Name: סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-11-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: למד שיטת השתלת כבד אורתוטופית בחולדות עם חיבור מחדש של עורק הכבד לשיפור שרידות המקבלים. מודל זה מחקה השתלות אנושיות ומפחית סיבוכים נוירולוגיים וכבדיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה מומן באמצעות כספים מהתוכנית להשתלת איברים מרובי איברים ב-UHN ותמיכה מהקרן המערבית של טורונטו ג'נרל וטורונטו.

לסופרים אין מה לחשוף.

מודלים קטנים להשתלת כבד בעלי חיים חשובים להבנת חסינות להשתלה וזיהוי אסטרטגיות טיפוליותחדשניות 32. מודל השתלת כבד בעלי חיים קטן אידיאלי משכפל את כל השלבים של ההליך האנושי, כולל חיבור עורקי. זה יכול להיות מאתגר לפרש תוצאות מדגל OLT חולדה, כמו רוב הגרסאות אינם משלבים צעד anastomosis HA, אשר מוביל שיעור גבוה יותר של סיבוכים ותוליות42. כמה הליכי שחזור השתמשו בעורק הכליה, אשר דורש הסרת הכליה27. פרוטוקול זה מונע הסרת איברים, כפי שהוא מעבר למה שקורה בהליך האנושי.
שחזורים עורקים יכולים להתבצע גם על ידי מניפולציה של חבי העורקיםחולדה 31. עם זאת, שיטות אלה דורשות ניתוח נרחב והידוק של העורקים. אם זמן המלחציים הוא ממושך, אז חולדת הנמען יהיו תוצאות גרועות הקשורות איסכמיה דיסטל43. בבני אדם, טכניקה כירורגית LT כרוכה קשירה וחלוקה של העורק גסטרו-ודם המטופל (GDA). עם זאת, התכונות הפיזיולוגיות והאנטומיות של מכרסמים להפוך השתלה באמצעות טכניקה זו מאתגרת יותר מבחינה פיזיולוגית, עלול להוביל לסיבוכים (כלומר, נמק של הלבלב צינור מרה35 ודליפת מרה44). החיבור העורקי מחדש בפרוטוקול זה נועד לעקוף אתגר זה, לשמור על זרימת דם צינור, ולשפר את תוצאות הנמען.
השימוש בשרוול טכניקה סטנינג לשחזור של חולדה HA תואר בעבר27. בטכניקה זו, סטנט משמש כמדריך, והעורק משוחזר מתא המטען הצליאק התורם לנמען משותף HA. לאחר מכן, הנמען נפוץ HA נותח ולאחר מכן, GDA הנמען קשור27. כתוצאה מכך, אספקת הדם לחלק התחתון של הנמען BD וראש הלבלב עלולה להיות בסכנה. הוא האמין כי זרימת הדם הנלוות לאזור זה לעתים קרובות מספק זרימת דם לקויה לתעלות המרה. לדוגמה, פרוטוקול זה בודק את GDA הנמען תחילה עם קליפ microvascular ולאחר מכן מחלק את BD הנמען. כאשר GDA מהודק, BD מחולק אינו מדמם. לאחר הסרת מהדק GDA, דימום מהיר מן ה-BD נצפתה. פרוטוקול זה, אשר שומר על זרימה טובה לציבר מרה הנמען מחולק, מגן על הפיזיולוגיה של רקמת הכבד הנמען על ידי מתן זיגת דם כבד נאותה ומניעת פגיעה בכבד היפוקסי לאחר OLT.
בצד התורם, סטנט HA מוכנס לתוך תא המטען צליאק במהלך הכנת השתל בקלות על ידי יצירת תיקון מתא המטען צליאק, עורק קיבה שמאל, עורק הטחול. ניתן להכניס את סטנט דרך הפתח הרחב, וזה פחות קשה מאשר לנסות להכניס את סטנט לתוך גזע הצליאק לבד. נמצא כי 24 G הוא גודל אידיאלי לשימוש עבור סטנט HA. אורך סטנט צריך להיות 1.0-1.5 מ"מ אורך, כי זה פועל כשוהר פתוח כדי לאפשר HA הנכון של המטופל להסתכם בקלות לתוך HA המשותף של התורם. עם תשומת לב זהירה למקום שבו 10-0 תפר את'ילון ממוקם, דם זורם דרך חיבור זה לעולם לא לגעת סטנט ישירות, ו HA הנכון של המטופל יהיה להגן עליו מבפנים, הפחתת הסיכון לסיבוכים. חשוב לציין, HA של התורם הוא אף פעם לא מהודק על מנת למנוע vasospasm. ההצלחה של שחזור עורקים מוערכת על ידי השארת GDA התורם פתוח. anastomosis מוצלח תוצאות זרימת דם טובה מן GDA התורם לאחר שחזור הושלמה.
בפרוטוקול זה, בדומה לאחרים, חיבור מחדש SHVC הוא הצעד האיטי ביותר ובסופו של דבר מכתיב את משך השלב anhepatic. ככל שמשך הזמן anhepatic עולה, הסיכון לפציעה איסכמית ותפקוד בכבד עולה45. מרכיב קריטי נוסף של דגמי חולדות OLT הוא הגדלים של השתל, סטנטים, ואזיקים. אם השתל קטן מדי, השתל עלול לסובב או להתהפך, ולחסום את חיבורי כלי הדם. גודל סטנטים ואזיקים עשוי לדרוש התאמות בהתאם לגיל, מין, משקל, ומתח של החולדה. גודל האזיקים המשמשים כאן נבחר כמתואר קודםלכן 28, וגודל שרוול אחד ששלט עבור גודל חולדה שימש. לא היו סימנים של מצוקה או סיבוכים (כלומר, גודש בכבד, בצקת, ascites, או splenomegaly) במהלך תקופת המעקב (עד כה: חציון = 133 ימים לאחר הניתוח, מינימום = 115 ימים לאחר הניתוח, מקסימום = 161 ימים לאחר הניתוח). מחקרים נוספים כדי לקבוע את הגודל המתאים של PV ו- IHVC עבור זנים שונים חולדה חשבונאות הן גיל ומין מוצדקים.
פרוטוקול OLT חולדה שונה זה משתמש באזיקים מודפסים בתלת-ממד עבור PV ו- IHVC, כמתוארבעבר 39,40. השיטות הקיימות לחיבור PV ו- IHVC כוללותטכניקת מיקרו-שכנוע 32,טכניקת שרוול 46, וטכניקת סד זמניתזעירה 47. טכניקת השרוול המודפסת בתלת-ממד נבחרה, שכן היא מאפשרת לתקינה של גודל השרוול על פי זן חולדות וקלה להכנה ולשימוש. ניתן להדפיס בבת אחת כמויות גדולות של אזיקים עם אותם ממדים. המשטח החלקי של השרוול יש שני חריצים כדי לסייע עם אבטחת קשרים ולמנוע החלקה. זנב משולב גם בעיצוב השרוול כדי לאפשר מניפולציה קלה יותר של השרוול. בסך הכל, הוא האמין כי שילוב אזיקים מודפסים 3D מוביל שיעורי הצלחה גבוהים ושחזור של הליך OLT על ידי קיצור זמן anhepatic. נקבע כי טכניקה זו גם מקצרת את עקומת הלמידה הכירורגית.
לסיכום, הפרוטוקול המתואר ביסס מודל הדומה יותר להשתלת כבד אנושי על ידי שילוב שלב חיבור מחדש של העורקים. פרוטוקול זה יכול להיות מותאם ללמוד היבטים חיסוניים וכירורגיים רבים של השתלת כבד והוא יכול לשמש מודל כדי לבדוק התערבויות טיפוליות רומן רלוונטי להשתלה.

הנטל העולמי של מחלת כבד ממשיך לגדול, עם עלייה של 30% במקרי מוות הקשורים למחלות כבד בין השנים 2005 ל-20131,,2. השתלת כבד היא לעתים קרובות המפלט היחיד עבור חולים עם מחלת כבד בשלב הסופי. הכבד הוא האיבר המוצק השני בתדירות הגבוהה ביותר, ומספר השתלות הכבד שבוצעו ברחבי העולם עלה ב-7.25% בין השנים 2015 ל-20161,2. למרות השכיחות שלה, שיעורי ההישרדות לאחר ההשתלה הפכו קיפאון3,4,5. שיעור ההישרדות של 15 שנה החולה הוא דיווח להיות 53%, ואת 20 שנה שיעור ההישרדות החולה עשוי להיות נמוך כמו 21%3,5. אמנם יש יוזמות אימונוביולוגיה חדשות ומלהיבות שעשויות להוביל לטיפולים חדשים ותוצאות קליניות משופרות, אבל עדיין אין מודל בעלי חיים קטן ואמין שבו ניתן לבחון אותם.
מודל OLT חולדה היה בשימוש נרחב בחקירת השתלת כבד, כוללדחייה 6,7 ,,8,9,,10, עמידותחיסונית 11,השתלת איסכמיה-reperfusion8,פציעה 12,דיכוי חיסוני 13, ופציעה בעץהמרה 14,15,16,17. עם זאת, חיסרון של המודל בצורתו הנוכחית הוא התמליות והתמותה הגבוהה לאחר הניתוח18,19. זהו חסרון רציני המנוכה למבצע האנושי, והוא פוגע ביכולת להסיק מסקנות רלוונטיות קלינית מהמודל20.
בנוסף, חלק גדול של חולה זו ניתן לייחס לחיבור מחדש של עורק הכבד חסר או לא מושלם (HA)18. למרות צעד קריטי בהשתלת כבד אנושי, קשיים טכניים נוטים לסכן חיבור מחדש HA במודל OLT חולדה. כתוצאה מכך, צינור מרה (BD) anastomosis הוא קלוש ותוצאות שיעור גבוה של דליפת מרה ונמק BD21. מעבר לשכיחות הגבוהה שלסיבוכים מרה 22, היעדר זרימה עורקי משנה את הפיזיולוגיה של הכבד השתל לאחרהשתלה 23, עם היפוקסיה בשתל כבדהתורם 24 ונזק לכבד שנצפה באונהמודלק 19,25,26. חולדה OLT ללא חיבור מחדש עורקי גם נוטה לקדם פיברוזיס27. פרוטוקול OLT חולדה המתואר להלן מטפל בבעיות אלה על ידי שילוב שלב שחזור HA פשוט עם עכברוש שפורסם בעבר OLTשיטה 28, וכתוצאה מכך שימור של parenchyma הכבד ושיעורי הישרדות משופרים.
להשתלת כבד יש שלושה שלבים: (1) חילוץ של שתל הכבד מהתורם, (2) הכנת שתל הכבד התורם, ו-(3) החלפת הכבד הנמען בשתל הכבד. ההליך כולל מניפולציה של חמישה מבנים אנטומיים: קאווה וונה נחותה suprahepatic (SHVC), ויריד פורטל (PV), קאווה וונה נחותה אינפרא-הרפתית (IHVC), עורק הכבד (HA) ותעלות מרה (BD).
OLT בחולדה הוצג לראשונה על ידי לי ואח '. באמצעות anastomosis microsuture של SHVC, PV ו- IHVC, וטכניקה משיכה דרך עבור BD29. מודל זה שופרה מאוחר יותר באמצעות הטכניקה שני שרוול בשנת 197930. מאז, הוצעו מספר טכניקות חלופיות, כאשר הרוב מתמקדים באנסתומוזיס ורתי ובשימוש בטכניקה דו-שרוולית עם כמה שינויים31. למרות ANastomosis HA תואר בעבר במודל OLT חולדה באמצעות טכניקות כגון microsuture, שרוול, שרוולים תוך לומים26,,31, 32,33,,34,טכניקותאלה דורשות לעתים קרובות כישורי מיקרוכירורגיים מאומנים מאוד, לשנות באופן משמעותי פיזיולוגיה חולדה, הם נפגעים על ידי פקקת ו / או סיבוכים biliary27,35.
יתר על כן, הבחירה של הליך כירורגי יכול גם להשפיע על הזמן anhepatic (זמן מ הידוק PV כדי reperfusion של שתל באמצעות PV מחדש), שהוא קריטי להצלחה של השתלת כבד חולדה. באופן ספציפי, שיעורי הישרדות גבוהים נצפו עם זמני anhepatic של 15-20 דקות36, ו 30 דקות הוא הגבולהעליון להצלחה 37,38. לכן, המטרה של שיטה זו היא ליישם מודל OLT עכברוש כירורגי פחות פולשני וקלות יותר לאימוץ כי הוא מסוגל לחבר מחדש את עורק הכבד, לקדם זיגה יעילה של הכבד המושתל, לשמור על זרימה לציבר מרה המטופל, ולשמר את מצבו הפיזיולוגי של המטופל.
מפורטים הנה כל השלבים של פרוטוקול מתוקן זה, כולל מניפולציה של תא המטען הצליאק של הכבד התורם, כמו גם את השימוש של 1) סטנט 1.5 מ"מ לבצע חיבור שרוול מחוץ לאלומיניום עם המטופל תקין HA, 2) תפר פועל לשחזור SHVC, 3) שני אזיקי פלסטיק בהדפסת 3D לשחזור PV ו- IHVC39,40, 4) חיבור מחדש של שרוול מיקרווסקולרי עבור HA18,27,41 ו- 5) טכניקת סטינגטון BD שתוארהקודם לכן 28. שני צעדים נוספים כלולים גם: סומק קר דרך PV, משטר אנטיביוטיקה המבוסס על ממצאים קודמים17. פרוטוקול OLT ממוטב זה ממזער סיבוכים ותחלואה perioperative ובאופן הדוק יותר מודלים הליך ההפעלה הכירורגית המועסקים בהשתלת כבד אנושי.

<table><tbody><tr><td>10-0 Ethilon</td><td>Ethicon</td><td>2830G</td><td>10-0 Ethilon Black 1X5 אינץ' BV100-4 מתחדד</td></tr><tr><td>10 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>B302995</td><td>Luer-Lok, סטרילי, חד פעמי</td></tr><tr><td>1 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>B309628</td><td>Luer-Lok, סטרילי, חד פעמי</td></tr><tr><td>20 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>B301031</td><td>Luer-Lok, סטרילי, חד פעמי</td></tr><tr><td>שרוול מודפס בתלת מימד עבור IHVC</td><td></td><td></td><td>שרוול</td></tr><tr><td>מודפס תלת מימד</td> מותאם אישית עבור PV <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מודפס תלת מימד מותאם אישית עבור IHVC</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מודפס תלת מימד מותאם אישית עבור PV</td><td></td><td></td><td>מזרק מותאם אישית</td></tr><tr><td>3 מ"ל</td><td>BD</td><td>B309657</td><td>Luer-Lok טיפ, סטרילי, חד פעמי</td></tr><tr><td>4-0 Sofsilk</td><td>Coviden</td><td>GS-835</td><td>Wx משי קלוע מקודד, 30 אינץ', תפר 1-מחט 26 מ"מ אורך 1/2 מעגל מחט נקודת התחדדות</td></tr><tr><td>5-0 מונוקריל</td><td>אתיקון</td><td>Y433H</td><td>מונופילמנט לא צבוע 1X27 אינץ' TF</td></tr><tr><td>5 מ"ל מזרק</td><td>BD</td><td>B309646</td><td>Luer-Lok טיפ, סטרילי, חד פעמי</td></tr><tr><td>7-0 משי</td><td>טלפלקס רפואי</td><td>103-S</td><td>שחור</td></tr><tr><td>8-0 פרולן</td><td>אתיקון</td><td>2775G</td><td>8-0 פרולן כחול 1X24 אינץ' BV130-5 EVP מחזיק מחט מיקרו חמוש כפול</td></tr><tr><td> ללא תפיסת</td><td>מכשירים כירורגיים של Aesculap</td><td>FD231R</td><td>מעוקל 120 מ"מ, 4 3/4 ופריים;</td></tr><tr><td>מחזיק מחט Barraquer, לסתות עדינות במיוחד 8.0 מ"מ, מעוקל עם מנעול חיצוני</td><td>Rumex International Co.</td><td>8-025T</td><td>גודל קטן, מחזיק מחט טיטניום</td></tr><tr><td>Barraquer, לסתות עדינות 12.0 מ"מ, מעוקלות עם מנעול</td><td>החוצה Rumex International Co.</td><td>8-021T</td><td>גודל קטן, טיטניום</td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard BC 22 GA x 1.00 IN</td><td>BD Angiocath / Autoguard</td><td>382523</td><td>22 גרם x 1.00 אינץ' (0.9 מ"מ x 25 מ"מ) קטטר ללא כנפיים, 37 מ"ל/דקה</td></tr><tr><td>BDPrecisionGlide מחטים חד פעמיות: שיפוע רגיל - דופן רגילה.</td><td>BD</td><td>B305106</td><td>מחטי נירוסטה PrecisionGlide עם רכזות פוליפרופילן שקופות, מקודדות בצבע. מחט מזרק 22 G</td></tr><tr><td>BD Precisionglide 21G</td><td>BD</td><td>305167</td><td>מד 21, אורך 1.5 אינץ', מחט היפודרמית</td></tr><tr><td>BD Precisionglide מחט מזרק 30G</td><td>BD</td><td>305128</td><td>מד 30, אורך 1 אינץ', מחט היפודרמית</td></tr><tr><td>תמיסת Betadine מאת Purdue Products LP</td><td>Purdue Products Lp</td><td>67618-150-17</td><td>10% פובידון&ndash; תמיסה מקומית יוד USP</td></tr><tr><td>הזרקת Bupivacaine BP 0.5%</td> <td>SteriMax Inc.</td><td>DIN:02443694</td><td>0.5% (100 מ"ג/20 מ"ל)</td></tr> <tr><td>מלקחיים קשירה מעוקלים</td><td>Duckworth & פלטפורמות קשירה של קנט</td><td>2-501E</td><td>6 מ"מ, פירים ישרים, ידית שטוחה, אורך 88 מ"מ</td></tr><tr><td>בקר טמפרטורת DC</td><td>FHC Inc.</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>DK מספריים לאיריס (מעוקל)</td><td>Duckworth & קנט</td><td>1-211B</td><td>טיפים קהים, אורך חיתוך 4 מ"מ, אורך קצה לציר 11 מ"מ, ידית עגולה, אורך 107 מ"מ</td></tr><tr><td>אתנול, 200 הוכחה (100%), USP, Decon Labs</td><td>Decon Labs, Inc.</td><td>2716</td><td>לדלל ל-70% עם d2H2O</td></tr><tr><td>מפסק חוט מתכוונן</td><td>עדין Fine Science Tools</td><td>17004-05</td><td>התפשטות מקסימלית: 3.5 ס"מ, עומק 5 ס"מ</td></tr><tr><td>מכשיר הרווארד Isoflurane Isoflurane Funnel-Fill Vaporizer</td><td>Harvard Appartus Limited</td><td>34-1040SV</td><td></td></tr><tr><td>Heparin LEO (הפרין נתרן)</td> <td>LEO Pharma Inc.</td><td>DIN:00453811</td><td>10,000 יחב"ל/10 מ"ל</td></tr><tr><td>Ice-Pak</td><td>Cryopak</td><td>FIP88016</td><td>4.00 אינץ' x 7.00 אינץ', עובי 1.50 אינץ'</td></tr><tr><td>Isoflurane United States Pharmacopeia (USP) 99.9%</td> <td>Piramal Healthcare Limited</td><td>DIN: 02231929</td><td>250 מ"ל, הרדמה באינהלציה, NDC 66794-017-25</td></tr><tr><td>מלקחיים לבקרת תפרים מתכווננים דרך הלחמית</td><td>Duckworth & פלטפורמות</td> קשירה מלוטשות מאוד של קנט <td>2-502N</td><td>5 מ"מ, פירים ישרים, ידית שטוחה, אורך 84 מ"מ</td></tr><tr><td>USP מוזרק של רינגר לקטט, 1000 מ"ל</td><td>בקסטר ושות'.</td><td>DIN: 00061085</td><td>JB2324</td></tr><tr><td>מקפרסון קשירת מלקחיים</td><td>דאקוורת' & Kent</td><td>2-500E</td><td>פלטפורמות קשירה 6 מ"מ, פירים ישרים, ידית שטוחה, אורך 90 מ"מ</td></tr><tr><td>מספריים מצנבאום - 14.5 ס"מ</td><td>Fine Science Tools</td><td>14024-14</td><td>ישר חד/קהה</td></tr><tr><td>Micro Kitzmiller Clamp</td><td>Scanlan</td><td>3003-630</td><td>אורך לסת 23 מ"מ, אורך 11 ס"מ</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ-Leica M525 F20</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>אין מספר קטלוגי</td></tr><tr><td>ספוגי</td> <td>גזה לא ארוגיםFisherbrand</td><td>22-028-556</td><td></td></tr><tr><td>Olsen-Hegar עם חותך תפרים</td><td>Fine Science Tools</td><td>12002-14</td><td>15 מ"מ קצה חיתוך, 2 מ"מ משטח לסת - 14 ס"מ</td></tr><tr><td>OptixCare סיכה לעיניים, 25 גרם</td><td>OptixCare</td><td>ES-KE8O-69U1</td><td>לשעבר Optixcare חומר סיכה כירורגי לעיניים</td></tr><tr><td>Piperacillin מלח נתרן</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P8396</td><td>פניצילין אנלוגי</td></tr><tr><td>פוריטני 3 אינץ' ספוגית כותנה סטנדרטית עם ידית עץ</td><td>Puritan Medical Products Company LLC</td><td>803-WC</td><td>מוליך כותנה רגיל עם ידית עץ</td></tr><tr><td>מחזיק מחט עם ידית עץ מחזיק מחט עם ידית עגולה ישר עם מנעול</td><td>Fine Science Tools</td><td>12075-12</td><td>ידיות עגולות מאפשרות התאמות קלות בקצות האצבעות - 12.5 ס"מ</td></tr><tr><td>מספריים שיאה מעוקלים</td><td>קהים Fine Science Tools</td><td>14105-12</td><td>מספריים להשתלה עם דפוס קל ועדין - 12 ס"מ</td></tr><tr><td>נירוסטה מיקרו סרפינים מעוקלים - 4 מ"מ</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>18055-06</td><td>אורך לסת 4 מ"מ, רוחב לסת 0.75 מ"מ, אורך כולל 16 מ"מ, לחץ לסת 125 גרם</td></tr><tr><td>נירוסטה מיקרו סרפינים מעוקלים - 6 מ"מ</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>18055-05</td><td>אורך לסת 6 מ"מ, רוחב לסת 1 מ"מ, אורך כולל 17 מ"מ, לחץ לסת 100 גרם</td></tr><tr><td>נירוסטה מיקרו סרפינס ישר - 6 מ"מ</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>18055-03</td><td>אורך לסת 6 מ"מ, רוחב לסת 1 מ"מ, אורך כולל 15 מ"מ, לחץ לסת 100 גרם</td></tr><tr><td>פלטפורמה</td><td></td><td></td> כירורגית <td>מותאמת אישית,</td></tr><tr><td>מכונת הרדמה מגנטית SurgiVet Vaporstick</td><td>שירותי הרדמה כללית, Inc</td><td>V7015</td><td></td></tr><tr><td>T / משאבה טיפול מקומי</td><td>Stryker</td><td></td><td>TP700 סדרת</td></tr><tr><td>משאבת לחץ ואקום</td><td>Barnant Co.</td><td>400-1901</td><td></td></tr><tr><td>מספריים Vannas עם מיקרו-שיניים ישר</td><td>כלי מדע עדינים</td><td>15070-08</td><td>קצה חיתוך: 5 מ"מ, קוטר קצה: 0.1 מ"מ - 8.5 ס"מ</td></tr><tr><td>וטרינרי בופרנורפין</td><td>Ceva בריאות בעלי חיים בע"מ</td><td>NAC מס 12380352</td><td>0.324 מ"ג/מ"ל בופרנורפין הידוכלוריד תמיסת הזרקה לכלבים וחתולים</td></tr><tr><td>Vetroson V-10 יחידה אלקטרוכירורגית דו קוטבית</td><td>Summit Hill Laboratories</td><td></td><td>No מספר קטלוגי</td></tr><tr><td>וילון כירורגי</td><td>PDC Healthcare</td><td>DRP1824</td><td>פלסטיק שקוף סטרילי רב תכליתי, 18 אינץ' x 24 אינץ', 40/מארז</td></tr></tbody></table>

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה (OLT) הוא כלי רב עוצמה ללמוד דחייה חריפה וכרונית. עם זאת, זה לא ייצוג מלא של השתלת כבד אנושי בשל היעדר חיבור מחדש עורקי. מתואר כאן הוא הליך השתלה שונה הכולל את ההתאגדות של חיבור מחדש של עורק הכבד (HA), המוביל לשיפור ניכר בתוצאות ההשתלה. עם זמן anhepatic ממוצע של 12 דקות ו 14 s, חיבור מחדש HA תוצאות זברה משופרת של הכבד מושתל ועלייה בהישרדות הנמען לטווח ארוך מ 37.5% כדי 88.2%. פרוטוקול זה כולל את השימוש באזיקים ומחזיקים בהדפסת תלת-ממד כדי לחבר את וורין הפורטל וקאווה וונה טהרה נחותה. זה יכול להיות מיושם לחקר היבטים מרובים של השתלת כבד, מתגובה חיסונית וזיהום להיבטים טכניים של ההליך. על ידי שילוב שיטה פשוטה ומעשית לחיבור מחדש עורקי באמצעות טכניקת microvascular, פרוטוקול OLT חולדה שונה זה מחקה מקרוב היבטים של השתלת כבד אנושי וישמש מודל מחקר יקר ורלוונטי קלינית.

בעוד הקמת מודל OLT חולדת anastomosis שאינו HA באמצעות פרוטוקול שתואר קודםלכן 28, הצוות שלנו נצפתה 50% ו 37.5% שיעורי הישרדות ב 21 ימים ו 60 ימים לאחר הניתוח, בהתאמה. למרות שיעור גבוה של הישרדות לטווח ארוך ללא anastomosis HA דווחו על ידי כמהקבוצות 28, תוצאות מוקדמות אלה מדגישים את החסרונות של אין זרימה עורקית. לעומת זאת, הליך החיבור מחדש של HA הממוטב הגדיל משמעותית את ההישרדות לטווח ארוך מ-37.5% ל-88.2% (p = 0.015)(איור 6).
ניתוח היסטולוגי של תת קבוצה מייצגת של בעלי חיים מושתלים ללא חיבור מחדש HA (בימים 6 ו 13 לאחר הניתוח) הראה סימנים של פגיעה בכבד היפוקסי עם נמק צנטרילובלרי(איור 7). נמק כבד נרחב היה קשור עם רמות גבוהות מאוד של אלנין אמינוtransferase (ALT) ו אספרטה אמינוטרנספראז (AST) בבעלי חיים אלה(איור 7). לעומת זאת, חולדות מושתלות עם חיבור מחדש HA לא הראה סימנים של פגיעה בכבד, וניתוח היסטולוגי גילה מבנה parenchyma כבד נורמלי עם acini מאורגן, לובולות (למשל, ווריקט מרכזי וטריאדות פורטל עם ווריקט הכבד), עורקים, צינור מרה(איור 7).
למרות שהזמן anhepatic ממוצע במהלך 23 פעולות נפרדות היה מקובל (12 דקות ו 14 s [± 78 s]), זה עדיין אפשרי כי הישרדות במודל שאינו HA חיבור מחדש בסופו של דבר ניתן לשפר עם תרגול מוגבר. עם זאת, ראוי לציין כי שלוש מתוך ארבע בעלי החיים שהושתלו ללא חיבור מחדש של HA (אשר היו במעקב להישרדות ארוכת טווח) הומתו עקב מצוקה בימים 56, 96 ו-111 לאחר הניתוח. בנוסף, ניתוח היסטולוגי של הכבד גילה שינויים תגובתיים לאחר פגיעה בכבד hypoxic כולל התפשטות צינור מרה מסומן, פיברוזיס פריפורטל ודלקת, פרודיה כבד מעוותת(דמות משלימה 2). הנוכחות של תכונות מורפולוגיות של פגיעה בכבד hypoxic לאשש את הממצאים כי חיבור מחדש HA חשוב עבור עירוי כבד יעיל ותפקוד נורמלי.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig1.jpg"> איור 1: ייצוג סכמטי של עיצוב השרוול המודפס בתלת-ממד עבור וורי פורטל וקאווה וונה נחותה אינפרא-הפטית. העניבה הראשונה מהודצת בגרוב (ii) הקרוב ביותר לפניית (iii), והעניבה השנייה מהודצת בגרוב (i) הרחוק ביותר מהידית. הקוטרים החיצוניים הם (iv) 2.38 מ"מ עבור וורין הפורטל (PV) ו- 2.15 מ"מ עבור קאווה וחנה נחותה (IHVC). הקוטרים הפנימיים הם (v) 1.74 מ"מ עבור PV ו- 1.38 מ"מ עבור IHVC. אורכים הם (vi) 2.60 מ"מ עבור PV ו 2.15 מ"מ עבור IHVC (מפרטים מדויקים עבור כל החומרים המודפסים בתלת-ממד ניתן למצוא בחומרים משלימים). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig1large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig2.jpg"> איור 2: החדרת סטנט עורק הכבד בשתל. (א)קצה הפתיחה של תא המטען הצליאק (i) מורחב על ידי חיתוך עורק הטחול לעורק הקיבה השמאלי, אשר חושף את bifurcation של HA המשותף. (2) סטנט BD קשור לפני החילוץ של כבד החולדות התורם. (3) שרוול PV ו (4) שרוול IHVC מוכנסים וקשורים על ידי קיפול קצות כלי על השרוול. (ב)(i) כדי להכניס את סטנט HA, HA המשותף החשוף נמתח מספר פעמים עם מפסים. (ג)סטנט HA ממוקם באופן מאובטח HA המשותף וקשור עם 8-0 פרולין . (ד)(i) סטנט HA הוא סמוק עם (ii) תמיסת לקיטאט של רינגר (BD = צינור מרה, IHVC = קאווה וריד נחות אינפרא-הרפטי, HA = עורק הכבד). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig2large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig3.jpg"> איור 3: חיבור וירה נחות אינפרא-הפאטי באמצעות מחזיק בהדפסת תלת-ממד. (A) PV (i) מחובר באותה טכניקה כמו חיבור IHVC. השתל הוא (ii) מהודק מעל (iii) שרוול IHVC. פתיחת IHVC הנמען היא (iv) תופרת בצידי הפתח למחזיק בהדפסת תלת-ממד כדי להשאיר אותו פתוח. משי רופף (v) 7-0 קשור סביב הנמען IHVC. (ב)השרוול של השתל IHVC הוא (i) מוכנס בתוך הנמען IHVC. העניבה הרופפת עכשיו מהודקה. (ג)המלחציים מוסרים, ו-(i) בעל המודפס בתלת-ממד מנותק במספריים. (D)משי נוסף (i) 7-0 קשור סביב החיבור אם לא מאובטח, אבל בדרך כלל עניבה אחת מספיקה (PV = ויריד פורטל, IHVC = קאווה וונה נחותה אינפרא-מרחבית). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig3large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig4.jpg"> איור 4: חיבור שרוול מיקרווסקולרי של עורק הכבד. (א)(i) סטנט ה-BD אינו מחובר לנמען. (2) סטנט HA ממוקם בשתל, המקושר ל-HA הנכון של הנמען (iv). (3) PV מחובר. (ב)10-0 את'יון עם מחט מעוקלת (i) נמשך דרך סטנט HA לצדדים של הנמען HA סוף הפתיחה. (ג)אתלון 10-0 נמשך בחזרה דרך סטנט HA; לכן, HA הנכון של הנמען נמשך דרך סטנט כמו שרוול. (ד)(i) עניבה עם אתלון 10-0 נעשה ברגע HA הנכון של הנמען נמשך לתוך סטנט לחלק שעובר לראשונה דרך סטנט HA. (ה)מוצג כאן הוא סכמטי של anastomosis HA המתואר ב (B), (C), ו - (D) (BD = צינור מרה, HA = עורק הכבד, PV = ווריקט). *קצה הפתיחה של תא המטען הצליאק מורחב על ידי חיתוך עורק הטחול לעורק הקיבה השמאלי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig4large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig5.jpg"> איור 5: חיבור צינור מרה באמצעות שני סטנטים. (א)(i) סטנט BD שתל מוכנס לתוך הנמען BD בעזרת סטנט (ii) קשור באופן רופף בפתיחת BD של הנמען.(iii) PV מקושר לפני חיבור BD, אשר ממוקם מאחורי BD. (ב) סטנט בסוף BD של הנמען מוסר משמש פתח מורחב (i) להכניס את סטנט BD קשור השתל. (ג)העניבה המאבטחת באופן רופף את סטנט הנמען משמשת כעת לקשור את החיבור, ו-(i) משי 7-0 נוסף משמש כדי לשמור בחוזקה על סטנט במקום כדי למנוע החלקה או פיתול של סטנט. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig5large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig6.jpg"> איור 6: אחוזי הישרדות להשתלה. השתלת כבד חולדה אורתוטופית ללא חיבור מחדש HA (n = 8) ועם חיבור מחדש HA (n = 17). בעלי חיים עוקבים מקרוב לאחר ההשתלה לסימנים של אי ספיקת כבד ו / או זיהום לפחות 60 ימים. חולדות שלא הראו סיבוכים לאחר הניתוח נחשבו לניצולים (*p = 0.015, כפי שחושב על ידי הערכת קפלן-מאייר [מבחן דרגה ארוכה]). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig6large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60628/60628fig7.jpg"> איור 7: הערכה היסטופתולוגית כבד. המחלקה המטוקסילין המייצגת וקטעים מוכתמים באאוסין בבעלי חיים(A)ללא ו-(B)עם חיבור מחדש של עורק הכבד (HA) בימים 6 ו-13 לאחר השתלת כבד (LTx). (ג)parenchyma כבד נורמלי מראה טריאדת פורטל (וורי פורטל, עורק, צינור מרה), לובולות כולל ווריקט מרכזי, acini. Hepatocytes ליד טריאדת הפורטל הם אזור 1 hepatocytes; hepatocytes ליד וווה מרכזי בתוך לובולות הם אזור 3 hepatocytes; ו hepatocytes בין אזורים 1 ו 3 הם אזור 2 hepatocytes (ALT = אלנין אמינוtransferase, AST = אספרט אמינוtransferase, CV = ורין מרכזי). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628fig7large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Supplementary Figure 1" src="/files/ftp_upload/60628/60628suppfig1.jpg"> דמות משלימה 1: סטנט וממדים שרוול. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628suppfig1large.jpg" target="_blank">לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של נתון זה.</a>
<img alt="Supplementary Figure 2" src="/files/ftp_upload/60628/60628suppfig2.jpg"> דמות משלימה 2: הערכה היסטופתולוגית כבד מראה הפרעה של parenchyma הכבד. נציג המטוקסילין וסעיפים מוכתמים אאוסין בבעלי חיים ללא חיבור מחדש HA בימים 54, 96, ו 111 לאחר LTx. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/60628suppfig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>
חומר משלים 1: שרוול פורטה 200 גרם - תמיכה 2.0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary1.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 2: קאווה שרוול 200 גרם - תמיכה 2.0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary2.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 3: מפשק כבד 200 גרם. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary3.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 4: מחזיק אחורי - 1.2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary4.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 5: קאווה 150 גרם - 2.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary5.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 6: פורטה 1.4.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary6.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 7: מחזיק זרוע מקגיל. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary7.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 8: מעבדת זרוע מיני מחזיק. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary8.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 9: מחזיק זרוע רך חלק 1.3. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary9.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>
חומר משלים 10: בסיס מחזיק - 3.1. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60628/supplementary10.stl" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג קובץ זה (לחץ לחיצה ימנית להורדה).</a>

המטרה של מחקר זה היא לשנות את מודל השתלת כבד אורתוטופית חולדה כדי לייצג טוב יותר השתלת כבד אנושי ולשפר את הישרדות הנמען. השיטה המוצגת מחדש את זרימת העורקים הכבדים על ידי חיבור עורק הכבד המשותף של הכבד התורם לעורק הכבד התקין של הכבד הנמען.

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

מודל השתלת כבד אורתוטופי עכברוש הוא כלי רב עוצמה לחקר היבטים מרובים של השתלת כבד. מתגובה חיסונית על הזיהום, להיבטים טכניים של ההליך. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שזה יכול להפחית סיבוכים, מייצג טוב יותר השתלת כבד בא, ולשפר את הישרדות המטופל.פרוטוקול השתלת כבד אורתוטופי חולדה שונה זה מחקה באופן הדוק היבטים של השתלת כבד אנושית וישמש מודל מחקר משתנה ורלוונטי קלינית. אנו מקווים כי באמצעות ההדגמה החזותית, הצופים יוכלו ללמוד את כל הפרטים ולקצר את עקומת הלמידה לשליטה במיומנות המיקרו-כירורגית הנדרשת לטכניקה זו. לאחר הזרקת 300 יחידות בינלאומיות של נתרן הפרין לתוך וינה קאווה תוך-הפטית של חולדה בת 12 עד 14 שבועות, בצע חתך של חמישה מילימטרים מתחת לצינור המרה bifurcation, והכנס את צינור המרה סטנט לתוך צינור המרה המשותף.לאבטח את הסטנט עם אחד 7-0 קשירה משי, מילימטר אחד מעל החתך, ו קשירה אחת 10 מילימטרים מתחת bifurcation. חותכים את צינור המרה בין שני הקשרים ולחשוף את עורק הירך הנכון. מחלקים את העורק הגסטרודודיאלי בין שתי ליגטורות משי 7-0, וחושפים את עורק הקיבה השמאלי, עורק הטחול וגזע הצליאק.לאחר מכן חותכים את עורק הקיבה השמאלי, עורק הטחול וגזע הצליאק בין קשרי העורק. השתמש מזרק 20 מיליליטר מצויד מחט מד 21.5 להזריק לאט 20 מיליליטר של פתרון לקטט של ארבע מעלות צלזיוס רינגר לתוך וריד הפורטל. כדי להכין את הכבד התורם, לחתוך לפתוח את bifurcation של תא המטען צליאק, עורק טחול עורק קיבה שמאלה כדי ליצור שרוול עורקים גדול יותר שרוול העורקים ולהכניס את 1.5 מילימטר אורך 24 מד סטנט עורקי מד לתוך עורק הכבד המשותף התורם דרך השרוול.ואז לאבטח את הסטנט עם 8-0 קשירה פוליפרופילן ושטיפת הסטנט עם תספורת הלקטאט של רינגר. לאחר חשיפת וריד הפורטל של נמען חולדה בן 12 עד 14 שבועות, חלק את צינור המרה של הנמען ב- 0.5 ס"מ מתחת לחיתוך אריחים והכנס סטנט צינור מרה לתוך צינור המרה המשותף הדיסטלי. חשוף את עורקי הלחץ השמאליים, האמצעיים והימין וקשר את כלי הדם דיסטליים לביפורציה של עורק הלחץ.חותכים את העורקים קרוב לכבד מעל הקשרים ומ מניחים חתיכה דקה ארוכה של גזה מאחורי הנבוב הנבוב הנחות סופר כבד. מניחים מחזיק קאווה ותנאי תוך-הפטי מודפס בתלת-ממד מאחורי הווריד הווריד ההפוכה ולהשתמש בתפר מונופילמנט שאינו נספג של Tenno כדי לתפור את הקצוות של הידית המודפסת בתלת-ממד יחד. לקשור באופן רופף קשירה משי 7-0 מתחת הן מחזיק מודפס 3D בין הווריד intrahepatic ואת הווריד פורטל, ומהדקים את הווריד תוך-הפטי ממש מעל הווריד הכלייתי הנכון מתחת למחזיק קאווה מודפס 3D.מהדקים את וריד הפורטל ממש מעל וריד ההצמדה ומתחת למחזיק PV המודפס בתלת-ממד. באמצעות מזרק שלושה מיליליטר עם מחט מד 27 מחובר, לשטוף שני מיליליטר של 37 מעלות צלזיוס רינג'ר של פתרון לקטט באמצעות bifurcation של וריד הפורטל, ומהדק את וריד הכבד סופר קאווה מעל הכבד עם מהדק Kitzmiller. ואז לחתוך מתחת מהדק קרוב לכבד ככל האפשר לחתוך מעל המחזיקים המודפסים 3D עבור וריד הפורטל והן את הנבוב הנבוב בין הכבד כדי להסיר את הכבד המטופל.עבור השתלת כבד התורם, בזהירות לכוון את הכבד התורם בתוך חלל הגוף של המטופל באופן כזה anastomosis המרוצף העליון ניתן ליצור. הכנס את שרוול וריד הפורטל מהתורם לווריד פורטל הנמען והדק את עניבת המשי 7-0. הסר את המהדק האטראומטי מן ונטה קאווה בלחץ דם סופר ולהסיר את קליפ microvascular עבור וריד הפורטל.לאחר מזכה מחדש את הכבד עם דם חם, להכניס את שרוול הוורידה הוורידה תוך-לחץ דם התורם לתוך הנמען vena קאווה תוך-לחץ ולהבטיח את הכלי עם עניבת משי 7-0. לאחר מכן הסר את קליפ הנבוב ההפוכי של התורם לפני הסרת קליפ הנמען. כדי לבצע anastomosis עורקי, לחתוך את החלק של תא המטען צליאק מן התורם המשתרע מעבר סטנט, ומהדק את עורק הכבד הנכון של המטופל.חותכים את העניבה בסוף וכל רקמה נוספת המקיפה את הכלי. ולהשתמש בתסימת הלקטאט של רינגר כדי לשטוף את הלומן של קצוות כלי התורם והמקבל. באמצעות מחט מעוגלת, מניחים תפר 10-0 ethilon דרך ההיבט השמאלי של עורק הירך התורם, 2.5 מילימטרים מעל פתח דיסטלי של הסטנט, ובחוץ עד סוף הסטנט.Transfix עורק הירך הנכון הנמען 0.5 מילימטרים מתחת פתח הכלי מצד שמאל של הכלי, לצד ימין של העורק. מניחים את התפר הבא דרך הקיר הימני של עורק ההפטר התורם מבפנים החוצה, במרחק מן פתח הסטנט זהה לתפר המקורי, ולמשוך על שני הקצוות של מונופילמנט 10-0 nonabsorbable להחליק את עורק ההיתוך הנכון הנמען למעלה, ולתוך סטנט עורק ההשבחה. ואז לקשור את מונופילמנט 10-0 nonabsorbable עם עצמו על עורק הלחץ התורם.שטפו הן את תעלות המרה של הנמען והן את צינורות המרה של התורם, והכניסו את צינורות המרה של התורם לצינור המרה של הנמען. לאחר מכן הדק את העניבה שהונחה בעבר סביב צינור המרה של הנמען. בניסוי מייצג זה, מודל השתלת כבד אורתוטופית עורק שאינו כבד הפגינו 50 ו 37.5% שיעורי ההישרדות, ב 21 ימים ו 60 ימים, לאחר הניתוח בהתאמה.לעומת זאת, הליך חיבור עורקים בלחץ הירך אופטימיזציה הגדילה באופן משמעותי את ההישרדות לטווח ארוך. ניתוח היסטולוגי של תת קבוצה מייצגת של בעלי חיים מושתלים ללא חיבור עורק כבד גילה סימנים של פגיעה בכבד היפוקסי עם נמק מרכזי lobular, ביום שש ושלוש עשרה לאחר ההשתלה. נמק כבד נרחב היה קשור עם רמות גבוהות מאוד של מעבירי אימונו אלנין ו transferase אמינו אספרטט בבעלי חיים אלה.לעומת זאת, חולדות מושתלות עם חיבור עורק כבד לא הראו סימנים של פגיעה בכבד וניתוח היסטולוגי חשף מבנה פרנצ'ימה רגיל בכבד, עם acini מאורגן, אונות, עורקים ותעלות מרה. בנוסף, ניתוח היסטולוגי של הכבדים מן העורק הלא כבד חיבור מחדש מודל חולדות גילה שינויים תגובתי לאחר פגיעה בכבד היפוקסי. כולל התפשטות צינור המרה בשוק, פיברוזיס פורטל פרי ודלקת, ופרנצ'ימה כבד מעוותת.פרוטוקול זה יכול להיות מותאם לחקר היבטים אימונולוגיים וניתוחיים רבים של השתלת כבד והוא יכול לשמש מודל לבדיקת התערבויות טיפוליות חדשניות הרלוונטיות להשתלה.

reduced-complications-after-arterial-reconnection-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

כאן אנו מתארים את העכברוש orthotopic איבר האחוריות, הליך ההשתלה, אשר נראה כי תקן...

השתלת orthotopic לימב הינד-בחולדות

אנו מציגים גרסה לא קל ליצור בטכניקה של שתי השרוול קלאסית השתלת כבד orthotopic בחולדה.

השתלת כבד Orthotopic בחולדות

השתלת הכבד orthotopic בחולדות היא מודל ניסיון הכרחי למחקר ביו. כאן אנו מציגים הניתוחים שלנו להשתלת כבד חולדת orthotopic עם שחזור עורק כבד באמצעות 50% שתל חלקי.

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

השתלה כבד עזר מספקת תמיכה זמנית בכשל כבד אקוטי, עד התחדשות של הכבד הכושל. השתלת heterotopic עזר הכבד (אלט) עם arterialization וריד שער (PVA) הופכת את תפקוד כבד מספיק. פיתחנו טכניקה דומה בעכברים, כדי לבחון את ההשפעה של arterialization וריד שער על המורפולוגיה והתפקוד של השתל.

Heterotopic עזר עכברוש כבד השתלה עם זרימה מוסדר פורטל וריד Arterialization בכישלון חריף כבדית

כאן, מוצג פרוטוקול מעורבים השתלת כבד חלקית עכברוש arterialized מחדש. באופן ספציפי, 70% הכבד היה resected ויוו באמצעות טכניקת מעודכן של hepatectomy מונחה כלי השיט. עורק הכבד שוחזר בצורה הקצה לצד. הטכניקה השרוול שונה כדי לקצר את זמן השקה של infrahepatic את הווריד הנבוב.

מחדש Arterialized השתלת הכבד חלקית עכברוש עם ויוו מונחה כלי 70% Hepatectomy

השחזור של הווריד הנבוב suprahepatic (SHVC) נשאר צעד קשה בהשתלת הכבד orthotopic חולדה. במאמר זה אנו מראים פרוטוקול צעד אחר צעד עבור שחזור SHVC בחולדות בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

מאמר זה מספק תיאור מפורט של איך לבנות מודל של בעלי חיים של השלב האנהפטי (איסכמיה בכבד) בחולדות כדי להקל על מחקר בסיסי לתוך פגיעה איסכמיה-reperfusion לאחר השתלת כבד.

פגיעה באיבר איסכמיה-רפרופוזיה על ידי הדמיית שינויים המודינמיים במודל השתלת כבד עכברוש

בפרוטוקול זה מתואר מודל של השתלת כבד אורתוטופית חזירית לאחר אחסון קר סטטי של איברים תורמים למשך 20 שעות ללא שימוש במעקף ורידי במהלך השתלה. הגישה משתמשת בטכניקה כירורגית פשוטה עם מזעור השלב האנהפטי וניהול מתוחכם של נפח וזופרסור.

השתלת כבד חזירי ללא מעקף ורידי כמודל תורם קריטריונים מורחבים

פרוטוקול זה מספק מידע טכני לשחזור כלי דם באמצעות טכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר.

שחזור כלי דם בטכניקת השרוול בהשתלת כבד אורתוטופית בעכבר

וידאו זה מדגים את מודל orthotopic השתלת מסתם אאורטלי כמודל פשוט ללמוד את הפיתוח של vasculopathy ההשתלה (TVP) בחולדות.

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

למד שיטת השתלת כבד אורתוטופית בחולדות עם חיבור מחדש של עורק הכבד לשיפור שרידות המקבלים. מודל זה מחקה השתלות אנושיות ומפחית סיבוכים נוירולוגיים וכבדיים.

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

גלה סרטונים נוספים