Name: השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (ISWAT) מדגם ההשתלה של איויין מורנה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-16T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 14 s
Description: למד השתלת איי לנגרין בשומן לבן תת-עורי באזור המפשעה לטיפול בסוכרת מסוג 1. שיטה זו כוללת בידוד איי מעכברים, ניטור רמות סוכר בדם והערכה היסטולוגית של השתלות לשיפור תוצאות קליניות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים לאומי מפתח R & D תוכנית של סין (2017YFC1103704) קרנות מיוחדות לבניית בתי חולים ברמה גבוהה בפרובינצית גואנג-דונג (2019), פרויקט Sanming של הרפואה שנזן (SZSM201412020), קרן לרמה גבוהה משמעת רפואית בנייה של שנג (2016031638), קרן שנזן של המדע והטכנולוגיה (JCJY20160229204849975, GJHZ20170314171357556), קרן שנזן לבריאות ותכנון משפחה הנציבות (SZXJ2017021SZXJ2018059), רפואי הקרן למחקר מדעי של פרובינציית גואנג-דונג של סין (A2019218), הקרן פוסט-דוקטורט בסין (2018M633218).

כל ההליכים בפרוטוקול זה עקבו אחר עקרונות הרווחה של בעלי החיים של הוועדה לסקירת האתיקה של בית החולים השני של שנזן. מקבלי השתל איון ותורמים היו 8-עד 10-שבוע בן C57BL/6 עכברים זכרים שנרכשו מהמרכז הרפואי בעלי חיים בפרובינצית גואנג-דונג. ההליך של קצירת, בידוד, תרבות, או מינהל של תאים שנקטפו בוצעו בתנאים אספטי.
1. הכנה איון
<ol><li>הכנת הקולגן הסוג V פתרון עבודה. שוקלים את הסוג V ולפזר עם D-האנק של מאגר לריכוז הסופי של 1 מ"ג/mL, מסנן באמצעות 0.22 יקרומטר מזרק מונחה יחידת מסנן ומזרק 60 mL ו-precool קרח. יש צורך בנפח של 5 מ"ל עבור כל נמען תורם.</li>
	<li>המתת חסד של 10 שבועות בן C57BL/6 עכבר זכר (23 ± 2 g) על ידי פריקה צוואר הרחם לרסס את החלק החיצוני של העכבר עם 75% אתנול במשך כמה שניות. בינתיים, למלא מזרק 5 מ ל עם הפתרון הקולגן ולשנות את המחט מזרק עם המחט קהה בוטה המחודד (32 G).</li>
	<li>לשים את העכבר התורם בתנוחה פרקדן על שקית קרח תחת היקף החתך, לחתוך פתח רוחבי באמצעות ישר הצביע מספריים אופטלמולוגי בעור של אזור הערווה, ולחלוטין לממש את העור לעבר הראש. ואז לפתוח לחלוטין את הבטן דרך חתך V מאזור הערווה לתהליך xiphoid.</li>
	<li>לחשוף את כיס המרה ואת כל אורכו של צינור המרה המשותף על ידי מיקום מחדש של הכבד. ואז להדק את פתיחת התריסריון של צינור המרה המשותף עם מהדק כלי הדם ולחתוך פתח קטן בכיס המרה. הערה: מיקום מחטים אופטימלי חשוב למנוע תזים לתוך הכבד והמרה.</li>
	<li>צינורית צינור המרה המשותף מפתח כיס המרה באמצעות מחט זלוף בשלב 1.2, ואז להזריק ~ 2 mL של הפתרון הקולגן לתוך הלבלב. לאחר מכן, הפרידו את הלבלב המצעם מהמעיים, הקיבה והטחול באמצעות שני זוגות של מיקרופינצטה לא פולשנית, והכניסו אותו לשפופרת של 50 מ ל בקרח. הערה: חזור על התהליך עבור כל עכברי התורמים. שלושה משחטות ברציפות (לא יותר מ 40 דקות מלבד) ניתן לשלב לתוך צינור שפופרת של 50 mL מראש עם 3 מ ל של הפתרון הקולגן עבור כל לבלב.</li>
	<li>הוסף 100 μL DNase I (10 מ"ג/mL) לכל הלבלב לתוך הצינורות החרויים 50 mL, ולעכל את המשחטות באמבט מים ב 37 ° צ' על ידי לטלטל את צינורות החרוט עבור 3 – 5 דקות. הערה: לנער את הצינורות במרץ 40 x במרווחי זמן של 10 כדי לנתק את הרקמה לפני העיכול באמבט מים, ולאחר מכן לטלטל את הצינורות בזמן העיכול.</li>
	<li>הוסף פתרון עצירה (2.5 mg/mL BSA-HBSS פתרון) עד לנפח הסופי של 50 mL כדי לחסום את העיכול, ואת הדופק צנטריפוגה את הצינורות למהירות של 750 x g ב 4 ° c ולהפסיק במהירות.</li>
	<li>יוצקים את supernatant ולשטוף את כדורי 2x על ידי השעיית מחדש בעדינות ב 15-25 מ ל של BSA-HBSS. הדופק צנטריפוגה את הצינור עם אותם תנאים מהירות כפי שמתואר בשלב 1.7 עבור 1 דקות.</li>
	<li>יוצקים את הסופרנטאנט ואת הבריכה את כדורי שלושת הצינורות החרוטים לתוך צינורית חרוט 50 mL. השהה מחדש את כדורי בנפח כולל של 10 מ"ל של histopaque-1119. מערבבים הומוגנבאופן רציף, ברציפות להוסיף 5 מ ל של histopaque-1077 ו-5 מ ל של HBSS על ידי ליטוף לאט לאורך הצד של הצינור.</li>
	<li>לסובב את הדגימות בצנטריפוגה ב 750 x g ב 4 ° צ' עבור 10 דקות ללא בלמים.</li>
	<li>מביס את איונים מן HBSS/histopaque-1077 ממשק לתוך צינורית חרוט 50 mL באמצעות חד פעמי 5 מ ל הצינור פסטר, להוסיף BSA-HBSS לנפח הסופי של 50 mL, והדופק צנטריפוגה ב 750 x g ב 4 ° c.</li>
	<li>שופכים את הסופרנטאנט ושוטפים את איואיי באמצעות 30 מ ל של BSA-HBSS. צנטריפוגה עבור 1 דקות ב 750 x g ב 4 ° c.</li>
	<li>השעיה מחדש של איונים באמצעות 30 מ ל של תרבות בינונית (10% FBS-1% P/S-CMRL-1066) לצינור ולשפוך ב 10 ס מ קוטר התרבות הדוקה האור. תחת stereomicroscope, באמצעות 200 μL ג'ל טעינת pipet טיפים, לאסוף את איונים מן הפתרון מבוסס על המבנה שלהם (כלומר, מבחינה מעשית, לבן). לשים לתוך צלחת תרבות תא מטופל עם 10 מ ל של מדיום התרבות. הערה: איסוף הידיים השני יכול להתבצע אם הטוהר של איונים מטוהרים הראשון אינו אופטימלי לאחר הקטיף הראשון.</li>
	<li>בדוק את הטוהר של האיים שנבחרו על ידי dithizone מכתים תחת מיקרוסקופ אור לזהות את הכדאיות של איונים על ידי fluorescein diאצטט (FDA)-propidium יודיד (PI) מכתים תחת מיקרוסקופ פלורסנט.</li>
	<li>תרבות האיים המבודדים בתווך תרבותי (כמו בשלב 1.13) בחממה ב 37 ° c, 95% air-5% CO2 לפני ההשתלה.</li>
</ol>2. ISWAT השתלת איון
<ol><li>לגרום לסוכרת בגבר בן 8 שבועות C57BL/6 עכברים (22 ± 2 גרם) על ידי הזרקה אחת של streptozotocin (STZ). ביום-4, מהר את העכברים ~ 4-6 h, לאחר מכן להכין 2% STZ פתרון באמצעות 0.1 M ציטראט מאגר (pH 4.4). שוקלים, להשעות מחדש במאגר, ולהזריק את העכברים intraperitoneally במינון של 180 מ"ג/ק"ג. הערה: הפתרון STZ צריך להיות טרי מוכן לפני השימוש מכוסה ברדיד אלומיניום עקב רגישות האור שלה. יש להשתמש בו מיד, כי היא תאבד פעילות בתוך 15 – 20 דקות.</li>
	<li>ניקוב ורידים caudal של העכברים STZ-מוזרק לאסוף קצת דם בסביבות 10 בבוקר של יום -1 ויום 0 ולמדוד את רמת הגלוקוז בדם שאינם בצום באמצעות רצועת הבדיקה ומכשיר בסיסי לניטור הגלוקוז בדם. העכברים ישמשו כנמעני השתלת איון אם רמות הגלוקוז בדם של 2 ימי המבחן הרצופות הן לפחות 20 מ מול/L.</li>
	<li>ביום 0, שקול וסמן את כל עכברי הנמען. הפנטוברביטל כל נמען באמצעות הזרקת 60 מ"ג/ק"ג לintraperitoneally נתרן. הערה: לנהל את הבוהן כדי לבדוק את עומק ההרדמה. אם לעכבר הנמען אין רפלקס גמילה, רמת ההרדמה מספיקה לניתוח. אם לא, ניהול נוסף 10 מ"ג/ק"ג פנטוברביטל נתרן. פנטוברביטל נתרן בשימוש היה מדולל תמיסת מלח פיזיולוגי סטרילי בריכוז של 2% (m/v).</li>
	<li>קח את ההידרוג'ל ממקפיא של 20 ° c ושמור אותו על הקרח כדי לאפשר את הפשרה. ההידרוג'ל הינו נוזלי בגובה של 4 עד 10 ° c והוא יחזק בטמפרטורה גבוהה יותר.</li>
	<li>לאסוף ~ 450 – 500 המקבילה איון (IEQ) עבור כל נמען לתוך שפופרת 1.5 mL סטרילי מתחת לstereomicroscope (כמו בשלב 1.13) עם 200 μL של התרבות בינונית ולשמור על הקרח עד מוכן השתלת.</li>
	<li>לנגב את האזור השמאלי הלבין של המטופל באמצעות 75% אתנול. מניחים אותו במצב פרקדן ולתקן את ארבעת הגפיים באמצעות קלטת כירורגית. לגלח את השיער סביב האתר כירורגי עם קוצץ חשמלי ולנקות את האזור עם שפתי-האור.</li>
	<li>הפוך את חתך העור האנכי באזור זה באמצעות מספריים אופטלמולוגית ומיקרופינצטה לא פולשנית, לזהות את עורק הקיבה והווריד הנחותים באיזווואט, וליצור כיס קטן מעל כלי הדם.</li>
	<li>ספין הצינור איים עבור 30 s ב 200 x g ולהסיר את supernatant ככל האפשר. מנושף 20 μL של הידרוג'ל מופל לחלוטין ולטעון אותו לתוך הצינור עם איונים. , להשהות את האיים בעדינות. להימנע מבועות</li>
	<li>העבר את התערובת של איון-הידרוג'ל כולו בצינור לכיס (שלב 2.7) של המטופל עם טיפ 200 μL. הערה: תהליך זה דורש שני טכנאים, אחד להרים את הקצוות של הכיס באמצעות מיקרופינצטה לא פולשנית, והשני לאספקת תערובת איון לתוך הכיס.</li>
	<li>הוסף 20 μL של צפלוספורין (~ 5 – 10 מ"ג) לתוך האתר השתלת לאחר התערובת איונים-הידרוג'ל הוא מתחזק לחלוטין, ולאחר מכן להשתמש בתפר כירורגי 5-0 לסגור את השריר והעור עם שיטת תפר רציפה. הערה: ההידרוג'ל צריך בערך 3 דקות כדי לגבש עקב טמפרטורת הגוף.</li>
	<li>הציבו את המטופל בכלוב נקי והמשיכו להתחמם באמצעות משטח תרמי. המשך לעקוב עד שהנמען מתאושש במלואו ומתחיל לנוע באופן עצמאי. לאחר מכן לנהל 0.03 mg/ml Buprenorphine עם intraperitoneally מלוחים פיסיולוגיים, על פי 0.1 mg/ק"ג מינון.</li>
	<li>חזור על שלבים 2.3 – 2.11 עבור כל עכבר נמען.</li>
	<li>למדוד את רמות הגלוקוז בדם שאינם צום של עכברי הנמען (כמו בשלב 2.2) 3 – 4x בשבוע עבור החודש הראשון, ו-1x בשבוע לאחר מכן.</li>
	<li>בסוף המעקב (100 ימים לאחר ההשתלה), תחת הרדמה (בוצע כמו בשלב 2.3) הבלו ISWAT הנושאת את השתל מהנמענים בעקבות הצעדים סטרילי המתואר בשלב 2.6. תקן את הרקמה בפורמאלין ופאראפורמלדהיד בהתאם לפרוטוקולים היסטלוגיים עבור המטאוקסילין והאאוזין (H & E) כתמים ואימונולואואורולוגיים של אינסולין וגלוגון.</li>
	<li>להוסיף צפלוספורין ולסגור את החתך של הנמענים כמו בשלב 2.10, לאחר מכן להתכונן להחלמה כמו בשלב 2.11.</li>
</ol>

<ol><li>Cho, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IDF+Diabetes+Atlas%3A+Global+estimates+of+diabetes+prevalence+for+2017+and+projections+for+2045%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Research+and+Clinical+Practice%22%5BJournal%5D)">IDF Diabetes Atlas: Global estimates of diabetes prevalence for 2017 and projections for 2045.</a> Diabetes Research and Clinical Practice. 138, 271-281 (2018).</li>
<li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> New England Journal of Medicine. 343 (4), 230-238 (2000).</li>
<li>McCall, M., Shapiro, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+on+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Perspectives+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Update on islet transplantation.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 2 (7), 007823(2012).</li>
<li>Pathak, V., Pathak, N. M., O'Neill, C. L., Guduric-Fuchs, J., Medina, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapies+for+Type+1+Diabetes%3A+Current+Scenario+and+Future+Perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Medicine+Insights%3A+Endocrinology+and+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Therapies for Type 1 Diabetes: Current Scenario and Future Perspectives.</a> Clinical Medicine Insights: Endocrinology and Diabetes. 12, 1179551419844521(2019).</li>
<li>Bottino, R., Knoll, M. F., Knoll, C. A., Bertera, S., Trucco, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Future+of+Islet+Transplantation+Is+Now%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">The Future of Islet Transplantation Is Now.</a> Frontiers in Medicine (Lausanne). 5, 202(2018).</li>
<li>Stokes, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+sites+for+human+and+murine+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Transplantation sites for human and murine islets.</a> Diabetologia. 60 (10), 1961-1971 (2017).</li>
<li>van der Windt, D. J., Echeverri, G. J., Ijzermans, J. N., Cooper, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+choice+of+anatomical+site+for+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The choice of anatomical site for islet transplantation.</a> Cell Transplantation. 17 (9), 1005-1014 (2008).</li>
<li>Addison, P., Fatakhova, K., Rodriguez Rilo, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+an+Alternative+Site+of+Islet+Cell+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Diabetes+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Considerations for an Alternative Site of Islet Cell Transplantation.</a> Journal of Diabetes Science and Technology. , (2019).</li>
<li>Pepper, A. R., Bruni, A., Shapiro, A. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+islet+transplantation%3A+is+the+future+finally+now%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Clinical islet transplantation: is the future finally now.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 23 (4), 428-439 (2018).</li>
<li>Bellin, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Similar+islet+function+in+islet+allotransplant+and+autotransplant+recipients%2C+despite+lower+islet+mass+in+autotransplants%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Similar islet function in islet allotransplant and autotransplant recipients, despite lower islet mass in autotransplants.</a> Transplantation. 91 (3), 367-372 (2011).</li>
<li>Bruni, A., Gala-Lopez, B., Pepper, A. R., Abualhassan, N. S., Shapiro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+cell+transplantation+for+the+treatment+of+type+1+diabetes%3A+recent+advances+and+future+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%2C+Metabolic+Syndrome+and+Obesity%3A+Targets+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Islet cell transplantation for the treatment of type 1 diabetes: recent advances and future challenges.</a> Diabetes, Metabolic Syndrome and Obesity: Targets and Therapy. 7, 211-223 (2014).</li>
<li>Smood, B., Bottino, R., Hara, H., Cooper, D. K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+the+renal+subcapsular+space+the+preferred+site+for+clinical+porcine+islet+xenotransplantation%3F+Review+article%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Is the renal subcapsular space the preferred site for clinical porcine islet xenotransplantation? Review article.</a> International Journal of Surgery and Medicine. 69, 100-107 (2019).</li>
<li>Luan, N. M., Iwata, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+allogeneic+islet+graft+survival+in+prevascularized+subcutaneous+sites+without+immunosuppressive+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Long-term allogeneic islet graft survival in prevascularized subcutaneous sites without immunosuppressive treatment.</a> American Journal of Transplantation. 14 (7), 1533-1542 (2014).</li>
<li>Yasunami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Novel+Subcutaneous+Site+of+Islet+Transplantation+Superior+to+the+Liver%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A Novel Subcutaneous Site of Islet Transplantation Superior to the Liver.</a> Transplantation. 102 (6), 945-952 (2018).</li>
<li>Rajab, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+transplantation%3A+alternative+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Diabetes+Reports%22%5BJournal%5D)">Islet transplantation: alternative sites.</a> Current Diabetes Reports. 10 (5), 332-337 (2010).</li>
<li>Ekser, B., Vagefi, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Search+for+the+best+site+in+islet+xenotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Surgery+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Search for the best site in islet xenotransplantation.</a> International Journal of Surgery and Medicine. 70, 106-107 (2019).</li>
<li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+Islet+Transplantation+to+the+Omentum+in+Mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Method for Islet Transplantation to the Omentum in Mouse.</a> Journal of Visualized Experiments. (143), e57160(2019).</li>
<li>Neuman, J. C., Truchan, N. A., Joseph, J. W., Kimple, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+mouse+pancreatic+islet+isolation+and+intracellular+cAMP+determination%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A method for mouse pancreatic islet isolation and intracellular cAMP determination.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e50374(2014).</li>
<li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (50), e2096(2011).</li>
<li>Khatri, R., Hussmann, B., Rawat, D., Gurol, A. O., Linn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraportal+Transplantation+of+Pancreatic+Islets+in+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Intraportal Transplantation of Pancreatic Islets in Mouse Model.</a> Journal of Visualized Experiments. (135), e57559(2018).</li>
<li>Carter, J. D., Dula, S. B., Corbin, K. L., Wu, R., Nunemaker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+rodent+islet+isolation+and+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Procedures+Online%22%5BJournal%5D)">A practical guide to rodent islet isolation and assessment.</a> Biological Procedures Online. 11, 3-31 (2009).</li>
</ol>

המחברים אינם מדווחים על ניגודי אינטרסים.

השתלת איון הלבלב הוא טיפול מבטיח לטיפול T1DM. ההשפעה של טיפול זה מושפע גורמים רבים ובחירת אתר אופטימלי עבור השרשה איון חשוב מאוד. האתר האנטומי האידיאלי עבור השתלת איון צריך את המאפיינים הבאים: נגישות להשתלה פשוטה, ביופסיה, והליכי אחזור השתל; סיבוכים מופחתים; שיעור הצלחה גבוהה של בקרת גלוקוז בדם; ולטווח ארוך הישרדות של שתלי איון6,16.
הצוות שלנו תיאר בעבר פרוטוקול עבור השתלת איון ב המנטום במודל murine17. במהלך המנ...

השכיחות העולמית והשכיחות של סוכרת מסוג 1 (T1DM) עולים במהירות, על פי הנתונים הסטטיסטיים של הפדרציה הבינלאומית לסוכרת (צה"ל)1. השתלת איון היא אחת הגישות המבטיחים ביותר לטיפול T1DM4. מאז פריצת הדרך הגדולה שנעשתה השתלת איון קליני באמצעות פרוטוקול אדמונטון2 דווח, תפקוד הישרדות השתל איון ב T1DM הנמענים לאחר 5 שנים מגיע כעת על 50%3.
בעבר, מספר אתרי השתלת, כגון הכבד, כמוסת כליות, טחול, אזור תוך שרירי, מרחב תת עורי, מח עצם, ואת הכיס אונטל נחקרו עבור השתלת איון ניסיוני5,6,7. חלק מהאתרים הנ ל נבדקו בהגדרות הקליניות8. למרות השתלת איון לתוך הכבד נשאר השיטה הנפוצה ביותר בשימוש ביישום קליני בהווה9, יש כמה בעיות חשובות לכתובת בעת שימוש באתר זה. למשל, כיצד להפחית את אובדן מוקדם של האיים המושתלים שנגרמו על ידי התגובה הדלקתית מיידית של דם בתיווך (IBMIR) ואספקת חמצון העניים10,11 וכיצד לאחזר את שתלי איון במידת הצורך, כי הם מפזרים לוקליזציה בכבד. קפסולת הכליות עשויה להיות אתר אידיאלי עבור נמעני מכרסמים. עם זאת, הקפסולה כליה הדוקה מגביל את ההשתלה של איונים allogeneic מספקת בבני אדם, למרות שזה יכול להיות מתאים יותר עבור השתלת איון xenotransplantation בשל ההכנות מטוהרים מאוד חזירי איון בשימוש קליני5,12. לכן, החיפוש אחר אתר מתאים יותר עבור השתלת איון הוא בעיצומו.
החלל התת עורי עשוי לשמש כאתר הישימה קלינית עבור השתלת איון בשל הנגישות שלה. עם זאת, את היעילות של השתלת איון לחלל תת עורית הוא נמוך מאוד, ובכך דורשים מספר גדול יחסית של איוקמיה הפוכה13. לאחרונה, צוות מחקר יפני מצא את ISWAT, אתר תת עורית הספר מעולה להשתלה איון במודל murine בהשוואה לכבד14. ISWAT מכיל את העורק האפיקיבה ואת הווריד, כך אספקת הדם העשיר עשוי להבטיח השתלת איון revascularization. בכתב יד זה, אנו מציעים שיטת השרשה קלה באמצעות מטריקס מטריצות קרום הידרוג'ל כדי לתקן איונים murine מורנה ב ISWAT. פרוטוקול זה מוכיח יעיל עבור השתלת איון.

<table><tbody><tr><td>0.22 &mu; m יחידת סינון מונעת מזרק</td><td>Merck Millipore</td><td>SLHV033RB</td><td></td></tr><tr><td>צינור צנטריפוגה 1.5 מ"ל</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל פסטר פיפטה</td><td>ג'ינגאן ביולוגית, סין</td><td>J00085</td><td></td></tr><tr><td>מזרק 5 מ"ל</td><td>Szboon, סין</td><td>20170829</td><td></td></tr><tr><td>50 מ"ל צינור חרוטי</td><td>קורנינג</td><td>430829</td><td></td></tr><tr><td>5-0 תפר כירורגי</td><td>sh-Jinhuan, סין</td><td>CR537</td><td></td></tr><tr><td>מזרק 60 מ"ל</td><td>Szboon, סין</td><td>20170623</td><td></td></tr><tr><td>75% אתנול</td><td>LIRCON, סין</td><td>9180527</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 חמור נגד עכבר IgG (H + L)</td> <td>Invitrogen</td><td>A21202</td><td>דילול (1:200)</td></tr> <tr><td>נוגדן גלוקגון נגד עכבר</td><td>Abcam</td><td>ab10988</td><td>דילול (1:100)</td></tr> <tr><td>נוגדן אינסולין נגד עכבר</td><td>תא טכנולוגיית איתות</td><td>3014s</td><td>דילול (1:100)</td></tr> <tr><td>מחט זלוף מחודדת קהה</td><td>Oloey, סין</td><td>005</td><td>32G,</td></tr><tr><td>צהוב BSA</td><td>Meilune, סין</td><td>MB4219</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6 עכברים</td><td>מרכז בעלי חיים רפואיים במחוז גואנגדונג</td><td></td><td>8 ~ 10 שבועות</td></tr><tr><td>צלחת תרבית תאים</td><td>BIOFIL, סין</td><td>TCD000100</td><td>כללי, לא מטופל, קוטר 87.8 מ"מ</td></tr><tr><td>צנטריפוגה</td><td>Thermo Scientific</td><td>ST16R</td><td></td></tr><tr><td>cephalosporin</td><td>Lukang רפואי, סין</td><td>150303</td><td></td></tr><tr><td>CMRL-1066</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0422</td><td></td></tr><tr><td>Codos Pet Clipper</td><td>Szcodos, סין</td><td>CP-8000</td><td></td></tr><tr><td>קולגנאז מסוג</td><td>V Sigma</td><td>C9262</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Thermo Fisher</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>המאגר של D-hank</td><td>Coolaber, סין</td><td>PM5140-10</td><td></td></tr><tr><td>dithizone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5130</td><td></td></tr><tr><td>Dnase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4263</td><td></td></tr><tr><td>Eosin צביעת</td><td>מדיה Beyotime Biotech, סין</td><td>C0109</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GE Healthcare Life Sciences</td><td>SH30084</td><td></td></tr><tr><td>פלואורסצאין דיאצטט (FDA)</td> <td>תרמו פישר</td><td>F1303</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנטי</td><td>Leica</td><td>DMIL</td><td></td></tr><tr><td>קצות פיפט לטעינת ג'ל</td><td>קורנינג</td><td>CLS4884</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Coolaber, סין</td><td>PM5150-10</td><td></td></tr><tr><td>המטוקסילין מכתים מדיה איתות</td><td>תאים טכנולוגיית איתות תאים</td><td>14166S</td><td></td></tr><tr><td>HISTOPAQUE-1077</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>RNBG0522</td><td></td></tr><tr><td>HISTOPAQUE-1119</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>RNBG0536</td><td></td></tr><tr><td>הידרוג'ל</td><td>BD Biosciences</td><td>356234</td><td>מטריצת קרום מרתף</td></tr><tr><td>Iodophor</td><td>LIRCON, סין</td><td>צלחת</td> תרבית אטומה לאור 5190313 <td></td></tr><tr><td></td><td>DVS, סין</td><td>AN-5058548</td><td>מתוצרת עצמית, צלחת זכוכית מרוססת בצבע שחור</td></tr><tr><td>סרט דבק רפואי</td><td>Cofoe, סין</td><td>K12001</td><td></td></tr><tr><td>מיקרו-פינצטה לא פולשנית</td><td>RWD Life Science</td><td>F11033-11 ו-F12016-15</td><td></td></tr><tr><td>One Touch ultraeasy מערכת ניטור סוכר בדם בסיסית</td><td>Johnson & Johnson</td><td>33391713</td><td></td></tr><tr><td>מספריים עיניים</td><td>RWD Life Science</td><td>S12012-12 ו- S11001-08</td><td></td></tr><tr><td>P/S (פניצילין / סטרפטומיצין)</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>נתרן פנטוברביטל</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>P-010</td><td></td></tr><tr><td>פרופידיום יודיד</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>P4864</td><td></td></tr><tr><td>STZ (סטרפטוזוטוצין)</td><td>סיגמא-אולדריץ'</td><td>S0130</td><td></td></tr><tr><td>רצועת בדיקה</td><td>GenUltimate</td><td>100-50</td><td></td></tr><tr><td>TRITC מצומד עזים אנטי-ארנב IgG (H + L)</td> <td>proteintech</td><td>SA00007-2</td><td>דילול (1: 200)</td></tr> <tr><td>מהדק כלי דם</td><td>RWD מדעי החיים</td><td>R31006-04</td><td></td></tr></tbody></table>

השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (iswat) מדגם ההשתלה של איויין מורנה

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

השתלת איון הלבלב הוא טיפול רפואי מבוסס היטב עבור סוכרת סוג 1. קפסולת הכליה הוא האתר הנפוץ ביותר עבור השתלת איון במודלים מכרסמים. עם זאת, קפסולת הכליה הדוקה מגבילה את ההשתלה של איונים מספיקים בבעלי חיים גדולים ובני אדם. רקמת השומן הלבנה לבנה תת עורית (ISWAT), חלל תת עורי חדש, נמצא להיות אתר בעל ערך פוטנציאלי עבור השתלת איון. באתר זה יש אספקת דם טובה יותר מאשר חללים תת עורית אחרים. יתר על כן, ISWAT להכיל מסה איון גדול יותר מאשר קפסולת הכליה, והשתלת לתוך זה הוא פשוט. כתב יד זה מתאר את ההליך של בידוד איון העכבר והשתלת באתר ISWAT של העכבר סוכרתית התחביריים. באמצעות פרוטוקול זה, מורטין איונים הלבלב היו מבודדים על ידי העיכול הסטנדרטי קולגן ומטריצות קרום המרתף הידרוג'ל שימש לתיקון איונים מטוהרים באתר ISWAT. רמות הגלוקוז בדם של עכברי המטופל היו מנוטרים במשך יותר מ 100 ימים. שתלי איון אוחזרו ביום 100 לאחר ההשתלה ניתוח היסטולוגית. הפרוטוקול להשתלה איון באתר ISWAT המתואר בכתב יד זה הוא פשוט ואפקטיבי.

שני הליכים מוצגים בפרוטוקול זה: הכנה מורנה איון השתלת איון לאתר ISWAT. , בהליך הראשון לאחר השימוש והעיכול עם מסוג V קולגן הפתרון, טיהור עם Histopaque-1119 ו Histopaque-1077 וצעד נוסף לקטוף יד, איונים murine מבודדים יהיה טהור מספיק עבור השתלת (כפי שמוצג באיור 1) ואת איונים מבודדים כי יש כדאיות גבוהה ישמש השתלת (כפי שמוצג באיור 2). בהליך השני, האינדוקציה סוכרת עם כימיה STZ הוא קריטי. המינון האופטימלי של STZ תלוי במתח העכבר גיל, ואינדוקציה מוצלחת של סוכרת מוגדר על ...

בפרוטוקול זה, שיטה של מורטין איון בידוד והשתלת לתוך רקמת השומן הלבן התת עורית מתוארת. האיים המבודדים של מורנה ממורג מושתלים לתוך המטופל מורין באמצעות קרום מרתף הידרוג'ל. רמת הגלוקוז בדם של המטופלים מנוטרים, ו ניתוח היסטולוגיה של שתלי איון מבוצע.

השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (ISWAT) מדגם ההשתלה של איויין מורנה

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...

השתלת איון היא אחת הגישות המבטיחות ביותר לטיפול בסוכרת מסוג I. והחיפוש אחר אתר מתאים להשתלת איון נמשך. השתלת איון לרקמת השומן הלבנה התת עורית התת עורית היא שיטה פשוטה אך יעילה שעשויות להיות לה השלכות קליניות.אקסטרפולציה של הליך זה למרפאה עלולה להוביל להתפתחות תרופה לחולי סוכרת מסוג I. שיטה זו יכולה לספק תובנה על השתלת איון קליני כמו לשוני נקבע לא להיות אתר אידיאלי עבור חריטה איון. חשוב לעקוב בזהירות אחר כל שלב של ההליך, במיוחד צעדים מרכזיים, כגון עיכול הלבלב.הדגמה חזותית תסייע לחוקרים חדשים בטכניקה כדי לקבוע טוב יותר כיצד לבצע את בידוד איון ואת transmutation. לקציר איון, לרסס תחילה את הפרווה של עכבר שחור C57 בן 10 שבועות עם 75% אתנול, ולמלא מזרק חמישה מיליליטר עם פתרון קולגנס מוכן טרי. לצייד את המזרק עם מחט עיקול מחודדת קהה 32-מד, ולמקם את העכבר בתמקם supine על שקית קרח.השתמש מספריים עיניים מחודד ישר לעשות פתח רוחבי בעור של אזור הערווה, ולהרחיב את החתך לכיוון הראש של החיה. פתח לחלוטין את הבטן באמצעות חתך V מאזור הערווה לתהליך xiphoid, ולהזיז את הכבד כדי לחשוף את כיס המרה ואת כל אורך צינור המרה המשותף. לאחר מכן השתמשו במהדק כלי דם כדי לסגור את פתח התריסירה של צינור המרה המשותף וחותכים פתח קטן בכיס המרה.Cannulate צינור המרה המשותף דרך הפתח עם מחט חיסון שהוכן בעבר, ולהזריק כשני מיליליטר של פתרון קולגן לתוך הלבלב. כאשר כל הקולגנס נמסר, השתמש בשני זוגות של פינצטה מיקרו פולשנית כדי להפריד את הלבלב המופרך מהמעיים, הקיבה והטהר, והניח את הלבלב לתוך צינור חרוט 50 מיליליטר על קרח. לאחר איסוף כל הדגימות, הוסיפו 100 מיקרוליטרים של DNASE I לכל לבלב לצינורות 50 מיליליטר ורעידות נמרצות כל צינור כ-40 פעמים על פני תקופה של 10 שניות לפני שהניחו את הרקמות באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס במשך שלוש עד חמש דקות עם רעידות מתונות.בסוף הדגירה, להוסיף עד נפח סופי של 50 מיליליטר של פתרון להפסיק לעצור את העיכול. והדופק צנטריפוגה הצינורות למהירות של 750 פעמים G בארבע מעלות צלזיוס לפני במהירות לעצור את הצנטריפוגה. לאחר השלכת supernatants, לשטוף את כדורי פעמיים 15 כדי 25 מיליליטר של פתרון להפסיק לשטוף תחת אותם תנאי צנטריפוגה כפי שהוכח רק.לאחר הכביסה השנייה, בריכה שלוש כדורי לצינור לתוך צינורות חרוט חדשים 50 מיליליטר. ולתלות מחדש את תאי הלבלב בנפח כולל של עשרה מיליליטר של היטופק 1119. הבא בזהירות להוסיף חמישה מיליליטר של Histopaque 1077 לאורך הצד של כל צינור, ואחריו חמישה מיליליטר של HBSS.להפריד את התאים על ידי צנטריפוגה ולהשתמש פיפטה פסטר חמישה מיליליטר כדי לאסוף את איונים מממשק HBSS Histopaque 1077. בריכת האיים בצינור חרוט חדש 50 מיליליטר בנפח סופי של 50 מיליליטר של פתרון עצור עבור צנטריפוגה הדופק, ולהשליך את העל טבעי. תבזבזו מחדש את גלולת הכדור ב-30 מיליליטר של פתרון עצירה טרי לצנטריפוגה של דקה אחת, והשקיעו מחדש את האיים ב-30 מיליליטר של מדיום תרבותי.דקאנט את איונים לתוך אחד 10 ס"מ תבשיל תרבות אור הדוק לכל צינור. ומ מניחים את המנה מתחת למיקרוסקופ הסטריאו. בעזרת 200 טיפים לטעינת ג'ל מיקרוליטר, בחרו ידנית את איונים כדוריים לבנים מהתמיסה.הצבת האיים לתוך צלחת תרבות תאים מטופלת המכילה 10 מיליליטר של מדיום תרבות כפי שהם נקצרים. בדוק את טוהר האיים שנבחרו ביד על ידי כתמי dithizone תחת מיקרוסקופ אור. ולזהות את הכדאיות של איונים על ידי פלואורסין ניקוד רדידם יודיד מכתים תחת מיקרוסקופ פלורסנט.ואז תרבות האיים המבודדים בתרבות רעננה בינונית ב 37 מעלות צלזיוס ב 95% אוויר ו 5% פחמן דו חמצני עד ההשתלה. החל בימים 3 ו -4 לאחר אינדוקציה סוכרת, לנקב את וריד caudal של כל סטרפטוזוטוסין מוזרק שמונה שבועות זכר C57 שחור שישה עכבר סביב 10:00.m. כדי לאסוף דגימת דם מכל חיה הנמען.השתמש במכשיר ניטור גלוקוז בדם בסיסי כדי לקבוע את רמת הגלוקוז בדם ללא צום של כל עכבר ולאחר מכן להוסיף את הדם על רצועות בדיקה בודדות. כאשר בעל חיים הוכיח רמת גלוקוז בדם של לפחות 20 מילימול לליטר יומיים ברציפות, לשקול ולסמן את העכבר המטופל ולאשר חוסר תגובה רפלקס הדוושה בבעלי החיים הרדמה. מניחים aliquot של הידרוג'ל ממינוס 20 מעלות צלזיוס אחסון על קרח להפשרה.ולהעביר 450 עד 500 שווה ערך איון לכל נמען לתוך צינור צנטריפוגה סטרילי 1.5 מיליליטר המכיל 200 microliters של בינוני לכל צינור על קרח. ספוגית את האזור המגן השמאלי של הנמען עם 75%אתנול ולמקם את העכבר בתדר supine. לתקן את הגפיים עם סרט כירורגי, ולהשתמש קוצץ כדי להסיר את השיער סביב האתר הכירורגי.ספוגית את האזור הכירורגי עם יודפור ולעשות חתך אנכי בעור חיטוי. זהה את העורק והווריד האפיגמטריים הנחותים בתוך ISWAT וצור כיס קטן מעל כלי הדם. מעים את איונים על ידי צנטריפוגה ולהסיר על טבעי ככל האפשר.מוסיפים 20 מיקרוליטרים של הידרוג'ל מופשר לכל צינור, ומערבבים בעדינות את האיים, דואגים להימנע מבועות. כאשר הושגה השעיה הומוגנית, השתמש בקצה פיפטה 200 מיקרוליטר כדי לספק בזהירות את כל תערובת הידרוג'ל איון מצינור אחד לכיס. כאשר הידרוג'ל התגבש לחלוטין, להוסיף 20 microliters של צפלוספורין לאתר ההשתלה, ולסגור את השריר והעור עם תפר כירורגי מתמשך 5-0.לאחר מכן מניחים את הנמען בכלוב נקי על כרית תרמית עם ניטור עד ל recumbency מלא. לאחר עיבוד איון המורין כפי שהוכח, איי המורין המבודדים יהיו טהורים מספיק להשתלה. יש להשתמש רק באזורים מבודדים בעלי כדאיות גבוהה להשתלה.לאחר ערבוב יסודי של שתלי איון עם הידרוג'ל, השתל יכול להיות מושתל באתר ISWAT. לאחר כחודש של השתלה לתוך ISWAT, שתלי איון להפוך היפרגליקמיה בעוד משקל הגוף של העכברים הנמען גדל בהדרגה. בשעה 100 ימים לאחר ההשתלה, הסרת השתלים גורמת לעלייה מיידית בטמפרטורה של 10:00 .m.רמת גלוקוז בדם שאינה בצום. ניתוח היסטולוגי בנקודת זמן זו, מגלה כי שתלי איון נשארו שלמים. וכתמים חיסוניים של אינסולין וגלוקגון מצביעים על כך שגם האיים המושתלים מתפקדים ב-100 ימים לאחר ההשתלה.היזהר לא לנער את תאי הלבלב המוליכים חזק מדי או אחר היכולת של האיים המתקבלים ייפגע. איונים מבודדים ניתן להשתיל תחת קפסולת הכליה כפקד כדי להשוות את ההשפעות של ההשתלה המבודדת לתוך רקמת שומן לבן תת עורית inguinal באתר. ההליך יוסיף חניכה של ניסויים קליניים של השתלת איון לאתרים אחרים מלבד הכבד.

inguinal-subcutaneous-white-adipose-tissue-iswat-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

השתלה של איים מבודדים הוצע להיות טיפול פוטנציאלי עבור סוכרת מסוג 1. כאן אנו מתארים שיטה לבודד איים מהעכבר pancreata ואת השתלת אותם למרחב subcapsular של הכליה.

שיטה בידוד איילט Murine והשתלות כליה Subcapsular

פרוטוקול זה מדגים בידוד איים Murine וזרע על פיגום decellularized. איים נתמך פיגומים הושתלו לתוך כרית שומן האפידידימלי של streptozotocin (STZ), המושרה עכברים סוכרתית. איים שרדו באתר ההשתלות והפכו את מצב ההיפרגליקמיה.

פיגום נתמך השתלת איים בשומן השומן האפידידימלי של עכברים סוכרתית

שומן לבן (וואט) יש ליקויים קריטי הדגמים תרבות הראשי הנוכחי שלה, הפרעה מטבולית מחקרים ופיתוח תרופתי. כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר מערכת microphysiological אדיפוז מאת וואט sandwiching בין גליונות של תאי סטרומה. מבנה זה מספק פלטפורמה יציבה וניתנת להתאמה לתרבות וואט העיקרי.

פלטפורמה Microphysiologic שומן אנושי: דחוקה שומן לבן

מאמר זה מתאר שיטת השתלת להשתיל השתל בפטמות האפיתל התאים לתוך משטח שומן לבן של בעלי חיים הנמען. ניתן להשתמש בשיטה זו כדי לבחון את השפעות המארחים ו/או התורמים בהתפתחות האפיתל של הפטמות ומבטלת את הצורך בניקוי מראש, ובכך מרחיב את התועלת שבטכניקה זו.

חולדה השתלת תא האפיתל לתוך משטח שומן לבן הגלימה

שיטת השתלת איונים מכוסה שומן זו מתאימה לאיתור איים מושתלים בחלל התוך-צפק. יש לציין כי היא אינה דורשת שימוש בחומרים מחייבים ביולוגיים או בתפירה.

השתלת איון מכוסה שומן באמצעות רקמת שומן לבן אפידידימלית

הדמיה פונקציונלית וכמות של מחסני שומן תרמוגניים בעכברים באמצעות גישה מבוססת הדמיה מיקרו-PET /MR.

הדמיה וכימות של רקמות שומן חום ובז' בעכברים באמצעות [18F]FDG מיקרו-PET/MR הדמיה

פרוטוקול זה מציג את השימוש ב-CRISPR SunTag-p65-HSF1 (SPH) באדיפוציטים (AdipoSPH) כאסטרטגיה חלופית לווירוס הקשור לאדנו (AAV) לחקר ביולוגיה של שומן בז'. הזרקת In vivo של sgRNA נושא AAV המכוונת לגן האנדוגני Prdm16 מספיקה כדי לגרום להתפתחות שומן בז' ולשפר את תוכנית הגן התרמוגני.

חקירת ביולוגיה ומטבוליזם של שומן בז' באמצעות מערכת ההפעלה CRISPR SunTag-p65-HSF1

פרוטוקול זה מתאר את הבידוד החצי-אוטומטי של מקטע כלי הדם סטרומה (SVF) מרקמת השומן של מורין כדי להשיג קדם-אדיפוציטים ולהשיג התמיינות אדיפוציט במבחנה. שימוש בדיסוציאטור רקמות לעיכול קולגנאז מפחית את השונות הניסיונית ומגביר את יכולת הרבייה.

בידוד חצי אוטומטי של מקטע כלי הדם הסטרומלי מרקמת השומן הלבנה באמצעות דיסוציאטור רקמות

כאן אנו מציגים פרוטוקול השתלת רקמת שומן לבן וחום המציע אסטרטגיה מבטיחה להיפוך תת-פוריות, השמנת יתר והיפרגליקמיה, תוך שיפור תפקוד הכליות בעכברי BTBR סוכרתיים והשמנת יתר.

שתלי שומן לבנים וחומים: גישה לתיקון ליקויים רבייתיים, מטבוליים וכלייתיים בעכברים שמנים שחורים ושזופים (BTBR)

תיאור אינדוקציה הניתוח של אנדומטריוזיס בעכברים וחולדות על ידי השתלת אוטומטית של רקמת הרחם אל מפל העורקים של mesentery המעי.

עכבר דגם של אנדומטריוזיס בניתוח המושרה על ידי השתלת אוטומטי של רקמות הרחם

למד השתלת איי לנגרין בשומן לבן תת-עורי באזור המפשעה לטיפול בסוכרת מסוג 1. שיטה זו כוללת בידוד איי מעכברים, ניטור רמות סוכר בדם והערכה היסטולוגית של השתלות לשיפור תוצאות קליניות.

השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (ISWAT) מדגם ההשתלה של איויין מורנה

גלה סרטונים נוספים