Name: כרונית, חריפה, ו-HIV ההפעלה מופעל מודלים העכבר חיסוני הומניזציה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-03T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: חקור דינמיקת זיהום HIV באמצעות שלושה מודלים של עכברים מוחסרי חיסון עם תאים אנושיים. למד את ההבדלים בין זיהום כרוני, חריף והפעלה מחודשת של הווירוס במערכת החיסון האנושית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי החטיבה הקלינית IHV קרנות פנימיות כדי JCZ.

<ol><li>Shultz, L. D., Ishikawa, F., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humanized+mice+in+translational+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Immunology%22%5BJournal%5D)">Humanized mice in translational biomedical research.</a> Nature Reviews Immunology. 7, 118-130 (2007).</li>
<li>Koboziev, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+humanized+mice+to+study+the+pathogenesis+of+autoimmune+and+inflammatory+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Inflammatory+Bowel+Diseases%22%5BJournal%5D)">Use of humanized mice to study the pathogenesis of autoimmune and inflammatory diseases.</a> Inflammatory Bowel Diseases. 21 (7), 1652-1673 (2015).</li>
<li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NOD%2FSCID%2F%CE%B3cnull+mouse%3A+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">NOD/SCID/γcnull mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li>
<li>Ishikawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+functional+human+blood+and+immune+systems+in+NOD%2FSCID%2FIL2+receptor+%7Bgamma%7D+chain%28null%29+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Development of functional human blood and immune systems in NOD/SCID/IL2 receptor {gamma} chain(null) mice.</a> Blood. 106 (5), 1565-1573 (2005).</li>
<li>Kim, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Simple+Mouse+Model+for+the+Study+of+Human+Immunodeficiency+Virus%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS+research+and+human+retroviruses%22%5BJournal%5D)">A Simple Mouse Model for the Study of Human Immunodeficiency Virus.</a> AIDS research and human retroviruses. 32 (2), 194-202 (2016).</li>
<li>Wunderlich, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AML+xenograft+efficiency+is+significantly+improved+in+NOD%2FSCID-IL2RG+mice+constitutively+expressing+human+SCF%2C+GM-CSF+and+IL-3%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">AML xenograft efficiency is significantly improved in NOD/SCID-IL2RG mice constitutively expressing human SCF, GM-CSF and IL-3.</a> Leukemia. 24 (10), 1785-1788 (2010).</li>
<li>Billerbeck, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+human+CD4%2BFoxP3%2B+regulatory+T+cells+in+human+stem+cell+factor-%2C+granulocyte-macrophage+colony-stimulating+factor-%2C+and+interleukin-3-expressing+NOD-SCID+IL2R%CE%B3null+humanized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Development of human CD4+FoxP3+ regulatory T cells in human stem cell factor-, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-, and interleukin-3-expressing NOD-SCID IL2Rγnull humanized mice.</a> Blood. 117 (11), 3076-3086 (2011).</li>
<li>Coughlan, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myeloid+Engraftment+in+Humanized+Mice%3A+Impact+of+Granulocyte-Colony+Stimulating+Factor+Treatment+and+Transgenic+Mouse+Strain%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells+and+development%22%5BJournal%5D)">Myeloid Engraftment in Humanized Mice: Impact of Granulocyte-Colony Stimulating Factor Treatment and Transgenic Mouse Strain.</a> Stem cells and development. 25 (7), 530-541 (2016).</li>
<li>Kumar, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+Cell-Specific+siRNA+Delivery+Suppresses+HIV-1+Infection+in+Humanized+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">T Cell-Specific siRNA Delivery Suppresses HIV-1 Infection in Humanized Mice.</a> Cell. 134 (4), 577-586 (2008).</li>
<li>Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humanized+mice+for+HIV+and+AIDS+research%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Virology%22%5BJournal%5D)">Humanized mice for HIV and AIDS research.</a> Current Opinion in Virology. 19, 56-64 (2016).</li>
<li>Araínga, M., Su, H., Poluektova, L. Y., Gorantla, S., Gendelman, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV-1+cellular+and+tissue+replication+patterns+in+infected+humanized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">HIV-1 cellular and tissue replication patterns in infected humanized mice.</a> Scientific Reports. 6, 1-12 (2016).</li>
<li>Satheesan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV+replication+and+latency+in+a+humanized+NSG+mouse+model+during+suppressive+oral+combinational+ART%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">HIV replication and latency in a humanized NSG mouse model during suppressive oral combinational ART.</a> Journal of Virology. 92 (7), 2118(2018).</li>
<li>Medina-Moreno, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+CDK9+with+indirubin+3%E2%80%99-monoxime+safely+and+durably+reduces+HIV+viremia+in+chronically+infected+humanized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Targeting of CDK9 with indirubin 3’-monoxime safely and durably reduces HIV viremia in chronically infected humanized mice.</a> PLoS ONE. 12 (8), 1-13 (2017).</li>
<li>Honeycutt, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophages+sustain+HIV+replication+in+vivo+independently+of+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Macrophages sustain HIV replication in vivo independently of T cells.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (4), 1353-1366 (2016).</li>
<li>Perdomo-Celis, F., Medina-Moreno, S., Davis, H., Bryant, J., Zapata, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV+Replication+in+Humanized+IL-3%2FGM-CSF-Transgenic+NOG+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">HIV Replication in Humanized IL-3/GM-CSF-Transgenic NOG Mice.</a> Pathogens. 8 (33), Basel, Switzerland. 1-16 (2019).</li>
<li>Akkina, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvements+and+Limitations+of+Humanized+Mouse+Models+for+HIV+Research%3A+NIH%2FNIAID+%22Meet+the+Experts%22+2015+Workshop+Summary%5BTitle%5D)+AND+%22AIDS+Research+and+Human+Retroviruses%22%5BJournal%5D)">Improvements and Limitations of Humanized Mouse Models for HIV Research: NIH/NIAID "Meet the Experts" 2015 Workshop Summary.</a> AIDS Research and Human Retroviruses. 32 (2), 109-119 (2015).</li>
<li>Dudek, T. E., Allen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV-Specific+CD8%2B+T-Cell+Immunity+in+Humanized+Bone+Marrow-Liver-Thymus+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">HIV-Specific CD8+ T-Cell Immunity in Humanized Bone Marrow-Liver-Thymus Mice.</a> The Journal of Infectious Diseases. 208, Suppl 2 150-154 (2013).</li>
<li>Skelton, J. K., Ortega-Prieto, A. M., Dorner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Hitchhiker%27s+guide+to+humanized+mice%3A+new+pathways+to+studying+viral+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">A Hitchhiker's guide to humanized mice: new pathways to studying viral infections.</a> Immunology. 154, 50-61 (2018).</li>
<li>Pearson, T., Greiner, D. L., Shultz, L. D. Creation of "humanized" mice to study human immunity. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPearson%2C+T+%22Current+Protocols+in+Immunology%22">Current Protocols in Immunology</a>. , Chapter 15, Unit 15.21 (2008).</li>
<li>Hasgur, S., Aryee, K. E., Shultz, L. D., Greiner, D. L., Brehm, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+Immunodeficient+Mice+Bearing+Human+Immune+Systems+by+the+Engraftment+of+Hematopoietic+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+molecular+biology%22%5BJournal%5D)">Generation of Immunodeficient Mice Bearing Human Immune Systems by the Engraftment of Hematopoietic Stem Cells.</a> Methods in molecular biology. 1438, Clifton, N.J. 67-78 (2016).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+lymphoid+and+myeloid+cell+development+in+NOD%2FLtSz-scid+IL2R+gamma+null+mice+engrafted+with+mobilized+human+hemopoietic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Human lymphoid and myeloid cell development in NOD/LtSz-scid IL2R gamma null mice engrafted with mobilized human hemopoietic stem cells.</a> Journal of Immunology. 174 (10), Baltimore, Md. 6477-6489 (2005).</li>
<li>King, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+Hu-PBL+model+for+the+study+of+human+islet+alloreactivity+based+on+NOD-scid+mice+bearing+a+targeted+mutation+in+the+IL-2+receptor+gamma+chain+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">A new Hu-PBL model for the study of human islet alloreactivity based on NOD-scid mice bearing a targeted mutation in the IL-2 receptor gamma chain gene.</a> Clinical Immunology. 126 (3), Orlando, Fla. 303-314 (2008).</li>
<li>King, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+peripheral+blood+leucocyte+non-obese+diabetic-severe+combined+immunodeficiency+interleukin-2+receptor+gamma+chain+gene+mouse+model+of+xenogeneic+graft-versus-host-like+disease+and+the+role+of+host+major+histocompatibility+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Immunology%22%5BJournal%5D)">Human peripheral blood leucocyte non-obese diabetic-severe combined immunodeficiency interleukin-2 receptor gamma chain gene mouse model of xenogeneic graft-versus-host-like disease and the role of host major histocompatibility complex.</a> Clinical and Experimental Immunology. 157 (1), 104-118 (2009).</li>
<li>Covassin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+peripheral+blood+CD4+T+cell-engrafted+non-obese+diabetic-scid+IL2rgamma%28null%29+H2-Ab1+%28tm1Gru%29+Tg+%28human+leucocyte+antigen+D-related+4%29+mice%3A+a+mouse+model+of+human+allogeneic+graft-versus-host+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+experimental+immunology%22%5BJournal%5D)">Human peripheral blood CD4 T cell-engrafted non-obese diabetic-scid IL2rgamma(null) H2-Ab1 (tm1Gru) Tg (human leucocyte antigen D-related 4) mice: a mouse model of human allogeneic graft-versus-host disease.</a> Clinical and experimental immunology. 166 (2), 269-280 (2011).</li>
<li>Heredia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+of+mTOR+catalytic+site+inhibits+multiple+steps+of+the+HIV-1+lifecycle+and+suppresses+HIV-1+viremia+in+humanized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Targeting of mTOR catalytic site inhibits multiple steps of the HIV-1 lifecycle and suppresses HIV-1 viremia in humanized mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (30), 9412-9417 (2015).</li>
<li>Nair, A., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Basic+and+Clinical+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li>
<li>Miller, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+parameters+that+affect+human+hematopoietic+cell+outputs+in+mutant+c-kit-immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Hematology%22%5BJournal%5D)">Analysis of parameters that affect human hematopoietic cell outputs in mutant c-kit-immunodeficient mice.</a> Experimental Hematology. 48, 41-49 (2017).</li>
<li>Murphy, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+T+cell+differentiation+and+lymphomagenesis+in+the+thymus+of+mice+with+severe+combined+immune+deficiency+%28SCID%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Induction of T cell differentiation and lymphomagenesis in the thymus of mice with severe combined immune deficiency (SCID).</a> Journal of Immunology. 153 (3), Baltimore, Md. 1004-1014 (1994).</li>
<li>Poluektova, L. Y., et al. Humanized Mice as Models for Human Disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPoluektova%2C+LY+%22Humanized+Mice+for+HIV+Research%22">Humanized Mice for HIV Research</a>. , Chapter 2 15-24 (2015).</li>
<li>Nakata, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potent+anti-R5+human+immunodeficiency+virus+type+1+effects+of+a+CCR5+antagonist%2C+AK602%2FONO4128%2FGW873140%2C+in+a+novel+human+peripheral+blood+mononuclear+cell+nonobese+diabetic-SCID%2C+interleukin-2+receptor+gamma-chain-knocked-out+AIDS+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">Potent anti-R5 human immunodeficiency virus type 1 effects of a CCR5 antagonist, AK602/ONO4128/GW873140, in a novel human peripheral blood mononuclear cell nonobese diabetic-SCID, interleukin-2 receptor gamma-chain-knocked-out AIDS mouse model.</a> Journal of Virology. 79 (4), 2087-2096 (2005).</li>
<li>Terahara, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescent+Reporter+Signals%2C+EGFP%2C+and+DsRed%2C+Encoded+in+HIV-1+Facilitate+the+Detection+of+Productively+Infected+Cells+and+Cell-Associated+Viral+Replication+Levels%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Fluorescent Reporter Signals, EGFP, and DsRed, Encoded in HIV-1 Facilitate the Detection of Productively Infected Cells and Cell-Associated Viral Replication Levels.</a> Frontiers in Microbiology. 2, 280(2012).</li>
<li>Nicolini, F. E., Cashman, J. D., Hogge, D. E., Humphries, R. K., Eaves, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NOD%2FSCID+mice+engineered+to+express+human+IL-3%2C+GM-CSF+and+Steel+factor+constitutively+mobilize+engrafted+human+progenitors+and+compromise+human+stem+cell+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">NOD/SCID mice engineered to express human IL-3, GM-CSF and Steel factor constitutively mobilize engrafted human progenitors and compromise human stem cell regeneration.</a> Leukemia. 18 (2), 341-347 (2004).</li>
<li>Cyster, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicular+stromal+cells+and+lymphocyte+homing+to+follicles%5BTitle%5D)+AND+%22Immunological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Follicular stromal cells and lymphocyte homing to follicles.</a> Immunological Reviews. 176, 181-193 (2000).</li>
<li>Seung, E., Tager, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humoral+Immunity+in+Humanized+Mice%3A+A+Work+in+Progress%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Humoral Immunity in Humanized Mice: A Work in Progress.</a> Journal of Infectious Diseases. 208, Suppl 2 155-159 (2013).</li>
<li>Wahl, A., Victor Garcia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+BLT+humanized+mice+to+investigate+the+immune+reconstitution+of+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">The use of BLT humanized mice to investigate the immune reconstitution of the gastrointestinal tract.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 28-33 (2014).</li>
<li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+human+humoral+immune+responses+in+a+novel+HLA-DR-expressing+transgenic+NOD%2FShi-scid%2F%CE%B3c+null+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22International+Immunology%22%5BJournal%5D)">Induction of human humoral immune responses in a novel HLA-DR-expressing transgenic NOD/Shi-scid/γc null mouse.</a> International Immunology. 24 (4), 243-252 (2012).</li>
<li>Ali, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xenogeneic+Graft-versus-Host-Disease+in+NOD-scid+IL-2R%CE%B3null+Mice+Display+a+T-Effector+Memory+Phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Xenogeneic Graft-versus-Host-Disease in NOD-scid IL-2Rγnull Mice Display a T-Effector Memory Phenotype.</a> PLoS ONE. 7 (8), 1-10 (2012).</li>
<li>Brehm, M. A., Wiles, M. V., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+improved+humanized+mouse+models+for+human+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Generation of improved humanized mouse models for human infectious diseases.</a> Journal of Immunological Methods. 410, 3-17 (2014).</li>
<li>Hakre, S., Chavez, L., Shirakawa, K., Verdin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIV+latency%3A+experimental+systems+and+molecular+models%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">HIV latency: experimental systems and molecular models.</a> FEMS Microbiology Reviews. 36 (3), 706-716 (2012).</li>
<li>Wu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRIM5%CE%B1+Restriction+Affects+Clinical+Outcome+and+Disease+Progression+in+Simian+Immunodeficiency+Virus-Infected+Rhesus+Macaques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Virology%22%5BJournal%5D)">TRIM5α Restriction Affects Clinical Outcome and Disease Progression in Simian Immunodeficiency Virus-Infected Rhesus Macaques.</a> Journal of Virology. 89 (4), 2233(2015).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

התפתחויות חשובות הושגו בפיתוח של זנים של העכבר החיסוני להאנשה, עם מספר אפשרויות שונות שניתן להשתמש על פי עניין המחקר1. בתנאי כאן הוא פרוטוקול כללי עבור הומניזציה של NS γ-שרשרת העכבריםnull זנים דומים גנטית להיות מועסק בשלושה מודלים שונים עבור לימוד זיהום HIV. בגישה הניסיונית הראשונה, העכברים היילוד לקרינה מוזרק עם האדם CD34+ HSCs, אשר יכול להיות נגזר דם טבורי, הכבד עוברית, או מגוייס דם היקפי3,21. הקרנה מתאימה של γ NS-ש...

הומניזציה/SCID/אינטרלוקין (IL)-2 קולטן γ-שרשרתnull (להלן המכונה ההונים γ-שרשרתnull) מודל העכבר כבר בשימוש נרחב לחקר הפתוגנזה של זיהומים, חסינות אוטומטית, סרטן, כמו גם עבור מחקרים פרה-קליניים של תרופות, האדם תאים מבוססי טיפולים1,2. עכברים אלה מבוססים על רקע שאינו מהשמנת יתר (נוד), עם מוטציה scid ו מוטציה ממוקד ב-il-2 קולטן γ-שרשרת (γ שרשרת משותפת עבור il-2, il-4, il-7, il-9, il-15, ו-il-21), אשר לגרום ליקוי חמור בפיתוח העכבר T-, B-, ו הרוצח הטבעי (NK) תאים1 לפיכך, הם תומכים בתאום של רקמת האדם, CD34 האדם+ תאי גזע המטפאות (HSCs), ותאי דם היקפיים מונפקטיים (pbmcs)3,4,5. בנוסף, ביטוי הטרנסגניים של גורמים המטבטיים האנושיים, כגון מקדם של תאי גזע (scf), גרנולוציט/מקרופאג המושבה-גורם מגרה (GM-שדרתי), ו-IL-3 מקדם את העפיתו של אוכלוסיות מיאלואידית האדם6,7,8.
עבור לימודי HIV, מודלים מסוימים של ההונים γ-שרשרתnull תוארו, אשר שונים במתח העכבר, סוג של תאים אנושיים בשימוש, סוג של רקמות עבור חרט, ואת המקור של תאים (כלומר, בריא vs. תורם נגוע באיידס)9,10. הזן המקורי, עם זאת, משמש באופן נרחב בשל רמות גבוהות של תאים אנושיים בתיאום ונגיפי שכפול לאחר זיהום עם התייחסות מאמץ HIV11,12,13. חיסוני דומה לקוי של העכבר עם ביטוי טרנסגניים של גורמים המטטיים האנושיים (g., חעוגה-exl או nsg-SGM3) או עם שתלים של הכבד האנושי רקמות בלוטת התימוס (העצם במח-כבד בלוטת התימוס [בייקון] עכברים) שימושיים להערכת התפקיד של אוכלוסיות מיאלואידית בתגובה החיסונית אנטי-HIV, ההשפעות של HIV על רקמות אלה, ואת השתתפותם כמו מאגריםויראלי 14,15. יתר על כן, כמה זנים עם ביטוי טרנסגניים של אנטיגן לוקיציט אנושי (hla) מולקולות, כמו גם עכברים, ניתן להשתמש ללמוד את התגובה לתאי T לזיהום איידס16,17.
באופן כללי, בעכברים האלה, הומניזציה תלוי במקור התאי, בתוואי המשלוח (בתוך הצפק, בתוך הכבד, בתוך ורידי, בתוך הבית) ובגיל העכבר בזמן המועד המקביל18,19,20. לגבי מקור התא, האדם CD34+ hsc נגזר דם טבורי, הכבד עובר, או מגוייס דם היקפי ניתן להזריק היילוד או הצעיר עכברים3,21. בנוסף, בוגרים γ-שרשרת העכבריםnull יכול להיות הומניזציה על ידי הזרקת pbmc (כאן, הנקרא hu-pbmc-NS γ-שרשרת העכבריםnull ), המאפשר המחזור הזמני של תאים אלה בדם, איברי הלימפה המשני, ורקמות מודלק22,23,24.
המתואר כאן הוא פרוטוקול מפורט עבור הקמתה של ההוני γ-שרשרת מודלים העכברnull למחקר של זיהום HIV. הראשון הוא המודל הכרוני, שבו האדם CD34+ HSCs נגזר דם טבורי מתורם בריא מוזרק עכברים היילוד, ואחריו זיהום עם התייחסות למתח HIV לאחר 14 שבועות של המערכת החיסונית האנושית מחדש החוקה. מודל זה מאפשר ניטור של עכברים עד ~ 36 שבועות לאחר ההדבקה. המודל השני הוא מודל אקוטי, שבו PBMCs נגזר תורם בריא מוזרק ב-NS למבוגרים γ-שרשרתריק עכברים, ואחריו זיהום עם מאמץ התייחסות HIV לאחר 3 שבועות של התרחבות האדם T-cell בעכבר. לבסוף, המודל השלישי הוא מודל ההפעלה מההתחלה, שבו pbmcs נגזר של תורם מזוהם HIV תחת הטיפול המדכא תרופתי (אמנות) מוזרק למבוגרים NS γ-שרשרתריק עכברים. במקרה זה, סביבה נטולת סמים מאפשרת ההפעלה ויראלי ולהגדיל את העומס הנגיפי. שני הדגמים האחרונים מאפשרים ניטור עד ~ 9 שבועות לאחר החרט.
בסך הכל, אלה שלושה מודלים שימושיים למחקרים virological, טרום קליני מחקרים של תרופות הרומן, והערכה של השפעות הזיהום של HIV על התגובה החיסונית הגלובלית. חשוב גם לשקול כי שימוש בעכברים נגועים באיידס הומניזציה דורש סקירה ואישור על ידי ועדת Biosafety טיחות מוסדית (IBC) כמו גם על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים (IACUC) לפני כל ניסוי. הדבר מבטיח כי המחקר מלווה בכל התקנות המוסדיות הפנימיות והחיצוניות לשימוש בחומרים ביולוגיים מסוכנים ובטיפול הומאני בבעלי חיים ניסיוניים.

<table><tbody><tr><td>0. 5 מ"ל צינורות מיקרוצנטריפוגה</td><td>נפטון</td><td>3735.S.X</td><td></td></tr><tr><td>1. 5 מ"ל צינורות מיקרוצנטריפוגה</td><td>נפטון</td><td>3745.S.X</td><td></td></tr><tr><td>10 מ"ל פיפטות סרולוגיות</td><td>sceintific כוכבי</td><td>VL-4090-0010</td><td></td></tr><tr><td>15 מ"ל צינורות חרוטיים</td><td>Stellar scientific</td><td>T15-600</td><td></td></tr><tr><td>25 מ"ל פיפטות סרולוגיות</td><td>sceintific כוכבי</td><td>VL-4090-0025</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל פיפטות סרולוגיות</td><td>כוכביות</td><td>VL-4090-0005</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינורות חרוטיים</td><td>Stellar scientific</td><td>T50-600</td><td></td></tr><tr><td>ACK מאגר ליזה</td><td>איכותי ביולוגי</td><td>118-156-101</td><td></td></tr><tr><td>רפידות הכנה לאלכוהול</td><td>פישר מדעי</td><td>06-669-62</td><td></td></tr><tr><td>שיבוט CD3 סטרילי אנטי אנושי UCHT1</td><td>Biolegend</td><td>300439</td><td>APC מצומד</td></tr><tr><td>אנטי-אנושי CD4 שיבוט OKT4</td><td>Biolegend</td><td>317420</td><td>AF488 מצומד</td></tr><tr><td>אנטי-אנושי CD45 שיבוט 2D1</td><td>Biolegend</td><td></td> 368522-BV421 <td>מצומד</td></tr><tr><td>אנטי-אנושי CD8 שיבוט SK1</td><td>Biolegend</td><td>344710</td><td>PerCP-Cy5.5</td></tr><tr><td>מצומד Biosafaty ארון רמה 2</td><td></td><td></td><td>אם אפשרי מחובר ל-exauste chimeny בעת טיפול באיזופלורן</td></tr><tr><td>מצנפת</td><td>פישר מדעית</td><td>17-100-900</td><td>כובע לשימוש חד פעמי להגנה בסיסית</td></tr><tr><td>Cavicide</td><td>Metrex</td><td>13-1000</td><td>תאי</td></tr><tr><td>CD34+</td> חומר זיהומי משטח <td>Lonza</td><td>2C-101</td><td>כמה שיותר בקבוקונים זמינים מתורם יחיד</td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>בקמן</td><td>65-6KR</td><td></td></tr><tr><td>צנצנת שקופה</td><td>אמזון</td><td>77977</td><td></td></tr><tr><td>כרית</td> <td>גזה כותנהפישר מדעי</td><td>22-415-468</td><td></td></tr><tr><td>מעילי מעבדה חד פעמיים סטריליים</td><td>פישר מדעי</td><td>19-472-422</td><td></td></tr><tr><td>צינורות מיקרו EDTA</td><td>גריינר ביו-וואן</td><td>450480</td><td></td></tr><tr><td>מסכת פנים</td><td>פישר מדעי</td><td>17-100-897</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת ליזינג</td><td>FACS BD</td><td>340202</td><td></td></tr><tr><td>FBS פרימיום HI</td><td>אטלנטה ביולוגית</td><td>S1115OH</td><td></td></tr><tr><td>Ficoll</td><td>GE health one</td><td>17-1440-02</td><td></td></tr><tr><td>ציטומטר</td><td></td><td></td> זרימה <td>השתמשנו</td></tr><tr><td>בצינורות ציטומטריה זרימה</td> של FACS Aria II <td>Falcon</td><td>352054</td><td>5 מ"ל פוליסטירן ותחתית עגולה</td></tr><tr><td>HIV BaL</td><td></td><td></td><td>הוכן במתקן הליבה שלנו uQUANT</td></tr><tr><td>PBMCs</td><td></td><td></td> אנושיים <td>מתנדבים חיוביים ושליליים</td></tr> HIV <tr><td>אינפרא אדום כרית חימום</td><td>Venet Scientific</td><td>DCT-25</td><td>כרית חימום טיפולית זמנית לבעלי חיים קטנים</td></tr><tr><td>Isentress (Raltegravir)</td><td>Merck</td><td>NSC 0006-0227061</td><td>תרופה אנטי-רטרו-ויראלית לטיפול בנגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV)-מעכב אינטגראז</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Henry Schein</td><td>NDC 11695-6776-2</td><td></td></tr><tr><td>Mark I irradiator</td><td></td><td></td><td>ציוד השייך לאוניברסיטה של מרילנד</td></tr><tr><td>מיקרו פיפטות</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרוצנטריפוגה</td><td>אפנדורף</td><td></td><td></td></tr><tr><td>עכבר תגי אוזניים להקה</td><td>לאומית & Tag company</td><td>1005-1L1</td><td></td></tr><tr><td>צינורות איסוף דם של Natelson</td><td>פישר מדעי</td><td>02-668-10</td><td></td></tr><tr><td>NOG-EXL</td><td>Taconic</td><td>HSCFTL-13395-F</td><td></td></tr><tr><td>עכברי NSG</td><td>ג'קסון</td><td>5557</td><td>נקבות בהריון בזמן לחריטת CD34 וצעירים לחריטת PBMCs</td></tr><tr><td>NSG-SGM3</td><td>ג'קסון</td><td>13062</td><td></td></tr><tr><td>פרפורמלדהיד 16%</td><td>מדעי מיקרוסקופיה אלקטרונית</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>PBS 1X pH 7.4</td><td>Gibco</td><td>100-10-023</td><td></td></tr><tr><td>צלחות פטרי</td><td>פישר מדעי</td><td>08-757-28</td><td></td></tr><tr><td>מכונת Quantistudio qPCR</td> מאגרי <td>ריאגנטים תרמו</td><td>QS3</td><td></td></tr><tr><td>Costar</td><td></td><td>4870</td><td></td></tr><tr><td>RPMI מדיה 1640 1X</td><td>Gibco</td><td>11875-093</td><td></td></tr><tr><td>נעל מכסה</td><td>פישר מדעי</td><td>17-100-911</td><td></td></tr><tr><td>כפפות חד פעמיות סטריליות</td><td>Microflex</td><td>SUF-524</td><td></td></tr><tr><td>SuperScript II סינתזת גדיל ראשון SuperMix</td><td>Invitrogen</td><td>10080-400</td><td>מזרקי סינתזת cDNA</td></tr><tr><td>28-G x 1/2</td><td>BD</td><td>329-461</td><td></td></tr><tr><td>מזרקים 29-G x 1/2</td><td>BD</td><td>324-702</td><td></td></tr><tr><td>Truvada (Emtricitabine ו Tenofovir</td><td>Gilead</td><td>NDC 61958-0701-1</td><td>תרופה אנטי-רטרו-ויראלית לטיפול בנגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV)-מעכב אנלוגי-טרנסקריפטאז</td></tr><tr><td>טריפאן כחול</td><td>סיגמא</td><td>T8154</td><td>ספירת תאים וכדאיות</td></tr><tr><td>Vick Vaporub</td><td>בריאות בית הספר</td><td>43214</td><td>משחה על בסיס מנטול ואקליפטוס</td></tr><tr><td>ביולוגיה מולקולרית מים כיתה</td><td>איכות ביולוגית</td><td>351-029-131</td><td></td></tr></tbody></table>

כרונית, חריפה, ו-hiv ההפעלה מופעל מודלים העכבר חיסוני הומניזציה

Chronic, Acute, and Reactivated HIV Infection in Humanized Immunodeficient Mouse Models

בסיס הומניזציה/מזהה/IL-2 הקולטן γ עכבריםnull לאחר כמה תכונות של חסינות האדם, אשר ניתן לנצל במחקר בסיסי וטרום קליני על מחלות זיהומיות. מתוארים כאן הם שלושה מודלים של עכברים הומניזציה לקויה לחקר הדינמיקה של נגיף ה-HIV. הראשון מבוסס על הזרקה התוך הכבד של CD34+ תאי גזע המטפאות בעכברים היילוד, אשר מאפשר את החוקה של מספר התאים ורקמות הלימפה מוגבלים, ואחריו זיהום עם התייחסות מאמץ HIV. מודל זה מאפשר ניטור עד 36 שבועות לאחר ההדבקה ולכן נקרא מודל כרונית. המודלים השני והשלישי מכונים מודלים חריפה ומהירים, בהם תאי דם היקפיים הintraperitoneally מוזרק לעכברים מבוגרים. במודל החריף, תאים מתורם בריא מעפילו דרך התוואי התוך-הצפק, ולאחריו זיהום עם התייחסות למתח HIV. בסופו של דבר, במודל ההפעלה מההתחלה, תאים מתורם הנגוע באיידס תחת הטיפול האנטי-ויראלי מנחטרים באמצעות תוואי הצפק. במקרה זה, סביבה נטולת סמים בעכבר מאפשר ההפעלה מחודש וירוס ועלייה בעומס נגיפי. הפרוטוקולים המסופקים כאן לתאר את הגישה הניסיונית קונבנציונאלי עבור הומניזציה, מודלים העכבר החיסוני של נגיף ה-HIV.

כפי שמתואר לעיל, במהלך 14 שבועות post-HSC הזרקת (מודל כרוני) או במהלך 3 שבועות לאחר PBMC הזרקה (מודלים חריפה וההפעלה מראש), העכברים הם דימם להקרנה את רמת התאים האנושיים הסדר ידי הזרימה cy, try. נציג האסטרטגיה להערכת 1) האדם CD45+ תאים החוקה ו 2) אחוז של CD4+ ו CD8+ T-תאים מוצג באיור 1א. בדרך כלל, רמת החרט (אחוז של האדם CD45+ תאים) נע בין 10% – 80% לאחר CD34+ hsc הזרקה והוא תלוי בתוואי של הזרקה ומתח העכבר, בין הגורמים האח...

המתואר כאן הם שלוש גישות ניסיוני ללמוד את הדינמיקה של זיהום HIV בעכברים הומניזציה. הראשון מתיר את המחקר של אירועי זיהום כרונית, בעוד שני האחרונים מאפשר לימוד של אירועים חריפים לאחר זיהום ראשוני או נגיפי ההפעלה מראש.

כרונית, חריפה, ו-HIV ההפעלה מופעל מודלים העכבר חיסוני הומניזציה

Humanized NOD/SCID/IL-2 receptor &#947;-chainnull mice recapitulate some features of human immunity, which can be exploited in basic and pre-clinical ...

הליך זה מתאר שלושה מודלים של עכברים כשל חיסוני אנושי לחקר הדינמיקה של הידבקות ב- HIV. עכברים אנושיים NSG recapitulates על תכונות של חסינות אנושית. במקרה זה, מאפשר את המחקר של כרונית, חריפה, והפעלה מחדש של הידבקות ב- HIV בהגדרות פרה-קליניות.הפגנת הליך הכנת התא תהיה סנדרה מדינה-מורנו, מפקחת מחקר מעבדה מהקבוצה שלנו. בעת ביצוע הליך זה, השתמש תמיד בציוד מגן אישי חד פעמי כולל קרצוף סטרילי, כפפות, נעליים ייעודיות, כיסויי נעליים, מסכה, משקפי מגן, מצנפות שיער וזקן, ומעיל מעבדה סטרילי. עבור המודל הכרוני, יש להתריע מחדש על מיליון תאי גזע קפואים מסוג CD34+Human ב-10 מיליליטר של מדיית RPMI 1640 עם 10%FBS תחת ארון ביו-בטיחות מוסמך ולשמור על מצבים סטריליים.השתמש 10 microliters של ההשעיה לספור ולבדוק את הכדאיות התא על ידי טריפאן כחול הדרה כתמים בהמוציטומטר. ואז צנטריפוגה ההשעיה התא ב 400 פעמים g במשך 15 דקות בטמפרטורת החדר. השליכו את העל-טבעי והשקיעו מחדש את התאים ב-PBS 1X קר בריכוז הנדרש.שמור את התאים על קרח עד הזרקה. לשפשף מצעים נקיים בין הידיים כדי להסוות כל ריח זר אחר על הגורים המטופל. לאחר מכן מניחים גורים לתוך צלחת פטרי סטרילית 100 מילימטר מרובע יחד עם כמות קטנה של חומר מצעים מכלוב המגדל.שים את צלחת פטרי לתוך כלוב תחבורה נקי ולאחר מכן למקם את הכלוב בכלוב תחבורה Carboy כדי להגן על גורים מפני אור ישיר ורעש. מכסים את כלוב ההובלה עם כרית כיסוי כדי למנוע חשיפה של בעלי חיים לסביבה תוך כדי מעבר לחדר ההקרנה. לאחר הרדמה כמתואר בפרוטוקול הטקסט, היכונו לתריט באמצעות הזרקת כבד.כדי למזער את זמן ריסון העכבר, תן לחוקר אחד לטעון את המזרק עם ההשעיה של תאי הגזע ויש לי החוקר השני להחזיק את הגור ולנהל את הזריקה. לטעון 50 microliters של CD34 + השעיה תא גזע אנושי לתוך המזרק עם מחט מחוברת תחת ארון biosafety מוסמך. לרסן את הגורים עם אגודל ואצבעות אינדקס ולנקות את אתר ההזרקה עם 70% אלכוהול.השתמש בזווית מחט רדודה כדי לספק 50 microliters של תאים ישירות לתוך הכבד כדי לא לנקב לחלוטין את הכבד. לפני המלחמה את המנה באמצעות כרית התחממות אינפרא אדום עבור מכרסמים ב 20 מעלות צלזיוס כדי להבטיח את הגורים לא יהיה מחומם יתר על כן. מניחים את הגורים על צלחת פטרי מכוסה גזה סטרילית במשך 1 עד 5 דקות כדי לאפשר התאוששות.מיד לפני החזרת הגורים להוריהם, יש למרוח כמות קטנה של משחה על בסיס מנתל ואקליפטוס באמצעות האגודל והאצבעות האינדקסיות לחוטם של שני ההורים כדי למנוע קניבליזם או דחייה של הגורים. בדוק כלובים כל יום, מחפש כל סימנים של שתל לעומת מחלה מארחת בגורים כגון עור יבש, ללא האכלה, פריחה, או התקרחות. ליטף את הגורים בגיל שלושה שבועות ולשכן אותם בכלובים שונים.אמת חריטה בדם ההיקפי על ידי ציטומטריית זרימה בגיל 14 שבועות. מוצגת אסטרטגיית גת מייצגת להערכת שחזור תאים אנושיים מסוג CD45+תאים ואחוז מתאי CD4+ו- CD8+T. שיעור ההצלחה של חריטה הוא בין 80% ל -100%השתמש בתאים חד-גרעיניים של דם היקפי אנושי הנגזרים מתורם בריא למודל החריף או מחולה נגוע ב- HIV שהיה תחת טיפול תרופתי למודל ההפעלה מחדש.שכבה 15 מיליליטר של דם שלם בחמישה מיליליטר של בינוני שיפוע צפיפות סטרילית לתוך צינור חרוט 50 מיליליטר. צנטריפוגה ב 400 פעמים g במשך 30 דקות בטמפרטורת החדר ללא הפסקות, כדי למנוע את המעיל באפי מלהיות מעורבב עם מדיום שיפוע צפיפות. בזהירות לאסוף את השבר של תאים mononuclear בין המדיום שיפוע צפיפות על טבעי.מעבירים את מעיל באפי לצינור צנטריפוגה 15 מיליליטר המכיל 10 מיליליטר של 1X PBS. צנטריפוגה ב 300 פעמים g במשך 10 דקות בטמפרטורת החדר. להשליך את supernatant ולהסיר את תאי הדם האדומים הנותרים על ידי lysing עם חמישה מיליליטר של מאגר תזה ACK הוסיף לתאים גלולה.דגירה במשך ארבע דקות בטמפרטורת החדר. לאחר צנטריפוגה שוב כמו קודם, להשליך את supernatant ו resuspend ב 10 מיליליטר של 1X PBS או RPMI 1640 בינוני. השתמש 10 microliters של ההשעיה התא לספור את התאים ולבדוק את הכדאיות על ידי טריפאן כחול הדרה כתמים בהמוציטומטר.בדרך כלל, אחד עד שני מיליון תאים מתקבלים עבור כל מיליליטר אחד של דם עם יותר מ 95%הכדאיות. לאחר צנטריפוגה כבעבר, השלך את העל-טבעי והתאם את מספר התא לריכוז הנדרש. לטעון 3.5 מיליון תאי מונונוקלאר דם היקפיים ב 200 microliters של 1X PBS לתוך מזרק עם מחט מחוברת תחת ארון biosafety מוסמך.הסר את העכבר מהכלוב והחזק אותו בזנב כך שיוכל לאחוז את רשת שינוי החלת מתיחה עדינה לאחור. לאחר מכן מניחים את האצבע והאגודל על כתפי החיה שתופסים את העור הרופף של הצוואר ומשתמשים באצבע האמצעית כדי לייצב את גבה. החלק את ראש העכבר לאחור כך שגבו יהיה מעל ראשו.זה מאפשר הקרביים בחלל הבטן להיות נעקר לאחור ומפחית את הסיכון של ניקוב איברים פנימיים במהלך ההזרקה. נקה את אתר ההזרקה עם 70% אלכוהול. לחדור את המזרק מוכן דרך דופן הבטן ולספירה לפני הזרקת התאים.אם חומר כלשהו הוא שאפו, להסיר את המזרק ולהשליך אותו. אחרת, להזריק את התאים לאט בחלל תוך-אפית לפני הסרת המזרק והשליכתו. להחזיר את החיה לכלוב שלה ולאמת חריטה בדם היקפי על ידי ציטומטריה זרימה בשלושה שבועות לאחר ההזרקה.זהה עכברים על-ידי תיוג אוזניים. שימו לב לעכברים המשמשים בניסויים אלה מקרוב, פעמיים ביום לאחר כל הליך לסימנים קליניים של מצוקה. לאחר מכן המשיכו להזרקת HIV כמתואר בפרוטוקול הטקסט.בעקבות הזרקת HIV, יש עלייה מהירה בעומס נגיפי פלזמה בדרך כלל להיות מזוהה לאחר שבועיים עד שלושה שבועות לאחר ההדבקה הן במודלים כרוניים חריפים עם קינטיקה דומה במודל ההפעלה מחדש. העלייה בעומס הנגיפי עולה בקנה אחד עם ירידה ביחס CD4:CD8. שינויים אלה אינם נצפו בעכברי בקרה.שים לב, בדגם העכבר הבוגר PBMC NSG האנושי, היפוך ראשוני של יחס CD4:CD8 נצפה ושוחזר לאורך זמן הניטור. כאשר טיפול אנטי-רטרו-ויראלי מנוהל לעכברים נגועים ב- HIV, דיכוי של העומס הנגיפי כמו גם התאוששות ביחס CD4:CD8 התרחשו כצפוי והגיעו לרמות דומות לאלה בפקדים לא נגועים. בדרך כלל, לאחר שבועיים עד שלושה שבועות של טיפול, ירידה בעומס נגיפי וגידול ביחס CD4:CD8 נצפתה במודלים הכרוניים, החריפים וההפעלה מחדש.השתמש במינון ההקרנה המומלץ כדי למנוע מנת יתר קטלנית או דחייה של תאים מושתלים. אין לנקב לחלוטין את הכבד במהלך ההזרקה ולהשתמש במצעים כדי להסוות ריחות שהסכר יתפוס כזרים. שלושת המודלים הללו מאפשרים בדיקה של תרכובות אנטי ויראליות, נוגדנים נגד HIV או חומרים ביולוגיים אחרים המשפיעים על שכפול ויראלי.בנוסף, הם מאפשרים ניסויי העברה אדפטיבית עבור אימונותרפיה HIV. עכברים אנושיים NSG ניתן reconstituted באופן חלקי או מלא עם תאים אנושיים להגיב פתוגנים או תרופות, מחקה את המורכבות של המערכת החיסונית האנושית. כל האמצעים הביולוגיים הבסיסיים צריכים להיות במעקב קפדני מאז עכברים אנושיים NSG יכול להיות נגוע הן מורין פתוגנים אנושיים, במיוחד במקרה זה המשתמשת מניפולציה וירוס HIV.

chronic-acute-reactivated-hiv-infection-humanized-immunodeficient

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

אימונולוגיה וזיהומים

הדור והאפיון של תאי T ספציפיים סרטניים באמצעות עכבריים מתואר כאן. רקמה הרתי אדם ותאי גזע hematopoietic מהונדס גנטי אדם מושתלת לעכברי מדוכאי חיסון. התוצאה הוא הכינון מחדש של מערכת חיסון אנושית מהונדסת מאפשרת בבדיקת vivo של תגובות חיסוניות אנטי סרטניות.

שימוש בעכבר האנושי של BLT כמודל לתאי גזע מבוסס Gene Therapy גידול

סרטון זה מדגים בדיקה להערכת היעילות של טיפול אנטי-רטרו-ויראלי משולב פומי (cART אוראלי) במודל עכבר אנושי נגוע בנגיף חיסוני אנושי-1 (HIV-1). שילוב של תרופות המכוונות ל- HIV-1, כולל מעכבי שעתוק לאחור נוקלאוזיד ומעכבי העברת גדילי אינטגראז, ניתנים יחד עם תוסף תזונה ואנטיביוטיקה. בעקבות צריכת תערובת זו על ידי עכברים אנושיים נגועים ב- HIV-1, הדיכוי היעיל של שכפול ויראלי מוערך באמצעות בדיקות תקופתיות של העכברים.

טיפול אנטי-רטרו-ויראלי משולב אוראלי לטיפול בזיהום HIV-1 במודל עכבר אנושי

הסרטון מדגים טכניקה ליצירת מודל עכבר אנושי עם חסינות מהונדסת מבוססת תאי גזע נגד נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV). רקמת תימוס עוברית אנושית ותאי גזע המטופויטיים מהונדסים (HSC) מושתלים בכמוסת הכליה של עכבר מדוכא חיסון חמור. HSCs, המבטאים קולטני אנטיגן כימריים (CARs) נגד HIV, מעורבבים בתערובת חלבונים ג'לטינית המקדמת את לוקליזציה משותפת שלהם עם רקמת בלוטת התימוס. לאחר ההליך, HSCs להתמיין לתאים חיסוניים אנושיים שונים, וכתוצאה מכך לפתח מודל עכבר אנושי עם מערכת חיסון אנושית פונקציונלית נגד HIV.

בניית מודל עכבר אנושי עם חסינות מהונדסת נגד HIV

פרוטוקול זה מתאר את השיטות לבניית מודל עכבר מח עצם/כבד/תימוס אנושי עם חסינות מהונדסת מבוססת תאי גזע נגד זיהום HIV.

תאי גזע מהונדסים חסינות בהתבסס נגד HIV זיהום במודל העכבר האנושי

פרוטוקול זה מספק שיטה ליצירת עכברים humanized (hu-NSG) באמצעות intrahepatic הזרקה של תאי גזע hematopoietic אנושי לתוך ממוזגים קרינה עכברים NSG neonatal. העכבר hu-NSG חשופה הידבקות ב- HIV טיפול תרופתי קומבינטורית (עגלה), משמש כמודל pathophysiological מתאימים לחקירות שכפול וההשהיה HIV.

העכבר (hu-NSG) humanized הנד/SCID/IL2rγnull מודל עבור שכפול HIV ולימודי השהיה

פרוטוקול זה מספק שיטה אמינה להקמת עכברים הומניזציה עם מערכת החיסון האנושית ותאי הכבד. השני עכברים לקויה מחדש השיגה באמצעות הזרקה התוך הטחול של האדם hepatocytes ו CD34+ תאי גזע המטרופאיות רגישים לנגיף הכשל החיסוני האנושי-1 זיהום ונזק הכבד לכידה כפי שנצפתה ב . חולים נגועים...

הקמתה של הומניזציה Dual-TK-חעוגה מודל העכבר עבור הנגיף הקשור HIV פתוגנזה

אנו מתארים שיטה הרומן ליצירת הומניזציה כפולה עכברים התכונה המערכת החיסונית האנושית תפקודית יציבה מנופה של בני אדם כמו מיקרובידום. ניתן לעקוב אחר פרוטוקול זה ללא צורך בעכברים ללא חיידקים או מתקני גנוטוביוטיקה.

כפול-עכברים הומניזציה מודל שמציעות מיקרובידום יציבה אנושית כמו בטן האדם המערכת החיסונית

פיתחנו פרוטוקול עבור הדור והערכה של הומניזציה ונגיף הכשל החיסוני האנושי חעוגה מודל העכבר מבוסס על השתלת תא גזע, הנגיף החיסוני intravaginal האדם חשיפה, ו-droplet דיגיטלי PCR RNA כימות.

הומניזציה חעוגה עכברים עבור חשיפה Intravaginal HIV וטיפול בזיהום HIV

פרוטוקול זה מתאר שיטה חדשנית להעברת תרופות אנטי-רטרו-ויראליות משולבות דרך הפה המדכאות בהצלחה שכפול RNA של HIV-1 בעכברים אנושיים.

טיפול אנטי-רטרו-ויראלי משולב דרך הפה בעכברים נגועים ב- HIV-1

פרוטוקול זה מתאר כיצד השילוב של זיהום EcoHIV עם עכברי Tmem119-EGFP מציע מערכת ביולוגית רבת ערך לחקירת שינויים במיקרוגליה ומאגרים נגיפיים במודלים של מכרסמים של הפרעות נוירו-קוגניטיביות הקשורות ל-HIV.

זיהוי תאים נגועים ב-EcoHIV בעכברים טרנסגניים שעברו מניפולציה במיקרוגליה

חקור דינמיקת זיהום HIV באמצעות שלושה מודלים של עכברים מוחסרי חיסון עם תאים אנושיים. למד את ההבדלים בין זיהום כרוני, חריף והפעלה מחודשת של הווירוס במערכת החיסון האנושית.

כרונית, חריפה, ו-HIV ההפעלה מופעל מודלים העכבר חיסוני הומניזציה

גלה סרטונים נוספים