כירורגיה של חוט השדרה הLocomotor הניתוח והערכה פתוחה בשדה החזה בעכברוש

הטיפול בעמוד השדרה של החולדה הוא מודל רב ערך ומשחזר של פגיעה חד-צדדית בחוט השדרה כדי לחקור את המנגנונים העצביים של locomotor התאוששות ויעילות הטיפול. מאמר זה כולל מדריך מפורט של שלב אחר שלב לביצוע הליך החצייה ולהערכת ביצועים locomotor בזירה בשטח פתוח.

ההיתוך בעמוד השדרה מייצר ליקויי קטר הניתנים לכימות ואידיאליים הניתנים לשחזור שניתן ללכוד בסולם הקטר שפיתחנו. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא סלקטיביות ושחזור של ההיתוך, מה שמוביל שונות מופחתת פנוטיפים התנהגותיים בין בעלי חיים. לאחר אישור חוסר תגובה קמצוץ בוהן בחולדה בוגרת הרדמה, לעשות חתך 2.5 ס"מ בעור מגולח יתר על כן את חוליות T-6 כדי T-10 ולהשתמש מספריים קהה כדי לחזור בו העור ושומן שטחי.

השתמש מספריים ניתוח קהה מפשק עצמית כדי להפריד את השרירים paravertebral, החדרה על ההיבט הגבי של חוליות T-7 כדי T-9 ולהשתמש מטליות עדין ומוליכי כותנה כדי לתחקר ולטהר כל רקמה שנותרה כדי לחשוף את התהליכים ספיניל lamina החוליות. מניחים את הקצב תחת מיקרוסקופ סטריאו ולהשתמש גוזמים עדינים עצם לחתוך בזהירות את היבטים דו צדדית על חוליות T-7 ו- T-8. השתמש אזמל לעשות חתך שטחי מילימטר אחד ברקמת החיבור הגבית בין T-8 ו T-9 החוליות laminae, דואג לא לפגוע בכבל הבסיסי ולהשתמש גוזמי עצם כדי להסיר את התהליך ספיני של חוליות T-8.

עם מלקחיים המוסטטיים מעוגלים מהודק בזהירות על תהליך T-7 ספינוס, לסובב את הקצה caudal של T-8 laminae מעט rostrally כ 20 מעלות ולהכניס את גוזמי העצם מתחת T-8 למינה. בצע חתך קו האמצע המשתרע לאורך הלמינה, ממשיך את כריתת למין על ידי חזרה על החתכים בצד שמאל וימינה של למיאלי lamina החוליות לתהליכים רוחביים כדי לחשוף את חוט השדרה. טפטפו 100 מיקרוליטרים של 2%לידוקאין לתוך תעלת עמוד השדרה החשופה ולהשתמש במקלות עדינים ומספריים של כריתת אירידה כדי להסיר את הדורה המכסה את קטע עמוד השדרה T-8.

חזור על הממשל לידוקאין אל החוט החשוף ולזהות את קו האמצע של הכבל על ידי הדמיה של קו מרכזי שנוצר בין התהליכים ספיני המשתרע בין חוליית T-7 חשופה T-9. באמצעות ממטרות עדינים כדי לייצב את חוט השדרה, להשתמש בסכין חיטוי כדי להמיס את חוט השדרה מן קו האמצע לכיוון צד אחד של החיה, דואג לא לחתוך דרך עורק עמוד השדרה החזיתי בצד הגחוני. באמצעות מספריים iridectomy, לחתוך בזהירות דרך כל הרקמה הנותרת בצד הנגע של חוט השדרה כדי להבטיח את הרבע הגחוני-רוחבי הוא חתך כראוי ולהחיל סטרילי, בערך שישה על שני מילימטר ספוג מלוחים ספוג לתוך החלל החשוף מעל חוט השדרה.

לאחר מכן, השתמש 4-O polyglactin 910 תפרים כדי לסגור שכבות שרירים ואת העור סביב אתר החתך ולמקם את החולדה בסביבה חמה תחת מנורת חום עם ניטור עד החלמה מלאה. בנקודת הזמן הניסיונית המתאימה לבדיקות התנהגותיות, לאחר שהעכברושים התרגלו לזירה, התחילו בהקלטת הווידאו והמקמו חולדה במרכז הזירה, בתנאי אור עמומים לעידוד פעילות לוקומוטור. אפשר לחולדה לחקור לפחות ארבע דקות, הזזת החולדה בחזרה למרכז הזירה כאשר היא נשארת נייחת במשך יותר מ -20 שניות כדי לקדם את הקטר.

לאחר מכן, ציון הביצועים לוקומוטור של הפעלת הבדיקה המוקלטת. עבור תנועות גפיים מפרקיות, ציון תנועות מפרקים hindlimb במהלך קטר ספונטני בנפרד עבור הקרסול, הברך, ואת הירך, כרגיל, קל, או נעדר. לתמיכה במשקל, להעריך את היכולת של שרירי extensor hindlimb להתכווץ ולתמוך במשקל הגוף טעון כאשר האיבר הוא על הקרקע כאשר החולדה היא נייחת, כמו גם במהלך קטר פעיל.

עבור מיקום הספרה, להעריך את המיקום של הספרות hindlimb בעוד החולדה היא נייחת במהלך הקטר. השלם את הפרמטר צעד רק אם החולדה יכולה לתמוך במשקל הגוף שלה במהלך דריכה על ידי דירוג הכיוון של מיקום הכף hindlimb בזמן המגע הראשוני ב להרים מהקרקע בנוסף לנזילות של שלב הנדנדה במהלך דריכה. השלם את פרמטר תיאום ההמשך/hindlimb רק אם ארבעה צעדים רצופים מתרחשים במהלך הבדיקה ואם הגפיים יכולות לתמוך באופן פעיל במשקל הגוף.

להעריך את מיקום הזנב במהלך הקטר כמו גם למעלה או למטה. לאחר מכן הוסף את הציונים הבודדים מכל פרמטר כדי לספק סכום כולל עבור כל hindlimb למקסימום של 20 נקודות. כדי להעריך ולהשוות גדלי נגע בין קבוצות ניסיוניות, ניתן לחשב בקלות את האזור המקסימלי של ההיתוך כאחוז מהתת-חתך הכולל של חוט השדרה באמצעות הכתמות היסטולוגיות של חלקי חוט השדרה.

לדוגמה, היתוך מייצג זה של ההמיקורד השמאלי עם שכבת-על של שיעור אזור ההיתוך המקסימלי המשותף בין חולדות הדגים את גודל ההיתוך הממוצע של כ-47% מאזור הכבלים חתך. שינויים ייצוגיים אלה בביצועי הקטר במצב שלם בחמשת השבועות הראשונים לאחר ההימיסקט בצד שמאל ממחישים פגיעה משמעותית בקטר בגב השמאלי של החיה בשלושת השבועות הראשונים לאחר הניתוח. שיפור לרמת הקטר נצפתה בדיעבד הימני על ידי שבועיים לאחר ההליך.

הדברים החשובים ביותר שיש לזכור הם כי זיהוי מדויק של קו האמצע של עמוד השדרה עבור hemisection וטיפול נכון לאחר הניתוח בבעלי חיים וניטור חיוניים עבור פרוטוקול מוצלח. הערכה התנהגותית זו מספקת פרוטוקול אידיאלי למסך עבור מדדים paretrecorvial העליון עבור שכשהם עם בדיקות מיוחדות כדי לטפל בשאלה ספציפית של עניין על התאוששות לוקומוטור.