15 ביוני 2020
מוצג כאן פרוטוקול להערכת תפקוד הלב הדו-חדרי בעכברים על ידי יצירת לולאות נפח לחץ (PV) מהחדר הימני והשמאלי באותו בעל חיים באמצעות צנתור חזה סגור. ההתמקדות היא בהיבט הטכני של ניתוח ורכישת נתונים.
פרוטוקול זה מאפשר אפיון מקיף וחזק של תפקוד הלב, כמו גם כימות של תפקוד סיסטולי ודיאסטולי בחדר שמאל וימין של עכברים. טכניקה זו מציעה אפיון גלובלי של תפקוד הלב בעכברים מכיוון שהיא מציעה סיווג שמאל וימין באותה חיה. כדי להתחיל, בודד את עורק הצוואר הימני על ידי דיסקציה קהה כדי לעקור את שריר ההיואיד החזה לרוחב כדי לחשוף ולבודד את עורק הצוואר הימני.
לאחר מכן השתמש במלקחיים ודיסקציה קהה של חול כדי לבודד את עורק הצוואר מהעצב התועה ולהעביר שלושה תפרים כירורגיים 4-0 מתחת לעורק, אך לא את העצב. לבידוד וריד הצוואר הימני, עקור את הבלוטות התת-לסתיות והפרוטידות לרוחב. לדמיין את וריד הצוואר הימני ולהשתמש במלקחיים כדי לנתח ולחשוף בצורה בוטה את וריד הצוואר הימני.
נתח בזהירות את הווריד כדי להסיר את הפאשיה שמסביב, והעביר את המלקחיים מתחת לווריד הצוואר. העבירו תפר כירורגי מתחת לווריד, וקשרו את התפר לצד הגולגולת של הווריד. השתמש בהמוסטטי clamp כדי להפעיל מתיחה עדינה על התפר לכיוון הראש, ולהעביר שני תפרים נוספים מתחת לווריד הצוואר.
השתמש בשנייה clamp כדי למשוך בעדינות את התפר הדיסטלי ביותר לכיוון הזנב וליצור קשר רופף בתפר האמצעי. לאחר מכן הניחו כמה טיפות של מי מלח פיזיולוגיים מחוממים על הכלי באתר הווריד הצפוי. לצנתור של החדר הימני הניחו את העכבר מתחת למיקרוסקופ סטריאו וזהו את וריד הצוואר.
החל בעדינות מתיחה מעולה על הווריד והכנס מחט מעוקלת בגודל 30 בין הגולגולת לתפרים בזווית של 140 מעלות. כדי להבטיח שהמחט תיכנס בצורה קואקסיאלית. עם ההחדרה, הזז את המחט כדי להרחיב את הווריד והכנס קצה קטטר של שישה מילימטר מתחת למחט לתוך הוונוטומיה.
לאחר קידום הצנתר לחדר הימני, עקוב אחר צורת הגל הקלאסית של לחץ החדר הימני במוניטור רציף כדי לאשר את המיקום הנכון של הצנתר. במידת הצורך, סובב בעדינות את ציר הקטטר עד להשגת מיקום אופטימלי של הקטטר לאורך ציר החדר הימני. כדי להבטיח את המיקום הנכון של הצנתר לתוך הגחון הימני והשמאלי, עליך לקרוא ולפרש בעיון את הלחץ, הנפח, העוצמה, השלבים, העקבות, במקביל להזזת הצנתר.
כאשר מתקבל אות לולאה של גודל לחץ אופטימלי, לחץ על Enter בקונסולה כדי לבצע סריקה בסיסית ולנטר את הדופק. כדי ליצור את לולאות נפח הלחץ, שנה את פרמטר ציר ה-X מגודל לנפח, והשאיר את הלחץ כציר Y. כאשר אות לולאת עוצמת הלחץ אופטימלי.
הקלט למשך 30 שניות. בסיום הניתוח, הפסק את ההקלטה. לאחר מכן הנח את הקטטר שהוסר בתמיסת נתרן כלוריד הפרין.
לצנתור של החדר השמאלי, הרם בעדינות את עורק הצוואר הימני בעזרת מלקחיים, וקשר את תפר הגולגולת, ובכך חסם את העורק. השתמש בהמוסטטי clamp כדי להפעיל בעדינות מתיחה מכוונת גולגולת על הכלי והשתמש ב-clamp כדי למשוך את התפר הדיסטלי ביותר לכיוון הזנב. צרו קשר רופף על התפר האמצעי והוסיפו כמה טיפות של מי מלח פיזיולוגיים מחוממים על הכלי באתר כריתת העורקים הצפויה.
השתמש במיקרוסקופ כדי להתמקד בחלק הגולגולתי בין הזנב לתפר האמצעי והפעל בעדינות מתיחה מעולה על העורק. לאחר החדרת הקטטר כפי שהודגם עבור החדר הימני, אישר כי רישום ערוץ הלחץ מראה עקבות אבי העורקים האופייניים, קידום הקטטר לחדר השמאלי יהיה ניכר מהירידה הפתאומית בלחץ הדיאסטולי מאבי העורקים. כדי לייצב את לחץ החדר השמאלי, השתמש בלולאת נפח הלחץ כדי לאשר את המיקום הנכון של הצנתר בחדר השמאלי.
הפסק את ההקלטה והסר את הצנתר. הנח את הקטטר בתמיסת נתרן כלוריד הפרין וקשר את תפר הזנב. לאחר מכן נקו את הקטטר עם חומר ניקוי אנזימטי.
באיור זה ניתן להבחין בלולאות לחץ אופטימליות מייצגות הנוצרות מצנתר המוחדר כהלכה דרך וריד הצוואר ומתקדם לחדר הימני. מיקום לא נכון בתוך החדר הימני ניכר על ידי הופעת לולאות נפח לחץ פגומות. מיקום אופטימלי לאחור של הצנתר על פני המסתם האאורטלי לתוך החדר השמאלי מביא גם לדפוס לולאת לחץ ספציפי.
זה מתבטא בלולאות פגומות במקרה של קטטר הממוקם בצורה לא נכונה. טכניקה זו מאפשרת רכישת ערכי לחץ סיסטולי מקיפים בחדר שמאל וימין. הוא גם מספק פרמטרים דיאסטוליים, ומניב מידע על מדדים מתקדמים רבים של התכווצות ולוסיטרופיה.
טכניקה זו גם מקלה על הערכת היעילות של החדר השמאלי והימני והעומס לאחר שלב החדר. ניתן להשתמש בטכניקה זו כדי להעריך את תפקוד החדר הימני והשמאלי במחלות לב וכלי דם. לדוגמה, ניתן להשתמש בו כדי להעריך את תפקוד החדר הימני בתגובה לעומס מוגבר ביתר לחץ דם ריאתי.
תרגול כולל, שדה חיסול טוב, כלי כירורגי טוב, שמירה על לחות הווריד הזוויתי של הצוואר הוא המפתח להצלחת הליך זה.
פרוטוקול זה מפרט שיטה להערכת תפקוד דו-חדרי של הלב בעכברים באמצעות יצירת לולאות לחץ-נפח (PV loops) באמצעות קטטריזציה של החזה הסגור. הוא שם דגש על הטכניקות הכירורגיות ועל רכישת הנתונים הנחוצים למדידות מדויקות.
הערכה של תפקוד לב דו-חדרי במודלים פרה-קליניים היא קריטית להפחתת סיכונים עבור מועמדים לתרופות קרדיווסקולריות, על ידי אספקת תובנות מכניסטיות לגבי ביצועים סיסטוליים ודיאסטוליים. רכישת לולאות לחץ-נפח בשיטת חזה סגור בעכברים מאפשרת פרופיל המודינמי רלוונטי פיזיולוגית המשקף קטטרזציה קלינית, ובכך תומכת בביטחון תרגומי בתיקוף המטרה ובאופטימיזציה של המולקולה המובילה. גישה זו מפחיתה עמימות ביולוגית בשלבי הגילוי המוקדמים באמצעות אספקת נתונים כמותיים וניתנים לשחזור על תלות הדדית בין החדרים ועל כושר התכווצות.
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מתיקוף המטרה דרך זיהוי מובילים ועד לבדיקות יעילות פרה-קליניות, ומספקת אפיוני פנוטיפ לבביים תפקודיים בכל שלב.