מדריך מעשי עבור ייצור ו- PET/CT הדמיה של 68Ga-DOTATATE עבור גידולים נוירואנדוקריניים הקלינית יומי
17 באפריל 2019
גידולים נוירואנדוקריניים היטב הבדיל overexpress קולטני סומטוסטטין, אשר יכול להיות מנוצל עבור אבחון והדמיה עם אנלוגי סומטוסטטין radiolabeled 68Ga-DOTATATE. פרוטוקול זה מפרט את radiolabeling של 68Ga-DOTATATE, בקרת איכות, הכנת החולה הבאים PET/CT הדמיה. בטיחות קרינה, constrictions הזמן בשל זמן מחצית החיים הקצר של 68Ga נלקחים בחשבון.
פרוטוקול זה מתאר את הסינתזה ואת בקרת האיכות של גליום DOTATATE ואת הרכישה הבאה של גליום DOTATATE PET / CT סריקה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מספקת איכות גבוהה גליום DOTATATE בתוך מסגרת זמן מתאים לעבודה עם איזוטופ של זמן מחצית חיים קצר. הדגמת ההליכים תהיה אלס פון Bele ו ימית דקר, טכנולוגים לרפואה גרעינית במחלקה שלנו.
לפחות שעתיים לפני ניהול המטופל מניחים את ערכת התיוג gallium-68 במודול התיוג בהתאם למפרט היצרן, וממקמים את החומרים במצב הנכון. צרף את הפתרונות המסופקים בערכת התיוג gallium-68 לסעפות. ולצרף את הבקבוקון הסטרילי עם המסנן שאינו מאוורר לפלט של מודול התיוג.
מניחים את הבקבוקון במגן עופרת מספיק עבור פולטי פוזיטרונים. ולצרף את הפלט של מחולל 68 גליום לקלט של מודול התיוג. ממיסים 50 מיקרוגרם של פפטיד אנלוגי לתוך 1.5 מיליליטר של 1.5 פתרון חיץ HEPES טוחן המסופק בערכה, ולהעביר את הפפטיד לבקבוקון התגובה.
סגור את מיגון העופרת סביב מודול התיוג והתחל את הייצור של gallium-68 DOTATATE באמצעות מחשב הלוח המחובר למודול התיוג. כאשר הסינתזה היא סיימה, להסיר את המחטים עם מסננים מבקבוקון הזכוכית ולסגור את מגן עופרת סביב הבקבוקון. מניחים את הבקבוקון בכיול מינון כדי למדוד את הפעילות של גליום-68 DOTATATE ולציין את זמן הייחוס לפעילות.
לאחר מכן בסביבה סטרילית, להסיר 0.5 מיליליטר של פפטיד שכותרתו מן הבקבוקון לבקרת איכות, ולהכין מזרקים עבור הממשל החולה. כדי לאשר את איכות הפפטיד מסונתז לפני הממשל, חזותית לבדוק את המוצר האחרון גליום-68 DOTATATE כדי להבטיח כי הוא נוזל חסר צבע ללא כל חלקיקים. השתמש ברצועת מחוון pH כדי למדוד את ה- pH של הפתרון.
ה- pH צריך להיות בין 6.5 ל -7.5. לאחר מכן, כדי למדוד את גליום-68 קולואידים להוסיף 20 microliters של פפטיד שכותרתו 500 microliters של מים. ולהומוגניזציה של הדילול עם טלטול זהיר של הבקבוקון.
לאחר מכן הוסיפו חמישה מיקרוליטרים של הדילול כ-1.5 ס"מ מתחתית רצועה רחבה באורך 7 ס"מ של נייר סיבים מזכוכית ג'ל כרומטוגרפיה בשכבה דקה מיידית. ומניחים את הנייר בצינור המכיל שני מיליליטר של מתנול 50-50 לפתרון אמוניום אצטט טוחן אחד דואג כי פפטיד אינו בא במגע עם הפתרון. סגור את הצינור כדי למנוע אידוי ולחכות כמה דקות עד הממס נסע לפחות חמישה סנטימטרים מעל איפה פפטיד הוחל.
לאחר מכן, חותכים את הנייר לחצי ומ מניחים את החצאים התחתונים והתחתונים בצינורות נפרדים. לאחר מכן מניחים את הצינורות בדלפק היטב ולקבוע את מספר הספירות בכל בקבוקון בחלון האנרגיה 400 עד 600 וולט אלקטרונים במשך 30 שניות כדי לקבוע את אחוז הקולואיד. כדי לקבוע את 68-גליום ions לדלל 20 microliters של גליום-68 DOTATATE במיליליטר אחד של EDTA מילימולר חמישה מילימולרים.
לאחר מכן לדלל 10 microliters של פתרון EDTA פפטיד במיליליטר אחד של מים סטריליים, ולמקום את הפתרון מונה היטב כדי לקבוע את מספר הספירות בחלון האנרגיה 400 כדי 600 וולט אלקטרונים במשך 30 שניות. שטפו באיטיות מחסנית C-18 עם מיליליטר אחד של 100% אתנול ואחריו מיליליטר אחד של מים סטריליים. שטפו את הדגימה המדולללת דרך מחסנית C-18 לתוך צינור האיסוף.
לשטוף את הצינור מדגם עם מיליליטר אחד של מים לשטוף את הכביסה דרך העמוד לתוך צינור האיסוף. מניחים את צינור האיסוף, צינור הדגימה הריק והמזרק בדלפק היטב וקובעים את מספר הספירות בכל חומר בחלון האנרגיה של 400 עד 600 וולט אלקטרונים למשך 30 שניות כדי להעריך את אחוז היונים. לאחר מכן ניתן לקבוע את הטוהר הרדיופארמה על ידי חישוב הכמות הכוללת של גליום-68 DOTATATE בהתאם לנוסחה.
אם הטוהר הרדיופארמה הוא לפחות 91% לקבל היסטוריה רפואית קצרה של המטופל לאחר הצ'ק-אין דואג לשאול על התאריך של הממשל האנלוגי האחרון somatostatin. זה לא התווית נגד עבור גליום-68 הדמיה DOTATATE, אבל יש לציין. כאשר המטופל מוכן, מניחים cannula תוך ור הווריד בזרוע, ו לשטוף את הקטטר עם מלוחים כדי לאמת את המיקום של cannula.
45 דקות לפני הדמיה PET / CT להזריק 100 מגה becquerels של גליום-68 לתוך cannula. מניחים את המטופל עם הידיים מעל הראש על סורק PET / CT ולהנחות את המטופל להישאר עדיין לאורך כל הבדיקה. כאשר החולה נמצא בעמדה לרכוש תמונת סקר ולבחור את אזור הסריקה מן בלוטת יותרת המוח אל הירך האמצעית.
בצע סריקת CT במינון נמוך עם 40 מיליאמפר, 140 וולט אלקטרונים, וחמש פרוסות מילימולר לתיקון ההטמנה ומתאם אנטומי. ואז מתחיל בראש המטופל לבצע סריקת PET עם 150 שניות לכל תנוחת המיטה. כאן מוצגת סריקת PET/CT של DOTATATE/CT מייצגת של גליום-68 ללא ראיות למחלה.
ספיגה פיזיולוגית ניתן לראות בכבד בטח הטחול. גליום-68 DOTATATE מופרש על ידי הכליות ולכן גלוי במסלול השתן. כאן מוצגות תמונות של מטופל עם גידול ראשוני בלבלב.
חולה זה היה מנוהל במינון נמוך יותר של גליום-68 DOTATATE עקב עיכוב בייצור של פפטיד שכותרתו, אשר הוביל פחות פעילות להיות נוכח בחולה ושתי תמונות רועשות יותר. זה ניתן לראות בכבד, אשר מסומן על ידי החץ האדום. כאן, תמונה עם חפץ תנועה ניתן לראות, אשר מסומן על ידי החץ האדום.
לגליום-68 יש זמן מחצית חיים קצר של 68 דקות, לכן, העיתוי הוא קריטי בפרוטוקול זה. פרוטוקול זה עושה שימוש איזוטופ פולט פוזיטרונים גליום-68, ולכן יש לנקוט אמצעי הגנה נאותים כדי לשמור על חשיפה לקרינה של כוח אדם נמוך ככל האפשר.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
פרוטוקול זה מתאר את הסינתזה ובקרת האיכות של גליום DOTATATE, אנלוג של סומטוסטטין המסומן רדיואקטיבית ומשמש להדמיה אבחנתית של גידולי מערכת התאיים הנוירואנדוקרינית. הוא מפרט את ההליכים לרכישת סריקת PET/CT עם גליום DOTATATE, תוך דגש על חשיבות התזמון בשל זמן מחצית החיים הקצר של גליום-68.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום המדע
- גידולי נוירואנדוקרין
- דימות אבחנתי
- רפואה גרעינית
רקע
- גידולים נוירואנדוקריניים מבטאים ביתר של קולטני סומטוסטטין.
- גליום-68 הוא רדיו-איזוטופ בעל זמן מחצית קצר.
- אנלוגים של סומטוסטטין המסומנים רדיואקטיבית שימושיים לצילום.
- בקרת איכות היא חיונית להדמיה יעילה.
מטרת המחקר
- לסינתזה של gallium DOTATATE עבור דימות PET/CT.
- להבטחת בקרת איכות של התרכובת המסומנת רדיואקטיבית.
- להדגמת הליך הדימות לשימוש קליני.
שיטות שבהן נעשה שימוש
- הכנת ערכה לסימון ב-gallium-68.
- בדיקות בקרת איכות במהלך הסינתזה.
- פרוטוקולים להכנת המטופל.
- רכישת תמונות סריקת PET/CT.
תוצאות עיקריות
- סונתז gallium DOTATATE באיכות גבוהה.
- הדמיה בוצעה במסגרת מגבלות זמן מחצית החיים של האיזוטופ.
- מדדי בקרת איכות הבטיחו תוצאות הדמיה מהימנות.
- הדגמת הפרוצדורות על ידי טכנולוגים מיומנים לרפואה גרעינית.
מסקנות
- הפרוטוקול מספק שיטה מהימנה לסנתזת gallium DOTATATE.
- ניתן להשיג דימות יעיל של גידולי נוירואנדוקריניים.
- בקרת איכות היא חיונית להשגת תוצאות אבחנתיות מוצלחות.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למסמך סיכום
פרוטוקול זה תומך בתיקוף מטרות בשלבים מוקדמים על ידי מתן אפשרות להערכה כמותית של ביטוי קולטני סומטוסטטין במודלים של גידולים נוירואנדוקריניים. הוא מספק תהליך עבודה בר-שחזור לייצור תרופות רדיופיזיות המבטיח אספקה עקבית של ליגנדים למחקרי דימות פרה-קליניים. השיטה מקלה על הפחתת סיכונים מכניסטיים באמצעות מדדי בקרת איכות סטנדרטיים הקשורים לטוהר רדיוכימי ולפעילות ספציפית.
יישומים אסטרטגיים במו"פ של ביו-פארמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- ערך מדעי: מאפשר תיקוף תפקודי של ביטוי יתר של קולטן סומטוסטטין כמטרה טיפולית במודלים רלוונטיים למחלה.
- ערך תפעולי: תומך בסינתזה עקבית של רדיוליגנד לצורך מחקרי מעורבות מטרה (target engagement) הניתנים לשחזור בין מעבדות.
סריקה ופיתוח בדיקה
- ערך מדעי: מייצר תוצאי דימות כמותיים להערכת קינטיקת קישור ליגנדים וצפיפות קולטנים במערכות פרה-קליניות.
- ערך תפעולי: קובע נהלי בקרת איכות סטנדרטיים (טוהר רדיוכימי >91%, pH 6.5–7.5) החיוניים לאמינות הבדיקה ולהשוואתיות בין מחקרים.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- ערך מדעי: מסייע בבחירת מינון ובמידול של התפלגות ביולוגית על ידי אספקת יחסי גידול-לרקע מדויקים באמצעות דימות PET/CT.
- ערך תפעולי: מאפשר ניטור לאורך זמן של תגובה טיפולית בקוהורטות פרה-קליניות באמצעות פרוטוקולי רכישה סטנדרטיים (150 שניות לכל מיקום מיטה, CT במינון נמוך לתיקון ניחות).
שילוב תהליכי עבודה וצנרת עיבוד (Pipeline)
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה ועד לאופטימיזציה של המולקולה המובילה, על ידי אספקת סממנים ביולוגיים של דימות כמותי, המנחים החלטות של המשך או עצירה (go/no-go) בהתבסס על מעורבות המטרה והתנהגות פרמקוקינטית.
- ביולוגיה של הגילוי: תומך בבדיקת היפותזות באמצעות ויזואליזציה ישירה של נגעים חיוביים לקולטן סומטוסטטין in vivo, מה שמאפשר הבהרה של מסלולים ואישור של מטרות.
- סריקה: מספק תכשיר רדיופארמצבטי מוכן לבדיקה עם פעילות ספציפית וטוהר רדיוכימי מוגדרים, מה שמבטיח הערכה מהימנה של תרכובות בבדיקות קישור לקולטן.
- אנליטיקה: מספק מדידות כמותיות של משתנים תלויים (ספיגה בגידול, הפרשה מהאיברים, פינוי מהדם) המאפשרות ניתוח השוואתי בין קבוצות טיפול ומשטרי מינון.
- מחקר תרגומי: מקשר בין שלבי הגילוי המוקדמים לתיקוף פרה-קליני באמצעות תוצרי דימות עקביים המתואמים עם יעילות טיפולית ומדדי בטיחות.
- שימוש חוזר ארגוני: מבסס פלטפורמה לייצור רדיופארמצבטיים לשימוש חוזר, הישימה לאנלוגים אחרים המכוונים לקולטן סומטוסטטין, לצורך מאמצי תיקוף מטרות לאורך כל תהליך הפיתוח.
השפעה תפעולית וארגונית
- ערך מדעי: ביטחון חיזוי בתיקוף המטרה באמצעות דימות כמותי הניתן לשחזור של רמות ביטוי רצפטורים.
- ערך תפעולי: סטנדרטיזציה ויכולת הרחבה באמצעות מודולי סינתזה אוטומטיים ונקודות בקרה (QC) מוגדרות המפחיתות את שיעורי הכשל של סדרות ייצור.
- ערך אסטרטגי: שיפור בקבלת החלטות go/no-go על ידי הפחתת עמימות מכניסטית במחקרי מעורבות מטרה (target engagement).
- השפעה על הפורטפוליו: תיעדוף מותאם סיכון של מועמדים המכוונים לרצפטור סומטוסטטין, בהתבסס על נתוני תפיסת מטרה וסלקטיביות שהופקו מדימות.
שיקולי יישום
- דורש מומחיות בסינתזה של תרופות רדיופארמצבטיות, בבקרת איכות ובפרוטוקולים של בטיחות מקרינה.
- תלוי במודולים אוטומטיים לסימון ובכיליוברי מד-מינון למדידת פעילות ובקרת איכות.
- מחייב סטנדרטיזציה בין-צוותית בין צוותי הרדיופארמציה, הדימות והביולוגיה לצורך טיפול עקבי בדגימות.
- דורש שיקולי התאמה עבור אנלוגים שונים של פפטידים ויעילוסי סימון משתנים בין ליגנדים של קולטני סומטוסטטין.
- מגבלות מעשיות כוללות את זמן מחצית החיים של 68 דקות עבור gallium-68, מה שדורש תיאום הדוק בין לוחות הזמנים של הסינתזה, בקרת האיכות והדימות.
![רדיוסינתזה אוטומטית של [68Ga]Ga-FAPI-46 לשימוש קליני שגרתי](/_next/image?url=https%3A%2F%2Fcloudfront.jove.com%2FCDNSource%2Fteasers%2F66708.jpg%3Fv%3D2026-08-11T08%253A27%253A24.167Z&w=384&q=75)
![הכנה אוטומטית של [68Ga]Ga-3BP-3940 במודול סינתזה להדמיית PET של מיקרו-סביבת הגידול](/_next/image?url=https%3A%2F%2Fcloudfront.jove.com%2FCDNSource%2Fteasers%2F68356.jpg%3Fv%3D2026-07-08T02%253A55%253A13.427Z&w=384&q=75)