Name: מודל של החמוס של דלקת-מארוי מאוחר לטווח קדם-הסכמי פגיעה במוח (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: למדו מודל חדשני לפגיעה מוחית בחמוסים בני 17 יום המדמה תנאים של פגים בסיכון. השיטה משלבת חנק, היפרוקסיה ודלקת מוגברת לחקירת מנגנוני פגיעה עצבית התפתחותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

פיתוח המודל היה ממומן על ידי ביל ומלינדה גייטס, כמו גם על ידי NIH גרנט 5R21NS093154-02.

<ol><li>Martin, J. A., Hamilton, B. E., Osterman, M. J. K., Driscoll, A. K., Drake, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Births%3A+Final+Data+for+2017%5BTitle%5D)+AND+%22National+Vital+Statistics+Report%22%5BJournal%5D)">Births: Final Data for 2017.</a> National Vital Statistics Report. 67 (8), 1-49 (2018).</li>
<li>Vanhaesebrouck, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+EPIBEL+study%3A+outcomes+to+discharge+from+hospital+for+extremely+preterm+infants+in+Belgium%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">The EPIBEL study: outcomes to discharge from hospital for extremely preterm infants in Belgium.</a> Pediatrics. 114 (3), 663-675 (2004).</li>
<li>Raju, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-Term+Healthcare+Outcomes+of+Preterm+Birth%3A+An+Executive+Summary+of+a+Conference+Sponsored+by+the+National+Institutes+of+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Long-Term Healthcare Outcomes of Preterm Birth: An Executive Summary of a Conference Sponsored by the National Institutes of Health.</a> Journal of Pediatrics. , (2016).</li>
<li>Raju, T. N. K., Buist, A. S., Blaisdell, C. J., Moxey-Mims, M., Saigal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adults+born+preterm%3A+a+review+of+general+health+and+system-specific+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Paediatrica%22%5BJournal%5D)">Adults born preterm: a review of general health and system-specific outcomes.</a> Acta Paediatrica. 106 (9), 1409-1437 (2017).</li>
<li>Bennet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+inflammation+and+impaired+development+of+the+preterm+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reproductive+Immunology%22%5BJournal%5D)">Chronic inflammation and impaired development of the preterm brain.</a> Journal of Reproductive Immunology. 125, 45-55 (2018).</li>
<li>Reich, B., Hoeber, D., Bendix, I., Felderhoff-Mueser, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxia+and+the+Immature+Brain%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hyperoxia and the Immature Brain.</a> Developmental Neuroscience. 38 (5), 311-330 (2016).</li>
<li>Galinsky, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+interactions+between+hypoxia-ischemia+and+inflammation+in+preterm+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Medicine+%26+Child+Neurology%22%5BJournal%5D)">Complex interactions between hypoxia-ischemia and inflammation in preterm brain injury.</a> Developmental Medicine & Child Neurology. 60 (2), 126-133 (2018).</li>
<li>Empie, K., Rangarajan, V., Juul, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+ferret+a+suitable+species+for+studying+perinatal+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Is the ferret a suitable species for studying perinatal brain injury.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. 45, 2-10 (2015).</li>
<li>Snyder, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+white+matter%2C+toll-like+receptor+expression%2C+and+motor+skills+in+the+neonatal+ferret%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of white matter, toll-like receptor expression, and motor skills in the neonatal ferret.</a> International Journal of Developlemental Neuroscience. , (2018).</li>
<li>Schwerin, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progression+of+histopathological+and+behavioral+abnormalities+following+mild+traumatic+brain+injury+in+the+male+ferret%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Progression of histopathological and behavioral abnormalities following mild traumatic brain injury in the male ferret.</a> Journal of Neuroscience Research. 96 (4), 556-572 (2018).</li>
<li>Rafaels, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+injury+risk+from+primary+blast%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma+and+Acute+Care+Surgery%22%5BJournal%5D)">Brain injury risk from primary blast.</a> Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 73 (4), 895-901 (2012).</li>
<li>Wood, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Ferret+Model+of+Encephalopathy+of+Prematurity%5BTitle%5D)+AND+%22Developlemental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Ferret Model of Encephalopathy of Prematurity.</a> Developlemental Neuroscience. , (2019).</li>
<li>Barnette, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+Brain+Development+in+the+Ferret+via+Magnetic+Resonance+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization of Brain Development in the Ferret via Magnetic Resonance Imaging.</a> Pediatric Research. 66 (1), 80-84 (2009).</li>
<li>Kroenke, C. D., Mills, B. D., Olavarria, J. F., Neil, J. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKroenke%2C+CD+%22Biology+and+Diseases+of+the+Ferret%22">Biology and Diseases of the Ferret</a>. , WIley. (2014).</li>
<li>Eklind, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bacterial+endotoxin+sensitizes+the+immature+brain+to+hypoxic--ischaemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Bacterial endotoxin sensitizes the immature brain to hypoxic--ischaemic injury.</a> European Journal of Neuroscience. 13 (6), 1101-1106 (2001).</li>
<li>Falck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+Systemic+Inflammation+Induces+Inflammatory+Reactions+and+Brain+Apoptosis+in+a+Pathogen-Specific+Manner%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">Neonatal Systemic Inflammation Induces Inflammatory Reactions and Brain Apoptosis in a Pathogen-Specific Manner.</a> Neonatology. 113 (3), 212-220 (2018).</li>
<li>Osredkar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermia+Does+Not+Reverse+Cellular+Responses+Caused+by+Lipopolysaccharide+in+Neonatal+Hypoxic-Ischaemic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Hypothermia Does Not Reverse Cellular Responses Caused by Lipopolysaccharide in Neonatal Hypoxic-Ischaemic Brain Injury.</a> Developmental Neuroscience. 37 (4-5), 390-397 (2015).</li>
<li>Nakata, M., Itou, T., Sakai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+inflammatory+cytokines+expression+in+peripheral+blood+mononuclear+cells+of+the+ferret+%28Mustela+putorius+furo%29+using+real-time+PCR%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Immunology+and+Immunopathology%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of inflammatory cytokines expression in peripheral blood mononuclear cells of the ferret (Mustela putorius furo) using real-time PCR.</a> Veterinary Immunology and Immunopathology. 130 (1-2), 88-91 (2009).</li>
<li>Christensson, M., Garwicz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+postnatal+motor+development+in+ferrets%3A+ontogenetic+and+comparative+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Time course of postnatal motor development in ferrets: ontogenetic and comparative perspectives.</a> Behavioral Brain Research. 158 (2), 231-242 (2005).</li>
<li>Li, Y., Dugyala, S. R., Ptacek, T. S., Gilmore, J. H., Frohlich, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Immune+Activation+Alters+Adult+Behavior%2C+Gut+Microbiome+and+Juvenile+Brain+Oscillations+in+Ferrets%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Maternal Immune Activation Alters Adult Behavior, Gut Microbiome and Juvenile Brain Oscillations in Ferrets.</a> eNeuro. 5 (5), (2018).</li>
<li>Rice, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+immaturity+on+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurolology%22%5BJournal%5D)">The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat.</a> Annals of Neurolology. 9 (2), 131-141 (1981).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

בשל קווי הדמיון הפיזיים וההתפתחותיים בין המוח החמוס למוח האנושי, החמוס משמש יותר ויותר למודל של פגיעה מוחית מבוגרת והתפתחותית. . שמונה,תשע,עשר,11,12 עם זאת, מחקר עד היום מרמז כי המוח החמוס הוא גם עמיד בפני פציעה ראשונית, כמו גם מאוד פלסטיק, עם הנזק התנהגותי הפוחתת לאורך זמן גם במסגרת הפגיעה הפתולוגית נראה10,...

יש צורך מתמשך של מודלים בעלי חיים גדולים המשקפים את הפתופסולוגיה של טרום בגרות ולאחר ההיפוקסיה-איסכמיה שבה התערבויות טיפוליות לתינוקות יכולים להיבדק. ב 2017, 9.93% מתוך 382,726 תינוקות שנולדו בארצות הברית נולדו לטווח, ו 84% של תינוקות אלה נולדו בין 32 ו-36 שבועות של הריון1. בזמן התינוקות מוקדם, החשיפה לזיהום או דלקת היא נפוצה, שם הפעלה החיסונית אימהית בשל פתוגנים נגיפי או חיידקי יכול ליזום העבודה טרום לטווח. Postnatally, תינוקות טרום לטווח נמצאים בסיכון גבוה של מוקדם או מאוחר התפרצות אלח דם2. תינוקות preterm גם לעתים קרובות חווים תקופות של היפוקסיה, לחץ דם, ו עידות בשל מערכת הקרדיוכלתית הילדותית שלהם, מתח חמצן מוגבר באטמוספירה יחסית לאלה מנוסים ברחם, והחשיפות האיגניים. בנוסף, בתינוקות טרום לטווח, הגנות נוגד חמצון הם בלתי בוגרים3 ו-pro-האפוטוטיים גורמים הם באופן טבעי upregulated4. מתח חמצוני ומוות תאים להוביל הפעלה של מערכת החיסון ודלקות ניווניות. גורמים אלה משולבים נחשבים לתרום לפגיעות התפתחותית ופיזיולוגית של המוח, ולגרום או להחריף את האנצפלופתיה הקשורים בתוצאות התפתחותיות עניות בתינוקות טרום לטווח5,6,7.
בשל הדמיון הפיזי וההתפתחותי כי המוח החמוס מניות עם המוח האנושי, החמוס הוא זן אטרקטיבי שבו למודל פגיעה במוח8,9,10,11,12. חמוסים הם גם מועמדים אידיאליים כדי לדגמן את המוח האנושי לטווח הארוך, כפי שהם נולדים lissencephalic ולפתח מוחות באופן שוטף, אשר מספק חלון שבו כדי לחשוף את המוח המתפתח עלבונות כי לחקות את אלה מנוסים על ידי תינוקות נולד לטווח. בלידה, התפתחות המוח החמוס דומה העובר 13 שבוע האדם, עם postnatal יום (P) 17 ערכות נחשב שווה ערך לתינוק ב 32 – 36 שבועות של ההריון13.
הקבוצה שלנו פרסמה לאחרונה מודל של טרום לטווח (< 28 שבועות הריון) פגיעה במוח P10 חמוס על ידי שילוב של רגישות דלקתית עם es chia coli ליפופוליד (lps) עם חשיפה בעקבות היפוקסיה ו עידות12. בפרוטוקול הבא, אנו מתארים כעת מודל טרום לטווח מאוחר ב P17 חמוס, שם הרגישות LPS הוא אחריו בעקבות איסכמיה מוחית דו צדדית, היפוקסיה, ו hyperoxia. התוצאה היא פציעה חמורה יותר בקבוצת משנה של בעלי חיים, ומודלים הדוק יותר את האינטראקציה המורכבת של דלקת ממושכת, איסכמיה, היפוקסיה, ומתח חמצוני מנוסים מספר תינוקות טרום לטווח המפתחים פציעה במוח.

<table><tbody><tr><td>80% חמצן</td><td>Praxair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>9% חמצן</td><td>Praxair</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מגן ספסל סופג</td><td>Kimtech</td><td>7546</td><td></td></tr><tr><td>מסלול מסלול אוטומטי</td><td>Noldus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine קרצוף</td><td></td><td></td><td></td>כירורגי</tr><tr><td>Bupivacaine</td><td>Patterson וטרינרי</td><td>07-888-9382</td><td></td></tr><tr><td>קליפרים בופרנורפין</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>מוצרי מדידה SRA</td><td>ME-CAL-FP-200</td><td>טווח 200 מ"מ, רזולוציה 0.01 מ"מ</td></tr><tr><td>כותנה גזה ספוג</td><td>פישר מדעי</td><td>22028556</td><td></td></tr><tr><td>מעוקל מעוקל עדין המוסטט</td><td>Roboz</td><td>RS-7101</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מעוקלים</td><td>מכשירי דיוק עולמיים</td><td>501215</td><td></td></tr><tr><td>תפר מעוקל קשירת המוסטט</td><td>Roboz</td><td>RS-7111</td><td></td></tr><tr><td>Ethovision תוכנת מעקב</td><td>Noldus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>עין סיכה</td><td>רוגבי</td><td>NDC 0536-1970-72</td><td></td></tr><tr><td>חמוסים (Mustela putorius furo)</td><td>Marshall Biosciences</td><td></td><td>Outbred (ללא זן ספציפי)</td></tr><tr><td>פורמלין</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>SF100-4</td><td>10% (מאגר פוספט/מוסמך)</td></tr><tr><td>קוצץ שיער</td><td>מזרקי אינסולין Conair</td><td>GMT175N</td><td></td></tr><tr><td></td><td>BD</td><td>329461</td><td>0.3 סמ"ק 3 מ"מ 31 גרם</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>פיראמל</td><td>66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>לידוקאין</td><td>פטרסון וטרינרי</td><td>07-808-8202</td><td></td></tr><tr><td>רשימת LPS</td><td>ביולוגית</td><td>LPS Ultrapure #423</td><td></td></tr><tr><td>חיישן חמצן</td><td>BW התראת גז</td><td>GAXT-X-DL-2</td><td></td></tr><tr><td>תא פלסטיק פנטוברביטל</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Tellfresh</td><td>1960</td><td>10 ליטר; 373 x 270 x 135 מ"מ3</td></tr><tr><td>תמיסת מלח, 0.9%</td> <td>Hospira</td><td>RL-4492</td><td></td></tr><tr><td>להב אזמל</td><td>Integra Miltex</td><td>297</td><td></td></tr> ידית <tr><td>אזמל</td><td>World Precision Instruments</td><td>500236</td><td>#3, 13 ס"מ</td></tr><tr><td>תפר סטרילי</td><td>עדין Science Tools</td><td>18020-50</td><td>משי קלוע, 5/0</td></tr><tr><td>מוליך קליפ כירורגי</td><td>Fine Science Tools</td><td>12020-09</td><td></td></tr><tr><td>מסיר קליפס כירורגי</td><td>Fine Science Tools</td><td>12023-00</td><td></td></tr><tr><td>וילונות כירורגיים</td><td>Medline Unidrape</td><td>VET3000</td><td></td></tr><tr><td>כפפות כירורגיות</td><td>Ansell Perry Inc</td><td>5785004</td><td></td></tr><tr><td>Surigical Clips</td><td>Fine Science Tools</td><td>12022-09</td><td></td></tr><tr><td>מדחום (פי הטבעת)</td> <td>YSI</td><td>Precision 4000A</td><td></td></tr><tr><td>מדחום (מים)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>14-648-26</td><td></td></tr><tr><td>סרט טבור</td><td>Grafco</td><td>3031</td><td></td></tr><tr><td>אמבט מים</td> סטרילי <td>Thermo Scientific</td><td>TSCOL19</td><td>19 ליטר</td></tr></tbody></table>

מודל של החמוס של דלקת-מארוי מאוחר לטווח קדם-הסכמי פגיעה במוח

A Ferret Model of Inflammation-sensitized Late Preterm Hypoxic-ischemic Brain Injury

יש צורך מתמשך מודלים רלוונטיים קלינית של זיהום היפואטאטאל, hypoxia-איסכמיה (HI) שבו לבדוק התערבויות טיפוליות לתינוקות עם הרצף הנוירולוגי של טרום בגרות. חמוסים הם מועמדים אידיאליים למידול המוח האנושי הטרום-לטווח, כפי שהם נולדים lissencephalic ולפתח מוחות מוחיים באופן מוחי. בלידה, התפתחות המוח החמוס דומה לעובר האנושי של 13 שבועות, עם postnatal יום (P) 17 ערכות נחשב להיות שווה ערך לתינוק ב 32-36 שבועות הריון. אנו מתארים מודל פציעה ב P17 חמוס, שם הממשל ליפופוליל מלווה באיסכמיה מוחית דו צדדית, היפוקסיה, ו hyperoxia. זה מדמה את האינטראקציה המורכבת של דלקת ממושכת, איסכמיה, היפוקסיה, ומתח חמצוני מנוסים במספר neonates המפתחים פציעה במוח. בעלי חיים פצועים להציג מגוון של חומרת הפציעה ברוטו, עם שינויים מורפולוגיים במוח כולל היצרות של מספר מודורי הקורטיתיים ו sulci הקשורים. בעלי חיים פצועים גם מראים פיתוח רפלקס איטי, מהירות איטית יותר ומשתנה יותר של תנועה במסלול הדוגמנות אוטומטי, והירידה בחיפושי בשדה פתוח. מודל זה מספק פלטפורמה שבה לבחון את הטיפולים לתינוקות עם אנצפלופתיה התינוק הקשורים בדלקת ושלום, מנגנוני המחקר של פציעה המשפיעים על פיתוח קליפת הגוף, ולחקור מסלולים המספקים עמידות חיות לא מושפעות.

של 34 (n = 18 זכרים, n = 16 נקבות) בעלי חיים משישה לוחמים חשופים לעלבון, שמונה בעלי חיים (24%; n = 4 זכרים, n = 4 נקבות) בקבוצה הפצועה מתו בתקופת ההיפוקסיה השנייה (n = 5), במהלך ניהול הטמפרטורה (n = 2), או לילה לאחר העלבון ( בקבוצה הפצועה, תשעה מתוך 26 ניצולים (35%) היתה פציעה מגעילה בלתי נראית. חמשבעליחיים (n = 5 זכרים) היו בעלי פציעה מתונה, וארבע בעלי חיים (n = 2 זכרים, n = 2 נקבות) היתה פגיעה קשה, הוגדרה כעשרות פתולוגיה ברוטו של 2 – 5 ו 6-9, בהתאמה (איור 2א). בעלי חיים שנ...

השיטה מתארת דלקת-רגישות ארוי-איסכמי ופגיעה המוח hyperoxic ב P17 חמוס למודל האינטראקציה המורכבת בין דלקת ממושכת ופגיעה המוח חמצוני מנוסה במספר תינוקות טרום לטווח מאוחר.

There is an ongoing need for clinically relevant models of perinatal infection and hypoxia-ischemia (HI) in which to test therapeutic interventions for ...

פרוטוקול זה הוא משמעותי משום שהוא מציע את המודל הראשון של דלקת רגישה פגיעה מוחית מוקדמת החמוסים שתוצר פגיעה משמעותית ומתמשכת. טכניקה זו כרוכה בעלבונות ממושכים המשלבים רבים מהטריגרים והמנגנונים הביוכימיים שנחשבים לתרום לסוגי הפציעות המוחיות שנראות אצל תינוקות אנושיים מוקדמים. הדגימה של הליך מדידת המוח תהיה קיילי קורי, מדענית מחקר במעבדה שלנו ואוליביה ווייט, סטודנטית לתואר ראשון.שלושים דקות לפני תחילת הניתוח, לנהל שלושה מיליגרם לקילוגרם LPS IP ערכות בקבוצת הפציעה נפח שווה ערך של מלוחים סטריליים של שלושה microliters לגרם כדי לשלוט בבעלי חיים. לפני תחילת ההליך, השתמש קוצץ בעלי חיים קטנים כדי להסיר את כל השיער על אזור הצוואר הגחוני של החמוס בתבנית מלבנית, דואג למנוע פגיעה בעור או יצירת פריחה בחום. לנהל הרדמה מקומית לאזור מגולח ולחטא את העור עם שלוש ספוגיות לסירוגין של יוד povidone ו70 אחוז אתנול.לאחר אישור רמה מתאימה של הרדמה על ידי קמצוץ בוהן, לכסות את החיה עם סטרילי, חד פעמי לחתוך וילונות החושפים את אזור הצוואר. עבור קשירה עורק התרדמה הדו-צדדית, השתמש בלהב אזמל מספר עשר לשימוש יחיד כדי לבצע חתך של 1.5 ס"מ במרכז הצוואר ולהשתמש בהמוסטטים עדין ומטחנים מעוגלים כדי לנתח בבוטות עד העורק הראשי השמאלי. לנתח את העורק החשוף הרחק מהחבילה הנוירו-וסקולרית הקשורה.ולהשתמש בזוג מלקחיים עדין מעוקל לעבור לולאה אורך עשרה סנטימטרים של תפר משי סטרילי 5/0 מתחת לעורק. חותכים את התפר לשניים ולקשור בבטחה את שני אורכי התפר כדי לקשור את העורק, משאיר לפחות שני מילימטרים בין הקשרים. חוצים את העורק הראשי השמאלי בין התפרים, דואגים להשאיר את העצב שלם ולחזור על הניתוח בצד ימין.ליטוש הפיכה העורק הראשי הימני עם עניבת טבור סטרילית אחת 1/8 אינץ '. ולסגור את הפצע עם קליפי עור כירורגיים. לאחר מכן, לאפשר את החיה להתאושש באמבט מים מבוקר טמפרטורה לפחות שלושים דקות עם ניטור לפני היפוקסיה.עבור היפוקסיה רציפה, היפרוקסיה וטיפול היפוקסיה, למקם את בעלי החיים בקבוצת הפציעה בתא אטום בתוך אמבט מים. נטר ברציפות את ריכוז החמצן בתוך התא, כמו גם את הטמפרטורה רקטלי לפחות חיית סנטינל אחת. לשטוף את התא עם חמצן לח תשעה אחוזים ו 91 אחוז חנקן ולשמור על קצב זרימה של שלושה עד חמישה ליטר לדקה, בהתאם לגודל התא.לאחר ריכוז החמצן בתא הגיע תשעה אחוזים, להמשיך את המסירה במשך שלושים דקות. בסוף הטיפול בהיפוקסיה, העבר את אספקת הגז ל-80 אחוז חמצן לח ו-20 אחוז חנקן. לאחר שלושים דקות של היפרוקסיה, פתח את התא כדי לאפשר לו להגיע במהירות רבה יותר לנורמוקסיה, על ידי שיווי משקל עם אוויר החדר, לפני איטום התא ושטיפת עם תשעה אחוזים חמצן לח שוב.ניטור רציף של כל בעלי החיים במהלך הסיבוב השני של היפוקסיה, לשים לב לכל בעלי החיים המציגים bradypnea. לאחר ריכוז החמצן בתא הגיע תשעה אחוזים, להמשיך את הטיפול היפוקסיה במשך שלושים דקות. בסוף הטיפול, השתמשו במקלות מעוגלים כדי לזהות ולשחרר את הקלטת הטבורה מהעורק הראשי הימני.לתבודד את הפצע עם קליפים עור כירורגיים. ואז להחזיר את כל הערכות לג'יל במשך 60 דקות לסיעוד והתאוששות. בתום תקופת ההחלמה, החזירו את בעלי החיים הפצועים לאמבטיות המים בטמפרטורה של 37 עד 40 מעלות צלזיוס למשך שש שעות, והתאמת טמפרטורת המים לפי הצורך, כדי לשמור על טמפרטורות רקטליות של 36 עד 37 מעלות צלזיוס.לאחר מכן, להחזיר ערכות לג'יל שלהם שוב. לאחר קציר המוח וקיביעה בנקודת הקצה הניסיונית המתאימה, מניחים את קצות הקליפר האלקטרוני על ההיבטים הגביים והגחוניים של כל מוח כדי למדוד את הגובה של כל מוח פצוע ולא פצוע. מניחים את קצות הקליפר בחלקים הרוחביים ביותר של האונות הרקתיות כדי למדוד את הרוחב של כל מוח ולשקול כל מוח.השתמש בקאליפר כדי למדוד את סדק האורך, את כל sulci מההתחלה והסוף של החלק המובהק ביותר של סולקוס המתאים, ואת כל gyri מההיבט הרחב ביותר של כל gyrus המתאים. לאחר מכן, מניחים קצה אחד של הקליפר בנקודה האחורית ביותר של סדק האורך ואת הקצה השני של caliper בחלק האחורי ביותר של המוח הקטן כדי למדוד את כמות המוח הקטן חשוף. מתוך 34 בעלי חיים מששת המלטה שנחשפו לעלבון במחקר זה, חמישה בעלי חיים נפצעו באורח בינוני וארבעה בעלי חיים נפצעו באורח קשה.עם פציעה גוברת, צמצום של gyri באונות הרקתיות ו / או העורפית נצפתה, עם קיצור זועף הקשורים והרחבת הסקור האורך ואת האזורים הגדולים יותר של אובדן רקמת סיסטיק בבעלי החיים שנפגעו קשה ביותר. במהלך תקופת בדיקת הרפלקס, בעלי החיים הפצועים מציגים זמן איטי יותר להסתובב במשימה הגיאוטקסית השלילית. זמן איטי יותר להסתובב הרחק מהקצה במשימה סלידה מצוק קצת יותר זמן ימינה.על המסלול, בעלי חיים פצועים להפגין מהירות ממוצעת דומה פקדים אבל להציג מידה גדולה יותר באופן משמעותי של וריאציה מהירות במהלך כל ריצה. המרחק המותאם למשקל בין כפות הרגליים לכפות הרגליים האחוריות גדול משמעותית בבעלי חיים פצועים, עם פחות לחץ המופעל לכל אזור כפות רגליים יחידה, דרך ארבע כפות הרגליים. בשטח הפתוח, בעלי החיים הפצועים מכסים מרחק פחות מוחלט, עוצרים בתדירות גבוהה יותר ומבלים זמן רב יותר במרכז השדה ופחות זמן בפינות.כאן, ניתן לצפות במפות חום מייצגות של שליטה ובעלי חיים פצועים. יש לדאוג לנתח את העורק מן העצב הנלווה ולאפשר את הזמן המרבי האפשרי היפוקסיה. צעדים אלה יבטיחו שרוב בעלי החיים ישרדו, וגם יסבלו מפציעה.בעקבות הליך זה, ניתן להעריך כל תוצאות ביוכימיות, פתולוגיות או התנהגותיות, כולל הערכות המוגבלות בדרך כלל למודלים של מכרסמים של פגיעה מוחית.

a-ferret-model-inflammation-sensitized-late-preterm-hypoxic-ischemic

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

המודל עכברוש הלידה לפגיעה hypoxic-איסכמי המוח הוא מודל ומבוססת של אנצפלופתיה הילוד האנושי איסכמי היפוקסי (HIE). במאמר זה, אנו מתארים את המודל של HIE ב שלאחר הלידה גורי חולדה.

מודל hypoxic אנצפלופתיה איסכמי של איסכמיה הלידה

הקמנו מודלים של העכבר לויקומלציה periventricular (PVL), את הפגיעה במוח השולט על פגים מאופיין periventricular נגעים בחומר הלבן. היפוקסיה / איסכמיה עם / בלי זיהום מערכתי הם הגורמים העיקריים של PVL. קשירת הראש חד צדדית וחשיפה היפוקסיה עם / בלי זריקה lipopolysaccharide יוצר PVL כמו נגעים בעכברים P6.

עכבר מודלים של לויקומלציה periventricular

הסרטון מדגים את ההליך ליצירת מודל עכבר לחקר פגיעה מוחית היפוקסית-איסכמית בילוד. הוא מתאר את הצעדים לגרימת איסכמיה כירורגית וחשיפת בעל החיים להיפוקסיה כדי להחמיר נזק מוחי. לבסוף, הוא מראה כיצד להעריך את נגעי המוח המתקבלים, ולהבטיח שמודל העכבר מוכן לחקירה מדעית נוספת.

הקמת מודל עכברי של פגיעה מוחית היפוקסית-איסכמית בילוד

מקור: Jantzie, L. L., et. al. מידול אנצפלופתיה של פגות באמצעות היפוקסיה-איסכמיה טרום לידתית עם ליפופוליסכריד תוך מי שפיר בחולדות. J. Vis. Exp. (2015)סרטון זה מדגים פרוטוקול לגרימת מצבים היפוקסיים-איסכמיים ודלקתיים בחולדות עובריות על ידי הגבלת זרימת הדם ברחם והזרקת LPS, מודלים של דלקת עצבית ושיבוש התפתחות המוח הרלוונטיים למחקרי לידה מוקדמת.

השראת מצבים היפוקסיים-איסכמיים ודלקתיים למודל אנצפלופתיה בחולדות טרום לידתיות

ניתן לחקור אנצפלופתיה היפוקסית-איסכמית בעקבות חנק סביב הלידה באמצעות מודלים של בעלי חיים. אנו מדגימים את ההליכים הדרושים לביסוס מודל חזרזיר של אנצפלופתיה היפוקסית-איסכמית בילודים.

דגם חזרזיר של ילודים חוסר חמצן-איסכמי אנצפלופתיה

אנצפלופתיה של פגות מקיפה את ההפרעות במערכת העצבים המרכזית הקשורות לפגיעה מלידה מוקדמת. דוח זה מתאר מודל חולדה רלוונטי מבחינה קלינית של איסכמיה מערכתית חולפת ברחם ומתן ליפופוליסכריד תוך מי שפיר (LPS) המחקה כוריואמניוניטיס, ואת ההשפעה הקשורה של גירויים זיהומיים ותת-עירוי שליה על התפתחות מערכת העצבים המרכזית.

דוגמנות אנצפלופתיה של פגות שימוש בהריון היפוקסיה-איסכמיה עם lipopolysaccharide Intra-השפיר בחולדות

ביצענו חד-צדדית העורק הראשי סגר ביום כמחנכת CD 7-10-1 עכבר הגורים כדי ליצור מודל neonatal לפציעה hypoxic-איסכמי (איץ ' אי), חקר את ההשפעות של פגיעה מוחית HI. למדנו neurobehavioral פונקציות אלו עכברים לעומת עכברים רגילים שאינם המופעלים.

Neurobehavioral הערכות במודל של עכברים של פגיעה מוחית לפציעה Hypoxic-איסכמי Neonatal

ניתן לעצב הידרוצפלוס פוסט-דימומי של פגות (PHHP) בחולדות יילודים על ידי שילוב של כוריואמניוניטיס ודימום תוך חדרי. השילוב של אירועים אלה לפני הלידה ואחרי הלידה מסכם במדויק את סימני ההיכר הקליניים של PHHP, כולל מקרוצפליה, ונטריקולומגליה, ולחץ תוך גולגולתי מוגבר, לאורך החיים.

מידול הידרוצפלוס פוסט-דימומי של פגות בחולדות

נוזל הקשה הרוחב (LFP), מודל הוקמה של פגיעה מוחית טראומטית אצל עכברים, הוא הוכיח. LFP ממלא שלושת הקריטריונים העיקריים במודלים של בעלי חיים: התאמה, תוקף, אמינות קליני. ההליך המורכב craniotomy כירורגית, קיבעון של הרכזת ואחריו אינדוקציה של פגיעה, והתוצאה היא פגיעות מוקד ומפוזר, הוא תיאר.

נוזל הקשה Lateral: דגם של פגיעה מוחית טראומטית של עכברים

סרט זה מסביר את התיאוריה רקע של פעילות EEG היילודים ואת התגובות חושיות, ואחריו הפגנה חיה של ההקלטה שלהם ביחידה לטיפול נמרץ בילוד.

מוקדמת EEG: פרוטוקול נוירופיזיולוגי multimodal

למדו מודל חדשני לפגיעה מוחית בחמוסים בני 17 יום המדמה תנאים של פגים בסיכון. השיטה משלבת חנק, היפרוקסיה ודלקת מוגברת לחקירת מנגנוני פגיעה עצבית התפתחותית.

מודל של החמוס של דלקת-מארוי מאוחר לטווח קדם-הסכמי פגיעה במוח

גלה סרטונים נוספים