Name: מודל עכבר של Insected רקמה רכה לחלוטין סרקומה עבור בדיקה (ניאו) שפיטה טיפולים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: חקור מודל עכברים לכריתה חלקית של סרקומת רקמות רכות לבדיקת טיפולים ניאו-אדג'ובנטיים. שיטה זו מאפשרת סטנדרטיזציה של פצע וגידול שיורי לחקר החלמה לאחר ניתוח ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים מתוך גרב זה סרקומה! קרן, האוסטרלי, ניו זילנד האגודה סרקומה, לוקמיה לילדים & הקרן לחקר הסרטן ופילנתרופיה נצחית. W. J. L נתמך על ידי מלגת סימון לי ומלגת מחקר מבית החולים הלאומי לחקר הרפואה, ואת המועצה לסרטן WA.

בעלי חיים ששימשו בניסויים אלה התקבלו ממרכז המשאבים בעלי חיים (פרת ', אוסטרליה המערבית). בעלי חיים שמרו בתנאים הסטנדרטיים ללא הפתוגן במכון הארי פרקינס לחקר הרפואה ביוריאסוסס נורת ' מתקן (פרת ', אוסטרליה המערבית). כל הניסויים בוצעו בעקבות הפרוטוקול שאושר על ידי המכון לאתיקה בבעלי חיים של הארי פרקינס. עכברים BALB/c של 8-12 שבועות של גיל שימשו ניסויים אלה. קו התאים של WEHI 164 פיברוסרקומה התקבל מ-CellBank אוסטרליה (ווסטמיד).
1. חיסונים של תאים
<ol><li>הכנת תאים ובעלי חיים<ol>
<li>ודא ששורת התאים נשמרת במדיה המומלצת. לדוגמה, לשמור WEHI 164 תא קו בשנת הזיכרון ברוזוול פארק (RPMI) 1640 בינונית בתוספת עם 2 מ"מ L-גלוטמין, 10% סרום שור העובר, 20 מ"מ HEPES, 0.05 mM 2-mercaptoethanol, 100 U/mL פניצילין, ו 100 μg/mL סטרפטומיצין. הערה: בתאי המעבר לפחות 3 ועד 5 פעמים לאחר הסרתו מאחסון קריוגני. כדי להבטיח הכדאיות האופטימלית של התא, יש לפצל תאים כאשר הם בין 70-80% באמצעות החיבור. קווי הגידול תאים צריך להיבדק mycoplasma, כמו זיהום יכול לשנות את צמיחת התאים ולהשפיע על התגובה החיסונית ב vivo.</li>
		<li>לגלח עכברים באגף הימני התחתון. באמצעות קוצץ המכונות הערה: עכברים BALB/c הנשי, הגילאים בין 8-12 שבועות, של משקל רגיל (16 -22 גרם) שימשו בניסוי זה.</li>
		<li>ביום החיסונים, הקציר של WEHI 164 תאים כאשר 70-80% הקשר על ידי טריסיזציה.<ol>
<li>משלחים את מדיום התרבות מצלוחיות התרבות של רקמת הרקמה ולאחר מכן מוסיפים תמיסת פוספט סטרילית באגירה (1x PBS), כדי להסיר את העקבות הנותרים של סרום שור עוברי (FBS).</li>
			<li>. מבחנות של תרבות הרקמה הוסיפו 3 מ ל של 0.05% טריפסין (לבקבוקון T75) ולאחר מכן מערבולת הבקבוקון כך שכל המשטח של הבקבוקון עם התאים מכוסה בטריפסין.</li>
			<li>מודדקת את הבקבוקון ב 37 ° c, 5%2 חממה עבור 3 דקות. בדוק את התאים באופן תקופתי, על ידי הקשה על צידי הבקבוקון כדי לראות אם תאים החוצה.</li>
			<li>הסר צלוחיות מאינקובטור של תרבות התא והוסף 5 מ ל של מדיה בתוספת FBS כדי לנטרל את טריפסין. הערה: אין להשאיר את התאים בטריפסין יותר מהדרוש, שכן הדבר עלול לגרום נזק לתאים ולהוביל ליכולת היכולת להתאים לתאים נמוכים.</li>
			<li>Pipet ההשעיה מספר פעמים כדי להשיג השעיה תא יחיד. העבר תא השעיה לצינור צנטריפוגה חרוט.</li>
			<li>גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.</li>
		</ol>
</li>
		<li>רחץ את התאים שלוש פעמים ב-1x PBS.<ol>
<li>השהה תאים מחדש ב-50 mL של PBS 1 x מעוקר ולשטוף את התאים על ידי השעיית תא ליטוף למעלה ולמטה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.</li>
			<li>ומשהה את התאים מחדש ב -15 מ ל. של ערוץ 1-אקס סטרילי רוחצים את התאים על ידי השעיית תא ליטוף למעלה ולמטה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.</li>
			<li>בדיוק 10 מ ל. של הערוץ החדש הסטרילי לשטוף את התאים כמו בשלב 1.1.4.2 ולהעביר כמות קטנה (כ 100 μL) של התא הבולם לצינור צנטריפוגה לספירה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.</li>
		</ol>
</li>
		<li>קבע את מספר הטלפון באמצעות שיטת ההדרה הכחולה של טריקון על-ידי שימוש בפעולת הומוציטוטומטר או במונה תאים אוטומטיים. השהה את התאים מחדש בערוץ 1 x מעוקר בריכוז של 5 x 106 תאים/mL. . שמור על השעיית תא בקרח הערה: הכדאיות של תאים סרטניים צריך להיות שווה או מעל 80% כדי להבטיח גידול הגידול בגידולים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>חיסון תת עורי<ol>
<li>לערבב את ההשעיה התא ביסודיות למלא מזרק עם המחט של 26 G עם 100 μL של השעיה התא (5 x 105 תאים) סטרילי 1 x PBS. חזור על ערבול של תאים לפני טעינת המזרק הבא. הערה: לשמור על התאים בקרח במהלך ההליך כדי לשמור על יכולת הקיום.</li>
		<li>רסן את העכבר כראוי, ומבטיח גישה לאגף הימני התחתון. . מתת-עורי את העכבר על האגף הימני התחתון הערה: ודא שהחיסון אינו נמצא בצפק על-ידי הרמת המחט מעט, שאמורה להיות גלויה מתחת לעור. גוש כמו בועה צריך להיווצר. מתחת לעור בעקבות החיסון</li>
		<li>נטר עכברים כנדרש על ידי אישור האתיקה הישים ולבצע כריתת כירורגית כאשר הגידולים גדלו לגודל של כ 50 מ"מ2.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. כריתת כירורגית חלקית של הגידול
הערה: פרוטוקול זה דורש שני חוקרים; אחד עבור הליכים כירורגיים (מנתח), ואחר עבור ניטור העכבר (עוזר).
<ol><li>כיוונון כירורגי<ol>
<li>ביום 12 פוסט החיסון, כאשר הגידולים הגיעו לגודל של כ 50 מ"מ2, עכברים מינון עם 100 μl (0.1 מ"ג/ק"ג) של בופרנורפין ספורטינג ראגה בעורף של הצוואר, 30 דקות לפני הניתוח.</li>
		<li>להגדיר את האזור כירורגי עם משטח חום מכוסה מעיל ספסל להגדיר חרוט האף עבור הרדמה. לעקר כלים כירורגיים לפני השימוש, ובין כל חיה באמצעות מעקר חרוז חום, המאפשר כלים להתקרר לפני השימוש. יש את הציוד הכירורגי הבאים נקי בהישג יד: כלורקסדין, ספוגית, גזה, ג'ל עיניים, שני מלקחיים מעוקל, מספריים, המוליך קליפ, מסיר קליפ, מילוי קליפ (איור 2A, 2b).</li>
		<li>חמם את תא החימום עד 37 ° c והגדר משטח חום נוסף להתאוששות (איור 2ג). מניחים כלים מעקרים על משטח סטרילי כגון רפידות אוטוקלאויים.</li>
	</ol></li>
	<li>רדמה<ol>
<li>מניחים את העכבר בתא אינדוקציה ומייבשים את העכבר עם 4% isofלבין (4% ב-100% חמצן בקצב הזרימה של 1 L/min) עד קצב הנשימה מאט כ 60 נשימות לדקה (1 לשנייה) (זה בדרך כלל לוקח < 1 דקות). הערה: אל תשאירו את העכבר בחדר יותר מדי זמן שעלול לגרום לחנק ולמוות. יש רק עכבר אחד. מתחת להרדמה בכל פעם</li>
		<li>להעביר את העכבר על משטח החום על השולחן הניתוח, למקם את העכבר עם אפו בקונוס האף ולשמור על מצב ההרדמה עם 3-4% isofלוריאן ב 100% חמצן בקצב הזרימה של 0.5 L/min. נטר את קצב הנשימה כדי להבטיח שעומק ההרדמה יישמר. הערה: המסייע חייב לפקח על הנשימה של העכבר לאורך הניתוח כדי להבטיח את רמת ההרדמה הנכונה נשמרת. הנמך את ריכוז ההרדמה אם הנשימה הופכת איטית מדי או מגדיל את הריכוז אם עומק ההרדמה שטחי מדי. אם העכבר מתחיל לנשום, להסיר את העכבר מחרוט האף, להקטין את הריכוז הרדמה, ולחכות עד הנשימה הנורמלי לפני הצבת על חרוט האף שוב.</li>
		<li>בצע "צביטה בדיקה" ו "רפלקס המצמוץ בדיקה"14 כדי להבטיח כי העכבר מורדם לחלוטין לפני תחילת הניתוח. הערה: התנועה של חלק כלשהו של העכבר היא אינדיקציה כי העכבר אינו מורדם לחלוטין. על החיה לקבל מיד הרדמה נוספת על ידי הגברת הריכוז ההרדמה.</li>
		<li>לכסות את עיני העכבר עם כמות קטנה של ג'ל אופטלמולוגי כדי למנוע יובש בעין.</li>
	</ol></li>
	<li>ניתוח כירורגי (מנתח)<ol>
<li>לנגב את האזור כירורגי 3 פעמים עם כלורהקאיצין אלכוהוליים. באמצעות מלקחיים וזוג מספריים, לעשות חתך 1 ס מ ישר לאורך הצד החלק השני, 3 מ"מ הרחק הגידול (איור 3a, 3b). הערה: סטנדרטיזציה החתך ל 1 ס מ בכל עכבר (באמצעות סרגל) מאפשר אפילו הערכה של ריפוי הפצע בין עכברים. איתור החתך 3 מ"מ הרחק מן הגידול מאפשר טיפול בלתי מוסרי בעקבות מוסר ללא דליפה מהפצע.</li>
		<li>שימוש בפינצטה, למשוך את facia ואת רקמת שומן תת עורית בין הגידול לבין צפק. גידול תת עורית מחובר בדרך כלל לצד העור.</li>
		<li>פתח את הפצע על ידי החזקת בעדינות את העור על הנושא הגידול בצד באמצעות מלקחיים, ו "להפוך" את הגידול כך שהוא נראה מחוץ (איור 3ג, 3d). הערה: החלק של הגידול להיות מעורפל צריך להיות הקרוב ביותר לפתח, יש מספיק עור כדי לסגור את הפצע. להיזהר לא לחתוך את העור בעת הסרת הגידול.</li>
		<li>באמצעות זוג מספריים, לחתוך את קפסולת הגידול ממחצית להסיר, החל בבסיס הגידול הקרוב ביותר לפתח.</li>
		<li>עבור 50% ניתוח בצובר, לחתוך באמצע הגידול. באמצעות מלקחיים מעוקל, לאסוף את הקטע של הגידול להיות מוסר (50%); לאסוף את כל שרידי האזור מעורפל.</li>
		<li>עבור 75% debulk, לבצע 50% הגידול debulk כמו בחלק 2.3.5 לעיל. ואז לחתוך במחצית הנותרים 50% של הגידול וסקופ 25% של הגידול, באמצעות מלקחיים מעוקל כמתואר לעיל.</li>
	</ol></li>
	<li>סגירת האתר הכירורגי<ol>
<li>מניחים את הגידול הנותר בחזרה מתחת לעור, ושימוש מלקחיים, למשוך את מדפים העור יחד, קו את העור לאורך הפצע.</li>
		<li>להחזיק את העור יחד 5 מ"מ מקצה הפצע, ולהשתמש בקליפים כירורגיים כדי לסגור את הפצע, החל בצד הקרוב ביותר מלקחיים. החלת פריטים רבים ככל הנדרש כדי להבטיח שרקמת הבסיס אינה חשופה. באופן כללי, שלושה עד ארבעה קליפים מוחלים עם מרווחים של 2 מ"מ בין קליפים. הערה: אם פריטים כלשהם אינם מוחלים היטב, הסר אותו באמצעות מסיר קליפ והחלף בקליפים חדשים.</li>
	</ol></li>
	<li>שחזור של עכברים (עוזר)<ol>
<li>הניחו לעכברים להתאושש על ידי הכנסתו לחדר החימום החם (37 ° c).</li>
		<li>מניחים את כלוב העכבר על משטח החום. לנטר את העכברים בתא החימום עד שהם התאושש הרדמה (ער והליכה) ולאחר מכן להחזיר את העכברים בחזרה לכלוב. השאירו את הכלוב על משטח החימום למשך 10 דקות נוספות, עד שהעכברים יהפכו לפעילים יותר.</li>
		<li>תנו לעכברים מזון רך ורטוב. לנטר את העכברים 1 שעה לאחר הניתוח להחלמה ולהבטיח שקליפים יישארו במקומם. ודא כי הכלוב הוא חצי על/מחצית משטח החום כדי לאפשר לבעלי חיים לווסת את הטמפרטורה העצמית בזמן ללא השגחה.</li>
		<li>מינון עכברים עם 0.1 mg/ק"ג בופרנורפין (100 μl תת-עורי בתוך הצוואר), 6-8 שעות לאחר הניתוח (בסוף היום). הצג עכברים מוקדם בבוקר למחרת, ועכברים מינון שוב עם 0.1 mg/ק"ג בופרנורפין (100 μl תת-עורי בתוך העורף של הצוואר). תנו עוד מזון רטוב כנדרש.</li>
		<li>נטר עכברים מדי יום. במשך שבעת הימים הבאים ניתן להסיר קליפים לאחר שבעה ימים באמצעות מסיר הקליפים.</li>
	</ol></li>
	<li>שפיטה או טיפול בנאודון<ol>
<li>לטפל בעכברים פרי-בשיתוף עם (ניאו) טיפול הפסיקה בכל זמן נתון, בהתאם לטיפול בריבית.</li>
		<li>לדוגמה, להתייחס עכברים עם מנה אחת של 100 μg של anti-CTLA-4 intraperitoneally (כיתה) ביום 15 לאחר החיסון, או עם שלוש מנות של 200 μg anti-PD-1 כז ביום 15, 17 ו 19 לאחר החיסון.</li>
	</ol></li>
	<li>שולטת ניסויית<ol>
<li>בעת שימוש במודל זה כדי להעריך את ההשפעות של דלקת/הפצע ריפוי, לשקול שימוש בקבוצות הביקורת הבאות: 1) אין בקרת כירורגיה (הטיפולים עדיין ניתן לניהול intrאטומורתי); 2) שליטה בניתוח המנתח: חתך כירורגי נעשה בעור; הגידול הוא מניפולציות חשוף, אבל לא רקמת הגידול מוסר; הפצע סגור עם קליפים.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Orosco, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+Surgical+Margins+in+the+10+Most+Common+Solid+Cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Positive Surgical Margins in the 10 Most Common Solid Cancers.</a> Scientific Reports. 8 (1), 5686(2018).</li>
<li>Haas, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perioperative+Management+of+Extremity+Soft+Tissue+Sarcomas%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Perioperative Management of Extremity Soft Tissue Sarcomas.</a> Journal of Clinical Oncology. 36 (2), 118-124 (2018).</li>
<li>Brennan, M. F., Antonescu, C. R., Moraco, N., Singer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+the+study+of+10%2C000+patients+with+soft+tissue+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from the study of 10,000 patients with soft tissue sarcoma.</a> Annals of Surgery. 260 (3), 416-421 (2014).</li>
<li>Smith, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterns+of+disease+relapse+in+primary+extremity+soft-tissue+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Patterns of disease relapse in primary extremity soft-tissue sarcoma.</a> British Journal of Surgery. 103 (11), 1487-1496 (2016).</li>
<li>Uramoto, H., Tanaka, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recurrence+after+surgery+in+patients+with+NSCLC%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Lung+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Recurrence after surgery in patients with NSCLC.</a> Translational Lung Cancer Research. 3 (4), 242-249 (2014).</li>
<li>Stojadinovic, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+prognostic+significance+of+microscopic+margins+in+2%2C084+localized+primary+adult+soft+tissue+sarcomas%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Analysis of the prognostic significance of microscopic margins in 2,084 localized primary adult soft tissue sarcomas.</a> Annals of Surgery. 235 (3), 424-434 (2002).</li>
<li>Krall, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+systemic+response+to+surgery+triggers+the+outgrowth+of+distant+immune-controlled+tumors+in+mouse+models+of+dormancy%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">The systemic response to surgery triggers the outgrowth of distant immune-controlled tumors in mouse models of dormancy.</a> Science Translational Medicine. 10 (436), (2018).</li>
<li>Bakos, O., Lawson, C., Rouleau, S., Tai, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+surgery+and+immunotherapy%3A+turning+an+immunosuppressive+effect+into+a+therapeutic+opportunity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+for+ImmunoTherapy+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Combining surgery and immunotherapy: turning an immunosuppressive effect into a therapeutic opportunity.</a> Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 86(2018).</li>
<li>Predina, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+surgical+models+of+postoperative+tumor+recurrence+for+preclinical+adjuvant+therapy+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization of surgical models of postoperative tumor recurrence for preclinical adjuvant therapy assessment.</a> American Journal of Translational Research. 4 (2), 206-218 (2012).</li>
<li>Talmadge, J. E., Singh, R. K., Fidler, I. J., Raz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+models+to+evaluate+novel+and+conventional+therapeutic+strategies+for+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Murine models to evaluate novel and conventional therapeutic strategies for cancer.</a> American Journal of Pathology. 170 (3), 793-804 (2007).</li>
<li>Khong, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+efficacy+of+tumor+debulking+surgery+is+improved+by+adjuvant+immunotherapy+using+imiquimod+and+anti-CD40%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">The efficacy of tumor debulking surgery is improved by adjuvant immunotherapy using imiquimod and anti-CD40.</a> BMC Cancer. 14, 969(2014).</li>
<li>Broomfield, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial%2C+but+not+complete%2C+tumor-debulking+surgery+promotes+protective+antitumor+memory+when+combined+with+chemotherapy+and+adjuvant+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Partial, but not complete, tumor-debulking surgery promotes protective antitumor memory when combined with chemotherapy and adjuvant immunotherapy.</a> Cancer Research. 65 (17), 7580-7584 (2005).</li>
<li>Predina, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+positive-margin+resection+model+recreates+the+postsurgical+tumor+microenvironment+and+is+a+reliable+model+for+adjuvant+therapy+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Biology+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">A positive-margin resection model recreates the postsurgical tumor microenvironment and is a reliable model for adjuvant therapy evaluation.</a> Cancer Biology & Therapy. 13 (9), 745-755 (2012).</li>
<li>Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vital+signs+monitoring+during+injectable+and+inhalant+anesthesia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Animals%22%5BJournal%5D)">Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice.</a> Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).</li>
<li>Overwijk, W. W., Restifo, N. P. B16 as a mouse model for human melanoma. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOverwijk%2C+WW+%22Current+Protocols+in+Immunology%22">Current Protocols in Immunology</a>. , Chapter 20, Unit 20-21 (2001).</li>
<li>Predina, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+local+tumor+microenvironment+in+recurrent+cancers+may+explain+the+failure+of+vaccines+after+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Changes in the local tumor microenvironment in recurrent cancers may explain the failure of vaccines after surgery.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (5), E415-E424 (2013).</li>
<li>Endo, M., Lin, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+margins+in+the+management+of+extremity+soft+tissue+sarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Surgical margins in the management of extremity soft tissue sarcoma.</a> Chinese Clinical Oncology. 7 (4), 37(2018).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Efficacy+of+Neoadjuvant+Compared+to+Adjuvant+Immunotherapy+to+Eradicate+Metastatic+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">Improved Efficacy of Neoadjuvant Compared to Adjuvant Immunotherapy to Eradicate Metastatic Disease.</a> Cancer Discovery. 6 (12), 1382-1399 (2016).</li>
<li>Park, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extended+release+of+perioperative+immunotherapy+prevents+tumor+recurrence+and+eliminates+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Extended release of perioperative immunotherapy prevents tumor recurrence and eliminates metastases.</a> Science Translational Medicine. 10 (433), (2018).</li>
<li>Tai, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+tumor+model+of+surgical+stress+to+explore+the+mechanisms+of+postoperative+immunosuppression+and+evaluate+novel+perioperative+immunotherapies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A mouse tumor model of surgical stress to explore the mechanisms of postoperative immunosuppression and evaluate novel perioperative immunotherapies.</a> Journal of Visualized Experiments. (85), e51253(2014).</li>
<li>Gast, C. E., Shaw, A. K., Wong, M. H., Coussens, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Procedures+and+Methodology+for+a+Preclinical+Murine+Model+of+De+Novo+Mammary+Cancer+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), (2017).</li>
<li>Qiu, W., Su, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+orthotopic+pancreatic+tumor+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Development of orthotopic pancreatic tumor mouse models.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 215-223 (2013).</li>
<li>Erstad, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+and+heterotopic+murine+models+of+pancreatic+cancer+and+their+different+responses+to+FOLFIRINOX+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Orthotopic and heterotopic murine models of pancreatic cancer and their different responses to FOLFIRINOX chemotherapy.</a> Disease Models & Mechanisms. 11 (7), (2018).</li>
</ol>

אין הגילויים.

אנו מספקים פרוטוקול עבור מודל העכבר של כריתת כירורגית שלא הושלמה של סרקומה רקמת רך לבדוק טיפולים פרי-פעיל. אנו גם מתוקננת את החתך כירורגי כדי לאפשר הערכה של ריפוי הפצע בין עכברים בעקבות הטיפול.
הצבת הגידול היא חלק חשוב. בפרוטוקול הזה בחרתי מודל גידול תת עורי כדי לאפשר גישה כירורגית קלה לאתר הגידול וניהול של טיפולים מקומיים עם נטל מינימלי על העכברים. חשוב גם להבטיח כי גידולים לצמוח בחלל תת עורית ולא בתוך צפק, אשר יכול לגרום לתחלואה בלתי צפויה תמותה.
בעת בחירת קו תאים...

ניתוח נשאר אפשרות הטיפול העיקרי עבור גידולים מוצקים רבים1, כולל סרקומה של רקמה רכה2,3. למרות שיפורים בטכניקות ניתוח סרטן, ושילובים עם (ניאו) שדון טיפולים, יש עדיין סיכון גבוה של התדרדרות סרטן גרורות בעקבות כריתת הגידול העיקרי4,5. ב סרקומה רקמת רך, הישנות להתרחש במיוחד locoregionally, באתר של ניתוח, וכתוצאה מכך תחלואה מוגברת תמותה. בהגדרה הקלינית, זה יכול להיות קשה להשיג שוליים רחבים מספיק (למשל, עקב אילוצים אנטומיים), וכתוצאה מכך כריתת שלמים והחזרה הגידול הבאים6. לחץ כירורגי והתהליך הבא של ריפוי הפצע ידועים ליצור מיקרו מדכאים הגידול מיקרוסביבתי חיוביות להישנות הגידול7,8. לכן, גילוי ופיתוח של טיפולים חדשים עבור סרקומה של רקמה רכה, בעיקר חיסוני, צריך לקחת באופן אידיאלי את התגובה הריפוי פצע כירורגי בחשבון.
המחקרים הקדם-קליניים ביותר עבור הטיפולים מתבצעים בתחילה באמצעות מודלים של העכבר בסינגנמית או xenotransplant שתלות, מבלי לשלב את הלחץ כירורגי תגובה ריפוי הפצע9,10. לכן, פיתחנו את העכבר תת עורית מודל סרקומה של רקמה רכה המשלב ניתוח כירורגי שלם. WEHI 164 תאים פיברוסרקומה מחוסנת תת-עורי, ופעם גידולים מבוססים, אנו מסירים 50-75% הגידול הגורפת (איור 1A-E). גידולים מחדש בעקביות לצמוח מתוך הגידול שנותר. מודל זה מאפשר בדיקת שפיטה טיפולים תוך בהתחשב בהשפעה של לחץ כירורגי וריפוי הפצע. מודלים כירורגיים דומים של כריתה לא שלמה שימשו במספר מחקרים על ידי מספר קבוצות ומצאו להיות בתוקף ואפקטיבי11,12,13. כאן, אנו מספקים תיאור מפורט של פרוטוקול זה.

<table><tbody><tr><td>מזרק אינסולין 26 מד 0.5 מ"ל</td><td>בקטון דיקינסון, אוסטרליה</td><td>326769</td><td>אף אחד</td></tr><tr><td>2-Mercaptoethanol</td><td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>21985023</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מכונת גז הרדמה</td><td>Darvall Vet, אוסטרליה</td><td>מק"ט: 2848</td><td>ללא</td></tr><tr><td>אנטי-CTLA-4</td><td>BioXcell, ארה"ב</td><td>BE0164</td><td>ללא</td></tr><tr><td>אנטי-PD-1</td><td>BioXcell, ארה"ב</td><td>BP0273</td><td>ללא</td></tr><tr><td>הזרקת בופרנורפין הידרוכלוריד, 0.3 מ"ג/מ"ל</td><td>RB healthcare UK Limited, UK</td><td>55175</td><td>הזמנת מרשם</td></tr><tr><td>פילינג כירורגי כלורהקסידין 4%</td> <td>פריגו אוסטרליה, אוסטרליה</td><td>CHL01449F (קרצוף</td><td>ללא</td></tr><tr><td>סרום בקר עוברי</td><td>CellSera, אוסטרליה</td><td>AU-FBS-PG</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מלקחיים בסדר 10.5 ס"מ</td><td>בית כירורגי, מערב אוסטרליה</td><td>CC74110</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מלקחיים Fine 12 ס"מ</td><td>בית כירורגי משונן, מערב אוסטרליה</td><td>CC74212</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מלקחיים Halsted 14 ס"מ</td><td>בית כירורגי, מערב אוסטרליה</td><td>CD01114</td><td>ללא</td></tr><tr><td>תא חימום</td><td>Datesand Ltd, בריטניה</td><td>Mini-Thermacage</td><td>ללא</td></tr><tr><td>HEPES (1M)</td> <td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>15630080</td><td>ללא</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>הנרי שיין בריאות בעלי חיים, אוסטרליה</td><td>מק"ט: 29405</td><td>הזמנת מרשם</td></tr><tr><td>משחת עיניים סיכה</td><td>אלקון</td><td>n/a</td><td>ללא</td></tr><tr><td>פניצילין/סטרפטומיצין 1000X</td><td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>15140122</td><td>ללא</td></tr><tr><td>תמיסת חוצץ פוספט 10x</td><td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>70013-032</td><td>ללא</td></tr><tr><td>רפלקס 7 מ"מ קליפים מסוגלים</td><td> מדעי, אוסטרליה</td><td>AS59038</td><td>אף אחד</td></tr><tr><td>רפלקס 7 מ"מ קליפ פצע מוליך</td><td>מסוגל מדעי, אוסטרליה</td><td>AS59036</td><td>אף אחד</td></tr><tr><td>רפלקס פצע קליפ מסיר מסוגל</td><td>מדעי, אוסטרליה</td><td>AS59037</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מכרסם Qube הרדמה מעגל נשימה</td><td>Darvall Vet, אוסטרליה</td> <td>#7885</td><td>אף אחד</td></tr><tr><td>מכון הזיכרון רוזוול פארק (RPMI) 1640 בינוני + L-גלוטמין</td><td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>21870092</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מספריים איריס STR 11 ס"מ</td><td>בית כירורגי, מערב אוסטרליה</td><td>KF3211</td><td>ללא</td></tr><tr><td>מספריים איריס STR 9 ס"מ</td><td>בית כירורגי, מערב אוסטרליה</td><td>JH4209</td><td>ללא</td></tr><tr><td>תא אינדוקציה קטן</td><td>Darvall Vet, אוסטרליה</td><td>מק"ט: 9630</td><td>ללא</td></tr><tr><td>TrypLE אקספרס 1x</td><td>Life Technologies Australia Pty Ltd</td><td>12604-021</td><td>ללא</td></tr><tr><td>נביטה 500 מעקר חרוזי זכוכית</td><td>Cellpoint Scientific Inc., ארה"ב</td><td>5-1460-DK</td><td></td></tr></tbody></table>

מודל עכבר של insected רקמה רכה לחלוטין סרקומה עבור בדיקה (ניאו) שפיטה טיפולים

A Mouse Model of Incompletely Resected Soft Tissue Sarcoma for Testing (Neo)adjuvant Therapies

ניתוח הוא לעתים קרובות הטיפול הראשון עבור גידולים מוצקים רבים. עם זאת, התפרצויות מקומיות מתרחשות לעתים קרובות בעקבות הטיפול העיקרי הגידול, למרות הפסיקה או הניאו-שדון טיפולים. זה מתרחש כאשר שוליים כירורגי ללא מספיק גידול, וכתוצאה מכך תאים סרטניים שיורית. מנקודת מבט ביולוגית וחיסונית, ניתוח אינו אירוע null; סביבת הריפוי של הפצע ידוע כדי לגרום למסלולים הפרו-והאנטי-טוטגניים. כתוצאה מכך, דגמים פרה-קליניים לפיתוח תרופות שמטרתן למנוע התדרדרות מקומית צריך לשלב כריתת כירורגית כאשר בדיקות חדשות (ניאו) שדון טיפולים, כדי לדגמן את ההגדרות הקליניות בחולים שטופלו בניתוח.
כאן, אנו מתארים מודל העכבר של כריתת כירורגית שלא הושלמה של WEHI 164 סרקומה רקמה רכה המאפשר בדיקה של (ניאו) טיפולים והנמלה בקביעת תגובה ריפוי הפצע. במודל זה, 50% או 75% של הגידול מוסר, משאיר מאחורי רקמות סרטן באתרו כדי לדגמן מחלות שיורית גולמי לאחר הניתוח בסביבה הקלינית. מודל זה מאפשר טיפולים בדיקה בהקשר של ניתוח בעוד בהתחשב בתגובה ריפוי הפצע, אשר עשוי להשפיע על היעילות של הטיפול (ניאו) שדון טיפולים. כריתת כירורגית מלאה תוצאות לצמיחה מחודשת של הגידול בכל העכברים בהעדר טיפול שדון. הטיפול שדון עם המצור תוצאות מחסום לצמיחה מחודשת הגידול. מודל זה מתאים אפוא לבדיקת טיפולים בהקשר של ניתוח debulking ואת התגובה הקשורה שלה הפצע ריפוי והוא יכול להיות מורחב לסוגים אחרים של סרטן מוצק.

גידול בגודל של 50 mm2 הוא גודל אידיאלי עבור debulk חלקי. הניתוח הכירורגי ללא שלמות של 50 mm2 גידולים תוצאות ב 100% (n = 5) לצמיחה מחודשת של גידולים בהעדר הטיפול חיסוני שדון (איור 4א). הפעם הבאה השתמשו במודל כדי לבחון את הטיפול החיסוני שימוש בנוגדנים נגד מולקולות המחסום ציטוטוקסיים חלבון משויך לימפוציטים 4 (CTLA-4) וקולטן מוות מתוכנת 1 (PD-1). טיפול בעכברים עם anti-CTLA-4 או anti-PD-1 הביא שיעור הריפוי של 80% ו 25% (n = 4...

בפרוטוקול זה, אנו מתארים מודל העכבר של כריתת כירורגית לא הושלמה של סרקומה של רקמה רכה עבור בדיקות (ניאו) שדון טיפולים.

מודל עכבר של Insected רקמה רכה לחלוטין סרקומה עבור בדיקה (ניאו) שפיטה טיפולים

Surgery is often the first treatment for many solid tumors. However, local relapses frequently occur following primary tumor resection, despite adjuvant ...

פרוטוקול זה נועד לחקות את ההגדרה הקלינית של מחלה שיורית לאחר ניתוח debulking הגידול, ולכן מאפשר לנו לבדוק טיפולים חדשים בסרטן בהקשר של ריפוי פצע לאחר הניתוח. היתרון של טכניקה זו הוא שהיא מאפשרת סטנדרטיזציה של כמות הפצע שנגרם ואת כמות הגידול להישאר. טכניקה זו חשובה במיוחד למחקרים פרה-קליניים בזיהוי טיפולים חדשים לסרטן, שהיא מתדרדרת באופן מקומי כדוגמה לסרקומה של רקמות רכות.הדגמה חזותית זו היא קריטית כדי להדגים את טכניקת ההיפוך, המאפשרת לנו לחשוף את הגידול המחובר לצד העור. התחל הליך זה עם חיסון תת עורי של תאים סרטניים מוכנים בעכברים, כמתואר בפרוטוקול הטקסט. ביום 12, לאחר חיסון, כאשר גידולים הגיעו לגודל של כ 50 מילימטרים רבועים, עכברים במינון עם 100 microliters של buprenorphine תת עורית ב scruff של הצוואר, 30 דקות לפני הניתוח.הגדר את האזור הכירורגי עם כרית החום מכוסה מעיל ספסל ולהגדיר חרוט האף עבור הרדמה. סדר ציוד כירורגי נקי, כך שהם נמצאים בהישג יד, כולל chlorhexadine, ספוגית, גזה, ג'ל עיניים, שתי מדפים מעוגלים, מספריים, מוליך קליפ, מסיר קליפ, ומילוי קליפ. מחממים את תא החימום ל-37 מעלות ומגדירים כרית חום נוספת להחלמה.שים לב שהליך זה דורש שני אנשים. עוזר חייב לפקח על הנשימה של העכבר מקרוב במהלך ההליך. לאחר הרדמה של העכבר כמתואר בפרוטוקול הטקסט, בצע בדיקת קמצוץ ומבחן רפלקס הקרנית כדי להבטיח שהעכבר יהיה הרדמה מלאה לפני תחילת הניתוח.מכסים את עיני העכבר בכמות קטנה של ג'ל עיניים כדי למנוע יובש בעיניים. התחל ניתוח זה על ידי חיתוי האזור הכירורגי עם כלורקסאדין. באמצעות מדפים וזוג מספריים לעשות חתך ישר סנטימטר אחד לאורך הצד הגבי, שלושה מילימטרים מהגידול.אין לחתוך את העור ישירות מכסה את הגידול כפי שהוא לא לרפא היטב. הימנע משימוש באזמל כדי לחתוך את הגידול ולהשתמש פינצטה כדי לגרוף את החלקים. באמצעות פינצטה, למשוך את fascia ואת רקמת שומן תת עורית בין הגידול ואת צפק.הגידול התת עורי מחובר בדרך כלל לצד העור. פתח את הפצע על ידי החזקת העור בעדינות בצד נושא הגידול באמצעות פינצטה ולהפוך את הגידול, כך שהוא נראה בחוץ. באמצעות זוג מספריים, לחתוך את קפסולת הגידול מן החצי כדי להסיר, החל מבסיס הגידול הקרוב ביותר לפתיחה.עבור 50% ניתוח debulk, לחתוך על פני אמצע הגידול. באמצעות מדחפים מעוגלים לגרוף את החלק של הגידול כדי להסיר. אספו שרידים מאזור דבולק.עבור 75%debulk, להתחיל על ידי ביצוע debulk גידול 50% ואז לחתוך במחצית 50% הנותרים של הגידול. לגרוף 25% מהגידול באמצעות מדפים מעוגלים. כדי לסגור את האתר הכירורגי, מניחים את הגידול הנותר בחזרה מתחת לעור באמצעות מדפים, למשוך את מדפים העור יחד בשורה העור לאורך הפצע.החזיקו את העור יחד חמישה מילימטרים מקצה הפצע ולהשתמש קליפים כירורגיים כדי לסגור את הפצע החל בצד, הקרוב ביותר למדפים. יש למרוח כמה קליפים לפי הצורך כדי להבטיח שלא נחשפת רקמה בסיסית. בדרך כלל, שלושה עד ארבעה קליפים מוחלים עם רווחים של שני מילימטרים בין קליפים.אפשר לעכברים להתאושש על ידי הכנסתם לתא החימום החם. מניחים את כלוב העכבר על כרית החום. לפקח על העכברים בתא החימום עד שהם התאוששו מההרדמה.לאחר מכן, להחזיר את העכברים לכלוב, להשאיר את הכלוב על כרית החום במשך 10 דקות נוספות עד העכברים הפכו פעילים יותר. תן לעכברים אוכל רטוב ורך. לפקח על העכברים שעה אחת לאחר הניתוח להחלמה.נטר את העכברים שוב בסוף היום ובבוקר שלמחרת וודא שהסרטונים נשארים במקום. לטפל בעכברים perioperatively עם הרפתקה או טיפול neoadjuvant בכל זמן נתון, בהתאם לטיפול עניין. לדוגמה, לטפל בעכברים עם מנה אחת של 100 מיקרוגרם של אנטי CTLA-4 תוך פרטית ביום 15 לאחר חיסון.לחלופין, יש לטפל בעכברים בשלוש מנות של 200 מיקרוגרם של אנטי-PD-1 תוך-חיים בימים, 15, 17 ו-19 לאחר החיסון. כריתה כירורגית לא שלמה של 50 גידולים מילימטר מרובע, המצוין כאן על ידי קו מנוקד תוצאות 100%reroducible צמיחה מחדש של הגידולים בהעדר אימונותרפיה סדג'ובנטי. לכן, גידול הגידול לגודל של 50 מילימטרים רבועים הוא גודל אידיאלי עבור debulk חלקית.המודל שימש אז לבדיקת immunotherapies תריס באמצעות נוגדנים נגד מודולים מחסום, לימפוציטים T cytotoxic הקשורים חלבון ארבע קולטן מוות מתוכנת אחד. טיפול בעכברים עם אנטי CTLA-4, הביא שיעור ריפוי של 80%ואילו טיפול בעכברים עם אנטי PD-1 הביא שיעור ריפוי של 25%התגובה עם אנטי PD-1 מספק הזדמנות לבדוק את זה שילובים חדשניים, כדי לשפר עוד יותר את שיעור התגובה. חשוב שהגידול הנותר יישאר מחובר לעור, אחרת אספקת הדם תיחתך והגידול יהפוך לנמק.בעקבות הליך זה, גידולים ניתן לנתח על ידי מגוון רחב של שיטות, כגון ציטומטריה זרימה על מנת להעריך כיצד ניתוח משפיע על תאים חודרים הגידול. מודל העכבר הזה איפשר לנו לחקור כיצד ריפוי פצעים משפיע על חיסונים של סרטן.

a-mouse-model-incompletely-resected-soft-tissue-sarcoma-for-testing

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול לביסוס מודל עכבר גרורות ספונטני של קסנוגרפטים או PDX שמקורם בסרטן המעי הגס. מודלים אלה של xenograft מחקים חלקית את המאפיינים של קרצינומה אנושית ומבינים את ההיבטים הקריטיים של ממאירויות אנושיות, כולל פלישה וגרורות.

מודלים ספונטניים של גרורות בעכבר: פלטפורמה לחקר הפוטנציאל הגרורתי של תאי סרטן המעי הגס בהזרקה אורתוטופית

סרטון זה מדגים בדיקה של טיפול אדג'ובנטי או נוסף במודל עכבר עם גידולים תת עוריים שנכרתו באופן חלקי. העכבר שעבר כריתה חלקית של הגידול מטופל בנוגדן המכוון לחלבון האנטי-ציטוטוקסי של תאי בקרת T, מה שעשוי להפחית את הצמיחה המחודשת של הגידול ומציע טיפול אדג'ובנטי יעיל.

טיפול אדג'ובנטי במודל עכבר עם גידול תת עורי שעבר כריתה חלקית

מודל גידול עכבר של מתח כירורגית משמש לחקור כיצד דיכוי חיסוניים לאחר הניתוח מקדם מחלה גרורתית ולהעריך טיפולים סביב ניתוח immunostimulatory.

מודל גידול מאוס של מתח כירורגי כדי לחקור את המנגנונים של דיכוי מערכת חיסוני לאחר ניתוח והערכת immunotherapies Perioperative רומן

מודלים של התקדמות מחלה הספונטנית גרורתי קרצינומה של תאי כליות (RCC) יכולים לשמש להערכת טיפולים בסביבה רלוונטית מבחינה קלינית. פרוטוקול זה מדגים הליכים שונים להשתלת תאים סרטניים בכליות orthotopic, כריתת כליה תקינה, ולבסוף מתאר מדריך נתיחה לאחר מוות לניקוד חזותי וbioluminescent של נטל ולוקליזציה גרורתי.

Nephrectomy דוגמנות קרצינומה ספונטני גרורתי של תאי כליות (mRCC) בעכברים בעקבות

מודל גידול ראשוני orthotopic סרטן השד סר כירורגית של גידול ראשוני כדי להאריך את חיי עכבר כדי ליצור גרורות ספונטניות מתוארים. גידול הגידול ולהתפתחותו מנוטר לכמת ידי דימות פלואורסצנטי בלוציפראז.

במודל עכבר orthotopic של שד ספונטני סרטן גרור

מודלים פרה-קליניים המעריכים טיפול אדג'ובנטי למיקוד גרורות לסרטן השד נעדרים. כדי להתמודד עם זה, פיתחנו מודל Murine של novo ריאתי אדמוקרצינומה החלב ריאתי, שבו טיפולים שניתנו הגדרה אדג'ובנטית (כריתה כירורגית לאחר ניתוח) ניתן להעריך את היעילות להשפיע על גרורות בעבר ריאתי seeded.

כירורגית נהלים ומתודולוגיה עבור מודל Murlin פרה קלינית של דה נובו גרורות סרטן החלב

יישום מודל orthotopic של קרצינומה של תאי כליה בעכברים עם מערכת חיסון תקינים מקנה החוקר מערכת קלינית רלוונטית המוגדרת על ידי הנוכחות של גרורות גידול ריאות כליות עיקריות באותה החיה. מערכת זו יכולה לשמש כדי preclinically לבדוק מגוון של טיפולים in vivo.

קרצינומה תא syngeneic עכבר הדגם של גרורתי כליות עבור הערכה כמותית אורך ורוחב של טיפולים פרה-קליניים

הזרקה ישירה של נגזר סרטן שלפוחית חוץ-תאית (EVs) שמוביל התכנות של מח העצם תמיכה התקדמות הגידול; עם זאת, אילו תאים לתווך את האפקט הזה לא ברור. במסמך זה, אנו מתארים פרוטוקול צעד אחר צעד כדי לחקור בתיווך EV הגידול-mesenchymal תאי גזע (MSC) אינטראקציות ויוו, חשיפת תפקיד מכריע עבור EV משכילים MSCs ב גרורות.

דגם פרה העכבר של אוסטאוסרקומה כדי להגדיר את התקשורת חוץ-תאית שלפוחית בתיווך בין גידול בתאי גזע Mesenchymal

בהקשר הקליני, חולים עם סרטן הלבלב מקומי יעברו כריתת לבלב ואחריו טיפול אדג'ובנטי. פרוטוקול זה שדווח כאן נועד לבסס שיטה בטוחה ויעילה של מידול תרחיש קליני זה בעכברים עירומים, באמצעות השתלה אורתוטופית של סרטן הלבלב ואחריו כריתת לבלב דיסטלית וכריתת טבור.

מודל עכבר כריתה אורתוטופי של סרטן הלבלב

כאן, השתלה אורתוטופית סינגנית ואחריה הליך קטיעה של אוסטאוסרקומה עם גרורות ריאות ספונטניות שניתן להשתמש בהן לחקירה פרה-קלינית של ביולוגיה גרורות ופיתוח של טיפולים חדשניים מתואר.

מודל עכברוש אוסטאוסרקומה סנגנית אורתוטופית עם קטיעה כדי לשלוט בקצב גרורות

שיטה ייחודית לכריתה כירורגית של גידולי קרצינומה של תאי קשקש אוראליים שנוצרו בחלל הפה מוצגת כאן.

מודל כריתת גידול רלוונטי לתרגום עבור מודלים פרה-קליניים של עכברים של קרצינומה של תאי קשקש בפה

חקור מודל עכברים לכריתה חלקית של סרקומת רקמות רכות לבדיקת טיפולים ניאו-אדג'ובנטיים. שיטה זו מאפשרת סטנדרטיזציה של פצע וגידול שיורי לחקר החלמה לאחר ניתוח ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות.

מודל עכבר של Insected רקמה רכה לחלוטין סרקומה עבור בדיקה (ניאו) שפיטה טיפולים

גלה סרטונים נוספים