Name: הדור של מלנומה האדם Uveal האנושי פלטפורמת Xהשתל בעכברים חיסוני (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 2 s
Description: למד ליצור מודלים אורתוטופיים של מלנומת עין אנושית בכבד עכברים באמצעות השתלת נתחי גידול ממטופלים או הזרקת תאים מתורבתים. שיטה זו מאפשרת הערכה מדויקת של תגובת הגידול לטיפול תרופתי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

אנו אסירי תודה על מסיה אוהרה, ק. סאיטו, ומסיה טראי, על סקירת כתב היד. המחברים מכירים ביקורת קריטית עבור העריכה והעזרה האנגלית של כתב יד זה על ידי ד ר... סאטו בבית הסרטן פוקס צ'ייס מרכז. העבודה שתוארה בזאת היתה נתמכת על ידי קרן בוני קרול מחקר, הקרן מחקר ויינזירופ, קרן מלנומה לחקר העין באוניברסיטת תומס ג'פרסון, קרן הקהילה של אוסקה, ו-JSPS KAKENHI גרנט מספר JP 18K15596 באוסקה סיטי אוניברסיטת. מחקרים במעבדה של ד ר א. אפלין תמכו על ידי NIH גרנט R01 GM067893. פרויקט זה מומן גם על ידי פרס המדע הטרנספורמטיבי של דיקן, פרס היוזמה התוכניתית של אוניברסיטת תומס ג'פרסון.

חולים הרשומים במחקר צריך לספק הסכמה בכתב המאפשר את השימוש של דגימות כירורגי שנמחקו למטרות מחקר ומחקרים גנטיים, על פי הלוח סקירה מוסדית מאושר פרוטוקול. פרוטוקול זה בוצע בהתאם להמלצות במדריך לטיפול ולשימוש בבעלי חיים מעבדתיים של המוסדות הלאומיים לבריאות ומאושר על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים (IACUC).
1. אוסף של מטופל טרי- רקמת הגידול נגזר
<ol><li>השג רקמת סרטן נגזר החולה מהניתוח או ביופסיה מחט בחדר הניתוח של בית החולים.</li>
	<li>לשים את רקמת הגידול במיכל 100 mL המכיל הנקס ' מאוזן תמיסת מלח (HBSS) פתרון על קרח.</li>
	<li>להעביר את הרקמה לתוך מכסה סטרילי (Biosafety טיחות רמה 2) במעבדה.</li>
	<li>. המשך לשלב 2 בהקדם האפשרי הערה: מטעמי בטיחות, לא לכלול חולים עם HIV ידוע או צהבת B או C זיהומים.</li>
</ol>2. עיבוד של מטופל טרי-רקמת הגידול נגזר
<ol><li>שים את הרקמה בשפופרת 50 mL המכילה מלוחים מואגור פוספט (PBS) על קרח. כדי לשטוף את הרקמה, להוסיף PBS בצינור ולהיפטר PBS מהצינור פעמיים.</li>
	<li>העבירו את הרקמה לצלוחית פטרי המכילה PBS על הקרח.</li>
	<li>באמצעות מלקחיים ומספריים סטרילי, להסיר את החלקים נמק של הרקמה. השאר את הרקמה לחה וקרה במהלך השלבים 2.3 עד 2.5. עבור דגימות ביופסיה מחט, לדלג על צעד 2.3 ו 2.5, ואל תחתוך את הדגימות. הערה: רקמת הנקרוטיק מתפרקת לעתים קרובות בקלות כאשר היא נוגעת.</li>
	<li>חותכים את הרקמה לתוך 1 מ"מ3 קוביות עבור השתלת כבד כירורגי.</li>
	<li>חותכים את שאר הרקמה לקוביות של 2 מ"מ בצלחת פטרי.</li>
	<li>להעביר אותם 1.7 מ"מ microtube עם 4% פורמלין ניתוח היסטולוגית לצינור אחר עבור הניתוח גנומית ופרוטמית אחרת.</li>
	<li>שימו את המיקרוצינוריות בצנצנת חנקן נוזלי עם חנקן נוזלי. העבר את הצינורות ל-80 מקפיא ° c לאחסון קבוע. הערה: הזמן בין הסרת לדוגמה של המטופל ועיבוד רקמות לא יעלה על 30 דקות.</li>
</ol>3. השתלת כבד כירורגי עם החולה-רקמת הגידול נגזר
<ol><li>רסס את כל החפצים שמגיעים לשכונה לניתוח עם 70% אתיל אלכוהול. הערה: הדבר כולל כלי ניתוח, רפידות חימום ומכונות הרדמה.</li>
	<li>למדוד את המשקל של ספוגית כותנה סדין בד.</li>
	<li>באמצעות הצבת אותו בחדר האינדוקציה, יש להניח עכבר עם 3 – 5% מכשיר אידוי.</li>
	<li>לאחר העכבר מורדם לחלוטין, למקם אותו במיקום פרקדן על כרית חימום. הניחו את הקונוס של העכבר על חוטם העכברים כדי לשאוף 1.5 – 3% איזוofלשמירה על ההרדמה. הערה: העכבר צריך להיות על כרית החימום במהלך ההליך כולו. היעדר חימום עלול לגרום להיפותרמיה.</li>
	<li>לאשר הרדמה נכונה על ידי תגובה לא כאשר הרגל של העכבר הוא נדקר עם מלקחיים ultrafine.</li>
	<li>הכנס בופרנורפין (0.6 מ"ג/ק"ג) תת-עורי על הצלע באמצעות מחט של 27 גרם על מזרק מיקרו לפני הניתוח.</li>
	<li>החל 70% אתיל אלכוהול לבטן ופזר את הפרווה כלפי מעלה וכלפי מטה. לאחר הפצת הפרווה, לאשר הדמיה קלה יותר של העור מתחת לאזור subcostal שמאל לחיתוך קל יותר. אל תגלח את הפרווה מהבטן. הערה: הפרווה תסתיר את האתר החתך לאחר הניתוח ולמנוע את העכבר מגרד את הפעולה לאחר החתך. עם זאת, אתה יכול לגלח את הפרווה כדי למנוע זיהום של אתר החתך בהתאם לסטנדרטים מוסדיים.</li>
	<li>למרוח יוד ולתת לו להיקלט לתוך העור.</li>
	<li>מניחים לעטוף כירורגי סטרילי עם חור 2 ס מ על העכבר.</li>
	<li>מתיחת עור הבטן עם מלקחיים מעוקל ultrafine ולעשות 1 ס מ רוחב רוחבי שמאל חתך העור עם מספריים מעוקלים.</li>
	<li>הכנס את קצה המספריים העקומים מתחת לעור החתך ופתח אותם מעט כדי להפריד את הצפק מהעור. למשוך את המספריים מן החתך עם להבים סגורים. הערה: פתיחה וסגירה של מספריים בתוך העכבר יכול לגרום לנזק ודימום.</li>
	<li>. תאתר את הכבד מתחת לצפק אשר צבע אדמדם כהה דרך צפק.</li>
	<li>עם מספריים עקומים, לעשות חתך רוחב 1 ס מ בצפק. אם עורק הצפק מדמם מהקצה החדשני, מייד לעצור את הדימום עם הקאטרי.</li>
	<li>לתפוס רקמת שומן באמצעות מלקחיים מעוקל ultrafine עם יד אחת, להכניס את הקצה של מספוגית כותנה מתחת האונה השמאלית הכבד לגלגל את הספוגית כלפי מטה עם היד השנייה כדי להוציא את הכבד. הערה: רקמת שומן תופס חשוב לשמור על רקמת השומן לדבוק ספוגית כותנה.</li>
	<li>לנקות את הכבד על משטח הכותנה ולהניח את הכבד על גיליון בד סופג שאינו ארוג. הערה: הסדין בד משחק שני תפקידים חיוניים בייצוב הכבד וקליטת דימום.</li>
	<li>לעשות חתך 5 מ"מ ברוחב ועומק באמצעות להב סטרילי No. 11 אזמל ליצור כיס בתוך הכימומה בזמן לחיצה בעדינות על אתר החתך עם ספוגית כותנה.<ol>
<li>הכנס את הלהב במקביל עם פני השטח של הכבד לחתוך אופקית.</li>
		<li>לחצו על החתך עם משטח כותנה כדי לעצור שטף דם. הערה: אין לשמור על הלהב אנכית, אחרת תוכלו לפרוץ את הכבד ולפגוע בכלים גדולים באמצע הכבד.</li>
	</ol></li>
	<li>לגלגל את משטח הכותנה כלפי מעלה כדי לפתוח את האתר החתך והשתל 1 מ"מ3 קוביה של רקמת הגידול לתוך הכיס עם מלקחיים באולטרסאונד מעוקל. למשוך את מלקחיים תוך כדי לגלגל את הכותנה בסיבוב הפוך לוחץ למטה. הערה: לחיצה על האתר החתך עם ספוגית כותנה תוך כדי לעצור את מלקחיים מסייע למנוע עקירה של הגידול בתוך הכיס.</li>
	<li>בעדינות לקחת את הכותנה לנקות את האתר החתך לאחר השרשה. . המשך לשלב 3.19 בהקדם האפשרי</li>
	<li>שימו השמת שנספג. באתר החתך</li>
	<li>. תאשר הומוסטזיס אם הדימום ממשיך, הוסיפו. עוד הדימומים באתר החתך</li>
	<li>לקלף את הכבד את הסדין בד עם מלקחיים (רצוי קהה-הסתיים) ולשים את הכבד בחזרה לחלל הבטן.</li>
	<li>תפר צפק עם ליגטורה כפולה באמצעות תפר שנספג 5-0.</li>
	<li>תפר עור עם ליגטורה משולשת באמצעות תפר 5-0. הערה: הקשירה המשולשת מסייעת. למנוע חתך ניתוחי</li>
	<li>להתבונן בעכבר עד הערה לגמרי ולשים אותו בחזרה בכלוב.</li>
	<li>למדוד את המשקל של הספוגית כותנה ואת הסדין בד עם דם על הנפח דימום במהלך הניתוח. להשוות אותם עם משקולות המקורי שלהם לפני הניתוח. להפחית את הדימום במהלך הניתוח פחות מ 10% של במחזור נפח הדם בעכבר.</li>
</ol>4. איסוף ועיבוד של מתורבת שורה של הכבד האנושי מסרטן קו מלנומה
<ol><li>הכן תאים מתורבתים.</li>
	<li>אסוף תאים וחשב את מספר התא באמצעות מונה תאים.</li>
	<li>הכן כמות מתאימה של השעיית תאים עבור 10.0 x 106 תאים בשפופרת של 15 מ ל.</li>
	<li>ספין הצינור ב 300 x g עבור 5 דקות בצנטריפוגה בטמפרטורת החדר.</li>
	<li>הסר את הסופרנטנט. בצינור 15 מ ל תשאיר את הגלולה הסלולרית. בתחתית השפופרת</li>
	<li>הוסף 50 μL של RPMI 1640 בינונית לתוך שפופרת של 1.7 mL.</li>
	<li>גזור את הקצה של קצה 200 μL עם מספריים כדי להגדיל את פתיחת הקצה.</li>
	<li>הוסף 60 μL של מטריצת קרום המרתף באמצעות פיפטה עם קצה לחתוך לתוך הצינור 1.7 mL כי יש RPMI.</li>
	<li>לערבב RPMI ומטריצה בצינור 1.7 mL. . מערבולת את זה</li>
	<li>הוסף 110 μL של התערובת לתוך הגלולה התא בצינור 15 מ"ל. להעביר את ההשעיה התא לתוך צינור חדש 1.7 mL.</li>
	<li>שמור את השפופרת על הקרח לפני הזרקת המחט.</li>
</ol>5. השתלת מחט כירורגית של מתורבת לכבד האדם מסרטן מלנומה קו לתוך הכבד
<ol><li>בצע את הפרוטוקול הנ ל משלבים 3.1 עד 3.15.</li>
	<li>לאסוף את ההשעיה התא עם מיקרומזרק עם המחט 27 G.</li>
	<li>הכנס את המחט לאורך המשטח של הכבד ולקדם את קצה המחט 5 מ"מ עמוק יותר.</li>
	<li>הכנס 20 μL של תא הבולם לתוך הכבד.</li>
	<li>לצרוב את נקודת ההכנסה של הכבד כדי למנוע את התאים מוזרק דולף החוצה. . תאשר הומוסטזיס</li>
	<li>בצע את הפרוטוקול הנ ל משלבים 3.21 עד 3.24.</li>
</ol>6. סריקת CT
<ol><li>מניחים את העכבר לתוך הרסן במצב ער.</li>
	<li>נגב את הזנב עם כרית אלכוהול סטרילית לחיטוי והסנה.</li>
	<li>הכנס 100 μL של סוכן ניגודיות CT דרך הווריד הזנב עם מחט של 27 גרם על מזרק 1 מ ל.</li>
	<li>המתן 4 שעות לאחר ההזרקה לפני נטילת סריקת CT. הערה: זה לוקח 4 שעות עד שהסוכן. נלקח מתאי הכבד</li>
	<li>ארבע שעות לאחר ההזרקה, מורדם את העכבר נושאת הגידול עם 3 – 5% מתאדה isofלאנה על ידי הצבת אותו בחדר אינדוקציה.</li>
	<li>ברגע שהעכבר מורדם לגמרי, הצב אותו בתנוחה הנוטה ב-CT. מניחים את החרוט על החרטום של העכבר כדי לשאוף 1.5 – 3% isoffor תחזוקה של הרדמה.</li>
	<li>לאשר הרדמה נכונה על ידי תגובה לא כאשר הרגל של העכבר הוא נדקר עם מלקחיים ultrafine.</li>
	<li>. תעשה סריקת סי. טי. במשך 15 דקות</li>
	<li>ודא כי העכבר עד שהוא התעורר במלואו לאחר סריקת ה-CT והחזר אותו לכלוב.</li>
	<li>הערכה לקיומו של הגידול ולמדוד את גודל הגידול על תמונות CT. הערה: הסוכן ניגודיות מגביר את הכבד הרגיל מכימומה, כך שקל לזהות גידול בלתי משופר. לא לפרש את הכיס המרה ואת הבטן כמו גידול.</li>
</ol>7. קציר ועיבוד רקמות
<ol><li>עכברים המתת חסד באמצעות CO2 ואחריו פריקה צוואר הרחם על ידי הצבת אצבע המפתח ואת האגודל מאחורי הגולגולת ומושך את הגוף על ידי בסיס הזנב. . המשך לשלב 7.2 בהקדם האפשרי</li>
	<li>מניחים את העכבר במצב פרקדן ולרסס את הבטן עם 70% אתיל אלכוהול.</li>
	<li>השתמש מלקחיים סטרילי מספריים סטרילי לעשות חתך רוחבי 3 ס מ מתחת לתהליך xiphoid לחשוף את איברי הבטן.</li>
	<li>בלו את רקמת הגידול ולבצע שלבים 2.1 כדי 2.2.</li>
	<li>חותכים את שאר הגידול לתוך 2 מילימטר קוביות בצלחת פטרי.</li>
	<li>להעביר אותם צינור הקפאה עם cryomedium עבור השרשה מחדש לאחר הקפאת ההזמנה.</li>
	<li>שימו את הצינורות במיכל הקפאה מקפיא מלא באיזופנול.</li>
	<li>העבירו את המכולה למקפיא של 80 ° c לאחסון זמני. לא לשים את הקריוצינורות עם cryomedium ישירות לתוך מיכל חנקן נוזלי. להקפיא אותם לאט בקצב קירור של 1 ° צ'/מינימום כדי לשמר את רקמת הגידול.</li>
	<li>ביום למחרת, להעביר את הצינורות לתוך מיכל חנקן נוזלי עבור אחסון קבוע.</li>
</ol>8. השרשה מחדש
<ol><li>לשמור על הצינורות קפואים צנצנת חנקן נוזלי עם חנקן נוזלי עד מוכן רקמת השתל. מזער את חשיפת הרקמה לטמפרטורת החדר כדי לשמור על יכולת הקיום ולשפר את סיכויי החרט.</li>
	<li>הפשרת שפופרת הקפאה באמבט מים ב37 ° c.</li>
	<li>בצע את שלבים 2.2 – 2.4.</li>
	<li>שתל את הגידול המושתל לתוך עכברים כמתואר בשלבים 3.1 – 3.24.</li>
</ol>

<ol><li>Aronow, M. E., Topham, A. K., Singh, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uveal+Melanoma%3A+5-Year+Update+on+Incidence%2C+Treatment%2C+and+Survival+%28SEER+1973-2013%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ocular+Oncology+and+Pathology%22%5BJournal%5D)">Uveal Melanoma: 5-Year Update on Incidence, Treatment, and Survival (SEER 1973-2013).</a> Ocular Oncology and Pathology. 4 (3), 145-151 (2018).</li>
<li>Krantz, B. A., Dave, N., Komatsubara, K. M., Marr, B. P., Carvajal, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uveal+melanoma%3A+epidemiology%2C+etiology%2C+and+treatment+of+primary+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Uveal melanoma: epidemiology, etiology, and treatment of primary disease.</a> Clinical Ophthalmology. 11, 279-289 (2017).</li>
<li>Gragoudas, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+patients+with+metastases+from+uveal+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Survival of patients with metastases from uveal melanoma.</a> Ophthalmology. 98 (3), 383-389 (1991).</li>
<li>Diener-West, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+metastatic+disease+after+enrollment+in+the+COMS+trials+for+treatment+of+choroidal+melanoma%3A+Collaborative+Ocular+Melanoma+Study+Group+Report+No.+26%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Development of metastatic disease after enrollment in the COMS trials for treatment of choroidal melanoma: Collaborative Ocular Melanoma Study Group Report No. 26.</a> Archives of Ophthalmology. 123 (12), 1639-1643 (2005).</li>
<li>Collaborative Ocular Melanoma Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+metastatic+disease+status+at+death+in+435+patients+with+large+choroidal+melanoma+in+the+Collaborative+Ocular+Melanoma+Study+%28COMS%29%3A+COMS+report+no.+15%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Assessment of metastatic disease status at death in 435 patients with large choroidal melanoma in the Collaborative Ocular Melanoma Study (COMS): COMS report no. 15.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (5), 670-676 (2001).</li>
<li>Hidalgo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models%3A+an+emerging+platform+for+translational+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research.</a> Cancer Discovery. 4 (9), 998-1013 (2014).</li>
<li>Kim, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+orthotopic+and+heterotopic+human+pancreatic+cancer+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice.</a> Nature Protocols. 4 (11), 1670-1680 (2009).</li>
<li>Némati, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+characterization+of+a+panel+of+human+uveal+melanoma+xenografts+derived+from+primary+and%2For+metastatic+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Establishment and characterization of a panel of human uveal melanoma xenografts derived from primary and/or metastatic tumors.</a> Clinical Cancer Research. 16 (8), 2352-2362 (2010).</li>
<li>Wilmanns, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+Doxorubicin+sensitivity+and+level+of+p-glycoprotein+expression+in+human+colon-carcinoma+cells+by+ectopic+and+orthotopic+environments+in+nude-mice%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Modulation of Doxorubicin sensitivity and level of p-glycoprotein expression in human colon-carcinoma cells by ectopic and orthotopic environments in nude-mice.</a> International Journal of Oncology. 3 (3), 413-422 (1993).</li>
<li>Kang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proliferation+of+human+lung+cancer+in+an+orthotopic+transplantation+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic%22%5BJournal%5D)">Proliferation of human lung cancer in an orthotopic transplantation mouse model.</a> Experimental and Therapeutic. 1 (3), 471-475 (2010).</li>
<li>Fichtner, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+patient-derived+non-small+cell+lung+cancer+xenografts+as+models+for+the+identification+of+predictive+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Establishment of patient-derived non-small cell lung cancer xenografts as models for the identification of predictive biomarkers.</a> Clinical Cancer Research. 14 (20), 6456-6468 (2008).</li>
<li>Marangoni, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+patient+tumor-derived+breast+cancer+xenografts+for+preclinical+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A new model of patient tumor-derived breast cancer xenografts for preclinical assays.</a> Clinical Cancer Research. 13 (13), 3989-3998 (2007).</li>
<li>Bergamaschi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+and+characterization+of+luminal-like+and+basal-like+in+vivo+breast+cancer+xenograft+models%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Oncology%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling and characterization of luminal-like and basal-like in vivo breast cancer xenograft models.</a> Molecular Oncology. 3 (5-6), 469-482 (2009).</li>
<li>Ho, K. S., Poon, P. C., Owen, S. C., Shoichet, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessel+hyperpermeability+and+pathophysiology+in+human+tumour+xenograft+models+of+breast+cancer%3A+a+comparison+of+ectopic+and+orthotopic+tumours%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Blood vessel hyperpermeability and pathophysiology in human tumour xenograft models of breast cancer: a comparison of ectopic and orthotopic tumours.</a> BMC Cancer. 12, 579(2012).</li>
<li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+orthotopic+xenografts%3A+better+mimic+of+metastasis+than+subcutaneous+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Patient-derived orthotopic xenografts: better mimic of metastasis than subcutaneous xenografts.</a> Nature Reviews Cancer. 15 (8), 451-452 (2015).</li>
<li>Rubio-Viqueira, B., Hidalgo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+in+vivo+xenograft+tumor+model+for+predicting+chemotherapeutic+drug+response+in+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Direct in vivo xenograft tumor model for predicting chemotherapeutic drug response in cancer patients.</a> Clinical Pharmacology & Therapeutics. 85 (2), 217-221 (2009).</li>
<li>Ozaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+and+Characterization+of+Orthotopic+Mouse+Models+for+Human+Uveal+MelanomaHepatic+Colonization%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Establishment and Characterization of Orthotopic Mouse Models for Human Uveal MelanomaHepatic Colonization.</a> American Journal of Pathology. 186 (1), 43-56 (2016).</li>
<li>Kageyama, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+an+orthotopic+patient-derived+xenograft+mouse+model+using+uveal+melanomahepatic+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Establishment of an orthotopic patient-derived xenograft mouse model using uveal melanomahepatic metastasis.</a> Journal of Translational Medicine. 15 (1), 145(2017).</li>
<li>Fu, X. Y., Besterman, J. M., Monosov, A., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+human+metastatic+colon+cancer+in+nude+mice+orthotopically+constructed+by+using+histologically+intact+patient+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Models of human metastatic colon cancer in nude mice orthotopically constructed by using histologically intact patient specimens.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88 (20), 9345-9349 (1991).</li>
<li>Rashidi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+orthotopic+mouse+model+of+remetastasis+of+human+colon+cancer+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">An orthotopic mouse model of remetastasis of human colon cancer liver metastasis.</a> Clinical Cancer Research. 6 (6), 2556-2561 (2000).</li>
<li>Fan, Z. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+monitoring+of+rare+circulating+hepatocellular+carcinoma+cells+in+an+orthotopic+model+by+in+vivo+flow+cytometry+assesses+resection+on+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Real-time monitoring of rare circulating hepatocellular carcinoma cells in an orthotopic model by in vivo flow cytometry assesses resection on metastasis.</a> Cancer Research. 72 (10), 2683-2691 (2012).</li>
<li>Jacob, D., Davis, J., Fang, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenograftictumor+modelsinmiceforcancer+research%2C+atechnical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Therapy+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Xenograftictumor modelsinmiceforcancer research, atechnical review.</a> Gene Therapy and Molecular Biology. 8, 213-219 (2004).</li>
<li>Ahmed, S. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+subcutaneous+and+intrahepatic+human+hepatocellular+carcinoma+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Generation of subcutaneous and intrahepatic human hepatocellular carcinoma xenografts in immunodeficient mice.</a> Journal of Visualized Experiments. 25 (79), e50544(2013).</li>
<li>Kim, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+humanized+liver+mouse+model+by+transplant+of+patient-derived+fresh+human+hepatocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Generation of humanized liver mouse model by transplant of patient-derived fresh human hepatocytes.</a> Transplantation Proceedings. 46 (4), 1186-1190 (2014).</li>
<li>Lavender, K. J., Messer, R. J., Race, B., Hasenkrug, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+bone+marrow%2C+liver%2C+thymus+%28BLT%29+humanized+mice+on+the+C57BL%2F6+Rag2%28-%2F-%29%CE%B3c%28-%2F-%29CD47%28-%2F-%29+background%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Production of bone marrow, liver, thymus (BLT) humanized mice on the C57BL/6 Rag2(-/-)γc(-/-)CD47(-/-) background.</a> Journal of Immunological Methods. 407, 127-134 (2014).</li>
<li>Boll, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+based+experimental+liver+imaging+using+a+nanoparticulate+contrast+agent%3A+a+longitudinal+study+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Micro-CT based experimental liver imaging using a nanoparticulate contrast agent: a longitudinal study in mice.</a> PLoS One. 6 (9), e25692(2011).</li>
<li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+gene+expression+profiling+confirms+the+molecular+fidelity+of+primary+tumor-based+orthotopic+xenograft+mouse+models+of+medulloblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncology%22%5BJournal%5D)">Global gene expression profiling confirms the molecular fidelity of primary tumor-based orthotopic xenograft mouse models of medulloblastoma.</a> Neuro-Oncology. 14 (5), 574-583 (2012).</li>
<li>Rubio-Viqueira, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+in+vivo+platform+for+translational+drug+development+in+pancreatic+cancer.Clinical%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">An in vivo platform for translational drug development in pancreatic cancer.Clinical.</a> Cancer Research. 12 (15), 4652-4661 (2006).</li>
<li>Siolas, D., Hannon, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+tumor+xenografts%3A+transforming+clinical+samples+into+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Patient-derived tumor xenografts: transforming clinical samples into mouse models.</a> Cancer Research. 73 (17), 5315-5319 (2013).</li>
<li>Alkema, N. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biobanking+of+patient+and+patient-derived+xenograft+ovarian+tumour+tissue%3A+efficient+preservation+with+low+and+high+fetal+calf+serum+based+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Biobanking of patient and patient-derived xenograft ovarian tumour tissue: efficient preservation with low and high fetal calf serum based methods.</a> Scientific Reports. 6 (5), 14495(2015).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

הדגמים הנוכחיים של מודלים של השתל הנוכחי הינם עתירי עבודה, זמן רב, ויקרים ליצירה. אורתובנושא הגידול מבע מודלים עכבר לסרטן הכבד הוקמו לפני יותר משני עשורים19,20,21. עם זאת, טכניקה זו היא מסובכת ודורשת שימוש בציוד מיוחד, כגון בעל מחט מיקרו ו 6-0 כדי 8-0 תפרים משובחים מתחת למיקרוסקופ. סרטן ורקמות הכבד הנורמלי חייב להיות תפור בזהירות כך תפר אינו פוגע רקמת הכבד שברירי. הטכניקות הקונבנציונליות מובילות לסיבוכים, כגון שטף דם ונמק<sup cl...

מלנומה uveal היא הגידול הנפוץ ביותר התוך העינית ממאיר בקרב מבוגרים בעולם המערבי. במהלך 50 השנים האחרונות, השכיחות של מלנומה uveal (5.1 מקרים למיליון) נשאר יציב בארצות הברית1,2. מלנומה uveal נובע מלנוציטים ב איריס, גוף סיליארי, או choroid, וזה מחלה קטלנית ביותר כאשר הוא מפתח גרורות. שיעור התמותה של חולים עם גרורות מלנומה uveal היה 80% בשנה 1 ו 92% ב 2 שנים לאחר האבחנה הראשונית של גרורות. הזמן בין האבחנה של גרורות ומוות הוא בדרך כלל קצר, פחות מ 6 חודשים, בלי להתייחס לטיפול3,4. הסרטן מתפשט דרך הדם ונוטה להיות גרורות נגד הכבד (89-93%)4,5. מודל העכבר האפקטיבי הוא הצורך בדחיפות לחקירה נוספת של מלנומה הכבד-גרורתי מסרטן. עבור מחקר translational, יש דרישה ברורה כדי ליצור מודל העכבר מלנומה גרורתית מסרטן הכבד uveal.
החולה-נגזר הגידול מבע (pdx) מודלים העכבר צפויים לספק אסטרטגיות תרופות מותאמת אישית. מודלים אלה עשויים להיות ניבוי של תוצאות קליניות, להיות שימושי עבור הערכת תרופות טרום קלינית, ולשמש למחקרים ביולוגיים של גידולים6. הנציג pdx מודלים הם למריחה על הגידול עכברים מבע, אשר יש גידול באתרים תת עורית. רוב החוקרים יכולים לעשות ניתוח להשתלה תת עורית ללא אימון מיוחד7,8. הם יכולים גם לפקח על גידולים תת עורית בקלות. למרות מודלים PDX תת עורית הפך פופולרי בשלב המחקר, יש להם כמה מכשולים במעבר לשימוש מעשי. השרשה תת-עורית כוחות החולה-נגזר גידולים לתוך מיקרופט בסביבה שונה ממקור הגידול, כך שהוא מוביל לכשל בתיאום וצמיחה איטית הגידול 9,10,11, .12,13,14 אורתופפית מהווה גישה אידיאלית ורציונלית לדגם pdx, משום שהוא משתמש באותו איבר כמו הגידול המקורי15,16.
לאחרונה, פיתחנו פרוטוקולים עבור טכניקות השרשה כירורגי השתלת החולה-נגזר בכבד-מלנומה בסרטן ושיטות הזרקת מחט טכניקות עם הגוף האנושי-גרורתי בכבד האדם מלנומה ומסרטן קו בהנהון. Cg-prkdcscidIl2rgtm1Wjl/szj (nsg) עכברים17,18. הפרוטוקולים כתוצאה בעקביות שיעורי הצלחה טכנית גבוהה. כמו כן הקמנו CT סריקת טכניקות שימושיות כדי לזהות גידולים בכבד הפנים, ופיתחנו מחדש השרשה של גידולים בתוך פלטפורמת PDX. מצאנו כי uveal מלנומה גידול מודלים מבע לשמור על המאפיינים של גידול בכבד החולה המקורי, כולל תכונות histopathological ומולקולרית שלהם. יחד, טכניקות אלה מספקים פלטפורמה טובה יותר עבור מודלים הגידול הכבד הנושא עבור מלנומה uveal במחקר טרנסלtional.

<table><tbody><tr><td><חזקים>חומרים, רקמות ובעלי חיים</חזקים></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>בופרנורפין</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO<תת>2</תת> מיכל</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>קריומדיום</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>אקזיטרון ננו 12000 (חומר ניגוד ננו-חלקיקים מבוסס מתכת אדמה אלקליין)</td><td>Miltenyl Biotec</td><td>130-095-700</td><td></td></tr><tr><td>HBSS 1x, עם סידן & מגנזיום</td><td>קורנינג</td><td>21-020-CM</td><td></td></tr><tr>קו <td></td><td></td><td></td><td>תאי מלנומה ענבייה גרורתית בכבד</td></tr><tr><td>רקמת מלנומה ענבתית אנושית בכבד</td><td></td><td></td><td>כל הטיפול ברקמות צריך להיעשות במכסה מנוע ברמה 2. היזהר בעבודה עם רקמה אנושית; השתמש תמיד בכפפות והימנע ממגע ישיר עם העור. נניח שייתכן שהמטופלים נדבקו ב-HIV או באורגניזמים מדבקים אחרים. אין לעבד דגימות הידועות כנושאות זיהומים.</td></tr><tr><td>יוד</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>מוצרי פורדו</td><td>67618-150-17</td><td></td></tr><tr><td>איזופרופנול</td><td>פישר מדעי</td><td>A416-1</td><td>הימנע ממגע ישיר עם העור והעיניים ושאיפת חומר הרדמה.</td></tr><tr><td>חנקן</td><td></td><td></td><td></td>נוזלי</tr><tr><td>מטריג'ל HC</td><td>BD</td><td>354248</td><td></td></tr><tr><td>NOD. עכברי Cg-PrkdcscidIl2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) עכברי</td><td>Jackson Lab</td><td>5557</td><td>בני 4 עד 8 שבועות</td></tr><tr><td>PBS 1x, ללא סידן ומגנזיום</td><td>קורנינג</td><td>21-031-CM</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>קורנינג</td><td>10-013-CV</td><td></td></tr><tr><td>כרית הכנה לאלכוהול סטרילי (70% אלכוהול איזופרופיל)</td><td>מוצרי Nice-Pak</td><td>B603</td><td></td></tr><tr><td>4% תמיסת חיץ פוספט פרפורמלדהיד</td><td>Wako</td><td>163-20145</td><td></td></tr><tr><td>70% תמיסת אלכוהול אתילי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>04-355-122</td><td></td></tr><tr><td><חזק>שם</חזק></td><td><חזק>חברה</חזק></td><td><חזק>מספר קטלוגי</חזק></td><td><חזק>הערות</חזק</td></tr><tr><td>><חזק>ציוד</חזק></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>המוסטט נספג</td><td>ג'ונסון אנד ג'ונסון</td><td>63713-0019-61</td><td></td></tr><tr><td>אוטוקלאב</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מדידת</td><td></td><td></td><td></td>משקל גוף</tr><tr><td>Coutery</td><td>Bovie רפואי</td><td>MC-23009</td><td></td></tr><tr><td>מונה</td><td></td><td></td><td></td>תאים</tr><tr><td>צנטריפוגזר</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>צמר גפן</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיכל הקפאה קריו</td><td>NALGENE</td><td>5100-0001</td><td></td></tr><tr><td>Cryotube</td><td>SARSTEDT</td><td>72.379</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מעוקלים</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>503247</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מעוקלים אולטרה-עדינים</td> World <td>Precision Instruments</td><td>501302</td><td></td></tr> מקפיא <tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>גיליון בד</td></tr><tr><td>F/AIR מסנן מיכל</td><td>הרווארד מכשיר</td><td>600979</td><td></td></tr><tr><td>כרית</td><td></td><td></td><td></td>חימום</tr><tr><td>Isoflurane וופורייזר</td><td>Artisan Scientific</td><td>66317-1</td><td></td></tr><tr><td>חנקן</td><td></td><td></td><td></td>נוזלי</tr><tr><td>צנצנת חנקן נוזלי</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>2123</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-CT סריקת</td><td>סימנס</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>501246</td><td></td></tr><tr><td>צלחות פטרי</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>FB0875713</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק</td><td></td><td></td><td></td>ספריי</tr><tr><td>פיפטה</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מכסה מנוע</td><td></td><td></td> סטרילי <td>רמת בטיחות ביולוגית ארון</td></tr><tr><td>סטרילי מס' 11 אזמל</td><td>AD כירורגי</td><td>A300-11-0</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים ישרים</td><td>מכשירים מדויקים בעולם</td><td>14226</td><td></td></tr><tr><td>וילון</td><td></td><td></td><td></td>כירורגי</tr><tr><td>מסנן וריד זנב</td><td>Braintree Scientific</td><td>TV-150-STD</td><td></td></tr><tr><td>אמבט</td><td></td><td></td><td></td>מים</tr><tr><td>1 מ"ל מזרק שחפת עם מחט 27 גרם</td><td>BD</td><td>309623</td><td></td></tr><tr><td>צינור 1.7 מ"ל</td><td>Bioexpress</td><td>C-3260-1</td><td></td></tr><tr><td>5-0 PDO תפר</td><td>AD כירורגי</td><td>S-D518R13</td><td></td></tr><tr><td>15 מ"ל צינורות חרוטיים</td><td>AZER SCIENTIFIC</td><td>ES-9152N</td><td></td></tr><tr><td>27 G מחט</td><td>BD</td><td>780301</td><td></td></tr><tr><td>27 גרם מחט</td><td>המילטון</td><td>7803-01</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינורות חרוטיים</td><td>AZER SCIENTIFIC</td><td>ES-9502N</td><td></td></tr><tr><td>50 ומיקרו; מזרק מיקרו L</td><td>BD</td><td>80630</td><td></td></tr><tr><td>50 ומיקרו; מזרק מיקרו L</td><td>המילטון</td><td>7655-01</td><td></td></tr><tr><td>מיכל 100 מ"ל</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>12594997</td><td></td></tr><tr><td>200&mu; טיפ</td><td></td><td></td><td></td> L</tr></tbody></table>

הדור של מלנומה האדם uveal האנושי פלטפורמת xהשתל בעכברים חיסוני

Generation of a Liver Orthotopic Human Uveal Melanoma Xenograft Platform in Immunodeficient Mice

בעשורים האחרונים, תת-עורי מושתל החולה הנגזר גידולים מבע או שורות התאים האנושיים האדם מוכר יותר ויותר כמודלים מייצגים יותר ללמוד סרטן האדם עכברים חיסוני מאשר תא אנושי מסורתי הוקמה קווי מבחנה לאחרונה, אורתולמריחה על החולה מושתל הגידול מבע (pdx) מודלים בעכברים פותחו כדי לשכפל יותר תכונות של גידולים החולה. הכבד אורתובסיס מודל העכבר מקבל השתל צפוי להיות פלטפורמת מחקר שימושי לסרטן, מתן תובנות לתוך ביולוגיה של הגידול וטיפול בסמים. אולם, השתלת הגידול אורתוטופית מסובכת בדרך כלל. כאן אנו מתארים את הפרוטוקולים שלנו עבור השתלת הנושא האורתודפית של החולה-נגזר הכבד-מלנומה וגרורתית גידולים בסרטן. אנחנו מתורבתים האדם מתורבת uveal מלנומה מסרטן קווי לתוך עכברים חיסוני. הפרוטוקולים יכולים לגרום בעקביות שיעורי הצלחה טכנית גבוהה באמצעות טכניקה השרשה כירורגית אורתודופית עם נתחי החולה הנגזר מלנומה סרטן או טכניקה הזרקת מחט עם קו הגוף האנושי מתורבת. אנו גם לתאר פרוטוקולים עבור סריקת CT כדי לזהות גידולים בכבד הפנים לבין טכניקות מחדש השרשה באמצעות גידולים קריואופרשמורות כדי להשיג מחדש. יחד, פרוטוקולים אלה מספקים פלטפורמה טובה יותר עבור מודלים של העכבר הגידול אורתופפית של מלנומה גרורתית בכבד במחקר טרנסלtional.

השתלת כירורגית אורתוטופית באמצעות שיטת כיס הכבד יכולה להשתיל גידול מלנומה גרורתית של הכבד האנושי לתוך הכבד של העכבר עם שיעור הצלחה גבוהה של 80% בתוך שישה חודשים. הגידול של מבע מעפיב הכבד כגידול בודד ללא נודולים בת (איור 1 ואיור 3a). ההזרקה כירורגית הזרקת הטכניקה לתוך הכבד באמצעות מיקרוסויונלס בהצלחה חרט מנופה של האדם האנושי-גרורתי הכבד מלנומה בתאי הסרטן בכבד בכל המקרים (איור 2 וא...

אורתופון האדם גרורות הכבד uveal מלנומה מבע מודלים העכבר נוצרו באמצעות שיטות כירורגי אורתוקפית עם קטע הגידול המטופל נגזר וטכניקות הזרקת מחט עם הגוף האנושי תרבותי שורות מלנומה.

הדור של מלנומה האדם Uveal האנושי פלטפורמת Xהשתל בעכברים חיסוני

In recent decades, subcutaneously implanted patient-derived xenograft tumors or cultured human cell lines have been increasingly recognized as more ...

רוב המודלים של בעלי חיים שמקורם בחולה מושתלים תת עורית, ומונעים הערכה של תכונות חשובות של גידולים ויעילות התרופה. דיור הגידולים המושתלים בתוך הכבד הקל ניתוח זה ללא הסיכון של סטיות רבות מדי המתרחשים בתוך הכבד. לפני תחילת ההליך, לרסס את כל החומרים והמכשירים עם 70% אלכוהול אתיל.אשר חוסר תגובה לצביטת בוהן בבעל החיים הרדמה. מניחים את העכבר בתמרורית על משטח חימום, ומרטיבים את הפרווה ב-70% אלכוהול אתיל נוסף. מורחים את הפרווה כדי לדמיין את העור מתחת לאזור התת-תת-סטלי השמאלי.הסר את השיער, ולהחיל יוד להיספג לתוך העור. מניחים וילון כירורגי סטרילי עם חור של שני סנטימטרים מעל העכבר, ולהשתמש ממטרים דקים במיוחד מעוקל להרים את עור הבטן. הפוך חתך תת-סיסי רוחבי אחד רוחבי לעור האוהל, והכנס טיפים מעוקלים מספריים לחתך כדי להפריד את ההצלפה מהעור.לסגת מספריים מבלי לפתוח את הלהבים, ולאתר את הכבד מתחת לצייד על ידי צבע אדמדם כהה שלה. השתמש במספריים המעוקלים כדי לבצע חתך רוחבי של סנטימטר אחד בלידה. באמצעות היד השנייה, להכניס את הקצה של צמר גפן מתחת לאונה הכבד השמאלית, ולגלגל את ספוגית כלפי מטה כדי לדחוף את הכבד.הרם את ספוגית להעביר את הכבד על גיליון בד ארוג, סופג. החזקת להב אזמל סטרילי מספר 11 במקביל לפני השטח, לחץ על הלהב אופקית לתוך הכבד כדי להפוך חתך ברוחב חמישה מילימטרים בפרנצ'ימה תוך לחיצה רכה על אתר הח

generation-liver-orthotopic-human-uveal-melanoma-xenograft-platform

Research

JoVE Journal

Cancer Research

מחקר סרטן

השיטה מתוארת להפיץ גידולים אנושיים בעכברים רטינובלסטומה. תאים סרטניים הם מוזרק ישירות לתוך עיניו של עכברים חסר החיסונית. גידולים משניים הוקמו בהצלחה הן באמצעות תאים שנקטפו ישירות גידולים אנושיים tumorspheres תרבותי.

הקמה התפשטות של גידולים רטינובלסטומה האדם עכברים החיסון לקויה

הדור והאפיון של תאי T ספציפיים סרטניים באמצעות עכבריים מתואר כאן. רקמה הרתי אדם ותאי גזע hematopoietic מהונדס גנטי אדם מושתלת לעכברי מדוכאי חיסון. התוצאה הוא הכינון מחדש של מערכת חיסון אנושית מהונדסת מאפשרת בבדיקת vivo של תגובות חיסוניות אנטי סרטניות.

שימוש בעכבר האנושי של BLT כמודל לתאי גזע מבוסס Gene Therapy גידול

בסרטון זה, תאי מלנומה שמקורם בבני אדם מושתלים באופן תת-עורי באזור האגף של עכבר מדוכא חיסון. מודל PDX מאפשר חקירה פרה-קלינית של תאי מלנומה המשחזרים טוב יותר את ההטרוגניות של הגידול ואת אגרסיביות המלנומה שנצפתה בתנאי in vivo.

מידול Xenograft הנגזר מהמטופל: טכניקה ליצירת מודלים של עכברי מלנומה

סרטון זה מדגים בדיקה ליצירת מודל עכבר xenograft אנושי. עכבר מדוכא חיסון מוזרק עם cyclophosphamide כדי לגרום לדלדול תאי החיסון. תאי גידול שמקורם במטופל מעורבבים עם תאי דם חד-גרעיניים היקפיים אנושיים (PBMCs) בהידרוג'ל מוזרקים תת עורית לעכבר, ויוצרים גידול עם תאי T חודרים.

טכניקה ליצירת מודל עכבר קסנוגרפט אנושי המושתל על ידי PBMC אנושי

xenografts גידול האנושי בעכברים עם מערכת חיסון חלשים הם כלים רבי ערך כדי ללמוד ביולוגיה בסרטן. פרוטוקולים ספציפיים כדי ליצור xenografts תת עורי וintrahepatic מתאי אנושיים hepatocellular קרצינומה או שברי גידול מתוארים. התחדשות כבד הנגרמת על ידי כריתה חלקית בעכברי נמען מוצגת כאסטרטגיה כדי להקל על קליטתם intrahepatic.

דור של תת עורי וintrahepatic אדם xenografts קרצינומה hepatocellular בעכברים עם מערכת חיסון חלשים

כאן, אנו מציגים מודל כבד עכבר אנושי חדש שנוצר בעכברי נוקאאוט של תאים מתווכים של קולטן רעלן Alb (TRECK)/SCID לאחר השתלת תאי גזע כבד אנושיים לא בשלים וניתנים להרחבה.

דור של כבד עכבר אנושי באמצעות תאי גזע אנושי כבדיה

פרוטוקול זה מספק שיטה אמינה להקמת עכברים הומניזציה עם מערכת החיסון האנושית ותאי הכבד. השני עכברים לקויה מחדש השיגה באמצעות הזרקה התוך הטחול של האדם hepatocytes ו CD34+ תאי גזע המטרופאיות רגישים לנגיף הכשל החיסוני האנושי-1 זיהום ונזק הכבד לכידה כפי שנצפתה ב . חולים נגועים...

הקמתה של הומניזציה Dual-TK-חעוגה מודל העכבר עבור הנגיף הקשור HIV פתוגנזה

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את ההשתלה וההערכה של מלנומה בכורואיד מורין תוך שימוש בטומוגרפיה קוהרנטית אופטית.

השתלה והערכה של מלנומה בכורואיד מורין באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית

אורגנואידים הנוצרים מגידולי חולים מוזרקים אורתוטופית לכבד העכבר. כריתה של רקמת כבד לא גידולית מובילה לסביבה רגנרטיבית ברקמת הכבד בה נמצא הגידול.

מודל קסנוגרפט אורגנואיד שמקורו בחולי סרטן הכבד כדי לחקור את ההשפעה של התחדשות הכבד על צמיחת הגידול

לימפומה cell מנטל (MCL) היא קשה לטפל הפרעת תא B ולכן לא פחות קשה להקים מודל העכבר xenograft של ראשי MCL ללמוד ולפתח את הרפוי. כאן, אנו מתארים את הקמת MCL xenografts בעכברים כדי לעזור להבין את הביולוגיה כבסיס מוצלחת.

Engraftment גידול במודל של עכברים Xenograft של האדם מנטל לימפומה התא

למד ליצור מודלים אורתוטופיים של מלנומת עין אנושית בכבד עכברים באמצעות השתלת נתחי גידול ממטופלים או הזרקת תאים מתורבתים. שיטה זו מאפשרת הערכה מדויקת של תגובת הגידול לטיפול תרופתי.

הדור של מלנומה האדם Uveal האנושי פלטפורמת Xהשתל בעכברים חיסוני

גלה סרטונים נוספים