Name: דגימה וניתוח של אותות ריח בעלי חיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-13T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 59 s
Description: חקור שיטות מתקדמות לדגימה וניתוח של אותות ריח בעלי חיים באמצעות Headspace SPME ו-GC-MS. שיטות אלו מאפשרות זיהוי תרכובות נדיפות ומובילות להבנה מעמיקה של תקשורת כימית בבעלי חיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לקית' הולדינג על עזרתו בניתוחים כימיים במרכז המדע ע"ש רוזלינד פרנקלין, וולברהמפטון ובן מנטל על הפקת הסרטון. אנו מודים גם לפרופ' גלוריאנו מונטי, ד"ר ג'וזפה פייראצ'יני ולחברי המרכז לספקטרומטריית מסה באוניברסיטת פירנצה, פירנצה, ולפרופ' לוקה קלמאי וד"ר מרקו מיכאלוצי ממעבדת ARCA של CNR, פירנצה, על עזרתם בהקמת מתודולוגיה זו. פרויקטי המחקר שכללו את שיטות הדגימה והניתוח המתוארות בכתב היד נתמכו על ידי שתי מלגות מארי סקלודובסקי-קירי אינטרה אירופאיות (תעודות זהות של הסכם מענק: 327083, 703611), מענק קטן ('הפרימט המועשר החושי') מאגודת הפרימטים של בריטניה הגדולה, ומענק מחקר קטן ('האם לציידים-לקטים יש חוש ריח מיוחד?') מהאקדמיה הבריטית / קרן Leverhulme ל S.V. עבודת המעבדה הדרושה להקמת מתודולוגיה זו קיבלה גם מימון מתחרות המימון השנתית של הפקולטה למדעים והנדסה (וולברהמפטון) ל-S.V.

1. אוסף לדוגמה
<ol><li>דוגמת ריחות שהם אחד מהבאים:<ol>
<li>לאסוף באופן ספונטני שוחרר על ידי נושאי מחקר רגילים (למשל, פרימטים גן החיות) באמצעות סימון ריח על נייר מסנן סטרילי (למשל, הפרשות ריח בלוטת ריח) או ישירות לתוך בקבוקונים (למשל, שתן).</li>
		<li>לאסוף על ידי שפשוף ספוגיות כותנה סטרילית לאחר אימון נושאי המחקר באמצעות אימון חיזוק חיובי.</li>
		<li>לאסוף על ידי שפשוף ספוגיות כותנה סטרילית לאחר הרדים של נושאי המחקר.</li>
	</ol>
</li>
	<li>מניחים דגימות בבקבוקוני זכוכית שקופים סטריליים של 10 מ"ל, וחותמים עם כובעי בורג עם כובעים המשלבים ספטה FTFE/סיליקון. מיד לאחסן אותם ב -20 מעלות צלזיוס. הערה: חיוני להשתמש בציוד מגן אישי נקי, כגון כפפות ניטריל; לשנות אותם לעתים קרובות; הימנע ממגע עור ישיר עם דגימות ובקבוקונים. עדיף להשתמש בבקבוקונים חדשים לגמרי; עם זאת, במקרה של בקבוקונים משומשים, חיוני לנקות מראש את הבקבוקונים, ולאחר מכן להשתמש באותו פרוטוקול.</li>
	<li>קח כדורי סרק סביבתיים בכל פעם שסימני ריח נאספים. לדוגמה, לאסוף את מדיית הדגימה (למשל, נייר סינון או ספוגית) ואת בקבוקון headspace החשופים לסביבה בעת דגימה מתבצעת.</li>
</ol>2. הכנה לדוגמה
<ol><li>הכינו דגימות בשטח על ידי חיתוך עם להב ריבוע של כ-10 מ"מ מנייר סינון מסומן ריח, או ראש הספוגית, והצבתו בבקבוקון 10 מ"ל עם מרווח ראש.</li>
	<li>לאחר הכנת כל דגימה, יש להשליך או לנקות את הלהב המשמש לחיתוך מדיית הדגימה באמצעות מגבון אנטיבקטריאלי מתאים ו/או אלכוהול ויובש יסודי.</li>
	<li>אחסן את כל הדגימות ב- -20 °C (69 °F). הערה: מועדף ב -20 °C (69 °F) או בכל דרך אחרת נמוך ככל האפשר בשדה.</li>
</ol>3. הכנה לניתוח
<ol><li>מוציאים דגימות מהמקפיא ומאפשרים להתחמם באופן טבעי לטמפרטורת החדר למשך שעה לפחות.</li>
	<li>הגדר את השיטה האנליטית ב- GC-MS באופן הבא:<ol>
<li>עבור תנאי ניתוח SPME, בצע את הוראות היצרן כדי להתנות סיבי SPME לפני השימוש הראשון: תנאי מקדים סיבים (260 °C למשך 5 דקות), דגירה לדוגמה (40 °C (40 °C למשך 2 דקות), זמן החילוץ (15 דקות), זמן desorption (2 דקות), וסיבים לאחר התנאי (260 °C (260 °C למשך 20 דקות).</li>
		<li>השתמש בתנאי GC הבאים: עמודה (HP5-MS 30 m x 0.25 מ"מ; 0.25 מיקרומטר), טמפרטורת מזרק (270 מעלות צלזיוס), קצב זרימה (1 מ"ל / דקה), מצב הזרקה (ללא פיצול), פרופיל תנור GC (45 מעלות צלזיוס למשך 2 דקות; 4 מעלות צלזיוס עד 170 מעלות צלזיוס; 20 °C /min עד 300 °C (300 °C), קו העברת MSD (280 °C (280 °C ).). הערה: כדי לשפר בין עקביות זמן שמירה לדוגמה השיטה האנליטית נעולה בזמן שמירה).</li>
		<li>השתמש בתנאי MSD הבאים: השהיית ממס (2.5 דקות) וטווח סריקה (29 עד 400 אמו). הערה: נעשה שימוש בטווח של 10 עד 400 בפרוטוקוליםקודמים 4.</li>
	</ol>
</li>
	<li>ודא שאספקת גז הטיהור ליחידת מיזוג הסיבים מופעלת. הערה: חיוני שהרכבת SPME תותקן כראוי בדוגמה האוטומטית ושהוא מיושר למגשי הדגימה האוטומטית, ליחידת מיזוג הסיבים וליציאת הכניסה של GC. יישור שגוי עלול לגרום לנזק או להרס של סיבי SPME.</li>
</ol>4. ניתוח
<ol><li>מקם בקבוקון רווח ראש ריק (כדי לפעול כריק מערכת) במיקום הראשון של מגש הדוגמל האוטומטי GC-MS. מקם את הריק הסביבתי במיקום השני של מגש הדוגמל האוטומטי. מקם את הדגימות לניתוח במיקומים הבאים של מגש הדגימה האוטומטית.</li>
	<li>צור רצף אנליטי כדי לנתח כל דגימה בתוך המגש לדוגמה.<ol>
<li>במסך הבית של MassHunter, בחר רצף | טען רצף.</li>
		<li>השלם את טבלת הרצף עבור כל המקומות הריקים והדוגמאות על-ידי הוספת המידע המתאים. שמור את טבלת הרצף שהושלמה. הערה: המידע המדויק עבור טבלת הרצף יהיה תלוי בעיצוב המעבדות עבור הטבלה. מידע מינימלי יכלול בדרך כלל סוג לדוגמה, שם לדוגמה, מיקום ומספר בקבוקון, שיטה אנליטית ומיקום ושם של קובץ נתונים (הקצאה של שם קובץ נתונים התואם לשם לדוגמה מסייעת לעיבוד נתונים עתידי). ניתן להוסיף דגימות נוספות לרצף במהלך הניתוח.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הפעל את הרצף על-ידי בחירה באפשרות רצף | הפעל רצף.</li>
	<li>לאחר ניתוח להחזיר דגימות למקפיא בהקדם האפשרי. הערה: ייתכן שניתן יהיה לנתח מחדש דגימות, אך יש לציין כי ייתכן שחלק מהרכיבים הנדיפים חולצו לחלוטין במהלך הניתוח הראשוני וייתכן שתרכובות מסוימות עברו פירוק תרמי ובקטריאלי ב- 40 מעלות צלזיוס, ולכן ייתכן שהכרומטוגרמה שנוצרה אינה מייצגת ביסודיות את סימון הריח המקורי.</li>
</ol>5. ניתוח נתונים
הערה: ניתוח נתונים ראשוני כולל שילוב של כרומטוגרמות כדי להשיג זמן שמירה ונתוני אזור שיא יחד עם זיהוי זמני של פסגות באמצעות תוכנת ChemStation ומסדי נתונים ספקטרליים המוניים של NIST (המכון הלאומי לתקנים וטכנולוגיה), גרסה MSD F.01.01.2317. ניתוח נתונים יכול להתבצע באופן ידני או באמצעות שיטה אוטומטית למחצה. אם השיטה האוטומטית למחצה משמשת אז זה לפעמים מועיל לבצע מידה מסוימת של ניתוח נתונים ידני כדי לאמת זיהויים מהוססים.
<ol><li>פתח את קובץ הנתונים על-ידי לחיצה על הקובץ המתאים בסרגל הניווט הימני. כרומטוגרמה היונית הכוללת (TIC) תוצג בחלון העליון של מסך ניתוח הנתונים.</li>
	<li>כדי לשלב את ה- TIC באמצעות אינטגרטור RTE, בחר כרומטוגרמה | שלב.</li>
	<li>התאם פרמטרי שילוב כך שפסגות הגדולות מרעש בסיסי של 3 x ישולבו. בחר | כרומטוגרמה פרמטרי שילוב אותות של MS. בתיבת הפלט להתאים את אזור השיא המינימלי לפי הצורך (1.0 מייצר תוצאות מקובלות בדוגמאות שלנו).</li>
	<li>כדי לזהות פסגות ולהפיק דוח סיכום, בחר יצא דוחות | תוצאות החיפוש בספריה מדווחות ל- XLS. הערה: יש לערוך חיפוש בספריות הספקטרליות יחד עם מספר התאמות הספרייה שיוצגו לפני שניתן יהיה לבצע חיפוש בספריה.</li>
	<li>דוח הגיליון האלקטרוני המתקבל מכיל נתוני שילוב עבור כל שיא והתאמה לא סופית של ספריה ספקטרלית להקצאת זהות. בדרך כלל, איכות הספריה /התאמת הספריה צריכה להיות >80 כדי לקבל את הזיהוי הלא סופי. שמור את הגיליון האלקטרוני.</li>
	<li>זהה שיא ישירות מהטי.איי.איי.<ol>
<li>בחר את שיא העניין.</li>
		<li>אם השיא קטן, הגדל את התצוגה על-ידי ציור תיבה מסביב לשיא על-ידי החזקת לחצן העכבר השמאלי כלפי מטה, מתיחת התיבה מעל הפסגה ושחרורה.</li>
		<li>מקם את קו הסמן כך שיהיה בנקודה הגבוהה ביותר של הפסגה (או מיד לאחר מכן).</li>
		<li>לחץ פעמיים על לחצן העכבר הימני וספקטרום המסה לשיא יופיע בחלון התחתון של מסך ניתוח הנתונים.</li>
		<li>כדי לחפש בספריה הספקטרלית, הזז את הסמן למקום כלשהו בחלון הספקטרלי ולחץ פעמיים על לחצן העכבר הימני. תוצאות החיפוש בספריה יופיעו בחלון חדש.</li>
		<li>כדי להסיר את רעשי הרקע ממגוון עניין, לחץ תחילה פעמיים על לחצן העכבר הימני בשיא המדובר. לאחר מכן לחץ פעמיים על לחצן העכבר הימני באזור ללא פסגות מיד מול שיא העניין. בחר | כרומטוגרמה הפחת ספקטרום. הספקטרום המצומצם יוצג בחלון התחתון של מסך ניתוח הנתונים ויציג את '(-)' לצד נתוני הסריקה בכותרת החלון.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Wyatt, T. D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWyatt%2C+TD+%22Pheromones+and+Animal+Behavior%3A+Chemical+Signals+and+Signatures%22">Pheromones and Animal Behavior: Chemical Signals and Signatures</a>. , Cambridge University Press. Cambridge, UK. (2014).</li>
<li>Heymann, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neglected+sense-olfaction+in+primate+behavior%2C+ecology%2C+and+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">The neglected sense-olfaction in primate behavior, ecology, and evolution.</a> American Journal of Primatology. 68 (6), 519-524 (2006).</li>
<li>Drea, C. M., Boulet, M., DelBarco-Trillo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%22secret%22+in+secretions%3A+Methodological+considerations+in+deciphering+primate+olfactory+communication%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">The "secret" in secretions: Methodological considerations in deciphering primate olfactory communication.</a> American Journal of Primatology. 75 (7), 621-642 (2013).</li>
<li>Vaglio, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sternal+gland+scent-marking+signals+sex%2C+age%2C+rank+and+group+identity+in+captive+mandrills%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Sternal gland scent-marking signals sex, age, rank and group identity in captive mandrills.</a> Chemical Senses. 41 (2), 177-186 (2016).</li>
<li>Marneweck, C., Jürgens, A., Shrader, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dung+odours+signal+sex%2C+age%2C+territorial+and+oestrous+state+in+white+rhinos%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Dung odours signal sex, age, territorial and oestrous state in white rhinos.</a> Proceedings of the Royal Society of London B: Biological Sciences. 284 (1846), (2016).</li>
<li>Shear, W. A., Jones, T. H., Miras, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+possible+phylogenetic+signal+in+milliped+chemical+defenses%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Systematics+and+Ecology%22%5BJournal%5D)">A possible phylogenetic signal in milliped chemical defenses.</a> Biochemical Systematics and Ecology. 35, 838-842 (2007).</li>
<li>Kimura, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volatile+substances+in+feces%2C+urine+and+urine-marked+feces+of+feral+horses%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Volatile substances in feces, urine and urine-marked feces of feral horses.</a> Canadian Journal of Animal Science. 81 (3), 411-420 (2001).</li>
<li>Vaglio, S., Minicozzi, P., Bonometti, E., Mello, G., Chiarelli, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volatile+signals+during+pregnancy%3A+a+possible+chemical+basis+for+mother-infant+recognition%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chemical+Ecology%22%5BJournal%5D)">Volatile signals during pregnancy: a possible chemical basis for mother-infant recognition.</a> Journal of Chemical Ecology. 35 (1), 131-139 (2009).</li>
<li>Setchell, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+composition+of+scent-gland+secretions+in+an+Old+World+monkey+%28Mandrillus+sphinx%29%3A+influence+of+sex%2C+male+status%2C+and+individual+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Senses%22%5BJournal%5D)">Chemical composition of scent-gland secretions in an Old World monkey (Mandrillus sphinx): influence of sex, male status, and individual identity.</a> Chemical Senses. 35 (3), 205-220 (2010).</li>
<li>Setchell, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odour+signals+MHC+genotype+in+an+Old+World+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London+B%3A+Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Odour signals MHC genotype in an Old World monkey.</a> Proceedings of the Royal Society of London B: Biological Sciences. 278 (1703), 274-280 (2011).</li>
<li>Pawliszyn, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPawliszyn%2C+J+%22Solid+phase+microextraction%3A+theory+and+practice%22">Solid phase microextraction: theory and practice</a>. , Wiley-VCH. New York, US. (1997).</li>
<li>Janda, E. D., Perry, K., Hankinson, E., Walker, D., Vaglio, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex+differences+in+scent-marking+in+captive+red-ruffed+lemurs%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Primatology%22%5BJournal%5D)">Sex differences in scent-marking in captive red-ruffed lemurs.</a> American Journal of Primatology. 81 (1), 22951(2019).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

השימוש בדגימות בקרה, הן בקרות סביבתיות שנוצרו בזמן איסוף הדגימה והן כדורי סרק של המערכת, חיוניים לפרשנות דגימות סימן הריח. כל הפסגות המיוחסות לסביבת הדגימה או למערכת האינסטרומנטלית צריכות להיות מודרות מדגימות סימן ריח, כך שרק פסגות העניין נכללות בכל פרשנות. פקדים אלה יכולים גם לשחק תפקיד בהערכת וניטור 'בריאות' המכשור.
הפרוטוקול כולל שלבים כדי להתנות את הסיבים לפני ואחרי כל מיצוי. זה נעשה קל יותר על ידי שימוש במדגם אוטומטי ומבטיח כי אין זיהום צולב מדגם לדגימה.
המגבלה...

מעט מאוד ידוע על השינויים הכימיים העומדים ביסוד אותות הריח בבעליחיים 1, גם בגלל אתגרים מתודולוגיים בהקלטה וכימות פרופילים כימיים נדיפים של ריחות2. ישנן מספר מלכודות פוטנציאליות בעת עבודה עם מטריצות כימיות מורכבות ביותר; אלה כוללים בעת דגימה וניתוח דגימות ריח3.
במרכז המדע ע"ש רוזלינד פרנקלין, אוניברסיטת וולברהמפטון, אנו מבצעים ניתוח של ריחות וסימני ריח כדי להבין כיצד בעלי חיים יכולים להשתמש בהם. אנו משלבים סמיוכימיה עם אקולוגיה התנהגותית, אנדוקרינולוגיה וציטולוגיה כדי לשפר את הבנתנו את התפקיד שמילאו אותות חוש הריח בתקשורת בין בעלי חיים.
פיתחנו מתודולוגיה ולאחר מכן ניתחנו ריחות וסימונים ממגוון מינים כולל כמה פרימטים לא אנושיים (כלומר, למורים מוכתרים, למורים אדומי עור, קופי מקוק יפניים, בבונים זיתים, שימפנזים) ויונקים אחרים (כלומר, חתולים, פרות). אספנו וניתחנו מגוון דגימות, כולל שתן, צואה, הפרשות ריח של שיער ובלוטת ריח. ריחות וסימני ריח אלה מורכבים מתערובות מורכבות של תרכובות ולכן כל מתודולוגיה המשמשת לניתוח שלהם צריכה לכלול צורה כלשהי של טכניקה הפרדה. כפי שמודגם, הם מתרחשים גם במגוון מטריצות המחייב שימוש בטכניקות כדי לחלץ את מרכיבי העניין.
מחקריםקודמים על ידי Vaglio et al. 4 ומחברים אחרים5 השתמשו מיצוי מרחב ראש דינמי (DHS) עם ספקטרומטריית גז כרומטוגרפיה-מסה (GC-MS) בעוד מיצוי ממס ישיר6 עקירות ממס מורכבים7 שימשו גם. במיוחד, דגימת headspace דינמית כרוכה בטיהור מרחב הראש עם נפח ידוע של גז אינרטי שבסופו של דבר מסיר את כל התרכובות הנדיפות למעט אלה המראות זיקה חזקה למטריצה לדוגמה (לדוגמה, תרכובות קוטביות בדגימות מימיות).
עבור המתודולוגיה הנוכחית, אימצנו את הטכניקה של מרחב ראש מוצק שלב microextraction (HS-SPME) יחד עם GC-MS. בפרט, פיתחנו ושיפרנו את המתודולוגיה שכבר נעשה בה שימוש על ידי Vaglio et al. במעבדת GC-MS הקודמת שלה8,9,10.
טכניקות מיצוי ממס יעילים מאוד לניתוח תרכובות קטנות, נדיפות מאוד (אשר אחרת ניתן לאבד בקלות מדגם) כי שיטות אלה לשתק תרכובות על תמיכה יציבה, שלב מוצק. HS-SPME משתמש בסיבים מצופים פולימר סופח כדי ללכוד תרכובות נדיפות במרחב הראש מדגם או כדי לחלץ תרכובות מומסות על ידי טבילה בנוזל ביולוגימימית 11. ציפוי פולימר אינו קושר את התרכובות בחוזקה, ולכן על ידי חימום ביציאת ההזרקה של GC הם יכולים להיות מוסרים. שיטה זו היא חזקה יותר מאשר טכניקות מיצוי ממס וגם יעיל יותר מאשר DHS.
בגישה הנוכחית דגימות כלולות בתוך בקבוקוני זכוכית. בקבוקונים אלה מחוממים לטמפרטורה של 40 מעלות צלזיוס כדי לדמות את טמפרטורת הגוף של בעלי החיים על מנת לקדם את הרכיבים הנדיפים של סימן הריח כדי לכבוש את ראש החלל של הבקבוקון. סיב SPME, מצופה 65 מיקרומטר של חומר סורבנט polydimethylsiloxane/divinylbenzene (PDMS/DVB), נחשף לסביבת headspace ורכיבים נדיפים מהמדגם נספגים על הסיבים. על חימום הסיבים ביציאת הכניסה של GC-MS, הרכיבים הנדיפים הם desorbed מן הסיבים ולאחר מכן מופרדים על ידי GC. דפוסי פיצול ספקטרליים של מסה מתקבלים עבור כל רכיב באמצעות MS. בהשוואה של ספקטרום מסה אלה מול מסדי נתונים ספקטרליים המוניים, ניתן לזהות באופן לא סופי את מרכיבי סימן הריח. באמצעות דוגם אוטומטי, אנו מסוגלים לנתח דגימות מרובות בקבוצות באופן עקבי.
בהתחשב בכך שלכל סוג של סיבי SPME יש זיקה שונה לכימיקלים קוטביים, הסיבים נבחרים בדרך כלל בהתאם לקוטביות ו/או המשקל המולקולרי של התרכובות הכימיות המשמשות כיעד. בנוסף, תנאי GC משתנים בהתאם לסוג עמודת GC ואת המאפיינים של תרכובות כימיות היעד.
טכניקה זו מאפשרת ניתוח חצי-כמותי של הרכיבים הנדיפים של סימוני ריח על-ידי מתן אפשרות להפרדה וזיהוי זמני של הרכיבים במדגם, ולאחר מכן ניתוח יחסי אזור שיא כדי לחפש מגמות שיכולות לסמן רכיבים של סימון הריח שעשויים להיות מעורבים באיתות.
נקודות החוזק העיקריות של גישה נוכחית זו הן:
<ul style="list-style-type: square;"><li>טווח הסוגים לדוגמה שניתן לנתח.</li>
	<li>אין צורך בהכנה או עקירות מדגם מורכבות.</li>
	<li>היכולת לנתח רכיבים נדיפים.</li>
	<li>היכולת להפריד את מרכיבי התערובת.</li>
	<li>כדי שתוכל לזהות את הרכיבים שזוהו.</li>
	<li>היכולת לספק מידע חצי כמותי ופוטנציאלי כמותי על הרכיבים שזוהו.</li>
</ul>

<table><tbody><tr><td>בקבוקוני דגימה אוטומטית של 10 מ"ל</td><td>Agilent</td><td>5188-5392</td><td>בקבוקוני הברגה של 10 מ"ל עם</td></tr><tr><td>מכסי בקבוקון 18 מ"מ</td><td>Agilent</td><td>8010-0139</td><td>מגנטי עם מחיצת PTFE/סיליקון</td></tr><tr><td>דגימה אוטומטית</td><td>Agilent</td><td>GC120 PAL דגימה</td><td></td>אוטומטית</tr> עמודה <tr><td>נימית</td><td>Agilent</td><td>HP5-MS</td><td>30 מ' x 0.25 מ"מ; 0.25 ומיקרו; m</td></tr><tr><td>תוכנת ניתוח נתונים</td><td>Agilent-ChemStation</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>כרומטוגרף גז</td><td>Agilent</td><td>7890B</td><td></td></tr><tr><td>כניסת מחיצה</td><td>Agilent</td><td>5182-3442</td><td>Merlin microseal</td></tr><tr><td>גלאי סלקטיבי מסה</td><td>Agilent</td><td>5977A</td><td></td></tr><tr><td>תוכנת דיווח</td><td>ספרייה</td> ספקטרלית של <td>Microsoft-Excel</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>NIST</td><td>-</td><td>NIST/EPA/NIH ספרייה ספקטרלית מסה</td></tr><tr><td>תוכנית חיפוש ספרייה ספקטרלית</td><td>NIST-MS</td><td></td> <td>חיפוש v.2.2</td></tr><tr><td>אניה כניסה מפוצלת</td><td>Agilent</td><td>5190-4048</td><td></td></tr><tr><td>סיבי SPME</td><td>Agilent</td><td>SU57345U</td><td>65 ומיקרו; m PDMS/DVB סיבים</td></tr></tbody></table>

דגימה וניתוח של אותות ריח בעלי חיים

Sampling and Analysis of Animal Scent Signals

פיתחנו מתודולוגיה יעילה לדגימה וניתוח של אותות ריח, באמצעות microextraction שלב מוצק headspace בשילוב עם ספקטרומטריית גז כרומטוגרפיה-מסה, כדי להבין כיצד הם עשויים לשמש בתקשורת בעלי חיים. טכניקה זו מאפשרת ניתוח חצי כמותי של הרכיבים הנדיפים של הפרשות ריח על ידי מתן אפשרות הפרדה וזיהוי זמני של הרכיבים במדגם, ואחריו ניתוח של יחסי אזור שיא לחפש מגמות שיכולות לסמן תרכובות שעשויות להיות מעורבות באיתות. נקודות החוזק העיקריות של גישה נוכחית זו הן טווח סוגי המדגמים שניתן לנתח; חוסר הצורך בהכנה או עקירות מדגם מורכבות; היכולת להפריד ולנתח את מרכיבי התערובת; זיהוי הרכיבים שזוהו; והיכולת לספק מידע חצי-כמותי ופוטנציאלי כמותי על הרכיבים שזוהו. המגבלה העיקרית למתודולוגיה מתייחסת לדגימות עצמן. מכיוון שמרכיבי הריבית הספציפית הם תנודתיים, ואלה עלולים בקלות ללכת לאיבוד, או שהריכוזים שלהם ישתנו, חשוב שהדגימות יאוחסנו ויעברו כראוי לאחר האיסוף שלהם. משמעות הדבר היא גם שתנאי האחסון וההובלה לדוגמה יקרים יחסית. שיטה זו יכולה להיות מיושמת על מגוון רחב של דגימות (כולל שתן, צואה, הפרשות ריח של שיער ובלוטת ריח). ריחות אלה מורכבים מתערובות מורכבות, המתרחשות במגוון מטריצות, ובכך מחייבות שימוש בטכניקות להפרדת הרכיבים הבודדים ולחילוץ תרכובות בעלי עניין ביולוגי.

בעקבות פרוטוקול זה, זיהינו באופן זמני סך של 32 תרכובות כימיות נדיפות מניתוח של 14 סימני ריח של איברי המין האנו שפורסמו באופן ספונטני על נייר סינון על ידי למורים אדומי צווארון (Varecia variegata rubra) והשווינו פרופילי ריח עם תכונות של האות12. תרכובות נדיפות המתרחשות באופן טבעי, כגון פחמימנים, טרפנים, אלכוהול טרפן וקטונים, היו נוכחים בתוך פרופילים אלה וכללו תרכובות שנמצאו בעבר לשמש פרומונים מין רמזים כושר מינים אחרים של בעלי חיים. התרכובות שזוהו באופן לא סופי מפורטות בטבלה 1</stron...

פיתחנו מתודולוגיה יעילה לדגימה וניתוח של אותות ריח כדי להבין כיצד ניתן להשתמש בהם בתקשורת בין בעלי חיים. במיוחד, אנו משתמשים במיקרו-אינטרנצ'רציה מוצקה של מרחב הראש יחד עם ספקטרומטריית גז כרומטוגרפיה-מסה כדי לנתח את הרכיבים הנדיפים של ריחות בעלי חיים וסימוני ריח.

We have developed an effective methodology for sampling and analysis of odor signals, by using headspace solid-phase microextraction coupled with gas ...

התפקיד שמילא הריח בתקשורת בין בעלי חיים אינו מוערך כיום כראוי ולכן לא מוערך כראוי. בפרט מעט מאוד ידוע על השינויים הכימיים העומדים ביסוד אותות הריח בבעלי חיים כולל בני אדם. ואלה נובעים גם מאתגרים מתודולוגיים, הקלטה וכימות של תרכובות כימיות של ריחות המשמשים בעלי חיים לתקשר.ישנם מספר אתגרים פוטנציאליים בעת עבודה עם תערובות כימיות מורכבות מאוד ואלה כוללים גם בעת דגימה וניתוח דגימות הריח. אנו מבצעים ניתוח של ריחות המשמשים בעלי חיים כדי להבין כיצד הם עשויים לשמש אותם כאשר הם מתקשרים זה עם זה. שילבנו ציטוכימיה עם אנדוקרינולוגיה ביו-אקולוגית וציטולוגיה כדי לשפר את הבנתנו את התפקיד שמילא הריח בתקשורת בין בעלי חיים.עבור המתודולוגיה הנוכחית שלנו בוולברהמפטון, אימצנו את הטכניקה של מיקרו-מבנה פאזה מוצק Headspace בשילוב עם ספקטרומטריית מסה כרומטוגרפית גז, שנבנתה על ובלתי נראה של המתודולוגיה משמשים בעבר. ריחות לדוגמה נאספים באחת מהדרכים הבאות. אחד, שוחרר באופן ספונטני ריחות מדגם מנבדקים מחקריים רגילים.לדוגמה, פרימטים גן החיות לאסוף הפרשות ריח ריח בלוטה על ידי סימון ריח על נייר מסנן סטרילי או דגימות שתן ישירות לתוך בקבוקונים. שתיים, לאחר אימון נושאי המחקר באמצעות חיזוק חיובי לאסוף הפרשות ריח על ידי שפשוף מבט ריח עם ספוגיות כותנה סטרילית. שלוש, לאחר sedation של נושאי המחקר לאסוף הפרשות ריח על ידי שפשוף בלוטות ריח עם ספוגיות כותנה סטרילית, על ידי דגימות לתוך בורג סטרילי 10 מיליליטר כתרים, בקבוקוני זכוכית ברורים לאטום עם כובעים מצופים בורג שילוב P T F E מגזר סיליקון.מיד לאחסן את הבקבוקונים במינוס 20 מעלות צלזיוס. הערה, חיוני כי ציוד מגן אישי נקי כגון כפפות ניטריל משמש במהלך הדגימה. החלף כפפות לעתים קרובות להימנע ממגע עור ישיר עם דגימות בקבוקונים.עדיף להשתמש בבקבוקונים חדשים לגמרי. עם זאת, במקרה של בקבוקונים משומשים, חיוני לנקות מראש את הבקבוקונים, ולאחר מכן להשתמש באותו פרוטוקול. קח כדורי סרק סביבתיים בכל פעם שסימני ריח נאספים.עשה זאת על ידי חשיפת נייר סינון שאינו בשימוש או צמר גפן ובקבוקונים לסביבה תוך כדי דגימה. דגימות מוכנות בשטח. עבור נייר מסנן מסומן ריח לחתוך מרובע כ 10 מילימטר מהנייר ומניחים לתוך בורג 10 מיליליטר עקף בקבוקון שטח הראש.עבור ספוגית, לחתוך את ראש ספוגית בקצה מאוד של פיר ספוגית ומניחים לתוך בקבוקון חלל הראש. לאחר כל דגימה הוכן להיפטר או לנקות את השימוש בלהב כדי לחתוך את מדיית הדגימה, עם ניגוב אנטיבקטריאלי מתאים או אלכוהול ויובש ביסודיות. אחסן את כל הדגימות במינוס 20 מעלות צלזיוס.הערה, דגימות צריך להיות מאוחסן במינוס 20 מעלות צלזיוס עם זאת, במאגר השדה הנמוך ביותר הוא הטמפרטורה האפשרית ולהעביר מינוס 20 מעלות צלזיוס בהזדמנות הראשונה. לפני הניתוח להסיר דגימות מהמקפיא מותר ללכת באופן טבעי לטמפרטורת החדר לפחות שעה אחת. הגדר את השיטות האנליטיות ב- GCMS כדלקמן עבור תנאי ניתוח SPMS בהתאם להוראות היצרן כדי להתנות סיבי SBME לפני השימוש הראשון.חיוני שהרכבת SBME תותקן כראוי בדוגמת הרכב ושהוא מיושר ליחידת מיזוג הסיבים של מגשי הדגימה האוטומטיים וליציאת הכניסה של GC. יישור שגוי עלול לגרום נזק או הרס של סיבי Sbme. ודא שאספקת הגז ליחידת מיזוג הסיבים מופעלת.כדי לשפר בין עקביות זמן שמירה לדוגמה, השיטה האנליטית נעולה בזמן שמירה להוסיף את הבקבוקונים לדוגמה למגש המדגם האוטומטי למקם בקבוקון שטח ראש ריק לפעול כמערכת ריקה במיקום הראשון של מגש המדגם האוטומטי. מקם את הריק הסביבתי במיקום השני ולאחר מכן מקם את כל הדגימות הנותרות לניתוח במיקומים הבאים של מגש הדגימה האוטומטית. צור רצף אנליטי כדי לנתח כל דגימה בתוך המגש לדוגמה.במסך הבית של צייד ההמונים, בחר רצף עבור שורת התפריטים ולאחר מכן טען רצף מהתפריט הנפתח. טבלת רצף ריקה תוצג להשלים את טבלת הרצף עבור כל הריקים והדוגמאות על-ידי הוספת המידע המתאים לשמור כטבלת רצף שהושלמה. שים לב, המידע המדויק עבור טבלת הרצף יהיה תלוי בעיצוב המעבדות של הטבלה.מידע מינימלי יכלול בדרך כלל שם לדוגמה של סוג לדוגמה, מיקום קובץ ושיטת ניתוח מספרים ומיקום קובץ נתונים והקצאת שמות של שם קובץ נתונים התואם לשם לדוגמה של עיבוד נתונים עתידי בגילאים. ניתן להוסיף דגימות נוספות לרצף במהלך הניתוח. הפעל את הרצף על-ידי בחירת רצף מתוך שורת התפריטים ולאחר מכן הפעל רצף.לאחר הניתוח החזיר דגימות למקפיא בהקדם האפשרי. שים לב, ייתכן שניתן יהיה לאכוך מחדש דגימות. אבל יש לציין כי כמה רכיבים נדיפים אולי שחולצו לחלוטין במהלך הניתוח הראשוני וכמה תרכובת אולי עברו פירוק תרמי חיידקי ב 40 מעלות צלזיוס.לכן, התוצאה כרומטוגרמה לא יכול להיות מייצג ביסודיות של סימון הריח המקורי. ניתוח נתונים ראשוני כולל שילוב של כרומטוגרמות כדי להשיג זמן שמירה ונתוני אזור שיא יחד עם זיהוי זמני של פסגות באמצעות תוכנת תחנת פקה ומסדי נתונים ספקטרליים מסה קן. ניתוח נתונים יכול להתבצע באופן ידני או באמצעות שיטה אוטומטית למחצה.אם השיטה האוטומטית למחצה משמשת אז זה לפעמים מועיל לבצע מידה מסוימת של ניתוח נתונים ידני כדי לאמת זיהויים מהוססים. כדי להתחיל ניתוח נתונים לפתוח את קובץ הנתונים על ידי לחיצה על הקובץ המתאים בסרגל הניווט השמאלי. סך כרומטוגרמה יון TIC יוצג בחלון העליון של מסך ניתוח הנתונים.כדי לשלב את ה- TIC באמצעות האינטגרטור RTE, בחר תחילה כרומטוגרמה מתוך שורת התפריטים ולאחר מכן בחר אינטגרטור מהתפריט הנפתח תיבה נפתחת ובחר באינטגרטור RTE. חזור לתפריט הכרומטוגרמה וכעת בחר שלב. כדי להתאים פרמטרי שילוב כך שישולבו פסגות או יותר מפי שלושה מרעש בסיסי, בחר שוב כרומטוגרמה משורת התפריטים ולאחר מכן פרמטרים של שילוב MS Signal מהתפריט הנפתח.בתיבה הנפתחת, התאם את אזור השיא המינימלי בהתאם ל- 1.0 המתאים והפיק תוצאות מקובלות בדוגמאות שלנו. כדי לזהות פסגות וליצור דוח סיכום, בחר יצא דוחות מ שורת התפריטים ולאחר מכן חפש דוחות תוצאות חיפוש בספריה ל- XLS. שים לב, הספריות הספקטרליות שיש לחפש יחד עם מספר התאמות הספריה שיוצגו צריכות להיות מוגדרות מראש בתוכנה לפני שניתן יהיה לבצע חיפוש בספריה.דוח הגיליון האלקטרוני המתקבל מכיל נתוני שילוב עבור כל שיא והתאמה לא סופית של ספריה ספקטרלית להקצאת זהות. בדרך כלל איכות הספריה או התאמת הספריה צריכות להיות גדולות מ- 80 כדי לקבל את הזיהוי הלא סופי. שמור את הגיליון האלקטרוני.כדי לזהות שיא ישירות מ- TIC, בחר את שיא העניין. אם השיא הוא הגדלה קטנה על-ידי ציור תיבה מסביב לשיא, על-ידי החזקת לחצן העכבר השמאלי למטה למתוח את התיבה מעל הפסגה ולשחרר את לחצן העכבר. מקם את קו הסמן כך שיהיה בנקודה הגבוהה ביותר של הפסגה או מיד לאחר מכן.לחיצה כפולה, לחצן העכבר הימני וספקטרום המסה לשיא יופיעו בחלון הנמוך של מסך ניתוח הנתונים. כדי לחפש בספריה ספקטרלית, הזז את הסמן למקום כלשהו בחלון הספקטרלי ולחץ פעמיים על לחצן העכבר הימני שתוצאות החיפוש בספריה יופיעו בחלון חדש. כדי להסיר תחילה את רעשי הרקע מקשת מעניינת, לחץ פעמיים על לחצן העכבר הימני בשיא המדובר ולאחר מכן לחץ על לחצן העכבר הימני באזור ללא פסגות מיד לפני שיא הריבית לחץ על לחצן ההפחתה ברצועת התפריט או בחר כרומטוגרמה לשורת התפריט ולאחר מכן הפחת ספקטרום מהתפריט הנפתח.ספקטרום מופחת יוצג בחלון התחתון של מסך ניתוח הנתונים ויציג מקף לצד נתוני הסריקה בכותרת החלון. בעקבות פרוטוקול זה, זיהינו באופן לא סופי סך של 32 תרכובות כימיות נדיפות מניתוח של 14 סימני ריח של איברי המין שפורסמו באופן ספונטני על נייר סינון על ידי למורים אדומי וולאנים והשווינו פרופילי ריח עם תכונות של האיתות תרכובות נדיפות המתרחשות באופן טבעי כגון פחמימנים, טרפנים, אלכוהול טורפין וקטונים היו נוכחים בתוך פרופילים אלה וכוללים את התרכובות שנמצאו בעבר לשמש הורמוני מין ורמזים לכושר במינים אחרים של בעלי חיים. התרכובות שזוהו באופן לא סופי מפורטות בטבלה הראשונה.כרומטוגרמות מייצגות אחת מבקר ואחת מסימן ריח לימה מוצגות באיור הראשון. מספרם ושפעם היחסי של הרכיבים נעו מדגם לדגימה על פני נושאי מחקר שונים. עם זאת, שש תרכובות שכותרתו A עד F על הכרומטוגרמה היו נוכחים בכל הדגימות.תרכובות אלה היו בהתאמה מתכופף לגובה לאי של E אחד paracrystal הקסטל שש paramentha שני שמונה לצבוע אחד שני אורן ארבעה ו pentodecane. התוצאות ממחקר זה הראו כי למורים אדומי וולאנים משתמשים בסימון שנשלח כדי להעביר מידע על מין וגיל נקבה ללא סימון איברי המין לשחק תפקיד בתקשורת מינית סוציו. תוצאה מייצגת נוספת בעקבות השימוש בפרוטוקול זה הייתה המחקר שלנו של פרסומת פוריות על ידי בבונים זית נקבה.זיהינו בסך הכל 74 תרכובות נדיפות מהניתוח של 395 דגימות ריח וגינאלי בבון נקבה. אלה כללו מגוון של תרכובות נדיפות ריח טבעי כגון קטונים, אלכוהול, אלדהידים, טרפנים, חומצות שומן נדיפות ופחמימנים. כרומטוגרמות טיפוסיות משמשות להשוואת דגימות ריח נרתיקי של טרול ריק ונקבות בבון מתקופות פוריות ולא פוריות מוצגות באיור 2.אנו בוחנים את היחסים בין פרופילי ריחות וגינאליים לבין קליטה מינית של בבונים נשיים. התוצאות שלנו הראו כי הכמות הכוללת של ריח הנרתיק שונה עם פוריות עולה כי ריח עשוי לשחק תפקיד איתות פוריות הבבון הנשי. מצאנו גם הבדלים בריח הנרתיק בין סוגי קבוצות, אך לא יכולנו להבחין בין ההשפעות של הרכב הקבוצה, חוסר ההגינות בגיל הנשי.זהו היתרונות המשולבים של הדגימה והשימוש ב- GCMS. אז באמצעות שטח הראש מוצק פאזה מיקרו החילוץ מאפשר מגוון רחב של דגימות שונות להיות מנותח באמצעות GCMS. אנחנו מסוגלים להפריד את הרכיבים של הסימונים המורכבים האלה ואז לזהות כל אחד מהרכיבים הבודדים האלה באמצעות ספקטרומטר המסה.ואז, אז כל הטכניקה המשולבת היא חזקה מאוד ונותנת לנו הרבה מידע על סימוני ריח אלה, אשר בעבר היה הרבה מיצוי הכנה מדגם נדרש כדי להיות מסוגל להשיג את התוצאות.

sampling-and-analysis-of-animal-scent-signals

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

במאמר זה וידאו, אנו מתארים שיטה חדשה המאפשרת בנייה של הדרגתיים odorant בגיאומטריות ויציב לשליטה. אנו בקצרה להמחיש כיצד הדרגתיים אלה יכולים לשמש מסך פגמים חוש הריח (תתרנות מלאה או חלקית) ו ללמוד תכונות מהותיות יותר של התנהגות chemotaxis.

ברזולוציה גבוהה מדידה של התנהגות ריח מונחה על הזחלים תסיסנית

יסוד, המאפיינים הייחודיים של המערכת עדיין מכרסם הריח הובילו מחקר הגוברת בקרב ביולוגים. הערכה פשוטה יחסית של תפקידה הוא צריך גם אז. כאן אנו מתארים בדיקות רגישות לאפיון של רגישות העכבר העדפה הריח ו.

בדיקה התנהגותית חוש הריח של העכבר למבוגרים

הגישה מינים השוואתי מאפשר מדעני מוח התנהגותיים לחקור הנוירוביולוגי גורמים שונים הקשורים התנהגויות מסוימות כאל מאפיין של הדגם בעל חיים מסוים. ניצול טבעי ההבדלים בהתנהגות בין מינים קרובים, טכניקה זו אינה דורשת טכניקות פולשניות כדי לתפעל את הביטוי של התנהגות.

באמצעות גישה המינים השוואתי לחקירת לנוירוביולוגיה התגובות של אבי האב

רמזי ריח לתווך התנהגויות רבות ושונות בחרקים, ולעתים קרובות הם תערובות מורכבות מורכבות מעשרות עד מאה תרכובות נדיפות. שימוש בגז כרומטוגרפיה עם הקלטה רבה ערוצית באונת מחושי החרקים, אנו מתארים שיטה לזיהוי של תרכובות ביו.

זיהוי נדיפים חוש ריח באמצעות קלטות כרומטוגרפיה-Multi-יחידת גז (GCMR) באונת מחושי החרקים

אנחנו מדגימים וריאציות של טכניקה רבת יחידת ההקלטה התאית לאפיין תגובות ריח מעורר בשלושת השלבים הראשונים של מסלול ההרחה חסר חוליות. טכניקות אלה יכולים בקלות להיות מותאמות לבחינת פעילות הרכב במערכות עצביות אחרות גם כן.

שיטות הקלטה בעל מספר יחידות לאפיין את הפעילות עצבית בארבה (<em&gt; Schistocerca אמריקנה</em&gt;) מעגלי ריח

אנו מתארים פרוטוקול לשימוש באנטנות חרקים בצורה של אלקטרואנטנוגרמות (EAGs) על רובוטים אוטונומיים. העיצוב הניסיוני שלנו מאפשר הקלטות יציבות תוך יום ופותר כתמי ריח בודדים עד 10 הרץ. היעילות של חיישני EAG לחיפושי ריח מודגמת בהנעת רובוט לעבר מקור ריח.

באמצעות חיישני Electroantennogram חרקים על אוטונומי רובוטים לחיפושי חוש הריח

עכברים לייצר רפרטואר multisyllabic מורכבים של vocalizations קולי (USVs). אלה USVs נמצאים בשימוש נרחב כמו readouts עבור הפרעות נוירופסיכיאטריות. פרוטוקול זה מתאר כמה מהנוהלים שלמדנו ופיתחנו כדי לעקב באופן עקבי, לאסוף ולנתח את התכונות האקוסטיות והתחביר של שירי העכבר.

Eliciting וניתוח זכר העכבר Ultrasonic ווקאליזציה (USV) שירים

פרוטוקול זה מתאר את השלבים עבור שימוש בתוכנה הרומן, SwarmSight, עבור מסגרת מעקב של עמדות אנטנה, חוטם חרקים מן האינטרנט המקובלת מצלמת וידאו באמצעות מחשבים קונבנציונלי. התוכנה בחינם, קוד פתוח מעבד מסגרות כ 120 פעמים מהר יותר מאשר בני אדם, מבצעת יותר דיוק אנושי.

SwarmSight: מעקב בזמן אמת של האנטנה חרקים תנועות רפלקס הרחבת חוטם באמצעות הכנה משותפת חומרה קונבנציונלי

מערכת החיקוי מבוקרת היא שיטה פשוטה, ניידת בשטח בעלות נמוכה של אספקת ריח לבדיקות ואימונים של ריח הריח. הוא בנוי של ריחן נשמר על חומר adsorbent והוא כלול בתוך שקית פולימר חדיר המאפשר שחרור מבוקר של אדי ריח לאורך זמן.

מערכות חמירה מבוקרות של ריח מחקה להכשרת ריח ובדיקות שטח

פרוטוקול זה חוקר את הקשר בין המוח להתנהגות בהיפוקמפוס CA1 בעכברים המנווטים בפלומת ריח. אנו מספקים פרוטוקול שלב אחר שלב, כולל ניתוח לגישה להדמיה של ההיפוקמפוס, אימון התנהגותי, הקלטה ועיבוד של המוח במיניסקופ GCaMP6f, ונתונים התנהגותיים לפענוח מיקום העכבר מפעילות עצבית ROI.

מיניסקופ מקליט אותות סידן בהיפוקמפוס של עכברים המנווטים בפלומת ריח

פרוטוקול זה קובע שיטות לחילוץ וכימות תגובות לפרומון המין הנדיף ב- C. elegans, ומספק כלים לחקר תקשורת כימית ומסלול ניווט.

מיצוי פרומון מין נדיף ובדיקת כימותרפיה ב- Caenorhabditis elegans

חקור שיטות מתקדמות לדגימה וניתוח של אותות ריח בעלי חיים באמצעות Headspace SPME ו-GC-MS. שיטות אלו מאפשרות זיהוי תרכובות נדיפות ומובילות להבנה מעמיקה של תקשורת כימית בבעלי חיים.

דגימה וניתוח של אותות ריח בעלי חיים

גלה סרטונים נוספים