כלבת נקרומה טכניקות בעלי חיים גדולים וקטנים
30 ביולי 2019
המטרה של פרוטוקול זה היא להפגין שיטות נמק בטוח בבעלי חיים קטנים וגדולים כדי להשיג דגימות רקמה מספקת עבור בדיקת כלבת.
איסוף רקמות לבדיקות כלבת יש סכנות ברורות ולא מעוררות עין. על הטכנאי להשתמש בשיטות הבטוחות ביותר הזמינות וללבוש ציוד מגן אישי מתאים. פרוטוקולים אלה מספקים טכניקות נקרופסיה בטוחות ללא שימוש בכלים חשמליים או מסורים, תוך מזעור הייצור של אירוסולים.
ניתן לבצע את הפרוטוקול הגדול של בעלי חיים גם בשטח. שימוש בשיטת אחזור דגימת בעלי חיים גדולה בתחום מבטל את האתגר של הובלת ראש בעל חיים במשקל של למעלה מ -45 ק"ג למעבדה. השיטה החייתית הגדולה דומה לפרוטוקול האירופי לאחזור דגימת אנצפלופתיה ספונטית transmissible והוא יכול לשמש לכל חקירה באמצעות גזע המוח והמוח הקטן.
כדי לאחזר את המוח הקטן ואת גזע המוח על ידי השיטה הגחונית, למקם את הצד הגחוני דגימה כלפי מעלה עם האף מכוון distally לכיוון החלק האחורי של ארון biosafety. מחזיק פטיש אורתופדי ביד הדומיננטית ואזמל חבר מועצה ביד השנייה, למקם את ה אזמל בזווית של 45 מעלות עם נקודת הפינה אל הפתח בצורת V בין הצד הימני של עצמות הזמן העורף. הכה את החלק העליון של ה אזמל עם הפטיש עד שתי העצמות נפרדות.
ולעשות חתך סמוך לעצם הבסיס. הפרד את עצמות הזמן וה העורף בצד שמאל של הדגימה כפי שהודגם זה הרגע. ולהשתמש ב אזמל לכופף את אזור V של הגולגולת כלפי מטה כדי לחשוף את כל אזור rhombencephalon של המוח.
לאחר מכן, השתמש במספריים ומדפים כדי לגרוף את גזע המוח ואת המוח הקטן, הסרת כל חתיכות רקמה שנותרו מהגולגולת לפי הצורך. אם הדגימה אינה מאפשרת מיקום אחזור גחוני המדגם הגבי, כאשר האף מופנה באופן דיסטרי לכיוון החלק האחורי של ארון ה-biosafety. ולהשתמש טנקולה גידול לתפוס את שריר הזמן השמאלי עם השיניים של טנקולה.
לסחוט את הידית כדי לנעול את השיניים סביב הרקמה ולהשתמש בסכין גילוף חדה לחתוך את שריר הזמן עד העצם. לסובב את הדגימה 180 מעלות עם טנקולה והסכין ולחזור על החתך על שריר הזמן הנגדי כדי לחשוף את הגולגולת. מחזירים את הראש לכיוון המקורי ומ מניחים את ה אזמל בזווית של 45 מעלות עם נקודת הפינה לאזמל במרכז הגולגולת בצומת העצמות הקודקודיות והאינטרפריטליות.
ולהכה את החלק העליון של ה אזמל עם הפטיש עד פתח אופקי נעשה על החצי העליון של הגולגולת בעצםקודית. לסובב את הדגימה 180 מעלות ולעשות פתח בצד הנגדי של הגולגולת כפי שהודגם רק. מקם את הראש לפי הצורך כדי להכניס את נקודת ה אזמל לתוך סוף החתך הראשון בזווית של 90 מעלות לפתיחה האופקית ולכה את ה אזמל עד הפתח מגיע לעצם העורפית.
מגלגלים את הדגימה כדי לפתוח את העצם העורפית הנגדית באותו אופן. הפתחים בגולגולת צריכים להידמות הפוך U.Insert השיניים של tenacula לתוך הגולגולת בתחתית לך ולמשוך את העצם לאחור כדי לחשוף את הקצה caudal של המוח הקטן ואת המוח הקטן. לאחר מכן השתמש במספריים כסקופ כדי להוציא את כל המוח הקטן מתוך החלל.
ולהשתמש במטלפסי רקמות כדי להקניט את גזע המוח מהתופסים. עבור המוח הקטן של בעלי חיים גדולים ואחזור גזע המוח, למקם את הדגימה, כך החלק הגבי של הגולגולת הוא במגע עם פני השטח נקרופסיה. עם החלק הקדום של הגולגולת ומגנום foramen מול החלק הקדמי של ארון biosafety.
לתפוס את גזע המוח עם מדפים. הכנס סכין סטילטו שונה לתוך מגנום foramen בין חוט השדרה ואת קרום המוח בעמוד השדרה ככל האפשר לסרוק סביב חוט השדרה כדי להפריד את המוח הקטן ואת גזע המוח מן קרום המוח בעמוד השדרה. לאחר מכן, משוך את הגבעול מתוך foramen עם מדפים.
כאשר הסכין הוכנסה דרך מגנום foramen, בעדינות זווית הלהב לעקוב לאורך הגולגולת ככל האפשר ולהכניס מרית מתכת או סכין עם ידית מספיק ארוכה כדי להגיע מתחת למוח לתוך החלל בין הרקמה העצבית ואת קרום המוח בעמוד השדרה. בדיקה סביב המוח הקטן כדי להבטיח כי הקשרים קרום המוח בעמוד השדרה נותו. כאשר קרום המוח נותק לחלוטין לקדם את המרית rostrally ו dorsally כדי לגרוף את המוח הקטן.
ואז לגרוף את המוח הקטן עם המרית. כל הדגימות הארציות שהוגשו עם גולגולות בין ה-31 בינואר 2019 ל-28 בפברואר 2019 היו מידע על נוכחות צוואר ושיטת הנמק שנאספה. במהלך תקופה זו, 170 ראשים היו necropsied עם 18 מינים מיוצגים.
52% נערפו כראוי. הנותרים היו לפחות חוליות אחד מחובר כולל שלוש דגימות גוף שלמות. נעשה שימוש בשיטת הגחון ב- 75% מהזמן.
מתוך אלה, צווארים היו נוכחים על 49. שלושה בעלי חיים גדולים הוגשו, בשני מקרים נעשה שימוש בפרוטוקול הגדול של בעלי החיים. סנאי אחד הוגש עם גולגולת מרוסקת ופשוט חותך את העור חשף את רקמת המוח כך שאף אחת מהשיטות המודגמת לא שימשה.
הרקמות המשמשות לצילום מיקרוסקופיה או מופקות משיטות מולקולריות בעת עיבוד בעלי חיים מרובים נמנעות מזיהום צולב באמצעות מכשירי כפפות חדשים ואזור עבודה נקי. להיות זהיר בעת ביצוע פרוטוקולים אלה כמו הדגימות עשוי להיות נגוע בנגיף כלבת או מחלות זואונוטיות אחרות. שים לב שאובייקטים חדים עשויים להיות נוכחים גם בתוך הדגימות.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים
סקירה כללית
מחקר זה דן בטכניקות נשפח (necropsy) לאיסוף בטוח של דגימות רקמה מבעלי חיים קטנים וגדולים כאחד, במטרה להקל על בדיקות לכלבת. הדגש מושם על מזעור הסיכונים הקשורים להיווצרות של אירוסולים במהלך תהליך הנשפח.
מרכיבי מפתח של המחקר
תחום המדע
- פתולוגיה וטרינרית
- חקירת מחלות זואונוטיות
- טכניקות לאיסוף דגימות רקמה
רקע
- נתיחה לאחר המוות כרוכה בסיכונים בעת איסוף דגימות רקמה לבדיקת כלבת.
- טכניקות נתיחה בטוחות הן קריטיות לאבחון מעבדתי.
- שיטות האיסוף נועדו למנוע זיהום צולב ולהימנע מחשיפה לנפתogens זואנוטיים.
- ניתן להתאימה לשימוש בשטח פרוטוקולים קיימים לשליפת דגימות מבעלי חיים גדולים.
מטרת המחקר
- להדגים טכניקות בטוחות לנתיחה לאחר המוות (necropsy).
- להתוות שיטות יעילות לדגימת רקמות מבעלי חיים קטנים וגדולים כאחד.
- להבטיח תהליכי איסוף נכונים הממזערים סיכונים עבור הטכנאים.
שיטות שנעשה בהן שימוש
- הפרוטוקולים עושים שימוש בכלים ידניים לצורך נתיחה, תוך הימנעות מכלים חשמליים כדי להפחית יצירה של אירוסולים.
- מתוארות שתי שיטות, ונטרלית ודורסלית, להוצאה בטוחה של גזע המוח והמוחון.
- טכניקות ספציפיות כוללות שימוש באיסות ופטיש ובתפסני גידוליים (tumor tenacula) למניפולציה של השרירים.
- שמות דגש על נקיטת אמצעי היגיינה קפדניים כדי למנוע זיהום צולב.
- איסוף תוך הקפדה על טיפול בטוח בדגימות שייתכן שהן נגועות בכלב.
תוצאות עיקריות
- השגת שליפה מוצלחת של רקמות מוחיות באמצעות הטכניקות המתוארות.
- במעורבותם של מיני בעלי חיים שונים, הודגשה יעילותם של הפרוטוקולים.
- עריפת ראש נכונה וטיפול תקין בדגימות היו קריטיים לקבלת תוצאות בדיקה מדויקות.
- נכללו אזהרות בנוגע לסיכונים זואנוטיים פוטנציאליים.
מסקנות
- מחקר זה קובע שיטות לביצוע נתיחות לאחר המוות באופן בטוח בתנאי שטח ובמעבדה.
- הפרוטוקולים מאפשרים דגימה מדויקת לצורך אבחון כלבת וממזערים את הסיכונים עבור המבצעים של ההליכים.
- הטכניקות שהודגמו תורמות להבנת מנגנוני המחלה ולפרקטיקות וטרינריות בטוחות.
שאלות נפוצות
רלוונטיות תעשייתית למנהלים
טכניקות נתיצה בטוחות וסטנדרטיות למעקב אחר כלבת הן קריטיות עבור צוותי מו"פ בביופארמה העוסקים במודלים של מחלות זואונוטיות ובגילוי סמנים ביולוגיים תרגומיים. מזעור של יצירת אירוסולים וזיהום צלוב במהלך איסוף רקמות משפיע ישירות על המהימנות של ניתוחים מולקולריים והיסטופתולוגיים בשלבים הבאים. פרוטוקולים אלה תומכים בשמירה רחבה על שלמות הדגימות ובבטיחות התפעולית, ומאפשרים הפקה בטוחה של נתונים עבור תיקי מחקר של מחלות זיהומיות.
יישומים אסטרטגיים במחקר ופיתוח בביו-פארמה
גילוי מוקדם ותיקוף מטרה
- מאפשר איסוף של רקמת מוח בעלת שלמות גבוהה לצורך זיהוי פתוגנים ומחקרים מכניסטיים.
- מפחית עמימות ביולוגית על ידי הבטחת דגימות ללא זיהום עבור תהליכי תיקוף של יעדים.
- תומך בביטחון ניבויי בפיתוח מודלים של מחלות על ידי מזעור משתנים פרה-אנליטיים.
סריקה ופיתוח בדיקות
- מסייע בהכנת דגימות רקמה מאומתות עבור בדיקות מולקולריות ואימונוהיסטוכימיות.
- משפר את השחזור של הבדיקות על ידי סטנדרטיזציה של הליכי הנתיחה והוצאת הרקמות.
- מאפשר סריקה אמינה של גורמים זיהומיים במודלים שונים של בעלי חיים.
מחקר תרגומי ופרה-קליני
- מתואם עם אסטרטגיות של ביומרקרים תרגומיים על ידי תמיכה באיסוף דגימות עקבי הן מהשטח והן מסביבות מעבדה.
- מבטיח רציפות משלב הגילוי ועד לתיקוף פרה-קליני באמצעות שמירה על איכות הדגימות ובטיחות ביולוגית.
- מפחית סיכונים במחקרים פרה-קליניים על ידי צמצום הסבירות לזיהומים מבלבלים או למקרי חשיפה.
שילוב זרימת עבודה וצנרת עיבוד
פרוטוקולי הנתיחה לאחר המוות הללו משתלבים בממשק שבין ביולוגיה של גילוי למחקר טרום-קליני של מחלות זיהומיות, ותומכים בזרימות עבודה החל מבדיקת היפותזות ועד לתיקוף של מודלים תרגומיים.
- ביולוגיה של גילוי: מספקת דגימות רקמה אמינות לזיהוי פתוגנים מונחה-השערה ומחקרים מכניסטיים.
- סריקה: מבצעת סטנדרטיזציה של קלט הדגימות עבור בדיקות מולקולריות וסרולוגיות המשך.
- אנליטיקה: מאפשרת קריאות כמותיות ואיכותיות על ידי שימור שלם הרקמה וצמצום זיהומים.
- מחקר תרגומי: תומכת ברציפות מהשטח למעבדה לצורך התאמה של סמני ביולוגיים ומודלים של מחלות.
- שימוש חוזר ארגוני: קובעת פרוטוקול בטוח-ביולוגית הניתן לשימוש חוזר ולהתאמה בין מינים וסביבות מחקר שונות.
השפעה תפעולית ועסקית
- ערך מדעי: מגביר את הביטחון החיזוי ומפחית עמימות מכניסטית במודלים של מחלות זיהומיות.
- ערך תפעולי: משפר את הסטנדרטיזציה, השחזוריות והבטיחות הביולוגית בזרימות עבודה של איסוף רקמות.
- ערך אסטרטגי: משפר את קבלת החלטות מסוג go/no-go ואת היעילות ההונית על ידי הפחתת סיכונים הקשורים לדגימות.
- השפעה על הפורטפוליו: תומך בתיעדוף מותאם סיכונים ובקידום תוכניות מחקר של מחלות זואונוטיות.
שיקולי יישום
- דורש כוח אדם מיומן הבקיא בטכניקות נשף ידניות ובפרוטוקולי בטיחות ביולוגית.
- מחייב גישה למכשור ידני מתאים ולתשתית בטיחות ביולוגית.
- דורש סטנדרטיזציה קפדנית בין הצוותים כדי להבטיח הדירות ובטיחות.
- ניתן להתאמה למגוון של מודלים חייתיים, מיונקים קטנים ועד לבעלי חיים גדולים.
- המגבלות כוללות פוטנציאל לשונות התלויה במבצע והצורך בהקפדה קפדנית על בקרת זיהומים.
שאלות נפוצות בתחום הביופארמה
Chapters in this video
0:04
Title
0:53
Small Animal Cerebellum and Brain Stem Retrieval: Ventral Method
2:03
Small Animal Cerebellum and Brain Stem Retrieval: Dorsal Method
4:01
Large Animal Cerebellum and Brain Stem Retrieval
5:23
Results: Representative Breakdown of Specimens Requiring Tissue Removal
6:22
Conclusion
