Name: מוות המוח אינדוקציה עכברים באמצעות לחץ דם פנים עורקים ניטור ואוורור באמצעות קנה מאוזן (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-04-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 3 s
Description: למדו אינדוקציית מוות מוח בעכברים באמצעות קטטר בלון תוך-גולגולתי לחקר תגובת דלקתית מערכתית והשפעותיה על שימור איברים להשתלה. המודל מאפשר ניטור לחץ דם וניתוח מולקולרי של סמני חיסון.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם לעקרונות של טיפול בעלי חיים במעבדה שגובשה על ידי האגודה הלאומית למחקר רפואי והמדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שהוכנו על ידי האקדמיה הלאומית למדעים ופורסם על ידי המכון הלאומי לבריאות (NIH פרסום No. 86-23, תוקן 1985). כל הניסויים אושרו על ידי משרד החינוך, המדע והתרבות האוסטרית (BMWF-66.011/0071-II/3b/2012).
1. צנתור עורקים
<ol><li>הזרק את העכבר בזריקה תוך-בצפק של קטמין ו-xylazine10 ומשכך כאבים על פי הנוהג המקומי (למשל בופרינורפין).  צבוט את הגפיים האחוריות עם מלקחיים כדי לאשר את העומק הנכון של הרדמה. הערה: למחקר זה, עכברים C57BL/6N בגיל 8 עד 12 שבועות שימשו (משקל 20-25 גרם). המחברים בחנו את BALB/c זכר באותו גיל ללא הצלחה, אך לא ניסו זנים אחרים (ראה דיון).</li>
	<li>הסר את השיער באזורי העניין (ראש, צוואר) באמצעות תער חשמלי. ודא כי לא נותר שיער רופף כדי למנוע זיהום הפצע. לאחר מכן לחטא את השדה כירורגי עם 70% אתנול/כלורהקאדין/betadine ומניחים את העכבר פרקדן עם הראש מול המנתח.</li>
	<li>לעשות חתך באמצע הצוואר הצווארי עם מספריים מבתר.</li>
	<li>לנתח את בלוטות הלסת התחתונה ואת רקמת שריר הצוואר ולהפריד אותם כדי לחשוף את עורק הראש המשותף. השתמש בעיקר בניתוח. קהה באמצעות מלקחיים</li>
	<li>. מקום שלוש 8-0 ליגטורות ממשי. מתחת לעורק הראש המשותף הנכון</li>
	<li>מניחים מלחציים על הקשירה האבובית ומביאים מתח בעורק כדי שהזרימה תושהה.</li>
	<li>. תסגור את החיבור המרוחק ביותר</li>
	<li>הכנס את קטטר העורקים דרך חור עור קטן, שנוצר מראש על ההיבט הגולגולתית של החתך. לסחוט ו עוות לומן של הקטטר אם הוא מופיע גדול מדי כדי להפחית את זרימת הדם. מתקבע עם כל שלושת הליגטורות.</li>
	<li>מתיקונים את הקטטר לעור כדי למנוע נקע. עשה זאת על ידי שימוש תפר (למשל, 5-0 מונופינט, לא נספגים) אשר מחבר את הקטטר לעור באזור חור העור טרום המבנה.</li>
</ol>2. מסדר קנה מאוזן
<ol><li>לנתח את השרירים שלפני הקנה. בעזרת מלקחיים</li>
	<li>. מקום שני 8-0 ליגטורות משי מתחת לקנה הנשימה.</li>
	<li>קנה מידה באמצעות מספריים מיקרו ככל האפשר כדי למנוע אוורור חד צדדית. השתמש בקו חיתוך אופקי בין שני סחוס הקנה.</li>
	<li>הכנס את צינור האוורור ואת התיקונים עם הליגטורות המוכנות. הערה: הקצה החלק היותר של קנה הנשימה אינו צריך להיות מוקשה.</li>
	<li>לסגור את העור בתפר מסתובב (למשל, 6-0 מונופינט, לא נספגים).</li>
	<li>לאוורר את העכבר עם תדר של 150/דקות ואת נפח הגאות של 200 μL.</li>
</ol>3. מוות מוחי האינדוקציה
<ol><li>לסדר את העכבר על התנוחה נוטה.</li>
	<li>להסיר את העור מהגולגולת באמצעות מספריים כירורגי מלקחיים להחזיק את העור.</li>
	<li>מקדחה מקדח בקוטר 1 מ"מ. מעל קליפת הקודקוד השמאלית הפסיקו את הקידוח לפני שפורצים את העצם הקומפקטית הפנימית ואת מאטר דורא.</li>
	<li>לחדור את גשר הרקמה הסופית של הגולגולת באמצעות מלקחיים קהה, הסרת קצוות חדים.</li>
	<li>הכנס את קטטר הבלון, כך שהוא לגמרי בתוך חלל הגולגולת. ודא שהבלון מתמלא בתמיסת מלח וכל האוויר פונה.</li>
	<li>התחל באינפלציה ב-~ 0.1 mL/min לאורך תקופה של 10 עד 15 דקות (נפח כולל של 0.8-1.2 mL) בעזרת משאבת מזרק. הערה: העכבר יהיה להפגין מיוקלאוס, mydriasis, עוד להתקף פעילות ונשימות נשימות אגונאליות.</li>
	<li>לבטא את המוח העכבר מת פעם הזנב של העכבר הלך נוקשה והוקם. הערה: BD מאושר על ידי שיא מאפיין של לחץ דם ראשוני (רפלקס קושינג), העדר רפלקסים גזע המוח נשימה ספונטנית. בדיקת דום נשימה רגילה יש להימנע במהלך ניסויים, כמו עכברים עלולים להיות מסוגל להפוך את הדם בשל חוסר חמצן.</li>
	<li>לעצור את האינפלציה של קטטר הבלון.</li>
	<li>לשים שמיכה הסקה על העכבר כדי למנוע היפותרמיה.</li>
</ol>4. במהלך תקופת BD
<ol><li>לפקח ולתעד לחץ דם באופן קבוע. להוציא עכברים עם שלב היתר ממושך (מתכוון לחץ עורקי [MAP] < 50 mmHg עבור > 30 דקות).</li>
	<li>להשרות 0.1 mL של תמיסת מלח כל 30 דקות כדי לייצב את לחץ הדם של העכבר. הערה: בסך הכל 0.8 מ ל של תמיסת מלח היה מנוהל כל עכבר במחקר זה.</li>
	<li>לאחר 4 h של משך BD, הקציר העכבר איברים/רקמות. הוצא את העכבר מהניסוי אם לב העכבר אינו פועם בסוף הניסוי.</li>
</ol>5. הליך זה
<ol><li>ביצוע שלבים 1.1-3.3. הערה: אל תפתחו את העצם הקומפקטית הפנימית. אין להוסיף או לנפח צנתר בלון.</li>
	<li>הישארו קרוב לעכבר וברציפות להתבונן בחיה. מלקחיים כדי לאשר את העומק. הנכון של ההרדמה החלת תת-עורי הרדמה נוספת (כ 1/2 של מינון ההתחלה) אם העכבר מראה סימנים של התעוררות, אשר, לניסיוננו, קורה בערך אחרי 2-3 h לאחר ההרדמה.</li>
	<li>החל את אותה כמות של תמיסת מלח ורידי כמו בעכברים BD. הערה: העכבר המזויף יקבל חזרה את הנשימה הספונטנית לאחר הפסקת האוורור. העכבר BD לא. בדיקת דום נשימה צריך להתבצע בעת הקמת המודל, אבל במהלך ניסויים יש להימנע בשל לחץ פיזיולוגי מיותרים.</li>
</ol>

<ol><li>Hart, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OPTN%2FSRTR+2017+Annual+Data+Report%3A+Kidney%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">OPTN/SRTR 2017 Annual Data Report: Kidney.</a> American Journal of Transplantation. 19 (Suppl 2), 19(2019).</li>
<li>The Quality Standards Subcommittee of the American Academy of Neurology. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practice+parameters+for+determining+brain+death+in+adults+%28summary+statement%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Practice parameters for determining brain death in adults (summary statement).</a> Neurology. 45 (5), 1012-1014 (1995).</li>
<li>Terasaki, P. I., Cecka, J. M., Gjertson, D. W., Takemoto, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+survival+rates+of+kidney+transplants+from+spousal+and+living+unrelated+donors%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+Medicine%22%5BJournal%5D)">High survival rates of kidney transplants from spousal and living unrelated donors.</a> New England Journal Medicine. 333 (6), 333-336 (1995).</li>
<li>Pratschke, J., Neuhaus, P., Tullius, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+can+be+learned+from+brain-death+models%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">What can be learned from brain-death models?</a> Transplant International. 18 (1), 15-21 (2005).</li>
<li>Wilhelm, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+heart+by+donor+brain+death+accelerates+acute+rejection+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Activation of the heart by donor brain death accelerates acute rejection after transplantation.</a> Circulation. 102 (19), 2426-2433 (2000).</li>
<li>Pomper, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Introducing+a+mouse+model+of+brain+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Introducing a mouse model of brain death.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (1), 70-74 (2010).</li>
<li>Ritschl, P. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+brain+death+leads+to+differential+immune+activation+in+solid+organs+but+does+not+accelerate+ischaemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Donor brain death leads to differential immune activation in solid organs but does not accelerate ischaemia-reperfusion injury.</a> Journal of Pathology. 239 (1), 84-96 (2016).</li>
<li>Atkinson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+brain+death+exacerbates+complement-dependent+ischemia%2Freperfusion+injury+in+transplanted+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Donor brain death exacerbates complement-dependent ischemia/reperfusion injury in transplanted hearts.</a> Circulation. 127 (12), 1290-1299 (2013).</li>
<li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+with+tetrahydrobiopterin+overcomes+brain+death-associated+injury+in+a+murine+model+of+pancreas+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Treatment with tetrahydrobiopterin overcomes brain death-associated injury in a murine model of pancreas transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 15 (11), 2865-2876 (2015).</li>
<li>Floerchinger, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+immune+responses+in+a+reproducible+mouse+brain+death+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Immunology%22%5BJournal%5D)">Inflammatory immune responses in a reproducible mouse brain death model.</a> Transplant Immunology. 27 (1), 25-29 (2012).</li>
<li>Steen, P. A., Milde, J. H., Michenfelder, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((No+barbiturate+protection+in+a+dog+model+of+complete+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">No barbiturate protection in a dog model of complete cerebral ischemia.</a> Annals of Neurology. 5 (4), 343-349 (1979).</li>
<li>Cooper, D. K., Novitzky, D., Wicomb, W. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiological+effects+of+brain+death+on+potential+donor+organs%2C+with+particular+reference+to+the+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Royal+College+of+Surgeons+of+England%22%5BJournal%5D)">The pathophysiological effects of brain death on potential donor organs, with particular reference to the heart.</a> Annals of the Royal College of Surgeons of England. 71 (4), 261-266 (1989).</li>
<li>Herijgers, P., Leunens, V., Tjandra-Maga, T. B., Mubagwa, K., Flameng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+organ+perfusion+after+brain+death+in+the+rat+and+its+relation+to+circulating+catecholamines%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Changes in organ perfusion after brain death in the rat and its relation to circulating catecholamines.</a> Transplantation. 62 (3), 330-335 (1996).</li>
</ol>

. למחברים אין מה לגלות

BD, גורם סיכון לאיכות השתלת בתורמים רב איברים, כרוך שפע של שינויים pathפסולוגיים, אשר ניתן רק מוערך מספיק באמצעות מודלים vivo. שינויים הומודינמיים, סערת cy, שינויים הורמונליים והשפעתם האולטימטיבית על איכות והשתלת איברים לא ניתן לנתח בתוך מבחנה4. רוב ההשתלה הבסיסית, כמו גם מחקר אימונולוגיים תלויה בכלי אבחון מתוחכמים, אשר זמינים באופן נרחב רק בדגמי עכברים. מודלים עכברים כבר הובילו למגוון תובנות חדשות ב-BD הקשורות מחקר7,8,<sup clas...

השתלת כיום הטיפול המרפא היחיד עבור כשל איבר בשלב הסופי. עד עכשיו, מוות מוחי (BD) מטופלים היו המקור העיקרי לתרומות איברים, למרות התרומה החי והתרומה לאחר מוות הדם הן חלופות ערך1. BD מוגדר על ידי תרדמת בלתי הפיכה (עם סיבה ידועה), העדר רפלקסים גזע המוח דום נשימה2. למרבה הצער, איברי BD להפגין תוצאות נחות לטווח ארוך הישרדות השתלת עצמאית של אנטיגן לוקיציט אנושי (HLA)-חוסר התאמה והזמן איסכמי קר3. בינתיים, מחקר אינטנסיבי על גורם זה אנטיגן הסיכון העצמאי בוצע וכתוצאה מכך שלושה היבטים עיקריים של שינויים פתופסלוגיים מתווך כתוצאה של BD: הומודינמיקה, הורמונלי, ו דלקתיות4.
עד כה, מודלים BD ניסיוני מכרסמים בוצעו בעיקר באמצעות חולדות. כדי לקבל תובנה גדולה יותר על ההשלכות האימונולוגיים על איברים מוצקים לאחר BD, כיוונו להקים מודל מורטין של BD, כמו כרגע רק מודלים העכבר לאפשר חקירה מקיפה לגורמים גנטיים או אימונולוגיים. בהקשר זה, מערכת העכבר מספקת מגוון רחב יותר של כלים אנליטיים.
עקרון האינדוקציה BD כפי שמתואר כאן מבוסס על עלייה בלחץ תוך גולגולתי הנגרמת על ידי האינפלציה של קטטר בלון מוכנס מתחת לגולגולת. לחץ תוך גולגולתי מוגברת מחקה את המנגנון הפיזיולוגי של BD על ידי חסימת זלוף של המוח, המוח החלק, ואת גזע המוח5,6. כדי להבטיח שילוב מספיק של איברים היקפיים, מדידת לחץ הדם היא חובה במהלך ההליך. הקטטר המשמש למטרה זו באותו זמן משמש לניהול מלוחים כדי לייצב את לחץ הדם על ידי החלפת נוזלים. כמו BD מלווה בהפסקת נשימה ספונטנית, יש להבטיח אוורור מספיק. שמיכה חשמלית שומרת על טמפרטורת גוף ליבה פיזיולוגית.
לסיכום, מודל זה יאפשר מחקרים מעמיקים לתוך השפעה של פציעה BD המושרה, על הגירה לוקיציט7, הפעלת מחמאה8, הreperfusion פציעה9, וגורמים אחרים.

<table><tbody><tr><td>קטטר עורקי (BD Neoflon 26G)</td><td>BD</td><td>391349</td><td></td></tr><tr><td>מתמרי לחץ דם (APT300)</td><td>Harvard Apparatus Inc.</td><td>73-3862</td><td></td></tr><tr><td>קטטר לכריתת תסחיף עורקי פוגארטי N&deg; 3</td><td>Edwards Lifesciences Corporation</td><td>120403F</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים</td><td>FST</td><td>11271-30</td><td></td></tr><tr><td>מערכות שמיכה הומותרמיות עם בדיקה גמישה</td><td>Harvard Apparatus Inc.</td><td>55-7020</td><td></td></tr><tr><td>קטנסול</td><td>Graeub</td><td>6680110</td><td></td></tr><tr><td>מספריים מיקרו</td><td>FST</td><td>15018-10</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק מחט</td><td>FST</td><td>12060-02</td><td></td></tr><tr><td>פרולן 5-0</td><td>אתיקון</td><td>8698H</td><td></td></tr><tr><td>משאבת 11 עירוי עלית רק</td><td>מכשיר הרווארד יחיד בע"מ.</td><td>70-4500</td><td></td></tr><tr><td>מספריים</td><td>FST</td><td>14075-11</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ סטריאוטקטי</td><td>אולימפוס</td><td>SZX7</td><td></td></tr><tr><td>קלטת טרנספור</td><td>3M</td><td>1527-1</td><td></td></tr><tr><td>רפידות תחתונות</td><td>Molinea.A</td><td>274301</td><td></td></tr><tr><td>מאוורר לעכברים (MiniVent דגם 845)</td><td>הרווארד מכשירים בע"מ</td><td>73-0043</td><td></td></tr><tr><td>Xylasol</td><td>Graeub</td><td>7630109</td><td></td></tr></tbody></table>

מוות המוח אינדוקציה עכברים באמצעות לחץ דם פנים עורקים ניטור ואוורור באמצעות קנה מאוזן

Brain Death Induction in Mice Using Intra-Arterial Blood Pressure Monitoring and Ventilation via Tracheostomy

בעוד תרומת החיים והתרומה לאחר מוות הדם לספק הזדמנויות חלופיות השתלת איברים, תרומה לאחר מוות המוח תורם (BD) עדיין מייצג את המקור העיקרי עבור השתלות מוצק. למרבה הצער, אובדן בלתי הפיך של תפקוד המוח ידוע לגרום לשינויים פתופסלוגיים מרובים, כולל הומודינמיקה כמו גם שינויים הורמונליים, לבסוף מוביל תגובה דלקתית מערכתית. מודלים המאפשרים חקירה שיטתית של תופעות אלה vivo הם נדירים. אנו מציגים מודל murine של האינדוקציה BD, אשר יכול לסייע חקירות לתוך ההשפעות ההרסניות של bd על איכות השתלת. לאחר יישום לחץ דם פנים עורקי מדידה דרך העורק הראשי המשותף אוורור אמין באמצעות הקנה הנשימה, BD נגרמת על ידי הגדלת בהתמדה לחץ תוך גולגולתי באמצעות קטטר בלון. ארבע שעות לאחר האינדוקציה BD, איברים יכולים להיות נקצרו לניתוח או להליכי השתלת נוספת. האסטרטגיה שלנו מאפשרת ניתוח מקיף של התורם BD במודל murine, ולכן מאפשר הבנה מעמיקה של השפעות BD הקשורות השתלת איברים מוצק ופוטנציאל לסלול את הדרך כדי אופטימיזציה האיברים הקדם.

מודל ה-BD murine בוצע בהצלחה יותר מ 100 פעמים עם שיעור הצלחה של מעל 90%. בנוסף, השתלת איברים התערבותית של הלב והכליות כבר בוצעה בבטחה7.
BD משרה מגוון שינויים פתופסלוגיים שעשויים להיחקר עוד באמצעות מודל זה. כמתואר באיור 1, לחץ הדם מראה שיא הראשוני לחץ דם גבוה ואחריו שלב היתר ממושך. כדי למנוע השפעות פיזיולוגיות מזיקות של תת לחץ דם, עכברים עם לחצים ממושכת מספיק בדם (מפה &lt; 50 ...

אנו מציגים דגם murine של אינדוקציה מוות המוח על מנת להעריך את ההשפעה של ההשפעות הפתופיזילוגיות שלה על איברים, כמו גם על שתלים רצופים בהקשר של השתלת איברים מוצק.

While both living donation and donation after circulatory death provide alternative opportunities for organ transplantation, donation after donor brain ...

למרות שתרומה לאחר מוות מוחי של תורם היא המקור העיקרי להשתלת איברים מוצקים, האובדן הבלתי הפיך של תפקוד המוח גורם לשינויים פתופיזיולוגיים שמובילים לתגובה דלקתית מערכתית. מודל מורין זה של אינדוקציה של מוות מוחי מאפשר שימוש במגוון רחב של כלים אנליטיים ומודלים נוקאאוט כדי לחקור את המסלולים של ויסות מוות מוחי. לצנתור עורקי לאחר אישור חוסר תגובה רפלקס הדוושה והסרת שיער הבטן העליונה, לחטא את העור החשוף עם 70% אתנול ולהשתמש מספריים ניתוח לעשות חתך קו האמצע בעור.באמצעות מטלפים, בוטה לנתח את בלוטות submandibular ואת רקמת שריר הצוואר ולהפריד את הרקמות כדי לחשוף את העורק הראשי נפוץ. מקום שלוש 8-0 ליגטורות משי מתחת לעורק הראשי המשותף הנכון ומ מניחים מלחציים על הקשירה הפרוקסימלית. הביאו מתח בזרם כך שהזרימה תושעה וסגרו את הקשירה הדיסטלית ביותר.הכנס קטטר עורקי 26-מד דרך חור עור מעוצב מראש קטן על ההיבט הגולגולתי של החתך. לסחוט את הקטטר עם מדפים אם לומן הוא גדול מדי כדי להפחית את הזרימה האחורית ולאבטח את קטטר עם כל שלושת התפרים, ולאחר מכן להשתמש יחיד 5-0 monofilament nonabsorbable כדי לתקן את הקטטר לעור ליד חור העור preformed. כדי לבצע tracheostomy, להשתמש במטסים כדי לנתח קהה את השרירים הקדם-צבאיים ולמקום שני 8-0 קשירה משי מתחת קנה הנשימה.הכנס את צינור האוורור בין שני סחוסים קנה הנשימה כדי למנוע אוורור חד צדדי ולאבטח את הצינור עם שתי הקשירות מוכנות, ולאחר מכן לסגור את העור עם 6-0 monofilament תפר ריצה nonabsorbable ולאוורר את העכבר עם תדר של 150 לדקה ונפח גאות ושפל של 200 microliters. כדי לגרום למוות מוחי בבעל החיים הניסיוני, סדר את העכבר לתדר הנוטה, והחזקת העור במטסים, השתמש במספריים כירורגיים כדי להסיר את העור מהגולגולת. לקדוח חור קליפר מילימטר אחד perimedially מעל קליפת המוח הקודקודית השמאלית ולהשתמש מדחפים קהה לחדור גשר הרקמה הסופי של הגולגולת.לאחר הסרת כל הקצוות החדים, להכניס קטטר בלון ממולא מראש עם מלוחים עם כל האוויר פונה. כאשר הקטטר נמצא כולו בתוך חלל הגולגולת, השתמש במשאבת מזרק כדי להתחיל לנפח את הקטטר בכ -0.1 מילימטרים לדקה על פני תקופה של 10 עד 15 דקות. כאשר מוות מוחי מתרחש, לעצור את האינפלציה של קטטר בלון ולהמקם שמיכת חימום על העכבר, כדי למנוע היפותרמיה.לאחר מוות מוחי אושר, לפקח ולתעד את לחץ הדם באופן קבוע, מחדיר 100 microliters של מלוחים כל 30 דקות כדי לייצב את לחץ הדם של החיה. לאחר ארבע שעות של מוות מוחי, להוציא את כל בעלי החיים מבלי להכות לבבות לקצור את איברי העכבר ורקמות עניין על פי פרוטוקולים סטנדרטיים. לאחר אינדוקציה מוחית-מוות, לחץ הדם מציג שיא יתר לחץ דם ראשוני ואחריו שלב תת לחץ דם ממושך.תצפית מבוססת נוספת היא כי אינדוקציה מוות מוחי מובילה להפעלה של המערכת החיסונית. ואכן, לאחר ארבע שעות של מוות מוחי במודל זה, רגולציה ספציפית לאיבר של סמנים חיסוניים נצפית ברמת mRNA. לאחר תקופה מוגדרת מראש של מוות מוחי, האיברים עשויים להיות שנקטפו לניתוח הישיר שלהם או להשתלת איברים לאחר מכן.מודל זה יאפשר מחקרי עומק על השפעת הפציעה הנגרמת כתוצאה ממוח וכבר חשף תובנות חדשות לגבי הפעלה משלימה והגירה לויקוציט.

brain-death-induction-mice-using-intra-arterial-blood-pressure

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

מודל Murine לפגיעה ריאות הנגרמת ההנשמה הוא כלי חשוב ללמוד פציעה ריאות...

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

מודל Murine עבור איסכמיה בשריר הלב נפשית מראש איסכמי הוא כלי מחקר חשוב מנגנוני...

השימוש במערכת משקל תליה על חסימת העורקים הכליליים של עכברים

מודל רב עוצמה עבור perioperative וביקורתית טיפול הקשור לפגיעה כליות חריפה מוצגת. שימוש hypoperfusion כל הגוף הנגרמת על ידי דום לב אפשר כמעט לשחזר את השינויים היסטולוגית ופונקציונלי של AKI קליניים.

דום לב Normothermic ו החייאה: במודל עכבר של פגיעה איסכמיה reperfusion

סרטון זה מדגים את ההליך לגרימת מוות מוחי במודל עכבר על ידי הגברת לחץ תוך גולגולתי מבוקר באמצעות קטטר בלון, המחקה מוות מוחי טבעי.

גרימת מוות מוחי במודל עכבר באמצעות קטטר בלון

סרטון זה מדגים את ההליך של שכפול שבץ טרומבוטי במודל עכבר על ידי חסימת עורק הצוואר המשותף הימני וחשיפת העכבר לסביבה דלת חמצן. תהליך זה מפחית את זרימת הדם והחמצן למוח, וגורם להיווצרות קרישי דם ולנזק מוחי.

גרימת שבץ טרומבוטי באמצעות היפוקסיה ואיסכמיה במודל עכבר

מודל עכבר סטנדרטי של דימום תת עכבישי על ידי מעגל intraluminal של הניקוב וויליס מתואר. ניקוב כלי ודימום תת עכבישי מנוטרים על ידי ניטור לחץ תוך גולגולתי. בנוסף פרמטרים חיוניים שונים נרשמים ומבוקר כדי לשמור על תנאים פיסיולוגיים.

מודל Murine של תת עכבישי דימום

מאמר זה מתאר כיצד לבצע ריאה בעכברים. מודל חדש זה יקל על החקירה של המנגנון המולקולרי מעורבת ועוגב נזק.

לב-ריאה במודל של עכברים: גישה מוזרה

מוצג כאן פרוטוקול להערכת תפקוד הלב הדו-חדרי בעכברים על ידי יצירת לולאות נפח לחץ (PV) מהחדר הימני והשמאלי באותו בעל חיים באמצעות צנתור חזה סגור. ההתמקדות היא בהיבט הטכני של ניתוח ורכישת נתונים.

הערכה דו-חדרית של תפקוד הלב ולולאות נפח לחץ על ידי צנתור חזה סגור בעכברים

המחקר הנוכחי מראה את הקמתם של שלושה מודלים שונים של תרומת ריאות (תרומה לאחר מוות מוחי, תרומת מוות לאחר מחזור הדם ותרומת הלם לאחר דימומים). הוא משווה את התהליכים הדלקתיים וההפרעות הפתולוגיות הקשורות לאירועים אלה.

חקר מודלים ניסיוניים לתרומת איברים להשתלת ריאות

פרוטוקול זה מדגים מודל עכברי ייחודי של דום לב מחנק שאינו דורש דחיסת חזה לצורך החייאה. מודל זה שימושי לניטור והדמיה של הדינמיקה של הפיזיולוגיה של המוח במהלך דום לב והחייאה.

מודל דום לב עכברי להדמיית מוח וניטור פיזיולוגיה מוחית במהלך איסכמיה והחייאה

המערך המוצע מאפשר אוורור מכני מבוקר והדמיית תהודה מגנטית של תנועת בית החזה בתלת מימד בעכברים וחולדות. השתמשנו במערך זה כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה העומדת בבסיס תפקוד לקוי של שרירי הנשימה הנגרמת על ידי הנשמה מכנית.

הדמיית תהודה מגנטית תלת מימדית של תנועת נשימה בעכברים וחולדות מאווררים מכנית

למדו אינדוקציית מוות מוח בעכברים באמצעות קטטר בלון תוך-גולגולתי לחקר תגובת דלקתית מערכתית והשפעותיה על שימור איברים להשתלה. המודל מאפשר ניטור לחץ דם וניתוח מולקולרי של סמני חיסון.

מוות המוח אינדוקציה עכברים באמצעות לחץ דם פנים עורקים ניטור ואוורור באמצעות קנה מאוזן

גלה סרטונים נוספים