Name: הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב Reperfusion בחולדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-28T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: למד הערכת שמורת זרם כלילית בחולדות לאחר איסכמיה-ריפרפוזיה באמצעות אקו-דופלר טרנסתורקלי. שיטה זו מאפשרת מדידה לא פולשנית של תפקוד מיקרו-כלי דם לבביים ומסייעת בחקר מודלים קרדיו-וסקולריים קליניים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

היינו רוצים להודות לקרן הלמסלי לספק ציוד אולטרסאונד לביצוע הניסויים שלנו. עבודה זו נתמכת על ידי NIA R01 053585 מענק.

כל ההליכים בוצעו בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי אוניברסיטת לואיוויל טיפול בעלי חיים מוסדיים והוועדה השימוש (IACUC שאושרו על-ידי פרוטוקול 18223) ואת מדריך NIH לטיפול ושימוש בחיות מעבדה11.
1. בעלי חיים
<ol><li>השימוש 4 חודשים-נקבה פישר 344 חולדות (BW ~ 150-180 גרם) עבור המחקר.</li>
</ol>2. הדמיה אולטרסאונד לפני כירורגיה של IR
<ol><li>לאחר שהחולדה הייתה בחדר האינדוקציה בגודל של 5% עם 1.5 – 2.0 L/min או2 זרימה ואחריו 1.5 – 2.0% עם 1.5 – 2.0 L/min o2 זרימה. הרדמה זו נשמרת במהלך הניסוי, במהלך שלבי המנוחה והמתח.</li>
	<li>מניחים את החיה בתנוחה מספקת ומגלחת את בית החזה. שמרו על טמפרטורת הגוף ב-37-38 ° c באמצעות פלטפורמת ההתחממות המובנית. עקוב אחר קצב הלב באמצעות התוכנה. הערה: הרדמה נכונה היא חיונית לשמירה על קצב הלב בשיעור פיזיולוגי נורמלי (בין 295-350 פעימות/דקות).</li>
	<li>החל משחה וטרינר אופטלמולוגי כדי למנוע יובש של עיניים לפני ההדמיה.</li>
	<li>ביצוע האקו באמצעות 13 – 24 בדיקה לינארית MHz (למשל, MS250) (איור 1A).</li>
	<li>מניחים את החיה במצב פרקדן על הפלטפורמה מחוממת. ודא כי ההרדמה נשלטת באמצעות חרוט האף. ואז למקם את החללית כדי לקבל את תצוגת ציר קצר parasternal (PSAX) באמצעות מערכת המעקה (איור 1B).</li>
	<li>הזזת המקדח לכיוון הrostral מPSAX, אתר את עורק הריאות (איור 1B).</li>
	<li>הזז את המקדח מעט בכיוון caudal מעורק הריאות כדי להציג את LAD ולאחסן את התמונה. הערה: בחור קשה למצוא ללא צבע דופלר, אז תמונות במצב B של LAD לא תמיד אפשרי.</li>
	<li>כאשר הבדלים בודדים להקשות לאתר את העורק הכלילי של LAD, בצע את הטכניקה הנזכרת להלן:<ol>
<li>הזז את המקדח לרוחב. לעורק הריאתי</li>
		<li>זווית הפלטפורמה כך החיה נוטה, הפוכה, או מעט לכיוון הצד הימני, כך החדר השמאלי הוא נראה בקלות יותר עם הגשוש.</li>
	</ol></li>
	<li>לאחר התמונה במצב B הוא נלכד או cine-מאוחסן, לחץ על הצבע דופלר על מסך המגע (איור 1c). המחש את עורק העורק (חץ לבן מציין LAD) בציר הקצר (איור 1C). הצבע האדום, כפי שנראה בזמן אמת, מעיד על כיוון הזרימה (כלומר, זרימת הדם היא כלפי המקדח).</li>
	<li>לאחר ויזואליזציה בחור על צבע-דופלר מצב, לשנות את המצב גל הדופק (pw)-מצב. חפשו את הנוכחות של קו מחוון צהוב בעורק העורק (איור 2 א).</li>
	<li>הציבו את החוט הצהוב. באמצע עורק העורק ודא שהזווית מקבילה לכיוון הזרימה. הערה: מהירות הזרימה תלויה מאוד בזווית של קו PW, כדי להיות בטוח להתאים את הזווית של בדיקה על המסך עם זווית של LAD. השתמש במסך המגע כדי לכוונן את הזווית; PW זווית צריך להיות פחות מ 60 °.</li>
	<li>השתמש בחנות cine כדי ללכוד את המהירות של הזרם הכלילי במנוחה של LAD ב-the שיא מנוחה כמו צורות גל (איור 2b).</li>
	<li>לאחר קבלת מנוחה מהירות זרימת LAD, למדוד את מהירות הזרימה המקסימלית של LAD במהלך הלחץ כדי לחשב CFR. כדי למדוד את מהירות הזרימה המקסימלית במהלך הלחץ, להחדיר Dobutamine במינון של 20 μg/ק"ג/דקות באמצעות וריד זנב8 (איור 2c). הערה: עירוי הDobutamine אינו אמור להיות יותר מ-8 דקות. השתמש במשאבת אינפוזיה והגדר את קוטר משאבת העירוי ל-14.43 עבור BD 10 mL.<ol>
<li>השתמש בפרפר עירוי של 25 גרם לשימוש בצינורית העורק האחורי. כדי למקם את מחט האינפוזיה, מניחים רצועה קטנה של גזה סביב הבסיס של זנב החולדה, ואז לתפוס עם הומוסטטיסטיקה ולסובב את חוסם העורקים כדי להפעיל לחץ ולגרום לווריד להגדיל.</li>
		<li>מניחים את המחט תוך חיבור ישיר למזרק Dobutamine. הערה: קח בזהירות לא להציג בטעות תרופה כאשר למשוך דם כדי להבטיח מיקום תקין של המחט בווריד הזנב. כמו כן, הקפידו להימנע מהצגת בועת אוויר לתוך הווריד, כאשר תסחיף עלול להיות קטלני לבעל החיים.</li>
		<li>לאחר המחט ממוקם, לייצב אותו עם דבק ופיסת קלטת כירורגית, אבטחת קו העירוי לזנב.</li>
		<li>הסר את הזרם העורקים והחסם כדי לשחזר את הזרימה.</li>
		<li>המקום Dobutamine מזרק במשאבה אינפוזיה ולהגדיר אותו להזריק 20 μg/kg/min.</li>
		<li>במהלך עירוי Dobutamine, בזהירות לפקח על שיא LAD ואת קצב הלב. מעת לעת להקליט בחור PW פסגות במצב דופלר, במיוחד בכל פעם שהוא מגדיל בתגובה Dobutamine. הערה: אתגר הלחץ הנגרם על ידי Dobutamine גורם ללב לעבוד קשה יותר; לעיתים קרובות התוצאה היא תנועת הלב והנער. היה מוכן להעביר את החיה, את המקדח, או את שניהם כדי לשמור על הנער לראות.</li>
		<li>לאחר פסגות LAD וקצב הלב יש plateaued במהלך האתגר, לעצור את העירוי Dobutamine, להסיר את הווריד הזנב ערכת העירוי ולהסיר את החיה מן הפלטפורמה. הניחו לבעל החיים להתאושש בכלוב ביתו.</li>
	</ol></li>
	<li>בחר הכלי שיא Vel להשיג את המהירויות שיא הדיאסטולי מן התמונות המוצגות באיור 2b ו-C.</li>
	<li>לחשב את המדד CFR כיחס של מתח LAD (Dobutamine) שיא מהירות זרימת הדיאסטולי למנוחה בחור השיא מהירות תזרים הדיאסטולי (איור 2A).</li>
</ol>3. Reperfusion איסכמיה פציעה
<ol><li>חולדה משבית עם לשכת האינדוקציה ב 5% עם 1.5 – 2.0 L/min O2 זרימה ואחריו 1.5 – 2.0% עם 1.5 – 2.0 L/min o2 זרימה.</li>
	<li>לאשר את עומק ההרדמה על ידי חוסר רפלקס נסיגה דוושה. השתמש משחה וטרינר אופטלמולוגי על העיניים כדי למנוע יובש. שמרו על טמפרטורת הגוף הנכונה של 37-38 ° צ' באמצעות משטח חימום או בקר טמפרטורה בעלי חיים.</li>
	<li>ניהול טרום כירורגי מלוקסיעם, 5 מ"ג/ק"ג בתוך הפנים, 15 דקות לפני הניתוח, ואחריו 2 mL תת עורית של 0.9% תמיסת מלח כדי למנוע התייבשות במהלך הניתוח. כפפות וכלים סטריליים שימשו, וטכניקות אספטי המועסקים. באמצעות מקור האור סיב אופטי, העכבר הצנרור באמצעות צנתר 18 מד IV ולהתחבר למכונת ההנשמה.</li>
	<li>ליגייט LAD באמצעות 8-0 תפר מונופינט מבעד לפתיחת 15 מ"מ בחלל האינטרקוסטל ה -5. לקשור קשר פשוט ולעזוב במשך 30 דקות. באופן חזותי לאשר את איסכמיה בכל חולדות באמצעות שינוי צבע של משטח הלב12. שחרר את ליגטורה לאחר 30 דקות ולוודא reperfusion ידי האדמומיות של האזור דהוי בעבר של שריר הלב עבור 1-2 מינימום12.</li>
	<li>סגרו את כלוב הצלעות בעזרת תפר הנספג ב4-0 עם דפוס תפר מקוטע, ולאחר מכן סגרו את העור תוך שימוש ב-5-0 תפר משי שאינו נספג בצורה רציפה עם דפוס תפר רציף.</li>
	<li>. הסר את החיה מהרדמה לאפשר לבעל החיים להתאושש בכלוב הבית. 5mg/kg מלוקסיעם הוזרק תוך שרירי בכל 24 שעות לפני המתת החסד (72 שעות לאחר הניתוח).</li>
</ol>4. אולטרסאונד להדמיה לאחר ניתוח IR
<ol><li>72 h לאחר ניתוח IR, למדוד את זרם הכלילי ו-CFR שוב. השווה את המידות לפני מדידות IR. חזור על שלבים 2.1 עד 2.15 כמתואר לעיל.</li>
</ol>

<ol><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia+and+reperfusion--from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+medicine%22%5BJournal%5D)">Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation.</a> Nature medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).</li>
<li>French, C. J., Zaman, A. K., Sobel, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+erythropoietin+to+render+jeopardized+ischemic+myocardium+amenable+to+incremental+salvage+by+early+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Coronary+Artery+Disease%22%5BJournal%5D)">Failure of erythropoietin to render jeopardized ischemic myocardium amenable to incremental salvage by early reperfusion.</a> Coronary Artery Disease. 20 (4), 295-299 (2009).</li>
<li>Marzilli, M., Mariani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+and+microvascular+dysfunction%3A+implications+for+salvage+of+jeopardized+myocardium+and+reduction+of+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22Italian+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion and microvascular dysfunction: implications for salvage of jeopardized myocardium and reduction of infarct size.</a> Italian Heart Journal. 2 Suppl 3, 40s-42s (2001).</li>
<li>Prasad, A., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+microvascular+dysfunction+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Management of microvascular dysfunction and reperfusion injury.</a> Heart (British Cardiac Society). 91 (12), 1530-1532 (2005).</li>
<li>Ishihara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+coronary+flow+reserve+immediately+after+coronary+angioplasty+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22British+heart+journal%22%5BJournal%5D)">Impaired coronary flow reserve immediately after coronary angioplasty in patients with acute myocardial infarction.</a> British heart journal. 69 (4), 288-292 (1993).</li>
<li>Camici, P. G., d'Amati, G., Rimoldi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+dysfunction%3A+mechanisms+and+functional+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular dysfunction: mechanisms and functional assessment.</a> Nature Reviews Cardiology. 12 (1), 48-62 (2015).</li>
<li>Chung, K. S., Nguyen, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+measures+of+coronary+microcirculation%3A+Taking+the+long+road+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Non-invasive measures of coronary microcirculation: Taking the long road to the clinic.</a> Journal of Nuclear Cardiology. , (2017).</li>
<li>Kelm, N. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+cells+improve+left+ventricular+diastolic+function+and+increase+microvascular+perfusion+in+advanced+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived cells improve left ventricular diastolic function and increase microvascular perfusion in advanced age.</a> PLoS One. 13 (8), e0202934(2018).</li>
<li>Pan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+recovery+of+coronary+flow+reserve+in+patients+successfully+treated+with+a+percutaneous+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Espa%C3%B1ola+de+Cardiolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Late recovery of coronary flow reserve in patients successfully treated with a percutaneous procedure.</a> Revista Española de Cardiología. 56 (5), 459-464 (2003).</li>
<li>Samim, A., Nugent, L., Mehta, P. K., Shufelt, C., Bairey Merz, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+angina+and+microvascular+coronary+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+treatment+options+in+cardiovascular+medicine%22%5BJournal%5D)">Treatment of angina and microvascular coronary dysfunction.</a> Current treatment options in cardiovascular medicine. 12 (4), 355-364 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , 8th edition, The National Academies Collection: Reports funded by National Institutes of Health (2011).</li>
<li>Ciuffreda, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+experimental+model+of+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+an+ethical+approach+to+set+up+the+analgesic+management+of+acute+post-surgical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Rat experimental model of myocardial ischemia/reperfusion injury: an ethical approach to set up the analgesic management of acute post-surgical pain.</a> PloS one. 9 (4), e95913-e95913 (2014).</li>
<li>van de Hoef, T. P., Siebes, M., Spaan, J. A. E., Piek, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamentals+in+clinical+coronary+physiology%3A+why+coronary+flow+is+more+important+than+coronary+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Fundamentals in clinical coronary physiology: why coronary flow is more important than coronary pressure.</a> European Heart Journal. 36 (47), 3312-3319 (2015).</li>
<li>Naya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preserved+coronary+flow+reserve+effectively+excludes+high-risk+coronary+artery+disease+on+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preserved coronary flow reserve effectively excludes high-risk coronary artery disease on angiography.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 55 (2), 248-255 (2014).</li>
<li>Cortigiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+and+prognostic+value+of+Doppler+echocardiographic+coronary+flow+reserve+in+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Diagnostic and prognostic value of Doppler echocardiographic coronary flow reserve in the left anterior descending artery.</a> Heart (British Cardiac Society). 97 (21), 1758(2011).</li>
<li>Kawata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+value+of+coronary+flow+reserve+assessed+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+on+long-term+outcome+in+asymptomatic+patients+with+type+2+diabetes+without+overt+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+diabetology%22%5BJournal%5D)">Prognostic value of coronary flow reserve assessed by transthoracic Doppler echocardiography on long-term outcome in asymptomatic patients with type 2 diabetes without overt coronary artery disease.</a> Cardiovascular diabetology. 12, 121-121 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף

הממצאים העיקריים מן המחקר הנוכחי הם כי IR מגביר את המנוחה מנוחה בעורק העורקים הכליליים ופוגע CFR, אפילו בהעדר כל היצרות אנגקסוגרפית שיורית.
הבנת הפיזיולוגיה של כריתת העורק היא חלק חיוני בקבלת ההחלטות הקליני לטיפול במחלות עורקים כליליות. Cfr הוא אחד הפרמטרים הפונקציונליים החשובים בהבנת הפתופסיולוגיה של מיקרו מחזור כלילית7,13. CFR היא שיטה לא פולשנית כדי להעריך הן היצרות עורק העורקים כלילית מחזור מיקרוכלי הדם והוא מחוון של אספקת דם שריר ...

איסכמיה שריר הלב reperfusion (IR) הוא מצב שבו אספקת הדם מוגבלת ללב ואחריו שחזור של זלוף ו החמצן בו1. חסימה של עורקים כליליים יכולה להיגרם כתוצאה מקרע בפלאק או כולסטרול, מה שמביא לחוסר איזון חמור באספקת מטבולית וביקוש, גרימת היפוקסיה רקמות. הצלה של שריר הלב בסכנה, לשפר פונקציה חדרית שמאל, ולשפר את ההישרדות בחולים עם אוטם שריר הלב חריפה נצפו על ידי טיפול reperfusion. עם זאת, לאחר recanalization של עורק כלילי, מומים פונקציונליים של כלי קיבול כלילית קטנים עשויים להתרחש2,3,4,5. חלק משמעותי מהחולים, אולי ככל 40%, לא להחזיר מיקרוכלי דם ואוטם שריר הלב למרות שחזור של זרימת כלילית. הדמיה והערכה של מיקרוקובלטציה כלילית יכול להיות קשה ב-vivo, אבל יש מספר טכניקות פולשנית ולא פולשני שניתן להשתמש בהם כדי להעריך את הפרמטרים ישירות בהתאם לפונקציה מיקרונימי כלילית6 ,7. כמו כן, ניתן להעריך את תפקוד האנדותל ברמת המחזור הכלילי באמצעות CFR5.
הבית החזה דופלר האקו הוא כלי לא פולשני אשר מאפשר לנו ללמוד תזרים עורק כלילי מהירות ו CFR5. CFR מייצג את היחס של זרימת הדם הכלילית המקסימלית לזרימת הדם הכלילית במנוחה8. במהלך אתגר הלחץ, לב נורמלי מגביר את זרימת הדם כלילית עד ארבע פעמים מעל ערך המנוחה. סיכון לב וכלי דם עולה כאשר CFR הוא פחתה9. אישיהארה ואח ' הראה כי ה-CFR נפגע קשות מיד לאחר הניתוח הכלילי5. בהעדר היצרות של עורק כלילי, CFR פוחתת במהלך תפקוד הכלילי מיקרוכלי דם והוא נוכח כמחצית החולים עם מחלת עורקים יציבה כלילית10.
המטרה הכוללת של שיטה זו היא הדמיה לא פולשנית של עורק שמאלי קדמי כלילי (LAD) הפונקציה בחולדות דרך האקו, אשר עשוי לשמש כדי לחשב CFR. זה מציע כלי הערכה חשובה לאבחון תפקוד מיקרוכלי דם והערכת טיפולים טיפוליים פוטנציאליים.

<table><tbody><tr><td>מזרק BD 10 מ"ל</td><td>302995</td><td></td><td></td></tr><tr><td>250S 13&ndash; בדיקה ליניארית 24 מגה-הרץ</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dobutamine hydrochloride</td><td>Sigma</td><td>D0676-10mg</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RRC</td><td>27376</td><td></td></tr><tr><td>Legato 100 משאבת מזרק</td><td>KD Scientific</td><td>788100</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 3100</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>סט עירוי מכונף, 27G x 1/2 אינץ', Medline.com</td><td></td><td></td><td></td>TMOSV27ELZ</tr></tbody></table>

הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב reperfusion בחולדות

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

מחלת עורק כלילית היא הגורם המוביל למוות בכל העולם. לאחר אוטם שריר הלב חריפה, התערבות שריר הלב מוקדם ומוצלח דרך recanalization של עורק הכלילי היא האסטרטגיה האפקטיבית ביותר להפחתת הגודל של שריר הלב האיסכמי. המיקרו-וסקולרית הכלילית לא יכול להיות מדמיין ומvivo, אבל יש כמה טכניקות פולשנית ולא פולשני שניתן להשתמש בהם כדי להעריך את הפרמטרים התלויים ישירות על תפקוד מיקרונימי כלילית. פונקציה אנדותל לאחר reperfusion איסכמיה יכול להיות מוערך גם ברמה של המחזור הכלילי באמצעות שמורת זרם כלילית (CFR). במחקר זה, מהירות השיא של הקדמי השמאלי בירידה (LAD) העורקים הכליליים נמדד חולדות ב vivo via שעבר החזה דופלר אקוקרדיוגרפיה בזמן מנוחה והלחץ (הנגרמת על ידי Dobutamine). לב נורמלי יכול להגביר את זרימת הדם הכלילי שלו עד ארבע פעמים מעל ערכי המנוחה במהלך האינדוקציה הלחץ. בעקבות איסכמיה reperfusion, מצאנו CFR פחתה באופן משמעותי, אשר ניתן להשתמש בו כסמן של תפקוד מיקרונימי כלילית. CFR פתחה חלון על החשיבות של תפקוד מיקרוכלי דם, הוכח לנבא סיכון לב וכלי דם עצמאית אם המחלה חסימתית חמורה היא נוכחת.

עבור המחקר הזה, השתמשנו 12 הנקבה פישר 344 חולדות. ביצעת מבחן לחץ עם Dobutamine ומדד מהירות עורק כלילית של LAD לפני ו 72 שעות לאחר ניתוח IR. לפני כירורגיה של IR, מנוחה LAD מהירות עורק כלילית נמדד כמו 423 ± 59 mm/s, אשר הוגדלה לאחר עירוי Dobutamine (1005 ± 77 מ"מ/s) (איור 3A). לאחר 72 h של איסכמיה reperfusion, מנוחה מהירות עורק כלילית של LAD היה גבוה באופן משמעותי לעומת המהירות מנוחה מהירות עורק כלילית לפני הניתוח IR (743 ± 40mm/s vs 423 ± 59 מ"מ/s) (<strong cl...

שמורת זרם כלילית (CFR), מוגדרת כיחס של זרימת דם כלילית מירבית לזרימת הדם הכלילית במנוחה. אנו מציגים פרוטוקול להערכת CFR בחולדות באמצעות אולטרסאונד, אשר מציעה את ההזדמנות לחזות גורמי סיכון לב וכלי דם בהעדר מחלה חסימתית כלילית.

הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב Reperfusion בחולדות

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

המטרה הכוללת של שיטה זו היא הדמיה של פונקציית העורק הכלילי היורדת השמאלית בחולדות באמצעות אקו לב לחישוב עתודת זרימה כלילית. שיטה זו מציעה כלי הערכה חשוב לאבחון תפקוד לקוי של כלי הדם בלבבות חולים ולהערכת טיפולים פוטנציאליים לאורך כל המחקר. למרות טיפול reperfusion הוכח להציל שריר הלב בסכנה כדי לשפר את תפקוד חדר שמאל, חריגות תפקודיות של כלי כליליים קטנים עלולים להתרחש לאחר recanalization של העורק הכלילי.שיטה זו יכולה לספק תובנה על המיקרו-סירקולציה הכלילית של חולדות, כמו גם על דגמים אחרים, כולל אוטם שריר הלב, ועומס יתר של נפח הלחץ של החדר השמאלי. לפני ניתוח קדם אצמיה ניתוח אולטרסאונד הדמיה, לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בחולד פישר 344 הרדמה. לגלח את השיער מהחזה.יש למרוח משחה על עיני החיה ולמקם את החיה בתצב האופין על פלטפורמת התחממות מובנית של 37 עד 38 מעלות צלזיוס. חבר את הגשוש ליניארי 13 עד 24 מגה-הרץ למכונת האולטרסאונד. הגדר את הגדרת היישום מראש להגדרת הדמיה לבבית ולהשתמש במערכת הרכבת כדי למקם את החללית כדי לקבל את תצוגת הציר הקצר parasternal.השתמש במיקרומניפולטור ציר XY כדי להזיז את החללית בכיוון rostral כדי לאתר את עורק הריאה. להזיז את החללית, מה שהופך את החדר השמאלי גלוי יותר בקלות. לאחר לכידת התמונה במצב B ו-Cine Stored, לחצו על 'דופלר צבע' והמחישו את העורק הכלילי בציר הקצר.הצבע האדום, כפי שנצפה בזמן אמת, מעיד על כיוון הזרימה. לאחר הדמיה של העורק הכלילי היורד הקדמי התחתון במצב דופלר צבעוני, שנה את המצב לגל הדופק וחפש נוכחות של קו מחוון צהוב על העורק הכלילי. מניחים את קו גל הדופק הצהוב באמצע העורק הכלילי, דואגים שהזווית מקבילה לכיוון הזרימה ולהשתמש בחנות Cine כדי ללכוד את המהירות של הזרימה הכלילית הקדמית השמאלית המנוחה ואת דיאסטולה השיא של צורות הגל.לאחר קבלת מנוחה שמאלה ירידה מהירות זרימה, מניחים רצועה קטנה של גזה סביב בסיס הזנב ולהשתמש hemostats לתפוס ולסובב את חוסם העורקים כדי להפעיל לחץ, גורם לווריד להגדיל. בזהירות למקם מחט פרפר עירוי 25-מד מחובר מזרק 10 מיליליטר טעון דובוטמין לתוך וריד הזנב הפוך לייצב את המחט עם דבק חתיכת סרט כירורגי. כאשר קו העירוי אובטח, הסר את ההמוסטטים וחוסם העורקים כדי לשחזר את הזרימה ולהחדיר את המזרק למשאבת עירוי להגדיר להזריק 20 מיקרוגרם לקילוגרם לדקה.במהלך העירוי, לפקח בזהירות על פסגת העורק היורדת השמאלית וקצב הלב, מעת לעת מתעד את הרמה השמאלית של גל הדופק העורק היורד במצב דופלר תחת תנאי הלחץ הנגרמים על ידי דובוטמין. לאחר שפסגות העורקים הכליליים וקצב הלב היורדות לפנים במהלך האתגר, עצרו את העירוי, הסירו את ערכת עירוי וריד הזנב והוציאו את החיה מהרציף. לאחר מכן, השתמש בכלי מהירות השיא כדי להשיג את המהירויות הדיאסטאליות שיא מן התמונות ולחשב את מדד עתודה זרימה כלילית כיחס של זרם עורקים יורדים שמאלי שיא מהירות זרימה דיסטולית למנוחה שמאלה עורקים יורדים שיא מהירות זרימה דיסטולית.באמצעות מקור אור סיבים אופטיים, לצנרר חולדה עם קטטר IV 18-מד ולהתחבר קטטר למכונת הנשמה. לאחר מכן, השתמש ב- 8-0 תפר מונופילמנט כדי לקשור את העורק היורד הקדמי השמאלי דרך פתח של 15 מ"מ בחלל הבין-קומתי החמישי עם קשר רגיל במשך 30 דקות. בסוף תקופת חוץ מים, חזותית לאשר את הישמיה באמצעות שינוי צבע של פני הלב ולשחרר את הקשירה.ניתן לאמת את ההשלכות על ידי אדמומיות של האזור דהוי בעבר של שריר הלב. 72 שעות לאחר הניתוח, למדוד את הזרימה הכלילית ואת עתודה זרימה כלילי כפי שהוכח, ולהשוות את המדידות לאלה שהושגו לפני הפציעה. בניסוי מייצג זה, לפני ניתוח ההעתקה חוץ-מימדית, נמדדה מהירות העורקים הכליליים היורדת במנוחה כ-423 מילימטרים לשנייה ליותר מכפול ממהירות לאחר עירוי דבוטמין.72 שעות לאחר נגיף הזיהום, המנוחה השמאלית-ארצית היורדת במהירות העורקים הכליליים הייתה גבוהה משמעותית בהשוואה למהירות העורק הכלילי השמאלית המנוחה לפני הניתוח. תגובת הלחץ לבדיקת דבוטמין לאחר הפציעה הופחתה באופן משמעותי בהשוואה לתגובה לפני התגובות לניתוח. רזרבת הזרימה הכלילית מחושבת כיחס בין מהירות הזרימה לשיא במהלך הלחץ למהירות הזרימה במנוחה והייתה כ -2.1 בחולדות צעירות לפני הניתוח, אך הצטמצמה משמעותית 72 שעות לאחר הפציעה.בנוסף, לא היו שינויים משמעותיים בתפקוד סיסטולי של החדר השמאלי 72 שעות לאחר הפציעה. לאחר התפתחותה, טכניקה זו תאפשר לחוקרים לחקור ולהשתמש בהדמיית אולטרסאונד של עורקים כליליים במודלים קטנים של בעלי חיים המחקים במדויק מחלות אנושיות. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה צריך הבנה טובה מאוד של איך למדוד את זרימת הדם הכלילית ולהעריך microcirculation כלילית במודל קטן של מחלת לב בעלי חיים.

evaluation-coronary-flow-reserve-after-myocardial-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

המודל של עכברוש אקוטי אוטם שריר הלב (AMI) כדאי ללמוד תוצאה של MI על תפקוד pathophysiological ופיזיולוגיות לב.

באוטם שריר הלב אצל חולדות

פרוטוקול זה מתאר את המודל חזירי אוטם שריר הלב (MI) באמצעות חסימת 90 דקות סגורות חזה בלון הכליליים של העורק השמאלי הקדמי יורד (LAD), ואחריו reperfusion. יתר על כן, הפרוטוקול למספר פרמטרים תוצאה, כמו תפקוד לב, פרמטרים המודינמיים, התנגדות כלי הדם, וגודל אוטם, הם גם הציגו.

אוטם שריר לב והערכת תוצאה תפקודית בחזירים

CFR שימושי להערכת דרישת החמצן בשריר הלב ולהערכת הסיכון הקרדיווסקולרי. מחקר זה מבסס שיטת אקו לב דופלר טרנס-חזה (TTDE) שלב אחר שלב לניטור אורכי של השינויים ב-CFR, כפי שנמדד מעורק כלילי בעכברים, תחת עומס יתר ניסיוני של פס אבי העורקים.

הערכת אולטראסאונד מבוססת של עורקים הכליליים זרימה והזרימה כלילית ריזרב שימוש בדגם עומס יתר הלחץ בעכברים

לב החולדה המבודד הוא מודל מתמשך לפגיעה באיסכמיה. כאן, אנו מתארים את תהליך קצירת הלב הפועם מחולדה באמצעות קנולציה של אבי העורקים באתרה, זלוף לנגנדורף של הלב, סימולציה של פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה וצביעה על אוטם כדי לאשר את היקף העלבון האיסכמי.

אינדוקציה והערכה של איסכמיה reperfusion פגיעה בלבבות עכברוש Langendorff-perfused

מודל איסכמיה-רפרפוזיה שריר הלב של לב חולדה משופר על ידי שימוש ב- retractor מתוצרת עצמית, צינור פוליוויניל כלוריד ושיטת קשר ייחודית. אלקטרוקרדיוגרמה, טריפנילטרזוליום כלוריד וכתמים היסטולוגיים, ותוצאות ניתוח הישרדות באחוזים הראו כי לקבוצת המודל המשופרת יש שיעורי הצלחה והישרדות גבוהים יותר מאשר לקבוצת המודל הקיימת כבר.

מודל מכרסמים משופר של איסכמיה שריר הלב ופציעת רפרפוזיה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול המתמקד בבקרת האיכות של קשירת העורק הכלילי היורד הקדמי השמאלי על ידי שינוי טכני של ההליך המסורתי בחולדות למחקר איסכמיה חריפה של שריר הלב.

קשירת עורקים כליליים יורדת קדמית שמאלית למחקר איסכמיה-רפרפוזיה: שיפור מודל באמצעות שינויים טכניים ובקרת איכות

המחקר הנוכחי מדגים מודל בעל חיים בעל יכולת שחזור גבוהה של איסכמיה אזורית חריפה של שריר הלב ופגיעה ברפרפוזיה בארנבים באמצעות מיני בית חזה שמאלי למקרי הישרדות או עצם סטרנטומיה בקו האמצע למקרים שאינם הישרדותיים.

מודל של איסכמיה ופגיעה רפרפוזיה בארנבים

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מבט פרסטרנלי ארוך שונה ללוקליזציה מהירה ומדויקת של העורק היורד הקדמי השמאלי. גישה זו נועדה להיות פשוטה וידידותית יותר למשתמש תוך הקלה על בחינת שינויים דינמיים במאגר הזרימה הכלילי בעקבות איסכמיה של שריר הלב בעכברים.

הערכות דינמיות של שמורת הזרימה הכלילית לאחר רפרפוזיה של איסכמיה שריר הלב בעכברים

טראומה ניתוחית גורם לתגובה דלקתית. ציטוקינים ligands אנדוגניים ידועים לווסת את גודל האוטם בשריר הלב בעקבות איסכמיה ו reperfusion. אנו מציגים שונה סגור החזה מודל של איסכמיה reperfusion Murine באמצעות משקולות תלויות כדי למזער את ההשפעות של פתיחת בית החזה.

דגם Murine סגור החזה של איסכמיה של שריר הלב reperfusion

אנחנו מציגים את שיטה כירורגית כדי לגרום לאיסכמיה / reperfusion הניסיוני (I / R) פציעה כדי לדמות אוטם שריר הלב (MI) בעכברי מודל, המאפשר ליותר בהירות במיצוב של קשירה בעורק השמאלי הקדמי יורד (LAD) כדי להגדיל את שחזור ניסויים MI בעכברים.

דגם של שריר הלב איסכמיה reperfusion הפגיעה Murine באמצעות קשירת של העורק השמאלי קדמי יורד

למד הערכת שמורת זרם כלילית בחולדות לאחר איסכמיה-ריפרפוזיה באמצעות אקו-דופלר טרנסתורקלי. שיטה זו מאפשרת מדידה לא פולשנית של תפקוד מיקרו-כלי דם לבביים ומסייעת בחקר מודלים קרדיו-וסקולריים קליניים.

הערכה של שמורת זרם כלילית לאחר איסכמיה אוטם שריר הלב Reperfusion בחולדות

גלה סרטונים נוספים