Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Wen-Yang Hu; Dan-Ping Hu; Lishi Xie; Lynn A. Birch; Gail  S. Prins

doi:10.3791/60357

בידוד של תאים כמו גזע מתרבויות תלת ממדיות ספרואיד

JoVE Journal
Cancer Research

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Cancer Research

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

בידוד של תאים כמו גזע מתרבויות תלת ממדיות ספרואיד

Full Text

9,592 Views

09:06 min

December 13, 2019

DOI: 10.3791/60357-v

Wen-Yang Hu¹, Dan-Ping Hu¹, Lishi Xie¹, Lynn A. Birch¹, Gail S. Prins^1,2,3

¹Department of Urology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, ²Department of Pathology, College of Medicine,University of Illinois at Chicago, ³University of Illinois Cancer Center, College of Medicine,University of Illinois at Chicago

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

שימוש בתאי אפיתל הערמונית העיקרי האנושי, אנו מדווחים על שיטה ביוארינקר הרומן החופשי של אפיון פונקציונלי של תאים גזע דמוי על ידי שמירת תווית מבוסס ספרואיד מבוססי. פרוטוקול צעד אחר צעד מתואר עבור BrdU, CFSE, או הרחוק האדום תיוג תא 2D; היווצרות ספרואיד תלת מימדי; זיהוי תאים מתמך בתוויות באמצעות כימיה חיסונית מדומה; ובידוד על ידי FACS.

בידוד תאי גזע נותר אתגר גדול עקב בידוד שותף של תאים סניטריים בשיטות הנוכחיות. פיתחנו סמן ביולוגי חדשני כדי לבודד תאי גזע הרה-חיים של תווי עורב מעורבים. היתרון העיקרי של זה מבוסס כדורית, שמירה על תווית assay, זה יכול להרחיב ולבודד תאי גזע חיים מן אביהם בתם על ידי FACS באמצעות CFSE או תיוג אדום רחוק.

בעוד טיפולים קונבנציונליים לחסל את רוב התאים סרטן הערמונית, תאי גזע סרטניים להישאר בשל התנגדות טיפולית, ובכך מניעים את התקדמות המחלה. בידוד תאים דמוי גזע יאפשר זיהוי של גנים חדשניים שיכולים להיות ממוקדים טיפולית להפוגת מחלות יעילה. ההחזקה שלנו ישימה לבידוד תאי גזע תקינים מרקמות ותאים שונים, ולחקר תאי גזע סרטניים.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos