Name: מודל העכבר המושרה של הפאציט הנגרמת על ידי מדגם של סרטן הפטאותאי העולה בקביעת דלקת הכבד פיברוזיס (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-09-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 s
Description: חקור מודל עכברים אורתוטופי לסרטן כבד המחקה תכונות קליניות של HCC אנושי באמצעות שיטת פיברוזיס והזרקה תריסרית. כלי זה מאפשר חקר סבילות חיסונית מושרית גידול ותגובות טיפוליות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי NIH/NCI R01 CA164335-01A1 (K. F. סטיילי-או'קארול, PI) ו-NIH/NCI R01CA208396 (מארק Kester, Guangfu לי, קווין פ. סטיילי-או'קרול).

הערה: כל ההליכים כולל נושאי בעלי חיים אושרו על ידי IACUC באוניברסיטת מיזורי. כל העכברים קיבלו טיפול הומאני על פי הקריטריונים המתוארים ב"מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה". יש לבצע את ההליך הבא עבור בידוד תאים וחיסונים במכסה ברדס. כל המבצעים צריכים ללבוש את ציוד ההגנה האישי הסטנדרטי לטיפול בעכברים וברקמות.
1. אינדוקציה של פיברוזיס של הכבד שחמת עם הזרקת IP של פחמן טטרלוריד (CCl4)
הערה: ראה איור 1. (CCl4 הוא מגיב מאוד מסוכן, זה צריך להיות מטופל בזהירות עם לובש כפפות עמידות כימית)
<ol><li>השג עכברים זכרים C57BL/6J שאינם בני 6 עד 8 שבועות (ראו טבלת חומרים).</li>
	<li>הכינו 10% CCl4 (v/v) פתרון שמן תירס בשפופרת צנטריפוגה. קבע את אמצעי האחסון הכולל בהתבסס על מספר העכברים שיש להזריק (ראה שלב 1.6).</li>
	<li>השימוש עכברים מתאים טיפול בטכניקה כדי לבחור עכבר אחד להזרקה.</li>
	<li>לרסן באופן ידני את העכבר עם החלק הימני שלו (בטן) למעלה.</li>
	<li>נקה את אתר ההזרקה על קיר הבטן של העכבר על ידי קרצוף עם 70% אלכוהול.</li>
	<li>להזריק C57BL זכר/6J עכברים עם 160 μL של 10% CCl4 פתרון על ידי הזרקת הצפק (IP) באמצעות מחט חד פעמי 25-מד.</li>
	<li>ודא כי המחט חודרת רק דרך הקיר הבטן (כ 4-5 מ"מ) עם משופע בצד עד בזווית מעט ב 15-20 מעלות.</li>
	<li>להזריק עכברים פעמיים בשבוע עבור סך של ארבעה שבועות-כל עכבר יקבל סך של שמונה זריקות. הערה: שבועיים לאחר ההזרקה האחרונה, העכברים שטופלו מוכנים לחיסון ISPL של הפטציטים אונגניים מעכברים MTD2.</li>
</ol>2. בידוד תג-העברה של הפטציטים מקו MTD2
הערה: ראו טבלה 1 עבור מתכוני פתרונות.
<table fo:keep-together.within-page="1"><tbody>
<tr>
<td>תמיסת מלח מאוזנת של 10x ארל ללא Ca או Mg (EBSS ללא Ca או Mg)</td>
			<td>4 ג ' KCl 68 g 1.4 g NaH2PO4 · H2O 10 גר' דקסטרוז להוסיף מים 1 ליטר, pH כדי 4.32 מעבר במסנן</td>
		</tr>
<tr>
<td>הפתרון הראשון</td>
			<td>20 מ"ל 10x EBSS ללא Ca או Mg 44 משחק3 1.33 מ ל 1.5 מ' הפסי 10 מ ל של 10 מ"ל הוספת מים ל 200 mL</td>
		</tr>
<tr>
<td>הפתרון השני</td>
			<td>100 מ"ל 2.2 משחק3 6.67 מ"ל 1.5 M הפסי הוספת מים ל 1 ליטר</td>
		</tr>
<tr>
<td>0.75% הפתרון לקולגן</td>
			<td>15 מ"ג קולגן סוג 1 20 מ ל של פתרון 2</td>
		</tr>
<tr>
<td>בינוני מלא</td>
			<td>2 RPMI 50 מ ל FBS מסטרפטומיצין לפניצילין 5 מ"ל</td>
		</tr>
</tbody></table>טבלה 1: מתכוני פתרונות.
<ol><li>השג שורה MTD2 עכברים38 לשמש כמקור של החרופציטים אונגניים.</li>
	<li>שMTD2 בגיל 5 שבועות עכברים באמצעות 2.5% isofלאנה. הערה: ההרדמה המתאימה תיבדק על ידי שיטת הצביטה בבוהן. בקיצור, באמצעות שתי אצבעות, לתת את הבוהן העכבר/הרגל לחיצה טובה. אם אין תגובת נסיגה, החיה שנשפט מספיק עמוק כדי להתחיל בניתוח.</li>
	<li>כאשר מסומם בצורה מספקת, המקום עכברים במצב פרקדן ולתקן את הגפיים עם הקלטת כדי לספק חשיפה נאותה של משטח הבטן.</li>
	<li>לבצע חתך באמצע הדרך באמצעות מספריים לאורך האורך של לינאה אלבה גדול מספיק כדי לספק חשיפה נאותה של הכבד.</li>
	<li>להעביר את המעיים שמאלה כדי לספק חשיפה טובה יותר של הכבד טריאדת הפורטל.</li>
	<li>נתח מעל הכבד כדי לחשוף את האובורד הנחותים (IVC).</li>
	<li>לישער את האגודה מעל הכבד באמצעות מהדק עורק.</li>
	<li>חזרה אל הגבול הנחות של הכבד, להשתמש מחט פרפר (לראות חומרים) כדי לקבל את הגישה IV לווריד הפורטל. תקן קטטר ביד.</li>
	<li>מבשם ברציפות את הכבד של העכבר באמצעות מזרק הזרקת ב 8.9 mL/min עם 15 מ ל של פתרון 1, 15 מ ל של 0.75% קולגן פתרון 2, ו 15 מ ל של פתרון 2 באמצעות הקטטר.</li>
	<li>לקצור את הכבד המקורות על ידי גזירה ונטילת מסת הגידול מ MTD2 עכברים בשפופרת חרוט 50 mL עם 10-15 mL של PBS.</li>
	<li>הסר את PBS ושטוף זמן נוסף עם PBS; לא לצנטריפוגה בשלב זה.</li>
	<li>חותכים את הכבד לחתיכות קטנות יותר באמצעות מספריים ולאחר מכן לשטוף שוב עם PBS 2x כדי להסיר את הדם הנותרים.</li>
	<li>הוסף 5 מ ל של מדיום RPMI להשלים את הצינור החרוט ברציפות את הכבד עם מספריים לחתיכות קטנות (< 3 מ"מ)-רקמות צריך לעבור בצורה חלקה דרך צינור 5 מ"ל.</li>
	<li>הוספת RPMI השלם לנפח הסופי של 30 מ ל והשעיית הכבד באמצעות פיפטה 5 מ"ל.</li>
	<li>לסנן את הפתרון המעורב עם מסננת 70 יקרומטר לתוך צינורית חרוט 50 mL.</li>
	<li>שטוף מסננת מספר פעמים עם RPMI מלאה ולהתאים את הנפח הסופי ל 50 mL על ידי הוספת RPMI מדיום נוספים.</li>
	<li>במהירות לסובב את ההשעיה על ידי צנטריפוגה למקסימום של 500 סל ד; ברגע שהמהירות מואצת ל-50 x g, יש לעצור את הצנטריפוגה.</li>
	<li>וכדורי השעיה ב -20 מ ל של PBS.</li>
	<li>לספור תאים באמצעות הדרה כחול של טרילון ומכשיר הומוטומטר, ולאחר מכן להתאים את הריכוז של התא ל-2.5 x 106/mL עבור החיסון לתא הבא. הערה: התשואה הצפויה מ 5 גרם של רקמת הגידול היא 80,000,000 hepatocytes עם יכולת קיום > 95%.</li>
</ol>3. הMTD2 ההפטציטים מעכברים לכבד סוג פראי C57BL/6J על ידי הזרקת ISPL
<ol><li>הטכניקה האספטי צריכה לשמש בכל ההליכים</li>
	<li>הC57BL את העכברים הזכריים של CCl4שטופלו על ידי גברים עם 2.5% isofלאנה, העכברים צריכים להיות מטופלים עם חומר סיכה כדי למנוע מהעיניים להתייבש.</li>
	<li>הכן מזרקים עם 200 μL של הפטציטים להזרקה.</li>
	<li>כאשר מסומם בצורה מספקת, מיקום עכברים עם צד שמאל למעלה.</li>
	<li>לגלח את כל האגף השמאלי של העכברים, ואז לקרצף את האזור, לסירוגין בין 70% אלכוהול ו betadine שלוש פעמים.</li>
	<li>מנהל 5 מ"ג/ק"ג של carprofen subcutaneouly לפני חיתוך כירורגי.</li>
	<li>לעשות חתך 1 ס מ על האגף השמאלי במקבילהצלעות 13 מן ההתחלה הקיצונית הקיצוני ממש מתחת לשריר עמוד השדרה.</li>
	<li>לזהות את הטחול ולאחר מכן. לצבוע אותו בעזרת מלקחיים בוטים</li>
	<li>מחסנית הטחול עם שני קליפים בגודל בינוני טיטניום. הניחו את שני הסרטונים בין עורק הטחול והווריד, השאירו מקום בין הקליפים לקיצוץ מאוחר יותר לאחר החיסון. הערה: המטרה היא לבודד את הקוטב הנחות של הטחול כדי להפחית את הסיכון של זריעה.</li>
	<li>להזריק 200 μL (500,000) של hepatocytes מוכן לתוך הקוטב הנחות של הטחול באמצעות מחט G 27.</li>
	<li>מחסנית את הענף הנחות של העוקץ (כלים נחותים של מוט הטחול) עם קליפ בגודל בינוני אחד.</li>
	<li>חותכים את הטחול בין שני הקליפים שמוקמו בתחילה.</li>
	<li>להסיר את הקוטב הנחות של הטחול שהוזרק ישירות עם תאים סרטניים.</li>
	<li>השימוש 3-0 polyglactin 910 בהפרעה תפירה לסגור את שכבת השריר הפנימי.</li>
	<li>השתמש הפצע מעוקר פלדה מהדקים כדי לסגור את שכבת העור החיצונית. הערה: אטבי פלדה מעדיפים על תפרים כדי למנוע בעלי חיים ללעוס תפרים ולהשאיר פצע פעור.</li>
	<li>מנהל 5 מ"ג/ק"ג של carprofen תת-עורי לאחר תפר.</li>
	<li>מניחים את כל החיות מתאושש על כרית חימום מבוקרת טמפרטורה וניטור היטב עד התאושש באופן מלא מן ההרדמה.</li>
	<li>תן לעכברים גישה חופשית למים לאחר הניתוח. אם העכבר הופך להתייבש במהלך הניתוח, ניהול נוזלים תת עורית (< 1 מ ל).</li>
	<li>הסר קליפי עור ב 7-10 ימים לאחר הניתוח.</li>
</ol>

<ol><li>O'Connor, S., Ward, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocellular+carcinoma+-+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Hepatocellular carcinoma - United States.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 59, 517-520 (2010).</li>
<li>Petrick, J., Kelly, S., Altekruse, S., McGlynn, K., Rosenberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Future+of+Hepatocellular+Carcinoma+Incidence+in+the+United+States+Forecast+Through+2030%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+clinical+oncology%3A+official+journal+of+the+American+Society+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Future of Hepatocellular Carcinoma Incidence in the United States Forecast Through 2030.</a> Journal of clinical oncology: official journal of the American Society of Clinical Oncology. 34, 1787-1794 (2016).</li>
<li>Greten, T., Lai, C., Li, G., Staveley-O'Carroll, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+and+Immune-based+Therapies+for+Hepatocellular+Carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Targeted and Immune-based Therapies for Hepatocellular Carcinoma.</a> Gastroenterology. 156, 510-524 (2019).</li>
<li>Llovet, J., Zucman-Rossi, J., Pikarsky, E., Sangro, B., Schwartz, M., Sherman, M., Gores, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocellular+Carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Disease+primers%22%5BJournal%5D)">Hepatocellular Carcinoma.</a> Nature reviews. Disease primers. 2, 16018(2016).</li>
<li>Ding, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precision+medicine+for+hepatocellular+carcinoma%3A+driver+mutations+and+targeted+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Precision medicine for hepatocellular carcinoma: driver mutations and targeted therapy.</a> Oncotarget. 8, 55715-55730 (2017).</li>
<li>Colombo, M., Maisonneuve, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+liver+cancer+mortality+on+a+global+scale%3A+still+a+long+way+to+go%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Controlling liver cancer mortality on a global scale: still a long way to go.</a> Journal of Hepatology. 67, 216-217 (2017).</li>
<li>Llovet, J., Burroughs, A., Bruix, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Hepatocellular carcinoma.</a> Lancet. 362, 1907-1917 (2003).</li>
<li>Parkin, D., Bray, F., Ferlay, J., Pisani, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+world+cancer+burden%3A+Globocan+2000%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Estimating the world cancer burden: Globocan 2000.</a> International Journal of Cancer. 94, 153-156 (2001).</li>
<li>Thomas, M., Zhu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepocellular+carcinoma%3A+the+need+for+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Hepocellular carcinoma: the need for progress.</a> Journal of Clinical Oncology. 23, 2892-2899 (2005).</li>
<li>Llovet, J., Bruix, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+targeted+therapies+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Molecular targeted therapies in hepatocellular carcinoma.</a> Hepatology. 48, 1312-1327 (2008).</li>
<li>Bruix, J., Sherman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+hepatocellular+carcinoma%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Management of hepatocellular carcinoma: an update.</a> Hepatology. 53, 1020-1022 (2011).</li>
<li>Pang, T., Lam, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+management+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Surgical management of hepatocellular carcinoma.</a> World Journal of Hepatology. 7, 245-252 (2015).</li>
<li>Llovet, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+endpoints+of+clinical+trials+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institution%22%5BJournal%5D)">Design and endpoints of clinical trials in hepatocellular carcinoma.</a> Journal of the National Cancer Institution. 100, 698-711 (2008).</li>
<li>Mueller, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+immunology+and+immunotherapy.+Realizing+the+promise.+Introduction%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cancer immunology and immunotherapy. Realizing the promise. Introduction.</a> Science. 348, 54-55 (2015).</li>
<li>Gajewski, T., Schreiber, H., Fu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+and+adaptive+immune+cells+in+the+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Immunology%22%5BJournal%5D)">Innate and adaptive immune cells in the tumor microenvironment.</a> Nature Immunology. 14, 1014-1022 (2013).</li>
<li>Ribas, A., Wolchok, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+cancer+immunotherapy+and+targeted+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Combining cancer immunotherapy and targeted therapy.</a> Current Opinion in Immunology. 25, 291-296 (2013).</li>
<li>Postow, M., Callahan, M., Wolchok, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+blockade+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%3A+Official+Journal+of+the+American+Society+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint blockade in cancer therapy.</a> Journal of Clinical Oncology: Official Journal of the American Society of Clinical Oncology. 33, 1974-1982 (2015).</li>
<li>Gao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VISTA+is+an+inhibitory+immune+checkpoint+that+is+increased+in+ipilimumab+therapy+in+patients+with+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">VISTA is an inhibitory immune checkpoint that is increased in ipilimumab therapy in patients with prostate cancer.</a> Nature Medicine. 23, 551-555 (2017).</li>
<li>Hahn, A., Gill, D., Pal, S., Agarwal, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+future+of+immune+checkpoint+cancer+therapy+after+PD-1+and+CTLA-4%5BTitle%5D)+AND+%22Immunotherapy%22%5BJournal%5D)">The future of immune checkpoint cancer therapy after PD-1 and CTLA-4.</a> Immunotherapy. 9, 681-692 (2017).</li>
<li>Remon, J., Besse, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+inhibitors+in+first-line+therapy+of+advanced+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Oncology%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint inhibitors in first-line therapy of advanced non-small cell lung cancer.</a> Current Opinion in Oncology. 29, 97-104 (2017).</li>
<li>Kudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+blockade+in+hepatocellular+carcinoma%3A+2017+update%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Cancer%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint blockade in hepatocellular carcinoma: 2017 update.</a> Liver Cancer. 6, 1-12 (2017).</li>
<li>Kudo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+inhibition+in+hepatocellular+carcinoma%3A+Basics+and+ongoing+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Oncology%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint inhibition in hepatocellular carcinoma: Basics and ongoing clinical trials.</a> Oncology. 92, 50-62 (2017).</li>
<li>Breous, E., Thimme, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+immunotherapy+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Potential of immunotherapy for hepatocellular carcinoma.</a> Journal of Hepatology. 54, 830-834 (2011).</li>
<li>Sprinzl, M., Galle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facing+the+dawn+of+immunotherapy+for+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Facing the dawn of immunotherapy for hepatocellular carcinoma.</a> Journal of Hepatology. 59, 9-10 (2013).</li>
<li>Liu, D., Staveley-O'Carroll, K., Li, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune-based+therapy+clinical+trials+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Cell+Immunology%22%5BJournal%5D)">Immune-based therapy clinical trials in hepatocellular carcinoma.</a> Journal of Clinical Cell Immunology. 6, 376(2015).</li>
<li>Greten, T., Wang, X., Korangy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+concepts+of+immune+based+treatments+for+patients+with+HCC%3A+from+basic+science+to+novel+treatment+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">Current concepts of immune based treatments for patients with HCC: from basic science to novel treatment approaches.</a> Gut. 64, 842-848 (2015).</li>
<li>Koster, B., de Gruijl, T., van den Eertwegh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+developments+and+future+challenges+in+immune+checkpoint+inhibitory+cancer+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Oncology%22%5BJournal%5D)">Recent developments and future challenges in immune checkpoint inhibitory cancer treatment.</a> Current Opinion in Oncology. 27, 482-488 (2015).</li>
<li>Johnson, D., Sullivan, R., Menzies, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+checkpoint+inhibitors+in+challenging+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Immune checkpoint inhibitors in challenging populations.</a> Cancer. 123, 1904-1911 (2017).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+cell+death-1+%28PD-1%29+checkpoint+blockade+in+combination+with+an+mTOR+inhibitor+restrains+hepatocellular+carcinoma+growth+induced+by+hepatoma+cell-intrinsic+PD-1%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Programmed cell death-1 (PD-1) checkpoint blockade in combination with an mTOR inhibitor restrains hepatocellular carcinoma growth induced by hepatoma cell-intrinsic PD-1.</a> Hepatology. 66, 1920-1933 (2017).</li>
<li>Heindryckx, F., Colle, I., van Vlierberghe, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+mouse+models+for+hepatocellular+carcinoma+research%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Experimental+Pathology%22%5BJournal%5D)">Experimental mouse models for hepatocellular carcinoma research.</a> International Journal of Experimental Pathology. 90, 367-386 (2009).</li>
<li>Qi, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+inCVAX%2C+in+situ+cancer+vaccine%2C+and+its+immune+response+in+mice+with+hepatocellular+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+and+Cellular+Immunology%22%5BJournal%5D)">Development of inCVAX, in situ cancer vaccine, and its immune response in mice with hepatocellular cancer.</a> Journal of Clinical and Cellular Immunology. 7, 438(2016).</li>
<li>Qi, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+radiofrequency+ablation+platform+in+a+clinically+relevant+murine+model+of+hepatocellular+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Development of a radiofrequency ablation platform in a clinically relevant murine model of hepatocellular cancer.</a> Cancer Biology and Therapy. 16, 1812-1819 (2015).</li>
<li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sunitinib+represses+regulatory+T+cells+to+overcome+immunotolerance+in+a+murine+model+of+hepatocellular+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncoimmunology%22%5BJournal%5D)">Sunitinib represses regulatory T cells to overcome immunotolerance in a murine model of hepatocellular cancer.</a> Oncoimmunology. 7, 1372079(2017).</li>
<li>Staveley-O'Carroll, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+ligation+of+CD40+enhances+priming+against+the+endogenous+tumor+antigen+and+promotes+CD8%2B+T+cell+effector+function+in+SV40+T+antigen+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">In vivo ligation of CD40 enhances priming against the endogenous tumor antigen and promotes CD8+ T cell effector function in SV40 T antigen transgenic mice.</a> Journal of Immunology. 171, 697-707 (2003).</li>
<li>Avella, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regression+of+established+hepatocellular+carcinoma+is+induced+by+chemoimmunotherapy+in+an+orthotopic+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Regression of established hepatocellular carcinoma is induced by chemoimmunotherapy in an orthotopic murine model.</a> Hepatology. 55, 141-152 (2012).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+chemoimmunotherapy+against+hepatocellular+cancer+in+a+novel+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Successful chemoimmunotherapy against hepatocellular cancer in a novel murine model.</a> Journal of Hepatology. 66, 75-85 (2017).</li>
<li>Li, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoliposome+C6-ceramide+increases+the+anti-tumor+immune+response+and+slows+growth+of+liver+tumors+in+ice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Nanoliposome C6-ceramide increases the anti-tumor immune response and slows growth of liver tumors in ice.</a> Gastroenterology. 154, 1024-1036 (2018).</li>
<li>Held, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+antigen+expression+and+tumorigenesis+in+transgenic+mice+containing+a+mouse+major+urinary+protein%2FSV40+T+antigen+hybrid+gene%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">T antigen expression and tumorigenesis in transgenic mice containing a mouse major urinary protein/SV40 T antigen hybrid gene.</a> EMBO Journal. 8, 183-191 (1989).</li>
<li>Hanahan, D., Weinber, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hallmarks+of+cancer%3A+the+next+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144, 646-674 (2011).</li>
</ol>

. אין שום דבר להצהיר עליו

עם פרוטוקול זה, הקמנו מודל מורטין אמין ומהימן של HCC כי מחקה את האדם החניכה של HCC והתקדמות. קלינית, גורמי סיכון רבים לגרום לפציעה בכבד, הכבד פיברוזיס, שחמת והשלב הסופי של HCC. בפרוטוקול שלנו, הזרקת IP של CCl4 משמש לייצר הראשון פיברוזיס של הכבד בעכברים סוג פראי, אשר מאפשר הhepatocytes הבאים ליצור את הגידולים בהגדרה של פיברוזיס בכבד. מצאנו כי היווצרות הגידול התרחשה בהצלחה ביותר בעכברים שקיבלו את החיסון הרפואי שבועיים לאחר CCl4 הטיפול, לעומת עכברים מקבל זריקות בנקודות זמן אחרות. בנוסף, מצאנו פיברוזיס ...

סרטן hepatocellular (HCC) הוא הסוג הגדל ביותר במהירות של סרטן בארצות הברית (ארה ב)1,2,3. בכל שנה, כ 850,000 מקרים חדשים מאובחנים4,5 ו 700,000 חולים מתים ממחלה קטלנית זו6,7,8,9,10 , מה שהופך אותו לגורם השני בגובהו של מוות הקשור לסרטן ברחבי העולם. הניהול של HCC כולל כריתת כירורגית, השתלת, אבלציה, chemoembolization, או טיפולים מערכתית, כגון sorafenib11. אבחון וניהול מוקדם עם כריתה כירורגית או השתלת יש יתרון ההישרדות הכולל הגבוה ביותר4. למרבה הצער, רוב המטופלים נוכחים בשלב מאוחר יותר ודורשים ניהול עם אבלציה, chemoembolization או sorafenib12. Sorafenib, קולטן טירופין קינאז מעכב (RTKI), אושרה על ידי מינהל המזון והתרופות בשנת 2008 כמו טיפול תרופתי מערכתית היחיד זמין לטיפול HCC מחדש. למרות התרופה רק מספק גידול צנוע בהישרדות הכללית, מ 7.9 עד 10.7 חודשים13, זה סיפק אסטרטגיה טיפולית חדשה שיכול להיות מנוצל כדי לנהל HCC.
שינוי מערכת החיסון כדי לחסל סרטן הוקמה היא שדה גדל במהירות במחקר סרטן14. מחקרים חיסוניים במחסום יש מתקדם במידה ניכרת פיתוח תרופות חיסוני טיפול בסרטן15,16. ה-FDA אישר את השימוש בנוגדנים (Abs) נגד אנטיגן T-לימפוציט לימפוציטים 4 (CTLA-4), מתוכנת חלבון מוות של תאים 1 (PD-1), ואת הליגוה PD-L1 לטיפול של מלנומה, סרטן ריאות, הראש והצוואר סרטן, וסרטן שלפוחית השתן17, מיכל בן 18 , מיכל בן 19 , 20. ניסויים קליניים של מונותרפיה או טיפול משולב באמצעות נוגדנים אחד או מספר נגד PD-1, pd-L1, או ctla-4 לטיפול HCC מתקדם מתמשך21,22,23, וכמה ניסויים הראו תוצאות חיוביות. ב 2017, ה-FDA העניק אישור מואץ עבור נוגדן anti-PD-1 לטיפול בחולים HCC, מי הם התנגדות sorafenib, אבל את קצב התגובה הכולל של טיפול זה הוא רק 14.3%. אסטרטגיות אחרות לא תורגמו לפרקטיקה קלינית בשלב זה24,25. להתגבר על עמידות החיסונית עמוקה מעמיק כדי לשפר את הטיפול במחסום החיסונית26; ניבוי היעילות של טיפול במחסום החיסון; מניעת תופעות לוואי הקשורות למערכת החיסונית; אופטימיזציה של תוואי האדמיניסטרציה, המינון והתדר; ומציאת שילובים יעילים של טיפולים27,28,29 כולם להישאר מאתגרת מאוד משימות.
ישנן מספר גישות קונבנציונליות המשמשות כדי לגרום HCC במודלים העכבר כיום והם מנוצלים בהתאם לשאלה הספציפית של החוקר מחקר30. כימית המושרה מודלים העכבר עם תרכובות גנוטוקסיל לחקות פציעה הנגרמת ממאירות. Xenograft מודלים דרך או השתלת חוץ רחמי או אורתוטופית של קווי תא HCC מתאימים הקרנת סמים. מספר עכברים ששונו גנטית ההונדסים לחקור את הפתופסולוגיה של HCC. עכברים טרנסגניים ביטוי גנים ויראליים, אונגנים ו/או גורמי גדילה מאפשרים זיהוי של מסלולים המעורבים hepatocarcinogenesis. בשל המגבלות הטמונות, מודלים אלה אינם מחדשים את מאפייני החיסון האופייני שנראו ב-HCC האנושי, אשר הייתה מוגבלת באופן משמעותי בהסבר למנגנון הבסיסי ולהתפתחות של אסטרטגיות חיסוני חדשניות14 ,15. לאחרונה יצרנו מודל מורטין רלוונטי קליני. זה מודל הרומן לא רק מחקה האדם התחלה HCC והתקדמות אלא גם משקף את התכונות הטיפוסיות ביותר של המחלה האנושית כולל תפקוד המערכת החיסונית. אנחנו האפיינו את המאפיינים. הביולוגיים והאימונולוגיים שלו מינוף זה מודל הרומן, יש לנו בחנו אסטרטגיות חיסוני שונות לטיפול HCC31,32,33,34,35,36, 37. הפלטפורמה הייחודית הזאת מאפשרת לנו ללמוד מנגנונים של עמידות חיסוני הנגרמת על ידי הגידול ולפתח אסטרטגיות טיפול הוכחה של HCC כלפי בסופו של דבר תרגום קליני.

<table><tbody><tr><td>מכונת הרדמה</td><td>VETEQUIP</td><td>IMPAC6</td><td>מכונת הרדמה לניתוח</td></tr><tr><td>מחט פרפר</td><td>BD</td><td>8122963</td><td>מחט המשמשת לזלוף כבד</td></tr><tr><td>C57BL/6 עכברי</td><td>מעבדת ג'קסון</td><td>000664&nbsp;</td><td>עכברים המשמשים בפרוטוטול</td></tr><tr><td>קרפרופן</td><td>Creescent CHEMICAL</td><td>20402</td><td>קרפרופן לשחרור כאבים</td></tr><tr><td>מסננת תאים&nbsp;</td><td>CORNING</td><td>REF 431751</td><td>מסננת תאים, 70 ומיקרו; m, לצנטריפוגה לבידוד הפטוציטים</td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>בקמן קולטר</td><td>אלגרה X-30R</td><td>לבידוד תאים</td></tr><tr><td>קליפס&nbsp;</td><td>Teleflex Medical</td><td>REF 523700</td><td>קליפס טיטניום לטחול</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ</td><td>Zeiss</td><td>Primovert&nbsp;</td><td>מיקרוסקופ לתצפית תאים</td></tr><tr><td>עכברי Mtd2</td><td>N/A</td><td></td><td>מתנה מד"ר וויליאם A הוחזק במכון הסרטן רוזוול פארק בשנת 2002, מתוחזק במעבדה שלנו</td></tr><tr><td>מחט</td><td>BD</td><td>REF 305109</td><td>מחט דיוק BD, 27G x 1/2 (0.4 מ"מ x 13 מ"מ)</td></tr> <tr><td>תפר</td><td>ETHICON</td><td>J303H</td><td>מצופה VICRYL תפר</td></tr><tr><td>SV40 T Ag נוגדן</td><td>Abcam</td><td>ab16879</td><td>נוגדן אנטיגן אנטי-SV40 למזרק IHC</td></tr><tr><td></td><td>BD</td><td>REF 309626</td><td>מזרק שחפת 1 מ"ל להזרקת תאים</td></tr><tr><td>טריפן כחול</td><td>SIGMA</td><td>T 8154</td><td>תמיסה כחולה טריפן לבדיקת כדאיות התאים</td></tr><tr><td>קליפס פצע</td><td>רפלקס</td><td>רפלקס9, חלק מס' 201-1000</td><td>קליפס פצע נירוסטה לסגירת פצע</td></tr></tbody></table>

מודל העכבר המושרה של הפאציט הנגרמת על ידי מדגם של סרטן הפטאותאי העולה בקביעת דלקת הכבד פיברוזיס

An Oncogenic Hepatocyte-Induced Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Cancer Arising in the Setting of Hepatic Inflammation and Fibrosis

העדר של מודל קליני רלוונטי בעלי חיים התייחסות המאפיינים החיסוניים טיפוסי של סרטן hepatocellular (HCC) יש באופן משמעותי את ההסבר של המנגנונים הבסיסיים ופיתוח של אסטרטגיות חיסוני חדשני. כדי לפתח את המודל החי האידיאלי לחבר את HCC האדם, C57BL זכר המוסמכת/6J העכברים הראשון לקבל פחמן ארבלוריד (CCl4) הזרקה כדי לגרום פיברוזיס בכבד, ולאחר מכן לקבל היסטולוגית נורמלי הפגניים הפטציטים מגבר צעיר SV40 T אנטיגן (תג)-עכברים טרנסגניים (MTD2) על ידי הטחול (ISPL) החיסון. האנדרוגן שנוצר עכברים זכר הנמען בגיל ההתבגרות יוזם ביטוי תג תחת שליטה של מקדם ספציפי לכבד. כתוצאה מכך, hepatocytes הועברו להפוך לתאים סרטניים הגושים הגידול טופס בהגדרה של פיברוזיס בכבד/שחמת. מודל זה הרומן מחקה האדם החניכה HCC והתקדמות בהקשר של פיברוזיס הכבד/שחמת ומשקף את התכונות האופייניות ביותר של HCC האדם כולל תפקוד המערכת החיסונית.

הפטציטים אונגניים מבודדים מעכברים תגים-טרנסגניים (איור 2) נזרע בכבד של עכברים מסוג פראי על ידי הזרקה פנים-הטחול (איור 3). Hepatocytes המושתלים בהצלחה ובאמינות גדל אורתופאהנושא גידולים HCC (איור 4) עם הגידול אנטיגן ספציפי SV40 TAg (איור 5) בהגדרה של דלקת הכבד פיברוזיס (איור 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59368/59368fig1.jpg"> איור 1: סכ...

כאן, אנו מתארים את ההתפתחות של מודל מורטין רלוונטי קלינית של סרטן הכבד לכידה של תכונות החיסונית אופייני של סרטן hepatocellular (HCC).

The absence of a clinically relevant animal model addressing the typical immune characteristics of hepatocellular cancer (HCC) has significantly impeded ...

באמצעות רק מודל לפתח מודל מסת סרטן hepatocellular יכול לעזור לאנשים להאיר את האימונוטוסובלנות הנגרמת על ידי הגידול שלהם טיפול ספציפי המושרה, כל immunoresponses הגידול. הגידול אורתוטופי המתפתח עם טכניקת פיברוזיס בכבד מחקה את התכונות הקליניות של סרטן הכבד האנושי. שיטה זו יכולה לספק כלי שימושי במחקר אימונולוגי סרטן hepatocellular.הדגמה חזותית של שיטה זו יכולה להמחיש את השלבים המאתגרים יותר מבחינה טכנית, כגון הזרקת ההזרקה ההיאטרספלנית, החיוניים לביצוע מוצלח של פרוטוקול זה. לאחר מכן, לרסן באופן ידני זכר, שישה עד שמונה שבועות C57 שחור 6 עכבר הגב בצד למעלה. השתמשו במדים חלופיים של 70%אתנול ובתדין כדי לנקות את אתר ההזרקה שלוש פעמים.לאחר מכן לספק 160 microliters של tetrachloride פחמן לעכבר על ידי הזרקה תוך-לידתית ולהחזיר את החיה לכלוב הבית שלה. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן, בעכבר מהופנט 40 T אנטיגן בן חמישה חודשים, למקם את העכבר במצב supine ולאבטח את הגפיים עם סרט הדבקה. בצע חתך לפרוטומיה קו האמצע לאורך לינאה אלבה, גדול מספיק כדי לספק חשיפה נאותה של הכבד, ולעקור את המעיים שמאלה.לנתח מעל הכבד לחשיפה את הנבוב הנבוב הנחות. לגרום מלחצי עורקים כדי לצרף את הכלי. השתמש במחט פרפר כדי לקבל גישה תוך וריד לווריד הפורטל ולאבטח ידנית את הקטטר.בזהירות החלפת מזרקים עבור כל פתרון, בהצלחה לספק 15 מיליליטר של פתרון אחד, 15 מיליליטר של 0.75% פתרון קולגנס שתיים, ו 15 מיליליטר של פתרון שני ללא קולגן באמצעות קטטר, ב 8.9 מיליליטר משוער של פתרון לדקה קצב זרימה. בסוף חליטה, לקצור את מסת הגידול לתוך צינור חרוט 50 מיליליטר המכיל 10 עד 15 מיליליטר של PBS. Excise הגידול מהעכבר הבא MTD2 כפי שהוכח רק.השתמש במספריים כדי לחתוך את הכבדים לחתיכות קטנות יותר. להעביר את הרקמות לתוך מיכל חדש של PBS טרי כדי להסיר את שאר הדם מן הרקמה לפני העברת חתיכות הרקמה לתוך צינור חרוט 50 מיליליטר המכיל חמישה מיליליטר של מדיום RPMI מלא. טחון את דגימות הכבד שטף עד חתיכות יכול להתאים בקלות דרך קצה של פיפיטר חמישה מיליליטר.מוסיפים מספיק מדיום לצינור כדי להגיע לנפח סופי של 30 מיליליטר. השתמש פיפט חמישה מיליליטר כדי triturate שברי הרקמה, לפני סינון הפתרון באמצעות מסננת 70 מיקרומטר לתוך צינור חדש 50 מיליליטר. לשטוף את מסננת מספר פעמים עם מדיום מלא.כוונן את עוצמת הקול הסופית ל- 50 מיליליטר עם מדיום שלם נוסף. במהירות לסובב את ההשעיה על ידי צנטריפוגה למקסימום של 50 פעמים g לפני עצירת הצנטריפוגה ו decanting את supernatant. ואז תן שימוש חוזר את גלולה ב20 מיליליטר של PBS לספירה.להזרקה תוך-תפל של ההפטוציטים MTD2, טען מזרק של מיליליטר אחד המצויד במחט של 27 מד לכל בעל חיים נמען עם 220 מיקרוליטרים של hepatocytes לכל עכבר. אשר חוסר תגובה לצביטת בוהן בבעל חיים הרדמה, פחמן tetrachloride מטופלים. החל ממש מתחת לשריר עמוד השדרה, הבא, לעשות חתך של סנטימטר אחד על האגף השמאלי במקביל הצלע השלוש עשרה מן הקיצוני הגבי ולהשתמש מטלפים מחודדים קהה כדי להחריח את הטחול.חתוך את הטחול בשני קליפי טיטניום בגודל בינוני בין העורק הטחול לווריד, וספק 200 מיקרוליטרים של תאים לקוטב הנחות של הטחול. חותכים את הענף הנחות של הפדיקל עם קליפ אחד בגודל בינוני וחותכים את הטחול בין שני הקליפים שהוצבו בתחילה. הסר את הקוטב הנחות של הטחול שהוזרק ישירות עם תאים סרטניים ולהשתמש 3-0 פוליגלקטין 910 תפור מופרע כדי לסגור את שכבת השריר הפנימי.לאחר מכן השתמשו בפצעי פלדה מעוקרים כדי לסגור את שכבת העור החיצונית ולנהל תת עורית חמישה מיליגרם לקילוגרם של קרפרופן. לאחר בידוד מעכברים מהו מהודרים אנטיגן T כפי שהוכח, הן hepatocytes ותאים חודרים לגידול ניתן לראות. התאים בדרך כלל מדגימים כמעט 100%הכדאיות לאחר העיבוד.לאחר חיסון תוך-תפל לבעלי חיים שטופלו בפחמן מסוג פראי, ההפטוציטים המושתלים מגדלים בהצלחה ובאמינות גידולי קרצינומה אורתוטופיים המפטיקולריים המבטאים את נגיף הסימאיאן הספציפי לגידול 40 T אנטיגן. הכנת האוכלוסייה בת קיימא וטהור שלנו של hepatocytes מן המסה MTD2 ניהול מדויק של הזרקת intrasplenic חשובים להצלחת ההליך. למרות שהצוות שלנו בדק חיסון hepatocyte לעכברים נמען באמצעות הזרקה תוך-וסקולרית ותוך-עינית, שיטות אחרות אלה לא הצליחו לגרום קרצינומה hepatocellular אורתוטופית.מודל זה מספק פלטפורמה ייחודית המאפשרת חקירה למעקב חיסוני וסובלנות בשלבים המוקדמים והמאוחרים יותר של התקדמות הגידול. אנא היזהר בעת שימוש tetrachloride פחמן, כפי שהוא רעיל.

an-oncogenic-hepatocyte-induced-orthotopic-mouse-model-hepatocellular

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

זיהום של עכברים עם adenovirus להביע autoantigen אדם גדול ציטוכרום P450 2D6 (hCYP2D6) המוכרים על ידי סרה של חולים הסובלים מסוג 2 תוצאות אוטואימוניות הפטיטיס בצורה מתמשכת של מחלה אוטואימונית בתיווך הכבד המאופיינת סיסטיק נרחב צהבת, ואת הדור של CYP2D6 ספציפית התגובה החיסונית.

CYP2D6 מודל החיה: כיצד לגרום דלקת כבד אוטואימונית עכברים

xenografts גידול האנושי בעכברים עם מערכת חיסון חלשים הם כלים רבי ערך כדי ללמוד ביולוגיה בסרטן. פרוטוקולים ספציפיים כדי ליצור xenografts תת עורי וintrahepatic מתאי אנושיים hepatocellular קרצינומה או שברי גידול מתוארים. התחדשות כבד הנגרמת על ידי כריתה חלקית בעכברי נמען מוצגת כאסטרטגיה כדי להקל על קליטתם intrahepatic.

דור של תת עורי וintrahepatic אדם xenografts קרצינומה hepatocellular בעכברים עם מערכת חיסון חלשים

הפרעה בזרימת המרה גורמת לפגיעה דלקתית חמורה בכבד כולסטטי עם רצף אופייני תלוי זמן של שינויים מורפולוגיים. כאן אנו מציגים פרוטוקול לקשירה כירורגית של צינור המרה המשותף בעכברים המאפשר לגרום לתגובה פיברוטית חזקה לאחר 21 עד 28 יום.

מרה Duct קשירת בעכברים: אינדוקציה של דלקת כבד פגיעה ופיברוזיס ידי חסימתית cholestasis

ההתפשטות הגרורה של הסרטן היא הסיבה העיקרית למוות הקשורים לסרטן. אנו מספקים תיאור מעמיק של מתודולוגיה ניתוח ההישרדות שלנו להקמת מערכת "חולה-כמו" orthotopic מודל עכבר syngeneic לחקר המנגנונים של גרורות בגידולים מוצקים איבר.

&quot;מטופל כמו&quot; Orthotopic syngeneic עכבר הדגם של Hepatocellular Carcinoma גרורה

פרוטוקול זה מספק שיטה אמינה להקמת עכברים הומניזציה עם מערכת החיסון האנושית ותאי הכבד. השני עכברים לקויה מחדש השיגה באמצעות הזרקה התוך הטחול של האדם hepatocytes ו CD34+ תאי גזע המטרופאיות רגישים לנגיף הכשל החיסוני האנושי-1 זיהום ונזק הכבד לכידה כפי שנצפתה ב . חולים נגועים...

הקמתה של הומניזציה Dual-TK-חעוגה מודל העכבר עבור הנגיף הקשור HIV פתוגנזה

פרוטוקול זה מציג מודל ביומימטי תלת מימדי עם תא סטרומה פיברוטית נלווית. מוכן עם הידרוג'לים רלוונטיים מבחינה פיזיולוגית ביחסים המחקים את התכונות הביו-פיזיקליות של המטריצה החוץ-תאית הסטרומלית, מתווך פעיל של אינטראקציות תאיות, צמיחת גידולים וגרורות.

מודל ביומימטי לסרטן הכבד לחקר אינטראקציות גידול-סטרומה בסביבה תלת מימדית עם תכונות ביו-פיזיקליות מתכווננות

הזרקת וריד פורטל של אורגנואידים מסרטן המעי הגס (CRC) יוצרת גרורות כבד עשירות בסטרומה. מודל עכבר זה של גרורות כבד CRC מייצג כלי שימושי לחקר אינטראקציות בין גידול לסטרומה ולפיתוח טיפולים חדשניים המכוונים לסטרומה כגון טיפולים גנטיים בתיווך וירוסים הקשורים לאדנו.

הזרקת וריד פורטל של אורגנואידים לסרטן המעי הגס לחקר סטרומה גרורות בכבד

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירת קסנושתרים אורתוטופיים של קרצינומה הפטוצלולרית עם ובלי קשירת עורק הכבד ומבצעים הדמיית טומוגרפיה לא פולשנית של פליטת פוזיטרונים (PET) של היפוקסיה גידולית באמצעות [18 F]Fluoromisonidazole ([18 F]FMISO) ו- [18 F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG).

הדמיית PET/MR לא פולשנית במודל עכבר אורתוטופי של קרצינומה הפטוצלולרית

אורגנואידים הנוצרים מגידולי חולים מוזרקים אורתוטופית לכבד העכבר. כריתה של רקמת כבד לא גידולית מובילה לסביבה רגנרטיבית ברקמת הכבד בה נמצא הגידול.

מודל קסנוגרפט אורגנואיד שמקורו בחולי סרטן הכבד כדי לחקור את ההשפעה של התחדשות הכבד על צמיחת הגידול

מודל העכבר של כריתת כבד חלקית 2/3 (66%) מתואר היטב בספרות, אך לעתים רחוקות נעשה שימוש בכריתת כבד ממושכת יותר המחקה תסמונת קטנה לגודל לאחר השתלת כבד. אנו מתארים הליך מורחב של 78% כריתת כבד במודל עכבר שמביא לכ-50% קטלניות לאחר הניתוח בעכברים בריאים.

כריתת כבד מורחבת של 78% במודל כירורגי עכבר

פרוטוקול זה מציג צינור הדמיה מקיף להמחשה ומידום מורפולוגיית תאי כוכב כבדיים ברקמת כבד שלמה. גישה זו משלבת תיוג פלואורסצנטי של פיברובלסטים באמצעות גנטיקה של עכברים, הכנת רקמה מבוססת פרפוזיה בכבד במקום , ושיטת ניקוי רקמות iDISCO מותאמת להשגת שקיפות אופטית.

מיפוי מורפולוגיית תאי כוכב כבדיים במודלים של עכברים של פיברוזיס כבד

חקור מודל עכברים אורתוטופי לסרטן כבד המחקה תכונות קליניות של HCC אנושי באמצעות שיטת פיברוזיס והזרקה תריסרית. כלי זה מאפשר חקר סבילות חיסונית מושרית גידול ותגובות טיפוליות.

מודל העכבר המושרה של הפאציט הנגרמת על ידי מדגם של סרטן הפטאותאי העולה בקביעת דלקת הכבד פיברוזיס

גלה סרטונים נוספים