Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Josiah Fernandez; Enrique C Torchia

doi:10.3791/59353

בידוד וכתמים של העור העכבר Keratinocytes עבור ניתוח מחזור התא הספציפי של חלבון הביטוי הסלולרי על ...

JoVE Journal
Developmental Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Developmental Biology

Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

בידוד וכתמים של העור העכבר Keratinocytes עבור ניתוח מחזור התא הספציפי של חלבון הביטוי הסלולרי על ידי המוני הקיקומטריה

Full Text

8,143 Views

12:34 min

May 9, 2019

DOI: 10.3791/59353-v

Josiah Fernandez¹, Enrique C Torchia¹

¹Department of Dermatology and Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado Anschutz Medical Campus

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

פרוטוקול זה מתאר כיצד לבודד keratinocytes העור מדגמי העכבר, כדי להכתים עם מתכת מתויג נוגדנים, ולנתח תאים ויטראז על ידי cy, try המונית כדי לפרופיל את דפוס הביטוי של חלבונים של עניין בשלבים שונים מחזור התא.

פרוטוקול זה הוא משמעותי משתי סיבות עיקריות. מספר אחד, זה מאפשר למשתמש להיות מסוגל לקבוע את מצבי מחזור התא של תאי העור שבודדו ממודל של בעלי חיים. זה גם מאפשר לנו להיות מסוגלים לנתח ביטוי חלבון בשלבים הדיסקרטיים של מחזור התא.

בהשוואה לשיטות קודמות לקביעת התפשטות תאים, השיטה שלנו מאפשרת קביעה מדויקת יותר של השלבים השונים במחזור התאים, ואנחנו יכולים גם לנתח יותר מ -40 סמנים שונים בשלבים השונים של חלוקת התאים. זה משפר מאוד את היישום ואת הרבגוניות של השיטה. פרוטוקול זה עשוי לשמש בחקר הסרטן ובכל סוג אחר של מחלה שבו יש צורך לקבוע מחזור התא דפוסי ביטוי חלבון ספציפיים.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos