תא עיתונאי מקרופאג שיטה לבחון קולטן שיחת כמו-תיווך NF-kB/AP-1 איתות על שכבות חלבון Adsorbed על משטחים פולימריים

פרוטוקול זה מאפשר הערכה מהירה של פעילות NF-kappa-B ו- AP-1 במקרופגים עיתונאיים המתרבים על שכבות חלבון סופחים ותרומת מסלולי איתות תאים, כמו קולטני אגרה, לתגובה זו. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא הפשטות שלה, המאפשרת לתרבות התאים לנתח במהירות עבור פעילות NF-kappa-B ו- AP-1 באמצעות חקירה אנזימטית פשוטה. התחל על ידי המסת PMMA בכלורופורם בריכוז סופי של 20 מיליגרם למיליליטר בבקבוקון זכוכית 20 מיליליטר במכסה המנוע של אדים.

מניחים בר מגנטי בבקבוקון, ומערבבים את התערובת במשך שעתיים לפחות. כאשר כל המוצקים כבר מומסים, להעביר 400 microliters של פתרון PMMA למרכז של כל שקופית מיקרוסקופ זכוכית borosilicate לכל תנאי מתוכנן על מעיל ספין, ולסובב את PMMA על השקופית במשך שתי דקות ב 3, 000 סיבובים לדקה. לאחר מכן אחסנו את השקופיות המצוות בספין בקופסה נקייה עם ריסוס אתנול של 70%.