מודל לפציעה בהקפאה לחקור אוטם שריר הלב בעכבר

שיטה זו אמינה ללמוד את הדור של אוטם שריר הלב פלטפורמה מצוינת לשימוש לחקר התאוששות הלב לאחר, למשל, השתלת תאי גזע. היתרון העיקרי של הליך זה הוא שניתן להשתמש בו כדי ליצור גדלים אוטם אחיד באופן מהיר, קל, להתרבות. התערבויות ניסיוניות חדשניות, כגון פרמקולוגיות, או אסטרטגיות מבוססות רקמות מהונדסות, יכולות להיבדק במודל זה.

ובהצלחה לבדוק כי אפשרויות ניתן לאשר עוד יותר במודלים גדולים של בעלי חיים. לאחר אישור חוסר תגובה רפלקס כאב ב 27 גרם הרדמה, עכבר בן 14 שבועות, להשתמש גוזם שיער כדי להסיר את הפרווה של החזה והצוואר של החיה ולמקם את העכבר בתמונת סופי על כרית מחוממת. מדביקים את החלק האחורי ואת הרגליים בתקרת נשר מתפשטת ולהשתמש ברצף povidone-יוד ו 80% קרצוף אתנול כדי לחטא את העור החשוף.

בצע חתך בעור קו האמצע מהשליש התחתון של עצם החזה לסנטר, ולהשתמש מדחיסות מעוגלות כדי להפריד בזהירות את השרירים סביב הצוואר כדי לחשוף את קנה הנשימה. השתמש במספריים זעירים כדי לבצע כריתת קנה הנשימה בין טבעות הסחוס השני והשלישי. ולהגדיר את מכונת ההנשמה לתדר אוורור של 110 לדקה עם נפח גאות ושפל של 0.5 מיליליטר.

לאחר מכן, הכנס צינורית פלסטיק, 20 מד מחובר למכונת ההנשמה לתוך קנה הנשימה. לאחר מכן, השתמש צרובית כדי לנתק את שריר החזה הימני ממקור החזה שלה בין הצלעות השלישית והשביעית. ולהשתמש מספריים באביב זווית צדדית לחתוך את הרביעי עד שש צלעות קרוב ככל האפשר לעצם החזה.

לנתח את רקמת החיבור הבסיסית כדי לקבל תצוגה ברורה לתוך חלל החזה, צרוב העורק חלבי כדי לעצור דימום לפי הצורך. הכנס מפטר כתם זהב מיני כדי להפיץ את הצלעות ולשמור על חלל החזה פתוח. ולהשתמש במדפים קהים כדי לפתוח את הנוון כדי לחשוף את הלב.

השתמש מוט קהה כדי להרים את הלב מן חלל בית החזה ולהפחית את המתח של המפשק כדי להפחית את פתח החזה כדי לשמור על הלב ליפול בחזרה לתוך חלל הבטן. לפני לקרר cryoprobe בקוטר שלושה מילימטר במשך 10 שניות, ולהחיל את cryoprobe על הקיר החדר השמאלי הפנימי במשך 10 שניות כדי ליצור חדר שמאלי, קריואנג'ורי אוטם. נתק את ההקפאה מהקיר החדר השמאלי עם השקיה מלוחה בטמפרטורת החדר ויישר מחדש את פתח החזה עם המפשק.

השתמש במוט כדי להחזיר בעדינות את הלב לחלל בית החזה ולהסיר את המפשק. השתמש בתפר 6-0 כדי לחבר את השטרנוטומיה עם קשר אחד. ולהשתמש בתפר ריצה 6-0 כדי לסגור את חלל החזה.

השתמש מזרק 10 מיליליטר כדי לפנות את כל האוויר שנותר מהחזה לפני קשירת הקשר ולהתאים את העור בקצה caudal לפני השימוש בתפר פועל 5-0 כדי לסגור את הרקמה עד לנקודה של פתח קנה הדרך. לאחר הפחתת isoflurane ואת החיה רווחי נשימה ספונטנית להסיר את קטטר קנה הנשימה ולסגור את החתך קנה הנשימה עם אחד 8-0 תפר. החלף את שרירי הצוואר הגחוני בחזרה למיקום האנטומי שלהם מעל קנה הנשימה ולהשלים את תפר העור.

לאחר מכן, מוסיפים metamizole למי השתייה עבור משככי כאבים במשך שלושה ימים עם ניטור בעלי חיים יומי במשך שמונה שבועות. ב cryoinjured לבבות echocardiography מגלה שבר פליטה מופחת באופן משמעותי ושינוי אזור שבר, עם ליקוי תפקודי נצפתה מהיום השביעי שלאחר הניתוח עד נקודת הקצה הניסיונית ב 56 ימים. כפי שהוערך על ידי ניתוח לולאת נפח לחץ, cryoinfraction מוביל לתפקוד החדר השמאלי לקוי אשר משתקף כירידה בנפח שבץ, עבודת שבץ, פלט לב, וכוח מקסימלי מותאם מראש.

מיפוי אופטי לשעבר vivo של לבבות צבועים רגישים למתח פלואורסצנטי מדגים חסימה של מוליך חשמלי בגבול הפציעה, המציין ניתוק חשמלי מקומי. הכתמה היסטולוגית עם הטריכרום של מאסון חושפת היווצרות רקמות פיברוטית טרנסמורלית באתר הפציעה. גודל אוטם ניתן לחשב על ידי מדידת אזור צלקת אוטם או אורך צלקת קו האמצע.

בנוסף, כתמים immunofluorescent נגד סמן קרדיומיוציטים קולגן-אני מאשר את נוכחותם של שיפוץ פיברואטי ואובדן cardiomyocytes באתר של פציעה. חשוב לשמור על אותו משך מגע של cryoproblem כל חיה כמו משך שונה עלול להוביל גדלים אוטם לא שכיחות. לאחר השליטה בטכניקה זו ניתן לבצע תוך 20 דקות אם היא מבוצעת כראוי.

לאחר צפייה בסרטון זה אתה צריך הבנה טובה כיצד לבצע את מודל cryoinjury. בהצלחה עם הניסויים שלך.