Name: מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-08-16T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 1 s
Description: למדו את שיטת ההשפעה בקליפת המוח הנשלטת ליצירת מודל פגיעה מוחית טראומטית בעכברים. שיטה זו מאפשרת חקירת מנגנוני פציעה, הערכת אובדן רקמה והתנהגות לאחר פגיעה מוחית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי המכונים הלאומיים של מלגת בריאות GM117341 והמכללה האמריקנית למנתחים ג. ג'יימס קאריקו מלגת מחקר לS.J.S.

כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים באוניברסיטת נורת'ווסטרן. C57BL/6 העכברים נרכשו מהמעבדה ג'קסון קבוצה שוכנו במתקן מחסום במרכז לרפואה השוואתית באוניברסיטת נורת'ווסטרן (שיקגו, IL). כל החיות שוכנו ב 12/12 h מחזור אור/כהה עם גישה חופשית למזון ולמים.
1. לגרום הרדמה
<ol><li>להזריקו את העכבר עם קטמין (125 מ"ג/ק"ג) ו xylazine (10 מ"ג/ק"ג) מוזרק intraperitoneally.</li>
</ol>2. שלטים חיוניים מפקחים על כל 15 דקות
<ol><li>מוניטור הטמפרטורה, קצב הנשימה, וצבע העור. העכבר צריך להרגיש חם למגע. העור אמור להופיע ורוד ומלא. קצב הנשימה נע בין 50 ל-70 נשימות לדקה.</li>
</ol>3. הליכים טרום כירורגי
<ol><li>שוקלים את כל העכברים ביום לפני הפגיעה האינדוקציה.</li>
	<li>לעקר קבוצה אחת של כלי ניתוח על ידי אוטוקלינג עבור כל נושא ניסיוני. חטא את המכשיר הנוגע להשפיע לפני השימוש.</li>
	<li>הכינו כלוב התאוששות על ידי הצבת כלוב נקי על כרית חימום חשמלי להגדיר "נמוך" הגדרה ממוקם בצורה כזאת, כי העכברים יכולים להתרחק החום פעם אמבולטורי.</li>
	<li>הגדר את התיאטרון התפעולי בתוך כיסוי למינארי של זרימה מחוטאת.<ol>
<li>הצב את מסגרת ההפעלה הסטריאוטקאית.</li>
		<li>חברו את המכשיר הנוגע לה, למסגרת הסטריאוטקאית.</li>
		<li>הגדר את המכשיר האקטולי עם הפרמטרים הביומכאני הרצוי עבור מהירות וזמן להתעכב. הערה: בפרוטוקול זה מתוארת פגיעה מוחית חמורה באמצעות השפעה בקוטר 3 מ"מ באמצעות כריתת גולגולת בקוטר 5 מ"מ עם המהירות שנקבעה ב-2.5 מ מ וזמן משכון של 0.1 s. ניתן להשתמש במגוון רחב של פרמטרים ביומכאני כדי לזרז את הספקטרום המלא של TBI.</li>
	</ol>
</li>
	<li>דון ציוד הגנה אישי חדש וכפפות סטרילי.</li>
	<li>לגלח את הפרווה מהאתר הפעיל באמצעות קוצץ חשמלי.</li>
	<li>החלת משחה עיניים מגן לעיניים של העכבר כדי למנוע פציעה הקרנית וייבוש.</li>
	<li>הציבו את העכבר לתוך אולם ההפעלה.</li>
	<li>להכין את העור עם הניתוח יוד מבוסס לסירוגין עם אלכוהול שלוש פעמים.</li>
</ol>4. יישום של השפעה קורטיקלית מבוקרת
<ol><li>. באמצע הדרך עם אזמל שחושף את הגולגולת</li>
	<li>הצב את העכבר בתוך מסגרת הפעלה סטריאוטקאית על-ידי אבטחת עצמות הזמן הדו בין ברים האוזן הזעירים ונעילת החותכות בתוך מהדק חותכת יצירת יציבה שלוש נקודות להחזיק על ראש העכבר.</li>
	<li>למשוך את הקרקפת הרחק מהאתר הפעיל עם הדימום או מלקחיים נעילה כדי להבטיח את הקרקפת לא בא במגע עם סיבית המקדחה במהלך כריתת גולגולת.</li>
	<li>זהה את התפרים המשונן והקורונאליות על הגולגולת החשופה. הערה: פרוטוקול זה מרכז את כריתת הגולגולת 2 מ"מ משמאל משונן תפר ו 2 מ"מ rostral לתפר ילתית.</li>
	<li>בצע כריתת גולגולת באמצעות תרגיל עם סיבית של מקדחה טרפין.<ol>
<li>כדי לבצע את כריתת הגולגולת, הפעל תחילה את התרגיל במהירות מירבית ולאחר מכן החל את התרגיל הקודח של הפין בניצב לגולגולת באתר של כריתת גולגולת.</li>
		<li>החל בעדינות, אפילו לחץ על התרגיל פעם איש קשר נעשה עם הגולגולת. קל "לתת" יהיה הרגיש ברגע התרגיל חודר דרך הגולגולת. אין לחדור את השכבה הבסיסית. הערה: פרוטוקול זה מנצל מקדחה של 5 מ"מ בלבד כדי לבצע את כריתת הגולגולת.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מלקחיים להשתמש ו מד קטן המחט תת-עורית כדי להסיר את דש העצם, חשיפת מלא את הבסיס דורא מאטר.</li>
	<li>סובב את הקצה של המדחף לתוך השדה הפעיל והנמך אותו עד שהוא יוצר קשר עם משטח השכבה החשוף. לאחר המגע מתבצע חיישן המגע של המכשיר יעשה צליל שקול כדי להתריע על המנתח שנוצר קשר. פעולה זו תסמן את נקודת האפס שממנה מוגדרת עומק הדפורמציה. הערה: פרוטוקול זה מנצל טיפ 3 מ"מ להשפיע כדי ליצור פציעה חמורה. ניתן להשתמש בטיפים קטנים כמו 1 מ"מ כדי להחיל פציעה מקומית יותר.</li>
	<li>למשוך את הקצה המשפיעים ולקבוע את עומק ההשפעה הרצוי על-ידי הנמכת המיקום של המדחף במסגרת הסטריאוטקאית. הערה: בפרוטוקול זה אנו מתארים פציעה חמורה על ידי הגדרת עומק הדפורמציה ל-2 מ"מ.</li>
	<li>החל את הפציעה על-ידי הפעלת impactor חקן בהתקן האקטולי.</li>
	<li>סובב את התקן ההתנגשות מחוץ לשדה והסר את בעל החיים מהמסגרת הסטריאוטקאית.</li>
</ol>5. סגירת אתר כירורגי
<ol><li>שליטה דימום מהגולגולת ומשטח קליפת המוח נפצע עם לחץ ישיר של המוליך כותנה סטרילית משופעת.</li>
	<li>תייבש את הגולגולת עם. מחבר כותנה סטרילי</li>
	<li>סגרו את הקרקפת מעל לריתת הגולגולת באמצעות דבק כירורגי זמין מסחרית או תפר מונופינט. הערה: בפרוטוקול זה דבק כירורגי וטרינרי משמש לסגירת הקרקפת. כנף העצם אינה מוחלפת ונמחקת.</li>
</ol>6. טיפול וניטור שלאחר הניתוח
<ol><li>מנהל כאבים שלאחר הניתוח (למשל, שחרור מתמשכת בופרנורפין 0.1 – 0.5 מ"ג/ק"ג מנוהל תת-עורי מתן 72 h של כאבים מתמשכת).</li>
	<li>מניחים את החיה בתנוחת התאוששות לרוחב בכלוב נקי מראש מחומם.</li>
	<li>להתבונן בחיות עד הערה וניידים, ואז להחזיר כל עכבר לכלוב הבית שלו.</li>
	<li>הקפידו לקבל גישה חופשית לאוכל ולמים. צריכת המזון והמים הרגילים מחדשים בדרך כלל תוך שעתיים לאחר הפציעה.</li>
	<li>מדידת משקל הגוף כל שלושה ימים לאורך הניסוי.</li>
</ol>

<ol><li>Faul, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFaul%2C+M+%22Traumatic+Brain+Injury+in+the+United+States%3A+Emergency+Department+Visits%2C+Hospitalizations+and+Deaths+2002-2006%22">Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits, Hospitalizations and Deaths 2002-2006</a>. , Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. Atlanta (GA). (2010).</li>
<li>Roozenbeek, B., Maas, A. I., Menon, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changing+patterns+in+the+epidemiology+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Changing patterns in the epidemiology of traumatic brain injury.</a> Nature Reviews Neurology. 9 (4), 231-236 (2013).</li>
<li>Corso, P., Finkelstein, E., Miller, T., Fiebelkorn, I., Zaloshnja, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+and+lifetime+costs+of+injuries+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Injury+Prevention%22%5BJournal%5D)">Incidence and lifetime costs of injuries in the United States.</a> Injury Prevention. 12 (4), 212-218 (2006).</li>
<li>Pearson, W. S., Sugerman, D. E., McGuire, L. C., Coronado, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergency+department+visits+for+traumatic+brain+injury+in+older+adults+in+the+United+States%3A+2006-08%5BTitle%5D)+AND+%22Western+Journal+of+Emergency+Medicine%22%5BJournal%5D)">Emergency department visits for traumatic brain injury in older adults in the United States: 2006-08.</a> Western Journal of Emergency Medicine. 13 (3), 289-293 (2012).</li>
<li>Whitlock, J. A. Jr, Hamilton, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+outcome+after+rehabilitation+for+severe+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Functional outcome after rehabilitation for severe traumatic brain injury.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 76 (12), 1103-1112 (1995).</li>
<li>Schwarzbold, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders+and+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychiatric+Disease+and+Treatment%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders and traumatic brain injury.</a> Neuropsychiatric Disease and Treatment. 4 (4), 797-816 (2008).</li>
<li>Whelan-Goodinson, R., Ponsford, J., Johnston, L., Grant, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychiatric+disorders+following+traumatic+brain+injury%3A+their+nature+and+frequency%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Head+Trauma+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Psychiatric disorders following traumatic brain injury: their nature and frequency.</a> Journal of Head Trauma Rehabilitation. 24 (5), 324-332 (2009).</li>
<li>Peskind, E. R., Brody, D., Cernak, I., McKee, A., Ruff, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Military-+and+sports-related+mild+traumatic+brain+injury%3A+clinical+presentation%2C+management%2C+and+long-term+consequences%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Military- and sports-related mild traumatic brain injury: clinical presentation, management, and long-term consequences.</a> Journal of Clinical Psychiatry. 74 (2), 180-188 (2013).</li>
<li>Martin, L. A., Neighbors, H. W., Griffith, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+experience+of+symptoms+of+depression+in+men+vs+women%3A+analysis+of+the+National+Comorbidity+Survey+Replication%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The experience of symptoms of depression in men vs women: analysis of the National Comorbidity Survey Replication.</a> JAMA Psychiatry. 70 (10), 1100-1106 (2013).</li>
<li>Makinde, H. M., Just, T. B., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Role+of+Microglia+in+the+Etiology+and+Evolution+of+Chronic+Traumatic+Encephalopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">The Role of Microglia in the Etiology and Evolution of Chronic Traumatic Encephalopathy.</a> Shock. 48 (3), 276-283 (2017).</li>
<li>Belanger, H. G., Vanderploeg, R. D., McAllister, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subconcussive+Blows+to+the+Head%3A+A+Formative+Review+of+Short-term+Clinical+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Head+Trauma+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Subconcussive Blows to the Head: A Formative Review of Short-term Clinical Outcomes.</a> Journal of Head Trauma Rehabilitation. 31 (3), 159-166 (2016).</li>
<li>Carman, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+document%3A+Mind+the+gaps-advancing+research+into+short-term+and+long-term+neuropsychological+outcomes+of+youth+sports-related+concussions%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Expert consensus document: Mind the gaps-advancing research into short-term and long-term neuropsychological outcomes of youth sports-related concussions.</a> Nature Reviews Neurology. 11 (4), 230-244 (2015).</li>
<li>Kramer, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Contribution+to+the+Theory+of+Cerebral+Concussion%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">A Contribution to the Theory of Cerebral Concussion.</a> Annals of Surgery. 23 (2), 163-173 (1896).</li>
<li>Lighthall, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+cortical+impact%3A+a+new+experimental+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model.</a> Journal of Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).</li>
<li>Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+controlled+cortical+impact+model+of+traumatic+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat.</a> Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).</li>
<li>Schwulst, S. J., Trahanas, D. M., Saber, R., Perlman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury-induced+alterations+in+peripheral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma+and+Acute+Care+Surgery%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury-induced alterations in peripheral immunity.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 75 (5), 780-788 (2013).</li>
<li>Trahanas, D. M., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Activation+of+Infiltrating+Monocyte-Derived+Cells+After+Mild+and+Severe+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Differential Activation of Infiltrating Monocyte-Derived Cells After Mild and Severe Traumatic Brain Injury.</a> Shock. 43 (3), 255-260 (2015).</li>
<li>Makinde, H. M., Cuda, C. M., Just, T. B., Perlman, H. R., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonclassical+Monocytes+Mediate+Secondary+Injury%2C+Neurocognitive+Outcome%2C+and+Neutrophil+Infiltration+after+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Nonclassical Monocytes Mediate Secondary Injury, Neurocognitive Outcome, and Neutrophil Infiltration after Traumatic Brain Injury.</a> Journal of Immunology. 199 (10), 3583-3591 (2017).</li>
<li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+fluid+percussion+brain+injury%3A+a+15-year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22 (1), 42-75 (2005).</li>
<li>Marmarou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+diffuse+brain+injury+in+rats.+Part+I%3A+Pathophysiology+and+biomechanics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A new model of diffuse brain injury in rats. Part I: Pathophysiology and biomechanics.</a> Journal of Neurosurgery. 80 (2), 291-300 (1994).</li>
<li>Reneer, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multi-mode+shock+tube+for+investigation+of+blast-induced+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A multi-mode shock tube for investigation of blast-induced traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 28 (1), 95-104 (2011).</li>
<li>Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Traumatic+Brain+Injury+and+Assessment+of+Injury+Severity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity.</a> Molecular Neurobiology. , (2019).</li>
<li>Makinde, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte+depletion+attenuates+the+development+of+posttraumatic+hydrocephalus+and+preserves+white+matter+integrity+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Monocyte depletion attenuates the development of posttraumatic hydrocephalus and preserves white matter integrity after traumatic brain injury.</a> PLoS One. 13 (11), e0202722(2018).</li>
<li>Osier, N. D., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Controlled+Cortical+Impact+Model%3A+Applications%2C+Considerations+for+Researchers%2C+and+Future+Directions%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions.</a> Frontiers in Neurology. 7, 134(2016).</li>
<li>Iaccarino, C., Carretta, A., Nicolosi, F., Morselli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+severe+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of severe traumatic brain injury.</a> Journal of Neurosurgical Sciences. 62 (5), 535-541 (2018).</li>
</ol>

למחברים אין קונפליקטים פיננסיים של עניין.

קיימים מספר שלבים קריטיים להחלת פציעה אמינה ועקבית. ראשית, העכבר חייב להגיע למישור עמוק של הרדמה כירורגית להבטיח שום תנועה במהלך הביצועים של כריתת הגולגולת. בעוד משטרי הרדמה רבים עשוי לשמש כדי לגרום הרדמה כללית במכרסמים, הרדמה לגרום לדיכאון נשימתי כגון הרדמה המערכת הימית עלולה לגרום לדום נשימה בשילוב עם TBI חמור. פרוטוקול זה מנצל קטמין (125 מ"ג/ק"ג) ו xylazine (10 מ"ג/ק"ג) מוזרק intraperitoneally. שילוב זה של תרופות מייצר מישור כירורגי של הרדמה בתוך 5 דקות של ניהול משך של כ 30 – 45 דקות. יתרה מזאת, שילוב זה של תרופות אינ...

המרכזים לבקרת מחלות ומניעת פגיעה מעריכים כי כ-2,000,000 אמריקנים מקיימים פגיעה מוחית טראומטית (tbi) מדי שנה1,2. למעשה, tbi תורמת מעל 30% ממקרי המוות הקשורים בארצות הברית עם עלויות בריאות מתקרבים $80,000,000,000 בשנה וכמעט $4,000,000 לאדם בשנה ששרדו tbi חמור3,4,5. ההשפעה של TBI מודגשת על ידי לטווח ארוך משמעותי נוירוקוגניטיבי הסיבוכים הנוירופסיכיאטריים שסבלו על ידי ניצולי עם התחלתה חתרני של התנהגות, קוגניטיבית, וליקויים מוטוריים הנקרא כרונית טראומטית אנצפלופתיה (CTE) מיכל בן 6 , מיכל סבן , בן שמונה , מיכל בן 10 , 10. אפילו אירועים משניים של זעזוע-מוח-השפעות אלו שאינן מובילות לתופעות הקליניות — יכולות להוביל לתפקוד לקוי של נוירוג'יק בלתי ממושך11,12.
מודלים בעלי חיים לחקר TBI המועסקים מאז סוף 1800 של13. בשנות ה-80 פותחה בשנת 1980 שחקן פניאומטי למטרת דוגמנות TBI. שיטה זו מכונה כעת השפעה מבוקרת הקורטיקלית (CCI)14. השליטה והתוכסות של CCI הובילו חוקרים להתאים את המודל לשימוש במכרסמים15. המעבדה שלנו משתמשת במודל זה כדי לגרום tbi באמצעות impactor חקן זמין מסחרית ואלקטרונית מכשיר הגשמה16,17. מודל זה מסוגל לייצר מגוון רחב של מצבי TBI הישימים קלינית בהתאם לפרמטרים הביומכאני שבשימוש. הערכה היסטולוגית של מוחות TBI לאחר פציעה חמורה הנגרמת במעבדה שלנו מדגים משמעותי ביותר הקליפת המוח הקורטיתית ואובדן היפוקמאל, כמו גם בצקת מועלת צלעות ועיוות. בנוסף, CCI מייצרת ליקוי עקבית בתפקוד המוטורי והקוגניטיבית כפי שנמדד על ידי בחני התנהגותית מספר18. המגבלות של CCI כוללות את הצורך בפתיחת הגולגולת ועל הוצאות הרכישה של המכשיר המעורר.
מספר דגמים נוספים של tbi קיימים והם מבוססים היטב בספרות כולל מודל כלי ההקשה של נוזל לרוחב, מודל ירידה במשקל, ופציעה הפיצוץ דגם19,20,21. בעוד כל אחד מדגמים אלה יש יתרונות ברורים שלהם החסרונות העיקריים שלהם הם פציעה מעורבת, תמותה גבוהה וחוסר סטנדרטיזציה, בהתאמה22. יתרה מזאת, אף אחד מדגמים אלה אינו מציע את הדיוק, הדיוק והתוכסות של CCI. על ידי התאמת הפרמטרים הביומכאני לתוך המכשיר האקטואלי, מודל CCI מאפשר לחוקר שליטה מדויקת על גודל הפציעה, עומק הפציעה, ואנרגיה קינטית המוחלת על המוח. זה נותן לחוקרים את היכולת ליישם את כל הספקטרום של TBI לאזורים ספציפיים במוח. זה גם מתיר את האפשרות הגדולה ביותר מניסוי להתנסות.

<table><tbody><tr><td>AnaSed הזרקת קסילזין תמיסה סטרילית</td><td>LLOYD, Inc.</td><td></td><td></td>5939911020</tr><tr><td>בופרנורפין SR מעבדה 0.5 מ"ג/מ"ל</td><td>Zoopharm-Wildlife Pharmaceuticals ארה"ב</td><td>BSRLAB0.5-182012</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-מנוע סיבובי במהירות גבוהה KiT0</td><td>Foredom חברת חשמל</td><td>K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Imapact אחד עבור Stereotaxix CCI</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>39463920</td><td></td></tr><tr><td>Ketathesia קטמין HCl הזרקה USP</td><td>הנרי שיין, בע"מ</td><td>56344</td><td></td></tr><tr><td>בסיס סטריאוטקסי ספציפי לעכבר</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>39462980</td><td></td></tr><tr><td>טרפינים למיקרו מקדחה</td><td>Fine Science Tools, Inc</td><td>18004-50</td><td></td></tr></tbody></table>

מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית

Murine Model of Controlled Cortical Impact for the Induction of Traumatic Brain Injury

הערכת המרכז לבקרת מחלות ומניעת פציעה שכמעט 2,000,000 אנשים סובלים מפגיעה מוחית טראומטית (TBI) מדי שנה בארצות הברית. למעשה, TBI הוא גורם תורם ליותר משליש מכל התמותה הקשורה לפציעה. עם זאת, המנגנונים הסלולאריים והמולקולריים העומדים בבסיס הפתופסולוגיה של TBI מובנים בצורה גרועה. כך, מודלים טרום קלינית של TBI מסוגל לשכפל את מנגנוני הפציעה הרלוונטיים TBI בחולים אנושיים הם צורך מחקר קריטי. מודל ההשפעה הקורטיקלית הנשלטת (CCI) של TBI מנצל מכשיר מכני כדי להשפיע ישירות על קליפת המוח החשופה. בעוד מודל לא יכול למלא את דפוסי הפציעה שונים ואת הטבע הטרוגנית של TBI בחולים אנושיים, CCI מסוגל לגרימת מגוון רחב של TBI קלינית ישימה. יתר על כן, CCI הוא מתוקננת בקלות ומאפשר לחוקרים להשוות תוצאות על פני ניסויים, כמו גם על פני קבוצות חקירה. הפרוטוקול הבא הוא תיאור מפורט של החלת CCI חמור עם מכשיר מסחרי זמין להשפיע במודל murine של TBI.

Impactor שחקן עולה ישירות על מסגרת סטריאוטקאית המאפשר ככל 10 יקרומטר רזולוציה לשליטה על נקודת ההשפעה, עומק וחדירה. הכוחות האלקטרומגנטיים המועסקים יכולים להקנות למהירויות השפעה החל 1.5 – 6/m. זה מאפשר דיוק ללא תחרות והוא מהווה שליטה על כל מגוון של TBI הרלוונטיות קלינית. החוקרים יכולים להפעיל ניסויים פיילוט שינוי פרמטרי הפציעה כגון גודל הטיפ impactor שחקן, מהירות ההשפעה, עומק ההשפעה כדי לקבוע את הפרמטרים הטובים ביותר לייצר את המידה הרצויה של פציעה. פרוטוקול זה מתאר TBI חמורה לאזור parietotemporal זמן השמאלי על ידי ביצוע הנ...

כאן אנו מתארים פרוטוקול עבור האינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית מורמין באמצעות ראש פתוח השפעה בקליפת המוח.

The Centers for Disease Control and Injury Prevention estimate that almost 2 million people sustain a traumatic brain injury (TBI) every year in the ...

קל לתקנן השפעה קליפתית מבוקרת בין נבדקים וניסויים ומאפשרת יישום של כל הספקטרום של פגיעה מוחית טראומטית באזורים מוגדרים במדויק של המוח. מדגים הליך זה הוא מכה האיסלאם, טכנאי מחקר במעבדה שלי. טכניקה זו נותרה הצורה העקבית והתרבותית ביותר של גרימת פגיעה מוחית טראומטית במכרסמים.לפני תחילת ההליך, חבר את ההתקן המשפיע למסגרת ההפעלה הסטריאוטוקסית. Se המכשיר מפעיל עם הפרמטרים הביומכניים הרצויים עבור המהירות הניסיונית המתאימה וזמן טוב. דון ציוד מגן אישי חדש וכפפות סטריליות ולאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר ניסיוני הרדמה.השתמש קוצץ לגלח את הפרווה עבור האתר הכירורגי ולהחיל משחה על העיניים של החיה. לאחר מכן מניחים את העכבר לתוך חדר הניתוח ולהכין את העור מגולח עם שלושה יוד רציף מבוסס אלכוהול כירורגית לשפשף. כדי לגרום לפגיעה מוחית טראומטית בקליפת המוח מבוקרת, השתמש תחילה באזמל כדי לבצע חתך של סנטימטר אחד לאורך קו האמצע של הקרקפת כדי לחשוף את הגולגולת.יש לסגת מהקרקפת מהאתר הפעיל ולזהות את התפרים הסגיטליים והקורונה על הגולגולת החשופה. כדי לבצע כריתת סרטן, לצייד microdrill עם קצת מקדחה טרפין חמישה מילימטר כדי להפעיל את התרגיל במהירות המרבית ולהחיל את קצת בניצב על הגולגולת שני מילימטרים משמאל לתפר sagittal ושני מילימטרים rostral לתפר הכתר עם לחץ עדין אפילו. תן קל יורגש כאשר המקדחה חודרת את הגולגולת.השתמש מדפים ומחט מזרק מד קטן כדי להסיר את דש העצם, לחשוף באופן מלא את מאטר דורה הבסיסית ולסובב את קצה המשפיע לתוך השדה האופרטיבי. אבטח את עצמות הזמן הדו-צדדיות בין פסי האוזן הזעירים של המסגרת הסטריאוטוקסית ונעל את החותכים בתוך המהדק החותך כדי ליצור אחיזה יציבה של שלוש נקודות על ראש העכבר. מנמיך את הקצה עד שהוא יוצר קשר עם דורה מאטר החשוף.חיישן המגע של המכשיר יגרום לטון נשמע להתריע כי מגע נעשה. משוך את קצה ההשפעה מנקודת האפס והורד את מיקום המשפיע על המסגרת הסטריאוטוקסית כדי להגדיר את עומק הפגיעה הרצוי. לאחר מכן הפעיל את המשפיע במכשיר ההתפעילות לפני סיבוב ההתקן בחזרה אל מחוץ לשדה כדי לאפשר את הסרת החיה מהמסגרת.מיד לאחר הפציעה, יש להפעיל לחץ ישיר ממוליך כותנה סטרילי על הגולגולת ועל משטח קליפת המוח הפצוע כדי לשלוט בכל דימום ולהשתמש במוליך טרי לייבוש הגולגולת. סגור את הקרקפת מעל craniectomy על פי טכניקות סטנדרטיות ולנהל משככי כאבים לאחר הניתוח. לאחר מכן מניחים את החיה במצב התאוששות דטוביטוס מצד שני בכלוב נקי מחומם מראש עם ניטור עד שיקום מלא ולמדוד את משקל הגוף כל שלושה ימים במהלך הניסוי.מסירת הפציעה כפי שהוכח גורמת לדימום תת-עורי ותת-עורי תת-עורי. הערכה היסטולוגית של חלקי רקמת מוח פגיעה מוחית טראומטית לאחר פציעה חמורה מגלה אובדן קליפת המוח והיפוקמפוס ipsilateral משמעותי, כמו גם בצקת מנוגדת ועיוות. הדמיית MR של מוחות פצועים קשה מדגימה גם אובדן והחלפה של רקמות מתקדמות על ידי נוזל השדרה.השפעה קליפתית מבוקרת גורמת לפציעה אמינה ועקבית המסוגלת לייצר מגוון רחב של פגיעות מוח ישימות קלינית. שיטת ההשפעה הקורטית המבוקרת שלנו מייצרת מודל מורין של פגיעה מוחית טראומטית חמורה לניתוח התנהגותי והדמיה ומייצרת רקמה לניתוח מולקולרי ותאי.

murine-model-controlled-cortical-impact-for-induction-traumatic-brain

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית בגולגולת פתוחה בעכבר על ידי ביצוע חתך בגולגולת קו האמצע, קידוח דרך הגולגולת והסרת דש העצם כדי לחשוף את קליפת המוח, והפעלת לחץ גבוה כדי לגרום לטראומה. לאחר מכן תופרים את הפצע כדי להכין את מודל העכבר לניסויים הבאים.

יצירת מודל עכבר של פגיעה מוחית טראומטית באמצעות גשושית אימפקטור

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פגיעה מוחית טראומטית (TBI) במודל עכבר. עכבר מורדם עם גולגולת חשופה נלקח כדי ליצור פתח בגולגולת, ולאחר מכן נגרמת פגיעה מבוקרת בקליפת המוח באמצעות מכשיר פגיעה. הפגיעה פוגעת ברקמת המוח וגורמת לפגיעה בתפקוד הקוגניטיבי ובקואורדינציה המוטורית.

יצירת מודל עכברי של פגיעה מוחית טראומטית באמצעות מכשיר אימפקטור

מקור: Macheda, T., et. al. מודל ראש סגור מבוקר אלקטרומגנטי של פגיעה מוחית טראומטית קלה בעכברים. J. Vis. Exp. (2022)סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת פציעת ראש סגור במודל עכבר באמצעות מסגרת סטריאוטקסית. ההשפעה המבוקרת משכפלת פגיעה מוחית טראומטית קלה, ומאפשרת לחוקרים לחקור השפעות נוירולוגיות והתאוששות על ידי מדידת רפלקסים והתנהגות לאחר פציעה.

אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית קלה במודל עכבר

פגיעות מוח טראומטיות (TBI) נשארות בעיה בריאותית חמורה. באמצעות מודל ניתוח פגיעה מבוקרת בקליפת המוח, ניתן לבצע מחקר על ההשפעות של TBI ושיטות טיפול אפשריות.

השפעת דגם קליפת המוח מבוקר לפגיעה מוחית טראומטית

הספורטאים סופגים כמה מאות פציעות מוחיות טראומטיות קלות (mTBI) / זעזוע מוח מדי שנה; עם זאת, את התוצאות של אלה על המוח הוא הבין היטב. לכן, מודל החיות של mTBI יחיד וחוזר על עצמו באופן עקבי משכפל סימפטומים קליניים רלוונטיים מספק את האמצעים לקדם את המחקר של mTBI ו זעזוע מוח.

דגם עכבר של פגיעה בודדת וחזרה קלה של פגיעה מוחית טראומטית

פרוטוקול זה מדגים מתודולוגיות עבור מודל העכבר של פגיעה במוח הגולגולת טראומה טראומטית השתלת הגוף האנושי המושרה pluripotent שפעה התאים הנגזר לתוך האתר פציעה. מבחנים התנהגותיים והיסטולוגיים של תוצאות מהליכים אלה מתוארים גם בקצרה.

מבוקרת מודל השפעה בקליפת המוח של פגיעה במוחו של העכבר עם השתלת הטיפולית של האדם המושרה Pluripotent תא גזע תאים הנגזרים

דימום אינטרפרנכימלי ודלקת עצבית המלווה בחבלה מוחית עלולים לגרום לפגיעה מוחית משנית חמורה. פרוטוקול זה מפרט מודל השפעה קליפתית מבוקרת עכבר (CCI) המאפשר לחוקרים לחקור דימום, קונטוזיה ותגובות חיסוניות פוסט-טראומטיות ולחקור טיפולים פוטנציאליים.

מודל השפעה קליפת המוח מבוקרת פרה-קלינית עבור דימום טראומטי, חבלה ודלקת עצבית

הפרוטוקול מתאר פגיעה מוחית טראומטית קלה במודל עכבר. בפרט, פרוטוקול שלב אחר שלב לגרימת פגיעת ראש סגורה קלה בקו האמצע ואפיון מודל בעלי החיים מוסבר במלואו.

מודל ראש סגור מבוקר אלקטרומגנטי של פגיעה מוחית טראומטית קלה בעכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל של בעלי חיים עם פגיעת ראש סגורה המשחזר את תוצאת הדימוי העצבי של פגיעה מוחית טראומטית קלה לא מסובכת עם מבנה המוח השמור בשלב החריף וניוון מוחי ארוך טווח. הדמיית תהודה מגנטית אורכית היא השיטה העיקרית המשמשת לראיות.

פיתוח מודל פגיעה מוחית טראומטית קלה לא מסובך ששונה בשיטת ירידה במשקל והוכח על ידי הדמיית תהודה מגנטית

נוזל הקשה הרוחב (LFP), מודל הוקמה של פגיעה מוחית טראומטית אצל עכברים, הוא הוכיח. LFP ממלא שלושת הקריטריונים העיקריים במודלים של בעלי חיים: התאמה, תוקף, אמינות קליני. ההליך המורכב craniotomy כירורגית, קיבעון של הרכזת ואחריו אינדוקציה של פגיעה, והתוצאה היא פגיעות מוקד ומפוזר, הוא תיאר.

נוזל הקשה Lateral: דגם של פגיעה מוחית טראומטית של עכברים

למדו את שיטת ההשפעה בקליפת המוח הנשלטת ליצירת מודל פגיעה מוחית טראומטית בעכברים. שיטה זו מאפשרת חקירת מנגנוני פציעה, הערכת אובדן רקמה והתנהגות לאחר פגיעה מוחית.

מודל מורנה של השפעה בקליפת המוח הנשלטת על אינדוקציה של פגיעה מוחית טראומטית

גלה סרטונים נוספים