Name: שיטה מתוקנת לגרימת ימפתית משנית בתוך הגפיים של עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-11-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: למד שיטה מתוקנת לגרימת ימפתית משנית בעכברים באמצעות ניתוח מיקרוכירורגי והקרנת קדם-ניתוח. מודל זה מאפשר מחקר פתופיזיולוגיה ואפשרויות טיפול חדשניות למשך לפחות שמונה שבועות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים מודים פיטר בוללן, ראש המעבדה ביו-רפואי להלוואות את הציוד הדרוש כדי להקליט את המדה לראות דרך מיקרוסקופים.

בעלי חיים היו שוכנו באוניברסיטת דרום דנמרק מתקן טיפול בעלי חיים לפי הנחיות מוסדי. כל ההליכים הכרוכים בנושאי בעלי חיים אושרו על ידי ניסויים בבעלי חיים Inspectorate, משרד הסביבה והמזון של דנמרק.
1. הקרנה טרום-ניתוח
הערה: הקרנה טרום ניתוח מתקיימת 7 ימים לפני הניתוח.
<ol><li>. לגרום להרדמה<ol>
<li>מניחים את העכבר בתוך תיבת אינדוקציה ולהגדיר את האידוי ל 3% isof, עם שיעור זרימת החמצן של 0.8 ליטר L/min כדי לגרום שאיפת הרדמה. הערה: לחילופין ניתן להשתמש בהרדמה, אך במשך הזמן הקצר של ההקרנה גורם להרדמה מספקת. לקבלת התוצאות המוצגות במאמר זה, השתמשו בעכברים C57BL6 נקביים בת 9 שבועות.</li>
		<li>ודא שהעכבר מורדם לגמרי על-ידי זנב או בדיקת צביטה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הצב את העכבר להקרנה.<ol>
<li>אם מסומם לחלוטין, להזיז את העכבר מהתיבה אינדוקציה ולמקם אותו תחת המקור של קרינה במיקום פרקדן ולקבוע בעדינות את הגפיים האחוריות עם קלטת. הערה: העכבר יישאר מסומם למשך זמן קצר של הקרינה.</li>
		<li>במקום משטח עופרת עבה 1.5 מ"מ כדי להבטיח שרק האזור שעובר ניתוח (כלומר, האזור המעגלי עם קוטר של 25 מ"מ סביב הברך) מקבל הקרינה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ניהול מנה של 10 הקרינה Gy בשיעור מינון של 5.11 Gy/מינימום (100 kVp, 10 mA). התראה: יש לנקוט אמצעי זהירות בטיחות בעת עבודה עם קרינה. במהלך ניסוי זה, כל הקרנה בוצעה בחדר מבודד קרינה, ומקור הקרינה הופעל רק כאשר כל אנשי הצוות עזבו ואטמו את החדר.</li>
	<li>מניחים את העכבר חזרה בכלוב שלו.</li>
</ol>2. התקנת ציוד
הערה: יש לבצע את הניתוח בחדר המוקדש להליכים כירורגיים. . המשטח הפעיל חייב להיות עקר
<ol><li>נקי ביסודיות כל משטחי האופרטיביים עם 70% אתנול. . תלבש רשת שיער וסרבל השתמש בכלי ניתוח סטריליים וכפפות סטרילי.</li>
	<li>. הכן הרדמה<ol>
<li>לצייר 1 מ ל של פנטניל (0.315 mg/mL), 1 מ ל של midazolam (5 מ"ג/mL), ו 2 מ ל של מים סטריליים. השתמש מזרקים ומחטים שונים עבור הרכיבים השונים.</li>
		<li>מערבבים פנטניל ומים סטרילי על ידי ריקון איטי של מזרקים לתוך צינור זכוכית סטרילי. כאשר מעורב, להוסיף midazolam כדי להשלים את פתרון העבודה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>. הכן משככי כאבים<ol>
<li>לצייר את 0.2 mL של בופרנורפין (0.3 mg/ml) ו 2 מ ל של תמיסת מלח.</li>
		<li>ערבב את אמצעי האחסון על ידי ריקון איטי של מזרקים לתוך צינור זכוכית סטרילי כדי להשלים את פתרון העבודה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הפעל את המיקרוסקופ וודא שהדלקת מספיקה, ושהמיקרוסקופ מותאם היטב לעיני המפעיל. הערה: יש לבצע את כל ההליכים הכירופלסטיים במיקרוסקופ הפעלה. טווח הגדלה של 4 x-25x מספיק.</li>
</ol>3. הכנה
<ol><li>שקול את העכבר לפני הניתוח על ידי הצבת העכבר במיכל ריק בקנה מידה נקי.</li>
	<li>. מנהל הרדמה<ol>
<li>לצייר את 0.1 mL של הרדמה לכל 10 גרם של משקל גוף העכבר. הכנס את מתת-עורי ההרדמה. כזריקת בולוס</li>
		<li>תן לעכבר לנוח בכלוב עם הרבה מצעים ומחסה במשך כ 10 דקות עד הרגעה מלאה. לבחון את עומק ההרדמה על ידי הערכת הרפיה שרירים ולבצע כפה או הזנב צביטה בדיקה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>כאשר הרגעה מלאה, לגלח את הגפיים האחוריות שנבחרו להליך באמצעות קוצץ חשמלי. הקפידו לנגב את השיער העודף.</li>
	<li>הפעל את מכשיר החימום, כגון משטח חימום ומכסים אותו במטלית כירורגית.</li>
	<li>הגדר את זרימת החמצן ל-0.8 L/min וחבר אותה באמצעות nosecone. . השתמש ב-100% חמצן הערה: nosecone הוא רק עבור משלוח חמצן ולא הרדמה.</li>
	<li>החל משחה אופטלמולוגית ולהזריק 0.5 mL של תת-עורי מלוחים, רצוי בתוך הבית של העכבר, כדי למנוע hypovolemia במהלך הניתוח.</li>
	<li>למקם את העכבר לניתוח.<ol>
<li>מניחים את העכבר על הבד כירורגי במצב פרקדן. . הניחו את הנוס1 מעל החוטם</li>
		<li>מתואם את סוף הגפיים בעדינות עם הקלטת כדי למנוע העכבר מתזוזה במהלך הניתוח.</li>
		<li>לחטא את העור באמצעות אלכוהול/כלורהקאיצין או אלכוהול/povidone יוד.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. כירורגיה
הערה: בדוגמה זו, האיבר האחוריות השמאלי (כאשר העכבר מוצג במצב פרקדן), נבחר עבור ההליך.
<ol><li>. תעשו חתך עגול<ol>
<li>הרם את העור באמצעות מלקחיים חלקים והצמד לפתח קטן כ-5 מ"מ הקרוב ביותר לפוסות הפוכטיל.</li>
		<li>שקופית חדה מספריים לתוך הפתיחה ולהצמיד לעבר הברך כך החתך מסתיים ממש מעל הברך. הקפידו לא לנקב את כלי הקיבול על ידי הרמת העור בעזרת מלקחיים תוך כדי חיתוך.</li>
		<li>להזיז את העכבר לתנוחה נוטה ולהמשיך קליפ מן הברך לכיוון פוסות popliteal עד החתך ההיקפי הושלמה.</li>
	</ol></li>
	<li>. מנתח את העור מתחת לברך<ol>
<li>בעדינות לנתח את האזור מתחת לברך עד כמה מילימטרים מעל הקרסול, על ידי פתיחה איטית וסגירה של מיקרו מספריים תוך הרמת העור עם מלקחיים.</li>
		<li>גזור בזהירות את הדבקויות הגלויות שנותרו באמצעות מיקרו-מספריים. השתמש מלוחים סטרילי באופן קבוע כדי לשמור על הרקמה לחות במהלך ההליך כולו.</li>
	</ol></li>
	<li>לנתח את העור בשפה האבובית של החתך ההיקפי, כך שניתן לפרק אותו עם מפסק אלסטי. הערה: המפסק מאפשר למפעיל לראות טוב יותר את כלי הלימפה האבובית ומונע את השפה האבובית מן הסטה במהלך הניתוח.</li>
	<li>בעוד שהוא עדיין במצב נוטה, לסובב את האיבר החוצה בעדינות ולקבוע אותו עם הקלטת, כך וריד ischiatic מוצג מן הנקודה ההכי הרבה ביותר של האזור חשוף לנקודה המרוחק ביותר.</li>
	<li>הכנס כ 0.01 mL של פטנט כחול V תת-עורי בין הבוהן השנייה והשלישית באמצעות מזרק 0.5 mL עם מחט של 30 G. לחץ בעדינות על כף היד כמה פעמים כדי להפיץ את הפטנט הכחול V. המחש את כלי הלימפה ואת הצומת לימפה דרך המיקרוסקופ כמו הפטנט כחול V ממלא את כלי הלימפה. הערה: אם הצבע הכחול של כלי הלימפה דוהה במהלך ההליך, בעדינות לעסות את הכף כדי לקדם את ספיגת, במקום להזריק יותר כחול פטנטים V. שימוש עודף של פטנט כחול V עלול להוביל דליפה וצביעה של הרקמה סביב כלי הלימפה אשר עשוי סכן את ההליך.</li>
	<li>אתר את המבנים החשובים: הצומת הלימפה popliteal (PLN), שני כלי הלימפה המרוחק לצומת לימפה (DLV1 ו DLV2), ואת כלי הלימפה אחד האבותיים לצומת לימפה (PLV). הערה: כל כלי הלימפה ניתן למצוא בסמוך לווריד ischiatic. כלי הלימפה האבודיים נמצא בדרך כלל המדילי לווריד, שני כלי הלימפה המרוחק נמצאים המדילי ולרוחב לווריד. הקיצורים של המבנים משמשים בווידאו הנלווה.</li>
	<li>הגדלה בבהירות להמחיש את PLV ו לישער אותו עם תפר ניילון 10-0 באמצעות מיקרו מחט מחזיק מיקרומלקחיים. לחץ על כף היד כמה פעמים כדי להבטיח כי אין פטנט כחול V עובר האבובית לתפר. הערה: זמירה את השומן המקיף את כלי הלימפה עשוי להיות הכרחי.</li>
	<li>חזור על שלב 4.7 לשער. את שני כלי הלימפה האלה לחץ על כפה מספר פעמים כדי להבטיח כי אין פטנט כחול V עובר האבופה לקשירה. אם כלי הלימפה לשקר קרוב וריד ischiatic נסה לבתר עוד יותר distally. הערה: בדוגמה זו, ניתן לראות שאחד מכלי הלימפה מתפוצץ עקב הקשירה המתמנת את זרימת הלימפה. כלי הלימפה לעתים קרובות לפצל מן הווריד יותר למטה.</li>
	<li>הסר את הצומת לימפה popliteal.<ol>
<li>לאתר את הצומת לימפה popliteal ולחתוך חור קטן עם מיקרו מספריים כדי לגשת אליו ולהסיר אותו עם מיקרולקחיים מיקרו מספריים. הערה: הצומת לימפה יש פנינה חלקה כמו משטח בניגוד לרקמת השומן שמסביב.</li>
		<li>כדי לבדוק אם הרקמה הוסרה היא צומת לימפה, למקם אותו במבחנה מלאה במים. הערה: אם הרקמה מורכבת משומן, הרקמה תצוף. , אם הרקמה היא צומת לימפה. הוא ישקע לתחתית</li>
	</ol></li>
	<li>להסיר את משטח שומן אינרירינאלה ואת הלימפה.<ol>
<li>לפני הסרת משטח שומן מעוקר, להשתמש מקריש דו קוטבית כדי לצרוב את כלי ריצה דרך השומן.</li>
		<li>לכרות את משטח השומן באמצעות מיקרולקחיים ומיקרומספריים. מהדק בעדינות את כלי הקיבול הקאולים הזורמים דרך השומן. לאחר מכן לכרות בעדינות את רקמת השומן באזור האינרירינרית. הערה: הצומת לימפה הממוקם בשומן הוא לעתים נדירות בצבע על ידי פטנט כחול V והוא יכול להיות קשה להבדיל מן השומן. הסרת משטח השומן בחתיכה אחת היא הדרך הטובה ביותר להבטיח את הצומת לימפה הוסר.</li>
	</ol></li>
	<li>לשטוף את הרגל ביסודיות עם תמיסת מלח סטרילי ולאשר דרך המיקרוסקופ כי כל שערות קטנות וחלקיקים הוסרו ביסודיות מהאזור כירורגי כדי למנוע זיהום וזיהום הפצע. . תוודא שאין דימום פעיל</li>
	<li>תפר את הקצוות העור למטה facia שריר עם תפרים ניילון 6-0 באמצעות מלקחיים ומחזיק מחט, עוזב פער של 2-3 מ"מ כדי להגביל את זרימת הלימפה שטחית. הערה: הווידאו הנלווה מציג דוגמה לתפרים גמורים.</li>
	<li>. לנהל משככי כאבים לצייר עד 0.1 mL של כאבים לכל 30 גרם של משקל גוף העכבר. הכנס את התת-עורי כאבים. בתור זריקת בולוס</li>
	<li>שוקלים את העכבר לאחר ניתוח להשוואה.</li>
	<li>מניחים את העכבר בכלוב בארון מחומם להחלמה.</li>
</ol>5. טיפול פוסט-פעיל
<ol><li>תן את העכברים בודדים בכלובים כדי להתאושש לאחר הניתוח עם מים ומזון libitum.</li>
	<li>לנהל את המינון תת עורית של 0.02 mL של בופרנורפין 3x מדי יום עבור 3 ימים עבור כאבים.</li>
	<li>עקוב אחר החיה מדי יום לריפוי הפצע המתאים, סימנים של כאב וזיהום. אם סימנים של זיהום נוכחים, להשתמש משחה אנטיביוטית.</li>
</ol>6. הקרנה לאחר הניתוח
<ol><li>שלושה ימים לאחר הניתוח, חזרו על ההליך להקרנה טרום ניתוח (שלבים 1.1-1.4).</li>
</ol>

<ol><li>Lawenda, B. D., Mondry, T. E., Johnstone, P. A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema%3A+a+primer+on+the+identification+and+management+of+a+chronic+condition+in+oncologic+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Lymphedema: a primer on the identification and management of a chronic condition in oncologic treatment.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 59 (1), 8-24 (2009).</li>
<li>Greene, A. K. Epidemiology and morbidity of lymphedema. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGreene%2C+AK+%22Lymphedema%3A+Presentation%2C+Diagnosis%2C+and+Treatment%22">Lymphedema: Presentation, Diagnosis, and Treatment</a>. Greene, A. K., Slavin, S. A., Brorson, H. , Springer International Publishing. New York, NY. 33-44 (2015).</li>
<li>Hespe, G. E., Nores, G. G., Huang, J. J., Mehrara, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+lymphedema-Is+there+a+chance+for+medication+treatment%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of lymphedema-Is there a chance for medication treatment?</a> Journal of Surgical Oncology. 115 (1), 96-98 (2017).</li>
<li>Grada, A. A., Phillips, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema%3A+Pathophysiology+and+clinical+manifestations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Academy+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Lymphedema: Pathophysiology and clinical manifestations.</a> Journal of the American Academy of Dermatology. 77 (6), 1009-1020 (2017).</li>
<li>Chang, D. W., Masia, J., Garza, R. 3rd, Skoracki, R., Neligan, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema%3A+Surgical+and+Medical+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lymphedema: Surgical and Medical Therapy.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 138 (3 Suppl), 209S-218S (2016).</li>
<li>Carl, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+Review+of+the+Surgical+Treatment+of+Extremity+Lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reconstructive+Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Systematic Review of the Surgical Treatment of Extremity Lymphedema.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 33 (6), 412-425 (2017).</li>
<li>DiSipio, T., Rye, S., Newman, B., Hayes, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+unilateral+arm+lymphoedema+after+breast+cancer%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Incidence of unilateral arm lymphoedema after breast cancer: a systematic review and meta-analysis.</a> The Lancet Oncology. 14 (6), 500-515 (2013).</li>
<li>Douglass, J., Graves, P., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-Care+for+Management+of+Secondary+Lymphedema%3A+A+Systematic+Review%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Neglected+Tropical+Diseases%22%5BJournal%5D)">Self-Care for Management of Secondary Lymphedema: A Systematic Review.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 10 (6), e0004740(2016).</li>
<li>Shih, Y. C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence%2C+treatment+costs%2C+and+complications+of+lymphedema+after+breast+cancer+among+women+of+working+age%3A+a+2-year+follow-up+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Incidence, treatment costs, and complications of lymphedema after breast cancer among women of working age: a 2-year follow-up study.</a> Journal of Clinical Oncology. 27 (12), 2007-2014 (2009).</li>
<li>Ridner, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+psycho-social+impact+of+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphatic+Research+and+Biology%22%5BJournal%5D)">The psycho-social impact of lymphedema.</a> Lymphatic Research and Biology. 7 (2), 109-112 (2009).</li>
<li>Gutknecht, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost-of-illness+of+patients+with+lymphoedema%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+European+Academy+of+Dermatology+and+Venereology%22%5BJournal%5D)">Cost-of-illness of patients with lymphoedema.</a> Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 31 (11), 1930-1935 (2017).</li>
<li>Hayes, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+prognostic+significance+of+secondary+lymphedema+following+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphatic+Research+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Prevalence and prognostic significance of secondary lymphedema following breast cancer.</a> Lymphatic Research and Biology. 9 (3), 135-141 (2011).</li>
<li>Danese, C. A., Georgalas-Bertakis, M., Morales, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+chronic+postsurgical+lymphedema+in+dogs%27+limbs%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">A model of chronic postsurgical lymphedema in dogs' limbs.</a> Surgery. 64 (4), 814-820 (1968).</li>
<li>Das, S. K., Franklin, J. D., O'Brien, B. M., Morrison, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+model+of+secondary+lymphedema+in+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">A practical model of secondary lymphedema in dogs.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 68 (3), 422-428 (1981).</li>
<li>Huang, G. K., Hsin, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+for+lymphedema+in+rabbit+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">An experimental model for lymphedema in rabbit ear.</a> Microsurgery. 4 (4), 236-242 (1983).</li>
<li>Tobbia, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphedema+development+and+lymphatic+function+following+lymph+node+excision+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Research%22%5BJournal%5D)">Lymphedema development and lymphatic function following lymph node excision in sheep.</a> Journal of Vascular Research. 46 (5), 426-434 (2009).</li>
<li>Lahteenvuo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+factor+therapy+and+autologous+lymph+node+transfer+in+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Growth factor therapy and autologous lymph node transfer in lymphedema.</a> Circulation. 123 (6), 613-620 (2011).</li>
<li>Honkonen, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+transfer+and+perinodal+lymphatic+growth+factor+treatment+for+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lymph node transfer and perinodal lymphatic growth factor treatment for lymphedema.</a> Annals of Surgery. 257 (5), 961-967 (2013).</li>
<li>Wang, G. Y., Zhong, S. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+experimental+lymphedema+in+rats%27+limbs%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">A model of experimental lymphedema in rats' limbs.</a> Microsurgery. 6 (4), 204-210 (1985).</li>
<li>Oashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+acquired+lymphedema+in+the+mouse+hind+limb%3A+a+preliminary+report%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">A new model of acquired lymphedema in the mouse hind limb: a preliminary report.</a> Annals of Plastic Surgery. 69 (5), 565-568 (2012).</li>
<li>Slavin, S. A., Van den Abbeele, A. D., Losken, A., Swartz, M. A., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Return+of+lymphatic+function+after+flap+transfer+for+acute+lymphedema%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Return of lymphatic function after flap transfer for acute lymphedema.</a> Annals of Surgery. 229 (3), 421-427 (1999).</li>
<li>Cheung, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+for+the+study+of+lymphedema+and+its+response+to+therapeutic+lymphangiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22BioDrugs+%3A+Clinical+Immunotherapeutics%2C+Biopharmaceuticals+and+Gene+Therapy%22%5BJournal%5D)">An experimental model for the study of lymphedema and its response to therapeutic lymphangiogenesis.</a> BioDrugs : Clinical Immunotherapeutics, Biopharmaceuticals and Gene Therapy. 20 (6), 363-370 (2006).</li>
<li>Rutkowski, J. M., Moya, M., Johannes, J., Goldman, J., Swartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secondary+lymphedema+in+the+mouse+tail%3A+Lymphatic+hyperplasia%2C+VEGF-C+upregulation%2C+and+the+protective+role+of+MMP-9%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Secondary lymphedema in the mouse tail: Lymphatic hyperplasia, VEGF-C upregulation, and the protective role of MMP-9.</a> Microvascular Research. 72 (3), 161-171 (2006).</li>
<li>Tammela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+differentiation+and+maturation+of+lymphatic+vessels+after+lymph+node+dissection+and+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Therapeutic differentiation and maturation of lymphatic vessels after lymph node dissection and transplantation.</a> Nature Medicine. 13 (12), 1458-1466 (2007).</li>
<li>Frueh, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+surgical+lymphedema+research--a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in surgical lymphedema research--a systematic review.</a> Journal of Surgical Research. 200 (1), 208-220 (2016).</li>
<li>Jorgensen, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Chronic+Lymphedema+in+a+Revised+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Quantification of Chronic Lymphedema in a Revised Mouse Model.</a> Annals of Plastic Surgery. 81 (5), 594-603 (2018).</li>
<li>Frueh, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+3D+volumetry+versus+conventional+measuring+techniques+for+the+assessment+of+experimental+lymphedema+in+the+mouse+hindlimb%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">High-resolution 3D volumetry versus conventional measuring techniques for the assessment of experimental lymphedema in the mouse hindlimb.</a> Scientific Reports. 6, 34673(2016).</li>
<li>Biau, D. J., Kerneis, S., Porcher, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistics+in+brief%3A+the+importance+of+sample+size+in+the+planning+and+interpretation+of+medical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">Statistics in brief: the importance of sample size in the planning and interpretation of medical research.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 466 (9), 2282-2288 (2008).</li>
<li>Korula, P., Varma, S. K., Sunderrao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+wound+contraction+by+point-to-point+adherent+splintage%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Inhibition of wound contraction by point-to-point adherent splintage.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 95 (4), 725-730 (1995).</li>
<li>Komatsu, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+Drainage+During+Wound+Healing+in+a+Hindlimb+Lymphedema+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Lymphatic+Research+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Lymph Drainage During Wound Healing in a Hindlimb Lymphedema Mouse Model.</a> Lymphatic Research and Biology. 15 (1), 32-38 (2017).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

קיימים מספר שלבים קריטיים בפרוטוקול זה. ראשית, חשוב כי החוקרים לנקוט אמצעי זהירות בטיחות כאשר עובדים עם רדיואקטיביות. שנית, במהלך הניתוח של פרוטוקול זה, חשוב להתחיל את ההליך ברגע שהעכבר מורדם ולסיים אותו ללא הפסקות מיותרות. זה חשוב להימנע מתקופה כירורגית ארוכה מדי עבור בעל החיים כדי למנוע את ההרדמה מאבדים אפקט במהלך הניתוח. מומלץ לנהל רק הזרקת בולוס אחת של הרדמה ולהשלים את ההליך הכירורגי בישיבה אחת. זהו גם צעד קריטי, לא לנהל יותר מדי פטנטים כחול V, כמו עודף פטנט כחול V יהיה לטשטש את הרקמה המקיפה את כלי הלימפה. אם הרקמה ש...

ימפתית מאופיין על ידי הצטברות של נוזל הלימפה המובילה נפיחות רקמות מקומי, אשר מתרחשת בעיקר בשל לקויי או זרימה של נוזל הלימפה בכלי הלימפה1. זרימת הלימפה יכול להיות לקוי או מופרת על ידי זיהום, חסימה, פציעה או פגמים מולדים במערכת הלימפה2. אלה התוצאה הסופית של הצטברות של נוזל הלימפה, אשר מוביל למצב כרוני של דלקת, וכתוצאה מכך פיברוזיס הבאים, כמו גם התצהיר של רקמת האדיפוז3. ניתן לסווג את ימפתית כימפתית ראשי או משני. ראשי ימפתית נגרמת על ידי חריגות התפתחותיות או מוטציה גנטית2,4. ימפתית משנית מתרחשת בשל מחלה מערכתית הבסיסית, ניתוח או טראומה2,4. ימפתית משנית היא הצורה הנפוצה ביותר של ימפתית בעולם2. במדינות מפותחות, הגורם השכיח ביותר של ימפתית משנית הוא טיפול אונלוגי כגון הקרנות שדון ובלוטות הלימפה לנתיחה5. ימפתית הוא הנפוץ ביותר בקרב חולי סרטן השד, אבל יכול גם לפתח בחולים עם גניקולוגיות, מלנומה, שמין או סרטן צווארשישה. זה הציע כי מתוך כל הנשים שאובחנו עם סרטן השד, 21% יפתחו ימפתית7.
ימפתית יכול להיות מלחיץ את המטופל הן פיזית ופסיכולוגית. חולים עם ימפתית יש סיכון מוגבר של זיהום5,8,9, איכות ירודה של החיים והוא יכול לפתח חרדה חברתית ותסמינים של דיכאון10. הסיבוכים של ימפתית כרונית להוביל לעלות גבוהה של טיפול ונטל מחלות מוגברת9,11. ממצאים הציעו גם כי ימפתית עשוי להיות משויך לסיכון מוגבר למוות לאחר טיפול בסרטן השד12. ניהול שמרני כגון דחיסה של האזור המושפע, ניקוז לימפה ידני וטיפוח כללי להישאר הגישה הקו הראשון. כרגע אין טיפול מרפא6. למרות שההתקדמות נעשתה בתחום הטיפול הכירורגי והרפואי, עדיין יש מקום לשיפור. מחקר נוסף, מתן תובנה הפתופסולוגיה והתקדמות של המחלה, יש צורך לאפשר לרופאים כדי לספק אפשרויות טיפול טוב יותר עבור חולים5.
מודלים בעלי חיים נמצאים בשימוש במחקרים פרה-קליניים כדי להבין את הפתופסיולוגיה של מחלות ולפתח אפשרויות טיפול פוטנציאליות. מספר מודלים ימפתית בעלי חיים שונים הוקמו כלבים13,14, ארנבים15, כבשים16, חזירים17,18 ומכרסמים19,20, . 21,22,23,24 המודל מכרסם נראה המודל החסכוני ביותר, כאשר בחקירת שחזור של תפקוד הלימפה, בשל מכרסמים נגיש בקלות יחסית נמוכה במחיר25. רוב המודלים עכברים התמקדו גרימת ימפתית בזנב של עכברים21,22,23. מודל הזנב הוא מאוד אמין, אבל את הטכניקה כירורגית מדויקת לגרימת ימפתית משתנה באופן משמעותי בחומר שפורסם קודם לכן. התוצאה היא תנודות במשך ובחוסן של הימפתית המפותחות שהוצגו בשנת הארגז הידוע25. טכניקות שונות משמשות גם לגרימת ימפתית במודל הגוף החדש והם גם להניב תוצאות משתנות, אבל המודל החדש עשוי להיות קל יותר להבין מנקודת מבט טרנסלבית. הדגמים הקודמים ימפתית כבר ה על ידי החלטה ספונטנית ימפתית ולכן מודל ימפתית להיות לאחר וקבע צריך25. החוקרים ניסו בעבר להגדיל את מינון הקרינה, כדי למנוע את הרזולוציה ימפתית ספונטנית, אבל זה הוביל לעתים קרובות לתחלואה חמורה הבאים25.
מודל זה מביא לימפתית משמעותיים מבחינה סטטיסטית, מבלי לגרום לתחלואה חמורה, על ידי שילוב מיקרו-ניתוחים עם קרינה. המודל תוקן ממודל כירורגי קודם על ידי הוספת מנה של הקרנה הגורמת ימפתית, מבלי לגרום לתחלואה קשה26. הוא גם מציע הזדמנות מצוינת להכשרה מיקרוכירורגית. לאחר גישה לציוד מיקרו כירורגי מיקרוסקופ הוא הכרחי, בשל מבנים אנטומיים קטנים של העכברים. הליך כירורגי ניתן לבצע כאשר המשתמש כבר לימד טכניקות מיקרו כירורגי בסיסיות, כגון תפירה עם כלי מיקרו כירורגי. המפעילים כי ביצעו את ההליך הזה כל קטעי וידאו הדרכה שנצפו על ידי acland על תנאי מראש של מיומנויות יקרוכירורגית (1981) וטכניקה מיקרותפר בסיסי (1985). אנו ממליצים לתרגל את ההליך הכירורגי 8-10 פעמים לפני השימוש בו במחקר. תרגול ההליך מבטיח כי בוצעו פחות טעויות ושהתהליך יכול להתבצע ביתר יעילות. כאשר שולט, ההליך הכירורגי ניתן לבצע בתוך 45 דקות.

<table><tbody><tr><td>10-0 תפר ניילון</td><td>S& T</td><td>12051-10</td><td></td></tr><tr><td>6-0 תפר ניילון - Dafilon</td><td>B בראון</td><td>C0933112</td><td></td></tr><tr><td>קרישה - ICC 50</td><td>ERBE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אפליקטורים עם קצה כותנה</td><td>Yibon medical co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ניתוח מלקחיים</td><td>לוטון</td><td>09-0190</td><td></td></tr><tr><td>מחזירים אלסטיים</td><td>בית החולים</td><td></td><td></td>האוניברסיטאי אודנסה</tr><tr><td>חשמל קליפר</td><td>Aesculap</td><td>GT420</td><td></td></tr><tr><td>פנטניל 0,315 מ"ג/מ"ל</td> כרית חימום <td>מטריקס</td><td></td><td></td></tr><tr><td>- PhysioSuite</td><td>Kent Scientific Corp.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane 1000mg Attane</td><td>Scan Vet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane וופורייזר - PPV</td><td>Penlon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרו מלקחיים</td><td>לוטון</td><td>1405-05</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט מיקרו</td><td>לוטון</td><td>25679-14</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיקרו</td><td>לוטון</td><td>10128-15</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים מיקרו קשירה</td><td>לוטון</td><td>43953-10</td><td></td></tr><tr><td>מזרק Microfine U-40 0,5 מ"ל</td><td>BD</td><td>328821</td><td></td></tr><tr><td>מזרק מיקרולנס 25 גרם</td><td>BD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מזרק מיקרולנס 27 גרם</td><td>BD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Midazolam 5 מ"ג/מ"ל (המלן)</td> מחזיק מחט <td>מטריקס</td><td></td><td></td></tr><tr><td>- עץ מעגל</td><td>לוטון</td><td>08-0065</td><td></td></tr><tr><td>ספוגיות לא ארוגים</td><td>Selefa</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Opmi pico microscope F170</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Patent Blue V - 25 מ"ג/מ"ל</td> מספריים <td>Guerbet</td><td></td><td></td></tr><tr><td>- Joseph</td><td>BD</td><td>RH1630</td><td></td></tr><tr><td>Siemens INVEON multimodality סורק פרה-קליני</td><td>פתרונות</td><td></td><td></td>פרה-קליניים של סימנס</tr><tr><td>מקור קרינה - D3100</td><td>Gulmay</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stata תוכנה סטטיסטית: מהדורה 15</td><td>StataCorp LLC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Temgesic - 0,2 מ"ג</td> משחת עיניים <td>Indivior</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vet - ויסקוטירות</td><td>Bausch & לומב</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

שיטה מתוקנת לגרימת ימפתית משנית בתוך הגפיים של עכברים

A Revised Method for Inducing Secondary Lymphedema in the Hindlimb of Mice

דגמי בעלי חיים הם בעלי חשיבות עליונה במחקר של ימפתית על מנת להבין את הפתופסולוגיה של המחלה, אלא גם כדי לחקור אפשרויות טיפול פוטנציאליות. מודל זה של העכבר מאפשר לחוקרים לגרום ימפתית משמעותי מתמשך לפחות 8 שבועות. ימפתית הוא המושרה באמצעות שילוב של הקרנות שבירה ואבלציה כירורגית של lymphatics. מודל זה דורש כי העכברים לקבל מנה של 10 אפור (Gy) קרינה לפני ואחרי הניתוח. החלק הכירורגי של המודל כולל הארכה של שלושה כלי הלימפה החילוץ של שני בלוטות הלימפה מתוך הגוף החוצה העכבר. לאחר גישה לכלי מיקרו כירורגי מיקרוסקופ חיוני, בשל מבנים אנטומיים קטנים של עכברים. היתרון של מודל זה הוא שהוא יוצר ימפתית משמעותיים סטטיסטית, אשר מספק בסיס טוב להערכת אפשרויות טיפול שונות. זוהי גם אפשרות גדולה וזמינה בקלות עבור הכשרה מיקרוכירורגית. המגבלה של מודל זה היא כי ההליך יכול להיות ארוך זמן, במיוחד אם לא לתרגל מראש. המודל מביא לימפתית באופן אובייקטיבי בעכברים, מבלי לגרום לתחלואה קשה ונבדק בשלושה פרויקטים נפרדים.

הליך זה שימש בעבר בשלושה ניסויים נפרדים. כל הניסויים נעשו על ידי חוקרים מובילים שונים אשר כולם מחברים שותפים של מאמר זה. בכל שלושת הניסויים, הטיפול הגדול נלקח לדבוק באותו תהליך כפי שמתואר בפרוטוקול זה. בכל שלושת הניסויים, ימפתית משנית המושרה באחד הגפיים האחרון בעוד האיבר הקודם השני שימש שליטה. אמצעי האחסון של הגפיים היו התוצאה העיקרית בכל שלושת הניסויים. איור 1 ממחיש את עיצוב המחקר.
כל העכברים עברו ...

מודל זה חיה מאפשר לחוקרים לגרום מימפתית משני משמעותי מבחינה סטטיסטית בתוך האיבר הארוך של עכברים, שנמשך לפחות 8 שבועות. המודל יכול לשמש כדי ללמוד את הפתופסולוגיה של ימפתית ולחקור אפשרויות טיפול הרומן.

Animal models are of paramount importance in the research of lymphedema in order to understand the pathophysiology of the disease but also to explore ...

המטרה הכוללת של שיטה זו היא לגרום בצקת לימפתית משנית עקבית בדיעבד של עכברים מבלי לגרום לתחלואה חמורה. שיטה זו יכולה לשמש כדי לגרום בצקת לימפתית משנית בדיעבד של עכברים. היתרון העיקרי של שיטה זו הוא שהיא פותרת בצקת לימפתית חסרת משמעות שתימשך לפחות שמונה שבועות מבלי לגרום לתחלואה חמורה.מישהו חדש בהליך עשוי להיאבק בטכניקות המיקרוכירורגיות. לכן אנו ממליצים על אימון מיקרוכירורגי וכמה הליכי תרגול כדי להבטיח תוצאה מוצלחת, אלא גם כדי להכין את החוקר כך שהוא או היא יוכלו לבצע את ההליך בצורה יעילה יותר. הגדר את מקור הקרינה והרס את העכבר כמתואר בפרוטוקול.מניחים כרית עופרת בעובי 1.5 מ"מ כדי להבטיח שרק האזור שעובר ניתוח מוקרן. הדוגמה המוצגת היא של עכבר לאחר הניתוח כדי להבהיר את האזור. מתן מנה של 10 הקרנה אפורה.החוקרים חייבים לנקוט אמצעי זהירות בעת עבודה עם קרינה. במהלך ניסוי זה כל ההקרנה בוצעה בחדר מבודד קרינה. ומקור הקרינה נדלק רק כאשר כל אנשי הצוות עזבו את החדר.לשקול את העכבר לפני הניתוח. בחן עומק הרדמה על ידי מבחן כף רגל או צביטת זנב. לגלח את הרגל שנבחרה להליך.הגדר את זרימת החמצן ל 0.8 ליטר לדקה. לחבר אותו עם חרוט האף. החל משחה עיניים.להזריק 0.5 מיליליטר של מלוחים תת עורית, רצוי ב scruff של העכבר כדי למנוע hypovolemia במהלך הניתוח. מניחים את העכבר על הבד הכירורגי במצב על-חושי. מניחים את חרוט האף על האף.לקבע את הקצה של hindlimbs בעדינות עם קלטת, כדי למנוע את העכבר מפני הסטה במהלך הניתוח. מרימים את העור במלקחי חלקים וחותכים פתח קטן כ-5 מילימטרים קרובים לאפוסה הפופליטית. החלק מספריים חדים לתוך הפתח וגזור לכיוון הברך, כך החתך מסתיים ממש מעל הברך.הקפד לא לנקב את כלי הדם הבסיסיים, על ידי הרמת העור עם מלקחים בעת חיתוך. להזיז את העכבר למיקום נוטה ולהשלים את החתך ההיקף. לנתח את העור לכמה מילימטרים מעל הזווית.זכור לשמור על הרקמה לחה עם מלוחים סטריליים במהלך כל ההליך. נסיגת העור של הפצע הפרוקסימלי עם מפשק אלסטי. וודאו שהווריד הסיאטי נראה כפי שמוצג.להזריק 0.01 מיליליטר פטנט כחול V תת עורית בין בוהן השנייה והשלישית. בעדינות ללחוץ על הכף כמה פעמים כדי להפיץ את V.The הפטנט הכחול ההפצה של V כחול פטנט ניתן לראות דרך המיקרוסקופ. המבנים הדרושים כדי להיות חזותיים הם, כלי הלימפה proximal, PLV, צומת הלימפה popliteal, PLN, כלי הלימפה הדיסטלי הראשון, DLV1, ואת כלי הלימפה דיסטלי השני, DLV2.הגדל כדי לדמיין את ה- PLV וללקט אותו באמצעות תפר ניילון 10-0. לחץ על הכף כדי להבטיח שאף פטנט כחול לא יעבור קרוב לקשירה. Ligate שני כלי הלימפה דיסטלי כפי שמוצג.לחץ על הכף מספר פעמים שוב כדי לוודא כי שום V כחול פטנט עובר קרוב לקשירה. בדוגמה זו, ניתן לראות כי אחד מכלי הלימפה מתפרץ עקב הקשירה המעכבת את זרימת הלימפה. הסר את צומת הלימפה popliteal, צומת הלימפה יש משטח חלק דמוי פנינה והוא נצבע על ידי V כחול פטנט בניגוד לרקמת השומן שמסביב.לפני הסרת כרית השומן inguinal, לצרוב את הכלי הזה כפי שמוצג. ואז להסיר את כרית השומן בחתיכה אחת. ודא כי אין דימום פעיל.זוהי דוגמה של צומת לימפה inguinal ממוקם. צומת הלימפה הממוקם כרית השומן inguinal הוא לעתים רחוקות בצבע על ידי V כחול פטנט יכול להיות קשה להבדיל מן השומן. הסרת כרית השומן בחתיכה אחת היא הדרך הטובה ביותר להבטיח כי צומת הלימפה הוסר.תפר את קצות העור עד fascia השריר, עם תפר ניילון 6-0 באמצעות מטח ומחזיק מחט, משאיר פער של שניים עד שלושה מילימטרים, כדי להגביל את זרימת הלימפה שטחית. זוהי דוגמה לתפרים המוגמרים, באפוסה הפופליטית, בצד הצדדי של הבד האחורי, מעל הברך, ובצוד המדיאלי של האחורי. לנהל משככי כאבים ולשקול את העכבר לאחר הניתוח, ולאחר מכן למקם אותו ארון מחומם להחלמה.חזור על ההליך להקרנה לפני הניתוח. גרף זה מראה את נפח hindlimb הממוצע המשולב של שלושה מחקרים נפרדים בשמונת השבועות שלאחר הניתוח. 31 עכברים נכללו בסך הכל.ציר ה-x מייצג שבועות לאחר הניתוח. ציר ה- y מייצג נפח אחורי במילימטרים מעוקבים. סרגלי החצים מייצגים את סטיית התקן.יש לצפות כי הנפיחות מהניתוח ואת בצקת הלימפה המושרה יקטן במהלך ארבעת השבועות הראשונים. לאחר ארבעת השבועות הראשונים אנו רואים מצב יציב יחסית של בצקת לימפתית. נפח השליטה hindlimb עולה במהלך שמונת השבועות, ובכך בקפדנות אומר את ההבדל בנפח בין hindlimb בצקת הלימפה ואת hindlimb שליטה, זה היה בלתי צפוי.הגורם הוא העריך להיות כי העכברים השתמשו hindlimb לא מופעל שלהם יותר מאשר hindlimb המופעל בשבועות שלאחר הניתוח. זה יכול להוביל היפרטרופיה של hindlimb שליטה ואולי להסביר את הגידול בנפח. לנתונים פרטניים על שלושת המחקרים שנכללו אנא קראו את הפרוטוקול.טבלה זו מציגה את מבחן ההשוואה המרובים של Sidak למדידות הנפח המשולבות של שלושת המחקרים הכלולים. ערך P מחושב מראה כי יש הבדל מובהק סטטיסטית בין hindlimbs עם בצקת לימפתית המושרה ואת השליטה hindlimbs, במהלך כל שמונת השבועות של מעקב. לניתוח סטטיסטי פרטני על שלושת הפרויקטים הכלולים אנא קרא את הפרוטוקול.שיטה זו גורמת בצקת לימפתית מובהקת סטטיסטית, נמשך לפחות שמונה שבועות. ההליך יכול לשמש כדי ללמוד את פטריות של בצקת הלימפה כדי לחקור אפשרויות טיפול חדשני. לאחר צפייה בסרטון זה, היית צריך להשיג הבנה של איך לגרום בצקת לימפתית משנית בדיעבד של עכברים, באמצעות שילוב של מיקרוכירורגיה הקרנה לפני ואחרי הניתוח.לאחר השליטה, ניתן לבצע את ההליך הכירורגי תוך 45 דקות.

a-revised-method-for-inducing-secondary-lymphedema-hindlimb

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פיתחנו hindlimb alternant פריקה מודל בעכברים. היתרון העיקרי של השיטה שלנו hindlimb זנב טבעת פריקה על הטכניקה המקובלת זנב המתיחה מורי-הולטון היא הליך פשוט פשוט זה ממזער הלחץ על החיה.

שיטת Alternant את המודל המסורתי של נאס&quot;א פריקה Hindlimb ב עכברים

סרטון זה מתאר טכניקת in vivo ליצירת לימפאדמה בזנב מורין, הצטברות נוזלים חריגה בחלל הרקמה הבין-תאית המובילה לנפיחות בזנב. המודל מוחל על מנגנוני לימוד וטיפול בלימפדמה.

מודל לימפדמה של זנב מורין: טכניקת In Vivo ליצירת לימפאדמה מתמשכת בזנב מורין

בלוטות הלימפה הן הרקמות החיסוניות המתזמרות את התגובה החיסונית והן יעד קריטי לחיסונים. Biomaterials הועסקו כדי למקד טוב יותר בלוטות הלימפה כדי לשלוט על משלוח של אנטיגנים או אדג'ובנטים. מאמר זה מתאר טכניקה המשלבת רעיונות אלה כדי להזריק חלקיקי פולימר תואמים ביולוגית לתוך בלוטות הלימפה.

הזרקת בלוטות תוך-לימפתיות של חלקיקי פולימר מתכלים

חיסון המניעה והטיפולי לעתים קרובות לא מצליח לעורר תגובה חיסונית חזקה בשל ניקוז שבוע של החיסון לבלוטות הלימפה ומעורבות עניות וכתוצאה מכך של תאים חיסוניים. על ידי הזרקה ישירה של חיסון לבלוטות הלימפה, הזרקת intralymphatic כביכול, יעילות חיסון ניתן לשפר מאוד וניתן להפחית מינוני חיסון.

Intralymphatic חיסוני וחיסון בעכברים

מודל הרומן הזה להשתלה הגפיים האחוריות orthotopic בתוך העכבר, החלת טכניקה השרוול הלא תפר עבור השקה סופר-כלי הדם, מספק כלי רב עוצמה עבור מחקר אימונולוגי מכניסטית in vivo הקשורים אלוגרפט מרוכבים vascularized (VCA).

Orthotopic הינד לימב השתלה בבית העכבר

פרוטוקול לחסום את זרימת הלימפה על ידי תפירה כירורגית של כלי לימפה שונים מוצג.

חסימת זרימת הלימפה על ידי תפירת כלי לימפה אפילנט בעכברים

לימפאדמה היא נפיחות בגפיים הנגרמת על ידי תפקוד לקוי של הלימפה. אנו מתארים מודל זנב מורין כרוני של ביצנית לימפה ושימוש חדשני בטכנולוגיית ננו-טראנספקטו רקמות (TNT) להעברת מטען גנטי לזנב.

מודל לימפאדמה זנב מורין

מאמר זה מדגים גישה כירורגית יעילה ליצירת איסכמיה חריפה בעכברים עם חתך קטן. גישה זו יכולה להיות מיושמת על ידי רוב קבוצות המחקר ללא כל שדרוגי מעבדה.

מודל כירורגי מותאם של איסכמיה בגפיים אחוריות ב- ApoE-/- עכברים באמצעות חתך מיניאטורי

התכנון הניסיוני המוצג כאן מספק מודל רבייה שימושי למחקרים של תאי CD8+ T ספציפיים לאנטיגן במהלך גרורות בלוטות הלימפה (LN), אשר אינו כולל את ההפרעה של תאי CD8+ T עוברי אורח.

ניקוז גרורות בלוטות הלימפה מודל להערכת הדינמיקה של תאי CD8+ T ספציפיים לאנטיגן במהלך הגידול

הפרוטוקול נועד לתאר מודל עכברי ליצירת הישנות של לוקמיה לימפובלסטית חריפה, בהתבסס על הדינמיקה של התגובה לכימותרפיה אינדוקציה.

מודל עכברי של הישנות לוקמיה לכימותרפיה אינדוקציה ללוקמיה לימפובלסטית חריפה

למד שיטה מתוקנת לגרימת ימפתית משנית בעכברים באמצעות ניתוח מיקרוכירורגי והקרנת קדם-ניתוח. מודל זה מאפשר מחקר פתופיזיולוגיה ואפשרויות טיפול חדשניות למשך לפחות שמונה שבועות.

שיטה מתוקנת לגרימת ימפתית משנית בתוך הגפיים של עכברים

גלה סרטונים נוספים