנו מתארים שיטה תפוקה גבוהה של מדידת שינה באמצעות פיקוח הביתה כלוב מבוסס-פעילות. שיטה זו מציעה יתרונות על פני שיטות מסורתיות מבוססות-EEG. זה טוב מאומת מצפני משך השינה הכולל והוא יכול להיות כלי רב עוצמה כדי לפקח על שינה במודלים מכרסם של מחלות אנושיות.

נחישותם לא פולשנית, תפוקה גבוהה של משך השינה בחולדות

פרוטוקול זה מציג שיטה של הכלוב שינוי חולדות באמצעות השלט הדרכה. חולדות למד את ההתנהגות הרצויה, לא רק על ידי הדרכה ישירה, אלא גם על ידי למידה תצפיתית. היישום של פרוטוקול זה מהיר וקל עשויה לסייע לשיפור רווחתו והיגיינה במתקני מכרסמים.

באמצעות השלט ההדרכה והתבוננות חברתית ללמד חולדות בהתנדבות לשנות את הכלובים

באמצעות וידאו-EEG-א.ק.ג-אוקסימטריה-קפנוגרפיה בו זמנית, פיתחנו מתודולוגיה להערכת הרגישות של מודלים ארנב לפתח הפרעות קצב והתקפים עוררו. מערכת הקלטה חדשנית זו מקימה פלטפורמה לבדיקת היעילות והבטיחות של הטיפולים ויכולה ללכוד את המפל המורכב של אירועים רב מערכתיים שמגיעים לשיאם במוות פתאומי.

ניטור רב מערכתי לזיהוי התקפים, הפרעות קצב וקום נשימה בארנבים מאופקים מודעים

למד שיטה לא פולשנית למדידת מדבק מפהק בזכרי חולדות באמצעות רמזים חזותיים ואולפקטוריים. פרוטוקול זה מאפשר לחוקרים לחקור מנגנונים חושיים של התנהגות חברתית בבעלי חיים.

שיטה מעבדה למדוד מדבק מפהק בחולדות

גלה סרטונים נוספים