Name: שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-26T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: למדו מודל כירורגי בעכברים לחקר דחיית שתלים ווסקולופתיה באלוגרפטים מורכבים מושתלי כלי דם. שיטה זו מאפשרת הערכת אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות בקונטקסט קליני רלוונטי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי המשרד של עוזר מזכיר ההגנה לענייני בריאות באמצעות Congressionally בימוי רפואי תוכנית מחקר תחת הפרס לא. W81XWH-13-2-0057. דעות, פרשנויות, מסקנות והמלצות הן אלה של המחברים ואינן בהכרח מיוחסות על-ידי משרד ההגנה.

כל הניתוחים בעלי חיים בוצעו בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים של אוניברסיטת לואיוויל (IACUC שאושרו על-ידי פרוטוקול 18198) ואת המכון הלאומי לבריאות (NIH) מדריך לטיפול ושימוש של חיות מעבדה10. ארבעה חודשים בן גבר בראון-נורבגיה (RT1. An) ו-4 חודשים בן לואיס (RT1. Al) חולדות שימשו התורמים vca והנמענים, בהתאמה.
1. הקציר האלושתל התורם
<ol><li>משתמשים בחדר. באמצעות מתאדה</li>
	<li>גלח את אזור תרומת השתל (החוצה), כמו גם את אזורי המפשעה והבטן. לאחר מכן, לטפל עם קרם דפילציה כדי להפחית את כמות הפלומה שמאל על ידי קוצץ.</li>
	<li>בעלי חיים תורמים עמוקים באמצעות הצפק (IP) קטמין (60 mg/kg)/xylazine (15 מ"ג/ק"ג)/אספרומאזין (2 מ"ג/ק"ג). ניהול מנה ראשונית של 0.2 mL/100 גרם של משקל הגוף ומינונים נוספים של 0.2 mL כל h. לנוחיותכם, הוא אופציונלי לביצוע שלב זה לפני שלב 2.</li>
	<li>ברציפות לפקח על בעלי חיים בעוד תחת הרדמה עבור נשימה, טמפרטורת הגוף, עומק של הרדמה, באמצעות הבוהן צביטה בדיקת רפלקס.</li>
	<li>מנהל 30 U של הפארין פתרון תת-עורי (SC) באזור הגביל לפני הניתוח כדי למנוע קרישה.</li>
	<li>לבש מסכה, כיסוי ראש, שמלת בידוד חד פעמית וכפפות חד פעמיות.</li>
	<li>מניחים את החיה התורמת מספקת על כרית חימום. מייצרים שדה כירורגי סטרילי על ידי מכינים, קרצוף, ומאותת את האזור כירורגי, כולל ההיבטים הגוגטים והגוגלים של הרגל. . דון כפפות סטרילי</li>
	<li>לעשות חתך העור 3 ס מ בתוך המעטפת מפשעה באמצעות להב האזמל15 ומשקפים את משטח השומן האינבלילי באמצעות מספריים איריס.</li>
	<li>לחשוף את כלי הירך המשותפים ולמקם קרס חוט עם הגומייה לסגת שרירי הבטן.</li>
	<li>באמצעות מיקרוסקופ מבתר (40x), לנתח את הפרובאלי מתוך הופעתה של כלי הירך המשותפים מתחת לרצועה ההוליברית ובדילית למפגש של כלים popliteal לתוך השתל.</li>
	<li>באמצעות מיקרוקליפים ומלקחיים דו קוטבית של הצורפים, ליגייט ולחלק את הענפים הגדולים בעורקים ורידים, כגון כלים לרוחב הירך, כלים שטחיים caudal הקיבה, העורק saphenous, ואת כלי הירך האבודל הראשי, כדי לגייס כלי הירך הראשי. לצרוב ענפים קטנים באמצעות מלקחיים דו קוטבית משובחים.</li>
	<li>לעשות חתך העור ממרכז העור הקודם לחתוך לאורך הצד הגחוני של האיבר האחרון, לאזור הקרסול, באמצעות מספריים איריס.</li>
	<li>חותכים את השריר העדין, כמו גם את השרירים האחרים וני מתחתיו, בצורה אנכית כדי לחשוף ולהאריך את כלי הדם המדיליים ה, מסעף עמוק, כלי קטן הסתעפות, ואת העצב הגיד. הערה: בשלב זה, על שולחן ניתוחים נפרד, המנתח השני צריך לצנרור ולהרדמה (2.5% – 3% isofלאנה) בעל החיים של המטופל; זה מאפשר למנתחים להכין את האתר כירורגי הנמען בזמן למיקום השתל ולמזער את זמן האיסכמי של השתל.</li>
	<li>על בעל החיים תורם, לעשות חתכים העור ההיקפי ברמה של הברך והקרסול. לבטל את הברך ואת הקרסול, להסיר שרירים ורקמות זרות, ולעשות חתך העור האנכי על הצד השני של האיבר החוצה כדי לשחרר את השתל. בשלב זה, השתל (מורכב של פיבולה ושוקה, מכוסה עם שרירים ושרירי העור הניזונים על ידי הניקובים שלה) מחובר רק על ידי העוקץ.</li>
	<li>מניחים מלחציים קטנים ככל האפשר על עורק הירך והווריד, וחותכים את העוקץ ככל האפשר, בסמוך לרצועה המהתרית.</li>
	<li>כדי לרוקן את השתל של דם, להחדיר תמיסת מלח heparinized (30 U/mL) לתוך עורק הירך באמצעות 27 G הריקון בוטה צינורית. הערה: מאפשר גישה קלה להכנסת הצינורית לפני הפארין. בזמן הריקון, הדוק מקרוב את הזרימה היוצאת מווריד הירך. ברגע שנוזל הניקוי יוצא. מעורק הירך, עצור את הסומק</li>
	<li>עוטפים את השתל המבודד בגזה חמימה מלוחים, ומובילים אותו מיד לשולחן החיות של המטופל. בשלב זה, האתר כירורגי הנמען צריך כבר להיות מוכן לחיבור כלי הדם.</li>
	<li>לאחר הקציר השתל, מיד המתת את עכברוש התורם באמצעות חזה אוויר.</li>
</ol>2. ניתוח השתלת הנמען
<ol><li>בעקבות שימוש בהרדמה מעמיקה באמצעות מאדה שחלה בחדר, מורדם עמוקות על ידי בעל החיים המטופל באמצעות צינורית אנדוקנה מבוקרת, ו-2.5% – 3%. הערה: בשלב הזה, עכברוש התורמים. עדיין מורדם</li>
	<li>ברציפות לפקח על קצב הלב, קצב הנשימה, טמפרטורת הגוף, עומק של הרדמה של בעל חיים של המטופל, באמצעות צביטה בבוהן בדיקת רפלקס.</li>
	<li>על מנת למנוע התייבשות והיפוגליקמיה, להזריק 2 מ ל של הפתרון של הפקודה לייזר ו 2.5% דקסטרוז תת-עורי בתחילת ועוד 2 mL בסוף הניתוח.</li>
	<li>לגלח את אזור המפשעה, ולאחר מכן לטפל עם קרם דפילציה כדי להפחית את כמות הפלומה שמאל על ידי קוצץ.</li>
	<li>לבש מסכה, כיסוי ראש, שמלת בידוד חד פעמית וכפפות סטריליות.</li>
	<li>מניחים את החיה מספקת על כרית חימום. החלת משחה אופטלמולוגית כדי למנוע שריטות הקרנית במהלך ההרדמה. מייצרים שדה כירורגי סטרילי על ידי מכין, קרצוף, ומאותת את האזור כירורגי.</li>
	<li>לעשות חתך העור 3 ס מ בתוך המעטפת מפשעה באמצעות להב האזמל15 ומשקפים את משטח השומן האינרירינאלי באמצעות מספריים איריס.</li>
	<li>לחשוף את כלי הירך המשותפים ולמקם קרס חוט עם הגומייה לסגת שרירי הבטן.</li>
	<li>. ליגייט ותחלק ענפים של מרפי</li>
	<li>שימוש 10-0 ניילון הפריעו תפרים, כלי תורם אנסטוכי לכלי הנמען באמצעות טכניקה הקצה לצדדים ובטכניקה מקצה לקצה עורקים. שחררו בהדרגה את התפסים מעורק העורקים ואז את הווריד. נטר את האתרים הanastomotic לדימום והוסף תפרים נוספים במידת הצורך.</li>
	<li>באופן חזותי להעריך את החיבור כלי הדם כדי להבטיח reperfusion השתל יעיל.</li>
	<li>שיבוץ את השתל לתוך הכיס האינשאני והוא הפוך אותו למטה, עם הקרסול משותף משותפת מפרק הברך נחות.</li>
	<li>באמצעות תפרים להכניס, לאבטח את השתל לתוך השרירים הסמוכים. סגור את העור באמצעות המזרן מקוטע העור האופקי נספג 4-0 תפרים.</li>
	<li>הסר את בעל החיים של המטופל מהרדמה וגמול אותו ממכונת ההנשמה. מניחים את החיה על משטח חימום לתמיכה תרמית. הערה: זמן הפעולה הכולל הוא בין 3 ל -4 שעות, בהתאם לניסיון המנתח ולהיכרות עם ההליך הכירורגי.</li>
	<li>מלוקסיעם (1 מ"ג/ק"ג) תת-עורי לדיכוי כאב ולניטור עד שבעל החיים התאושש והנייד.</li>
</ol>3. ניטור הנמען VCA
<ol><li>הבית המטופל חולדות ביחידים ולנטר אותם מדי יום עבור סימנים קליניים של כאב, התייבשות, ירידה במשקל, ירידה בפעילות בנוסף כישלון כירורגי (עבור הראשון 48-72 h) או דחייה. מנהל תת-עורי מלוקסיאם (1 מ"ג/ק"ג) מדי יום עבור 3 הימים הראשונים לדיכוי הכאב.</li>
	<li>בהתבסס על נקודת הקצה של המחקר, לבחור תרופה מדכא חיסוני להיות מנוהל.</li>
</ol>4. היסטולוגיה
<ol><li>בהרדמה מרבית (2.5% – 3%), השג את העור הסדרתי ואת ביופסיות השרירים הבסיסיים משתל התורם בנקודות הזמן הרצויות. העור צריך להיות מקורצף ומכוסה לפני קבלת ביופסיה, ותחום סטרילי טכניקה צריך להתבצע.</li>
	<li>סגרו את הפצע באחד משני התפרים, תוך שימוש בתפרים 4-0. להחזיר את החיה לכלוב שלה ולאפשר לו להתאושש מההרדמה.</li>
	<li>. בצינורות נפרדים ב -10% פורמאלין</li>
	<li>בנקודת הזמן של הטרמינל ותחת שאיפה ההרדמה (2.5%-3%), קחו ביופסיה גדולה יותר לעור המתפרס על גבול התורם/המטופל. אתר בזהירות את זוג הרצועה של הכלי באתר של האנסטוסים; האתר המתאים יהיה גלוי עקב התפרים. קח את דגימות כלי הקיבול. הרצויות מעורק העורקים ו/או הווריד תקן את כל הדגימות בנפרד ב -10% פורמאלין. לאחר איסוף דגימות רקמות, ובעוד החיה עדיין תחת הרדמה isof לוריאן, מיד המתת החיה באמצעות חזה אוויר.</li>
	<li>באמצעות מעבד רקמה (או טכניקה אחרת הטבעה מועדף), פרפין-להטביע כל ביופסיה לתוך הבלוק שלה. עבור דגימות העור, האוריינט הרקמה כך כל השכבות באפידרמיס העור יכול להיראות בפרוסה אחת. לדגימות כלי קיבול, כוון את כלי הקיבול כך שניתן יהיה להשיג מקטעים צולבים.</li>
	<li>באמצעות מיקרוטומה, גזור 6 מקטעי μm-עבה ולהחיל אותם על שקופיות עבור המטאוקסילין ו אאוזין (H & E) כתמים.</li>
	<li>כתם עבור H & E באמצעות פרוטוקול סטנדרטי.</li>
	<li>השיגו תמונות מייצגות של כל דגימות הרקמה הרצויה באמצעות טכניקות מיקרוסקופ ברייטפילד.</li>
</ol>

<ol><li>Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Untold+Story+of+the+First+Hand+Transplant%3A+Dedicated+to+the+Memory+of+one+of+the+Great+Minds+of+the+Ecuadorian+Medical+Community+and+the+World%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reconstructive+Microsurgery%22%5BJournal%5D)">The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).</li>
<li>Dubernard, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+hand+allograft%3A+report+on+first+6+months%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Human hand allograft: report on first 6 months.</a> Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).</li>
<li>Jones, J. W., Gruber, S. A., Barker, J. H., Breidenbach, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+hand+transplantation.+One-year+follow-up.+Louisville+Hand+Transplant+Team%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Successful hand transplantation. One-year follow-up. Louisville Hand Transplant Team.</a> The New England Journal of Medicine. 343 (7), 468-473 (2000).</li>
<li>Devauchelle, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+human+face+allograft%3A+early+report%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">First human face allograft: early report.</a> Lancet. 368 (9531), 203-209 (2006).</li>
<li>Broyles, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+abdominal+wall+reconstruction+using+an+innervated+abdominal+wall+vascularized+composite+tissue+allograft%3A+a+cadaveric+study+and+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reconstructive+Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Functional abdominal wall reconstruction using an innervated abdominal wall vascularized composite tissue allograft: a cadaveric study and review of the literature.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 31 (1), 39-44 (2015).</li>
<li>Kollar, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innovations+in+reconstructive+microsurgery%3A+Reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Innovations in reconstructive microsurgery: Reconstructive transplantation.</a> Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 800-806 (2018).</li>
<li>Kaufman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft+vasculopathy+in+clinical+hand+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Graft vasculopathy in clinical hand transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 12 (4), 1004-1016 (2012).</li>
<li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Birth+Defects+Research+Part+C%3A+Embryo+Today%22%5BJournal%5D)">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research Part C: Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li>
<li>Kaufman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunobiology+in+VCA%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+International%22%5BJournal%5D)">Immunobiology in VCA.</a> Transplantation International. 29 (6), 644-654 (2016).</li>
<li>Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%2C+8th+edition%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition</a>. , National Academies Press. Washington, DC. (2011).</li>
<li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li>
<li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats%3A+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

בפיתוח מודל זה של VCA, כמה בעיות חשובות נחשבו. ראשית, זה היה חשוב לכלול עצם שלם (שוקה ושבולה), מח עצם, ועור בשתל. בעוד השתלות יד קלינית של תורמים מבוגרים לא להעביר כמויות משמעותיות של מח המטפי פעיל, מחקרים של התפקיד של נישה מח העצם משתקף טוב יותר באמצעות עצם שלמה, במקום עצם לחתוך ארוך, אשר התוצאות פיברוזיס של מח העצם החשוף. יתר על כן, העצם סגורה האוסטאופהעורית עיצוב כנף מפחית את הסיכון של זיהום ודימום. גם מח העצם וגם העור הם רקמות חיסוני מאוד, אשר עשוי לשמש כדי לעורר תגובה חיסונית אם תרצה. שנית, זה לא היה הכרחי עבור השתל...

ניתוח שחזור לאובדן הרקמות הקטסטרופלי מקטיעה, פציעות הפיצוץ, ממאירות ופגמים מולדים מוגבלים על-ידי זמינות הרקמה מהמטופל והתחלואה הנוספת הנגרמת באתר התורם. במקרים מסוימים, כגון נפגעי כוויות או מארזים מרובע, רקמות קיימא עבור שחזור אינו זמין מהמטופל. בשנת 1964 בוצעה השתלת היד המודרנית הראשונה באקוודור. אמנם זו היתה הצלחה טכנית, דיכוי חיסוני זמין בזמן לא היה מספיק כדי למנוע דחייה, והשתל אבד בתוך פחות מ 3 שבועות1. ב 1998 ו 1999, השתלת היד הראשונה בעידן המודרני של דיכוי חיסוני בוצעו בליון, צרפת2 ו לואיוויל, קנטאקי, ארה ב3. בפעם הראשונה, מנתחים שיקומיים. יכולים להחליף כאילו השתלת פנים בוצעה לראשונה ב 20054, ומספר שתלי vca אחרים נמצאים כעת באופן שגרתי מבוצע, כגון קיר הבטן5, הרחם, השתלות אורואיברי6.
שלא כמו השתלת איברים מוצק, רוב הטכניקות vca לערב את הנוכחות של העור תורם מאוד העברה אנטיגנית. ניסיון קליני קבע כי דחייה חריפה של העור הוא יחסית קל לשלוט אבל יכול לתרום דחייה כרונית של הרקמות הבסיסיות וכלים, אשר לא מגיבים היטב לטיפול7. תפקוד כלי הדם הקשורים לתגובה alloimmune היא מכשול מבשר רעות יותר עבור שדה VCA7. מקרוסרקולופאאס מובילים לפראינפוזיה, מעכבים ריפוי ומצבים מודלקות. הן האנטי-שוטפת של כלי הקיבול הגדול והתוקפני והיפרפלזיה האנטי-ממוקד מתרחשים בשני מקבלי השתלת יד7. בנוסף, סביר להניח שתורמים לסיבוכים של VCA, וייתכן אפילו להוביל לאירועי דחייה. בעוד הגורמים החיסונית ולא החיסונית כנראה לשחק תפקיד בתוך התמיכה של השתלת יד הנמענים, המנגנונים הספציפיים לקדם את התפקוד הלקוי של כלי הדם ב VCA אינם ידועים, במיוחד בהקשר של כיתה נמוכה, דחייה כרונית. אלה שאלות שלא נענו מחייבים את התפתחותם של מודל VCA בעלי חיים אשר יאפשר הערכה הסדרתית של השתל במהלך הקורס הקליני של הדחייה VCA/תחזוקה ו vasculopathy. דגם מסוג זה יציע תובנות לדחייה ולסרקולוטיה בפני דיכוי חיסוני, אתגר מדבק ו/או פציעה טראומטית שלאחר הניתוח,9.
מוצג כאן הוא עכברוש אלוגנמית VCA הטרוטונושא מודל הטרוסקסואלים האוסטאופהאיבר. בהתבסס על דגמי VCA שפורסמו בעבר, הליך זה מבחינה טכנית קל לבצע, להציג במספר גדול, ומציג תחלואה מינימלית וחוסר נוחות לבעלי חיים של המטופל. מודל זה תוכנן כדי לאפשר הערכות קליניות והיפולוגיים של קבלה VCA לעומת דחייה, והוא מספק הזדמנות להעריך בבסיס המנגנון החיסונית לא חיסונית המעורבים דחייה.

<table><tbody><tr><td>אצפרומזין</td><td>הנרי שיין</td><td>5700850</td><td></td></tr><tr><td>מספריים אדוונטיטיה</td><td>ASSI&nbsp;</td><td></td><td>מהדק</td></tr><tr><td>מעריך SAS15R8 (כפול)</td> <td>ASSI</td><td>ABB2V, מהדק מעריך ABB22V</td><td></td></tr><tr><td>(יחיד)</td> <td>FST</td><td>00398-02</td><td></td></tr><tr><td>מהדק החלת מלקחיים</td><td>ASSI&nbsp;</td><td>CAF4</td><td></td></tr><tr><td>מספריים לניתוח</td><td>ASSI</td><td>SDS18R8</td><td></td></tr><tr><td>שטיפה מחט קהה 27 גרם</td><td>SAI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparin נתרן</td><td>סוכן</td><td>25021-400-30</td><td></td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>14043-704-06</td><td></td></tr><tr><td>תכשיטנים דו קוטבי</td><td>ASSI</td><td>103000BPS03</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים תכשיטנים #3</td><td>FST</td><td>11231-30</td><td></td></tr><tr><td>קטמין הידרוכלוריד 100 מ"ג/מ"ל</td><td>זוטיס</td><td>043-304</td><td>נדרש רישיון DEA</td></tr><tr><td>תמיסת רינגר חלב</td><td>Hospira</td><td>0409-7953-03</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת רינגר חלב + 5% דקסטרוז</td><td>הוספירה</td><td>0409-7953-09</td><td></td></tr><tr><td>מלוקסיקם</td><td>הנרי שיין</td><td>11695-6925-2</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים</td><td>ASSI&nbsp;</td>מחזיק מחט <td>מיקרו JFAL3</td><td></td></tr><tr><td></td><td>ASSI</td><td>B138</td><td></td></tr><tr><td>Prograf (Tacrolimus) 5 מ"ג/מ"ל</td><td>אסטלס</td><td>0469-3016-01</td><td></td></tr><tr><td>תפר, 10-0 Prolene</td><td>Ethicon</td><td>W2790</td><td>או 10-0 Ethilon (2830)</td></tr><tr><td>תפר, 4-0 מצופה Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J714D</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים להרחבת כלי</td><td>ASSI</td><td>D5AZ</td><td></td></tr><tr><td>קסילזין</td><td>וטוואן</td><td>13985-612-50</td><td></td></tr></tbody></table>

שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט

Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

השתלת ואסיקלבית (VCA) היא שדה חדש יחסית בניתוח השיחזור. הישגים קליניים ב VCA האנושית כוללים השתלות יד ופנים, לאחרונה, קיר הבטן, הרחם, השתלות אורואיברי. התוצאות הפונקציונליות חרגו מציפיות ראשוניות, ורוב הנמענים נהנים מאיכות חיים משופרת. עם זאת, כאשר התנסות קלינית מצטברת, יש לטפל בדחייה כרונית ובסיבוכים מדיכוי החיסוני. במקרים רבים שבהם השתלים נכשלו, הפתולוגיה הסיבתי הייתה איסכמי ואסקולופתיה. <span style="font-size: 11pt; line-height: 115%; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(41, 43, 49); background-image: initial; background-position: initial; background-size: initial; background-repeat: initial; background-attachment: initial; background-origin: initial; background-clip: initial;">המנגנונים הביולוגיים של הדחייה החריפה והכרונית הקשורים ל-VCA, בעיקר לאיסכמי האנקולוטיה, הם תחומים חשובים של מחקר. עם זאת, בשל מספר קטן מאוד של חולי VCA, הערכה של מנגנונים מוצעים ממוען טוב יותר במודל ניסיוני. קבוצות מרובות השתמשו במודלים לבעלי חיים כדי לטפל בכמה מהשאלות הרלוונטיות שאינן פתורות בדחיית VCA ו-vasculopathy. בספרות מתוארות מספר עיצובים הכרוכים במגוון מינים. כאן אנו מציגים מודל הנחודש של VCA הטרולנושא המפרק האוסטאופהאיבר בתוך החולדה כי ניתן לעשות שימוש עבור מחקר VCA טרנסמטריקה. מודל זה מאפשר הערכה טורית של השתל, כולל ביופסיות ושיטות דימות שונות, תוך שמירה על רמה נמוכה של תחלואה.

מודל vca חולדה הטרומאת המודל האוסטאופמעורית מדגם מאפשר לטווח ארוך הישרדות השתלת תחת דיכוי חיסוני. המודל מהימן, מתוכשל ופשוט לביצוע. הכנף מוסתרת היטב באזור המפשעה ומהווה תחלואה וחוסר נוחות מינימליים לבעל החיים. מצגת העור הוא ביטוי קליני של הישרדות ודחייה של allograft (איור 1). עיצוב הכנף מאפשר ניטור קליני ברוטו ויוצר הזדמנות לטכניקות דימות שונות, כגון דופלר לייזר (איור 2). ביופסיות סדרתיות של העור, השריר והעורקים מאפשרים להגיע לטיפול וניתוח בשלבי דחייה שונים (<st...

השתל המורכב של vascularized מציע יתרונות משנים חיים לנמעני ההשתלה, אך הגורמים הביולוגיים לדחיית השתל והעיקור נשארים ברורים לקוי. המודל הכירורגי מכרסם הציג כאן מציע המודל הרלוונטי קלינית של השתלת, המאפשר לחוקרים להעריך את אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות כדי למנוע את התרחשותן.

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand ...

המספר הקטן של שבבי דם מרוכבים שבוצעו קלינית מחייב מודל אמין, רבייה בעלי חיים על מנת לחקור את הגורמים הבסיסיים של דחיית השתל. רקמות רלוונטיות קלינית כגון עור, שרירים ועצמות נמצאות כולן במודל. בנוסף, האופי הלא פונקציונלי של המודל שלנו מאפשר ניתוח מהיר יותר, פחות זמן איסכמי לדש, ותחלואה נמוכה יותר בהשוואה למודלים אורתוטופיים של VCA.במקבלי השתלת יד, vasculopathy של כלי תורמים יכול להוביל לסגירה מוחלטת של כלי השיט, ונזק איסכמי ליד המושתלת. מודל זה הוא כלי לחקר התפתחותם של אירועים וסקולופתיים אלה. לפני שתנסה את המודל הכירורגי הזה, המנתח הראשי צריך להכיר ולמיומנות בטכניקות כירורגיות מקרו-וסקולריות.זהו הליך מסובך וא ארוך. ההדגמה החזותית תסייע למעבדות אחרות להיערך בהתאם, ולהבין את שלבי הניתוח. כדי להתחיל, תחילה לקצור את האיבר האחורי של חולדה תורם על ידי ביצוע חתך בעור בקונסיברטיות המפשעה, חשיפת כלי הירך.בצע חתך בעור הגחוני, אשר יסייע ניתוח של פדיקל. לאחר פירוק הברך והקרסול, בצעו חתכים בעור הגבי, חותך את הפדיקל כדי לשחרר את השתל, ולהעביר את השתל מיד לשולחן הניתוחי של המטופל, שם האתר הכירורגי של החיה המטופלת מוכן מראש כדי למזער את הזמן האיסכמי של השתל. על החיה המטופלת, לחשוף ול לנתח את כלי הירך כמו קודם, ולאחר מכן anastomose השתל, וריד מקצה לקצה, עורק מקצה לקצה.מכניסים את השתל לכיס הפנימי ומכווןים אותו במהופך. לבסוף, לתפור את העור. כדי להתחיל את ההליך, לגלח חולדה תורם הרדמה, ולאחר מכן להשתמש קרם depilatory.להזריק 30 יחידות של הפרין תת עורית באזור scruff. מניחים את בעלי החיים על כרית חימום ומייצרים שדה כירורגי סטרילי על ידי הכנה, קרצוף ותעטפות של האזור הכירורגי, כולל ההיבט הגבי של הרגל. השתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי להפוך חתך עור 3 ס"מ ב concavity המפשעה של החולדה התורם.השתמש מספריים איריס כדי לשקף באופן מאוחר את כרית השומן inguinal. באמצעות ניתוח קהה עם ספוגית כותנה, לחשוף את כלי הירך הנפוצים, ולאחר מכן למקם וו חוט עם רצועה אלסטית כדי לחזור בו שרירי הבטן. תחת מיקרוסקופ ניתוח עם הגדלה של עד פי 40, השתמש במיקרו-מספריים, מספר שלוש מטליות תכשיטים ישרות, ומספר חמש מדפים בזווית של 45 מעלות כדי לנתח את הפדיקל באופן פרוקסימאלי מהופעת כלי הירך הנפוצים תחת הרצועה המגוחכת, ובדיסוס לקונפלינציה של כלי פופליטי לתוך השתל.באמצעות מיקרו קליפים ותכשיטנים דו קוטביים מטלטולים, ליגטה ולחלק את ענפי העורקים והווסקים הגדולים כדי לגייס את כלי הירך העיקריים. השתמש במדפים דו קוטביים עדין כדי לצרוב ענפים קטנים. השתמש מספריים איריס לעשות חתך בעור ממרכז העור הקודם לחתוך לאורך הצד הגחוני של hindlimb לאזור הקרסול.חותכים את שריר gracilis ואת השרירים adductor אחרים מתחתיו בצורה אנכית כדי לחשוף וללגר את כלי genicular proximal המדיאלי, כלי קטן הסתעפות עמוקה, ואת העצב הסיאטי. בשלב זה, על שולחן כירורגי נפרד, המנתח השני צריך להצביע ולהרים את החיה המטופלת כדי להכין את האתר הכירורגי של המטופל בזמן למיקום השתל, ולמזער את הזמן האיסכמי של השתל. בצע חתכים בעור היקפי ברמה של הברך והקרסול, לפרק את הברך והקרסול, ולהסיר שרירים ורקמות מיותרים.בצע חתך עור אנכי בצד הגבי של hindlimb כדי לשחרר את השתל, המורכב שוקית וטיביה, ועכשיו מחובר רק על ידי pedicle. מניחים מלחציים קטנים באופן פרוקסימילי ככל האפשר על עורק הירך והווריד וחותכים את הפדיקל קרוב ככל האפשר לרצועה המגוחך. השתמש 27-מד שטיפה cannula קהה להזריק מלוחים heparinized לתוך עורק הירך כדי לשטוף את השתל של דם.עוטפים את השתל המבודד בגאזה ספוגה מלוחים חמים ומעבירים אותו מיד לשולחן עם החיה המטופלת, כאשר האתר הכירורגי כבר מוכן לאנזטומוזיס כלי דם. צנרר את החולדה המטופל, ולהרדים עמוק עם 2.5 עד 3% איזופלורן מאודה, מאוזן עם ליטר אחד לדקה של חמצן. מניחים את החיה על כרית חימום, ולשפשף ולעטף את האתר הכירורגי.בזמן שהמנתח הראשון עובד על לשחרר את השתל מהחיה התורמת, השתמש בלהב אזמל מספר 15 כדי לבצע חתך עור באורך 3 ס"מ בקונסטיות המפשעה של החולדה המטופלת שהורדמה. השתמש מספריים איריס כדי לשקף באופן מאוחר את כרית השומן inguinal. לאחר חשיפת כלי הירך הנפוצים באותו אופן כמו עם החיה התורמת, מניחים וו תיל עם רצועה אלסטית כדי לחזור בו שרירי הבטן.ואז ליגטה ולחלק ענפי מרפי. באמצעות 10-0 ניילון קטע תפרים, כלי תורמים anastomose. לכלי נמען באמצעות טכניקה הווריית מקצה לקצה.לאחר מכן לבצע anastomosis עורקים באמצעות טכניקה מקצה לקצה. לאחר שחרור הדרגתי של המהדקים, יש לנטר את האתרים ההאנטומוטיים לדימום ולהוסיף תפרים נוספים במידת הצורך. על מנת להבטיח תדלוק שתל יעיל, חזותית להעריך את anastomosis כלי הדם.לאחר מכן להכניס את השתל לכיס inguinal, ולכוון אותו במהופך, עם מפרק הקרסול מעולה, ואת מפרק הברך נחות. השתמש תפרים תחוב כדי לאבטח את השתל לשרירים סמוכים. לבסוף, סגרו את העור באמצעות תפרים אופקיים ספוגים בעור 4-0, והמשיכו בטיפול לאחר הניתוח כמתואר בכתב היד.עכברוש VCA הטרוטופית בדיעבד מודל דש osteomyocutaneous מאפשר הישרדות allograft לטווח ארוך תחת דיכוי המערכת החיסון. הדש מוסתר היטב באזור המפשעה, ומהווה תחלואה מינימלית ואי נוחות לבעלי החיים. כאשר הטיפול בדיכוי המערכת החיסון הופסק, השתל נדחה.תמונות דופלר של allograft להראות מעבר מ שפע דם מינימלי מיד לאחר VCA, כדי revascularization מלא של הדש ביום 64. ביופסיה של העור של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית של מרכיבי העור, ואילו יש ניוון חדירת תא מונונוקלארי allograft allogeneic בדחייה ביום 75 מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון. ביופסיית שרירים של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית, ואילו ניוון שרירים חדירת תאים מונונוקלאריים ניכרים allograft allogeneic בדחייה ביום 98, מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון.ביופסיה עורק הירך של allograft סינגני ביום 45 מראה מורפולוגיה נורמלית של העורק, בניגוד לעורק הירך של allograft allogeneic בדחייה ביום 98, מטופלים מדי יום עם מינון נמוך יותר של מדכא חיסון. מודל זה מספק כלי לבדיקת ההשפעות של דחייה חריפה, דחייה כרונית וגורמים סביבתיים כגון זיהום ועלבונות כירורגיים על התפתחות vasculopathy. תרופות לדיכוי המערכת החיסון נדרשות להישרדות ארוכת טווח של השתל.תרופות אלה הן מסוכנות מבחינה כימית, ויש לטפל בהן בזהירות ובציוד מגן נכון של כוח אדם.

modified-heterotopic-hindlimb-osteomyocutaneous-flap-model-rat-for

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

העברת רקמה חינם הוא מועסק באופן נרחב בניתוח שחזור כדי לשחזר את הצורה ותפקוד בעקבות כריתה וטראומה אונקולוגי. Preconditioning רקמה זו לפני הניתוח עשויה לשפר את התוצאה. מאמר זה...

באתרו מדף רוחבי Rectus abdominis Myocutaneous: מודל עכברוש של הפגיעה reperfusion איסכמיה Myocutaneous

Vascularized Composite Allotransplantations (VCA) הפכו למציאות קלינית. עם זאת, יישום קליני רחב של VCA מוגבל על ידי דיכוי חיסוני סמים רב כרוני. המחברים מציגים מודל חיה גדול אמין לשחזור לתרגם אסטרטגיות החיסונית רומן שיכול למזער או פוטנציאלי לבטל את הצורך של דיכוי חיסוני בVCA.

דגם השתלות Heterotopic החזירים הינד איבר השתנה לTranslational vascularized Composite Allotransplantation מחקר (VCA)

מודל הרומן הזה להשתלה הגפיים האחוריות orthotopic בתוך העכבר, החלת טכניקה השרוול הלא תפר עבור השקה סופר-כלי הדם, מספק כלי רב עוצמה עבור מחקר אימונולוגי מכניסטית in vivo הקשורים אלוגרפט מרוכבים vascularized (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

כיום כל סוג של vascularized אלוגרפט ללא הפרדות צבע תלוי וארוך-טווח-החיסוני, קשה לתמוך עבור אינדיקציות לא החיים-קריטיות. אנו מציגים חזירי הטיביאלי VCA מודל חדש שניתן ללמוד עצם VCA ואף מדגימים את השימוש אנגיוגנזה כירורגית כדי לשמור על עצם הקיום ללא הצורך של החיסון לטווח ארוך-אפנון.

אנגיוגנזה כירורגי אלוגרפט הטיביאלי חזירי: עצם חדשים בעלי חיים גדולים Vascularized דגם אלוגרפט ללא הפרדות צבע

מאמר זה מתאר את השלבים הנדרשים להרמת דש חופשי אפיגסטרי פאשיו-עורי והעברתו לצוואר בחולדה.

מודל של העברת רקמות חינם: דש עכברוש ברום הבטן חינם

פרוטוקול זה מציג מודל חזק, לשחזור של כלי דם מרוכבים allotransplant (VCA) מכוון למחקר בו זמנית של אימונולוגיה והתאוששות תפקודית. הזמן שהושקע בטכניקה קפדנית בהשתלה אורתוטופית ירך ימין באמצע הירך האחורי עם תפורים ביד וסמיכות עצבית מניב את היכולת ללמוד התאוששות תפקודית.

לוקח את הצעד הבא: מודל השתלת גפיים אחוריות קופטציה עצבית כדי למקסם את ההתאוששות תפקודית בחולדה

מאמר זה מציג פרוטוקול השתלת דש אוסטאומיו-עורית הטרוטופית חלקית בחולדות ותוצאותיו הפוטנציאליות במעקב אמצע הטווח.

מודל השתלת הינדימבה הטרוטופית חלקית בחולדות

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את מודל הדש החיתו-עורי החזירי ואת השימוש הפוטנציאלי בו במחקר רקמות מרוכבות וסקולריות.

מודל אמין של דש פאסיו-עורי חזירי למחקרי ביו-הנדסה של אלוגרפטים מרוכבים מרוכבים בכלי דם

אנו מציגים מודל עכבר שניתן לשחזור של אלוטרנסלנטציה מורכבת של גפיים אחוריות לצוואר הטרוטופית. פרוטוקול סופר-מיקרוכירורגי זה, הכולל אנסטומוזות כלי דם בקוטר 0.3-0.5 מ"מ, משלב הנחיית חוטי ניילון ושרוול ורידי. הוא מספק פלטפורמה אמינה למחקרים תרגומיים על סבילות, פגיעות איסכמיה-רפווזיה, ומנגנונים אימונולוגיים באלוטרנסרפלנטציה של כלי דם מרוכב.

השתלת גפה אחורית לצוואר הטרוטופית בעכבר: מודל סופר-מיקרוכירורגי של אלוטרנספלינצ'נציה מורכבת וסקולרית

למדו מודל כירורגי בעכברים לחקר דחיית שתלים ווסקולופתיה באלוגרפטים מורכבים מושתלי כלי דם. שיטה זו מאפשרת הערכת אירועי דחייה ואסטרטגיות טיפוליות בקונטקסט קליני רלוונטי.

שונה הטרולנושא הגפיים האוסטאופהעורית מודל החולדה על השתלת ואסימטיקה מורכבת מחקר האלוגרפט

גלה סרטונים נוספים