Name: תסה תנוענות פלנרית כדי לאמוד את המאפיינים של מודולים ביולוגיים של מוצרים טבעיים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: למדו את שיטת מבחן מהירות התנועה של תולעי פלנריה להערכת השפעות ממריצות ונסיגה של סוכנים ביולוגיים על תנועת התולעים. שיטה זו מספקת נתוני התנהגות אמינים במחקר עצבי וביולוגיה התנהגותית.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחברים רוצים להכיר במשרד של קידום מוסדי, ואת קרן מוריסוויל המכללה למענק פרסום כדי לתמוך בעבודה זו, כמו גם את SUNY מוריסוויל קולג'יט מדע וטכנולוגיה כניסה התוכנית (CSTEP) על הסיוע המתמשך שלהם ותמיכה של מחקר לתואר ראשון ב SUNY מוריסוויל. ברצוננו גם להודות לסופיה הוטצ'נס על הערות מועילות על הטכניקה המתוארת.

1. גיבר פלנרי
<ol><li>השתמש בתכנון שנרכשו בחברת אספקה ביולוגית או שנתפסו בטבע במידת הצורך. התכנון המשמש בפרוטוקול זה הוא Dugesia tigrina, כפי שרשום ברשימת האספקה. מין זה מכונה גם ג'ירארדיה טיגרינה31. מינים ימיים אחרים מקובלים גםכן על 2,3. הערה: הפרוטוקול המתואר מיועד לבעלי חיים שנרכשו בחברת אספקה ביולוגית. מערכת ההסתה הזו לא נבדקה עם אנשים שנתפסו בטבע. עם זאת, אם נעשה שימוש בתכנון שנתפס בטבע, מומלץ לתרגל אותם למים המשמשים בניסויים, כמו גם לסביבת המעבדה לפחות שבוע לפני השימוש.</li>
	<li>עם ההגעה, מעבירים את התכנון למכלי אחסון מזון מפלסטיק המכילים מי מעיין נקיים ולשמור על המכסים פתוחים.</li>
	<li>שמור על תכנון בסביבה חשוכה.</li>
	<li>להאכיל את התכנון החדש נמסר לאחר 24-36 שעות בסביבה החדשה שלהם.</li>
	<li>אפשרו ללוכנים להסתגל למעבדה לפחות שבוע לפני הניסויים.</li>
	<li>להאכיל את התכנון בלוח זמנים קבוע פעמיים בשבוע.<ol>
<li>אפשרו לתכנון להאכיל את הליביטום על ביצים מבושלות אורגניות קצוצים או כבד בקר אורגני מעורבב במשך 1-2 שעות.</li>
		<li>מניחים את התכנון המוזנים במיכל נקי לאחר ההאכלה.<ol>
<li>הסירו את המים המלכלכים מהכנות.</li>
			<li>השתמש במכחול קטן שטוח בצבעי מים (מספר 3-6) כדי להעביר פסולת מזון ורפש דבקות במיכל מסביב planarians מגבת נייר.</li>
			<li>עם מי מעיין מתוקים ומערבולת עדינה או תסיסה, לנתק את פלנריים ולשפוך אותם לתוך מיכל נקי.</li>
			<li>ניתן להעביר את כל התכנון שנותר לדבוק במיכל באמצעות מכחול עגול בצבעי מים (מספר 3-6) או להעביר פיפטה עם משעמם רחב.</li>
			<li>תשמיד את מי ההעברה.</li>
			<li>כסה את התכנון עם מי מעיין נקיים.</li>
			<li>לאחר השעה 24 שעות, מוציאים את התכנון מכל פסולת מזון שגורשו על ידי העברתם למכל נקי כמתואר לעיל (שלבים 1.6.2.1-1.6.2.6).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>כדי לנקות מכולות וכלים המשמשים לאירוח פלנרי, אין להשתמש בסבון או בחומרי ניקוי. נקה פריטים אלה על ידי שטיפה היטב עם מים נקיים (מי ברז מקובלים) וייבושם במטלית נקייה או מגבת נייר.</li>
</ol>2. הכנת תכנון לניסויים
<ol><li>לאפשר לתכנון החדש להסתגל לסביבתם לפחות שבוע לפני הניסויים.</li>
	<li>תגווע ברעב במשך 5-10 ימים לפני הניסויים.</li>
	<li>לשנות את מי התרבות לפחות 1x במהלך תקופת הרעב.</li>
</ol>3. מהירות הקטר פלנרית (pLmV) מבחן: התנהגויות ממריצות
<ol><li>לפני הניסויים, ודאו שתכנון מורעב נוצר במלואו, עם ראש וזנב שלמים ופיגמנטים.</li>
	<li>הכן צלחת פטרי זכוכית או פלסטיק 10 ס"מ ומיכל מגורים למבחן pLmV לפני תחילת הניסוי.<ol>
<li>מניחים צלחת פטרי נקייה בקוטר 10 ס"מ לשימוש למבחן pLmV על נייר רשת טרום לא מופרך (עם ריבועים 0.5 ס"מ).</li>
		<li>הוסף 20 מ"ל של מי מעיין טהורים עבור פקדים, או מי מעיין המכילים את הריכוז המתאים של המוצר הטבעי נבדק, לצלחת פטרי בקוטר 10 ס"מ לשימוש למבחן pLmV.</li>
		<li>מקם מצלמה (למשל, טלפון סלולרי או מצלמה ברזולוציה גבוהה) מעל צלחת פטרי בקוטר 10 ס"מ כדי להקליט את התנועלת הפלנרית על נייר הרשת במהלך הניסוי. דוכן טבעת היא דרך נוחה למקם את המצלמה במרחק שיכול להקליט את כל התצוגה של 10 ס"מ צלחת פטרי וקווי רשת.</li>
		<li>הכן מיכל מגורים עם 5-10 מ"ל של מי מעיין טהורים (פקדים), או מי מעיין המכילים את הריכוז המתאים של המוצר הטבעי שנבחן. מיכל דומה בקבוקון מבריק או קטן 5 ס"מ צלחת פטרי מתאים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>השתמש במכחול קטן, נקי, שטוח או עגול בצבעי מים כדי להעביר בעדינות פלנרי מהמכל עם מי המעיין למכל המגורים, שיש לו 5-10 מ"ל של מי מעיין או מי מעיין טהורים המכילים את המוצר הטבעי שנבחן. הערה: בעת מניפולציה של תכנון עבור תסוואי pLmV, השתמש במכחול קטן, נקי, שטוח או עגול בצבעי מים (מספר 3-6). בעת הזזת פלנריים, יש להציב את המברשת מתחת לחיה כדי להרים אותה בעדינות. כדי להבטיח שהפלנריים לא ייפגעו בעת השימוש במברשת, אין לשכך את זיפים של המברשת מתחת לחיה. התפשטות מתוך הזיפים עלולה לפגוע בפלנרי אם הוא ייתפס בין הסיבים של המברשת. הערה: פיפטה העברה נשא רחב יכול לשמש גם להעברת planarian לתוך מיכל מגורים נקי ויבש.<ol>
<li>אם משתמשים בפיפטה, הסר עודף מים שהוזז עם התכנון ממכל המגורים באמצעות פיפטת ההעברה.</li>
		<li>בזהירות להוסיף את פתרון המגורים (כלומר, מי מעיין עבור פקדים או מי מעיין המכילים את ריכוז המוצר הטבעי נבדק) למכל המגורים המכיל את planarian.</li>
	</ol>
</li>
	<li>תקופות מגורים יהיו תלויות בדינמיקת הגירוי המוערכת עבור המוצר הטבעי שנבחן. זמן מגורים של 2 דקות הוכיח מקובל לזהות גירוי בעבודה זו1.</li>
	<li>לאחר תקופת המגורים של 2 דקות, השתמשו במכחול בצבעי מים כדי להעביר בעדינות את הפלנרי למרכז צלחת פטרי המוכנה ב-10 ס"מ לניסוי גירוי pLmV.</li>
	<li>הפעל את המצלמה כדי להקליט את התנועה של התכנון. שיא 10-11 דקות של וידאו.</li>
	<li>הכינו את מיכל המגורים ואת צלחת פטרי ב-10 ס"מ לניסוי pLmV עם פתרונות טריים לכל פלנרי.</li>
	<li>השתמש בפיפטות ייעודיות, כלים, מכולות ומברשות צבע עבור כל ריכוז ניסיוני של המוצר הטבעי שנבחן כדי למנוע חשיפה בשוגג של פלנריים לפתרון הלא נכון במהלך הניסויים.</li>
	<li>מכיוון שלכנים מציגים התנהגויות מלומדות, יש להשתמש בכל תכנון (שליטה או בדיקה) רקפעם אחת 21,22.</li>
</ol>4. מהירות הקטר פלנרית (pLmV) מבחן: התנהגויות גמילה
<ol><li>לפני הניסויים, ודאו שתכנון מורעב נוצר במלואו, עם ראש וזנב שלמים ופיגמנטים.</li>
	<li>הכינו צלחת פטרי ב-10 ס"מ (זכוכית או פלסטיק) לניסוי pLmV, צלחת פטרי ב-5 ס"מ (זכוכית או פלסטיק) לשטיפה של הפלנרית בעקבות המגורים, ומיכל מגורים לפני תחילת הניסוי.<ol>
<li>מניחים צלחת פטרי נקייה בקוטר 10 ס"מ לשימוש לניסוי pLmV על נייר רשת עם 0.5 ס"מ מרובעים).</li>
		<li>הוסף 20 מ"ל של מי מעיין טהורים לצלחת פטרי בקוטר 10 ס"מ שישמש לניסוי pLmV.</li>
		<li>מקם מצלמה מעל צלחת פטרי בקוטר 10 ס"מ מוכנה כמו בשלב 3.2.3 כדי להקליט את התניתות הפלנרית מעל נייר הרשת במהלך הניסוי.</li>
		<li>הכן את מיכל השטיפה הפלנרי על ידי הוספת 5 מ"ל של מי מעיין בלבד לצלחת פטרי 5 ס"מ.</li>
		<li>הכן מיכל מגורים עם 5-10 מ"ל של מי מעיין טהורים (פקדים) או מי מעיין המכילים את המוצר הטבעי שנבחן. מיכל הדומה למבען מבריק או לצלחת פטרי קטנה בגודל 5 ס"מ (זכוכית או פלסטיק) מתאים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>השתמש במכחול קטן, נקי, שטוח או עגול בצבעי מים כדי להעביר פלנרי מי מעיין למכל המגורים המוכן בעל 5-10 מ"ל של מי מעיין טהורים (פקדים) או מי מעיין המכילים את המוצר הטבעי שנבחן. מעבירים בעדינות את החיה מהמכל למכולה. ודא שהתכנון אינו פגום על-ידי המברשת. הערה: בעת מניפולציה של תכנון עבור תסוואי pLmV, השתמש במכחול קטן, נקי, שטוח או עגול בצבעי מים (מספר 3-6). בעת הזזת פלנריים, יש להציב את המברשת מתחת לחיה כדי להרים אותה בעדינות. כדי להבטיח שהפלנריים לא ייפגעו בעת השימוש במברשת, אין לשכך את זיפים של המברשת מתחת לחיה. התפשטות מתוך הזיפים עלולה לפגוע בפלנרי אם הוא ייתפס בין הסיבים של המברשת. הערה: פיפטה העברה נשא רחב יכול לשמש גם כדי להעביר את planarian לתוך מיכל מגורים נקי ויבש.<ol>
<li>אם משתמשים בפיפטה, יש להסיר עודפי מים עם התכנון ממכל המגורים באמצעות פיפטת ההעברה.</li>
		<li>בזהירות להוסיף את פתרון המגורים (כלומר, מי מעיין טהורים עבור פקדים או מי מעיין המכילים את המוצר הטבעי נבדק) למכל המגורים המכיל את planarian.</li>
	</ol>
</li>
	<li>תקופות מגורים לנסיגה יהיו תלויות בדינמיקת הגירוי המוערכת עבור המוצר הטבעי שנבחן; 2-5 דקות הוכיחו מספיק.</li>
	<li>לאחר תקופת ההתייזמן השתמשו במכחול בצבעי מים כדי להעביר בעדינות את הפלנרי לצלחת פטרי מוכנה ב-5 ס"מ המכילה מי מעיין כדי לשטוף כל מוצר טבעי ממכל המגורים. ודא שהתכנון אינו פגום על-ידי המברשת.</li>
	<li>העבר מיד את התכנון למרכז צלחת פטרי מוכנה ב-10 ס"מ המכילה מי מעיין לניסוי הנסיגה של ה-pLmV. ודא שהתכנון אינו פגום על-ידי המברשת.</li>
	<li>הפעל את המצלמה כדי להקליט את התנועה של התכנון. שיא 10-11 דקות של וידאו.</li>
	<li>הכינו את מיכל המגורים, מיכל השטיפה וצלחת פטרי ב-10 ס"מ לניסוי pLmV עם פתרונות טריים לכל פלנרי.</li>
	<li>השתמש בפיפטות ייעודיות, כלים, מכולות ומברשות צבע עבור כל ריכוז ניסיוני של המוצר הטבעי שנבחן כדי למנוע חשיפה בשוגג של פלנריים לפתרון הלא נכון במהלך הניסויים.</li>
	<li>מכיוון שלכנים מציגים התנהגויות מלומדות, השתמשו בכל תכנון (שליטה אובדיקה) רק פעם אחת 26,27.</li>
</ol>5. ניתוח נתונים
<ol><li>הכן טבלת איסוף נתונים כדי לתעד את אופן הפעולה ואת התנועבתיות של תיכנותים כאשר מספר קווי הרשת חצו עבור כל דקה במהלך הפעלת pLmV. הטבלה אמורה לאפשר את תיעד גם מספר הקווים המצטבר לדקה שחצה התכנון. כלול שורות עבור הערות וטבלת הגדרות כדי לעיין בהתנהגויות במהלך תקופת הניסוי, כגון 'לשוטט' ו'עצור' (ראה דיון).</li>
	<li>באמצעות הווידאו, ספור את מספר קווי הרשת המלאים שחצו התכנון לדקה למשך 10 דקות, והקליט מספר זה בטבלת הנתונים. התנהגות פלנרית טיפוסית מורכבת ממהירות רציפה, תנועה אופקית מכוונת קדימה, עם פניות תקופתיות וללא עצירות.<ol>
<li>התחילו לתזמן את הניסוי בנקודה שהפלנרית ירדה מהמכחול ששימש להעברתו לצלחת פטרי ב-10 ס"מ. הקלט את זמן ההתחלה הזה.</li>
		<li>כדי לקבוע מתי החיה חוצה ריבוע רשת מלא, התמקד בראש וציון קו אחד כאשר הראש חוצה באופן מלא ריבוע.</li>
		<li>כדי להבקיע רשת מלאה כאשר התולעת נעה סביב קצה הצלחת, דמיין מרחק של 0.5 ס"מ על-ידי התייחסות אל הקווים כשהם מתרחקים משוליים של הצלחת. אם התכנון חוצה את הפינה של תיבה, עיין בקו השני חצה כדי להבקיע קו רשת אחד. שוב, להתמקד בראש כדי להפוך את ההחלטות האלה.</li>
		<li>הפסק את הווידאו לאחר כל דקה כדי להקליט את הנתונים.</li>
		<li>בעת הפעלה מחדש של הווידאו כדי לספור את הדקה הבאה, אם ראש התולעת היה בין קווי רשת כאשר הווידאו הופסק, להקליט את הקו הראשון חצה כתיבה מלאה.</li>
		<li>ציון מספר קווי הרשת חצו במשך 10 דקות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>אם בעל החיים מפסיק לנוע במהלך בדיקת pLmV ולא חוצה עוד קווי רשת במהלך זמן ההקלטה של 10 דקות, לתעד את ההתנהגות של planarian בתרשים התנהגותי (למשל, 'לשוטט' או 'להפסיק'). בעלי חיים המפסיקים את המסלול קדימה שלהם במהלך ה-pLmV assay במקום יש לשים לב והנתונים המוצגים כתדירות של המספר הכולל של בעלי חיים שנחשפו לריכוז רבגנט זה. התנהגות מפותלת או עוויתות (המכונה התנהגות C) מניעת כל תנועה קדימה במהלך תקופת המגורים מציין כי הריכוז של המוצר הטבעי אינו מתאים לשימוש ב- pLmV assay כי הודעה pLmV הוא מבוסס תנועתיות. ניתן לנתח התנהגויות מסוג C באמצעות ניתוח מסוג אחר (ראה דיון).</li>
	<li>במידת האפשר, בדוק ריכוזים ניסיוניים מרובים של המוצר הטבעי באמצעות לפחות 9-12 תולעים בימים שונים ובזמנים שונים של היום אם לקבוע את ההשפעה הכוללת של reagent על פיזיולוגיה פלנרית. עם זאת, אם החוקרים מנסים להפחית את השונות הנגרמת על ידי היממה, ניתן לערוך ניסויים עם תאורה קבועה בשעה מוגדרת ביום באמצעות תולעים המתורבבות עם מחזורי אור/כהה מתוזמנות וקביע זמני האכלה. יש לפחות שני ניסויים מעורבים בפרוייקט כדי לאפשר את האפשרות שיש אחד נתוני רשומה בודדים, בעוד הפרט השני סופר את קווי הרשת 'עיוור' לתנאים המשמשים לאיסוף נתונים. העובדה שאנשים שונים מעורבים באיסוף נתונים, כמו גם חישובים וניתוחים סטטיסטיים, מפחיתה גם הטיה אפשרית.</li>
	<li>חשב ספירות קווי רשת עבור כל ריכוז מוצר טבעי בכל יום ביחס לספירת בקרה עבור כל דקה, כך שניתן יהיה לשלב נתונים מימים, זמנים וניסויים שונים. ניתן להשתמש בממוצע בנתונים אלה ולאחר מכן לנתח אותם באמצעות מבחני T של סטודנט. ניתן להעריך ערכי P עבור כל בדיקה בדקה בהשוואה לבקרה ובין ריכוזי reagent. הערכות ANOVA באמצעות ערכות נתונים הנגזרות מריכוזים ניסיוניים שונים מספקות שיטת ניתוח נוספת.</li>
</ol>

<ol><li>Moustakas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guarana+provides+additional+stimulation+over+caffeine+alone+in+the+planarian+model%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Guarana provides additional stimulation over caffeine alone in the planarian model.</a> PloS One. 10 (4), 0123310(2015).</li>
<li>Raffa, R. B., Valdez, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cocaine+withdrawal+in+Planaria%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Cocaine withdrawal in Planaria.</a> European Journal of Pharmacology. 430 (1), 143-145 (2001).</li>
<li>Raffa, R. B., Holland, L. J., Schulingkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+dopamine+D2+antagonist+activity+using+invertebrate+%28Planaria%29+locomotion+as+a+functional+endpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of dopamine D2 antagonist activity using invertebrate (Planaria) locomotion as a functional endpoint.</a> Journal of Pharmacology and Toxicological Methods. 45 (3), 223-226 (2001).</li>
<li>Thumé, I. S., Frizzo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sertraline+induces+toxicity+and+behavioral+alternations+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Research+International%22%5BJournal%5D)">Sertraline induces toxicity and behavioral alternations in planarians.</a> Biomedical Research International. 2017, 5792621(2017).</li>
<li>Aggarwal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+novel+allosteric+modulator+of+the+human+dopamine+transporter%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chemical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification of a novel allosteric modulator of the human dopamine transporter.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (8), 3718-3730 (2019).</li>
<li>Zhang, C., Tallarida, C. S., Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sucrose+produces+withdrawal+and+dompamine-sensitive+reinforcing+effects+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Sucrose produces withdrawal and dompamine-sensitive reinforcing effects in planarians.</a> Physiology & Behavior. 0, 8-13 (2013).</li>
<li>Zewde, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PLDT+%28planarian+light%2Fdark+test%29%3A+an+invertebrate+assay+to+quantify+defensive+responding+and+study+anxiety-like+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">PLDT (planarian light/dark test): an invertebrate assay to quantify defensive responding and study anxiety-like effects.</a> Journal of Neuroscience Methods. 293, 284-288 (2018).</li>
<li>Risse, B., Otto, N., Berh, D., Jiang, X., Klämbt, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIM+Imaging+and+FIMtrack%3A+two+new+tools+allowing+high-throughput+and+cost+effective+locomotion+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">FIM Imaging and FIMtrack: two new tools allowing high-throughput and cost effective locomotion analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52207(2014).</li>
<li>Inoue, T., Hoshino, H., Yamashita, T., Shimoyama, S., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planarian+shows+decision-making+behavior+in+response+to+multiple+stimuli+by+integrative+brain+function%5BTitle%5D)+AND+%22Zoological+Letters%22%5BJournal%5D)">Planarian shows decision-making behavior in response to multiple stimuli by integrative brain function.</a> Zoological Letters. 1, 7(2015).</li>
<li>Hastrom, D., Cochet-Escartin, O., Zhang, S., Khuu, C., Collins, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freshwater+planarians+as+an+alternative+animal+model+for+neurotoxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Freshwater planarians as an alternative animal model for neurotoxicology.</a> Toxicological Sciences. 147 (1), 270-285 (2015).</li>
<li>Risse, B., Berh, D., Otto, N., Klämbt, C., Jiang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIMtrack%3A+an+open+source+tracking+and+locomotion+analysis+software+for+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One+Computational+Biology%22%5BJournal%5D)">FIMtrack: an open source tracking and locomotion analysis software for small animals.</a> PLoS One Computational Biology. 13 (5), 100553(2017).</li>
<li>Pagán, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planaria%3A+an+animal+model+that+integrates+development%2C+regeneration+and+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Planaria: an animal model that integrates development, regeneration and pharmacology.</a> International Journal of Developmental Biology. 61, 519-529 (2017).</li>
<li>Palladini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pharmacological+study+of+cocaine+activity+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology%22%5BJournal%5D)">A pharmacological study of cocaine activity in planaria.</a> Comparative Biochemistry and Physiology. 115 (1), 41-45 (1996).</li>
<li>Buttarelli, F. R., Pellicano, C., Pontieri, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropharmacology+and+behavior+in+planarians%3A+translation+to+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Biochemistry+and+Physiology+Part+C.+Toxicology+%26+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Neuropharmacology and behavior in planarians: translation to mammals.</a> Comparative Biochemistry and Physiology Part C. Toxicology & Pharmacology. 147 (4), 399-408 (2008).</li>
<li>Nishimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+glutamic+acid+decarboxylase+gene+and+distribution+of+GABAergeric+nervous+system+in+the+planarian+Dugesia+japonica%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Identification of glutamic acid decarboxylase gene and distribution of GABAergeric nervous system in the planarian Dugesia japonica.</a> Neuroscience. 153 (4), 1103-1114 (2008).</li>
<li>Raffa, R. B., Rawls, S. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRaffa%2C+RB+%22A+model+for+drug+action+and+abuse%22">A model for drug action and abuse</a>. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2008).</li>
<li>Hall, F., Morita, M., Best, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((neoplastic+transformation+in+the+planarian%3A+I+cocarcinogenesis+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">neoplastic transformation in the planarian: I cocarcinogenesis and histopathology.</a> The Journal of Experimental Zoology. 240 (2), 211-227 (1986).</li>
<li>Voura, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Planarians+as+models+of+cadmium-induced+neoplasia+provide+measurable+benchmarks+for+mechanistic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology+and+Environmental+Safety%22%5BJournal%5D)">Planarians as models of cadmium-induced neoplasia provide measurable benchmarks for mechanistic studies.</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 142, 544-554 (2017).</li>
<li>Van Roten, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+carcinogenic+trigger+to+study+the+function+of+tumor+suppressor+genes+in+Schmedtea+mediterranea%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+and+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">A carcinogenic trigger to study the function of tumor suppressor genes in Schmedtea mediterranea.</a> Disease Models and Mechanisms. 11 (9), 032573(2018).</li>
<li>Mason, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemo-klino-kinesis+in+planarian+food+location%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Chemo-klino-kinesis in planarian food location.</a> Animal Behaviour. 23 (2), 460-469 (1975).</li>
<li>Van Huizen, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weak+magnetic+fields+alter+stem+cell-mediated+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Weak magnetic fields alter stem cell-mediated growth.</a> Science Advances. 5 (1), 7201(2019).</li>
<li>Brown, H. M., Ogden, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+electrical+response+of+the+planarian+ocellus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Physiology%22%5BJournal%5D)">The electrical response of the planarian ocellus.</a> Journal of General Physiology. 51 (2), 255-260 (1968).</li>
<li>Inoue, T., Yamashita, T., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thermosensory+signaling+by+TRPM+is+processed+by+brain+serotonergic+neurons+to+produce+planarian+thermotaxis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Thermosensory signaling by TRPM is processed by brain serotonergic neurons to produce planarian thermotaxis.</a> The Journal of Neuroscience. 34 (47), 15701-15714 (2014).</li>
<li>Byrne, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+ethanol+on+negative+phototaxis+and+motility+in+brown+planarians+%28Dugesia+tigrina%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of ethanol on negative phototaxis and motility in brown planarians (Dugesia tigrina).</a> Neuroscience Letters. 685, 102-108 (2018).</li>
<li>de Sousa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomic+analysis+of+planarians+under+simulated+microgravity+or+8g+demonstrates+that+alteration+of+gravity+induces+genomic+and+cellular+alterations+that+could+facilitate+tumoral+transformation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Transcriptomic analysis of planarians under simulated microgravity or 8g demonstrates that alteration of gravity induces genomic and cellular alterations that could facilitate tumoral transformation.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (3), 720(2019).</li>
<li>Best, J. B., Rubinstein, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maze+learning+and+associated+behavior+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+and+Physiological+Psychology%22%5BJournal%5D)">Maze learning and associated behavior in planaria.</a> Journal of Comparative and Physiological Psychology. 55, 560-566 (1962).</li>
<li>Shomrat, T., Levin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+automated+training+paradigm+reveals+long-term+memory+in+planarians+and+its+persistence+through+head+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">An automated training paradigm reveals long-term memory in planarians and its persistence through head regeneration.</a> The Journal Experimental Biology. 216, Pt 20 3799-3810 (2013).</li>
<li>Robarts-Galbraith, R. H., Newmark, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+organ+trail%3A+insights+into+organ+regeneration+in+the+planarian%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Genetics+%26+Development%22%5BJournal%5D)">On the organ trail: insights into organ regeneration in the planarian.</a> Current Opinion in Genetics & Development. 32, 37-46 (2015).</li>
<li>Ivancovic, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+systems+for+regeneration%3A+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Model systems for regeneration: planarians.</a> Development. 146 (17), 167684(2019).</li>
<li>Herath, S., Lobo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-inhibition+of+Turing+patterns+explains+the+self-organized+regulatory+mechanism+of+planarian+fission%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Theoretical+Biology%22%5BJournal%5D)">Cross-inhibition of Turing patterns explains the self-organized regulatory mechanism of planarian fission.</a> Journal of Theoretical Biology. 485, 110042(2019).</li>
<li>Animal Diversity. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Dugesia_tigrina/">http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Dugesia_tigrina/</a> (2019).</li>
<li>Itoh, M. T., Shinozawa, T., Sumi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms+of+melatonin-synthesizing+enzyme+activities+and+melatonin+levels+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms of melatonin-synthesizing enzyme activities and melatonin levels in planarians.</a> Brain Research. 830 (1), 165-173 (1999).</li>
<li>Itoh, M. T., Igarashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythm+of+serotonin+levels+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreports%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythm of serotonin levels in planarians.</a> Neuroreports. 11 (3), 473-476 (2000).</li>
<li>Hinrichsen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photosensitivity+and+motility+in+planarian+Schmedtea+mediterranea+vary+diurnally%5BTitle%5D)+AND+%22Chronobiology+International%22%5BJournal%5D)">Photosensitivity and motility in planarian Schmedtea mediterranea vary diurnally.</a> Chronobiology International. 36 (12), 1789-1793 (2019).</li>
<li>Raffa, R. B., Desai, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+and+quantification+of+cocaine+withdrawal+signs+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Description and quantification of cocaine withdrawal signs in planaria.</a> Brain Research. 1032 (1-2), 200-202 (2005).</li>
<li>Pagán, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cembranoid+from+tobacco+prevents+the+expression+of+induced+withdrawal+behavior+in+planarian+worms%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">A cembranoid from tobacco prevents the expression of induced withdrawal behavior in planarian worms.</a> European Journal of Pharmacology. 615 (1-3), 118-124 (2009).</li>
<li>Rawls, S. M., Patil, T., Yuvasheva, E., Raffa, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+evidence+that+drugs+of+abuse+produce+behavioral+sensitization+and+cross-sensitization+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">First evidence that drugs of abuse produce behavioral sensitization and cross-sensitization in planarians.</a> Behavioural Pharmacology. 21 (4), 301-313 (2010).</li>
<li>Venturini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pharmacological+study+of+dopaminergic+receptors+in+planaria%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">A pharmacological study of dopaminergic receptors in planaria.</a> Neuropharmacology. 28 (12), 1377-1382 (1989).</li>
<li>Ouyang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+effects+of+Spenda%2C+Equal+and+sucrose%3A+Clues+from+planarians+on+sweeteners%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Behavioral effects of Spenda, Equal and sucrose: Clues from planarians on sweeteners.</a> Neuroscience Letters. 636, 213-217 (2017).</li>
<li>Pagán, O. R., Montgomery, E., Deats, S., Bach, D., Baker, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+nicotine-induced%2C+curare-sensitive%2C+behavior+in+planarians%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochemical+Research%22%5BJournal%5D)">Evidence of nicotine-induced, curare-sensitive, behavior in planarians.</a> Neurochemical Research. 40 (10), 2087-2090 (2015).</li>
<li>Shibata, N., Agata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNA+interference+in+planarians%3A+feeding+and+injection+of+synthetic+dsRNA%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">RNA interference in planarians: feeding and injection of synthetic dsRNA.</a> Methods in Molecular Biology. 1774, 455-466 (2018).</li>
<li>Pagán, O. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+cocaine-induced+planarian+behavior+by+parthenolide+and+related+sesquiterpene+lactones%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+Biochemistry+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Reversal of cocaine-induced planarian behavior by parthenolide and related sesquiterpene lactones.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 89 (2), 160-170 (2008).</li>
<li>Vouga, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereochemistry+and+neuropharmacology+of+a+%27bath+salt%27+cathinone%3A+S-enantiomer+of+mephedrone+reduces+cocaine-induced+reward+and+withdrawal+in+invertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Stereochemistry and neuropharmacology of a 'bath salt' cathinone: S-enantiomer of mephedrone reduces cocaine-induced reward and withdrawal in invertebrates.</a> Neuropharmacology. 91, 109-116 (2015).</li>
<li>Chan, J. D., Marchant, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+and+functional+genetic+assays+to+manipulate+regeneration+of+the+planarian+Dugesia+japonica%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Pharmacological and functional genetic assays to manipulate regeneration of the planarian Dugesia japonica.</a> Journal of Visualized Experiments. (54), e3058(2011).</li>
</ol>

לסופרים אין מה לחשוף.

תנועתיות פלנרית פשוטה ונגישה מתוארת כדי לקבוע את ההשפעות ממריצות ונסיגה של מוצרים טבעיים. כמודל התנהגותי יש צורך בפרוטוקולים מחמירים לניקוד תנועה והגדרות ברורות של התנהגויות כלשהן כדי לתמלן תצפיות בין ניסויים שונים. הרעיונות שהוצגו מציעים הדגמה של איך זה יכול להיות מושגת. כל מעבדה המשתמשת בפרוטוקול זה צריכה להתאים את המידע המוצג כך שיתאים להשפעות של המוצר המסוים שנבחן. מומלץ להגדיר בזהירות את סביבת העבודה כדי להבטיח בדיקות יכול להיעשות בתנאים עקביים על ידי כל חוקר המעורב במחקר (איור 1). ניתן...

הפרוטוקול המתואר משתמש בתנוענות פלנרית כדי לספק אמצעי להערכת ההשפעות של מודולים ביולוגיים של חומרים טבעיים. זה הותאם במיוחד כדי לקבוע אם חומרים אלה מתפקדים כממריצים, ואם הם היו קשורים אז עם התנהגות גמילהמדידה 1. תסרוקת זו, המכונה מבחן מהירות הקטר התפלנית (pLmV), שימשה לראשונה לבדיקה של סוכנים פרמקולוגייםידועים 2,3. היישום של תנוענות פלנרית זו מבוססת תנועלת גדל מאז בפופולריות, אומץ על ידי מעבדות שונות המעוניינות בחומרים אחרים מאשר מוצרים טבעיים4,,5. לצורך כך, פלנרי ממוקם בצלחת פטרי המכילה מי מעיין או מי מעיין המכילים אפנן ביולוגי מומס. מכיוון שהמנה עצמה מונחת על נייר גרף, ניתן להשתמש במספר קווי הרשת שחצו בעלי החיים עם הזמן במהלך התנועה על המכל כדי לקבוע את קצב התנועה בכל מצב. מבחן האור/כהה, המכונה גם מבחן העדפת מקום מותנה (CPP), הוא וריאציה נוספת על הנושא של ניטור תנוניות פלנרית, ומעריך כמה מהר בעלי החיים מגיבים ונודדים לסביבה חשוכה6,,7. ניתן לנתח מעקב וידאו אחר תנועות תכנון באמצעות תוכניות מחשב ומרכז מסה (COM) מעקבאחר 8,9,,10,11.
שימוש בתכנון כמודל בעלי חיים עבור מחקרים כאלה מציע מספר יתרונות על בעלי חיים אחרים בכך שהנסוי יכול בקלות לשלוט בסביבת ה-assay. באופן ספציפי, להרעיב את התכנון לפני ניסויים יכול למנוע את חשיפתם לחומרים תזונתיים או תרופתיים אחרים שאחרת עלולים לבלבל את התוצאות, ואת biomodulator ספציפי תחת חקירה ניתן להציג את planarians פשוט על ידי הוספתו ישירות למים התרבות, ובכך לתקנן את החשיפה. מאז planarians יש מערכת העצבים נוירוטרנסמיטורים המזכירים בעלי חיים 'בסדר גבוה', הפיזיולוגיה ותגובות ניסיוניות של בעלי חיים אלה לגירויים עצביים שריריים נחשבים רלוונטיים ביולוגית אורגניזמים אחרים12,13,14,15,16. כמו כן, מכיוון שהתכננים זולים יחסית וישירים לתחזוקה במעבדה, הם מציעים מודל ביולוגי נגיש לחוקרים רבים.
כחיה ניסיונית, התכנון מתאים למגוון רחב של מחקרים. לדוגמה, הקבוצה שלנו, כמו גם חוקרים אחרים להשתמש planarians כדי ללמודגידולים 17,18,19. Planarians גם להפגין שורה של התנהגויות תגובה כימי, תרמי, כוח הכבידה, חשמל, תמונה, וגירויים מגנטיים שיצרו את הבסיס של מערכות אסיי אחרות. חלק מתופעות אלה שימשו ללימוד למידה וזיכרון בבעלי חייםאלה 20,21,22,23,,24,,25,26,27., השימוש העיקרי במודל התכנון בספרות כיום מתמקד בפעילותם של תאי גזע פלוריפוטנטיים פלוריים, הנקראים neoblasts,ותפקידם בהתחדשות 28,29,30. לפיכך, אימוץ המודל המתואר כאן מאפשר מחקר נוסף באמצעות תחודות אחרות המבוססות על תכנון כדי לספק הבנה רחבה יותר של האופן שבו מוצרים טבעיים ובואפנונים אחרים משפיעים על האורגניזם.

<table><tbody><tr><td>מים מינרליים - 1 גל.</td><td>פולין מעיין</td><td>N/A</td><td>מי מעיין לגידול פלנרי ולהכנת פתרונות</td></tr><tr><td>Brown Planaria (Dugesia tigrina)</td><td>חברת האספקה הביולוגית של קרולינה</td><td>132954</td><td>Brown planaria living (מינים אחרים מקובלים)</td></tr><tr><td>מכחול שטוח</td><td>Royal Crafter's Choice</td><td>9159</td><td>מברשות צבע שטוחות בצבעי מים לניקוי מיכלי תרבית פלנרית</td></tr><tr><td>צלחת פטרי מזכוכית - 10 ס"מ</td><td>קימקס</td><td>N/A</td><td>קוטר 10 ס"מ (זכוכית) צלחות פטרי לבדיקת pLmV</td></tr><tr><td>צלחת פטרי זכוכית - 5 ס"מ</td><td>Kimax</td><td>N / A</td><td>5 ס"מ וצלחות פטרי לשטיפת פלנרים במהלך ניסויי גמילה ולהרגלה ממריצה</td></tr><tr><td>נייר רשת</td><td>כל</td><td>N/A</td><td>נייר רשת סטנדרטי 0.5 ס"מ לבדיקת pLmV</td></tr><tr><td>iPEVO Visualizer (תוכנה)</td> <td>iPEVO</td><td>https://www.ipevo.com/software/visualizer</td><td>תוכנת מצלמת מסמכים לצילום והקלטה</td></tr> של <tr><td>וידאו סט כלי מתכת עם מעמד תמיכה וטבעת רטרט</td><td>כל</td><td>מעמד</td><td>טבעת מעבדה כימיה סטנדרטי להחזקת מצלמת טלפון סלולרי אם נעשה בו שימוש</td></tr><tr><td>ביצה אורגנית</td><td>כל</td><td>N/A</td><td>ביצה אורגנית או כבד בקר להאכלת פלנרינים</td></tr><tr><td>בקבוק פוליקרבונט עם מכסה מוברג - 10 מ"ל</td><td>בקבוקוני פלסטיק של בקמן</td><td>N/A</td><td>להכיל נפחים של 5 עד 10 מ"ל להרגל ממריץ</td></tr><tr><td>מיכל אחסון עגול - 10 ס"מ</td><td>Ziploc</td><td>N/A</td><td>10 ס"מ מיכלי אחסון מזון עגולים לכ-90 פלנרים או פחות</td></tr><tr><td>מברשת צבע מים עגולה</td><td>LOEW-Cornell</td><td>N/A</td><td>מברשות צבע צבעי מים עגולות קטנות (מספרים 3 עד 6) -</td></tr><tr><td>פיפטת העברה</td> רכה <td>כל</td><td>N/A</td><td>פיפטות העברת פלסטיק עם קדח רחב (5 מ"ל) להזזת פלנרים מצלמת</td></tr><tr><td>מסמכי USB</td><td>iPEVO</td><td>מצלמת מסמכים CDVU-06IP</td><td>(או מצלמה אחרת או מצלמת טלפון סלולרי)</td></tr></tbody></table>

תסה תנוענות פלנרית כדי לאמוד את המאפיינים של מודולים ביולוגיים של מוצרים טבעיים

A Planarian Motility Assay to Gauge the Biomodulating Properties of Natural Products

אמצעי פשוט, נשלט של שימוש פלנרי שאינו טפילי, Dugesia tigrina, תולעת שטוחה מימית חיים חופשיים, כדי לחקור את תכונות ממריץ ונסיגה של מוצרים טבעיים מתואר. מחקרים ניסיוניים המרוויחים מהיבטים ייחודיים של פיזיולוגיה פלנרית הוחלו על מחקרים על ריפוי פצעים, התחדשות ותוסס גידולים. בנוסף, מכיוון שהפלנריים מפגינים רגישות למגוון גירויים סביבתיים ומסוגלים ללמוד ולפתח תגובות מותנות, ניתן להשתמש בהם במחקרים התנהגותיים הבוחנים למידה וזיכרון. Planarians יש סימטריה דו-צדדית בסיסית ומערכת עצבים מרכזית המשתמשת במערכות מוליך עצבי הניתן ללימודים הבוחנים את ההשפעות של ביואפנולטורים עצביים שריריים. כתוצאה מכך, מערכות ניסיוניות ניטור תנועה פלנרית ותנועתיות פותחו כדי לבחון התמכרות וחומרים גמילה. מכיוון שתנועתיות פלנרית מציעה את הפוטנציאל של מערכת תנועתית רגישה, מתוקנה בקלות כדי לפקח על ההשפעה של גירויים, מבחן מהירות הקטר התכנון (pLmV) הותאם כדי לפקח על התנהגויות גירוי ונסיגה על ידי planarians באמצעות קביעת מספר קווי הרשת חצו בעלי החיים עם הזמן. כאן, הטכניקה והיישום שלה מדגימים ומוסברים.

יש להשלים את המעבדה ואת הכנת סביבת העבודה להפעלת ערך ה-pLmV לפני תחילת הניסויים. זה כולל את הכנת מיכל המגורים, לשטוף את מיכל במידת הצורך (לניסועי גמילה), צלחת פטרי על נייר רשת למינציה, ומצלמה ממוקמת כראוי(איור 1). לאחר כל קטעי הווידאו נלקחים, מומלץ להשתמש גליון נתונים משותף כדי לתקנן איסוף נתונים ומצגת בין חוקרים (איור 2 ודמות 2 תוספת).
המצלמה להגדיר צריך לאפשר תצוגה ברורה של planarian ואת נייר הרשת כדי לאפשר הערכה מ...

תנועתיות פלנרית משמשת כדי לאמוד את תכונות ממריצים ונסיגה של מוצרים טבעיים בהשוואה לתנועה של בעלי החיים במעיין בלבד.

A straightforward, controllable means of using the non-parasitic planarian, Dugesia tigrina, a free-living aquatic flatworm, to study the stimulant and ...

מבחן מהירות לוקומוטור Planarian הוא אמצעי להערכת במהירות השפעות גמילה ממריצות ו אפשריות עבור מגוון רחב של סוכני שינוי ביולוגיים שעשויים להשפיע על תנועתיות. מאמר זה נשלט בקלות ומספק שיטה פשוטה ונגישה ליצירת נתונים התנהגותיים אמינים אפילו בהגדרות המחקר הבסיסיות ביותר. מאז מערכת העצבים הפלנרית יש מוח בסיסי ריכוזי, סימטריה דו-צדדית ומערכות נוירוטרנסמיטר אנלוגי, מחקרים התנהגותיים באמצעות אורגניזמים אלה מציעים תובנות פרה-קליניות לתגובות חוליות אפשריות.ניסויים יכולים להיות מושפעים עוד יותר על ידי משני מסלול פיזיולוגיים, תרופות או אפילו מתכננים מהונדסים גנטית כדי לספק תובנה על המנגנונים הביולוגיים הקשורים. חשוב שהמל"ל יהיה כך שההעברות בין המכולות לא ידגישו אותן ויתקננו את עקומות קו הרשת בין חברי המעבדה. הדרך הטובה ביותר להשיג תוצאות עקביות מניסוי מאמר התנהגות זה, היא על ידי לראות איך משתמשים מנוסים ביצעו אותם.לאחר הקמת תרבות פלנרית, להאכיל את התולעים ad libitum על לוח זמנים קבוע פעמיים בשבוע של ביצים מבושלות אורגניות קצוצות או כבד בקר אורגני מעורבב במשך שעה עד שעתיים. לאחר האכלה, להסיר את כל המים מלוכלכים מן המיכל ולהשתמש מברשת צבע בצבע מים שטוח להעביר את כל פסולת מזון רפש דבק במיכל למגבת נייר. השתמשו מי מעיין מתוקים ומערבולות עדינות או תסיסה כדי לנתק את המתכננים ולהפוך את התולעים למיכל נק

a-planarian-motility-assay-to-gauge-biomodulating-properties-natural

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

מודל אטרקטיבי עבור הלומדים תא גזע בידול בתוך החי הוא התולעת השטוחה planarian. התחדשות הוא למד על ידי ניסויים פשוטים קטיעה מבוצעים בקלות במעבדה בסיסי הנוחות (תרופתי ו...

מבחני גנטית תרופתי ו פונקציונלית לתפעל התחדשות של Planarian Japonica Dugesia</em

סרטון זה מדגים את השימוש בבדיקת תנועה רדיאלית כדי להעריך תפקוד לקוי של מוטוריקה ב-C. elegans המבטא חלבון TDP-43 אנושי מסוג פרא או מוטנטי ALS. תולעים עם רמות שונות של ביטוי TDP-43 מסוג בר או מוטנטי מורשות לזחול, ותנועתן נמדדת על ידי המרחק הרדיאלי שעובר מהנקודה המרכזית על לוחית הבדיקה. הבדיקה מבחינה בין ליקויים מוטוריים קלים, בינוניים וחמורים על סמך המרחק שעברו הזנים השונים C. elegans.

הערכת ליקוי מוטורי במודלים של C. elegans באמצעות בדיקת תנועה רדיאלית

שיטת הערכת כמותית תגובת chemotactic...

Assay Chemotaxis סי אלגנס

פרוטוקול מתואר לזיהוי in vivo של השפעות של מעכבי מיטוכונדריה באורגניזם המודל Caenorhabditis elegans ולזיהוי תרכובות משפרות פוטנציאליות. ניתן להשתמש בפרוטוקול זה כדי לסנן ספריות תרופות עבור תרכובות המווסתות את תפקוד המיטוכונדריה.

Screenable<em&gt; In vivo</em&gt; Assay עבור מיטוכונדריאלי מאפנני שימוש הטרנסגניים Bioluminescent<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

פרוטוקול זה מראה כיצד שיחתוך עיני planarian בעקביות (כוסות אופטיות) מבלי להפריע רקמות סובבות. באמצעות מחט אינסולין במזרק, או אחת או בשתי העיניים יכול להיות מלוטשים על מנת להקל על חקירת מנגנוני ויסות התחדשות העין, את האבולוציה של התחדשות ויזואלית, ואת הבסיס העצבי של התנהגות האור המושרה.

אבלציה כירורגית Assay עבור לימוד Regeneration Eye ב Planarians

תכנון מים מתוקים מציגים שלוש חבטות (גלישה, פריסלזיס, ו כיווץ) הניתנים להבחנה על ידי ניתוח התנהגותי כמותי. אנו מתארים שיטה לגרום לכיסה באמצעות גירויים מזיקים שונים, כימות שלהם, והבחנה בין פריסלזיס וגלישה. באמצעות נוק-דאון גנטי, אנו מדגימים את הספנות של התכתשות כקריאה פנוטיפית כמותית.

התכתוב תכנון כקריאה התנהגותית כמותית עבור חישת גירויים מזיקים

אנו מציגים פרוטוקול לאפיון תנועתיות והתנהגות של אוכלוסייה של תאים בגודל של מאה מיקרון עד מילימטר באמצעות מיקרוסקופיית שדה בהיר ומעקב אחר תאים. בדיקה זו מגלה כי Stentor coeruleus עובר דרך ארבעה שלבים שונים מבחינה התנהגותית כאשר הוא מחדש מנגנון אוראלי אבוד.

ניתוח דפוסי תנועתיות של סטנטור במהלך ואחרי התחדשות מנגנון הפה באמצעות מעקב אחר תאים

פרוטוקול זה מתאר שתי בדיקות רגישות להפלות בין ליקויים מוטוריים קלים, בינוניים וחמורים בדגמי C. elegans של טרשת אמיוטרופית לרוחב, עם תועלת כללית לזני C. elegans , עם תנועתיות שונה.

הערכה של ליקוי מוטורי בדגמי C. elegans של טרשת אמיוטרופית לרוחב

הפרוטוקול הנוכחי מתאר בדיקה לקביעת התגובה ללבמיזול, אגוניסט פרמקולוגי של סוג אחד של קולטני אצטילכולין Caenorhabditis elegans . במבחן השחייה הנוזלי הזה, החוקרים מתבוננים באופן חזותי ומכמתים את השיתוק תלוי הזמן של בעלי חיים המעובדים בצלחות של 24 בארות.

מדידת רגישות Caenorhabditis elegans לקולטן אצטילכולין אגוניסט לבאמיזול

המאמר מציע שיטה חדשה במבחנה להערכה מהירה ורגישה של הרעילות והרעילות האקולוגית של מזהמים, המבוססת על התנועתיות של המוציטים Mytilus galloprovincialis . השיטה נועדה לתרום לפיתוח בדיקות חשיפה טוקסיקולוגיות ואקוטוקסיקולוגיות אתיות ורגישות יותר.

בדיקה טוקסיקולוגית ואקוטוקסיקולוגית המבוססת על תנועתיות המוציטים של מולים (Mytilus galloprovincialis)

התקפים משפיעים לרעה על תפקודים שונים ועל איכות החיים. תולעי פלנריה נחשפו לריכוזים משתנים של פרכוסים כימיים כדי להעריך את פנוטיפים ההתקפים ואת התנועתיות המשבשת שלהן. מחקר זה מציע להשתמש בתולעי פלנריה כמודל להתקפים חריפים בבני אדם ויש לו משמעות בפיתוח תרופות לאפילפסיה.

פלנר כמודל חיה להתקף חריף ניסיוני

למדו את שיטת מבחן מהירות התנועה של תולעי פלנריה להערכת השפעות ממריצות ונסיגה של סוכנים ביולוגיים על תנועת התולעים. שיטה זו מספקת נתוני התנהגות אמינים במחקר עצבי וביולוגיה התנהגותית.

תסה תנוענות פלנרית כדי לאמוד את המאפיינים של מודולים ביולוגיים של מוצרים טבעיים

גלה סרטונים נוספים