Name: הערכה של תפקוד הזיכרון בפילסוקרפיין-עכברים מבוססי אפילפסיה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 34 s
Description: למדו פרוטוקול להערכת ליקויי זיכרון בעכברים עם אפילפסיה כרונית שנגרמה על ידי פילוקרפין. השיטות כוללות מבחני מיקום וזיהוי עצמים חדשים ומבחן הפרדת תבניות ללא לחץ מיותר על בעלי החיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנחנו מודים לד ר ג'אי-מין לי. על התמיכה הטכנית שלו עבודה זו נתמכת על ידי הקרן הלאומית למחקר של קוריאה (NRF) מענקים ממומן על ידי ממשלת קוריאה (NRF-2019R1A2C1003958, NRF-2019R1A2C1003958 A08000167).

. למחברים אין מה לגלות

עבודה זו מתארת הליכים ניסיוניים להערכת תפקוד קוגניטיבי בעכברים עם אפילפסיה כרונית. תבניות התנהגות שונות רבות משמשות להערכת פונקציות הלמידה והזיכרון בעכברים18. מבוך המים של מוריס, הזרוע הרדיאלי מבוך, Y-מבוך, מיזוג הפחד ההקשריים, ובדיקות מבוססות האובייקט הם המבחנים התנהגותיים הנפוצים ביותר ולספק תוצאות אמינות. ביניהם, המבחנים NL, לא, ו-PS הם יעילים, פשוט שיטות להערכת למידה וזיכרון בעכברים אפילפטי8,10. מכיוון שעכברים אפילפטי יכולים להיות בלתי...

אפילפסיה היא הפרעה כרונית המאופיינת התקפים חוזרים ספונטנית1,2,3. מכיוון התקפים חוזרים יכולים לגרום ליקויים מבניים ופונקציונליים במוח1,2,3, פעילות תפיסה נורמלית יכול לתרום לתפקוד הקוגניטיבי, שהוא אחד הנפוצים ביותר אפילפסיה הקשורים התחלואה4,5,6. בניגוד לאירועים תפיסה כרונית, אשר ארעי ורגעי, ליקויים קוגניטיביים יכולים להימשך ברחבי החולים אפילפסיה ' חייהם, הידרדרות איכות החיים שלהם. לכן, חשוב להבין את המנגנונים הפתופסולוגיים של אפילפסיה-הידרדרות קוגניטיבית הקשורים.
מודלים שונים של בעלי חיים ניסיוניים של אפילפסיה שימשו כדי להדגים את הלמידה ואת ליקויי זיכרון הקשורים אפילפסיה כרונית7,8,9,10,11,12. לדוגמה, מבוך המים של מוריס, התניה הקשר הקשרית, לוח החורים, מיקום האובייקט הרומן (NL), ובדיקות זיהוי אובייקט הרומן (NO) השתמשו לעתים קרובות כדי להעריך את תפקוד הזיכרון באפילפסיה של האונה הטמפורלית (TLE). בגלל ההיפוקמפוס הוא אחד האזורים העיקריים שבו TLE מראה פתולוגיה, בדיקות התנהגותיות שיכולים להעריך פונקציית זיכרון תלויי ההיפוקמפוס הם לעתים קרובות מעדיפים בחירה. עם זאת, בהינתן כי התקפים יכולים לגרום היפוקאמאל נוירוגנזה ולתרום אפילפסיה הקשורים לירידה קוגניטיבית10, תבניות התנהגותיות עבור בדיקות הפונקציה של היילוד הילוד (כלומר, דפוס הפרדה מרחבית, PS)8,13 יכול גם לספק מידע חשוב על המנגנונים הסלולריים של ליקויי זיכרון באפילפסיה.
במאמר זה, אנו מדגימים סוללה של בדיקות זיכרון, NL, NO ו-PS, עבור עכברים אפילפסיה. הבדיקות פשוטות ונגישות בקלות ואינן דורשות מערכת מתוחכמת.

<table><tbody><tr><td>מזרק 1 מ"ל</td><td>Sung-shim</td><td></td><td>השתמש עם מחט 26 או 30 מד</td></tr><tr><td>70% אתנול</td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>ספריי לניקוי הקופסה והחפצים</td></tr><tr><td>וילון</td><td></td><td></td> שחור <td>להימנעות מרמזים חזותיים מיותרים</td></tr><tr><td>Cresyl violet</td><td>Sigma</td><td>C5042</td><td>עבור Cresyl סגול מכתים</td></tr><tr><td>קריוטום</td><td>Leica</td><td>E21040041</td><td>לרקמות חיתוך</td></tr><tr>סרט <td></td><td></td><td>דביק דו צדדי</td><td>למיקום יציב של החפצים</td></tr><tr><td>מדיום הרכבה DPX</td><td>Sigma</td><td>06522</td><td></td></tr><tr><td>סדרת אתנול</td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>הכינו 100%, 95%, 90%, 80%, 70% פתרונות אתנול</td></tr><tr><td>צלחת רצפה עם דפוסי רשת צרים</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>ציוד ניסוי התנהגותי, גודל צלחת: 42.5 x 42.5 x 0.5 ס"מ, גודל רשת: 2.75 x צלחת רצפה 2.75 ס"מ</td></tr><tr><td>עם דפוסי רשת רחבים</td> ציוד ניסוי התנהגותי <td>Leehyo-bio</td><td></td>, <td>גודל צלחת: 42.5 x 42.5 x 0.5 ס"מ, גודל רשת: 5.5 x 5.5 ס"מ</td></tr><tr><td>מד תאורה</td><td>TES Electrical Electronic Corp.</td><td>1334A</td><td>למדידת תאורת החדר (60 לוקס)</td></tr><tr><td>יחידת טיפול נמרץ</td><td>Thermocare</td><td>#W-1</td><td></td></tr><tr><td>קטמין הידרוכלוריד</td><td>Yuhan</td><td>7003</td><td>השתמש להרדמת העכבר לזלוף דרך הלב</td></tr><tr><td>מנורת LED</td><td>Lungo</td><td>P13A-0422-WW-04</td><td>תאורה לחפצי</td></tr> <tr><td></td><td></td><td></td><td>חדר הבדיקה ההתנהגותייםבובת גומי, צינור פלסטיק 50 מ"ל, צנצנת קופלין מזכוכית, בקבוק T מפלסטיק,</td></tr><tr><td>בקבוק זכוכית קופסת שדה פתוח</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>ציוד ניסוי התנהגותי, גודל: 44 x 44 x 31 ס"מ</td></tr><tr><td>מגבת נייר</td><td>Yuhan-Kimberly</td><td>47201</td><td>השתמש לייבוש קופסת שדה פתוחה וחפצים</td></tr><tr><td>paraformaldehyde</td><td>Merck Millipore</td><td>104005</td><td>הכינו תמיסה של 4%</td></tr><tr><td>פילוקרפין הידרוכלוריד</td><td>Sigma</td><td>P6503</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>סרגל השתמש כדי לאתר את האובייקטים בתיבת השדה הפתוח</td><td></td></tr> <tr><td>סקופולמין מתיל חנקתי</td><td>סיגמא</td><td>S2250</td><td>הפוך מלאי פי 10</td></tr><tr><td>מערכת חכמה 3.0</td><td>Panlab</td><td></td><td>מערכת מעקב וידאו</td></tr><tr><td>שעון עצר</td><td>Junso</td><td>JS-307</td><td>למדידת פעילויות חקר של עכברים</td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td>להגנה מפני הקפאה של קטעי רקמות</td></tr><tr><td>מלח טרבוטלין המיסולפט</td><td>סיגמא</td><td>T2528</td> הכינו מצלמת <td>וידאו מלאי 10X</td></tr><tr><td>(מצלמת CCD)</td><td>Vision</td><td>VCE56HQ-12</td><td>הנח את המצלמה ישירות מעל תיבת השדה הפתוח</td></tr><tr><td>קסילזין (רומפון)</td> <td>באייר קוריאה</td><td></td><td>KR10381 השתמש כדי להרדים את העכבר לזלוף דרך הלב</td></tr><tr><td>קסילן</td><td>דוקסן</td><td>UN1307</td><td>עבור צביעת סגול קרסיל</td></tr></tbody></table>

הערכה של תפקוד הזיכרון בפילסוקרפיין-עכברים מבוססי אפילפסיה

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

ליקוי קוגניטיבי הוא אחד הנפוצים ביותר בתחלואה במחלת האונה הטמפורלית. כדי ללכוד אפילפסיה-הידרדרות קוגניטיבית הקשורים במודל בעל חיים של אפילפסיה, יצרנו מטופל הטיפול בעכברים כרוניים. אנו מציגים פרוטוקול לשלוש בדיקות התנהגותיות שונות באמצעות עכברים אלה: מיקום אובייקט הרומן (NL), זיהוי אובייקט הרומן (NO), ובדיקות הפרדת תבניות (PS) להערכת למידה וזיכרון עבור מקומות, אובייקטים והקשרים, בהתאמה. אנו מסבירים כיצד להגדיר את המנגנון התנהגותי ולספק הליכים ניסיוניים לבדיקות ה-NL, NO, ו-PS בעקבות מבחן שדה פתוח המודד את הפעילויות הlocomotor בסיס של בעלי החיים. אנו מתארים גם את היתרונות הטכניים של המבחנים NL, NO, ו-PS ביחס לבדיקות התנהגותיות אחרות להערכת תפקוד הזיכרון בעכברים אפילפסיה. בסופו של דבר, אנו דנים בסיבות אפשריות ופתרונות לעכברים אפילפטי שאינם מצליחים ליצור קשר טוב עם האובייקטים במהלך הפעלות ההיכרות, שהוא צעד קריטי לבדיקות זיכרון מוצלחות. לפיכך, פרוטוקול זה מספק מידע מפורט אודות אופן ההערכת ליקויי זיכרון המשויכים לאפילפסיה באמצעות עכברים. בדיקות ה-NL, NO ו-PS הן פשוטות ויעילות, המתאימות להערכת סוגים שונים של זיכרון בעכברי אפילפסיה.

לוח זמנים ניסיוני כללי והגדרה להערכת תפקוד קוגניטיבי מוצגים באיור 1. שישה שבועות לאחר המבוא של התקפים המושרה של הפילקרואורן, העכברים היו חשופים ל-NL, NO, ו-PS בדיקות בסדר זה הופרדו על ידי שלושה תקופות מנוחה ביום בין בדיקות (איור 1A). עבור בדיקת NL, שני אובייקטים זהים הוצבו בשדה הפתוח במהלך הפעלת ההיכרות (F1), וביום שלמחרת, אובייקט אחד הועבר למיקום חדש. בבדיקה NO, אובייקט אחד הוחלף באחד חדש במהלך הפעלת הבדיקה. עבור מבחן ה-PS, שתי הפעלות ההיכרות (F1, F2) הציגו שיל...

מאמר זה מציג הליכים ניסיוניים להערכת ליקויי זיכרון בעכברים אפילפסיה הנגרמת על ידי pilocarpine. פרוטוקול זה יכול לשמש כדי ללמוד את המנגנונים הפתופיזיטיביים של התדרדרות קוגניטיבית הקשורה לאפילפסיה, שהיא אחת הנפוצות ביותר במחלת התחלואה באפילפסיה.

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...

פגיעה קוגניטיבית היא אחת התחלואה המשותפת הנפוצה ביותר באפילפסיה של האונה הרקתית. אנו מציגים פרוטוקול המתאר כיצד להעריך ליקוי זיכרון באמצעות מודל עכבר של אפילפסיה כרונית. מיקום אובייקט חדשני, זיהוי אובייקט חדשני ומבחן הפרדת תבניות הם ישבנים פשוטים וקצרים שיכולים להדגיש באופן מינימלי את בעלי החיים.זה עושה את הבדיקה אופטימלית להערכת תפקוד הזיכרון בעכברים אפילפטיים, ללא גורמים נוספים להתקפים חוזרים ספונטניים. כדי להתחיל, להתאקלם בעלי החיים לאור הנמוך בכלובי הבית שלהם, לפחות 30 דקות. הכן תיבת שדה פתוחה.ביום הראשון של המגורים, המקום וההלומינומטר במרכז תיבת השדה הפתוח. ולהתאים את ההתרעה ל60 לוקס. כדי להעריך את פעילות הלוקום של כל עכבר, השתמש בתוכנת מעקב וידאו התנהגות בעלי חיים.לאחר פתיחת תוכנת המעקב אחר וידאו, כייל את גודל תיבת השדה הפתוח. לאחר מכן מניחים בעדינות עכבר ניסיוני בתיבת השדה הפתוח הפונה לקיר. פתח את תוכנית חכמה, לחץ על מותאם אישית וקבל.לחץ על מקור תמונה. לאחר בחירת המצלמה המותקנת, לחץ על לחצן קבע. כוונן את רזולוציית המצלמה ולחץ, קבל.לאחר לחיצה על הכיול שלנו, גרור את עכבר המחשב כדי שיתאים לגודל התיבה. ולמלא את גודל הקופסה הפנימית. לחץ על הגדרת אזור כדי לשמור ולהתאים כל גודל תיבה ולאחר מכן לחץ על שמור.התיבה האדומה היא הטווח המסוכך, כך שהיא מתאימה לגודל התיבה הפנימית, בעוד שהתיבה הוורודה מתאימה לקו המתאר. לחץ על הגדרת זיהוי. לחץ על תמונה והקש Start Test, כדי לבדוק אם מתבצע מעקב אחר אזור מסוים ולאחר מכן קדם את עצירת הבדיקה ולאחר מכן קבל.לחץ על הגדרות שעה. לאחר בחירת זמן מוגדר מראש, הגדר את זמן ההשהיה, בשלוש שניות זמן רכישה ל- 15 דקות ולחץ על קבל. הקש נושאים כדי להגדיר את שם הקוד.לחץ על מתזמן, כדי למחוק את הפרטים הקיימים ולגרור את שם הקוד שהשתנה בנושאים להפעלה 1. לחץ על רכישת נתונים. לחץ על לחצן הקלט ולחץ על התחל.שים את העכבר בתיבה ולעקוב אחריו במשך 15 דקות. לאחר 15 דקות של הקלטה להחזיר את העכבר לכלוב הביתי שלה. שחזר את האור הבהיר.לחץ על רכישת נתונים. ולאחר מכן לחץ על פעיל ניתוח גרור שם קוד Sham לחלון שלצו. לחץ על לחצן הגדרות דוח.לחץ על לחצן הגדרות דוח חדשות ולאחר מכן על דוח סיכום ולחץ על קבל. לחץ על שם נושא ומרחק באזור ושלח אותו לצד. לאחר מכן לחץ על לחצן קבל.לחץ על סימן הביקורת האדום ולחץ על נתח. תבדוק את התוצאות. ביום השני, וביום השלישי, חזור על מפגשי ההרגלה.ביום הרביעי לבצע את הפגישה היכרות. באור העמום, מקם כל עכבר בשדה הפתוח הריק למשך שלוש דקות. לאחר מגורים קצרים אלה החזירו את החיה לכלוב הבית שלה.מניחים שני חפצים זהים, בובות גומי, לזירת השדה הפתוח, חמישה סנטימטרים מהקירות הסמוכים. תקן את האובייקטים באמצעות קלטת דו-צדדית. הצג את העכבר הניסיוני, לתוך תיבת השדה הפתוח הפונה לקיר הרחוק ביותר מהאובייקטים.אפשר חקירה בחינם במשך 20 דקות ולמדוד באופן ידני את הזמן שהושקע בחקר שני האובייקטים באמצעות שני סטופרים. אין לכמת כזמן גישוש, כל התנהגות, שבה חוטם החיה אינו מצביע לכיוון האובייקט. לאחר שהעכבר מגיע לזמן החיפוש המינימלי של 30 שניות, עבור שני האובייקטים, הפסק את הפעלת F1 והעבר את העכבר לכלוב הביתי שלו.אם העכבר אינו מצליח לחקור את האובייקטים במשך 30 שניות בתוך 20 הדקות, הסר את העכבר מתיבת השדה הפתוח ואל תכלול אותו בהפעלות נוספות. ביום החמישי, לבצע את הפגישה החדש אובייקט מיקום הבדיקה. מעבירים את העכבר לשטח השדה הפתוח לשיקום למשך שלוש דקות.ואז להחזיר אותו לכלוב הבית שלה. הזז אובייקט אחד למיקום האלכסוני והצב את העכבר הניסיוני מול הקיר של תיבת השדה הפתוח. אפשר 10 דקות של חקירה חינם והקלטת עם מערכת מעקב וידאו.מדידה, הזמן שהושקע בחקר כל אובייקט, באמצעות שני סטופרים. לאחר מכן, להעביר את העכבר לכלוב הבית שלה, על ידי תפיסת הזנב. במשך שלושה ימים, תן לעכבר לנוח עם גישה חופשית למזון ומים.ביום התשיעי לבצע מפגש הרגלה 15 דקות, עבור עכבר אחד. ביום ה-10 מבצעים את מפגש השיקום הקצר, במשך שלוש דקות. ואז להחזיר אותו באופן זמני לכלוב הבית שלו.מניחים שני חפצים זהים, צינורות פלסטיק 50 מיליליטר מלא 40 מיליליטר של מים, בשדה הפתוח, חמישה סנטימטרים מן הקירות הסמוכים. הצג את העכבר הניסיוני לתוך תיבת השדה הפתוח, מול הקיר הרחוק ביותר מן האובייקטים. כמו העכבר ייחשף לשני אובייקטים שונים במבחן NO, צינור פלסטיק 50 מיליליטר מלא 40 מיליליטר של מים, וצנצנת צנצנות קופלין זכוכית.לאזן את האובייקט במהלך הפגישה היכרות, על ידי הצגת שני חפצים זהים, צנצנות קופלין זכוכית, עבור מחצית בעלי החיים בקבוצה. לאחר מכן, עם שני אובייקטים שונים, אפשר חקירה חופשית במשך 20 דקות ולמדוד באופן ידני את הזמן שהושקע בחקר שני האובייקטים באמצעות שני סטופרים. לאחר שהעכבר מגיע לזמן התפוגה המינימלי של 30 שניות עבור שני האובייקטים, הפסק את הפעלת ההיכרות.למחרת, בצע את הפעלת הבדיקה לזיהוי אובייקטים חדשניים. ראשית, להעביר את העכבר לשדה הפתוח לשיקום, במשך שלוש דקות, ולאחר מכן להחזיר אותו לכלוב הבית שלה. חמישה סנטימטרים מן הקירות הסמוכים, להחליף את הצינור עם צנצנת צנצנות קופלין זכוכית, כך העכברים נחשפים צינור אחד צנצנת צנצנות קופלין זכוכית אחת.עבור מחצית בעלי החיים שנחשפו צנצנות צנצנות קופלין זכוכית במהלך הפגישה הראשונה היכרות, להחליף את צנצנת צנצנות קופלין זכוכית עם צינור פלסטיק 50 מיליליטר מלא 40 מיליליטר של מים. כך שהעכברים נחשפים לצינור אחד וצנצנת צנצנות קופלין מזכוכית אחת. אפשר 10 דקות של חקירה חופשית בעת הקלטתו באמצעות מערכת מעקב וידאו.ואז לתפוס את הזנב של העכבר הניסיוני, ולהעביר אותו לכלוב הבית שלה. במשך שלושה ימים ולתת לעכבר לנוח עם גישה חופשית למזון ומים. עבור ניתוח NL, פתח את תוכנית ההפעלה המותאמת אישית וקבל.לחץ על מקור תמונה. לאחר בחירת המצלמה המותקנת, לחץ על לחצן קבע. רק את רזולוציית המצלמה ולחץ על קבל.לחץ על לחצן פתח תיקיית סרטוני וידאו כדי לפתוח את הווידאו שנשמר. צפה בסרטון הווידאו שנשמר במשך 10 דקות מהרגע שהעכבר נכנס ולמדוד את הזמן שהושקע בחקר כל אובייקט. ביום ה-15 ביצע לראשונה את מפגש ההיכרות הראשון של מבחן PS.זה לעכבר לשטח השדה הפתוח לשיקום, למשך שלוש דקות. מניחים את לוח הרצפה עם הרשת הרחבה, ושני עצמים זהים. בקבוקי טי מפלסטיק מלאים ב-50 מיליליטר מים, בקופסת השדה הפתוח.לאחר מכן הציג את העכבר הניסיוני לתוך תיבת השדה הפתוח הפונה לקיר הרחוק ביותר מהאובייקטים. אפשר חקירה חינם למשך 20 דקות. ולמדוד באופן ידני את הזמן לבלות לחקור את שני האובייקטים באמצעות שני סטופרים.לאחר שהעכבר מגיע לזמן חקירה מינימלי של 30 שניות עבור שני האובייקטים, הפסק את מפגש ההיכרות הראשון והעבר את החיה לכלוב הביתי שלה. כדי לאזן את מבחן הפרדת האובייקטים והתבניות עבור מחצית מבעלי החיים מניחים את לוח הרצפה עם הרשת הרחבה ושני עצמים זהים, בקבוקי זכוכית לניסוי איזון הדלפק בתיבת השדה הפתוח. לאחר מכן הציגו את העכבר הניסיוני לתיבת השדה הפתוח ואפשרו חקירה חופשית למשך 20 דקות.לאחר שהעכבר מגיע לזמן חקירה מינימלי של 30 שניות עבור שני האובייקטים, הפסק את מפגש ההיכרות הראשון והעבר את החיה לכלוב הביתי שלה. למחרת, להעביר את העכבר לאזור השדה לשיקום במשך שלוש דקות. ואז להחזיר אותו לכלוב הבית שלו.לאחר מכן בצע את מפגש ההיכרות השני עם שני בקבוקי זכוכית על רצפת הרשת הצרה. לניסויי האיזון הנגדי, בצעו את מפגש ההיכרות השני עם שני בקבוקי טי מלאים במים על רצפת רשת צרה. למחרת לבצע את הפגישה בדיקת הפרדת דפוס.העבר את העכבר לשטח השדה הפתוח ללא חפץ לשיקום למשך שלוש דקות. ואז להחזיר אותו לכלוב הבית שלו. לאחר מכן, מניחים את הבקבוק T מלא במים ובקבוק זכוכית על רצפת הרשת הצרה.הפוך את T-flasks מלא במים, באובייקט הרומן. לניסויים נגדיים, מניחים כל חפץ על רצפת הרשת הצרה כדי להפוך את בקבוק הזכוכית לאובייקט חדשני במקרה זה. לאחר מכן עבור העכבר הניסיוני לשטח השדה הפתוח במשך 10 דקות כדי לחקור.אפשר 10 דקות של חקירה חינם והקלטת באמצעות מערכת מעקב וידאו. תפוס את הזנב של העכבר הניסיוני ולהעביר אותו לכלוב הבית שלה. למדוד את הזמן שהושקע בחקר כל אובייקט באמצעות שני שעוני עצר.ולחשב את יחס האפליה השווה את הפרש הזמן שהושקע בין האובייקט החדשני לבין האובייקט המוכר המחולק לפי הזמן הכולל לחקור את שני האובייקטים. שישה שבועות לאחר כניסתה של pilocarpine המושרה התקפים חריפים. עכברים יהיו נתונים למבחן מיקום האובייקט החדש.בדיקת זיהוי אובייקטים חדשנית ומבחן הפרדת תבניות. בסדר זה מופרדים על ידי שלוש תקופות מנוחה יום בין בדיקות. אושר כי אין העדפה משמעותית בין שני האובייקטים שהוצגו יחד.העכברים האפילפטיים הראו ירידה משמעותית ביחס האפליה בשלושת הבדיקות בהשוואה לפקדי שאם. הפגנת ליקוי זיכרון מרחבי. המדידה של פעילות לוקומוטור, הראתה עלייה משמעותית בבעלי חיים אפילפטיים.בעוד שהמוטיבציה לחקור את האובייקטים הייתה דומה בין שאם לבעלי חיים אפילפטיים. לבסוף מוות של תא היפוקמפוס הוערך לאחר אפילפטיקוס מצב המושרה pilocarpine באמצעות כתם סגול קריסטל כדי לאשר את ההתקף המושרה נזק עצבי. בעלי החיים שטופלו pilocarpine הפגינו תאים פיקנוטיים בשדה המשנה CA3 של ההיפוקמפוס, שלא כמו פקדי שאם.ספירה במבחן NO ו- PS היא קריטית כדי להפחית את ההטיה הטבועה אפשרית באובייקטים ספציפיים למכשיר זה. בנוסף עכברים אפילפטיים כרוניים פתוחים מראים חרדה מוגברת, הדורשת צעדי מגורים מרובים עבור אומה מספיק לשבחים להגדרות הניסוי. שינויים בזמן כגון המספר או המיקום של האובייקטים בפרוטוקול שלנו יכולים לספק את בדיקות הזיכרון.אשר יכול להיות שימושי כדי לפרט מנגנונים מורכבים של אפילפסיה הקשורים ירידה קוגניטיבית. לאחר צפייה בסרטון זה, אתה צריך הבנה טובה של איך להעריך היבטים שונים של ליקוי זיכרון באפילפסיה.

assessment-of-memory-function-in-pilocarpine-induced-epileptic-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

סרטון זה מציג את ההליך לגרימת אפילפטיקוס סטטוס (SE) בעכברים על ידי מתן מערכתי של פילוקרפין למודל אפילפסיה של האונה הרקתית.

טיפול פילוקרפין מערכתי: מודל עכברי של אפילפסיה של האונה הרקתית

סרטון זה מדגים רישום אלקטרואנצפלוגרפי (EEG) של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה. חולדה עם אלקטרודות שהושתלו בהיפוקמפוס הגחוני מחוברת למערכת רישום EEG וממוקמת בתא פרספקס. החולדה מורשית לנוע בחופשיות בזמן שפעילות המוח נרשמת כדי לעקוב אחר התרחשות ההתקפים.

רישום אלקטרואנצפלוגרפי של התקפים אפילפטיים בחולדות המושרות על ידי אפילפסיה

מקור: Soukupová, M., et al. מיקרודיאליזה של חומצות אמינו מעוררות במהלך רישומי EEG בחולדות הנעות בחופשיות. J. Vis. Exp. (2018)סרטון זה מדגים את ההערכה של רמות נוירוטרנסמיטורים מעוררים חוץ-תאיים בחולדות עם השראת אפילפסיה כרונית. לאחר השתלת בדיקת מיקרודיאליזה במוח ואישור היעדר התקפים באמצעות אלקטרואנצפלוגרפיה (EEG), נאסף נוזל חוץ-תאי כדי להעריך רמות נוירוטרנסמיטורים גבוהות בחולדות אפילפטיות. לאחר מכן מוזרקת תמיסה עתירת אשלגן כדי לשמור על ריגוש עצבי ולעורר שחרור מוגבר של נוירוטרנסמיטורים, כאשר...

הערכת רמות נוירוטרנסמיטורים מעוררים בחולדות הנגרמות על ידי אפילפסיה כרונית

מטרת פרוטוקול זה היא לחקור קוגניציה מרחבית במכרסמים. מבוך המים הכפול H הוא מבחן חדשני, שימושי במיוחד להבהרת המרכיבים השונים של למידה, קונסולידציה וזיכרון, כמו גם את יחסי הגומלין בין מערכות זיכרון.

זוגי H-המבוך: מבחן חזק התנהגות למידה וזיכרון במכרסמים

מאמר זה מדגים את הביצועים של דיקור סיני, מודלים של אפילפסיה וניתוח שינה במכרסמים. מתוארים הליך הדיקור וזיהוי נקודות הדיקור. פילוקרפין או פנטילנטרזול (PTZ) משמשים לגרימת אפילפסיה. אלקטרוקורטיקוגרמה (ECoG), אלקטרומיוגרמה (EMG), טמפרטורת המוח ורישומי פעילות תנועתית משמשים לניתוח שינה.

מניפולציה של Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) ולישון חולדות ועכברים ידי דיקור

פרוטוקול זה מתאר שיטה של הצתה כימי עם pentylenetetrazole ומספק דגם העכבר של אפילפסיה. פרוטוקול זה יכול לשמש גם כדי לחקור את הפגיעות פרכוס אינדוקציה, פתוגנזה לאחר התקפים אפילפטיים בעכברים.

דגם העכבר מתמצקים הנוצרות על-ידי Pentylenetetrazole

כתב יד זה מתאר שיטה של גרימת סטטוס אפילפטיקוס בזריקה פילוקרפין מערכתית ואת הפיקוח התקפים חוזרים ונשנים ספונטנית בבעלי חיים באמצעות וידאו אלחוטית טלמטריה העוויתיים המערכת. פרוטוקול זה יכול להיות מנוצל ללמוד את המנגנונים pathophysiologic של אפילפסיה כרונית, epileptogenesis התקפים חריפה.

המודל פילוקרפין של אפילפסיה של אונה רקתית EEG ניטור באמצעות מערכת Radiotelemetry בעכברים

כאן, אנו מתארים שיטה ויוו microdialysis לניתוח שחרור אספרטט ולא גלוטמט בהיפוקמפוס הגחון של חולדות אפילפסיה ואפילפטי, בשילוב עם הקלטות EEG. חוץ-תאית ריכוזי אספרטט גלוטמט יכול להיות בקורלציה עם השלבים השונים של המחלה.

Microdialysis של חומצות אמינו מעוררות במהלך ההקלטות EEG בחופשיות העברת חולדות

דו"ח זה מתאר את השיטות ליצירת מודל של אפילפסיה של האונה הרקתית המבוסס על הצתה חשמלית של עכברי VGAT-Cre טרנסגניים. עכברי VGAT-Cre עשויים להיות שימושיים בקביעת הגורמים לאפילפסיה ולהקרנת טיפולים חדשניים.

הכנה והשתלה של אלקטרודות להצתה חשמלית של עכברי VGAT-Cre ליצירת מודל לאפילפסיה של האונה הרקתית

זיהום תוך-מוחי בנגיף האנצפלומיאליטיס מורין (TMEV) בעכברי C57BL/6 משכפל רבים מהתסמינים הקליניים המוקדמים והכרוניים של דלקת המוח הנגיפית ואפילפסיה שלאחר מכן בחולים אנושיים. מאמר זה מתאר את זיהום הנגיף, הסימפטומים וההיסטופתולוגיה של מודל TMEV.

מודל לאפילפסיה של אטיולוגיה זיהומית באמצעות וירוס Murine Encephalomyelitis של Theiler

התקפים משפיעים לרעה על תפקודים שונים ועל איכות החיים. תולעי פלנריה נחשפו לריכוזים משתנים של פרכוסים כימיים כדי להעריך את פנוטיפים ההתקפים ואת התנועתיות המשבשת שלהן. מחקר זה מציע להשתמש בתולעי פלנריה כמודל להתקפים חריפים בבני אדם ויש לו משמעות בפיתוח תרופות לאפילפסיה.

פלנר כמודל חיה להתקף חריף ניסיוני

למדו פרוטוקול להערכת ליקויי זיכרון בעכברים עם אפילפסיה כרונית שנגרמה על ידי פילוקרפין. השיטות כוללות מבחני מיקום וזיהוי עצמים חדשים ומבחן הפרדת תבניות ללא לחץ מיותר על בעלי החיים.

הערכה של תפקוד הזיכרון בפילסוקרפיין-עכברים מבוססי אפילפסיה

גלה סרטונים נוספים