Name: פוטותרפיה יומי עם אור אדום כדי לווסת קנדידה אלביקנס Biofilm צמיחה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 6 s
Description: למד כיצד פוטותרפיה באור אדום ב-635 ננומטר משפיעה על צמיחת ביופילם של Candida albicans לאורך 48 שעות. שיטה זו מציעה גישה חדשנית לטיפול בזיהומים פטרייתיים עמידים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים ד ר פאולה דה Silveira, ד ר Cecília בן מלונות שבדקתי Araújo דה קוסטה, שון מ מאולה, שיין מ מאולה, ד ר מערל (ש ע) Janal, Iriana Zanin ד ר לפיתוח של מחקר זה. אנו גם להכיר את ד ר אלכסנדר ד ג'ונסון (UCSF) עבור תרומת המתח שנותחו במחקר זה.

1. הכנת תרבות המדיה
<ol><li>להכין sabouraud דקסטרוז אגר (SDA). להשעות 65 גר' SDA בתוספת כלורמפניקול (50 מ"ג/ליטר) ב- 1,000 מ ל מים מזוקקים. מרתיחים להתמוסס המדיום לחלוטין. לחטא על ידי autoclaving ב 15 PSI (121 מעלות צלזיוס) במשך 30 דקות מגניב ל 45-50 מעלות צלזיוס. מערבבים היטב ויוצקים 20 מיליליטר SDA לתוך צלחות פטרי סטריליות (גודל: 100 מ"מ x 15 מ"מ).</li>
	<li>הכנת שמרים חנקן הבסיס (YNB) בינוני בתוספת 100 מ מ גלוקוז על ידי ערבוב 6.7 גרם של YNB ו- 18 גרם דקסטרוז 1,000 מ של מים הנדסה גנטית. לערבב שימוש קדירות, לעקר את המדיום באמצעות מערכת מסנן ואקום 0.22 מיקרומטר.</li>
	<li>הכן RPMI על ידי ערבוב 10.4 גרם של RPMI 1640, 34.32 גר' 3-(N-מורפולינו) propanesulfonic חומצה (MOPS) 1,000 מיליליטר מים הנדסה גנטית. לערבב תוך בחישה ללא חום, להתאים את רמת ה-pH 7 על-ידי הוספת 1 N NaOH (להוסיף 2 גרם של NaOH עד 50 מ"ל של מים הנדסה גנטית). לעקר את המדיום באמצעות מערכת מסנן ואקום 0.22 מיקרומטר.</li>
</ol>2. קדם inoculum ו- inoculum
<ol><li>הסר בקטריה SN425 אלביקנס ג מהמקפיא ° C −80 ולתת לו להפשיר בטמפרטורת החדר. זרע µL 10 של התרבות מניות בפטרי המכילות SDA בתוספת כלורמפניקול (50 מ"ג/ליטר). דגירה של צלחות פטרי aerobically ב 37 מעלות צלזיוס במשך 48 שעות.</li>
	<li>לאחר 48 שעות של דגירה, להוסיף 10 מושבות אלביקנס ג 10 מ"ל של חנקן שמרים בינוני (YNB) בסיס בתוספת 100 מ מ גלוקוז, דגירה aerobically ב 37 ° C עבור ה 16 עבור inoculum מראש.</li>
	<li>לאחר המקננת עבור 16 h, להכין את inoculums על ידי דילול התרבויות starter לתוך בינוני YNB טרי בתוספת 100 מ מ גלוקוז ב- 1:10 פרופורציה (1 מ"ל של התרבות starter מעורבבת עם 9 מ של YNB). למדוד את הצפיפות האופטית הראשונית (OD)-540 nm.</li>
	<li>דגירה של inoculums aerobically ב 37 מעלות צלזיוס במשך 8 שעות עד הזנים להגיע שלב הצמיחה יומן אמצע ולמדוד OD הסופי-540 nm. להחסיר OD הסופי מ OD הראשונית כדי לבדוק אם OD של inoculums הן על שלב הצמיחה יומן אמצע (8 שעות, בהתבסס על העקומות צמיחה באיור1).</li>
	<li>כדי להגיע inoculum עם 107 תאים מ ל-1, centrifuge את inoculum במשך 5 דקות ב 5,500 x g, למחוק את תגובת שיקוע ולרכז את inoculum חצי נפח של הצינורות.</li>
</ol>3. ביופילמים, פוטותרפיה
<ol><li>להוסיף 1 מ"ל של inoculum הבארות של צלחת 24-ובכן פוליסטירן. דגירה aerobically ב 37 מעלות צלזיוס במשך 90 דקות לאפשר תא אדהזיה לתחתית הבארות.</li>
	<li>השתמש אדום הלא קוהרנטי אור (ראה טבלה של חומרים) כמקור אור באורך גל של nm ± 10 635, כוח פלט קבוע של mW 1,460 ס מ−2.</li>
	<li>השתמש מד כוח למדידת צפיפות הכוח של האור. החשיפה קורן חלה הוא 87.6 J ס מ-2, שקול לבערך 1 דקות של חשיפה. להשתמש בנוסחה צפיפות אנרגיה (J/cm2) = כוח צפיפות (W/cm2) x זמן הקרנה (s). להחיל על מרחק של 5 מ מ בין מקור האור של biofilm כדי למנוע התחממות המדגם.</li>
	<li>לטיפול biofilms בקרה חיובית עם chlorhexidine 0.12% עבור 1 דקות, שליטה שלילי biofilms עם 0.89% NaCl עבור 1 דקות.</li>
	<li>לאחר טיפולים, לשטוף כל biofilms פעמיים עם 0.89% NaCl פתרון.</li>
	<li>להוסיף 1 מ"ל של RPMI 1640 באגירה מלאה עם 3-(N-מורפולינו) propanesulfonic חומצה (MOPS) ב- pH 7 כדי biofilms דגירה הלוחות ב 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה.</li>
	<li>בבוקר, להחיל את הטיפולים אותו כמו צעדים 3.2-3.6, לשטוף biofilms פעמיים עם 0.89% NaCl, להוסיף RPMI חדשים באגירה מלאה עם מגבים (1 מ"ל, pH 7) לבארות, דגירה aerobically ב 37 º C.</li>
	<li>באותו יום, לאחר 6 שעות, לחשוף biofilms לאור אדום. לטיפול biofilms בקרה חיובית עם chlorhexidine 0.12% עבור 1 דקות, שליטה שלילי biofilms עם 0.89% NaCl עבור 1 דקות. לאחר טיפולים, לשטוף biofilms פעמיים עם 0.89% NaCl פתרון.</li>
	<li>חזור על השלבים 3.2-3.8 עד להשגת h 48 biofilm הפיתוח. הערה: בעיקרון, טיפול אחד יקרה בבוקר, והשני יקרה בשעות אחר הצהריים באותו יום (6 h בנפרד).</li>
</ol>4. עיבוד
<ol><li>להוסיף 1 מ"ל של סטרילי 0.89% NaCl אל הבאר כדי להסיר את biofilm מאת לשרוט אותה היטב באמצעות טיפ פיפטה. הוסף את biofilm שהוסר צינור סטרילי.</li>
	<li>להוסיף עוד 1 מ"ל של סטרילי 0.89% NaCl אל הבאר. לגרד את זה שוב ומוסיפים את המתלים הצינור זהה עבור הנפח הכולל של 2 מ.</li>
	<li>המושבה יוצרי יחידות (CFU)<ol>
<li>נמרצות מערבולת ההשעיה biofilm עבור 1 דקות. מהשעיה biofilm, להשתמש aliquot של 0.1 מ"ל דילול טורי.</li>
		<li>לדלל את המתלים biofilm מ 10-1 ל 10-4 פתרון 0.89% NaCl.</li>
		<li>זרע μL 50 של כל דילול ללוחות SDA, דגירה הלוחות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 48 שעות.</li>
		<li>לספור את המושבות ולהחיל את הנוסחה CFU/מ"ל = מספר מושבות x 10n / q (n = דילול; q = נפח הזריעה).</li>
	</ol>
</li>
	<li>משקל יבש<ol>
<li>שוקלים ותווית microcentrifuge צינורות.</li>
		<li>המתלה biofilm, השתמש 0.1 מ"ל לקביעת משקל יבש (ביומסה).</li>
		<li>להוסיף 1 מ"ל אתנול מוחלטת aliquot של 0.1 מ"ל של biofilms ואחסן אותו ב-20 ° C עבור 18 h. לאחר 18 h, צנטריפוגה ב 10,000 x g למשך 10 דקות.</li>
		<li>למחוק את תגובת שיקוע, מקום הצינורות על desiccator כדי לייבש את הדגימות לשבוע אחד. ולשקול את הצינורות microcentrifuge שוב.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
סוכרים מסיסים במים (WSPs), סוכרים מסיסים אלקלי (האישיות)
	<ol>
<li>מ biofilm ההשעיה, נמרצות מערבולת השארית של אמצעי האחסון (1.8 מ ל) 1 דקות, צנטריפוגה ב 5,500 × g 10 דקות ב 4 º C. לאחסן את תגובת שיקוע צינור ולשטוף את התמיסה פעמיים עם התאים, אשר מכיל את המרכיבים קשי תמס של מטריצות במים הנדסה גנטית סטרילי (5,500 × g, 10 דקות ב 4 ° C).</li>
		<li>מחדש להשעות את התוכן לא מסיסים-1.8 מ ל מים הנדסה גנטית סטרילי.</li>
		<li>סוכרים מסיסים במים (WSPs) הערה: בצע את הניסוי הזה-ברדס fume.<ol>
<li>מ תגובת שיקוע מאוחסנות, שומרים 1 מ"ל על כימות של סוכרים מסיסים במים (WSPs).</li>
			<li>Homogenize את תגובת שיקוע מאוחסנות עבור 1 דקות. לאחר מכן, להעביר צינורות סטרילי, להוסיף 2.5 כרכים של 95% אתנול. אחסן את הצינורות עבור 18 h ב-20 ° C עבור WSPs משקעים.</li>
			<li>לאחר 18 h, centrifuge הצינורות ב x 9,500 g למשך 20 דקות ב 4 º C. לאחר צנטריפוגה, למחוק את supernatants.</li>
			<li>לשטוף את הדגימות שלוש פעמים עם 75% אתנול, מילה נהדרת כדורי. מחדש להשעות את גלולה עם 1 מ ל מים הנדסה גנטית סטרילי, לכמת את WSP בשיטת חומצה גופרתית-פנול.</li>
			<li>השתמש 0.1% גלוקוז (0.01 גרם של גלוקוז 10 מ של מים הנדסה גנטית) על העקומה סטנדרטי (0 2.5, 5, 10, 15, 20, 25 µL של גלוקוז למחזור).</li>
			<li>להוסיף 200 µL של 5% פנול (2.7 מ"ל של 90% פנול נמצא 47.3 מ של מים הנדסה גנטית) שפופרת זכוכית המונות 200 µL של המדגם, או עיקול רגיל הצבע (בטריפליכאט עבור דגימה) ומערבבים בזהירות.</li>
			<li>להוסיף 1 מ"ל של חומצה גופרתית הצינור ומערבבים. לחכות 20 דקות בשביל התגובה ולמדוד את הדגימות באמצעות ספקטרופוטומטרים (490 nm).</li>
		</ol>
</li>
		<li>סוכרים מסיסים אלקלי (האישיות) הערה: בצע את הניסוי הזה בשכונה fume.<ol>
<li>כמות מחדש על תנאי לא מסיסים, הפרד בין 1 מ"ל מצפני ASPs. Centrifuge את aliquots של כל השעיה biofilm (13,000 x g, 10 דקות ב 4 ° C).</li>
			<li>הסר בזהירות את תגובת שיקוע של כל שפופרת. ואז מניחים את הדגימות על רכז ואקום כדי לייבש את כדורי.</li>
			<li>שוקל כדורי ולהוסיף 300 µL של 1 N NaOH (2 גרם של NaOH עד 50 מ"ל של מים הנדסה גנטית) לכל 1 מ ג של משקל יבש. תקופת דגירה אותם של 2 h ב 37 מעלות צלזיוס, ואז צנטריפוגה ב × 13,000 g למשך 10 דקות.</li>
			<li>בזהירות לאסוף את supernatants עם פיפטה, העברת צינורות microcentrifuge, שמירה על בגדר.</li>
			<li>שוב, להוסיף אמצעי שווה של 1 N NaOH הצינורות הכוללת כדורי, וכן לחזור על אותם צעדים לעיל על החילוץ של ASP.</li>
			<li>לאחר דגירה כבר שעתיים, centrifuge את הדגימות (13,000 x g 10 דקות), בזהירות לאסוף את supernatants ומוסיפים supernatants שנאספו בעבר.</li>
			<li>על החילוץ השלישית, חזור על הפעולות כמו לעיל, אבל הפעם, לא דגירה בדגימות כבר שעתיים לפני צנטריפוגה.</li>
			<li>לאחר מכן, להוסיף שלושה כרכים של אתנול 95% כל דגימה. לאחר מכן, מלאי את הדגימות-−20 ° C עבור 18 h עבור משקעים של ASP.</li>
			<li>Centrifuge הצינורות (9,500 × g למשך 20 דקות ב 4 ° C) וזורקים את supernatants.</li>
			<li>תשטוף בכל גלולה שלוש פעמים עם 75% אתנול, מילה נהדרת (אותם הליכים עשה WSP). מחדש להשעות את כדורי בשווה הנפח הכולל של החילוץ הראשונה עם 1 N NaOH.</li>
			<li>לקרוא את הדוגמאות על כימות של ASP באמצעות פנול-גופרתית (אותו לגבי ניתוח WSP).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sardi, J. C. O., Scorzoni, L., Bernardi, T., Fusco-Almeida, A. M., Mendes Giannini, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candida+species%3A+current+epidemiology%2C+pathogenicity%2C+biofilm+formation%2C+natural+antifungal+products+and+new+therapeutic+options%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Candida species: current epidemiology, pathogenicity, biofilm formation, natural antifungal products and new therapeutic options.</a> Journal of Medical Microbiology. 62 (Pt 1), 10-24 (2013).</li>
<li>Harriott, M. M., Noverr, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candida+albicans+and+Staphylococcus+aureus+form+polymicrobial+biofilms%3A+effects+on+antimicrobial+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Candida albicans and Staphylococcus aureus form polymicrobial biofilms: effects on antimicrobial resistance.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3914-3922 (2009).</li>
<li>Srinivasan, A., Lopez-Ribot, J. L., Ramasubramanian, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+antifungal+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discovery+Today+Technologies%22%5BJournal%5D)">Overcoming antifungal resistance.</a> Drug Discovery Today Technologies. 11, 65-71 (2014).</li>
<li>Finkel, J. S., Mitchell, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+control+of+Candida+albicans+biofilm+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Genetic control of Candida albicans biofilm development.</a> Nature Reviews Microbiology. 9 (2), 109-118 (2011).</li>
<li>Zarnowski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+entries+in+a+fungal+biofilm+matrix+encyclopedia%5BTitle%5D)+AND+%22MBio%22%5BJournal%5D)">Novel entries in a fungal biofilm matrix encyclopedia.</a> MBio. 5, e013333 (2014).</li>
<li>Mitchell, K. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Community+participation+in+biofilm+matrix+assembly+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Community participation in biofilm matrix assembly and function.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (13), 4092-4097 (2015).</li>
<li>Mitchell, K. F., Zarnowski, R., Andes, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal+super+glue%3A+the+biofilm+matrix+and+its+composition%2C+assembly%2C+and+functions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Fungal super glue: the biofilm matrix and its composition, assembly, and functions.</a> PLoS Pathogens. 12, e1005828(2016).</li>
<li>Dai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue+light+rescues+mice+from+potentially+fatal+Pseudomonas+aeruginosa+burn+infection%3A+efficacy%2C+safety%2C+and+mechanism+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Blue light rescues mice from potentially fatal Pseudomonas aeruginosa burn infection: efficacy, safety, and mechanism of action.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 57 (3), 1238-1245 (2013).</li>
<li>de Sousa, D. L., Lima, R. A., Zanin, I. C., Klein, M. I., Janal, M. N., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+twice-daily+blue+light+treatment+on+matrix-rich+biofilm+development%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effect of twice-daily blue light treatment on matrix-rich biofilm development.</a> PLoS One. 10 (7), e0131941(2015).</li>
<li>Fontana, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+antibacterial+effect+of+photodynamic+therapy+in+dental+plaque-derived+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Periodontal+Research%22%5BJournal%5D)">The antibacterial effect of photodynamic therapy in dental plaque-derived biofilms.</a> Journal of Periodontal Research. 44 (6), 751-759 (2009).</li>
<li>Donlan, R. M., Costerton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilms%3A+survival+mechanisms+of+clinically+relevant+microorganisms%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms.</a> Clinical Microbiology Reviews. 15 (2), 167-193 (2002).</li>
<li>Panariello, B. H. D., Klein, M. I., Pavarina, A. C., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inactivation+of+genes+TEC1+and+EFG1+in+Candida+albicans+influences+extracellular+matrix+composition+and+biofilm+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Inactivation of genes TEC1 and EFG1 in Candida albicans influences extracellular matrix composition and biofilm morphology.</a> Journal of Oral Microbiology. 9 (1), 1385372(2017).</li>
<li>Gulati, M., Lohse, M. B., Ennis, C. L., Gonzalez, R. E., Perry, A. M., Bapat, P., Valle Arevalo, A., Rodriguez, D. L., L, D., Nobile, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culturing+and+screening+of+Candida+albicans+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">In vitro culturing and screening of Candida albicans biofilms.</a> Current Protocols in Microbiology. 50 (1), e60(2018).</li>
<li>Roberts, A. E., Kragh, K. N., Bjarnsholt, T., Diggle, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+limitations+of+in+vitro+experimentation+in+understanding+biofilms+and+chronic+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">The limitations of in vitro experimentation in understanding biofilms and chronic infection.</a> Journal of Molecular Biology. 427 (23), 3646-3661 (2015).</li>
<li>Kucharíková, S., Tournu, H., Lagrou, K., Van Dijck, P., Bujdáková, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detailed+comparison+of+Candida+albicans+and+Candida+glabrata+biofilms+under+different+conditions+and+their+susceptibility+to+caspofungin+and+anidulafungin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Detailed comparison of Candida albicans and Candida glabrata biofilms under different conditions and their susceptibility to caspofungin and anidulafungin.</a> Journal of Medical Microbiology. 60 (Pt 9), 1261-1269 (2011).</li>
<li>Weerasekera, M. M., Wijesinghe, G. K., Jayarathna, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+media+profoundly+affect+Candida+albicans+and+Candida+tropicalis+growth%2C+adhesion+and+biofilm+development%5BTitle%5D)+AND+%22Mem%C3%B3rias++Do++Instituto+Oswaldo+Cruz%22%5BJournal%5D)">Culture media profoundly affect Candida albicans and Candida tropicalis growth, adhesion and biofilm development.</a> Memórias Do Instituto Oswaldo Cruz. 111 (11), 697-702 (2016).</li>
<li>Kadosh, D., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+the+Candida+albicans+filamentous+growth+program+by+relief+of+transcriptional+repression%3A+a+genome-wide+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+biology+of+the+cell%22%5BJournal%5D)">Induction of the Candida albicans filamentous growth program by relief of transcriptional repression: a genome-wide analysis.</a> Molecular biology of the cell. 16 (6), 2903-2912 (2005).</li>
<li>Paschoal, M. A., Lin, M., Santos-Pinto, L., Duarte, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photodynamic+antimicrobial+chemotherapy+on+Streptococcus+mutans+using+curcumin+and+toluidine+blue+activated+by+a+novel+LED+device%5BTitle%5D)+AND+%22Lasers+in+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Photodynamic antimicrobial chemotherapy on Streptococcus mutans using curcumin and toluidine blue activated by a novel LED device.</a> Lasers in Medical Science. 30 (2), 885-890 (2015).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

השלבים הקריטיים ביותר עבור culturing מוצלחת של biofilm אלביקנס ג הם: 1) לעשות את inoculum מראש ולא את inoculum בינוני YNB השלים עם גלוקוז 100 מ מ; 2) כדי לחכות 90 דקות השלב אדהזיה ולשטוף היטב פעמיים הבארות עם 0.89% NaCl כדי להסיר תאים שאינם דבקה; ו 3) כדי להוסיף RPMI בינוני התאים מודבקת להתחיל ביופילמים, מאז RPMI מגרה צמיחה hyphae. Aneuploidies עשויה להתרחש כאשר culturing אלביקנס ג. כתוצאה מכך, חשוב שלא לעשות שימוש המושבות כי הם ישנים, לא לאחסון צלחות ב 4° C, ולא על פסים מחדש תאים קיימים לוחות למעלה משב...

שכיחות מוגברת של סוכרת, טיפול לדיכוי המערכת החיסונית יישומים, הידבקות ב- HIV, מגפת האיידס, הליכים פולשניים קליניים צריכת אנטיביוטיקה רחבת-טווח השנים האחרונות הגדילו את השכיחות של קנדידה אלביקנס הקשורים במחלות1,2. זיהומים אלביקנס ג בדרך כלל קשורים להתפתחות biofilm, עלול לגרום הביטויים הקליניים, כגון קנדידה או ביטויים מערכתית, כגון candidemia1,2. אחד הגורמים התקפה אלימה הבולטת ביותר של צמיחה biofilm הוא הממסד מטריצה חוץ-תאית רב-סוכר. ביופילמים משתף פעולה כדי להגדיל את ההתנגדות הקיימת תרופות נגד פטריות, עקה של מנגנונים חיסוניים מארח3.
צמיחת biofilm אלביקנס ג מתחיל עם הדבקות מוקדם של תאים פלנקטוניים מצע, ואחריו התפשטות של תאי שמרים דרך משטח המצע, צמיחה hyphal. השלב האחרון של צמיחה biofilm הוא שלב ההבשלה, שבה, כמו שמרים פיתוח מדוכא מרחיבה את ההתפתחות hyphal, מטריצות יקיף את biofilm4. Exopolysaccharides אלביקנס ג (EPS) המטריצה אינטראקציה כדי ליצור את מנן-גלוקן מורכב5,6. האינטראקציה של exopolysaccharides חיוני להגנה על biofilms נגד סמים7. לפיכך, ההפחתה של EPS של מטריצות אלביקנס ג יכול לתמוך בפיתוח של פרוטוקולים antibiofilm חדשים לבקרת בפה.
אור מווסת צמיחה, התפתחות, התנהגות של אורגניזמים מספר8 , שהוחלה כמו מיקרוביאלית כימותרפיה פוטודינמי מיקרוביאלית (ברית). ההסכם חל על אש גלויה של גל מסוים ו פוטוסנסיטייזר אור קליטת9. אולם, photosensitizers יש קשיים בחדירה של biofilm, גורם היעילות נמוכה10. הכישלון של סוכני טיפולית לחדור biofilms מלא הוא סיבה biofilms להתנגד לעתים טיפול מיקרוביאלית מסורתי3,5. כדי לבטל את תאי חיידקים סגורה, antimicrobials צריך לחדור דרך מטריצה חוץ-תאית; יחד עם זאת, קובצי EPS מאפיינת מכשול diffusional עבור מולקולות כאלה על-ידי המבקשת רמתם של הכרכרה לתוך biofilm או המשפיעים על התגובה של מיקרוביאלית עם המטריצה עצמה11.
בהתחשב החסרונות של ההסכם, מתגלה השימוש באור בפני עצמו שיפור רב ערך. המידע הראשוני חשף כי הטיפול באור כחול פעמיים ביום באופן משמעותי עכבות הייצור של EPS-לא מסיס ב biofilm mutans סטרפטוקוקוס . על ידי הירידה של EPS-לא מסיס, אור כחול פחתה biofilm צמיחה. עם זאת, התוצאות של פוטותרפיה באמצעות אור אדום ב ג אלביקנס biofilms נדירים. לפיכך, מטרת החקירה היה שיש לחשב מה פוטותרפיה באופן באמצעות אור אדום השפעות את הצמיחה ואת סידור biofilm אלביקנס ג . על הטיפול פעמיים ביום, שינינו של המעבדה שלנו הקודם פרוטוקולים9,12 לספק מודל biofilm לשחזור וקלה המספק תשובות לגבי הכדאיות, פוליסכרידים משקל יבש, חוץ-תאית כמויות לאחר טיפול באור אדום. ניתן להשתמש באותו הפרוטוקול לבדיקות טיפולים אחרים.

<table><tbody><tr><td>קלורהקסידין 20%&nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>C9394</td><td></td></tr><tr><td>דקסטרוז (D-גלוקוז)</td><td>פישר כימי</td> אנהידרולי <td>D16-500</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 200 הוכחה</td><td>Decon Laboratories</td><td>DSP-MD.43</td><td></td></tr><tr><td>LumaCare LC-122 A&nbsp;</td><td>LumaCare Medical Group, ניופורט ביץ', קליפורניה, ארה"ב&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NaCl&nbsp;</td><td>פישר כימיקלים</td><td>S641-500</td><td></td></tr><tr><td>NaOH&nbsp;</td><td>פישר ביו-ריאגנטים&nbsp;</td><td>BP 359-500</td><td></td></tr><tr><td>פנול 5%</td> <td>Milipore Sigma</td><td>843984</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 חומצה עם 3-(N-morpholino)</td> <td>Sigma</td><td>R7755</td><td></td></tr><tr><td>Sabouraud דקסטרוז אגר בתוספת כלורמפניקול</td><td>Acumedia</td><td>7306A</td><td></td></tr><tr><td>חומצה גופרתית&nbsp;</td><td>פישר כימיקל</td><td>SA200-1</td><td></td></tr><tr><td>בסיס חנקן שמרים&nbsp;</td><td>Difco</td><td>DF0392-15-9</td><td></td></tr><tr><td>3-(N-מורפולינו)חומצה פרופנסולפונית MOPS</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>M1254</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; צלחת פוליסטירן 24 בארות&nbsp;</td><td>פלקון</td><td>353935</td><td></td></tr></tbody></table>

פוטותרפיה יומי עם אור אדום כדי לווסת קנדידה אלביקנס biofilm צמיחה

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי להעריך את התוצאות של אש באור אדום טיפול על צמיחת קנדידה אלביקנס biofilm. כדי להגדיל את צמיחת פלנקטוניים אלביקנס ג SN425, inoculums גדל על בסיס חנקן שמרים מדיה. עבור ביופילמים, מדיה RPMI 1640, אשר יש ריכוזים גבוהים של חומצות אמינו, הוחלו לעזור biofilm צמיחה. Biofilms של 48 שעות טופלו פעמיים ביום למשך תקופה של 1 דקה עם מכשיר האור הלא קוהרנטי (אור אדום; אורך גל = 635 ננומטר; צפיפות אנרגיה = 87.6 J·cm-2). כמו פקד חיובי (PC), 0.12% chlorhexidine (CHX) היה מוחל, וכפי פקד שלילי (NC), 0.89% NaCl היה מוחל על biofilms. המושבה יוצרי יחידות (CFU), exopolysaccharides משקל יבש, מסיסים ובחלקם לא מסיסים היו לכמת לאחר טיפולים. בקצרה, פרוטוקול המובאת כאן היא פשוטה, לשחזור ומספק תשובות לגבי הכדאיות, רב-סוכר משקל יבש, חוץ-תאית כמויות לאחר טיפול באור אדום.

איור 2 מציג התוצאות של יומן10 CFU/mL של אלביקנס ג לאחר טיפולים אש"ל עם אור אדום עבור אור אדום דק 1 הקטינה באופן משמעותי את יומן10 בהשוואה של NC CFU/mL (p = 0.004). תרשים 3 מציג את התוצאות של ביומסה (מ ג) של biofilms אלביקנס ג לאחר טיפולים. כל מטופל קבוצות הראה הפחתה של ביומסה בהשוואה של NC (p = 0.000) ומטופל האור האדום הקבוצות הציגו ירידה דומה של ביומסה כדי שנצפה ב- PC. <strong class="xfig"...

כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי להעריך את התוצאה של יישום באור אדום הצמיחה של קנדידה אלביקנס biofilm. מכשיר האור הלא קוהרנטי אדום עם אורך הגל של 635 nm, צפיפות האנרגיה של 87.6 J·cm-2 הוחל ברחבי הצמיחה של קנדידה אלביקנס biofilms במשך 48 שעות.

פוטותרפיה יומי עם אור אדום כדי לווסת קנדידה אלביקנס Biofilm צמיחה

Here, we present a protocol to assess the outcomes of per diem red light treatment on the growth of Candida albicans biofilm. To increase the planktonic ...

קנדידה היא הגורם השכיא ביותר לזיהום פטרייתי מופץ אצל מארחים immunocompromised. הכישלון של סוכנים טיפוליים לחדור באופן מלא biofilm בגלל המטריצה היא אחת הסיבות מדוע biofilms להתנגד טיפולים מסורתיים. הפרוטוקול שלנו מעריך כיצד פוטותרפיה, באמצעות אור אדום, מפריעה לצמיחה ולסידור של ביופילמים של קנדידה אלביקנים.השיטות המיושמות מבוססות היטב, שכן הזן המשמש במחקר זה היה מטריצה חוץ תאית שלה מאופיין מכשיר האור הוחל בהצלחה על מתלים מיקרואורגניזם פלנקטוני אחרים biofilms. היתרון הגדול ביותר של מכשיר זה הוא צמצום זמן הטיפול, מה שהופך אותו גלוי יותר עבור יישומים קליניים. כאשר culturing קנדידה אלביקנים להיות מודעים לכך נוגדנים ניתן לרכוש.לכן, חשוב לא להשתמש במושבות כי הם יותר משבעה ימים, לא להתחיל צלחות בארבע מעלות צלזיוס, ולא לפס מחדש תאים מן הלוחות הקיימים. כמו כן, יש להשתמש במתח לפני 18 שעות של צמיחה לילה. בעת שימוש בספקטרופוטומטר בפעם הראשונה חשוב להשיג תחילה חוות מושבה ביחידות ספירת, כדי לתאם לערכי צפיפות אופטית.לכן, ניסויים יתחילו להשתמש באמצע שלב הצמיחה בריכוז התא הראשוני של 10 עד 7 תאים למיליליטר. ריכוז תאים זה הוכח לספק את הביופילמים החומר התלויים והיציבים ביותר. כדי להתחיל, להשעות 65 גרם של SDA, בתוספת 50 מיליגרם לליטר של כלוראמפניקול, ב 1, 000 מיליליטר של מים מזוקקים בבקבוק.מניחים את הסקילר על תנור לרתיחה, על מנת להמיס את המדיום לחלוטין. ואז להעביר את התקשורת לבקבוק זכוכית. מניחים את הכובע על הבקבוק, אבל לא לדפוק אותו לחלוטין כדי להבטיח את הבקבוק הוא מסוגל לפרוק.מניחים את הבקבוק במקלבה אוטומטית כדי לעקר את הפתרון ב 15 PSI ו 121 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות. מצננים את הפתרון סביב 45 מעלות צלזיוס. השתמש חד פעמי, פיפטה סטרילית, כדי לערבב היטב, ו pipette 20 מיליליטר של SDA לתוך צלחות פטרי סטרילי.כדי להכין בינוני YNB, בתוספת 100 גלוקוז מילימולר, לערבב 6.7 גרם של YNB ו 18 גרם של דקסטרוז ל 1, 000 מיליליטר של מים טהורים במיוחד בבקבוק. מניחים בר מערבבים בפקק ומכניסים את הסקילר לצלחת ערבוב כדי לערבב. סנן את המדיום באמצעות מערכת סינון ואקום של 0.22 מיקרומטר כדי לעקר.הכן מדיום RPMI על ידי ערבוב 10.4 גרם של RPMI-1640 ו 34 גרם של MOPS, ל 1, 000 מיליליטר של מים טהורים במיוחד. מערבבים תוך ערבוב ללא חום ומתאימים את ה-PH לשבעה על ידי הוספת נתרן הידרוקסידי רגיל אחד. יש לעקר את המדיום באמצעות מערכת סינון ואקום של 0.22 מיקרומטר.ראשית, להפשיר את מיקרואורגניזם קנדידה אלביקנים SN 425 בטמפרטורת הסביבה. זרעים 10 microliters של תרבות להפסיק על מנות פטרי שהוכנו בעבר המכיל SDA, בתוספת כלוראמפניקול. חודרים את מנות פטרי באופן אירובי ב 37 מעלות צלזיוס במשך 48 שעות.עבור טרום inoculum להשתמש סיכה מעורקת כדי לבחור 10 מושבות של קנדידה אלביקנים מן הכלים פטרי למקם אותם לתוך צינור צנטריפוגה המכיל 10 מיליליטר של מדיום YNB, בתוספת גלוקוז. דגירה הצינור באופן אירובי ב 37 מעלות צלזיוס במשך 16 שעות. לאחר מכן, להכין את inoculums על ידי הוספת תרבות זו המתנע לתוך מדיום YNB טרי, בתוספת גלוקוז, בפרופורציה אחת עד 10 לדילול.השתמש בספקטרופוטומטר כדי למדוד את OD הראשונית ב 540 ננומטר. דגירה inoculums אירובי ב 37 מעלות צלזיוס במשך שמונה שעות, ולמדוד את OD הסופי ב 540 ננומטר. הפחת את ה- OD הסופי מ- OD הראשוני כדי לבדוק אם ה- OD של האנוקולומים נמצא בשלב הצמיחה באמצע יומן הרישום.כדי להשיג inoculum עם 10 עד שבעה תאים למיליליטר, צנטריפוגה inoculum במשך חמש דקות ב 5, 500 פעמים G.Pour את העל טבעי לתוך מקור המכיל hypochlorite נתרן ולהוסיף YNB טרי לרכז את inoculum למחצית הנפח הקודם. מוסיפים מיליליטר אחד של inoculum לכל באר של צלחת פוליסטירן 24 היטב. דגירה אירובית ב 37 מעלות צלזיוס במשך 90 דקות כדי לאפשר הידבקות התא לתחתית הבאר.לטפל בביופילמים במשך דקה אחת עם מיליליטר אחד של 0.12% כלורקסידין עבור ביופילמים שליטה חיובית. לשליטה שלילית, לטפל biofilms במשך דקה אחת עם מיליליטר אחד של סטרילי, 0.89% נתרן כלורי. לאחר מכן, לשטוף את הבאר פעמיים, דקה אחת כל אחד, עם מיליליטר אחד של סטרילי 0.89% נתרן כלורי כדי להסיר תאים שאינם חסידים.לאחר מכן הפעל נורה אדומה לא עקבית ולהשתמש במד כוח כדי למדוד את צפיפות הכוח של האור. לקבוע את זמן החשיפה בהתבסס על דרישת צפיפות האנרגיה של 87.6 joules לס"מ מרובע. מניחים את הצלחת מתחת לאור האדום.שמור על המרחק בין מקור האור לביופילם לחמישה מיליליטר כדי להימנע מחימום הדגימה. לאחר החשיפה במשך דקה אחת, מוסיפים מיליליטר אחד של מדיום RPMI מעוקר לכל באר, ו דגירה הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס במהלך הלילה. בבוקר, לחזור על אותו כביסה, טיפול קל, טיפולי בקרה חיוביים ושליליים, ודגירה במשך שש שעות עם מדיום RPMI.שוב, לשטוף את הביופילמים פעמיים, לחשוף אותם לאור אדום, ולבצע טיפולי בקרה חיוביים ושליליים. שאפו את הפתרון בארות והוסיפו מדיום RPMI. חזור על הדגירה, הכביסה, הטיפול הקל וטיפולי הבקרה החיוביים והשליליים, עד להשגת 48 שעות של התפתחות ביופילם.כדי להתחיל לעבד, השלך את המדיום והוסף מיליליטר אחד של סטרילי, 0.89% נתרן כלורי ל באר, ולהשתמש בקצה פיפטה כדי לגרד את הביופילם מה באר. מעבירים את הביופילם שהוסר לצינור סטרילי. מוסיפים עוד מיליליטר של סטרילי, 0.89% נתרן כלורי ל באר.לגרד אותו שוב ולהוסיף את ההשעיה לאותו צינור, עבור נפח כולל של 2 מיליליטר. מערבולת נמרצת ההשעיה ביופילם לדקה אחת. לניתוח CFU, להעביר aliquot של 0.1 מיליליטר מן ההשעיה biofilm לצינור מיקרו צנטריפוגה המכיל 900 microliters של 0.89% פתרון נתרן כלורי עבור כל דילול.מדללים את תמיסת הביופילם מ-10 לתמיסה השלילית, ל-10 לארבע השליליות, בתמיסת מלח. זרעים 50 microliters של כל דילול צלחות SDA, ו דגירה הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס במשך 48 שעות. ספור את המושבות והחל את הנוסחה.לניתוח משקל יבש, ראשית לשקול ולתייג צינורות מיקרו צנטריפוגה. מוסיפים 0.1 מיליליטר של ההשעיה ביופילם ומיליליטר אחד של אתנול מוחלט לתוך הצינורות, ולאחסן אותם שלילי 20 מעלות צלזיוס במשך 18 שעות. לאחר מכן, צנטריפוגה זה 10, 000 פעמים G במשך 10 דקות.השליכו את העל-טבעי והמקמים את הצינורות במייבש כדי לייבש את הדגימות למשך שבוע. לשקול את צינורות מיקרו צנטריפוגה שוב, ולעשות את ההפחתה כדי להשיג את משקל ביומסה. בניסוי זה, לאחר טיפולי פר-דיאם באור אדום למשך דקה לביופילמים של קנדידה אלביקנים, הופחת ה-CFU, בהשוואה לשליטה השלילית שטופלה בנתרן כלורי.התוצאות של ביומסה של ביופילמים קנדידה אלביקנים לאחר טיפולים יומיים, להראות את הקבוצה שטופלו באור אדום הציג הפחתה דומה של ביומסה לזה שנצפה בקבוצת הביקורת החיובית, מטופלים עם כלורהקסידין. שתי הקבוצות גם הראו דמיון סטטיסטי זו עם זו. בעוד ששניהם הראו הפחתה של הביומסה, בהשוואה לשליטה השלילית שטופלה בנתרן כלורי.כמויות נחותות של קנדידה אלביקנים מסיסים ובלתי מסיסים EPS, נצפתה בשליטה חיובית, לעומת שליטה שלילית. למרות שלא מובהק סטטיסטית, יישום פר diem של אור אדום פחתה מספרית כמויות של EPS מסיסים EPS מסיסים EPS מסיסים. הבקרה השלילית והקבוצה שטופלה באור אדום הראו דמיון סטטיסטי.מדידת צפיפות הכוח של האור, באמצעות מד כוח לפני תחילת הטיפול כדי לקבוע את תקופות היישום המדויקות. הצעדים מבטיחים כי צפיפות האנרגיה תמיד תהיה 87.6 joules אחוז סנטימטרים בריבוע. השתמש בנוסחה שצוטטה בעבר.המדידה נעשתה באמצעות אותו דבר מהאור לבקבוק הצלחות, חמישה מילימטרים. קשר בין פוטותרפיה ותרופות נגד פטריות ניתן ללמוד כדי לבדוק אם הטיפול הקדם עם אור אדום, ואחריו יישום סמים, משפר חדירת סמים לתוך biofilm. לטיפול פעמיים ביום התאמתי את פרוטוקולי המעבדה שלנו, המספקים מודל ביופילם קל ובלתי ניתן לשחזור, המספק תשובות לגבי כדאיות, משקל יבש כמויות פוליסכריד חוץ-תאי לאחר טיפול באור אדום.הפרוטוקול הוא כללי ונוה יכול לשמש לבדיקת טיפולים אחרים, בנוסף לאור אדום, כולל תרופות, אורות אחרים, או שילוב של אור ותרופות. עבודה עם מיקרואורגניזמים דורשת ציוד מיוחד, כגון משקפי בטיחות, חלוק מעבדה לכפתורים וכפפות ניטרו.

daily-phototherapy-with-red-light-to-regulate-candida-albicans

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

פיתחנו פלטפורמה בצפיפות גבוהה microarray המורכב 3D ננו biofilms...

קנדידה אלביקנס biofilm צ&#39;יפ (ע&quot;א BChip) להקרנה תפוקה גבוהה תרופות נגד פטריות

מקור: ז'או, ק. ואחרים. מודל Invitro לחקר השפעת טיפול פוטודינמי בתיווך חומצה 5-אמינולוולינית על ביופילם סטפילוקוקוס אוראוס . J. Vis. Exp. (2018)הסרטון מדגים פרוטוקול טיפול פוטודינמי להערכת השפעות אנטיבקטריאליות על ביופילמים חיידקיים גרם-חיוביים. ביופילמים מחולקים לארבע קבוצות: שתיים מקבלות חומר קדם-רגיש לאור, ושתיים מקבלות בופר. כולם מודגרים בחושך, ואחריהם חשיפה לאור אדום לקבוצה אחת שטופלה בקדימות וקבוצה אחת בלבד עם בופר. מיני חמצן תגובתיים נוצרים רק בקבוצה המקבלת גם קדם וגם אור, מה שמוביל למוות...

טיפול מופעל באור של ביופילמים חיידקיים באמצעות חומר קדם-רגיש לאור

כדי להציג ולכמת את התכונות הפנימיות של קנדידה אלביקנס ביוילאמים, אנו מכינים דגימות שלמות קבוע כי מובהר על ידי השבירה המדד התאמה. לאחר מכן ניתן להשתמש במיקרוסקופיה אופטית כדי להשיג נתוני תמונה תלת-ממדיים למרות העובי המלא של הנתונים.

הבהרת והדמיה של קנדידה ביוביאמים

השכיחות הגוברת של קנדידה אלביקנס עמידים לתרופות היא בעיה בריאותית חמורה ברחבי העולם. טיפול פוטודינמי אנטי-מיקרוביאלי (aPDT) עשוי להציע אסטרטגיה למאבק בזיהומים פטרייתיים עמידים לתרופות. הפרוטוקול הנוכחי מתאר את יעילות ה-aPDT בתיווך בנגל רוז על זן C. albicans עמיד בפני multidrug במבחנה.

טיפול פוטודינמי בתיווך רוז בנגל לעיכוב קנדידה אלביקנס

פרוטוקול מבוסס צלחת מיקרוטיטר 96-well המשתמש ב-2,3-ביס(2-מתוקסי-4-ניטרו-5-סולפופניל)-5-קרבוקסילייד-2H-tetrazolium (XTT) מתואר כאן, כדי לחקור את השפעת הנוגדנים על ביופילמים שנוצרו על ידי C. tropicalis. ניתן להשתמש בפרוטוקול in vitro זה כדי לבדוק את ההשפעה של תרכובות אנטי-פטרייתיות חדשות פוטנציאליות על הפעילות המטבולית של תאי מין קנדידה בביופילמים.

בדיקת הפחתה מסיסה המבוססת על טטרזוליום להערכת השפעת נוגדנים על ביופילמים של קנדידה טרופיקליס

פרוטוקול זה מתאר את היישום של טיפול פוטודינמי אנטי-מיקרוביאלי (aPDT) במודל מורין של קנדידה אוראלית. aPDT בוצע באמצעות תערובת מסיסה במים של כורכומינואידים ואור LED כחול.

טיפול פוטודינמי אנטי-מיקרוביאלי בתיווך כורכומינואיד על מודל מורין של קנדידאזיס פומי

המשמעות של מושבות קטנות בקנדידה spp. עמידות לתרופות לא נחקרה במלואה. טיפול פוטודינמי אנטי-מיקרוביאלי (aPDT) מציע אסטרטגיה מבטיחה נגד זיהומים פטרייתיים עמידים לתרופות. מחקר זה מדגים כי aPDT בתיווך בנגל ורד מבטל ביעילות קנדידה גלברטה וגורם למושבות קטנות, ומציג הליך ייחודי.

השראת מושבות קטנות בקנדידה מבריקה באמצעות טיפול פוטודינמי בתיווך בנגל

מכשיר LED באור כחול באורך 405 ננומטר מדגים יעילות אנטימיקרוביאלית נגד מגוון רחב של פתוגנים של פצעים כאשר הוא מוערך על מודל עור סינתטי מבוסס קולגן. גישה פשוטה זו במבחנה מציעה חלופה ניתנת לשחזור ואתית להערכה מוקדמת של טיפולים אנטימיקרוביאליים מבוססי אור.

חקירה של מכשיר LED באור כחול לדיכוי פתוגנים של פצעים באמצעות מודל עור סינתטי מבוסס קולגן

אנו מתארים שיטה פשוטה, מהירה וחזקה...

96 microtiter ובכן פלייט מבוססי שיטה ליצירת ניטור ובדיקה של רגישות נגד פטריות קנדידה אלביקנס Biofilms

Assay מתאר אמצעי מהיר למדוד היווצרות biofilm מוקדם חיידקים ופטריות. שיטה זו משתמשת צלחת microtiter כמו לתשתית להיווצרות חיידקים biofilm ו biofilm היא דמיינו באמצעות סגול זן קריסטל. Assay מספק גם assay איכותי או כמותי ליצירת biofilm מוקדם.

Biofilm microtiter תבשיל גיבוש Assay

למד כיצד פוטותרפיה באור אדום ב-635 ננומטר משפיעה על צמיחת ביופילם של Candida albicans לאורך 48 שעות. שיטה זו מציעה גישה חדשנית לטיפול בזיהומים פטרייתיים עמידים.

פוטותרפיה יומי עם אור אדום כדי לווסת קנדידה אלביקנס Biofilm צמיחה

גלה סרטונים נוספים