אלקטרורטינוגרמה ישירה (DC-ERG) להקלטת התגובות החשמליות המעוררות אור של אפיתל פיגמנט רשתית העכבר

טכניקת DC-ERG יכולה לשמש להערכה לא מתחמקה של פונקציית אפיתל פיגמנט רשתית כדי לפקח על שינויים הקשורים לגיל או התקדמות המחלה ולהעריך השפעות התערבות תרופתית. טכניקה זו משפרת את יכולת ההתרבות DC-ERG ואת קלות השימוש על ידי פישוט הכנת האלקטרודה נימי. זה יכול גם להיות בתוספת עם יישום תוכנה אוהם סטנדרטי כדי להקל על הניתוח.

התחל על ידי החלקה בזהירות מחט מזרק 25-מד דרך אטם גומי סיליקון לקיר האחורי של מחזיק האלקטרודה. מלא את הבסיס של מחזיק האלקטרודה עם HBSS degassed תוך נסיגה איטית של המחט, דואג לא להציג בועות, ולהחליף את הכובע מושחל ללא הידוק. הכנס מחדש את מחט המזרק כדי למלא את החלל הריק בתוך הפער עם HBSS ולהחזיק את נימי אופקית תוך מילוי כדי למנוע פתרון לברוח מהסוף השני.

אוחזים את נימי מלא בקצה הכפוף, לאט להכניס את הקצה השני דרך הכובע משוחרר להדק את מכסה הבורג למקומו. להטות את מחזיקי האלקטרודה עם אלקטרודות נימי פונה כלפי מעלה כדי לאפשר לכל בועות לזרום החוצה degas נימים בתא ואקום במשך חמש עד 10 דקות. לאחר מכן, שחררו באיטיות את הוואקום ומילוי מחדש של מחזיקי האלקטרודות נימי הזכוכית, כפי שהוכח.

כדי ליצור מעמד מותאם אישית למחזיק המיקרו-אלקטרודה, הסר את קליפי הפוליאצטל השחורים מצד אחד של מספר שמונה T-clip ולהשתמש בבסיס צילינדר עם מפרקי כדור מגנטי במכונה לשניים כדי להתאים את הגובה. אבטחו את קליפי ה-T ששונו לברגים להרכבה על כדור מגנטי עם אגוזים בגודל M3 ושקופית בידית עץ מחודדת בגודל של כ-1 אינץ', ששונתה ממקל ניקוי קצה כותנה, לתוך הדוכן בזווית כדי לאבטח את מחזיק המיקרו-אלקטרודה לתוך מעמד מפרק הכדור המגנטי T-clip המותאם אישית. לאחר מכן, השתמש בבסיס הצילינדרים הנדירים של מגנטים לכדור הארץ כדי למקם באופן מאובטח את מעמד מחזיק האלקטרודה המותאם אישית על לוח המתכת של הבמה, מה שמאפשר סיבוב של 360 מעלות על ציר של 180 מעלות.

כדי לבצע בדיקת אלקטרודה, ראשית, הורידו בעדינות את המיקרואלקטרודים נימיים המלאים במילוי HBSS לתוך מיכל קטן של HBSS. מניחים את אלקטרודה הקרקע מחט ואת כסף, כסף כלוריד מרוכז גלולה התייחסות אלקטרודה באותו HBSS כדי להשלים את המעגל ולבחור או ליצור מזהה מתאים כדי לתאר את העכבר להיבדק. כדי לבחור את פרוטוקול האלקטרורטינוגרמה המזוגג הישיר שיש לבצע, לחץ על פרוטוקולים ובחר DC-ERG.

לחץ על הפעל. תיבת דו-שיח תצוץ עם פרטי המטופל. אם המידע נכון, לחץ על כן והמשך שלב אחד מתוך שישה.

סגור את הדלתות לכלוב פאראדיי ולחץ על עצור כדי להציג את מצב ההימנעות. ודא כי הערכים עבור התייחסות הפה, הקרקע הזנב ואלקטרודות הקלטה מקובלים ולחץ על שלב כדי להמשיך לשלב ארבע מתוך שש כדי לבדוק את היציבות הבסיסית. כדי להתחיל להציג את המעקבים, לחץ על תצוגה מקדימה.

העקבות צריכים להיות רעש נמוך עם משרעת שיא לשיא של פחות מ 200 microvolts. כדי למקם את העכבר ואת האלקטרודות לניסוי, הרדמה הקרנית של עכבר מרומם עם ירידה של 5%proparacaine חומצה הידרוכלורית לפני טבילת הקרנית עם ירידה של 2.5% פנילפרין HCL ו 5% טרופיקמיד. בתוכנת המערכת של ERG, ודא שהמטופל הנכון נבחר.

לחץ על פרוטוקולים. תחת תיאור פרוטוקול, בחר DC-ERG ולחץ על הפעל. לחץ על כן כדי לוודא שהבדיקה הנכונה מתבצעת.

השתמש בשלב אחד מתוך שישה כדי להדליק אור אדום עמום בתוך הכיפה ולה מניח את העכבר על שולחן הקלטה מחומם. השתמש במדפים כדי לאוהל בזהירות את העור של הרגל האחורית. ולהשתמש ביד אחת כדי להחזיק בחוזקה את אלקטרודה המחט, להשתמש ביד השנייה כדי להכניס את ההתחשמלות תת עורית לתוך הרגל האחורית כדי לאבטח את האלקטרודה למקומה.

מניחים את האלקטרודה כסף הפניה, כסף כלוריד לתוך הפה של החיה, כך גלולה מרוכזת נח לאורך הלחי האחורית מוחזק במקום מאחורי השיניים. לפני הנחת האלקטרודות נימי על העין, למקם את מחזיק האלקטרודה עם נימי זכוכית בכיוון אנכי להעיף את מחזיק האלקטרודה עם אצבע המורה כדי להסיר את כל הבועות שאולי הוצגו. השתמש מחט 25-מד כדי למלא את הטיפים נימי עם HBSS ולבדוק את נימים כדי להבטיח כי אין בועות אוויר לכודים בקצות.

מקם את מעמד מחזיק האלקטרודה כך שהטיפים הפתוחים של נימים מלאים HBSS נמצאים במגע עדין עם הקרנית. ומטפל כדי למנוע החדרת בועות, להפוך את מתקן ג'ל עיניים סיכה כדי להשליך את הטיפות הראשוניות. לאחר מכן, מניחים טיפה של ג'ל עיניים סיכה על כל עין כדי לשמור על מוליכות ולמנוע ייבוש במהלך ההקלטה.

כדי להקליט את DC-ERGs, לחץ על שלב כדי לבחור את שלב חמש מתוך שש ולחץ על בלתי לעכבה כדי להשתמש במסך בדיקת ההימנעות כדי לבחון את ההתנגדויות של העיניים השמאלית והימין. ערכי ההימנעות עבור האלקטרודות המתעדות בכל עין צריכים להיות דומים. וערכי ההימנעות הן עבור האלקטרודות הקרקעיות והן עבור אלקטרודות הייחוס צריכים להיות פחות מ-10 קילו-שעה.

לחץ על תצוגה מקדימה כדי להציג את המעקבים לעיניים השמאלית והיינית והמתן עד 10 דקות להשגת קו בסיס יציב. לאחר מכן, לחץ על עצור כדי לצאת מהתצוגה המקדימה של המעקב ולחץ על הפעל כדי להתחיל את ההקלטה. כאן מוצגת ערכת נתונים לדוגמה מהנוקאאוט מותנה ועכברים מסוג פראי.

בניתוח זה, העקבות סבלו מבועות דקות באלקטרודה. זה הגביר את רעש השיא לשיא במעקב. בניתוח נפרד, הבועות בוטלו באמצעות תא ואקום לפני הרכבת microelectrodes בתוך מחזיק האלקטרודה עומד.

ניתן לחשב את קווי השעות המתאימים ביותר ל- 25 השניות הראשונות, דבר המאפשר לזהות את התגובות המתוקנות בסחף ואת משרעת רכיבי DC-ERG. כצפוי, ביטוי מופחת של תרופה 7.1 תעלות אשלגן ב RPE מאוד מקטין את הגל c ותנודה מהירה, המציין פגיעה משמעותית של תכונות חשמליות אפיתל פיגמנט הרשתית. כאן מוצגות משרעת יחסית של רכיבי DC-ERG, מנורמלים לסוגי פרא ומתכננים כנגד שתי משרעת הגלים הגדולה ביותר.

צורה זו של ניתוח יכולה לקבוע אם התגובות החשמליות המופחתות של RPE ניתן להסביר על ידי הפחתת פעילות photoreceptor לבד. לחלופין, אם קיים פגם בסיסי שמקורו ב- RPE. זכור להשיג בסיס יציב לפני המעבר להקלטת העכבר ולתזמן מחדש את האלקטרודות מעת לעת עבור בועות שאולי הוצגו.

ניתן להקליט ERGs כהים לפני DC-ERG כדי למדוד את פונקציית הרשתית מונחית הקונוסים. ERGs מותאמים לאור יכולים להתבצע גם לאחר DC-ERG כדי להעריך את התגובות ברשתית מונחה חרוט.