ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו ממומנת על ידי קרן המחקר הגרמני (DFG) בתוך מרכז מחקר שיתופי (SFB) 1134 "הרכבים פונקציונליים" (J.v.E. ו X.C.) ואת המענק מחקר EN948/1-2 (J.v.E.).

כל הניסויים אושרו על ידי פאנל הפיקוח הממשלי על ניסויים בבעלי חיים של ריינלנד-פפאלץ.
1. פתרונות
<ol><li>תמיסת חיתוך<ol>
<li>כדי להפחית את ההתרגשות, הכינו פתרון מבוסס כולין לשימוש במהלך הניתוח כפי שהוצג כאן (ב-mM): 87 נארל, 2.5 KCl, 37.5 כולין כלוריד, 25 נחקו3, 1.25 נה2פו4, 0.5 Cacl2, 7 mgcl2, ו 25 גלוקוז. הכינו את פתרון הניתוח פחות משבוע לפני הניסוי.</li>
	</ol>
</li>
	<li>פתרון הקלטה<ol>
<li>הכנת נוזל מלאכותי מוחין השדרה (ACSF) פתרון המכיל (ב mM): 125 הנאקל, 25 נחקו3, 1.25 נה2PO4, 2.5 Kcl, 2 קא2, 1 mgcl2, ו 25 גלוקוז. להוסיף 50 μM D-APV ו-10 μM SR 95531 הידרוברומיד כדי לחסום N-מתיל-D-aspartate (NMDA) ובהתאם לקולטנים,בהתאמה .</li>
	</ol>
</li>
	<li>פתרון תאיים<ol>
<li>להכין פתרון תאיים המכיל (ב מ): 35 Cs-gluconate, 100 CsCl, 10 HEPES, 10 EGTA, ו 0.1 D-600 (מתיונין הידרוכלוריד). להתאים את ה-pH ל 7.3 עם CsOH. סנן, משתמש ואחסן את פתרון המניה ב-20 ° c עד השימוש.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. חיתוך והרכבה
<ol><li>הכינו שני תאי פרוסה, שמהם הוא מלא 100 mL של פתרון החיתוך והשני עם 100 mL של פתרון ההקלטה. מניחים את שני הספלים לתוך אמבט מים (37 ° c) ובועה את הפתרונות עם קרבוסג'ן לפחות 15 דקות לפני הקרע.</li>
	<li>למלא גביע פלסטיק עם 250 mL של כמעט קרח קר (אך לא קפוא) פתרון חיתוך. בועה עם קרבוגן לפחות 15 דקות לפני השימוש.</li>
	<li>ממלאים צלחת פטרי מפלסטיק (100 מ"מ x 20 מ"מ), שבה יבוצע ניתוח המוח, עם פתרון החיתוך הקר. מניחים פיסת נייר סינון לתוך המכסה של צלחת פטרי.</li>
	<li>. תירגע בחדר הניתוח של הרטט</li>
	<li>הכשלי עכבר עם 2.5% isofלבנה, למשל, בכלוב העכבר. ברגע העכבר אינו מגיב צביטה זנב, לערוף את העכבר ליד לשד צוואר הרחם ולטבול את הראש לתוך הפתרון לקרע קר קרח בבסיס של צלחת פטרי.</li>
	<li>חותכים את העור של הראש מקאואל אפי ולשמור אותו לצד האצבעות כדי לחשוף את הגולגולת. כדי להוציא את המוח הקדמי, לחתוך תחילה את הגולגולת יחד עם האמצע האחורי הקדמי, ולאחר מכן לחתוך שתי פעמים יותר דרך תפר המונונאליות ואת התפר כבשה (איור 1A).</li>
	<li>הסירו את הגולגולת בין תפר העור ותפר העור כגון המוח נחשף. חותכים את נורת הריח ומפרידים את המוח הקדמי מהמוח עם להב דק (איור 1B). מסירים את המוח מהגולגולת עם מרית דקה ומניחים אותו על נייר הסינון במכסה של צלחת פטרי. הערה: שלבים 2.6 ו 2.7 יש לבצע מהר ככל האפשר כדי להפחית את מוות התאים.</li>
	<li>כדי לשמור על שלמות החושים הסנסוריים והחושיים לרכיב ה-dLGN בפרוסת המוח, הפרידו בין שתי האונות בעזרת זווית של 3/5 ° (איור 1C,D). מייבשים את המישורים המנייביים של שתי ההמיספרות על ידי הצבת אותם על נייר הסינון ולאחר מכן הדבק אותם אל השלב החותך בזווית של 10-25 ° מהמטוס האופקי (איור 1E).</li>
	<li>הניחו את הבמה במרכז מגש המתכת, ושופכים בעדינות את שאר הפתרון לחיתוך קר הקרח לתוך מגש המאגר. בצע צעד זה בזהירות מכיוון שזרימה חזקה עשויה להסיר את המוח המודבק (איור 1F).</li>
	<li>מניחים את מגש המאגר לתוך מגש מלא קרח, אשר מסייע לשמור על טמפרטורה נמוכה במהלך הניתוח. גזור 250 יקרומטר פרוסות עם להב תער במהירות של 0.1 מ"מ/s ומשרעת של 1 מ"מ.</li>
	<li>שמרו פרוסות בתא המעצר מלאות בתמיסה לחיתוך חמצן ב-34 ° c לערך 30 דקות ולאחר מכן הניחו לפרוסות להתאושש בפתרון ההקלטה ב-34 ° c לעוד 30 דקות.</li>
	<li>לאחר ההחלמה, להסיר את התא המחזיק את הפרוסה מאמבט מים ולשמור פרוסות בטמפרטורת החדר (RT) עד לשימוש בניסויים.</li>
</ol>3. אלקטרופיזיולוגיה
<ol><li>משוך את הפיפטות באמצעות נימי זכוכית בורוסיליקט ולאחר מכן לפולר. שמרו על עמידות ההקלטה ב-3-4 MΩ. משוך את הפיפטות הגירוי באותו פרוטוקול, אך שבור מעט את הקצה לאחר שהוא מושך להגדיל את הקוטר. ממלאים את ההקלטה בעזרת התמיסה התאיים והביולוציטין, תוך כדי מילוי הרטט עם פתרון ההקלטה.</li>
	<li>מניחים את הפרוסות בתוך חדר ההקלטה ומאפשרות באופן רציף את הפרוסות בעזרת פתרון הקלטה מחמצן ב-RT. בדוק את כל הפרוסות ובחר את אלה שמציגים מערכת אופטית ללא שינוי.</li>
	<li>המחש את הפרוסה והתאים במיקרוסקופ זקוף המצויד בניגוד הפרעות אינפרא-אדום (IR-DIC) וידאו מיקרוסקופ. הערה: ממסר הנוירונים הם הבדיל בין interneurons על ידי גודל הסומה הגדול שלהם יותר הדנדריטים העיקרי (סניפים המתעוררים מן הסומה). אינטרנוירונים להציג מורפולוגיה דו-קוטבית עם הסומה קטן.</li>
	<li>הניחו את הפיפטה הגירוי על הפרוסה לפני שאתם מקליטים את התא עם הפיפטה המוקלט. כדי לחקור את הסינפסות retinogeniculate למקם את הצינורות הגירוי ישירות על מערכת האופטית, שם סיבי אקסון מתאים גנגליון הרשתית הם ארוזות (איור 2a). כדי לנתח את הסינפסות corticogeniculate, הציבו את האלקטרודה המעוררת על הגרעין של ראקולאריס thalami, שהוא בצמוד ל-dLGN (איור 2B).</li>
	<li>לאחר שפיפטה ההקלטה שקוע לתוך פתרון ההקלטה, להחיל 5 וולט הצעד מתח כדי לפקח על ההתנגדות הפיפטה. הגדר את הפוטנציאל המחזיק ב-0 mV ובטל את הפוטנציאל הנגדי כך שהזרם המחזיק הוא 0 pA.</li>
	<li>גש לתא עם הפיפטה המוקלט. בזמן הפעלת לחץ חיובי כאשר הפיפטה נמצא במגע ישיר עם קרום התא, לשחרר את הלחץ החיובי, ולהגדיר את הפוטנציאל המחזיק-70 mV. החלת לחץ שלילי קל כדי לאפשר את קרום התא להצמיד את הזכוכית לצינורות כגון החותמות של ג'יגה אוהם (עמידות > 1 GΩ). לפצות את הקיבולת של הצנרת ולפתוח את התא על ידי יישום של פולסים בלחץ שלילי.</li>
	<li>כדי לחקור את הפונקציה סינפטית, להחיל 0.1 ms הפולסים הנוכחיים (ca. 30 μA) דרך הפיפטה גירוי. אם לא נצפו תגובות סינפטית, ייתכן שיהיה צריך להחליף את הפיפטות הגירוי. היזהרו בזמן הצבת הפיפטות הגירוי לתנוחה אחרת, כך שהתא המוקלט לא יאבד. הערה: בהקלטות לדוגמה המוצגות באיור 2, הפלסטיות הסינפטית לטווח קצר, נחקר על-ידי עירור הסיבים האופטיים או סיבי הcorticogeniculate פעמיים עם 30 אלפיות השנייה של מרווחי הגירוי. היחס מזווג הדופק (PPR) חישב על ידי חלוקת משרעת של הזרם השני מרגש פוסט-סינפטית (EPSC) על ידי זה של EPSC הראשון (EPSC2/epsc1). כל פרוטוקול גירוי חזר 20 פעמים. משרעת EPSC נמדדו מתוך הזרמים הממוצעים של 20 מטאטא. מרווח הזמן בין כל חזרה היה לפחות 5 s כדי למנוע הפלסטיות לטווח קצר הנגרמת על ידי חזרות.</li>
	<li>עקוב אחר התנגדות הסדרה ברציפות על-ידי החלת צעד מתח 5-mV. רק להשתמש בתאים עם התנגדות הסדרה קטן יותר 20 MΩ לניתוח.</li>
</ol>4. תיוג ביולוציטין
<ol><li>שמור על תצורת התאים השלמה לפחות 5 דקות כדי לאפשר דיפוזיה של ביוציטוטין לתוך הדנדריטים הדידיטים.</li>
	<li>לאחר ההקלטה, להסיר בעדינות את הפיפטה מתא כך הסומה לא נהרס. הערה: אם יותר מתא אחד נרשם בפרוסה אחת, יש להתרחק ממנו בצורה מספקת מהתאים השכנים שלהם. ודא שהדנדריטים מתאים שונים אינם מפריעים זה לזה במהלך ההדמיה.</li>
	<li>הכינו לוחית של תרבית תאים באורך 24 שעות. ממלאים כל טוב עם 300 μL של 4% פאראפורמלדהיד (בתחתית). הקפד לא לזהם שום דבר עם הב, כי יהיה במגע עם הפרוסות להיות מוקלט.</li>
	<li>העבירו את הפרוסות מתא ההקלטה ללוח הכולל את המשטח עם פיפטה גומי ותקנו את הפרוסות בלילה. ודא שהפיפטה תמיד מנועה מהזיהום בה, התראה: תמיד לבש כפפות והשתמש במכסה כימי כשאתה מתמרן את השימוש בלגון.</li>
	<li>לאחר שהוא מתקן פרוסות לילה בתוך המטה, החליפו את הכדורגלן עם תמיסת מלח באגירה מפוספז (PBS). אחסן את הפרוסות ב-PBS ב-4 ° צ' לעיבוד עתידי (פחות מ 2 שבועות).</li>
	<li>שטוף את הפרוסות באמצעות הערוץ החדש 3 פעמים (10 דקות כל כביסה).</li>
	<li>חסימת אתרי קשירה לא ספציפיים על-ידי הדיסת הפרוסות בפתרון החסימה (0.2% שאינו מוגדר על-ידי החלפת שקעים ו-5% סרום בקר בערוץ PBS) עבור 2 h ב-RT על שייקר מסלולית.</li>
	<li>מחק את פתרון החסימה. מודלת את הפרוסות עם streptavidin-אלקסה 568 מדולל לתוך פתרון חסימת (1:1000) ב 4 ° c לילה על שייקר מסלולית.</li>
	<li>להיפטר פתרון נוגדן ולשטוף פרוסות 3 פעמים עם PBS עבור 10 דקות ב RT על שייקר מסלולית. שטוף את הפרוסות בעזרת מי ברז לפני ההרכבה.</li>
	<li>שימו את הפרוסות מעכבר אחד על מגלשת זכוכית אחת. ודא שהתאים המוכתמים נמצאים על המשטח העליון של הפרוסות. לספוג את המים סביב פרוסות עם רקמות ולאחר מכן להשאיר את הפרוסות להתייבש במשך כ 15 דקות.</li>
	<li>החל שתי טיפות של מדיום הרכבה בכל פרוסה. הר שמיכות בשקופית מבלי לייצר בועות אוויר.</li>
	<li>אחסנו את הפרוסות המסומנות ב-4 ° c לאחר הדמיה בעזרת מיקרוסקופ קונמוקד.</li>
</ol>5. הדמיה סלולרית ושיחזור
<ol><li>סרוק פרוסות בעזרת מיקרוסקופ קונמוקד והשתמש בתוכנה המשויכת לניתוח.</li>
	<li>להלהיב את הזריחה ב 561 ננומטר.</li>
	<li>תמונה הפרוסות עם 0.7 מפתח נומרי (NA), המטרה טבילה בשמן.</li>
	<li>התאימו את התא המיועד באמצע התצוגה והחילו הגדלה של 2.5 פעמים.</li>
	<li>רינדור הנתונים של מחסנית Z כדי לסרוק את תא העצב כולו עם הפרמטרים הבאים: פורמט = 2,550 x 2,550 פיקסלים, תדר סריקה = 400 Hz, Z מספר = 40. Voxel גודל היה סביב 0.1211 x 0.1211 x 1.8463 μm3.</li>
	<li>Semi-באופן אוטומטי לעקוב אחר הנוירונים באמצעות תוכנת שחזור עצבי (למשל, NeuronStudio). דוגמה לעצב-על של ממסר מעקב תלת-ממדי מוצג באיור 3D.</li>
</ol>

<ol><li>Guido, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development%2C+form%2C+and+function+of+the+mouse+visual+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Development, form, and function of the mouse visual thalamus.</a> Journal of Neurophysiology. 120, 211-225 (2018).</li>
<li>Guillery, R. W., Feig, S. L., Lozsadi, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paying+attention+to+the+thalamic+reticular+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Neurosciences%22%5BJournal%5D)">Paying attention to the thalamic reticular nucleus.</a> Trends in Neurosciences. 21, 28-32 (1998).</li>
<li>Turner, J. P., Salt, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+sensory+and+corticothalamic+excitatory+inputs+to+rat+thalamocortical+neurones+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Characterization of sensory and corticothalamic excitatory inputs to rat thalamocortical neurones in vitro.</a> The Journal of Physiology. 510 (3), 829-843 (1998).</li>
<li>Lindstrom, S., Wrobel, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+dependent+corticofugal+excitation+of+principal+cells+in+the+cat%27s+dorsal+lateral+geniculate+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Frequency dependent corticofugal excitation of principal cells in the cat's dorsal lateral geniculate nucleus.</a> Experimental Brain Research. 79, 313-318 (1990).</li>
<li>Granseth, B., Ahlstrand, E., Lindstrom, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paired+pulse+facilitation+of+corticogeniculate+EPSCs+in+the+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+of+the+rat+investigated+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Paired pulse facilitation of corticogeniculate EPSCs in the dorsal lateral geniculate nucleus of the rat investigated in vitro.</a> The Journal of Physiology. 544, 477-486 (2002).</li>
<li>Hamos, J. E., Van Horn, S. C., Raczkowski, D., Uhlrich, D. J., Sherman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+connectivity+of+a+local+circuit+neurone+in+lateral+geniculate+nucleus+of+the+cat%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Synaptic connectivity of a local circuit neurone in lateral geniculate nucleus of the cat.</a> Nature. 317, 618-621 (1985).</li>
<li>Kielland, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activity+patterns+govern+synapse-specific+AMPA+receptor+trafficking+between+deliverable+and+synaptic+pools%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Activity patterns govern synapse-specific AMPA receptor trafficking between deliverable and synaptic pools.</a> Neuron. 62, 84-101 (2009).</li>
<li>Chen, C., Regehr, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+remodeling+of+the+retinogeniculate+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Developmental remodeling of the retinogeniculate synapse.</a> Neuron. 28, 955-966 (2000).</li>
<li>Budisantoso, T., Matsui, K., Kamasawa, N., Fukazawa, Y., Shigemoto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+signal+filtering+at+a+multisynapse+contact%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%3A+The+Official+Journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying signal filtering at a multisynapse contact.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 32, 2357-2376 (2012).</li>
<li>Morgan, J. L., Berger, D. R., Wetzel, A. W., Lichtman, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Fuzzy+Logic+of+Network+Connectivity+in+Mouse+Visual+Thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The Fuzzy Logic of Network Connectivity in Mouse Visual Thalamus.</a> Cell. 165, 192-206 (2016).</li>
<li>Usrey, W. M., Reppas, J. B., Reid, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paired-spike+interactions+and+synaptic+efficacy+of+retinal+inputs+to+the+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Paired-spike interactions and synaptic efficacy of retinal inputs to the thalamus.</a> Nature. 395, 384-387 (1998).</li>
<li>Steriade, M., Jones, E. G., McCormick, D. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSteriade%2C+M+%22Thalamus%22">Thalamus</a>. , (1997).</li>
<li>Wang, W., Jones, H. E., Andolina, I. M., Salt, T. E., Sillito, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+alignment+of+feedback+effects+from+visual+cortex+to+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Functional alignment of feedback effects from visual cortex to thalamus.</a> Nature Neuroscience. 9, 1330-1336 (2006).</li>
<li>Zucker, R. S., Regehr, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+synaptic+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Short-term synaptic plasticity.</a> Annual Review of Physiology. 64, 355-405 (2002).</li>
<li>Chen, C., Blitz, D. M., Regehr, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contributions+of+receptor+desensitization+and+saturation+to+plasticity+at+the+retinogeniculate+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Contributions of receptor desensitization and saturation to plasticity at the retinogeniculate synapse.</a> Neuron. 33, 779-788 (2002).</li>
<li>Chen, X., Aslam, M., Gollisch, T., Allen, K., von Engelhardt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CKAMP44+modulates+integration+of+visual+inputs+in+the+lateral+geniculate+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">CKAMP44 modulates integration of visual inputs in the lateral geniculate nucleus.</a> Nature Communications. 9, 261(2018).</li>
<li>Krahe, T. E., El-Danaf, R. N., Dilger, E. K., Henderson, S. C., Guido, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologically+distinct+classes+of+relay+cells+exhibit+regional+preferences+in+the+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience+%3A+The+Official+Journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Morphologically distinct classes of relay cells exhibit regional preferences in the dorsal lateral geniculate nucleus of the mouse.</a> The Journal of Neuroscience : The Official Journal of the Society for Neuroscience. 31, 17437-17448 (2011).</li>
<li>von Engelhardt, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CKAMP44%3A+a+brain-specific+protein+attenuating+short-term+synaptic+plasticity+in+the+dentate+gyrus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">CKAMP44: a brain-specific protein attenuating short-term synaptic plasticity in the dentate gyrus.</a> Science. 327, 1518-1522 (2010).</li>
<li>Khodosevich, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coexpressed+auxiliary+subunits+exhibit+distinct+modulatory+profiles+on+AMPA+receptor+function%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Coexpressed auxiliary subunits exhibit distinct modulatory profiles on AMPA receptor function.</a> Neuron. 83, 601-615 (2014).</li>
<li>Farrow, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxiliary+subunits+of+the+CKAMP+family+differentially+modulate+AMPA+receptor+properties%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Auxiliary subunits of the CKAMP family differentially modulate AMPA receptor properties.</a> eLife. 4, e09693(2015).</li>
<li>Rafols, J. A., Valverde, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+structure+of+the+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+in+the+mouse.+A+Golgi+and+electron+microscopic+study%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">The structure of the dorsal lateral geniculate nucleus in the mouse. A Golgi and electron microscopic study.</a> The Journal of Comparative Neurology. 150, 303-332 (1973).</li>
<li>Hauser, J. L., Liu, X., Litvina, E. Y., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+synaptic+currents+increase+relay+neuron+firing+at+the+developing+retinogeniculate+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Prolonged synaptic currents increase relay neuron firing at the developing retinogeniculate synapse.</a> Journal of Neurophysiology. 112, 1714-1728 (2014).</li>
<li>Hooks, B. M., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+roles+for+spontaneous+and+visual+activity+in+remodeling+of+the+retinogeniculate+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Distinct roles for spontaneous and visual activity in remodeling of the retinogeniculate synapse.</a> Neuron. 52, 281-291 (2006).</li>
<li>Liu, X., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+roles+for+AMPA+and+NMDA+receptors+in+transmission+at+the+immature+retinogeniculate+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Different roles for AMPA and NMDA receptors in transmission at the immature retinogeniculate synapse.</a> Journal of Neurophysiology. 99, 629-643 (2008).</li>
<li>Govindaiah, G., Cox, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabotropic+glutamate+receptors+differentially+regulate+GABAergic+inhibition+in+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%3A+The+Official+Journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Metabotropic glutamate receptors differentially regulate GABAergic inhibition in thalamus.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 26, 13443-13453 (2006).</li>
<li>Fogerson, P. M., Huguenard, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tapping+the+Brakes%3A+Cellular+and+Synaptic+Mechanisms+that+Regulate+Thalamic+Oscillations%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Tapping the Brakes: Cellular and Synaptic Mechanisms that Regulate Thalamic Oscillations.</a> Neuron. 92, 687-704 (2016).</li>
<li>Jacobsen, R. B., Ulrich, D., Huguenard, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GABA%28B%29+and+NMDA+receptors+contribute+to+spindle-like+oscillations+in+rat+thalamus+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">GABA(B) and NMDA receptors contribute to spindle-like oscillations in rat thalamus in vitro.</a> Journal of Neurophysiology. 86, 1365-1375 (2001).</li>
<li>Kulik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+localization+of+GABA%28B%29+receptors+relative+to+synaptic+sites+in+the+rat+cerebellum+and+ventrobasal+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22The+European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Distinct localization of GABA(B) receptors relative to synaptic sites in the rat cerebellum and ventrobasal thalamus.</a> The European Journal of Neuroscience. 15, 291-307 (2002).</li>
<li>Gutierrez, C., Cox, C. L., Rinzel, J., Sherman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+low-threshold+spike+activation+in+relay+neurons+of+the+cat+lateral+geniculate+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%3A+The+Official+Journal+of+the+Society+for+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dynamics of low-threshold spike activation in relay neurons of the cat lateral geniculate nucleus.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 21, 1022-1032 (2001).</li>
<li>Armstrong, C. M., Gilly, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Access+resistance+and+space+clamp+problems+associated+with+whole-cell+patch+clamping%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Enzymology%22%5BJournal%5D)">Access resistance and space clamp problems associated with whole-cell patch clamping.</a> Methods in Enzymology. 207, 100-122 (1992).</li>
<li>White, J. A., Sekar, N. S., Kay, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Errors+in+persistent+inward+currents+generated+by+space-clamp+errors%3A+a+modeling+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Errors in persistent inward currents generated by space-clamp errors: a modeling study.</a> Journal of Neurophysiology. 73, 2369-2377 (1995).</li>
<li>Clay, J. R., Shlesinger, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+effects+of+cesium+ions+on+potassium+channel+currents+in+biological+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Theoretical+Biology%22%5BJournal%5D)">Analysis of the effects of cesium ions on potassium channel currents in biological membranes.</a> Journal of Theoretical Biology. 107, 189-201 (1984).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

אנו מתארים פרוטוקול משופר המבוסס על שיטה שפורסמה בעבר3, אשר מאפשר את החקירה של ההסתברות הגבוהה של הסינפסות retinogeniculate הסתברות נמוכה של שחרור corticogeniculate הסינפסות מאותה פרוסה. זה חשוב מאוד מאז שני כניסות אלה אינטראקציה אחד עם השני כדי לווסת את שידור האות החזותי: כניסות retinogeniculate הם הכונן העיקרי של ממסר הנוירונים, בעוד corticothalamic תשומות פונקציה כמו מאפטור, אשר משפיע על הרווח של שידור retinogeniculate על ידי השפעה על מצב של ממסר נוירונים. כצפוי, הבחנו כי הסינפסות retinogenicul...

ממסר נוירונים של גרעין הג לרוחב לשלב ולהעביר מידע חזותי לקליפת הראייה. נוירונים אלה מקבלים קלט מרגש של התאים גנגליון באמצעות הסינפסות retinogeniculate, אשר מספקים את הכונן העיקרי ה, הכולל את הדחף המרכזי לנוירונים. בנוסף, ממסר הנוירונים מקבלים כניסות מהנוירוטית מנוירונים באמצעות corticogeniculate הסינפסות. יתר על כן, ממסר הנוירונים לקבל תשומות מעכבות של האינטרנוירונים מקומיים ו GABAergic נוירונים של הגרעין של רטיקולאריס thalami1. הגרעין ברטיקולריס thalami נמצא כמו מגן בין תלמוס לקליפת המוח, כך שסיבים מקרינים מקליפת התלמוס ובכיוון ההפוך, חייבים לעבור דרך הגרעין רטיקולאריס thalami2.
כניסות retinogeniculate ו corticogeniculate תשומות להציג תכונות סינפטית נפרדות3,4,5,6,7,8. כניסות retinogeniculate טופס מסופים גדולים עם מספר אתרי שחרור9,10. לעומת זאת, כניסות corticogeniculate מציגות מסופים קטנים עם אתרי שחרור בודדים7. בנוסף, הסינפסות retinogeniculate ביעילות כונן פוטנציאל הפעולה של הנוירונים ממסר למרות מהווה רק 5-10% של כל הסינפסות על ממסר נוירונים3,8,11. Corticogeniculate הסינפסות, לעומת זאת, משמש מאפטור של שידורי retinogeniculate על ידי שליטה על פוטנציאל הממברנה של ממסר נוירונים12,13.
אלה שני תשומות ההתרגשות העיקריים להעברת הנוירונים הם גם שונה מבחינה פונקציונלית. אחד ההבדל הבולט הוא דיכאון לטווח קצר של הסינפסות retinogeniculate ואת ההנחיה לטווח קצר של הסינפסות corticogeniculate3,5,8. הפלסטיות הקצרת-טווח מתייחס לתופעה שבה משתנה חוזק הסינפטית כאשר הסינפסה פעילה שוב ושוב תוך פרק זמן של מספר אלפיות-שניה ועד מספר שניות. ההסתברות לשחרור סינפטית היא גורם חשוב המשמש לפלסטיות לטווח קצר. סינפסות, עם הסתברות שחרור נמוך הראשונית, להציג הקלה לטווח קצר עקב הצטברות של Ca2 + ב preסינפסה ולכן עלייה בהסתברות השחרור נצפתה על פעילות חוזרת. לעומת זאת, הסינפסות עם הסתברות שחרור גבוה להציג בדרך כלל דיכאון לטווח קצר עקב דלדול של שלפוחיות מוכנות ושלפוחית14. בנוסף, הפחתת רגישות של קולטנים פוסט-סינפטית תורמת הפלסטיות לטווח הקצר בכמה סינפסות הסתברות גבוהה מהדורה8,15. הסתברות גבוהה לשחרור והפחתת הרגישות של α-אמינו-3-הידרוxy-5-מתיל-4-isoxazolepropionic חומצה (אמפא) קולטנים תורמים לדיכאון הבולט לטווח קצר של הסינפסות retinogeniculate. לעומת זאת, ההסתברות לשחרור נמוך מהווה את ההנחיה לטווח הקצר של הסינפסות הcorticogeniculate.
בעכברים, המערכת האופטית נכנסת לגרעין של הג הצדדי (dLGN) מהאתר של קודולצלעות, בעוד שסיבים corticogeniculate נכנסים לתוך ה-dLGN rostroventrally. המרחק בין שני הקלטים מאפשר לחקור את המאפיינים הפרטניים של שני כניסות מרגש שונות מאוד אל אותו תא. כאן, אנו בונים על ולשפר את שיטת הניתוח שתוארה בעבר, שבו סיבים retinogeniculate והוא נשמר בפרוסות מוח חריפה3. אנו, לאחר מכן, לתאר את החקירה אלקטרופיסיולוגית של העברת נוירונים וגירוי של retinogeniculate וסיבים corticogeniculate עם אלקטרודות לתוך הגירוי. לבסוף, אנו מספקים פרוטוקול למילוי של נוירונים ממסר עם ביוציטוטין וניתוח אנטומי הבאים.

<table><tbody><tr><td>מגבר&nbsp;</td><td>HEKA Elektronik</td><td>EPC 10 USB מגבר</td><td></td>מהדק תיקון כפול</tr><tr><td>ביוציטין</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>B4261-250MG</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>EMSURE</td><td>1.02382.1000</td><td></td></tr><tr><td>כולין כלוריד</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>C1879-1KG</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סריקת לייזר קונפוקלי</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS SP5</td><td></td></tr><tr><td>CsCl</td><td>EMSURE</td><td>1.02038.0100</td><td></td></tr><tr><td>Cs-gluconate</td><td>בהכנה</td><td></td> עצמית <td>מכיוון שלא היה Cs-גלוקונאט מסחרי, הכנו אותו בעצמנו&nbsp;</td></tr><tr><td>D-600&nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>M5644-50MG</td><td>מתוקסיוורפאמיל הידרוכלוריד</td></tr><tr><td>D-APV&nbsp;</td><td>ביוטרנד&nbsp;</td><td>BN0085-100</td><td>אנטגוניסט קולטן NMDA</td></tr><tr><td>מצלמה דיגיטלית למיקרוסקופ</td><td>אולימפוס</td><td>XM10</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>SERVA</td><td>11290.02</td><td></td></tr><tr><td>Forene</td><td>Abbvie</td><td>2594.00.00</td><td>איזופלורן</td></tr><tr><td>גלוקוז</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>49159-1 ק"ג</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>ROTH</td><td>9105.2</td><td></td></tr><tr><td>מבודד גירוי זרם גבוה</td><td>World Precision Instruments</td><td>A385</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>EMSURE</td><td>1.04936.1000</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2</td><td>EMSURE</td><td>1.05833.0250</td><td></td></tr><tr><td>מיקרומניפולטורים</td><td>Luigs & נוימן</td><td>SM7</td><td></td></tr><tr><td>מירוסקופ</td><td>אולימפוס</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>בינוני הרכבה&nbsp;</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>P36930</td><td>Prolong Gold Invitrogen</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>ROTH</td><td>3957.1</td><td></td></tr><tr><td>NaH2PO4</td><td>EMSURE</td><td>1.06346.1000</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>EMSURE</td><td>1.06329.1000</td><td></td></tr><tr><td>פיפטה</td><td>הילגנברג</td><td>1807502</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Puller Sutter&nbsp;</td>סכין גילוח <td>P-1000</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>פרסונה&nbsp;</td><td>60-0138</td><td></td></tr><tr><td>ויברטום חצי אוטומטי</td><td>Leica&nbsp; ביוסיסטמס</td><td>VT1200S</td><td></td></tr><tr><td>SR 95531 הידרוברומיד&nbsp;</td><td>ביוטרנד&nbsp;</td><td>AOB5680-10</td><td>אנטגוניסט לקולטן GABAA&nbsp;</td></tr></tbody></table>

החקירות האלקטאליות של הפונקציה retinogeniculate ו corticogeniculate סינפסה

Electrophysiological Investigations of Retinogeniculate and Corticogeniculate Synapse Function

גרעין הג הצדדי הוא תחנת הממסר הראשונה למידע החזותי. ממסר נוירונים של הגרעין התלמי הזה לשלב קלט מתאי גנגליון רשתית ולהקרין אותו קליפת הראייה. בנוסף, ממסר הנוירונים לקבל עירור מלמעלה למטה מן הקליפה. שני תשומות ההתרגשות העיקריים לנוירונים בממסר שונים במספר היבטים. כל תא עצב ממסר מקבל קלט מתוך מספר סינפסות retinogeniculate בלבד, שהם מסופים גדולים עם אתרי שחרור רבים. זה משתקף על ידי עירור חזק זהובה, הנוירונים ממסר לקבל, מתאי גנגליון הרשתית. הסינפסות Corticogeniculate, לעומת זאת, הן פשוטות יותר עם כמה אתרי שחרור וחוזק סינפטית חלש יותר. שתי הסינפסות שונות גם בפלסטיות הסינפטית לטווח קצר. לסינפסות retinogeniculate יש הסתברות גבוהה לשחרר וכתוצאה מכך להציג דיכאון לטווח קצר. לעומת זאת, corticogeniculate הסינפסות יש הסתברות שחרור נמוך. סיבים Corticogeniculate לחצות את גרעיני התלתלמי לפני הכניסה לגרעין הגנוקה לרוחב. המיקומים השונים של הגרעין הטרתלמי הציקולאני (הרוסטרולי מתוך גרעין הג הצדדי) ומערכת האופטית (ונקטרו-מהצד מגרעין הג הצדדי) מאפשרים מגרה corticogeniculate או retinogeniculate בנפרד עם אלקטרודות של גירוי מסחטות. זה הופך את הגרעין לרוחב מצוי באזור המוח האידיאלי שבו שני סינפסות מרגש עם תכונות שונות מאוד גישו על אותו סוג תא, ניתן ללמוד בו זמנית. כאן, אנו מתארים שיטה לחקור את ההקלטה מהעברת נוירונים ולבצע ניתוח מפורט של הפונקציה retinogeniculate ואת corticogeniculate סינפציה בפרוסות מוח חריפה. המאמר מכיל פרוטוקול צעד אחר צעד עבור הדור של פרוסות מוח חריפה של הגרעין הגניקה לרוחב ושלבים עבור ההקלטה פעילות מהעברת הנוירונים על ידי גירוי מערכת האופטית וסיבים corticogeniculate בנפרד.

הכנת הפרוסה של dLGN המכיל את המסלולים retinogeniculate מוצג תחת מטרה 4x (איור 2). Axons של תאים גנגליון ברשתית צרור יחד במערכת האופטית (איור 2). הפיפטה המעוררת הונחה על מערכת האופטית כדי לגרום retinogeniculate סינפקה-תיווך הנוכחי (איור 2A) ועל הגרעין רטיקולריס thalami כדי לגרום corticogeniculate סינפסות-מתווכת הנוכחי (איור 2a), בהתאמה. של הערה, אקסונים מנוירונים בקליפת ה...

כאן, אנו מציגים פרוטוקולים להכנת פרוסות מוח חריפה המכילים את הגרעין הגנוקה לרוחב ואת החקירה אלקטרופיסיולוגית של הפונקציה retinogeniculate ותפקוד הסינפסות. פרוטוקול זה מספק דרך יעילה לחקר הסינפסות עם שחרור גבוה והסתברות נמוכה של שחרור באותן פרוסות מוח חדות.

החקירות האלקטאליות של הפונקציה Retinogeniculate ו Corticogeniculate סינפסה

The lateral geniculate nucleus is the first relay station for the visual information. Relay neurons of this thalamic nucleus integrate input from retinal ...

כאן אנו מציגים את הפרוטוקולים להכנת פרוסות מוח חריפות המכילות את גרעין הגניקולציה האופטיבי ואת החקירה האלקטרופיזיולוגית של תפקוד הגניקולציה של הרשתית וסינפסת הגניקולציה של קליפת המוח. אקסונים של תאי גנגליון רשתית נכנסים לגרעין הגניקולציה בצדדים הרחק מהתשומות קליפת המוח. זה מאפשר גירויים נפרדים של geniculate רשתית סינפסות geniculate קליפת המוח, אשר יש תכונות פונקציונליות שונות מאוד.כדי להתחיל בהליך זה, להכין שני תאי פרוסה, אחד מלא 100 מיליליטר של פתרון הניתוח והשני עם 100 מיליליטר של פתרון הקלטה. מניחים את שתי הקוביות באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס, ובועה את הפתרונות עם קרבוגן לפחות 15 דקות לפני הניתוח. לאחר מכן מלא פלסטיק עם 250 מיליליטר של פתרון ניתוח כמעט קר כקרח, ובועה אותו עם קרבוגן לפחות 15 דקות לפני השימוש.לאחר מכן מלאו צלחת פטרי מפלסטיק בתסמת הניתוח הקרה לניתוח המוח. מניחים פיסת נייר סינון במכסה של צלחת פטרי, וממלאים אותה בכמות קטנה של פתרון ניתוח. לאחר מכן לקרר את תא הניתוח של הרטט.חותכים את העור של הראש מן caudal לאף, ולשמור אותו פתוח באצבעות כדי לחשוף את הגולגולת. כדי להשיג את קו החזית, ראשית לחתוך את הגולגולת לאורך קו האמצע האחורי / החזיתי. ואז לחתוך פעמיים נוספות דרך התפר קורונטל תפר lambdoid.הסר את הגולגולת בין התפר הכתר לתפר lambdoid לחשוף את המוח הגדול. חותכים את נורת ה

electrophysiological-investigations-retinogeniculate

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

כאן אנו מתארים פרוטוקול להכנת אגר, מוטבע פרוסות רשתית המתאימים electrophysiology ו Ca2 + הדמיה. שיטה זו מאפשרת ללמוד סרט מסוג הסינפסות microcircuits הרשתית באמצעות תיקון ישיר, מהדק הקלטות של אחד מסופי העצב presynaptic.

Patch-clamp מדידות קיבול ו Ca 2 + הדמיה על מסופי עצב יחיד ב Slices רשתית

הסרטון מתאר את ההקלטה האלקטרופיזיולוגית של סינפסות רטינוגניקולאט וקורטיקוגניקולאט בפרוסות מוח של עכבר. הפרוסות המכילות את גרעין הגניקולאט הגבי הצידי (dLGN) ממוקמות בתא הקלטה. פיפטה מגרה ממוקמת על מערכת הראייה כדי לעורר תאי גנגליון ברשתית (RGCs) ולחקור סינפסות רטינוגניקולאט, או את גרעין הרשתית תלאמי כדי לעורר נוירונים בקליפת המוח ולחקור סינפסות קורטיקוגניקולטיות. עם הגירוי, ה-RGCs והנוירונים בקליפת המוח משחררים מוליכים עצביים מעוררים, אשר מייצרים זרמים סינפטיים בנוירוני ממסר LGN. זרמים אלה...

מחקר אלקטרופיזיולוגי של סינפסות רטינוגניקולאט וקורטיקוגניקולאט בפרוסות מוח עכבר

סרטון זה מדגים את ההליך לחקר יעילות סינפטית בקליפת המוח האנטורינלית הצידית (LEC) על-ידי גירוי אופטוגנטי של אקסונים של קליפת המוח הקדם-מצחית האמצעית (mPFC) ורישום התגובות של נוירונים פירמידליים ב-LEC. שיטה זו משלבת הקלטות מהדק טלאי עם הפעלה סינפטית על ידי גירוי אור כדי לחקור פלסטיות סינפטית.

גירוי אופטוגנטי ורישום אלקטרופיזיולוגי של אירועים סינפטיים בפרוסות מוח של חולדות

מאמר זה וידאו מדגים את ההגדרה, את ההליכים לתיקון גופי תא וכיצד ליישם את הקלטות מהדק דינמיות מתאי הגנגליון בכל הר עכבר רשתיות. טכניקה זו מאפשרת החקירה של התרומה המדויקת של תשומות סינפטיים מעוררות ומעכבות, ואת העצמה היחסית והעיתוי שלהם לspiking העצבי.

יישום קלאמפ דינמי עם Conductances Synaptic ומלאכותי בתאי עכבר גנגליון רשתית

פרוטוקולי אימונוהיסטוכימיה משמשים ללמוד את הלוקליזציה של חלבון מסוים ברשתית. טכניקות הדמיה סידן מועסקות ללמוד דינמיקת סידן בתאי הגנגליון ברשתית והאקסונים שלהם.

שיטות הדמיה אימונוהיסטוכימיים וסידן בWholemount עכברוש הרשתית

הקלטות מהדק טלאי ומילוי ביוציטין תוך-תאי בו זמנית של נוירונים מצומדים סינפטית בפרוסות מוח חריפות מאפשרים ניתוח מתואם של תכונותיהם המבניות והתפקודיות. מטרת פרוטוקול זה היא לתאר את השלבים הטכניים החיוניים של רישום אלקטרופיזיולוגי ממיקרו-מעגלים עצביים והניתוח המורפולוגי שלהם לאחר מכן.

אלקטרו ומורפולוגי אפיון של שבבים עצביים במוח חריף Slices שימוש מותאם Patch-קלאמפ הקלטות

פרוטוקול זה מתאר מדידה סימולטנית של אלקטרורטינוגרמה ופוטנציאלים מעוררים חזותיים בחולדות מורדמות.

הקלטה בו זמנית של Electroretinography ופוטנציאלים חזותיים מעוררים אצל חולדות הרדימו

פתחנו תכשיר חתך אופקי של הרשתית היונקת הבוגרת עם המטוס של חתך במקביל לפני שטח הרשתית. שדות דנדריטים של נוירונים ברשתית אוריינטציה nonradially לא היו מקוצץ, המאפשר חקר עיבוד אותות עם טכניקות תיקון- clamp והדמיה.

הכנת פרוסות אופקיות של רשתית למבוגרים עכבר עבור אלקטרו מחקרים

בנייר זה, נדון שלושה תכשירים המוח משמש עבור כל תיקון קלאמפ הקלטה ללמוד את המעגל retinotectal של ראשנים של צפרדע רפואית זריזה . כל הכנה, עם יתרונות ספציפיים משלה, תורמת ללקוחות שלנו ניסיוני של הראשן צפרדע רפואית כמודל ללמוד תפקוד מעגלים עצביים.

ההכנות ופרוטוקולים עבור כל תא, תיקון קלאמפ הקלטה של נוירונים Tectal צפרדע רפואית זריזה

כאן אנו מציגים פרוטוקול המתאר התמרה ויראלית של אזורי מוח בדידים עם מבנים אופטוגנטיים כדי לאפשר אפיון אלקטרופיזיולוגי ספציפי לסינפסה בפרוסות מוח של מכרסמים חריפים.

אקס ויוו חקירה אופטוגנטית של העברה סינפטית ארוכת טווח ופלסטיות מקליפת המוח הקדם-מצחית האמצעית ועד קליפת המוח האנטורינלית הלטרלית

כאן, אנו מציגים שני פרוטוקולים לרישום מיקרו-אלקטרוקורטיקוגרפיה בצפיפות גבוהה (μEcoG) בחולדות ועכברים, כולל שיטות כירורגיות, השתלה והקלטה. הקלטות μECoG מבוצעות בשילוב עם הקלטת פוליטרודה למינרית בקליפת המוח השמיעתית של החולדה או עם מניפולציה אופטוגנטית של פעילות עצבית בקליפת המוח הסומטוסנסורית של העכבר.

חקירות רב-ממדיות של עיבוד קליפת המוח על ידי שילוב פוליטרודים למינאריים ואופטוגנטיקה עם מיקרו אלקטרוקורטיקוגרפיה במכרסמים

למד את פרוטוקולי הכנת פרוסות מוח חריפות של הגרעין הגניקולטלי הצידי וחקירה אלקטרופיזיולוגית של סינפסות רטינוגניקולטיות וקורטיקוגניקולטיות. שיטה זו מאפשרת גירוי נפרד של הקלטים הרטינליים והקורטיקליים לחקירת תפקוד סינפטי.

החקירות האלקטאליות של הפונקציה Retinogeniculate ו Corticogeniculate סינפסה

גלה סרטונים נוספים