הערכה של החצי הכדור השני עם הקלטה הפוטנציאלי השדה המקומי בקליפת המנוע המשני של עכברים

טכניקה זו יכולה לשמש כדי לסקור כמה מאפיינים בסיסיים של אלקטרופיזיולוגיה בין-רגולציה עבור חצי הכדור לאורך, כמו גם את הקישוריות, כיווניות, צימוד. מדידה אלקטרופיזיולוגית היא שיטה רגישה ויעילה להערכת בעלי החיים, פעילויות עצביות. פרוטוקול זה מספק דרך טובה יותר לתמוך בסנכרון של אותות חשמליים.

ההבנה של המנגנון הבסיסי של שינוי אפשרי של המוח lateralization במחלת אלצהיימר פתוגנזה, עשוי לספק תובנות חדשות לתוך סמנים ביולוגיים פוטנציאליים לטיפול באלצהיימר. לפני הניתוח, לאשר את עומק ההרדמה של העכבר, על ידי ביצוע זנב או קמצוץ בוהן עם מדפים. לאחר מכן, מקם את העכבר במנה הסטריאוטוקסית ותקן את ראשו.

החל משחה על שתי העיניים כדי לשמור אותם לחים. לאחר מכן, לגלח את הראש, ולעקר את האזור. בצע חתך קטן של 12 עד 15 מילימטרים, באמצע האזור המגולח.

באמצעות מדפים, בעדינות למשוך את הקרקפת הרחק קו האמצע. לאחר מכן, להפריד את העור בעדינות, ולהסיר את הרקמה שיורית. לנקות את הגולגולת, באמצעות ניצני כותנה מצופים מי חמצן.

תחת מיקרוסקופ סטריאו, לקדוח שני חורים קטנים, של אחד עד 1.5 מילימטרים radii, משני הצדדים השמאליים והימין של הגולגולת, כדי לאפשר החדרה של microelectrodes הקלטה לתוך אזורי M2. בזהירות להסיר את הדורא מאטר עם מחט טונגסטן. לאחר מכן, הכנס שני מיקרואלקטרודות הקלטה נפרדות, מלאות בנתרן כלוריד 0.5 טוחן, לתוך החורים, בזווית של 60 מעלות, באמצעות מיקרומניפולטורים מכניים.

עבור הקלטת LFP, הנמיך באיטיות את אלקטרודות הזכוכית השמאלית והימין אל קואורדינטות M2. לבקרת איכות, בחן את ההתנגדות של כל אלקטרודה, באמצעות מגבר דיפרנציאלי. לאחר מכן, להגדיר את תהליך ההקלטה על 0.1 הרץ גבוה לעבור, ו 1000 הרץ נמוך לעבור, עם 1000 פעמים הגברה.

לאסוף את הנתונים LFP גלם דיגיטציה במצב יציב, לפחות 60 שניות, עם העכבר נושם באופן שווה בשתי נשימות לשנייה, תחת הרדמה. לאחר ההקלטה, הרם באיטיות את האלקטרודות אל מחוץ למוח. שמור את הנתונים ותנתח במצב לא מקוון, באמצעות תוכנת הניתוח.

כדי לבצע ניתוח חוצה מתאם, בתוכנת הניתוח, לחץ על ניתוח ולאחר מכן על מתאם צורת גל וייבא את הנתונים. לאחר מכן, הקצה אות ערוץ צורת גל אחד לערוץ הראשון והשני כהפניה. הגדר רוחב כשתיים והיסט כאחד.

לאחר מכן, הגדר את משך הזמן של שני LFPs ל- 100 שניות, על-ידי בחירת זמן ההתחלה ושעות הסיום. לאחר מכן, לחץ על לחצן התהליך כדי לבצע ניתוח מתאם צולב. לחץ על קובץ, יצא כ ולאחר מכן שמור את תוצאות המתאם הצולב המתאימות לתרשים המוקפץ שנוצר בתבנית טקסט.

לאחר מכן, הסר את ערכי המתאם בזמן בפיגורים בטווח אפס פלוס ומינוס 01 שניות ולאחר מכן טפל בשאר הנתונים חוצי המתאם. כדי לבצע ניתוח קוהרנטיות, הפעל את הנתונים בתוכנת הניתוח. לאחר מכן, סדר את שני אותות ה- LFP כערוצי צורת הגל הראשונה והשניה ולאחר מכן הגדר את ערך גודל הבלוק כ- 4096.

גודל בלוק פירושו מספר נקודות הנתונים המשמשות בראשון עבור המרה אמיתית. ככל שגודל הבלוק גדול יותר, כך רזולוציית התדר טובה יותר. הזז את הקווים המנוקדים באופן ידני, כדי להבטיח את דיוק הזמן עבור אותות בשני הערוצים מוגדרים כאותה תקופה.

לחץ על לחצן הוסף אזור כדי לטעון את האזור ולבצע ניתוח קוהרנטיות. לאחר מכן לחץ על קובץ ושמור בשם, כדי לשמור את תוצאות הקוהרנטיות המתאימות לתרשים המוקפץ שנוצר בתבנית טקסט. כדי לראות אם פתולוגיה מוקדמת של מחלת אלצהיימר פוגעת ביכולת של חצי הכדור לצד השני, LFPs חוץ תאיים נרשמו M2 שמאלה וימינה של עכברי APP / PS1 ובקרות סוג פראי, ואת המתאם הצולב שלהם נותח.

בעכברים מסוג פראי, התוצאות הראו כי המתאם הממוצע בין LFPs שמאלה וי הימנית בפיגור זמן חיובי היה שונה באופן משמעותי מזה בזמן שלילי מפגר, מה שמסבך את קיומם של בלתי סימטריות hemispheric באזורי M2 של פקדי סוג הבר. לשם השוואה, LFPs שמאלה וי הימנית של עכברי APP/PS1 הראו מסונכרן גבוה יותר בתחום הזמן, מה שמרמז על הפחתה של א-סימטריה בין M2 שמאלה וי הימנית. תנודות גמא מסוננים לאחר מכן מ- LFPs וניתוח קוהרנטיות בוצע כדי למדוד את הדמיון של אותות חשמליים בטווח תדר הגמא. התוצאה הראתה כי קוהרנטיות הגמא בין M2 שמאלה וימית בעכברים APP/PS1 היה גבוה משמעותית מזה בעכברים מסוג פראי, המציין סנכרון גבוה יותר, וכתוצאה מכך מופחתת רב-שנתיזציה בין M2 שמאלה ויטן בעכברים APP/PS1.

אורתאן רעיל ומסרטן, אז בבקשה תמיד להיות זהיר, ופעל בהתאם לתקנות הבטיחות בעת הטיפול בו. חשוב מאוד לבדוק את עומק ההרדמה מדי שעה, על מנת להבטיח LFPs יציב להיות מוקלט. תהליך ההקלטה והניתוח יכול להיות מיושם על מסלולי מוח אחרים, במיוחד עבור מעבדות אשר אין מערכות הקלטה רב ערוצית בבעלי חיים נעים בחופשיות.