Name: לימוד שיפוץ הפוך חדרי שמאלי על ידי ניתוק האבניים במכרסמים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: חקור מנגנוני שיפוץ הפוך של שריר הלב בעכברים באמצעות ניתוח שחרור עורקי. פרוטוקול זה מאפשר הערכת אפשרויות טיפוליות חדשות לשיקום לבבי ולימוד תהליכי החלמה מחלתיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים קרן פורטוגזית למדע וטכנולוגיה (FCT), האיחוד האירופי, Quadro de Referência Estratégico Nacional (QREN), פונדו אירופהו דה Desenvolvimento האזורי (FEDER) ו Programa אופרציונאל פקטורים דה Competitividade (להתחרות) למימון יוניק (UID / IC / 00051/2013) יחידת מחקר. פרויקט זה נתמך על ידי FEDER באמצעות COMPETE 2020 – Programa Operacional Competitividade E Internacionalização (POCI), הפרויקט DOCNET (NORTE-01-0145-FEDER-000003), הנתמך על ידי התוכנית התפעולית האזורית של נורטה פורטוגל (NORTE 2020), במסגרת הסכם השותפות של פורטוגל 2020, באמצעות הקרן האירופית לפיתוח אזורי (ERDF), הפרויקט NETDIAMOND (POCI-01-0145-FEDER-016385), הנתמך על ידי קרנות מבניות והשקעות אירופיות, התוכנית התפעולית האזורית של ליסבון 2020. דניאלה מירנדה-סילבה ופטרישה רודריגז ממומנות על ידי Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) על ידי מענקי מלגות (SFRH/BD/87556/2012 ו- SFRH/BD/96026/2013 בהתאמה).

כל הניסויים בבעלי חיים מצייתים למדריך לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה (פרסום NIH מס' 85-23, מתוקן ב-2011) והחוק הפורטוגלי לרווחת בעלי חיים (DL 129/92, DL 197/96; פ' 1131/97). הרשויות המקומיות המוסמכות אישרו פרוטוקול ניסיוני זה (018833). עכברי C57B1/J6 זכרים בני שבעה שבועות נשמרו בכלובים מתאימים, עם סביבת מחזור רגילה של 12/12 שעות בחושך בהיר, טמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס ולחות של 60% עם גישה למים וליביטום מודעת דיאטה סטנדרטי.
1. הכנת השדה הכירורגי
<ol><li>לחטא את אתר הניתוח עם 70% אלכוהול ומניחים שולחן ניתוח חד פעמי לכסות על האזור הכירורגי.</li>
	<li>לעקר את כל המכשירים לפני הניתוח. הערה: הליך זה דורש מספריים מיקרו כירורגיות, 2 מלקחיים מעוגלים עדינים, 3 מלקחיים ישרים עדינים, אזמל, מלקחיים קטנים, מספריים מפרק זוויתי, מחזיק מחט, סיוע קשירה אולטרה-דק, 2 hemostats, ולבסוף, מערכת פיתול קיבוע מגנטי מומלץ מאוד (איור 1A).</li>
	<li>עקום את קצה המחט הקהה 26 G ל 90° לגישה קלה יותר לאגור העורקים. מחט בקוטר 26 גרם תיצור צמצום של 0.45 מ"מ בציר העורקים (איור 1B).</li>
	<li>כוונן את טמפרטורת כרית החימום ל-37 ± 0°C(0°C).</li>
</ol>2. הכנת עכברים וצנרור
<ol><li>הרדמה עכברים צעירים C57B1/J6 (20-25 גרם) על ידי שאיפה של 8% sevoflurane עם 0.5 - 1.0 L /min 100% O2 בצינור חרוט.</li>
	<li>בדוק את עומק ההרדמה באמצעות רפלקס משיכה צביטה בוהן.</li>
	<li>מניחים את העכבר על שכיבה הגב על צלחת נוטה ולהמשיך לצנרור orotracheal.</li>
	<li>להזיז את העכבר אל כרית החימום במהירות לחבר את הצינור orotracheal למכונות ההנשמה ליזום את ההנשמה מכני.</li>
	<li>להתאים את הפרמטרים מאוורר לתדר של 160 נשימות / דקה ונפח גאות ושפל של 10 מ"ל / ק"ג.</li>
</ol>3. הכנה לניתוח (הן לניתוחי פסים והן לניתוחים)
<ol><li>לגלח ולהחיל את קרם depilatory מן הצוואר לרמת החזה האמצעי של העכברים.</li>
	<li>יש למרוח ג'ל עיניים על עיני בעלי החיים כדי למנוע התייבשות מהקרנית.</li>
	<li>מניחים בדיקה רקטלית ואת oximeter על כף רגל או זנב לניטור טמפרטורה וחמצון בדם, וקצב הלב, בהתאמה. הערה: הרדמה מעוררת היפותרמיה משמעותית, ולכן, חשוב לשמור על טמפרטורת גוף נורמלית במהלך הניתוח, כדי למנוע ירידה מהירה בקצב הלב.</li>
	<li>לשמור על הרדמה עם sevoflurane (2.0 - 3.0%). בדוק את הרמה הנכונה של הרדמה על ידי חוסר רפלקס צביטה בוהן.</li>
	<li>הניחו את העכברים בדקוביטוס ימני-לרוחב על כרית חימום ואבטחו את הגפיים למערכת הנסיגה של המקבע המגנטי באמצעות קלטת כדי לשמור על החיה במצב הנכון במהלך הניתוח (איור 2, איור 3A).</li>
	<li>לחטא את חזה העכבר עם 70% אלכוהול ואחריו לספק פתרון יוד.</li>
</ol>4. ניתוח פסים של פי העורקים העולה
הערה: לקבלת תיאור פרוטוקול מפורט, התייעץ עם 2,3,4,13.
<ol><li>עם להב חד פעמי, לבצע חתך קטן (~ 0.5 ס"מ) העור בצד שמאל מיד מתחת לרמת אקסילה לנתח את העור.</li>
	<li>בעדינות לנתח ולהפריד את שריר החזה ושכבות שרירים אחרות עד הצלעות להיות גלוי. השתמש מלקחיים עדינים ולהימנע חיתוך השריר.</li>
	<li>תחת מיקרוסקופ, זהה את החללים הבין-צלעיים ופתח חתך קטןבין החלל הבין-צלעיהשני והשלישי עם מלקחיים עדינים.</li>
	<li>שחזרו את הצלעות על ידי הנחת מחזר החזה (איור 2A).</li>
	<li>השתמש מלקחיים קטנים בעדינות לנתח ולהפריד את האונות התימית עד אבי העורקים עולה הופך גלוי. הערה: אפליקטורים כותנה צריך להיות שימושי במקרה של דימום. מלוחים סטריליים חמים צריכים להינתן תת עורית במקרה של דימום משמעותי (למשל, עורק החלב).</li>
	<li>השתמש במלקחיים קטנים כדי לנתח בעדינות את העורקים. הערה: Aorta נחשב להיות מנותח כאשר אין שומן או הידבקויות אחרות סביבו וניתן בקלות לכתר את הכלי עם מלקחיים עקומה קטנה.</li>
	<li>לאחר ניתוח בגור העורקים, הניחו ליגטורת פוליפרופילן 7-0 סביב אגירה באמצעות סיוע קשירה ומלקחיים מעוגלים (איור 2B).</li>
	<li>מקם את המחט הקהה של 26 גרם במקביל לאגורטה (קצה המכוון לכיוון ראש העכברים) (איור 2B). עבור עכברים במשקל 20-25 גרם, מחט זו גורם לשחזור 65-70% התכווצות של העורקים.</li>
	<li>צרו 2 קשרים רופפים סביב העורקים ומחט ה-26 G בעזרת 2 מלקחיים(איור 2B).</li>
	<li>הדקו את הקשרה-1, ובמהירות לאחר מכן, את הקשרהשני. לאשר בקצרה את המיקום הנכון של ההתכווצות ולהסיר במהירות את המחט כדי לשחזר את זרימת הדם בציר העורקים. לבסוף, לעשות קשר3 (קבוצת BA).</li>
	<li>מקם מחדש את התימוס והשרירים למצבם הראשוני.</li>
	<li>בצע את הליך הזיוף זהה להליך ההתכווצות אך שמירה על התפירה רופפת סביב העורקים (קבוצת SHAM).</li>
	<li>חותכים את הקצוות של התפירה ולהסיר את רקטור החזה. הערה: קצות תפר קצרים עשויים להגדיל את ההסתברות של קשרים מתרופפים עם לחץ על העורקים, בעוד קצוות ארוכים להפוך את הליך debanding מסוכן יותר מאז הידבקויות יכול להתרחש בין התפר לבין אטריום שמאל.</li>
	<li>סגור את דופן החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט מופרע או מתמשך באמצעות המספר הנמוך ביותר של תפרים אפשריים. הדק את קשר החזה האחרון עם הריאות מנופח בסוף השראה על ידי צבט את זרימת ההנשמה עבור 2s כדי לנפח מחדש את הריאות.</li>
	<li>סגור את העור עם תפר משי /פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה. הערות: אם נעשה שימוש במאוורר עדכני יותר, ניתן לתכנת אותו להשהות בהשראה (Setup-Advanced-Pause-Inspiring)</li>
</ol>5. טיפול לאחר הניתוח
<ol><li>יש למרוח תמיסת יוד באתר התפרים של העור.</li>
	<li>עבור משככי כאבים נאותים, לנהל buprenorphine תת עורית 0.1 מ"ג / קילוגרם, פעמיים ביום, עד החיה מתאוששת לחלוטין (בדרך כלל 2-3 ימים לאחר הניתוח).</li>
	<li>להזריק מלוחים סטריליים תוך-אופן כדי למנוע התייבשות במקרה של דימום משמעותי במהלך הניתוח.</li>
	<li>מכבים את ההרדמה (מבלי להכתיר את העכבר) ומחכים עד שהחיה תתאושש מהרפלקסים (תנועות שפם הן אות התעוררות) ותתחיל לנשום באופן ספונטני.</li>
	<li>הסר את קנולה קנה הנשימה.</li>
	<li>תן לחיה להתאושש באינקובטור ב-37 מעלות צלזיוס.</li>
	<li>החזירו את החיה לחדר מחזור אור/כהה של 12 שעות לאחר החלמה מלאה.</li>
</ol>6. ניתוח להשבתת העורקים
<ol><li>שבעה שבועות לאחר מכן, לבצע את debanding של העורקים במחצית בעלי החיים BA ולהסיר את התפר רופף ממחצית העכברים SHAM, הוליד 2 קבוצות חדשות - debanding (DEB) ו debanding SHAMA (DESHAM), בהתאמה. DESHAM מייצג את הפקד עבור הקבוצה DEB (איור 4).</li>
	<li>חזור על כל השלבים 2.1 עד 3.6 שהוזכרו לעיל.</li>
	<li>לנתח בעדינות את הרקמות, הידבקויות, פיברוזיס סביב העורקים עד ההתכווצות שלה הופך גלוי.</li>
	<li>לנתח בזהירות את העורקים ולהפריד את התפר מן העורקים. חותכים את התפירה במספר מספריים אביבי זוויתי חד-בדיקה(איור 3B).</li>
	<li>סגור את דופן החזה באמצעות תפר פוליפרופילן 6-0 עם תפר פשוט מופרע או מתמשך באמצעות המספר המינימלי של תפרים אפשריים. הערה: נסה להדק את תפר החזה האחרון כאשר הריאות מנופחות כדי למנוע pneumothorax.</li>
	<li>סגור את העור עם תפר משי /פוליפרופילן 6-0 בתבנית תפר רציפה.</li>
	<li>בצע את כל הליכי הטיפול שלאחר הניתוח כאמור ב- 5.</li>
	<li>להקריב את החיות 2 שבועות מאוחר יותר.</li>
</ol>7. אקו לב כדי להעריך את תפקוד הלב והשאיר היפרטרופיה חדרית ב vivo
<ol><li>בצע את הבדיקה אקו כל 2-3 שבועות כדי לעקוב אחר ההתקדמות של היפרטרופיה ותפקוד הלב.</li>
	<li>הרדמה את בעלי החיים, כמתואר, על ידי שאיפה של 5% sevoflurane עם חרוט האף. התאימו את רמת ההרדמה על ידי הפחתתה ל-2.5%.</li>
	<li>לגלח ולהחיל את קרם depilatory מן הצוואר עד רמת החזה באמצע החזה.</li>
	<li>מניחים את החיה על כרית חימום ומניחים את אלקטרודות א.ק.ג. להבטיח עקבות אק"ג טוב ולשמור על קצב הלב בין 300 ל 350 פעימות / דקה.</li>
	<li>לפקח על הטמפרטורה (~ 37 מעלות צלזיוס).</li>
	<li>יש למרוח ג'ל הד ולמקם את החיה בדבקה צדדית שמאלית.</li>
	<li>הפעל את ההד והתאם את ההגדרות.</li>
	<li>מקם בדיקת אולטרסאונד מעל בית החזה.</li>
	<li>להעריך את שיפוע הלחץ על פני הרצועות ב 7 ו 2 שבועות לאחר פסים וניתוח debanding, בהתאמה. מקמו את הגשוש בציר הארוך של LV והניחו את הקרן מעל העורקים. לחץ על הלחצן PW כדי להפעיל אקו-קרדיוגרפיה של דופלר. לאחר שבעה שבועות של פסים, שיפוע בצינור יהיה >25 מ"מ-ח"ג בבעלי החיים התחבושות.</li>
	<li>הקלט תמונות מונחות דו מימדיות של אבירה המראות את נוכחותו או היעדרו של התכווצות העורקים העולה כדי לדמיין באופן אנטומי את היעילות של הפסים וההתפרקות. הערה: ניתן לדמיין זרימה סוערת ברמת ההתכווצות אם מצב הצבע זמין.</li>
	<li>להעריך היפרטרופיה על ידי מיקום החללית בציר קצר LV, ברמת השרירים הפפילריים, ולחץ על מעקב מצב M כדי לדמיין קיר LV קדימי (LVAW), קוטר LV (LVD) וקיר אחורי LV (LVPW) בדיסטול (D) וסיסטולה (S) (איור 5).</li>
	<li>להעריך את הפונקציה הסיסטולית, לחשב את שבר הפליטה וקיצור שבר כפי שתואר קודם לכן14,15.</li>
	<li>להעריך את הפונקציה הדיאסטולית על ידי 1) קביעת השיא של דופלר גל פעמו של מהירות זרימה מיטרלית מוקדמת ומאוחרת (E ו- A גלים, בהתאמה) באמצעות נוף apical 4 תאים apical רק מעל העלונים המיטרליים; 2) הקלטת דיאסטולי מוקדם (E) ו שיא של מהירויות סיסטוליות (S') תוך שימוש ב- TDI פעמו ובתצוגה אפיקלית של 4 תאים (איור 5).</li>
	<li>רשום לפחות שלוש פעימות לב רצופות לכל הערכת פרמטר. ערכים אלה יהיו ממוצעים לאחר מכן.</li>
</ol>8. הערכה המודינמית
<ol><li>בסוף הפרוטוקול (איור 4), בצע אקו-קרדיוגרפיה סופית, כמתואר ב-7, לפני ההערכה המודינמית של הטרמינל.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.1 עד 3.6.</li>
	<li>ניתן ללגום את הווריד הצווארי הנכון ולהחדיר מלוחים סטריליים ב 64 מ"ל / קילוגרם / שעה.</li>
	<li>לסובב מעט את החיה בצד שמאל ולעשות חתך בעור ברמה של נספח xiphoid.</li>
	<li>להפריד את העור מן השריר עם מלקחיים או עם מספריים.</li>
	<li>בצע חתך לרוחב בין הצלעות השמאליות ברמת התוספתן xiphoid.</li>
	<li>בצע כריתת חזה לרוחב שמאל כדי לחשוף את הלב במלואו. הערה: כדי למנוע דימום ונזק לריאות, הכנס ספוגית כותנה לחלל בית החזה ודחוף את הריאה בעדינות תוך החדרת שני hemostats בצד ימין ושמאל של המקום לחתוך.</li>
	<li>מחממים מראש את קטטרי הלולאה P-V באמבט מים ב-37 מעלות צלזיוס.</li>
	<li>כייל את הקטטר (התקנה, הגדרת ערוץ, בחר את הערוץ הנכון עבור לחץ ועוצמה, יחידות).</li>
	<li>הכנס קטטר באופן נקודתי לתוך LV ולהבטיח חיישני עוצמת הקול ממוקמים בין שסתום אבי העורקים לשיא. ניתן להעריך כרכים באמצעות אקו לב (איור 5). הדמיה של לולאות עוצמת הלחץ מסייעת לאשר את המיקום הנכון של הצנתר (איור 6).</li>
	<li>אפשר לחיה לייצב 20-30 דקות ללא שינויים משמעותיים בצורת לולאות נפח הלחץ.</li>
	<li>עם אוורור מושעה בסוף התפוגה, לרכוש הקלטות בסיסיות (איור 6). באופן רציף לרכוש נתונים ב 1,000 הרץ כדי להיות מנותח לאחר מכן כבוי על ידי תוכנה מתאימה.</li>
	<li>לחשב מוליכות מקבילה לאחר בולוס מלוחים היפרטוני (10%, 10 μL).</li>
	<li>בעודו מורדם, להקריב את החיה על ידי exsanguination, לאסוף צנטריפוגה הדם.</li>
	<li>לבסוף, בלו ולאסוף את הלב. משקלל את הלב, השמאלי, ואת החדר הימני בנפרד ומיד לאחסן את הדגימות חנקן נוזלי או פורמלין למחקרים מולקולריים או היסטולוגיים הבאים, בהתאמה.</li>
</ol>9. הליך רצועות/ביטול פסים של העורקים בחולדות
<ol><li>בצע רצועות אב העורקים ב- Wistar הצעיר (70-90 גרם) באמצעות מחט 22 G ו 6-0 ליגטורת פוליפרופילן כדי לכווץ את אב העורקים.</li>
	<li>להבטיח הליכים הרדמה ומשככי כאבים נאותים עם 3-4% של sevoflurane ו 0.05 מ"ג / קילוגרם של buprenorphine, בהתאמה.</li>
	<li>במהלך אקו לב, להבטיח קצב הלב תמיד מעל 300 קצב / דקה (באופן אידיאלי בין 300 ל 350).</li>
	<li>לפני שלב 8.9, בעדינות לנתח את העורקים החולדה, למקם בדיקה זרימה סביבו כדי למדוד את תפוקת הלב. השימוש בגשוש הזרימה של העורקים הוא הליך תקן הזהב לחולדות.</li>
	<li>להערכה המודינמית, cannulate וריד הצוואר או הירך לניהול נוזלים (32 מ"ל / קילוגרם / שעה).</li>
	<li>החלף את קטטר נפח הלחץ SPR-1035 על ידי SPR-847 או SPR-838, שגודלם מתאים יותר למידות חדר החולדה.</li>
</ol>

<ol><li>Arany, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+aortic+constriction+leads+to+accelerated+heart+failure+in+mice+lacking+PPAR-gamma+coactivator+1alpha%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+U.+S.+A%22%5BJournal%5D)">Transverse aortic constriction leads to accelerated heart failure in mice lacking PPAR-gamma coactivator 1alpha.</a> Proceedings of the National Academy of Science U. S. A. 103 (26), 10086-10091 (2006).</li>
<li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice+for+Induction+of+Left+Ventricular+Hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiment%22%5BJournal%5D)">Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy.</a> Journal of Visualized Experiment. (127), e56231(2017).</li>
<li>Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K., Chow, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiment%22%5BJournal%5D)">Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> Journal of Visualized Experiment. (121), e55293(2017).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Science. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>Koide, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Premorbid+determinants+of+left+ventricular+dysfunction+in+a+novel+model+of+gradually+induced+pressure+overload+in+the+adult+canine%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Premorbid determinants of left ventricular dysfunction in a novel model of gradually induced pressure overload in the adult canine.</a> Circulation. 95 (6), 1601-1610 (1997).</li>
<li>Rodrigues, P. G., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reverse+remodeling%3A+how+far+can+we+rewind%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Myocardial reverse remodeling: how far can we rewind.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 310 (11), 1402-1422 (2016).</li>
<li>Weidemann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+myocardial+fibrosis+in+patients+with+symptomatic+severe+aortic+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Impact of myocardial fibrosis in patients with symptomatic severe aortic stenosis.</a> Circulation. 120 (7), 577-584 (2009).</li>
<li>Bing, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+and+Impact+of+Myocardial+Fibrosis+in+Aortic+Stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Imaging and Impact of Myocardial Fibrosis in Aortic Stenosis.</a> JACC Cardiovascular Imaging. 12 (2), 283-296 (2019).</li>
<li>Conceicao, G., Heinonen, I., Lourenco, A. P., Duncker, D. J., Falcao-Pires, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Netherlands+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Animal models of heart failure with preserved ejection fraction.</a> Netherlands Heart Journal. 24 (4), 275-286 (2016).</li>
<li>Weinheimer, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Load-Dependent+Changes+in+Left+Ventricular+Structure+and+Function+in+a+Pathophysiologically+Relevant+Murine+Model+of+Reversible+Heart+Failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Load-Dependent Changes in Left Ventricular Structure and Function in a Pathophysiologically Relevant Murine Model of Reversible Heart Failure.</a> Circulation Heart Failure. 11 (5), 004351(2018).</li>
<li>Bjornstad, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+reverse+cardiac+remodelling+following+banding-debanding+of+the+ascending+aorta%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">A mouse model of reverse cardiac remodelling following banding-debanding of the ascending aorta.</a> Acta Physiologica (Oxford). 205 (1), 92-102 (2012).</li>
<li>Yarbrough, W. M., Mukherjee, R., Ikonomidis, J. S., Zile, M. R., Spinale, F. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+remodeling+with+aortic+stenosis+and+after+aortic+valve+replacement%3A+mechanisms+and+future+prognostic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Myocardial remodeling with aortic stenosis and after aortic valve replacement: mechanisms and future prognostic implications.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 143 (3), 656-664 (2012).</li>
<li>deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiment%22%5BJournal%5D)">Transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiment. (38), 1729(2010).</li>
<li>Hamdani, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+titin+hypophosphorylation+importantly+contributes+to+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction+in+a+rat+metabolic+risk+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Myocardial titin hypophosphorylation importantly contributes to heart failure with preserved ejection fraction in a rat metabolic risk model.</a> Circulation: Heart Failure. 6 (6), 1239-1249 (2013).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Cardiac+Morphological+and+Functional+Changes+in+Mouse+Model+of+Transverse+Aortic+Constriction+by+Echocardiographic+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiment%22%5BJournal%5D)">Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging.</a> Journal of Visualized Experiment. (112), e54101(2016).</li>
<li>Lygate, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+high+resolution+3D-MRI+after+aortic+banding+in+mice%3A+band+internalization+is+a+source+of+variability+in+the+hypertrophic+response%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Research+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Serial high resolution 3D-MRI after aortic banding in mice: band internalization is a source of variability in the hypertrophic response.</a> Basic Research in Cardiology. 101 (1), 8-16 (2006).</li>
<li>Platt, M. J., Huber, J. S., Romanova, N., Brunt, K. R., Simpson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+Mapping+of+Experimental+Heart+Failure%3A+Left+and+Right+Ventricular+Remodeling+in+Transverse+Aortic+Constriction+Is+Temporally%2C+Kinetically+and+Structurally+Distinct%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological Mapping of Experimental Heart Failure: Left and Right Ventricular Remodeling in Transverse Aortic Constriction Is Temporally, Kinetically and Structurally Distinct.</a> Frontiers in Physiology. 9, 472(2018).</li>
<li>Garcia-Menendez, L., Karamanlidis, G., Kolwicz, S., Tian, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrain+specific+response+to+cardiac+pressure+overload+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulation+Physiology%22%5BJournal%5D)">Substrain specific response to cardiac pressure overload in C57BL/6 mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 305 (3), 397-402 (2013).</li>
<li>Melleby, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+high+precision+aortic+constriction+that+allows+for+generation+of+specific+cardiac+phenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).</li>
<li>Li, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+age+on+peripheral+vascular+response+to+transverse+aortic+banding+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Gerontology.+Series+A%2C+Biological+Sciences+and+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effect of age on peripheral vascular response to transverse aortic banding in mice.</a> The Journal of Gerontology. Series A, Biological Sciences and Medical Sciences. 58 (10), 895-899 (2003).</li>
<li>Ruppert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reverse+remodeling+after+pressure+unloading+is+associated+with+maintained+cardiac+mechanoenergetics+in+a+rat+model+of+left+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulation+Physiology%22%5BJournal%5D)">Myocardial reverse remodeling after pressure unloading is associated with maintained cardiac mechanoenergetics in a rat model of left ventricular hypertrophy.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 311 (3), 592-603 (2016).</li>
<li>Treibel, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reverse+Myocardial+Remodeling+Following+Valve+Replacement+in+Patients+With+Aortic+Stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Reverse Myocardial Remodeling Following Valve Replacement in Patients With Aortic Stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 860-871 (2018).</li>
<li>Dadson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular%2C+structural+and+functional+cardiac+remodelling+following+pressure+overload+and+unloading%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Cellular, structural and functional cardiac remodelling following pressure overload and unloading.</a> International Journal of Cardiology. 216, 32-42 (2016).</li>
<li>Krayenbuehl, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+myocardial+structure+in+aortic+valve+disease+before%2C+intermediate%2C+and+late+after+aortic+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Left ventricular myocardial structure in aortic valve disease before, intermediate, and late after aortic valve replacement.</a> Circulation. 79 (4), 744-755 (1989).</li>
<li>McCann, G. P., Singh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+Reverse+Remodeling+After+Aortic+Valve+Replacement+for+Aortic+Stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Revisiting Reverse Remodeling After Aortic Valve Replacement for Aortic Stenosis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 71 (8), 872-874 (2018).</li>
<li>Miranda-Silva, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+biventricular+alterations+in+myocardial+%28reverse%29+remodelling+in+aortic+banding-induced+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload.</a> Science Reports. 9 (1), 2956(2019).</li>
</ol>

למחברים אין ניגוד אינטרסים.

המודל המוצע בזאת מחקה את התהליך של שיפוץ LV ו- RR לאחר פסים ו debanding שלאבי העורקים, בהתאמה. לכן, הוא מייצג מודל ניסיוני מעולה כדי לקדם את הידע שלנו על המנגנונים המולקולריים המעורבים שיפוץ LV שלילי כדי לבדוק אסטרטגיות טיפוליות חדשניות מסוגל לגרום התאוששות שריר הלב של חולים אלה. פרוטוקול זה מפרט כיצד ליצור מודל של חיית מכרסמים של פסים אבי העורקים ו debanding עם טכניקה כירורגית זעיר פולשנית ושמרנית מאוד כדי להפחית את הטראומה הכירורגית.
הצעד הקריטי ביותר של הפרוטוקול קשור למידת התוקפנות הכירורג...

ההתכווצות של אב העורקים רוחבי או עולה בעכבר הוא מודל ניסיוני בשימוש נרחב עבור היפרטרופיה לב הנגרמת על ידי עומס יתר, תפקוד דיאסטולי וסיסטולי ואי ספיקת לב1,2,3,4. התכווצות העורקים מובילה בתחילה היפרטרופיה קונצנטרית (LV) של החדר השמאלי לפיצוי כדי לנרמל את לחץ הקיר1. עם זאת, בנסיבות מסוימות, כגון עומס לב ממושך, היפרטרופיה זו אינה מספיקה כדי להפחית את הלחץ על הקיר, מה שמפעיל תפקוד דיאסטולי וסיסטולי (היפרטרופיה פתולוגית)5. במקביל, שינויים במטריצה חוץ-תאית (ECM) מובילים לתצהיר הקולגן ולהצלבה בתהליך המכונה פיברוזיס, אשר ניתן לחלקו לפיברוזיס חלופי ופיברוזיס תגובתי. פיברוזיס הוא, ברוב המקרים, בלתי הפיך ומתפשר התאוששות שריר הלב לאחר הקלה עומס יתר6,7. עם זאת, מחקרי דימות תהודה מגנטית לב לאחרונה גילו כי פיברוזיס תגובתי הוא מסוגל לסגת בטווח הארוך8. בסך הכל, פיברוזיס, היפרטרופיה ותפקוד לקוי של הלב הם חלק מתהליך המכונה שיפוץ שריר הלב שמתקדם במהירות לכיוון אי ספיקת לב (HF).
הבנת התכונות של שיפוץ שריר הלב הפכה למטרה מרכזית להגבלה או היפוך ההתקדמות שלה, האחרון המכונה שיפוץ הפוך (RR). המונח RR כולל כל שינוי שריר הלב הפוך באופן כרוני על ידי התערבות נתונה, טיפול תרופתי כזה (למשל, תרופות נגד יתר לחץ פנים), ניתוח שסתום (למשל, היצרות אבי העורקים) או מכשירי סיוע חדריים (למשל, HF כרוני). עם זאת, RR הוא לעתים קרובות לא שלם בשל היפרטרופיה השוררת או תפקוד סיסטולי / דיאסטולי. לכן, ההבהרה של מנגנוני RR הבסיסית ואסטרטגיות טיפוליות חדשניות עדיין חסרים, וזה בעיקר בשל חוסר האפשרות לגשת וללמוד רקמת שריר הלב האנושי במהלך RR ברוב החולים האלה.
כדי להתגבר על מגבלה זו, מודלים מכרסמים מילאו תפקיד משמעותי בקידום ההבנה שלנו של מסלולי האיתות המעורבים בהתקדמות HF. באופן ספציפי, ניתוק אבי העורקים של עכברים עם התכווצות אבי העורקים מייצג מודל שימושי ללמוד את המנגנונים המולקולריים שבבסיס שיפוץ LV שלילי9 ו RR10,11 כפי שהוא מאפשר איסוף של דגימות שריר הלב בנקודות זמן שונות בשני שלבים אלה. יתר על כן, הוא מספק הגדרה ניסיונית מצוינת לבחון מטרות חדשניות פוטנציאליות שיכולות לקדם / להאיץ RR. לדוגמה, בהקשר היצרות אבי העורקים, מודל זה עשוי לספק מידע על המנגנונים המולקולריים המעורבים במגוון העצום של התגובה שריר הלב שבבסיס השלמות (in) של RR6,12, כמו גם, העיתוי האופטימלי להחלפת שסתום, המייצג חסרון גדול של הידע הנוכחי. ואכן, העיתוי האופטימלי להתערבות זו הוא נושא לדיון, בעיקר משום שהוא מוגדר על סמך גודלם של שיפועים בגור העורקים. מספר מחקרים תומכים כי נקודת זמן זו עשויה להיות מאוחר מדי עבור התאוששות שריר הלב כמו פיברוזיס ותפקוד דיאסטולי הם לעתים קרובות כברנוכחים 12.
למיטב ידיעתנו, זהו המודל החייתי היחיד כי מסכם את התהליך של שיפוץ שריר הלב והן RR המתרחשים בתנאים כגון היצרות אבי העורקים או יתר לחץ דם לפני ואחרי החלפת שסתום או תחילתה של תרופות נגד יתר לחץ דם, בהתאמה.
בניסיון להתמודד עם האתגרים שסוכמו לעיל, אנו מתארים מודל חיה כירורגי שניתן ליישם הן בעכברים והן בחולדות, תוך התייחסות להבדלים בין שני מינים אלה. אנו מתארים את הצעדים והפרטים העיקריים הכרוכים בביצוע ניתוחים אלה. לבסוף, אנו מדווחים על השינויים המשמעותיים ביותר המתרחשים ב- LV מיד לפני ולאורך RR.

<table><tbody><tr><td>ספיגה ספירס</td><td>FST</td><td>18105-03</td><td>לספיגת נוזלים במהלך הניתוח</td></tr><tr><td>להבים</td><td>FST</td><td>10011-00</td><td>לביצוע חתך העור</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Buprelieve</td><td></td><td>תרופה לשיכוך כאבים</td></tr><tr><td>Catutery</td><td>F.S.T</td><td>18010-00</td><td>למניעת exsanguination</td></tr><tr><td>טיפים לקטגוריה</td><td>F.S.T</td><td>18010-01</td><td>למניעה exsanguination</td></tr><tr><td>צמר גפן</td><td>ג'ונסון</td><td>לספיגת נוזלים</td><td></td> במהלך הניתוח</tr><tr><td>קרם אפילטורי</td><td>Veet</td><td></td><td>להסרת החיה</td></tr><tr><td>כיסוי שולחן חד פעמי לחדר ניתוח</td><td>MEDKINE</td><td>DYND4030SB</td><td>לכיסוי אזור הניתוח</td></tr><tr><td>בדיקת אקו</td><td>סימנס</td><td>סקויה 15L8W</td><td>רכישת אות אולטרסאונד</td></tr><tr><td>אקו לב</td><td>Siemens</td><td>Acuson Sequoia C512</td><td>רכישת אותות אולטרסאונד</td></tr><tr><td>מוניטור CO2 גאות ושפל</td><td>קנט סיינטיפיק</td><td>CapnoStat</td><td>לבקרת רוויית גז תפוגה</td></tr><tr><td>מלקחיים/פינצטה</td><td>FST</td><td>11255-20</td><td>לניתוח הרקמות ואבי העורקים</td></tr><tr><td>מלקח/פינצטה</td><td>F.S.T</td><td>11272-30</td><td>לניתוח הרקמות</td></tr><tr><td>ומלקחיים/פינצטה של אבי העורקים</td><td>FST</td><td>11151-10</td><td>לניתוח הרקמות ואבי העורקים</td></tr><tr><td>מלקחיים/פינצטה</td><td>FST</td><td>11152-10</td><td>לניתוח הרקמות ומערכת הגזים של אבי העורקים</td></tr><tr><td></td><td>פנלון סיגמא דלתא</td><td></td><td>להרדמה והנשמה מכנית</td></tr><tr><td>המוסטטים</td><td>FST</td><td>13010-12</td><td>להחזיק את התפר לפני הידוק אבי העורקים</td></tr><tr><td>המוסטטים</td><td>FST</td><td>13011-12</td><td>כדי להחזיק את התפר לפני הידוק אבי העורקים</td></tr><tr><td>עזרי קשירת</td><td></td> FST <td>18062-12</td><td>כדי למקם תפר סביב אבי העורקים</td></tr><tr><td>מפסק מגנטי</td><td>FST</td><td>18200-20</td><td>כדי לעזור לשמור על החיה במצב תקין</td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>FST</td><td>12503-15</td><td>לתפירת החיה</td></tr><tr><td>מחט 26G</td><td>B-BRAUN</td><td></td> 4665457 <td>לשמש כעובש בקוטר התכווצות אבי העורקים</td></tr><tr><td>נוזל</td><td></td> אוויר <td>חמצן</td><td>להרדמה והנשמה מכנית</td></tr><tr><td>תפר פוליפרופילן</td><td>Vycril</td><td>W8304/W8597</td><td>לתפירת החיה ולבצע את תמיסת ההיצרות</td></tr><tr><td>פובידון-יוד</td><td>Betadine&reg; </td><td></td><td>Skin חיטוי</td></tr><tr><td>PowerLab</td><td>מכשירי Millar</td><td>ML880 PowerLab 16/30</td><td>PV לולאה Signal Aquisition</td></tr><tr><td>דופק אוקסימטר</td><td>קנט Scientific</td><td>MouseStat</td><td>לשליטה בקצב הלב ורוויית הדם</td></tr><tr><td>תוכנת PVAN</td><td>Millar Instruments</td><td></td><td>לניתוח הנתונים המודינמיים</td></tr><tr><td>קתטר לולאת PV</td><td>מכשירי Millar</td><td>SPR-1035. 1.4 F</td><td>PV לולאה מפסק אות אקוויזיציה</td></tr><tr><td></td><td>FST</td><td>17000-01</td><td>כדי לספק סקירה טובה יותר של ידית אבי העורקים</td></tr><tr><td>סקלפט</td><td>FST</td><td>10003-12</td><td>לביצוע חתך העור</td></tr><tr><td>מספריים</td><td>FST</td><td>15070-08</td><td>לחיתוך התפר בניתוח רצועות</td></tr><tr><td>מספריים</td><td>FST</td><td>14084-09</td><td>כדי לחתוך חומר אחר במהלך הניתוח למשל תפר, papper</td></tr><tr><td>Sevoflurane</td><td>Baxter</td><td>533-CA2L9117</td><td></td></tr><tr><td>מודול בקרת טמפרטורה</td><td>Kent Scientific</td><td>RightTemp</td><td>לשליטה בטמפרטורת הגוף של בעלי חיים</td></tr><tr><td>מאוורר</td><td>Kent Scientific</td><td>PhysioSuite</td><td>לאוורור אמבט המים של בעלי החיים</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Scientific&Trade;</td><td>TSGP02</td><td>כדי לשמור על טמפרטורת מים נאותה לחימום לולאת ה-PV</td></tr></tbody></table>

לימוד שיפוץ הפוך חדרי שמאלי על ידי ניתוק האבניים במכרסמים

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

כדי להבין טוב יותר את החדר השמאלי (LV) שיפוץ הפוך (RR), אנו מתארים מודל מכרסמים שבו, לאחר שיפוץ LV הנגרמת על ידי תחבושת, עכברים עוברים RR עם הסרת התכווצות האב העורקים. במאמר זה, אנו מתארים הליך שלב אחר שלב לביצוע ניתוק אבי העורקים כירורגית זעיר פולשנית בעכברים. אקו-קרדיוגרפיה שימשה לאחר מכן כדי להעריך את מידת היפרטרופיה לב ותפקוד לקוי במהלך שיפוץ LV ו RR ולקבוע את התזמון הטוב ביותר עבור debanding אבי העורקים. בסוף הפרוטוקול נערכה הערכה המודינמית סופנית של תפקוד הלב, ונאספו דגימות למחקרים היסטולוגיים. הראינו כי debanding קשורה שיעורי ההישרדות כירורגית של 70-80%. יתר על כן, שבועיים לאחר debanding, הפחתה משמעותית של לאחר העומס בחדר מפעילה את הרגרסיה של היפרטרופיה חדרית (~ 20%) ופיברוזיס (~ 26%), התאוששות של תפקוד דיאסטולי כפי שהוערך על ידי נורמליזציה של מילוי חדרי שמאל ולחצים דיאסטוליים קצה (E / e ' ו LVEDP). ניתוק באבי העורקים הוא מודל ניסיוני שימושי לחקר LV RR במכרסמים. היקף ההתאוששות שריר הלב משתנה בין הנבדקים, ולכן, מחקה את המגוון של RR המתרחשת בהקשר הקליני, כגון החלפת שסתום אבי העורקים. אנו מסיקים כי מודל פסים /debanding אב העורקים מייצג כלי רב ערך כדי לפענח תובנות חדשניות לתוך המנגנונים של RR, כלומר רגרסיה של היפרטרופיה לב ואת ההתאוששות של תפקוד דיאסטולי.

הישרדות לאחר הניתוח והישרדות מאוחרת ההישרדות perioperative של הליך רצועה הוא 80% ואת התמותה במהלך החודש הראשון הוא בדרך כלל &lt;20%. כאמור, ההצלחה של ניתוח ההשבתה תלויה מאוד עד כמה פולשני היה הניתוח הקודם. לאחר עקומת למידה, שיעור התמותה במהלך הליכי ההשבתה הוא סביב 25%. עבור תמותה זו חשבונות בעיקר מקרי מוות במהלך הליך הניתוח, כולל אבי העורקים או קרע אטריום שמאל (בחולדות, שיעור ההישרדות גבוה יותר בשני הניתוחים).
רצועות אבי העורקים ושיפוץ שריר הלב ההצלחה של...

כאן אנו מתארים פרוטוקול צעד אחר צעד של פירוק אבי העורקים הכירורגי במודל העכברים המבוסס היטב של התכווצות אבי העורקים. הליך זה לא רק מאפשר ללמוד את המנגנונים שבבסיס שיפוץ הפוך החדר השמאלי ורגרסיה של היפרטרופיה, אלא גם כדי לבדוק אפשרויות טיפוליות חדשניות שעשויות להאיץ את ההתאוששות שריר הלב.

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

ניתוק אבי העורקים הוא מודל ניסיוני שימושי לחקר שיפוץ הפוך שריר הלב במכרסמים ולתובנות חדשניות מתענגות על מנגנוני רגרסיה קרדיומיוציטים והתאוששות תפקודית iso lic. מתכת זו מקלה על האבולוציה של ביקורת הפוך דוגמנות VIVO ואוסף של דגימות ביולוגיות למחקרים במבחנה מולקולרית בנקודות זמן שונות במהלך התקדמות המחלה. טכניקה זו מחקה את ההתקדמות של שיפוץ שריר הלב ושיפוץ הפוך ומאפשר לחקור את המנגנונים של התאוששות שריר הלב שלם.פרוטוקול זה מספק תובנות על המנגנונים ועל הקו השלם והבלתי שלם של שיפוץ היפוך שריר הלב בפתולוגיות הקשורות לעומס לחץ כרוני כגון יומרת עיניים או היצרות אבי העורקים. חבר את צינור האורוטרצ'יאלי לאוורור כדי ליזום את ההנשמה המכנית ולהתאים את מאוורר ההנשמה לתדר של 160 נשימות לדקה ונפח גאות ושפל של 10 מיליליטר לקילוגרם. לפני תחילת הליך הלהקה, לאשר חוסר תגובה רפלקס כאב בעכבר שש שחור C57 בן שישה עד שמונה שבועות, לגלח ולהחיל קרם depilatory מקו הצוואר לרמת החזה האמצעי של העכבר ולהחיל משחה על העיניים של החיה.מניחים בדיקה רקטלית ואת oximeter לניטור חמצון דם טמפרטורה וקצב הלב. מניחים את העכבר דקוביטוס לרוחב ימין על כרית חימום והקלטת הגפיים למערכת retraction קיבוע מגנטי כדי לשמור על החיה במצב הנכון במהלך ההליך. לאחר מכן, לחטא את החזה עם 70% אלכוהול רצופים povidone-יוד פתרון קרצוף אז ולפתוח את שריר העור ואת הצלעות על מנת לבצע את הלהקה אבי העורקים.בסוף ההליך להחיל תמיסת povidone-יוד לאתר תפר העור ולנהל משככי כאבים פעמיים ביום במשך יומיים עד שלושה ימים, ולאחר מכן להזריק לאה תוך תמיסת מלח סטרילית כדי למנוע התייבשות במקרים של דימום משמעותי במהלך הניתוח ומניחים את החיה באינקובטור עם ניטור עד החלמה מלאה. שבעה שבועות לאחר ניתוח הפסים, מנתחים בעדינות את הרקמות, הידבקות ופיברוזיס סביב העורקים במחצית מבעלי החיים המפוספסים עד שההתכווצות הופכת גלויה. לנתח בזהירות את העורקים ולהפריד את התפר מן הכלי, ולאחר מכן להשתמש במספריים כדי לחתוך את התפר.שים לב שזה חסימה ממושכת של מי אינדיגו גרזן במהלך מחייב או שטני עלול להוביל בצקת ריאות, הפעלה מופרזת של מסלולים דלקתיים. סגור את דופן החזה עם תפר פוליפרופילן פשוט מופרע או מתמשך שישה ישנים באמצעות המספר המינימלי של תפרים אפשריים ולסגור את העור עם תפר פוליפרופילן משי שישה O בתבנית תפר מתמשך, ולאחר מכן לבצע את הטיפול לאחר הניתוח כפי שהוכח. כל שבועיים עד שלושה שבועות לאחר הניתוח להסיר את הפרווה מקו הצוואר אל רמת החזה באמצע כפי שהוכח ומניחים את החיה על כרית חימום במצב סופי מקום א.ק.ג אלקטרודות על העור החשוף ולאשר את נוכחותו של עקבות אק"ג טוב וקצב לב בין 300 ל 350 פעימות לדקה.לפקח על הטמפרטורה ולהחיל ג'ל הד על אזור החזה. מניחים את העכברים בנסיכות הגב מעט פנה ימינה ולהתחיל את echocardiograph באמצעות ההגדרות המתאימות. לאחר מכן, למקם בדיקה אולטרסאונד על בית החזה ולהעריך את שיפוע הלחץ על פני העורקים.הקלט תמונות מונחות דו מימדיות של העורקים המראות את נוכחותו או היעדרו של התכווצות העורקים העולה כדי לדמיין באופן אנטומי את היעילות של הפסים וההתפרקות. כדי להעריך את היפרטרופיה, למקם את החללית על ציר קצר החדר השמאלי ברמת שריר הפפילרי ולחץ על כפתור מעקב מצב כדי לדמיין את הקיר השמאלי החדרני, קוטר החדר השמאלי ואת הקיר האחורי החדר השמאלי diacetyl ו systole. לאחר מכן להעריך את הפונקציה הסיסטולית ולחשב את שבר הפליטה וקיצור שבר על פי פרוטוקולים סטנדרטיים.כדי להעריך את הפונקציה הדיאסטולית, לקבוע את שיאו של גל הפוסט דופלר של מהירות הזרימה המיטרלית המוקדמת והמיטרלית באמצעות תצוגה לא טיפוסית של ארבעה תאים ממש מעל העלונים המיטרליים ולתעד את החלקה הדו-צדדית האפסית האפסית המוקדמת של שריר הלב ואת המהירויות הסיסטוליות הגבוהות באמצעות הדמיית דופלר של רקמת פוסט והנוף התאי של ארבעת התאים. ההצלחה של התכווצות אב העורקים ניתן לאמת על ידי החדר השמאלי מוגבר ולחץ סיסטולי. ועל ידי מהירויות זרימה של פי העורקים דופלר יותר מ 2.5 מטרים לשנייה.בהשוואה לבעלי חיים המופעלים על ידי שאם, כיפוף הנגרם היפרטרופיה בחדר השמאלי מודגם על ידי מסה מוגברת בחדר השמאלי ותפקוד דיאסטולי לקוי כפי שמעידים לחצי מילוי גבוהים יותר ולחץ דיאסטולי שמאלי. מבחינה היסטולוגית, שבעה שבועות של רצועות באבי העורקים גורם היפרטרופיה ופיברוזיס קרדיומיוציטים משמעותיים. ב נתון שלי debanding, כמו הסרה מוצלחת של היצרות אבי העורקים ניתן לאמת על ידי מהירויות הד דופלר.הפחתה כוללת מקדמת ירידה משמעותית בעומס שלאחר מכן והיפרטרופיית החדר השמאלית המוערכת על ידי מסת LV. יתר על כן, נורמליזציה של הפונקציה הדיאסטולית נצפתה גם. כאשר אתה משחק את זה בזהירות הימנעות קנוניה אתית ממושכת על מנת להבטיח כי חמצון הדם נשאר מעל 90%מודל מינימלי זה מאפשר לנו ללמוד שיפוץ הלב שלי ושיפוץ הפוך בנקודות זמן שונות של התקדמות המחלה ואפילו להעיר את המסלולים dysregulated ביותר בכל נקודת זמן.הליך זה מאפשר להעריך את הפוטנציאל הטיפולי של תרופות מבטיחות, כמו גם ללמוד את ההשפעה של מספר תחלואה משותפת remolding שריר הלב לאחור והתאוששות.

studying-left-ventricular-reverse-remodeling-aortic-debanding

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מדגים את הטכניקה של פירוק אבי העורקים, אשר יכול להוביל לשיפוץ לאחור כדי להגביל את ההתקדמות לקראת אי ספיקת לב במודל מורין. לאחר הנטישה, הפחתה משמעותית של עומס לאחר החדר מעוררת רגרסיה של היפרטרופיה חדרית ופיברוזיס, מה שגורם להתאוששות בתפקוד הלב.

Surgical Aortic Debanding: הליך לחקר שיפוץ לאחור של חדר שמאל במודל Murine של התכווצות אבי העורקים

אנו מתארים הליך בשלבים ליצירת עומס יתר לחץ והיפרטרופיה של חדר שמאלי בחולדות Wistar ידי התכווצות של אב העורקים עולים באמצעות קליפ מתכתי קטן. דגם זה נעשה שימוש נרחב ללימוד שינויי שיפוץ במהלך היפרטרופיה לבבית ולזיהוי והערכה של אסטרטגיות לנסיגה של שינויים כאלה.

עולה אבי העורקים תעוקה בחולדות ליצירת עומס יתר לחץ לב היפרטרופיה הדגם

מתואר מודל חולדה של התכווצות אבי העורקים הבטני הגורם להיפרטרופיה של הלב ועיצוב מחדש. שיטה יעילה, ניתנת לשחזור וזעיר פולשנית משמשת כדי לספק פלטפורמה פשוטה אך שימושית למחקר בהיפרטרופיה ותפקוד לקוי של שריר הלב.

מודל של שיפוץ לב באמצעות התכווצות של אבי העורקים בבטן בחולדות

המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר צעד אחר צעד הטכניקה של פולשנית רוחבי אבי העורקים הכיווץ (טק) בעכברים. על ידי חיסול של צנרור ואוורור אשר הכרחיות עבור הליך רגיל בשימוש נפוץ, טק פולשנית ומפשט את תהליך פעיל ומפחית את הלחץ על החיה.

הטכניקה של פולשנית התרחבות אבי העורקים רוחבי בעכברים עבור אינדוקציה של גדילת

כאן אנו מתארים ומשווים שתי עמדות לקבלת השקפה של ארבעה קאמריים בעכברים. תנוחות אלה מאפשרות את כימות התפקוד הימני של הפונקציה, לספק תוצאות דומות, ניתן להשתמש לסירוגין.

המדידה האקוקרדיוגרפית של פרמטרים של הימני החדרית בעכבר

אנו מתארים את היצירה של מודל חולדה של עומס יתר על הלחץ המושרה שיפוץ מתון ותפקוד סיסטולי מוקדם שבו אותות התמרה מסלולים מעורב בייזום של תהליך שיפוץ מופעלים. מודל בעל חיים זה יסייע בזיהוי מטרות מולקולריות להחלת אסטרטגיות טיפול מוקדמות נגד שיפוצים עבור אי ספיקת לב.

מודל חולדה של עומס יתר של לחץ המושרה שיפוץ מתון תפקוד סיסטולית לעומת אי ספיקת לב סיסטולית.

מודל מכרסם של הלב השמאלי נפח העומס של צניפי אי-ספיקת הוא דיווח. צניפי אי-ספיקת של חומרת מבוקרת נגרמת על ידי קידום מחט של ממדים מוגדרים לתוך העלון הקדמי של שסתום צניפי, בלב פועם, עם הדרכה אולטרסאונד.

תמונה מונחית Transapical צניפי העלון נקב מודל של נפח מבוקרת עומס יתר מ צניפי אי-ספיקת בעכברוש

הפרוטוקול הנוכחי מתאר הליך כירורגי להסרת פסים עולים-אבי העורקים במודל של חולדה של יתר לחץ דם ריאתי עקב מחלת לב שמאלית. טכניקה זו חוקרת מנגנונים אנדוגניים של שיפוץ הפוך במחזור הדם הריאתי ובלב הימני, ובכך מודיעה על אסטרטגיות להיפוך יתר לחץ דם ריאתי ו/או תפקוד לקוי של החדר הימני.

מודל של שיפוץ כלי דם הפוכים ביתר לחץ דם ריאתי עקב מחלת לב שמאלית על ידי התייבשות אבי העורקים בחולדות

פרוטוקול זה מציג מדריך מעשי על הניתוח ליצירת רגורגיטציה של אבי העורקים (AR) בעכבר. הערכת עכבר ה-AR על ידי אקו לב ומדידה המודינמית פולשנית מסכמת את המאפיינים הרלוונטיים מבחינה קלינית של היפרטרופיה אקסצנטרית הנגרמת על ידי עומס נפח, מה שמרמז על יישומו המבטיח בחקר היפרטרופיה לבבית.

עומס יתר של נפח הלב המושרה בניתוח על ידי רגורגיטציה של אבי העורקים בעכבר

פרוטוקול זה מתאר הליך כירורגי זעיר פולשני לפסי אבי העורקים העולה בחזירים.

מודל זעיר פולשני של היצרות אבי העורקים בחזירים

אי ספיקת לב ימנית (RHF) מאופיינת בהתרחבות לב בצד ימין והיפרטרופיה, מה שמוביל לתקלה בחדרים ובפרוזדורים. מחלות לב-ריאה הקשורות ל-RHF מלוות בסיכון מוגבר להפרעות קצב לב. מאמר זה מתאר מודל סטנדרטי של RHF המושרה על ידי רצועות עורק ריאתי הקשור להפרעות קצב חדריות ופרוזדוריות משופרות.

מודל חולדה של עיצוב לב ימני והפרעות קצב באמצעות רצועות עורק ריאתי

חקור מנגנוני שיפוץ הפוך של שריר הלב בעכברים באמצעות ניתוח שחרור עורקי. פרוטוקול זה מאפשר הערכת אפשרויות טיפוליות חדשות לשיקום לבבי ולימוד תהליכי החלמה מחלתיים.

לימוד שיפוץ הפוך חדרי שמאלי על ידי ניתוק האבניים במכרסמים

גלה סרטונים נוספים