ייצור של ממשק היקפי מורכב משובי היקפית (C-RPNI) בעכברוש למבוגרים

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי גם גם משמעו שהוא מאפשר הגברה בו זמנית של אותות עצביים מוטוריים לצד מתן גירוי עצבי חושי אדיש באמצעות ניצול ממשק עצב היקפי ביולוגי. טכניקה זו יכולה לספק מכשיר תותב דמוי חיים עבור אלה עם קטיעות כמו C-RPNI מאפשר שליטה מוטורית בו זמנית משוב חושי בתוך אותו ממשק עצב היקפי. רבים מאלה החיים עם קטיעות נוטשים מכשירים נוירופרותסטיים מתקדמים מכיוון שהמכשירים חסרי שליטה אינטואיטיבית ומשוב חושי משמעותי.

טכניקה זו מספקת את שניהם יכולה למנוע נטישה של התקן תותב. טכניקה זו יכולה להיות מיושמת על אנשים עם גפיים חלשות או נעדרות או ליקויים חושיים המספקים תובנה נוספת למערכות משוב המספקות בקרת גפיים מדויקת ואינטואיטיבית. ביצוע ניתוח על עצבים היקפיים קשה כמו יש מרווח קטן לטעויות.

שימוש בכלים באיכות גבוהה ותרגול לעתים קרובות הן הדרכים הטובות ביותר להבטיח הצלחה. טכניקות כירורגיות קשות מאוד להעביר וללמוד ממת פורמט ספרותי. התבוננות בכל שלב המעורב בהמצאת המבנה היא המפתח לשליטה בשיטה.

כדי להכין שתל עור, לאחר אישור חוסר תגובה קמצוץ בוהן, להחיל משחה על העיניים של חולדה הרדמה. בעזרת קוצץ, מגלחים את כל החלק האחורי התחתון, אזור הקרסול וצידי הכף. לחטא את hindlimb שנבחר במשטח plantar של הכף עם פתרון אלכוהול-iodopovidone רציף לטהר אלכוהול.

באמצעות מנוע מיקרו כף יד במהירות גבוהה מקדחה עם אבן ליטוש גריסים עגולה עגולה נשלפת, לקבור את פני השטח plantar של הכף כדי להסיר את האפידרמיס במהירות של 4, 000 מהפכות לדקה החלת טיפות של מלוחים כדי לא לשרוף את העור. הדרמיס הבסיסי יהיה מראה מבריק עם דימום נקודתי. החל חוסם עורקים על הקצה התחתון כדי להאט את זרימת הדם ולהשתמש מספר 15 אזמל כדי להסיר בחדות את העור plantar.

מניחים את העור גזה לחה מלוחים כדי למנוע ייעוד ולהחיל לעטוף גזה על הרגל מדממת כדי להאט את הדימום. מניחים את העור תחת מיקרוסקופ ניתוח ולהשתמש microscissors כדי להסיר כל רקמת גידים חיבור מהשכבה העמוקה של שתל העור. השתל עורי דליל צריך להיות אטום מעט, מכילים רק דרמים ולמדוד כ 0.5 על ידי סנטימטר אחד בגודל.

ואז למקם את הרקמה לתוך חתיכה חדשה של גזה לחה מלוחים עד בניית ייצור. כדי להכין שתל שרירים, השתמש באזמל מספר 15 כדי לבצע חתך אורך לאורך ההיבט הקדמי של hindlimb התחתון ממש מעל הקרסול אל ממש מתחת לברך. לנתח דרך הרקמה התת עורית כדי לחשוף את השרירים הבסיסיים.

בהיבט הדיסטלי של החתך, לחשוף את החדרות הגידים של השרירים הגפיים התחתונות. השוקית היא בדרך כלל הגדולה ביותר והתוססת ביותר מבין השרירים. ממש מתחת ו האחורי לשריר זה טמון לונגוס דיגיטציה extensoror.

כדי לבודד את גיד הדיגיטאור לאורך דיסטליטור מהגידים האחרים באזור, הכנס את שני נטי המדפים מתחת לגיד ופתח את המדפים כדי להפעיל לחץ כלפי מעלה כדי לגרום לטיול גידים. מניפולציה של הגיד צריך לגרום לכל בהונות להרחיב בו זמנית. השתמש מספריים איריס חדה לבצע tenotomy דיסטלי ולהשתמש tenomoties כדי להפריד בבוטות את השריר מן הרקמה שמסביב עובד proximally כדי למצוא את המקור הגידים.

לאחר שניתן לדמיין את הגיד הפרוקסימלי, השתמש במספריים הקשתית כדי לבצע טנטוטומיה שנייה ולהנחות את שתל השרירים בגאזה לחה מלוחה. לבידוד ולהכנת העצב הגולגולתי הנפוץ, גילחו ירך אחת וחטאו את העור החשוף בטיהור אלכוהול-בטדין-אלכוהול רציף. מניחים את החולדה הרדמה על כרית חימום תחת מיקרוסקופ כירורגי ולסמן את החתך רק דיסטלי לחרט sciatic לחלק הנחות של הברך נחות וזווית הרחק עצם הירך.

לאחר מכן השתמש באזמל מספר 15 כדי לבצע חתך לאורך הסימן דרך שרירי הירך הבסיסיים femoris fascia. בזהירות לנתח דרך שרירי הירך שרירים לחלל שבבסיס שרירי הירך. לאחר זיהוי העצב הגולגולתי הנפוץ, השתמש במלקחיים מיקרו דקים ובמיקרו-סיסורים כדי לבודד בזהירות את העצב הגולגולתי המשותף מהענפים הסיאטיים האחרים.

הסר כל רקמת חיבור מתמשכת באופן distally ובנקודה שבה העצב חוצה את פני השטח של הברך, לחצות בחדות את העצב עם זוג microscissors. לאחר מכן שחררו בזהירות את כל רקמת החיבור שנותרה מהעצב הגולגולתי המשותף ויעבדו באופן פרוקסימילי כדי לשחרר את העצב לאורך של כשני סנטימטרים. עצבים הם עדינים וקטנות קלות עלולות לגרום לגירעונות תפקודיים למשך זמן רב.

תרגול תכוף, מכשירים כירורגיים מדויקים ומיצוב ותמיכה אידיאליים ביד הם המפתח לשליטה בטכניקה זו. כדי להמציא את מבנה C-RPNI, מניחים את שתל השריר מתחת למיקרוסקופ המ לנתח ולהסיר את כל הרקמה הגידית המרכזית, כמו גם קטע מרכזי קטן של אפימיסיום משאיר את הקצוות הגידיים שלמים. שימוש ב- 8-0 תפר ניילון ושני תפרים מופרעים, לאבטח את האפינוריום של הקצה המשתנה של העצב peroneal נפוץ לאזור של שתל השריר נטול אפימיסיום משני צדי העצב.

אבטחו את שתל השרירים לעצם הירך עם תפר יחיד של 6-0 ניילון שנקטעו הן באופן פרוקסימלי והן באופן דיסטרי עם צומת שריר העצבים הפונה הרחק מעצם הירך. מניחים 8-0 תפר ניילון בשוליים המרכזיים הנחותים של אפימיסיום השתל השרירי המאבטח אותו לאפינוריום העצבי הגולגולתי הנפוץ כדי ליצור רפיון בעצב בתוך שתל השריר. מקם את שתל העור על שתל השריר כך שהוא מכסה לחלוטין את העצב ואת רוב השריר עם השוליים העמוקים של הדרמיס נח על השריר.

לקצץ את כל הדרמיס המשתרע מעבר לגבול השריר ולהשתמש 8-0 ניילון קטע תפרים כדי לאבטח את השתלת העור באופן היקף לשתל השריר. סגור את שרירי femoris fascia מעל המבנה באופן פועל עם תפר כרומי 5-0 ולסגור את העור overlying עם תפר כרומי 4-0 באופנה ריצה. לאחר מכן להחליף את האזור כירורגי עם כרית אלכוהול ולהחיל משחה אנטיביוטית לפני המאפשר לחולדה להתאושש עם מקורות מזון ומים נפרדים בני זוג בכלוב עם ניטור עד דחייה מלאה.

אם מוצלח, חשיפה כירורגית של המבנים לאחר שלושה חודשים תחשוף שרירים ועור כלי דם מחדש וסחיטה עדינה של העצב הפרונאלי המשותף עם מלקחים קרובים למבנה יגרום התכווצות שרירים גלוי. ניתוח היסטולוגי צריך להדגים עור, עצב ושרירים קיימא. כשל חיסוני גם יחשוף את העצבים המוטוריים והחושיים מחדש לצומתים הנוירומוסקולריים שלהם ולאברי הקצה החושיים שלהם בהתאמה.

בדיקות אלקטרופיזיולוגיות יכולות להתבצע על מבנים אלה ב vivo כפי שהודגם, למשל בשלושה ותשעה חודשים לאחר ייצור C-RPNI. כאן, פוטנציאל פעולה שריר מורכב יחיד וסיכום ופוטנציאל פעולה עצבית חושית מורכבת אותות שהושגו במהלך בדיקות electrophysiologic בפורמט גרפי מוצגים. תוצאות תת אופטימליות בשתל השריר מסומנות על ידי אותות מיומתים חסרי את צורת הגל הפוטנציאלית האופיינית לפעולת שריר מורכבת.

תוצאות תת-אופטימליות ברמת הרכיב העורי כרוכות בדרך כלל בהקטנה של צורת הגל עם רעשי רקע משמעותיים. מכשירים באיכות טובה הם חיוניים. מספריים צריך להיות חד מלקעות צריך להיות הטה בסדר כדי להקל על טיפול מדויק מאוד של שתלים עוריים ועצבים ללא נזק.

לאחר הייצור, ניתן להשתמש בשיטה זו בחקירות אלקטרופיזיולוגיות כדי לאפיין עוד יותר את יכולות האיתות המספקות תובנות נוספות על לולאות משוב אדישות ואדישות. למרות C-RPNI מאפשר משוב חושי, לא ברור אם מערכת משוב בלולאה סגורה עבור proprioception ניתן ליצור. אנחנו כרגע מטפלים בשאלה הזאת במעבדה.