השרשה של מיני משאבה איזופרופיל כדי לגרום לאי ספיקת לב בעכברים

הממשל הכרוני של isoproterenol באמצעות משאבת osmotic כבר בשימוש נרחב כדי לסכם שינויים אי ספיקת לב מתקדמת בעכברים. שיטה זו היא פשוטה ודורשת פחות מומחיות כירורגית מאשר מודלים אחרים, כגון LAD ו- TAC. הדגמת ההליך תהיה ד”ר וינסנט רן, מדען מחקר מהמעבדה של ד”ר ייבין וונג.

לאחר שקילה ורישום משקל הגוף של כל עכבר, לחשב את הכמות המתאימה ואת הריכוז של isoproterenol עבור כל בעל חיים, ולהמיס את isoproterenol ב 120 microliters של סטרילי 0.9% נתרן כלורי. מערבבים היטב במשך דקה אחת כדי לבודד לחלוטין את isoproterenol, ולשקול ולתזמן את המשקל של משאבה אחת אוסמוטית ריקה, יחד עם ובלי מנחה הזרימה שלה, לכל עכבר. חבר צינור מילוי 27-מד, קהה קצה מסופק עם משאבות osmotic, ולטעון אחד, מזרק אחד מיליליטר עם 120 microliters של פתרון איזופרוטרנול לכל עכבר.

החזקת משאבה במצב זקוף, להכניס את צינור המילוי דרך פתח המשאבה בחלק העליון עד קצה צינור המילוי יושב ליד החלק התחתון של מאגר המשאבה, לאט לדכא את הבוכנה מזרק עד פתרון isoproterenol מתמלא לפתיחת המשאבה. כאשר המשאבה נטענה, להסיר בזהירות את צינור המילוי, ולנגב את הפתרון עודף. הכנס בחזרה את מנחה הזרימה כדי לסגור את המשאבה, ולמחוק כל פתרון עודף.

לאחר מכן תיצרו מחדש את המשאבה כדי לאשר כי יותר מ-90% מנפח המאגר מולאו. מניחים את העכבר בתדר supine על כרית מחוממת, ולהסיר את האוויר מהבטן התחתונה. להשתלת משאבת אוסמוטית כירורגית, אשרו חוסר תגובה לצביטת בוהן בעכבר הרדמה, והחלו משחה על עיני החיה.

נקה את העור החשוף עם חיטוי מתאים, ולעשות חתך בעור קו אמצע סנטימטר אחד. השתמשו בזוג מספריים קהים כדי לנתח בזהירות את העור מהקירות ההפיטוניים שמתוקעים, ולהשתמש במקלפים כדי למשוך את הקירות ההפך-דם הרחק מהמעיים שמתוקעים. השתמש במספריים עדין כדי לחתוך חור 0.8 ס”מ בקיר צפי, ולהכניס את מנחה זרימת משאבת osmotic לסיים תחילה לתוך חלל peritoneal.

כאשר המשאבה נמצאת במקום, להשתמש 5-0 תפרים ספיגה בצורה מופרעת כדי לסגור את החור בקיר צפק, ולהשתמש 6-0 תפרים בלתי ניתנים לספיגה כדי לסגור את העור. לאחר מכן מניחים את העכבר באינקובטור ייעודי עם ניטור עד לחזרה מלאה לפני החזרת החיה לכלוב הבית שלה. כאן מוצג סיכום השינויים השבועיים המבוססים על הפרמטרים האקו-קרדיוגרפיים שנבחרו ועל הזמן הצפוי למודל הפיתוח.

למרות וריאציות נצפו בין זני העכבר, בממוצע, עובי קיר מחיצה בין-תאיים בסוף diastole ו עלייה קיצור שבר בשבוע הראשון אבל להקטין על ידי נקודות זמן מאוחר יותר. הקוטר הפנימי בחדר השמאלי בסוף diastole ואת המסה החדר השמאלי להגדיל על פני תקופה של שלושה שבועות. יתר על כן, לבבות העכבר להפגין ממדים תאים שמאליים גדולים יותר בעליל תחת isoproterenol, כמו גם כמויות גדולות יותר של פיברוזיס יחסית פקדים מלוחים שטופלו.

זה קריטי כדי לשמור על סביבה כירורגית סטרילית במהלך ניתוח ההישרדות כדי למזער זיהום לאחר הניתוח ותחלואה. יצירת מודל מוצלחת ניתן להעריך vivo על ידי אקו קרדיוגרפיה סדרתית עבור היפרטרופיה, תדלוח, תפקוד לקוי, כמו גם אקס ויוו באמצעות הערכה היסטולוגית ומולקולרית של רקמת לב שנקטפה. יישמו שיטה זו על מעל 100 זנים של עכברים inbred כדי להעריך תכונות שיפוץ לב עקב גירוי בטא-adrenergic כרונית.

התוצאות מתפרסמות וזמינות.