מערכת הזרמה אוטומטית לעיבוד תאים בקנה מידה קטן

פרוטוקול זה מספק פתרון לחילופי מאגרים אוטומטיים סגורים ולריכוז עבור ייצור תאים בקנה מידה קטן. חשוב לציין, חילופי חיץ הוא מסוגל להתבצע עם התאוששות גבוהה משלוח של נפח קטן מאוד של מוצר מרוכז. משתמשים חדשים עשויים להיאבק כדי לבצע את כל שלבי האוטומציה.

תרגול תכנות שלבים אלה וביצוע ריצות בדיקה עם מדיום הן דרכים טובות להכיר את המכשיר. לפני תחילת חילופי החיץ, בדרגה 2 ראש זרימה למינארית, להשתמש מזרק ומחט הרכבה כדי להסיר 50 מיליליטר של תמיסת מלח משקית מלוחים 500 מיליליטר. החלף כרך זה ב-50 מיליליטר של אלבומין סרום אנושי של 20%, וקצר את תאי העניין מכלי התרבות שלהם.

לאחר הספירה, השתמש במזרק כדי לטעון את התאים לתוך שקית העברה, ולהשתמש במנעול לולר כדי לחבר את תיק ההעברה ערכת עיבוד חד-שימושית. לאחר מכן חבר את השקית שהוכנה בעבר של מאגר לשטוף את ערכת עיבוד חד שימוש. כדי להגדיר חילופי מאגרים אוטומטיים, פתח את ממשק המשתמש הגרפי של ההתקן ולחץ על לחצן התחל.

לחץ על חדש כדי ליצור פרוטוקול חדש, ולחץ על פקד כדי לבחור את השסתומים להיפתח ולסגור, מהירויות צנטריפוגלי ומשאבה, כיוון המשאבה, ואת הגורמים המפעילים פעולה. לאחר הגדרת כל הפרמטרים, לחץ על שמור. תלה את השקיות המתאימות המחוברות במכשיר והצב את ערכת העיבוד החד-פעמית במחשב.

לאחר מכן לחץ על לחצן התחבר והורד את התוכנית השמורדת. כאשר לחצן ההפעלה נדלק, הפרוטוקול מוכן להפעלה. כדי לבצע את חילופי המאגר האוטומטיים, פתח את המהדקים הידניים עבור צינורות תיק ההעברה ולחץ על התחל כדי ליזום את תוכנית חילופי המאגרים.

בסוף שלב אוטומציה שש, התהליך יושהה עקב הפעלת חיישן הבועה על ידי האוויר בשקית ריקה עכשיו. אם התיק אכן ריק, לחץ ליד כדי להעביר את התהליך לשלב הבא. לאחר סיום התהליך האוטומטי, סגור את כל מהדקי הצינורות ופתח את דלת ההתקן.

לאחר מכן הסר את הערכה החד-שימושית מההתקן ונתק את המזרק כדי לאפשר איסוף של התאים לצורך ניתוח עוקב. בדרך כלל, מיטת התא הנוזלי תופיע כמיוצגות בתמונה זו כאשר התאים מצטברים באמצע ולכיוון חזית הקונוס, חלל קטן בקצה התא שבו התאים אינם מצטברים ופתח גלוי בתוך תא טעינת הכניסה. המיטה הסלולרית הנוזלית עשויה להיות דחוסה בעת הצגת מאגר חדש כי הוא צמיגות שונה או צפיפות.

קצב זרימה גבוה עשוי להיות מיושם כדי לבחור עבור תאים חיים כמו תאים מתים הם קטנים וקלים יותר והוא יכול להיות נאלץ לצאת מהתא על ידי הגדלת קצב הזרימה. התהליך האוטומטי של זמן העיבוד של חילופי מאגרים קצר יותר מזה של תהליך חילופי המאגר הידני. בניתוח זה, שיעורי השחזור בין המדריך לתהליכים האוטומטיים היו דומים עבור שני סוגי התאים שנבדקו, וכדאיות התא לא הושפעה משני התהליכים.

התאים שנמצאו הפגינו שיעורי התפשטות דומים, יכולות לייצר ציטוקינים ופעילויות איידיאו, ללא קשר לסוג העיבוד. חשוב לזכור כי פרוטוקול זה משמש רק כקווי מנחה, ולכן משתמשים צריכים לתכנת את קצב הזרימה ואת מהירות הצנטריפוגה בהתאם לסוג התא והמאגר שלהם. חילופי מאגרים הם שלב ביניים בייצור תאים שעשויים לעקוב אחר הרחבת תרבות התאים או הקפאה וניסוח.

המטרה היא לפתח דרכים להקיף את התהליך כולו. צנטריפוגה נגדית היא פלטפורמה רב-תכליתית מאוד. מחקרים עתידיים יחקרו יישומים בבחירת תאים, כגון הסרת תאים מתים ובידוד תאי מונונוקלוס ממוצר chorisis.