Name: פרוטוקול מתוקננת עבור בדיקות העדפה להערכת הרווחה דגים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: למדו פרוטוקול להערכת העדפות מגורים של דגי זברה (Danio rerio) בקשר לעשרור סביבתי וזרימת מים. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לשפר את רווחת הדגים בשבי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי מלגת שיתוף פעולה מחקר ומכון האק באוניברסיטת פנסילבניה סטייט, כמו גם משרד החקלאות AES 4558. המחקר הציית לכל הדרישות של טיפול בבעלי חיים והשימוש בפרוטוקולים של אוניברסיטת מדינת פנסילבניה; מ46466.

המחקר הנוכחי יש אישור ועומד בכל הדרישות של טיפול בעלי חיים ופרוטוקולים השימוש של אוניברסיטת פנסילבניה סטייט; מ46466.
1. התקנת מנגנון העדפה
<ol><li>השגת אישור מוועדת הטיפול בבעלי חיים של המכון (או ארגון שווה ערך) לכל הליכי הניסוי והגידול הכרוכים בבעלי חיים לפני תחילת ההתנסות.</li>
	<li>השתמשו במיכל ניסיוני העשוי מפלסטיק לבן אטום. הקירות בין האזורים עשויים אקריליק אפור כי הוא קבוע במקום עם איטום סיליקון. הערה: גודל הטנק הניסיוני תלוי בגודל של מינים של הריבית ומספר האנשים המשמשים (למשל, עבור 8 בוגרים zebrafish, טנק של 76 ס"מ L x 76 ס"מ W x 30 ס מ מומלץ).</li>
	<li>פצל את הטנק הנסיוני לארבעה אזורים המשתנים בהתאם לפרמטרי בית הגידול הספציפיים שייבדקו. דוגמאות של סוגים שונים של העשרה לחקור כוללים המצע חולית לעומת סלעי, צמחים מלאכותיים לעומת מקלטים, או זרימת מים לעומת נוכחות של צמחים מלאכותיים (איור 1).<ol>
<li>אם השימוש בזרימת מים כפרמטר של עניין, השתמש במשאבות קטנות כדי לספק מטוסי מים (ראה לוח חומרים). הגדר את המשאבות במהירות שנבחרה כך שהם יספקו זרימה קבועה ומכוונת של מים. בחר את המהירות הרצויה המבוססת על מינים של אקולוגיה של עניין ותולדות החיים (למשל, 14 ס"מ/s עבור דג zebrafish).</li>
	</ol>
</li>
	<li>במרכז הטנק הנסיוני, יש בזירה מרכזית שבה אוכל מועבר (איור 1). הגישה לזירה המרכזית מכל אזור היא דרך פתח קטן בקירות המפרידים. הפתיחה גדולה מספיק למין המעניין לנוע בין האזורים ללא הפריע, אבל קטן מספיק כדי להפחית את כל הרמזים החזותיים הדגים עשוי לחוות מאזורים אחרים.</li>
	<li>מניחים ביובקטר ומחמם בכל פינה של המיכל, אך מחוץ לאזור הניסיוני כדי לא להפריע לזרימת המים ולהבטיח טמפרטורת מים קבועה בכל האזורים.</li>
	<li>הגדר מיכלי ניסוי נוספים כאשר החלל מכתיב. סובב את האזורים השונים בכל טנק ניסיוני כדי להגביל את ההטיה הרציפה. ודא כי כל הטנקים לשכפל יש תנאים אחידים (רמות אור זהה, טמפרטורת המים, וכו ')</li>
	<li>מצלמות המקום (ראה טבלת חומרים) על חצובות ישירות מעל כל טנק ניסיוני, כך שכל האזורים גלויים. הימנע עדשות רחב זווית ולהבטיח את כרטיסי הזיכרון יש מספיק מקום להקלטה.</li>
	<li>הגדר את תאורת החדר בהדרגה (לדוגמה, 1/2 h) 12 ליטר: מחזור 12 D להדמיית זריחה ושקיעה. לשמור על טמפרטורת המים ב 25 ± 1 ° c.</li>
</ol>2. לכידה, הסתגלות ופרוצדורה
<ol><li>המשיכו לדוג במיכלי הבית כאשר אינם נבדקים. נטו כל דגי בדיקה ממיכלי הבית שלהם מקום בזירה המרכזית של הטנק ניסיוני (יום 1). מזער את זמני הלכידה כדי להפחית את הלחץ (למשל, פחות מ -30 s). הערה: הליך חלופי להעברת דגים ממיכל הבית שלהם אל הטנק הניסיוני שעשוי למזער את הלחץ הוא להעביר את הדג בגביע של מי טנקים.</li>
	<li>לשמור על מספר ומין של הדג בכל קבוע טנק ניסיוני על פני שכפול טנקים ולבחור מבוסס על גודל המינים ואקולוגיה.</li>
	<li>בימים 1 – 4 מבלים הדגים בזמן ההסתגלות ובחקר האזורים השונים. אין לאסוף נתונים בימים אלה. הערה: הרחב או הקטן את מספר הימים לצורך הסתגלות בהתאם לפרוטוקול הניסיוני המסוים. עם זאת, תקופת הסתגלות צריכה להיות מספיקה כדי למזער את ההשפעות של הטיפול, כמו גם כדי לקבל את הדגים רגילים להאכיל את המנגנון.</li>
	<li>במהלך תקופת הסתגלות, לפקח על איכות המים מקרוב על ידי ניהול בדיקות באיכות מים סדירה (למשל, pH, חנקתי, או הניריט רמות) ולהחליף את המים אם מזוהים בעיות (ראה לוח חומרים).</li>
	<li>האכילו את מאכלי הדג (ראו טבלת חומרים) בזירה המרכזית באמצעות טבעת מזון צף (ראו טבלת חומרים) המצורפת לקיר הזירה המרכזית במשטח המים. טבעת מזון מבטיחה חלקיקי מזון להישאר בתוך הזירה המרכזית ולא להציג הטיה עבור אזורים עקב מזון נסחף.</li>
	<li>תן את הדג 0.5 h כדי להאכיל libitum לפני הסרת מזון שאריות מהמיכל ניסיוני עם רשת לטבול. האכילו את הדג פעם בבוקר ופעם אחר הצהריים.</li>
	<li>הערכת התנהגויות בימים 5 – 7. החלף מצלמות והקלט התנהגויות דגים עבור 2 h אחרי כל בוקר מתוזמן האכלה אחר הצהריים. ביום 8 להסיר את כל הדגים מן הטנקים ניסיוני עם רשת לטבול ולמקם אותם בחזרה טנקים בבית שלהם.</li>
	<li>בהתאם לכמות המים sump זמין, להחליף לפחות 1/3 של המים בטנק ניסיוני עם מים sump טרי כדי להפחית את כל ההשפעות של הורמוני לחץ על דגים בעקבות משכפל.</li>
	<li>הגדר את הטנקים הניסיוניים בהתאם ללוח הזמנים של סיבוב האזור לאותו שבוע. סיבוב האזורים מקטין את הסיכוי להטיה התנהגותית כתוצאה ממיקום של כל אזור ביחס לזה. ואז להתחיל את תהליך הבדיקה שוב עם קבוצה חדשה של דגים.</li>
</ol>3. מדידות וניתוח נתונים
<ol><li>הורד את סרטי הווידאו למחשב בסוף כל יום ההקלטה. פעולה זו מבטיחה שקיים שטח בכרטיס הזיכרון לפני כל שימוש.</li>
	<li>השתמש בתוכנת וידאו (ראה טבלת חומרים) לצורך העדפת אזור מכמת. באופן ידני לספור את מספר הדגים בכל אזור ב 5 מרווחי זמן בכל תקופת הקלטה 2 h (כוללים את הזירה המרכזית בסעיפים אלה). הגדירו את מין הדג במהלך הניתוח אם הבידול בין הזכרים לנקבות אפשרי מצילומי הווידיאו.</li>
	<li>כדי לנתח את העדפת בית הגידול, לחשב את מספר ממוצע של דגים לכל אזור עבור כל מיכל שכפול (כלומר, כל הנתונים ממוצע על פני 3 ימים). כדי לקבל ציון העדפה לשימוש במבנה, לחשב את ההעדפה של ג'ייקובס מדד15 כמו J = (rx - p)/[(r x + p) – 2 *rx*p] כאשר x הוא אזור העניין, rx הוא היחס של דגים באזור x למספר הכולל של דגים בכל האזורים, ו p הוא החלק הזמין של כל האזורים במיכל ניסיוני. האינדקס נע בין +1 לבין העדפה מירבית לבין 1 לבין הימנעות מקסימלית.</li>
	<li>כדי לקבוע אם קיימים שינויים כלשהם בקצב שבו מעבר הדגים בין אזורים במהלך תקופת התבוננות, חשב את קצב המתג, rsr, בחמש הדקות הראשונות והאחרון של כל תקופת תצפית, כאשר rsr הוא מספר הפעמים שדגים נכנסים לכל אזור מהזירה המרכזית, מחולק במספר הכולל של הדג.</li>
	<li>שקול דג שנכנס לאזור כאשר כל הגוף של הדג חוצה דרך הפתח להפריד את האזורים. חישוב שיעור התחלה וממוצע גימור עבור כל אחד ממיכלי השכפול. לבצע את כל תצפיות ההתנהגות על ידי הניסויים הללו כדי להפחית את כל התצפיות ההתבוננות הנסערות.</li>
	<li>שימוש בתוכנה סטטיסטית (ראה טבלת חומרים), בביצוע ניתוחים סטטיסטיים רלוונטיים. מבחנים מוצעים כוללים ANOVA בכיוון אחד, עם אינדקס העדפה כמשתנה ואזור התלויים כמשתנה הנבא, ומבחן t משויך בקצב החלפת ממוצע ההתחלה והסיום עבור כל אחד מהטנקים.</li>
	<li>החלת בדיקת ההשוואה הכפולה של Tukey כדי לחקור עוד השוואות אזור, כאשר כל אזור מושווה זה לזה. ניתוח סטטיסטי מורכב יותר כולל דגמים מעורבים ההערכת אפקטי זמן, הזירה, אפקטי מין, או אפילו הבדלים בודדים בהתנהגות.</li>
</ol>

<ol><li>Reed, B., Jennings, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidance+on+the+housing+and+care+of+zebrafish%2C+Danio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22AAALAC+International%22%5BJournal%5D)">Guidance on the housing and care of zebrafish, Danio rerio.</a> AAALAC International. , 36(2010).</li>
<li>van Praag, H., Kempermann, G., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+consequences+of+environmental+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neural consequences of environmental enrichment.</a> Nature Reviews Neuroscience. 1, 191-198 (2000).</li>
<li>Oomen, C. A., Berkinschtein, P., Kent, B. A., Sakisda, L. M., Bussey, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+hippocampal+neurogenesis+and+its+role+in+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Wiley+Interdisciplinary+Reviews+-+Cognitive+Science%22%5BJournal%5D)">Adult hippocampal neurogenesis and its role in cognition.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews - Cognitive Science. 5 (5), 573-587 (2014).</li>
<li>DePasquale, C., Neuberger, T., Hirrlinger, A. M., Braithwaite, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+complex+and+threatening+environments+in+early+life+on+brain+size+and+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Proceeedings+of+the+Royal+Society+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">The influence of complex and threatening environments in early life on brain size and behaviour.</a> Proceeedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 283 (1823), 1-8 (2016).</li>
<li>Salvanes, A. G. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+promotes+neural+plasticity+and+cognitive+ability+in+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment promotes neural plasticity and cognitive ability in fish.</a> Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 280, 1-7 (2013).</li>
<li>Barnea, A., Pravosudov, V. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birds+as+a+model+to+study+adult+neurogenesis%3A+bridging+evolutionary%2C+comparative+and+neuroethological+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Birds as a model to study adult neurogenesis: bridging evolutionary, comparative and neuroethological approaches.</a> European Journal of Neuroscience. 34 (6), 884-907 (2011).</li>
<li>LaDage, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+between+territoriality%2C+spatial+environment%2C+and+hippocampal+neurogenesis+in+male+side-blotched+lizards%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Interaction between territoriality, spatial environment, and hippocampal neurogenesis in male side-blotched lizards.</a> Behavioral Neuroscience. 127 (4), 555-565 (2013).</li>
<li>Kempermann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+New+Neurons%3F+Possible+Functions+for+Adult+Hippocampal+Neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Why New Neurons? Possible Functions for Adult Hippocampal Neurogenesis.</a> Journal of Neuroscience. 22 (3), 635-638 (2002).</li>
<li>Dawkins, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+behaviour+to+assess+animal+welfare%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Welfare%22%5BJournal%5D)">Using behaviour to assess animal welfare.</a> Animal Welfare. 13, 3-7 (2004).</li>
<li>Kistler, C., Hegglin, D., Würbel, H., König, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preference+for+structured+environment+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29+and+checker+barbs+%28Puntius+oligolepis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">Preference for structured environment in zebrafish (Danio rerio) and checker barbs (Puntius oligolepis).</a> Applied Animal Behaviour Science. 135, 318-327 (2011).</li>
<li>Schroeder, P., Jones, S., Young, I. S., Sneddon, L. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+do+zebrafish+want%3F+Impact+of+social+grouping%2C+dominance+and+gender+on+preference+for+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">What do zebrafish want? Impact of social grouping, dominance and gender on preference for enrichment.</a> Laboratory Animals. 48 (4), 328-337 (2014).</li>
<li>Matthews, M., Trevarrow, B., Matthews, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+virtual+guide+for+zebrafish+users%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">A virtual guide for zebrafish users.</a> Lab Animal. 31 (3), 34-40 (2002).</li>
<li>Näslund, J., Johnsson, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+for+fish+in+captive+environments%3A+Effects+of+physical+structures+and+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+and+Fisheries%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment for fish in captive environments: Effects of physical structures and substrates.</a> Fish and Fisheries. 17 (1), 1-30 (2016).</li>
<li>Oliveira, K. V., Barreto, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+reduces+aggression+of+pearl+cichlid%2C+Geophagus+brasiliensis%2C+during+resident-intruder+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Neotropical+Ichthyology%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment reduces aggression of pearl cichlid, Geophagus brasiliensis, during resident-intruder interactions.</a> Neotropical Ichthyology. 8 (2), 329-332 (2010).</li>
<li>Brydges, N. M., Braithwaite, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+environmental+enrichment+affect+the+behaviour+of+fish+commonly+used+in+laboratory+work%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">Does environmental enrichment affect the behaviour of fish commonly used in laboratory work.</a> Animal Behaviour Science. 118, 137-143 (2009).</li>
<li>Ahlbeck Bergendahl, I., Miller, S., Depasquale, C., Giralico, L., Braithwaite, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Becoming+a+better+swimmer%3A+structural+complexity+enhances+agility+in+a+captive-reared+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Fish+Biology%22%5BJournal%5D)">Becoming a better swimmer: structural complexity enhances agility in a captive-reared fish.</a> Journal of Fish Biology. 90 (3), 1112-1117 (2017).</li>
<li>Roberts, L. J., Taylor, J., de Leaniz, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+enrichment+reduces+maladaptive+risk-taking+behavior+in+salmon+reared+for+conservation%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Conservation%22%5BJournal%5D)">Environmental enrichment reduces maladaptive risk-taking behavior in salmon reared for conservation.</a> Biological Conservation. 144 (7), 1972-1979 (2011).</li>
<li>Jacobs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurement+of+food+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Oecologia%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurement of food selection.</a> Oecologia. 14, 413-417 (1974).</li>
<li>DePasquale, C., Fettrow, S., Sturgill, J., Braithwaite, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+flow+and+physical+enrichment+on+preferences+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">The impact of flow and physical enrichment on preferences in zebrafish.</a> Applied Animal Behaviour Science. 215, 77-81 (2019).</li>
<li>Bekoff, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBekoff%2C+M+%22Encyclopedia+of+Animal+Rights+and+Animal+Welfare%2C+2nd+edition%22">Encyclopedia of Animal Rights and Animal Welfare, 2nd edition</a>. , Greenwood Press. Santa Barbara, CA. 53(2009).</li>
<li>Fraser, D., Nicol, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preference+and+motivation+research%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Welfare%22%5BJournal%5D)">Preference and motivation research.</a> Animal Welfare. , 183-199 (2011).</li>
<li>Franks, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+do+animals+want%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Welfare%22%5BJournal%5D)">What do animals want.</a> Animal Welfare. 28, 1-10 (2019).</li>
<li>Blaser, R. E., Rosemberg, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+of+anxiety+in+zebrafish+%28Danio+rerio%29%3A+dissociation+of+black%2Fwhite+preference+and+novel+tank+test%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Measures of anxiety in zebrafish (Danio rerio): dissociation of black/white preference and novel tank test.</a> PLoS One. 7 (5), 1-8 (2012).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

כאן אנו מציגים עיצוב ניסיוני המאפשר לנו לחקור את ההעדפות של דגים לסוגים שונים של בתי גידול. חלק מהשלבים הקריטיים החשובים בבדיקת העדפה כוללים: 1) מבטיחים כי התנאים האחידים נשמרים על פני משכפל שונה (לדוגמה, רעשים חיצוניים או תנועה, ניסויים, כימיית מים, רמות אור); 2) מבטיחים כי האזורים מסובבים בין משכפל לבין כמות משמעותית של מים מוחלפת במים מסוקעים טריים בין בדיקות להפחתת הביסים; (3) להבטיח שגודל מדגם מתאים ישמש לזיהוי תוצאות משמעותיות, הן מבחינת מספר האנשים בכל קבוצה ומספר מיכלי שכפול; ו-4) אם מבחנים נרשמים, מיטוב והבטחת ה...

התקנות השולטות כיצד יש לשכן חיות מעבדה בשבי הן מפורשות ומוגדרות היטב. האגודה להערכת והסמכה של טיפול בבעלי חיים במעבדה (AAALAC) הבינלאומי מפקחת ומנהלת את כל הארגונים והמוסדות העובדים עם בעלי חיים מחקריים והוא בעל קווים מנחים מסוימים לגידול ולדיור המתאימים למינים. לדוגמה, הדרכתו של AAALAC על הדיור והטיפול של צברפיש, דניאו Rerio1 "מעודדת מאוד" שימוש בהעשרה (תוספת של חפצים פיזיים או מפרטים בסביבת הדיור) כאשר הדיור משמש בשבי. המדריך ממשיך למדינה, "מתן צמחים מלאכותיים או מבנים לחקות את הגידול בדגים מאפשרים לחיות בחירה בתוך סביבתם".
הראיות מצביעות על כך העשרה יכול לעורר את הצמיחה של נוירונים חדשים (נוירוגנזה) באזורים של המוח מעורב עיבוד מידע מרחבי2, והוא חשב כי שינויים עצביים אלה משויכים יכולת למידה משופרת3. השפעות ההעשרה על נוירוגנזה ולמידה נחקרו באופן נרחב על פני מרחבי הטקא השונים, כולל דגים4,5, ציפורים6, זוחלים7ויונקים8. למרות שסוגים אלה של מחקרים חשובים להבין את ההשפעות של העשרה על המוח ועל ההתנהגות, הם לא לוקחים בחשבון את הבחירות המיוחדות או העדפות של בעלי חיים לסביבה מסוימת על פני אחר.
שאלה יסודית לשאול בעת הערכת רווחת החיות השבויה היא האם לחיות יש את מה שהם רוצים9. דרך לחקור שאלה זו המספקת ראיות מוחשיות היא לספק לבעלי חיים בחירות המאפשרות לנו להבין את ההעדפות הסובייקטיבית שלהם. לדוגמה, שני מחקרים חקרו האם הדגים מעדיפים גישה לסביבה מועשרת או פשוטה, עם שני המחקרים המציינים העדפה לאזורים המכילים10,11. עם זאת, יש גם הציע כי דגים מופיעים אדיש להעשרה סביבתית12, אז התשובה לשאלה היא בהחלט לא ברור לחתוך. יישום נוסף של בדיקת העדפה הקשורה לרווחת בעלי חיים מרחיב כדי לנסות להבין כיצד היבטים שונים של סביבה מועשרת לשחק חלק בבחירות בעלי חיים בודדים עושה. בדגים בלבד, לסוגים שונים של העשרה יש השפעות דיפרנציאליות על המוח ועל ההתנהגות, וקשר זה מורכב עוד יותר על ידי הבדלים אישיים בתכונות אישיות13. יתרה מזאת, בדיקת העדפה עשויה להועיל למחקרים השוואתיים של העשרה סביבתיים. אפילו על פני מינים שונים של דגים, העשרה הוכח יש השפעה על סוגים רבים של התנהגות, כולל תוקפנות14, תעוזה15, תנועה16, והתנהגות לקיחת סיכונים17.
מדד ההעדפה של ג'ייקוב הוא מבחן סטטיסטי המשמש לעתים קרובות לכמת את העדפות הדיור18. מדד ההעדפה של ג'ייקוב מקצה ערך לכל בית גידול שונה על בסיס מספר בעלי החיים הנוכחים בכל סוג של גידול בנקודות זמן שונות, כאשר העדפה נעה מ -1 (הימנעות) ל-+ 1 (המועדפת ביותר). כאן אנו מתארים שיטה לשימוש במדד ההעדפה של ג'ייקוב לחקור את העדפות הדיור בדגים ולהשתמש בדוגמה של הערכת שני מאפיינים חשובים של הסביבה הימית: 1) הנוכחות או העדר העשרה; ו -2) זרם המים19. עם זאת, הפרוטוקול יכול בקלות להיות מותאם להסתכל על מגוון של גורמים סביבתיים (למשל, חצץ לעומת חול כמצע, צמחי פלסטיק לעומת צמחים חיים, נמוך לעומת זרימת מים גבוהים) על פני מינים ונופים שונים (למשל, מימיים וארציים).

<table><tbody><tr><td>צמחי אקווריום מלאכותיים</td><td>Smarlin</td><td>B07PDZQ5M5</td><td></td></tr><tr><td>צמחי מים מלאכותיים אצות לאקווריום</td><td>MyLifeUNIT</td><td>PT16L212</td><td></td></tr><tr><td>מיכלי ניסוי</td><td>תאגיד הפלסטיק של ארצות הברית</td><td>6106</td><td></td></tr><tr><td>טבעת מזון צפה</td><td>SunGrow</td><td>B07M6VWH9V</td><td></td></tr><tr><td>מד זרימה</td><td>YSI</td><td>BA1100</td><td></td></tr><tr><td>מחמם תרמוסטט אקווריום Jager</td><td>Ehiem</td><td>3619090</td><td></td></tr><tr><td>מאסטר ערכת בדיקת איכות מים</td><td>API</td><td>34</td><td></td></tr><tr><td>SPSS סטטיסטיקה עבור מקינטוש</td><td>IBM</td><td>גרסה 25.0</td><td></td></tr><tr><td>משאבה טבולה, SL-Songlong</td><td></td> <td>SL-381</td><td></td></tr><tr><td>TetraMin פתיתים טרופיים</td><td>Tetra</td><td>16106</td><td></td></tr><tr><td>פילטר פינתי זרימה משולשת</td><td>Lee's</td><td>13405</td><td></td></tr><tr><td>מצלמת וידאו</td><td>Coleman</td><td>TrekHD CVW16HD</td><td></td></tr><tr><td>Windows Media Player (תוכנת וידאו)</td><td>Microsoft</td><td>Windows Media Player 12</td><td></td></tr></tbody></table>

פרוטוקול מתוקננת עבור בדיקות העדפה להערכת הרווחה דגים

A Standardized Protocol for Preference Testing to Assess Fish Welfare

טכניקות הערכה לרווחת בעלי חיים מנסות לקחת בחשבון את הצרכים הספציפיים והרצונות של בעל החיים הנדון. מתן העשרה (הוספת חפצים פיזיים או מפרטים בסביבת הדיור) היא לעתים קרובות דרך להעניק לחיות בשבי את ההזדמנות לבחור עם מי או מה הם מתקשרים ואיך הם מבלים את זמנם. מרכיב בסיסי בסביבה הימית שלעיתים קרובות מתעלמים מהשבי, לעומת זאת, הוא היכולת של בעל החיים לבחור לעסוק בפעילות גופנית. עבור בעלי חיים רבים, כולל דגים, תרגיל הוא היבט חשוב של ההיסטוריה החיים שלהם, והוא ידוע שיש לו יתרונות בריאותיים רבים, כולל שינויים חיוביים במוח ובהתנהגות. כאן אנו מציגים שיטה להערכת העדפות בית גידול בבעלי חיים בשבי. הפרוטוקול ניתן בקלות להתאים כדי להסתכל על מגוון של גורמים סביבתיים (למשל, חצץ לעומת חול כמצע, צמחי פלסטיק לעומת צמחים חיים, זרימה נמוכה לעומת זרימה גבוהה של מים) במינים ימיים שונים, או לשימוש עם מינים ארציים. הערכה סטטיסטית של העדפה מבוצעת באמצעות מדד העדפה של יעקב, אשר מדרג את בתי הגידול מ-1 (הימנעות) ל +1 (המועדפת ביותר). בעזרת מידע זה ניתן לקבוע מה החיה רוצה מפרספקטיבה רווחת, כולל מיקומם המועדף.

השתמשנו במבחן העדפה כדי לחקור את העדפות הדיור בדגים שניתנה בחירה בין העשרה שונים כולל 1) צמחי פלסטיק ומצע הסנדי; ו-2) זרימת מים. אלה חולקו לארבעה אזורים: (i) מועשר בלבד; (2) זרימה בלבד; (3) הועשר בזרימה; (iv) רגיל; ובזירה מרכזית שבה המזון הועבר19. זייברפיש הראה את ההעדפה הגבוהה ביותר עבור אזור מועשר וזרימה, שהיה שונה באופן משמעותי מכל שאר האזורים (מועשר בלבד, זרימה בלבד, פשוטה ומרכזית ארנה; p &lt; 0.01). הדגים נמנעו הן את הזרימה בלבד והן את האזורים הפשוטים, ומבלים זמן רב יותר בזירה המרכזי...

היבט בסיסי בהערכת רווחת בעלי החיים בשבי הוא לשאול אם לבעלי החיים יש את מה שהם רוצים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול כדי לקבוע את העדפת הדיור ב-דג זברה (דניאו רריו) ביחס לנוכחות/העדר העשרה סביבתית וגישה להזרמת מים.

Animal welfare assessment techniques try to take into consideration the specific needs and wants of the animal in question. Providing enrichment (the ...

פרוטוקול זה נותן לנו הבנה טובה יותר של מה דגים רוצים, על ידי התבוננות בחירות שהם עושים לגבי העדפות בית הגידול, וזה היסוד לרווחתם. פרוטוקול זה יכול בקלות להיות מותאם להסתכל על מגוון רחב של גורמים סביבתיים שונים, כולל חצץ לעומת מצע חולי, לחיות לעומת צמחי פלסטיק, או אפילו על פני מינים ימיים שונים. כדי להקים מנגנון העדפה, השתמש במיכל ניסיוני עשוי פלסטיק לבן אטום, מחולק לארבעה אזורים עם קירות עשויים אקריליק, קבוע במקום עם איטום סיליקון.מניחים את חומרי ההעשרה המתאימים לכל אזור בהתאם לפרמטרים הספציפיים של בית הגידול שיש לבדוק. לדוגמה, כוללים מצעים חוליים לעומת סלעיים, צמחים מלאכותיים לעומת מקלטים, או זרימת מים לעומת צמחים מלאכותיים. אם זרימת המים תשמש כ ופרמטר של עניין, הנח משאבות קטנות לאספקת סילוני מים למיכל והגדר את המשאבות במהירות מסוימת, כך שהן יספקו זרימה קבועה ומכוונת של מים המבוססת על האקולוגיה והיסטוריית החיים של מינים בעלי עניין.באמצע מיכל הניסוי, יש ארנה מרכזית שבה המזון יועבר. הגישה לארנה המרכזית מכל אזור צריכה להיות דרך פתח קטן בקירות המפרידים שהוא גדול מספיק, עבור המינים המעניינים, לנוע בין האזורים ללא הפרעה, אך קטן מספיק כדי להפחית את כל הרמזים החזותיים שהדגים עלולים לחוות באזורים אחרים. מניחים ביו-פילטר ותנור בכל פינה של המיכל מחוץ לאזור הניסוי, כדי לא להפריע לזרימת המים ולהבטיח טמפרטורת מים קבועה בכל האזורים.הגדר את כל טנקים ניסיוניים נוספים כמו חלל מכתיב, להבטיח כי כל הטנקים לשכפל יש תנאים אחידים. מניחים מצלמות על חצובה, ישירות מעל כל מיכל ניסיוני, כך שכל האזורים נראים לעין. לאחר אישור כי כרטיסי הזיכרון יש מספיק מקום להקלטה, להגדיר את תאורת החדר על הדרגתי 12 שעות, אור / כהה, מחזור כדי לדמות זריחה ושקיעה.ולהגדיר את טמפרטורת המים ל 25, בתוספת או מינוס מעלות צלזיוס אחת. שמור את הדגים במיכלים הביתה כאשר הם לא נבדקים. ביום הניסוי, השתמש בשתי רשתות כדי ללכוד במהירות את כל דגי המבחן מהמיכלים הביתיים שלהם, והצב אותם בזירה המרכזית של הטנק הניסיוני תוך 30 שניות מהתפס.בימים 1 עד 4, הדגים יבלו זמן בהסתגלות ובחקר האזורים השונים. אל תאסוף נתונים בימים אלה. במהלך ההתאקלמות, לבצע בדיקות איכות מים סדירות, החלפת המים אם התגלו בעיות כלשהן.כדי להאכיל את הדגים, השתמש בטבעת מזון צף, המחוברת לקיר הזירה המרכזית על פני המים, כדי לספק מזון דגים פתיתים לדגים. לאחר 30 דקות של גישה לליביאטום, השתמשו ברשת טבילה כדי להסיר את שאריות המזון מהמיכל. בימים 5 עד 7, הפעל את המצלמות, והקליט התנהגויות דגים במשך שעתיים לאחר כל האכלה מתוכננת בבוקר ואחר הצהריים.ביום השמיני, השתמש ברשת המטבל כדי להעביר את כל הדגים בחזרה למיכלים הביתיים שלהם. תלוי כמה מים sump זמין, להחליף לפחות שליש מהמים, במיכל הניסיוני, עם מים sump טריים כדי להפחית את כל ההשפעות של הורמוני לחץ על הדגים משכפלים הבאים. לאחר מכן, הקימו את מיכלי הניסוי בהתאם ללוח הזמנים של סיבוב האזור באותו שבוע, והתחלו בתהליך הבדיקה עם קבוצת דגים חדשה.בסוף כל יום הקלטה, הורד את הסרטונים למחשב. ולהשתמש בתוכנת וידאו כדי לספור באופן ידני את מספר הדגים בכל אזור, במרווחי זמן של חמש דקות, בכל תקופת הקלטה של שעתיים. כדי לנתח העדפות בתי גידול, חשב את המספר הממוצע של דגים לכל אזור עבור כל מיכל שכפול.לקבלת ציון העדפה לשימוש במבנה, חישבו את מדד ההעדפות של Jacobs באמצעות הנוסחה כפי שצוין. קחו למשל דג שנכנס לאזור, כאשר כל גופו של הדג חוצה את הפתח בין האזורים. כדי לקבוע אם יש שינויים בקצב המעבר של הדגים בין אזורים, במהלך תקופת תצפית, לחשב את מספר הפעמים שדג נכנס לכל אזור מהזירה המרכזית, מחולק במספר הדגים הכולל בחמש הדקות הראשונות והאחרונה של כל תקופת תצפית.וחשב קצב החלפה התחלתי ו ממוצע גימור עבור כל מיכל שכפול. באמצעות תוכנה סטטיסטית, לבצע ניתוח סטטיסטי רלוונטי, כגון ANOVA חד-כיוון, עם מדד העדפה כמו המשתנה התלוי ואת האזור כמשתנה מנבא, ו- t-test מזווג על קצב מתג ממוצע ההתחלה והגמר עבור כל טנק. כדי להשוות כל אזור לאזור זה לזה, החל את מבחן ההשוואה המרובים של Tukey לאחר הוק.בניסוי מייצג זה, דג הזברה הפגין את ההעדפה הגבוהה ביותר לאזור המועשר והזרימה, ונמנע מהזרימה בלבד ומזהמים רגילים, ובילתה זמן רב יותר בזירה המרכזית. בנוסף, דגי הזברה נעו בין אזורי הגידול השונים לעתים קרובות יותר בתחילת תקופת התצפית מאשר בסוף. זה קריטי כי תנאים אחידים, כגון רעש חיצוני, או תנועה, כימיית מים, או רמות האור נשמרים על פני מיכלים לשכפל.בדיקות העדפה משתרעות על הניסיון להבין כיצד היבטים שונים של ההעשרה הסביבתית משפיעים על החלטותיו של הפרט. אבל גם שימושי למחקרי העשרה סביבתיים השוואתיים.

a-standardized-protocol-for-preference-testing-to-assess-fish-welfare

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

הסרטון מתאר את בדיקת ההעדפה לאור-חושך כדי לחקור את ההתנהגות הקשורה לחרדה בדגי זברה בעקבות החשיפה לאתנול.

מבחן העדפה אור-כהה: שיטה לחקר התנהגות הקשורה לחרדה בדגי זברה

מוסברת שיטה חדשה להפחתת השונות בעת חשיפת דגים לתרופות.  דגים שנחשפו לדפוסים שונים של חשיפה לאתנול נמצאו כבעלי רמות חרדה שונות במהלך הגמילה במבחן סקוטוטקסי בהיר/כהה.

שיטה חדשה של תרופות אמריקניות לדג הזברה מרובה ( Rerio Danio) וכימות של נסיגה

המבדק זה מעסיק דגים טורפים מודל כדי להעריך את הנוכחות של מטבוליטים האכלה-הרתעה מתמציות אורגניות של הרקמות של יצורים ימיים בריכוזים טבעיים באמצעות מטריצת מזון דומה מבחינה תזונתית.

מעבדה מבדק-האכלת דגים לבחינת פעילות Antipredatory של משני מטבוליטים מהרקמות של אורגניזמים ימיים

כתב יד זה מתאר את ההגדרה, היישום והניתוח של תעוזה, תוקפנות וגלישה בדגי זברה ובדיקת נוכחות של תסמונת התנהגותית. גישה סטנדרטית לכימות התנהגותי תאפשר השוואה קלה יותר בין מחקרים. שינויים בפרוטוקול זה אפשריים מכיוון שניתן להפעיל כל בדיקה בנפרד.

תעוזה, תוקפנות, ואת מבחני Shoaling עבור תסמונות התנהגותיות דג הזברה

פיתחנו פרוטוקול כדי להעריך רווחה בעכברים במהלך הליכי באמצעות הרדמה כללית. סדרה של פרמטרים התנהגותית המציינת רמות של רווחה וכן glucocorticoid מטבוליטים נותחו. הפרוטוקול יכול לשמש כסיוע כללי כדי להעריך את מידת חומרת בצורה מדעית, מהחי.

הערכה שיטתית של רווחה בעכברים להליכי באמצעות הרדמה כללית

בעבודה זו, אנו מתארים של bioassay אקוטית, כרונית, multigenerational ללמוד את ההשפעות של לחצים יחיד ומשולבים על דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri. פרוטוקול זה תוכנן כדי ללמוד היסטוריה-החיים תכונות (התמותה, צמיחה, פוריות, משקל) ומקסימום תרמי קריטי.

פרוטוקול עבור סימן ובדיקות כרונית Ecotoxicity של דגים גמבוזיים טורקיז Nothobranchius furzeri

כתב יד זה מתאר שיטה פשוטה למדוד מתח במהלך הפעולה במהלך בגרות דג מבוגר. הגישה מנצלת את הנטייה הטבועה שדגים מעדיפים את החצי התחתון של הטנק כאשר במצב מלחיץ. כמו כן, אנו מתארים שיטות לזיווג עם פרמקולוגיה.

גישות התנהגותיות לחקר הלחץ הטבוע בדג זברה

אנו מציגים תא התנהגותי שנועד להעריך את הביצועים הקוגניטיביים. אנו מספקים נתונים המראים כי לאחר שנרכשו, דגי זברה זוכרים את המשימה 8 שבועות לאחר מכן. אנו גם מראים כי דגי זברה היפרגליקמיים שינו את הביצועים הקוגניטיביים, מה שמצביע על כך שפרדיגמה זו חלה על מחקרים המעריכים קוגניציה וזיכרון.

המשימה ההתנהגותית של בחירה תלת-תאית באמצעות דג זברה כמערכת מודל

כאן, אנו מציגים סוללת בדיקות התנהגותית מקיפה, כולל מיכל חדשני, Shoaling ומבחני העדפה חברתית, כדי לקבוע ביעילות את ההשפעות הנוירוטוקסיות האפשריות של כימיקלים (למשל, מתאמפטמין וגלייפוסט) על דגי זברה בוגרים באמצעות מכל יחיד. שיטה זו רלוונטית לנוירוטוקסיות ולמחקר סביבתי.

הערכת רעילות עצבית אצל מבוגרים Danio rerio באמצעות סוללה של מבחנים התנהגותיים במיכל יחיד

משימות העדפה חברתית רב-תאיות הותאמו ממכרסמים לדגי זברה, מה שמקל על חקר התנהגות חברתית באורגניזמים מודליים. פרוטוקול זה מאשר משימת אקווריום פתוח בעלות נמוכה עם שלושה תאים באמצעות מצלמות רשת ותוכנות קוד פתוח למדידת העדפה חברתית לדגי זברה, מה שהופך אותה לנגישה למחקר ולהוראה לסטודנטים לתואר ראשון.

אלטרנטיבה זולה לבחינת העדפה חברתית בדגי זברה (Danio rerio) באמצעות משימת שחייה חופשית פתוחה בת 3 חדרים

למדו פרוטוקול להערכת העדפות מגורים של דגי זברה (Danio rerio) בקשר לעשרור סביבתי וזרימת מים. שיטה זו מאפשרת לחוקרים לשפר את רווחת הדגים בשבי.

פרוטוקול מתוקננת עבור בדיקות העדפה להערכת הרווחה דגים

גלה סרטונים נוספים