דגימת דם רציפה בפליטת פוזיטרון של בעלי חיים קטנים טומוגרפיה ממוחשבת/טומוגרפיה ממוחשבת מאפשרת את המדידה של פונקציית הקלט העורקי

בסרטון זה, פרוטוקול לדגימת דם רציפה מסופק. רדיואקטיביות בדם תימדד במקביל ל-PET/CT באמצעות דלף עורקי לחץ דם. על ידי כך, פונקציית קלט העורקים לכמות הבאים של נתוני PET / CT נוצרת ומאפשרת מאוחר יותר מידול ביוקינטי מדויק.

היתרונות העיקריים של פרוטוקול זה הם שהוא ניתן לשחזור, מייצר איבוד דם מינימלי, ומאפשר דיוק גבוה ברזולוציה הזמנית של פונקציית הקלט העורקי. זה חיוני כדי להצליב את כל מכשירי המדידה כדי לשמש לקביעת ריכוז הפעילות של הדם. הפגנת ההליך תהיה אן מולר, טכנאית מהמעבדה שלנו.

לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן בחולדה בצום של 12 שעות, מגלחים את הרגל והמפשעה בצד הכירורגי של החיה ומנקים את העור החשוף בחיטוי נוסף. יש למרוח משחה על עינו של בעל החיים, ולהחיל בדיקה רקטלית לניטור ותחזוקה רציפים של טמפרטורת הגוף. מדביקים את איברי החולדה למשטח העבודה, ומחטאים את אתר ההפעלה באמצעות חיטוי ריר.

בצע חתך של כ-20 מ"מ במפשעה, וחותך את שכבות העור העדינות כדי לחשוף את וריד הירך, העורק והעצב. מניחים שני תריסים עדינים מתחת לווריד הירך ועורק, ומצריפים את כלי הדם עם תריסים דיסטליים. מחזיק את כלי תחת מתח עם מלחצי בולדוג, להשתמש תפר פרוקסימלי תריסים למתוח את הכלי עם מהדקי הבולדוג ללא קשר.

חוסמים את הווריד עם מלחצי מפרצת פרוקסימליים 2-3 מילימטרים דיסטל מהתפר עם מהדק הבולדוג, ולהשתמש במספריים הקרנית כדי להפוך חתך כי הוא 1/3 של קוטר הכלי. חתך כלי השיט הוא הצעד הקריטי ביותר בפרוטוקול שלנו. אנא הקפיץ להשתמש במכשירים מיקרוכירורגיים, כמו מספריים בקרנית, ולהבטיח לחתוך את הכלי בזהירות בזווית של 45 מעלות.

השתמש ספוגית כותנה סטרילית כדי להסיר את הדם הדולף, ולהעניק את הווריד עם מדפים עמומים. מחזיקים את הכלי פתוח, מכניסים את הקטטר המחודד לווריד בכיוון הפרוקסימלי, עד למפרצת. פתח את קליפ המפרצת, ודחוף את הקטטר עוד שניים עד שלושה סנטימטרים.

אם הקטטר הוצב כראוי, הדם יזרום לתוך הקטטר. אבטחו את הקטטר עם שני הקשרים הפרוקסימליים. השתמש מזרק אינסולין כדי לשטוף ולשאוף 100 microliters של מלוחים heparinized דרך קטטר כדי לבדוק את הפונקציונליות של קטטר.

לאחר מכן מניחים קטטר לתוך העורק, כפי שהוכח רק עבור וריד, ולסגור את הרגל עם תפרים. הפגנת ההליך תהיה ג'ואנה פורסטר, טכנאית מהמעבדה שלנו. לרכישת תמונה, מניחים את החיה בתצב מועד לראש על משטח מיטת ההסעות ומעבירים את מיטת ההסעות לתמקמת המיטה המורחבת להזרקה.

חבר את הקטטרים למערכת הדלף, והתחל את המשאבה ההיקנית בקצב זרימה של 1.52 מיליליטר לדקה כדי למלא את מערכת הדלף בדם החיה. הזז את מיטת ההסעות למרכז שדה הצפייה של טומוגרפיה פליטת פוזיטרונים, או PET, טבעת זיהוי, ולהתחיל את מערכת דגימת הדם המקוונת. לאחר מכן הפעל את תהליך העבודה של טומוגרפיה ממוחשבת PET, או CT.

לאחר 60 שניות, להזריק 0.5 כדי מיליליטר אחד של מינון כ 22 מגה אקרל של 18F-fluorodeoxyglucose דרך הווריד T-piece. לשטוף את T-piece עם כ 150 microliters של תמיסת מלח heparinized. עבור רכישת פליטת PET, הגדר את אפשרות הרכישה לפי זמן ל- 3, 600 שניות ובחר F-18 כאיותופ המחקר.

השתמש 350 כדי 650 וולט קילואלקטרון כמו רמת האנרגיה ו 3, 438 ננו שניות כחלון התזמון. עבור רכישת CT, בחר סריקת יוצלה באפשרות הרכישה, ובתחום הגדרות ההקרנה בחר 180 הקרנה עבור סיבוב חצי סה"כ. עבור שדה ההגדרות של תצוגה ורזולוציה, בחר נמוך כהגדלה וארבע על ארבע עבור הכריכה עם אורך סריקה של 275 מילימטרים ו- 3, 328 פיקסלים כגודל ההתקן המזוג של המטען הטרנסאקסיאלי.

בשדה הגדרות החשיפה, הגדר 500 מיקרואמפר עבור הזרם, 80 קילו-וולט למתח ו- 180 אלפיות שנייה לזמן החשיפה. לאחר מכן לרכוש PET דינמי במהלך 60 הדקות הבאות, ואחריו סריקת CT בסוף הדמיה PET. עבור היסטוגרמה של פליטת PET, הגדר סדרה של 20 מסגרות כמסגור הדינמי ובחר חיסור עבור העיכובים.

בשדה ההגדרות המתקדמות, בחר 128 ברוחב המינוגרמה, שלוש כתוחלת ו- 79 כהפרש טבעת ותיקון זמן מת. לשחזור PET, השתמש בציפייה דו מימדית מסודרת למקסום ולהחיל ולשמור sonogram פיזור עם ארבע ואיטראציות פורייה עבור איגוד מחדש כאלגוריתם השחזור. לאחר מכן בחרו 128 על 128 כגודל המטריצה, השתמשו באחת מהן כגודל התמונה ובחרו הכל למסגרות והכל למקטעים.

לדגימת דם ידנית 30, 60, 90, 600 ו- 1, 800 שניות לאחר תחילת רכישת ההדמיה, פתח את השסתום השלישי הראשון. לאסוף 100 microliters של דם עורקי לתוך צינור איסוף דם נימי EDTA 30 שניות לאחר הזרקת מעקב. כדי למדוד את הפעילות של הדם כולו, לטעון את המדגם לתוך מונה היטב כדי לאפשר חישוב של הפעילות של הדם כולו עבור כל נקודת זמן של דגימת הדם הידנית בקילו-בקרל למיליליטר.

לדגימת דם מקוונת, השתמש במדריך הצינור כדי למקם את הצינור לתוך הגלאי, ולהתחיל את תוכנת דגימת הדם. פתח את ממשק הרכישה, ואשר כי המחשב של הגדרת דגימת הדם המקוונת של PET / CT מסונכרנים זמן. לחץ על לחצן התחל בדיוק 60 שניות לפני הזרקת המעקב כדי להשיג מספיק נתונים לתיקון הרקע.

שמור את הנתונים הגולמיים באמצעות לחצן שמור במסד הנתונים PMOD לאחר המדידה. לתיקון וכיול של נתוני הדם המקוונים, עברו לממשק התיקון והפעילו את תיקון הריקבון. בחרו '18 F' והגדירו את זמן ההתחלה של רכישת התמונה, מה שמאפשר ללחצן 'ממוצע' לבצע תיקון רקע.

הפעל את הכיול והזן את גורם הכיול. שמרו את נתוני הדם המותקנים והמכוילים בעזרת כפתור Save TAC ובחרו את הדם. קובץ crv.

בתחילת דגימת הדם הרציפה, ניתן לראות שיא ראשוני בריכוז הרדיואקטיביות החל מחמש שניות לאחר הזרקת מעקב בניתוח המקוון. לאחר שיא זה, הפעילות בדם יורדת במהירות, ומגיעה לרמה של כ -15 דקות. בנתונים ידניים לדגימת דם, השיא שזוהה קטן יותר והמישור אינו מוגדר בקלות.

בנתונים המופקים מהתמונה, הפסגה ונקודת ההתחלה של הרמה גלויות בבירור. עם זאת, המקסימום של הפסגה הוא קטן יותר בהשוואה לנתונים דגימת דם רציפה. בדגימת דם תת-אופטימלית רציפה זו, לא התאפשרה רכישת נתונים במהלך 3 וחצי הדקות הראשונות של הדגימה עקב קרישת דם.

לאחר ניקוי הקריש, הזרימה במערכת הצינור הופעלה מחדש והמדידה נמשכה, וחשפה שיא של כארבע דקות שלא הקליט את הרדיואקטיביות המרבית בדם. דגימת דם ידנית וניתוחים שמקורם בתמונה עדיין היו אפשריים בדגימה תת-אופטימלית זו, עם זאת, והפגינו תוצאות דומות לאלה שנצפו לתוצאות נכונות של דגימת דם רציפה. יש לזכור את רווחת החיה לאורך כל ההליך, להכין את מערכת הדלף בדיוק כמומלץ, ולנסות להפחית את אורך הצינור.

הפרוטוקול יכול לשמש לשינוי של עקבות PET אבחון חדש, אפיון מודלים חדשים של מחלות, ואת הערכת התגובה הטיפולית של טיפולים חדשים בסביבה פרה-קלינית.