Name: מבחני העדפת מזון מהירה בדרוסופילה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-11T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 13 s
Description: למדו פרוטוקול מהיר להערכת העדפת מזון ב-Drosophila melanogaster באמצעות צלחת פטרי עם שני צבעי מאכל. השיטה מאפשרת סינון יעיל של השפעות גנטיות על התנהגות אכילה וחוסכת זמן רב בהשוואה למבחני רב-באר.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצים להודות לד"ר טינגווי מי שעזר להם לייעל את מבחני ההאכלה של שתי הנבחרות. הם גם רוצים להודות לסמואל צ'אן וויאט קולמס על הערותיהם על כתב היד. פרויקט זה מומן על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקים R03 DC014787 (Y.V.Z.) ו R01 DC018592 (Y.V.Z.) ועל ידי קרן אמברוז מונל.

1. הרכבת תאי ההסתעפות
הערה: בעוד שפרוטוקול זה מתאר את השימוש בצלחת פטרי 35 מ"מ(איור 1A),ניתן להשיג את האפקט הרצוי באמצעות כל כלי אטום למים עם תחתית חלקה שניתן לחצות ולכסות.
<ol><li>ראשית, חוצה צלחת פטרי 35 מ"מ מרופדת על ידי תיקון אורך פלסטיק (5 מ"מ רוחב ו 3 מ"מ גובה) לאורך קו האמצע עם דבק עמיד למים, ויוצרים שני תאים אטומים למים. אשר כי החותם הושלם כדי למנוע דליפה שיכולה להוביל לערבוב של שני מצעי מזון להיות assayed. הערה: לאחר ההרכבה, יש לעשות שימוש חוזר במנגנון זה כל עוד החותם מחזיק מעמד.</li>
</ol>2. הכנת בקבוקוני רעב
<ol><li>הכן מספר מספיק של בקבוקוני זבוב פלסטיק ריקים; לאחר מכן, לדחוס באופן רופף פיסת נייר טישו בתחתית. לדחוס את נייר הרקמה מספיק שהוא ממלא את החלל, אבל לא כל כך הרבה שהוא יוצר מסה צפופה. הערה: ודא כי אין סדקים עמוקים או קפלים ברקמה, כמו זה יכול להוביל זבובים להילכד.</li>
	<li>מוסיפים ~ 3 מ"ל מים טהורים לבקבוקון כך שהרקמה רוויה לחלוטין, אך אין מים עומדים. ודא כי אין טיפות גדולות של מים עודפים על הקיר של הבקבוקון. לחלופין, תחליף agarose עבור נייר ספוג על ידי הכנת 1% w / v פתרון אגר (ללא סוכרוז) על ידי הוספת 5 מ"ל של 1% agarose לכל בקבוקון ריק ומאפשר agarose להתמצק בטמפרטורת החדר.</li>
</ol>3. רעב רטוב של זבובים לפני הניסוי
<ol><li>ליזום רעב 24 שעות לפני הזמן של הניסוי. תחת CO2 הרדמה, מיין קבוצות של ~ 70, 2-4 יום בן זבובים לתוך בקבוקוני רעב מוכן, תיוג כל בקבוקון עם הגנוטיפ וזמן של רעב.</li>
</ol>4. הגדרת ריאגנט
<ol><li>הכנת צבעים הערה: לפני ביצוע כל הניסויים, חשוב לבצע בדיקה ראשונית כדי לקבוע את הריכוזים הנכונים של צבעים אדומים וכחולים לשימוש.<ol>
<li>לבדיקת הבקרה, הכינו מגוון של דילולים לכל צבע, ובצעו את מבחני ההאכלה עם אותו מזון עם צבע צבע שונה. השתמש בתוצאות כדי לזהות ריכוזים של שני צבעים (אחד אדום, אחד כחול) המניבים PI של ~ 0 כאשר לא נוסף תרכובת ניסיונית (ראה סעיף 7). הערה: לדוגמה, ריכוז הצבע הכחול הסופי תוקן ב 50 μM ונבדק נגד סדרה של ריכוזי צבע אדום. בהתבסס על עקומת מינון הצבע האדום, ריכוז הצבע האדום האופטימלי היה 210 מיקרומטר, מה שנתן הטיית צבע מינימלית (איור 1B). ריכוז צבע אדום גבוה יותר מניע זבובים להעדיף מזון אדום, ואילו ריכוז נמוך יותר מניע זבובים להעדיף מזון כחול. בזהירות לחדד ריכוזי צבע כחול או אדום במרווחים של μM 1, כמו הבדלים בסדר גודל זה גדול יותר יכול להשפיע על תוצאות ניסיוניות.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הכנה של 1% agarose<ol>
<li>לשלב 0.5 גרם agarose ו 50 מ"ל של מים טהורים (או כמה רבים מהם) בכלי בטוח למיקרוגל. יש לחמם במיקרוגל את תמיסת האגרוז עד להמסה, תוך ערבובה לפי הצורך.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הכנת רכיבי מזון אחרים<ol>
<li>ממיסים כל רכיב מזון, כולל סוכרוז ותרכובות ניסיוניות, במים בריכוז של פי 100 ומעלה של הריכוז הסופי שנבדק. הערה: הנפח הכולל של כל מרכיב מזון הוסיף 1% אגר לא יעלה על 1 מ"ל לכל 10 מ"ל אגר מותך. אחרת, agarose עשוי להיות מדולל מדי ולא להתמצק כראוי.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הכנת מדיית מזון<ol>
<li>מערבבים אגר, צבע, ואת התרכובת הניסיונית הרצויה בצינורות צנטריפוגה פוליפרופילן חרוט (15 או 50 מ"ל); להשתמש במים במקום טעים ניסיוני במזון הבקרה. לעשות זאת בזמן אגר הוא עדיין נוזלי לחלוטין ומערבבים ביסודיות באמצעות מערבל מערבולת. שמור את הצינורות באמבט מים 60 מעלות צלזיוס בזמן לא בשימוש כדי למנוע את agarose התקשות לפני להיות מופץ לכלים.</li>
	</ol>
</li>
	<li>הכנת מנות לניסוי הערה: יש לוודא שכל המנות יבשות לחלוטין לפני שמתחילים.<ol>
<li>פיפטה 1 מ"ל של מדיום מזון ניסיוני אדום לצד אחד של צלחת ההסתערות (איור 1A); חוזרים על הפעולה לקבלת מספר הכלים הרצוי. אפשרו לאגורוז להתקרר עד המשרד (3-5 דקות), ולאחר מכן פיפטה 1 מ"ל של מזון שליטה כחול לצד השני של הכלים(איור 1A). חזור על תהליך זה עם זוג כחול אדום /ניסיוני שליטה. הערה: ודאו שכל המנות מוגדרות במלואן לפני תחילת הניסוי. השתמש בכלים בתוך 30 דקות.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. ייזום מבחני ההאכלה הדו-כיווניים
<ol><li>לשתק זמנית קווי זבוב ניסיוניים על קרח עד שלא נצפו פעילויות מוטוריות ברורות כגון טיסה וטיפוס. לאחר הזבובים משותקים, בעדינות להפוך את הבקבוקון, ולהקיש כדי להעביר את כל הזבובים לתוך תא ההסתערות. הערה: הלם קר לוקח ~ 3 - 5 דקות. חשיפה ממושכת לקור עלולה להשפיע על הפיזיולוגיה והבריאות של הזבוב ולכן יש להימנע ממנה.</li>
	<li>מניחים במהירות את הכיסוי על התא ומניחים אותו בצד. לאחר שכל הזבובים הועברו, העבר את כל התאים לחלל חשוך וסגור. אפשר לבדיקה לפעול במשך 90 דקות. הערה: סביבה חשוכה ממזערת את השפעת המסלול החזותי של הזבוב על התנהגות ההזנה ומסירה רמזים סביבתיים מחוץ למנה.</li>
</ol>6. סיום מבחני ההזנה הדו-כיווניים
<ol><li>לאחר 90 דקות חלפו, להעביר את התאים למקפיא -20 מעלות צלזיוס להקריב את הזבובים. לאחר ~ 1 שעות, לספור את הזבובים. הערה: הפוך כל צלחת פטרי לפני הנחת המנה במקפיא כדי להבטיח כי אין זבובים יוקפאו על האוכל.</li>
</ol>7. הקצאת אינדקס העדפות (PI) לקביעת העדפת מזון
<ol><li>תחת מיקרוסקופ ניתוח סטנדרטי, בדקו את צבע הבטן של הזבובים בכל מנה בנפרד. ספרו את הזבובים כאדום, כחול או סגול לפי צבע הבטן שלהם (איור 2A). ספור את הזבוב אם הבטן שלו צבעונית יותר מ-50%, מה שמצביע על הזנה חזקה(איור 2B). אל תכלול את הזבוב אם הבטן שלו מכילה רק נקודת מזון זעירה, המציינת אכילה לקויה (איור 2C).</li>
	<li>לאחר ספירת מספר הזבובים שאוכלים מאכלים כחולים, אדומים או כחולים ואדומים כאחד, השתמש במשוואה הבאה כדי להקצות לכל צלחת פטרי מדד העדפה (PI):</li>
</ol>PI = (מספר זבובים שאוכלים מזון ניסיוני) - (מספר זבובים שאוכלים מזון בקרה) / (מספר זבובים שאוכלים מזון ניסיוני) + (מספר זבובים שאוכלים מזון בקרה) + (מספר זבובים שאוכלים את שניהם)
PI > 0 מציין העדפה עבור התרכובת הניסיונית, PI < 0 מציין סלידה לתרכובת הניסיונית, ו PI = 0 מציין שום השפעה של המתחם על התנהגות האכלה.
8. ניקוי תאי ההסתעפות
<ol><li>מיד לנקות את מנות פטרי על ידי גירוד מצע המזון ולשטוף אותם עם מים וסבון מבושם. משרים את מנות הפטרי למשך הלילה במים מזוקקים. בדוק כי חותם החלוקה בכל מנה הוא עדיין אטום למים, ואז לתת את האוויר צלחת יבש. הערה: לאחר הבטחה כי אין שאריות agarose או כתמי צבע, מנות פטרי מוכנים לשימוש שוב.</li>
</ol>

<ol><li>Jiao, Y., Moon, S. J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+gustatory+receptor+required+for+the+responses+to+sucrose%2C+glucose%2C+and+maltose+identified+by+mRNA+tagging%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">A Drosophila gustatory receptor required for the responses to sucrose, glucose, and maltose identified by mRNA tagging.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (35), 14110-14115 (2007).</li>
<li>Dahanukar, A., Foster, K., van der Goes van Naters, W. M., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Gr+receptor+is+required+for+response+to+the+sugar+trehalose+in+taste+neurons+of+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Gr receptor is required for response to the sugar trehalose in taste neurons of Drosophila.</a> Nature Neuroscience. 4 (12), 1182-1186 (2001).</li>
<li>Ueno, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trehalose+sensitivity+in+Drosophila+correlates+with+mutations+in+and+expression+of+the+gustatory+receptor+gene+Gr5a%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Trehalose sensitivity in Drosophila correlates with mutations in and expression of the gustatory receptor gene Gr5a.</a> Current Biology. 11 (18), 1451-1455 (2001).</li>
<li>Fujii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+sugar+receptors+in+sweet+taste+perception%2C+olfaction%2C+and+internal+nutrient+sensing%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Drosophila sugar receptors in sweet taste perception, olfaction, and internal nutrient sensing.</a> Current Biology. 25 (5), 621-627 (2015).</li>
<li>Wang, Z., Singhvi, A., Kong, P., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+representations+in+the+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Taste representations in the Drosophila brain.</a> Cell. 117 (7), 981-991 (2004).</li>
<li>Thorne, N., Chromey, C., Bray, S., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+perception+and+coding+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Taste perception and coding in Drosophila.</a> Current Biology. 14 (12), 1065-1079 (2004).</li>
<li>Slone, J., Daniels, J., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sugar+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Sugar receptors in Drosophila.</a> Current Biology. 17 (20), 1809-1816 (2007).</li>
<li>Dus, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutrient+sensor+in+the+brain+directs+the+action+of+the+brain-gut+axis+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Nutrient sensor in the brain directs the action of the brain-gut axis in Drosophila.</a> Neuron. 87 (1), 139-151 (2015).</li>
<li>Toshima, N., Tanimura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+preference+for+amino+acids+is+dependent+on+internal+nutritional+state+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Taste preference for amino acids is dependent on internal nutritional state in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Experimental Biology. 215 (16), 2827-2832 (2012).</li>
<li>Melcher, C., Bader, R., Pankratz, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino+acids%2C+taste+circuits%2C+and+feeding+behavior+in+Drosophila%3A+towards+understanding+the+psychology+of+feeding+in+flies+and+man%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Amino acids, taste circuits, and feeding behavior in Drosophila: towards understanding the psychology of feeding in flies and man.</a> Journal of Endocrinology. 192 (3), 467-472 (2007).</li>
<li>Zhang, Y. V., Ni, J., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+for+attractive+salt-taste+coding+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The molecular basis for attractive salt-taste coding in Drosophila.</a> Science. 340 (6138), 1334-1338 (2013).</li>
<li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The molecular and cellular basis of bitter taste in Drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li>
<li>Moon, S. J., Kottgen, M., Jiao, Y., Xu, H., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+taste+receptor+required+for+the+caffeine+response+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">A taste receptor required for the caffeine response in vivo.</a> Current Biology. 16 (18), 1812-1817 (2006).</li>
<li>Dweck, H. K. M., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+logic+and+evolution+of+bitter+taste+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Molecular logic and evolution of bitter taste in Drosophila.</a> Current Biology. 30 (1), 17-30 (2020).</li>
<li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gustatory+receptors+required+for+avoiding+the+insecticide+L-canavanine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Gustatory receptors required for avoiding the insecticide L-canavanine.</a> Journal of Neuroscience. 32 (4), 1429-1435 (2012).</li>
<li>Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+taste+of+the+Drosophila+gustatory+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">A taste of the Drosophila gustatory receptors.</a> Current Opinion in Neurobiology. 19 (4), 345-353 (2009).</li>
<li>Clyne, P. J., Warr, C. G., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candidate+taste+receptors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Candidate taste receptors in Drosophila.</a> Science. 287 (5459), 1830-1834 (2000).</li>
<li>Liman, E. R., Zhang, Y. V., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+coding+of+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Peripheral coding of taste.</a> Neuron. 81 (5), 984-1000 (2014).</li>
<li>Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gustatory+processing+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Gustatory processing in Drosophila melanogaster.</a> Annual Review of Entomology. 63, 15-30 (2018).</li>
<li>Freeman, E. G., Dahanukar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+neurobiology+of+Drosophila+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Molecular neurobiology of Drosophila taste.</a> Current Opinion in Neurobiology. 34, 140-148 (2015).</li>
<li>Tanimura, T., Isono, K., Yamamoto, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+sensitivity+to+trehalose+and+its+alteration+by+gene+dosage+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Taste sensitivity to trehalose and its alteration by gene dosage in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 119 (2), 399-406 (1988).</li>
<li>Zhang, Y. V., Raghuwanshi, R. P., Shen, W. L., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Food+experience-induced+taste+desensitization+modulated+by+the+Drosophila+TRPL+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Food experience-induced taste desensitization modulated by the Drosophila TRPL channel.</a> Nature Neuroscience. 16 (10), 1468-1476 (2013).</li>
<li>Bantel, A. P., Tessier, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+preference+assay+for+adult+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Taste preference assay for adult Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (115), e54403(2016).</li>
<li>Shiraiwa, T., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proboscis+extension+response+%28PER%29+assay+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (3), e193(2007).</li>
<li>Ja, W. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prandiology+of+Drosophila+and+the+CAFE+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Prandiology of Drosophila and the CAFE assay.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (20), 8253-8256 (2007).</li>
<li>Diegelmann, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CApillary+FEeder+assay+measures+food+intake+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">The CApillary FEeder assay measures food intake in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (121), e55024(2017).</li>
<li>Ro, J., Harvanek, Z. M., Pletcher, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FLIC%3A+high-throughput%2C+continuous+analysis+of+feeding+behaviors+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">FLIC: high-throughput, continuous analysis of feeding behaviors in Drosophila.</a> PLoS One. 9 (6), 101107(2014).</li>
<li>Yoshihara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+recording+of+calcium+signals+from+identified+neurons+and+feeding+behavior+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Simultaneous recording of calcium signals from identified neurons and feeding behavior of Drosophila melanogaster.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (62), e3625(2012).</li>
<li>Deshpande, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+Drosophila+food+intake%3A+comparative+analysis+of+current+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology.</a> Nature Methods. 11 (5), 535-540 (2014).</li>
<li>Yapici, N., Cohn, R., Schusterreiter, C., Ruta, V., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+taste+circuit+that+regulates+ingestion+by+integrating+food+and+hunger+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A taste circuit that regulates ingestion by integrating food and hunger signals.</a> Cell. 165 (3), 715-729 (2016).</li>
<li>Jiang, L., Zhan, Y., Zhu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+quantitative+food-intake+assays+and+forcibly+activating+neurons+to+study+appetite+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Combining quantitative food-intake assays and forcibly activating neurons to study appetite in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (134), e56900(2018).</li>
<li>Moon, S. J., Lee, Y., Jiao, Y., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Drosophila+gustatory+receptor+essential+for+aversive+taste+and+inhibiting+male-to-male+courtship%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">A Drosophila gustatory receptor essential for aversive taste and inhibiting male-to-male courtship.</a> Current Biology. 19 (19), 1623-1627 (2009).</li>
<li>Zhang, Y. V., Aikin, T. J., Li, Z., Montell, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+basis+of+food+texture+sensation+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The basis of food texture sensation in Drosophila.</a> Neuron. 91 (4), 863-877 (2016).</li>
<li>Itskov, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+monitoring+and+quantitative+analysis+of+feeding+behaviour+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Automated monitoring and quantitative analysis of feeding behaviour in Drosophila.</a> Nature Communications. 5, 4560(2014).</li>
<li>Qi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+feeding+assay+in+adult+Drosophila+reveals+rapid+modulation+of+food+ingestion+by+its+nutritional+value%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Brain%22%5BJournal%5D)">A quantitative feeding assay in adult Drosophila reveals rapid modulation of food ingestion by its nutritional value.</a> Molecular Brain. 8, 87(2015).</li>
<li>Simpson, J. H., Looger, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+imaging+and+optogenetics+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Functional imaging and optogenetics in Drosophila.</a> Genetics. 208 (4), 1291-1309 (2018).</li>
</ol>

המחברים מצהירים כי אין ניגודי אינטרסים או אינטרסים פיננסיים מתחרים.

שיטה זו כוללת מספר שלבים מכריעים שבהם עלולות להתרחש בעיות. ראשית, ודאו שזבובים בולעים כמות מספקת של מזון כדי לספק נתונים יציבים. אם זבובים אוכלים בצורה גרועה, ודאו שהזבובים מורעבים במשך 24 שעות לפחות, ושהמדיה הניסיונית מכילה לפחות ריכוז סוכרוז מינימלי (2 מ"מ). כדי להמריץ עוד יותר את צריכת המזון, להאריך את תקופת הרעב הרטוב מעבר ל-24 שעות, בהתאם למצבם הפיזיולוגי של הזבובים. אם זבובים רבים מדי אינם מצליחים לשרוד את הרעב הממושך, ודא כי מספיק מים מתווספים לנייר הרקמה בעת ביצוע רעב רטוב בבקבוקונים. הימנע מים מוגזמים שעלולים לה...

למרות הבדלים דרמטיים במבנה האנטומי של איברי הטעם בין זבובים ליונקים, התגובות ההתנהגותיות של הזבובים לחומרים טעימים רבים דומות להפליא לאלה של היונקים. לדוגמה, זבובים מעדיפים סוכר1,2,3,4,5,6,7,8, חומצות אמינו9,10, ומלח נמוך11, אשר מצביעים על חומרים מזינים, אבל לדחות מזונות מרים12,13,14,15 כי הם unpalatable או רעיל. במהלך שני העשורים האחרונים, זבובים הוכיחו להיות אורגניזם מודל בעל ערך רב לקידום ההבנה של שאלות בסיסיות רבות הקשורות תחושת טעם וצריכת מזון, כולל גילוי טעים, התמרת טעם, פלסטיות טעם, תקנת האכלה16,17,18,19,20. למרבה הפלא, מספר מחקרים הראו כי מנגנוני התמרת הטעם והמעגל העצבי שבבסיס תפיסת הטעם מקבילים בין זבובי פירות ליונקים. לכן, זבוב הפירות משמש כאורגניזם ניסיוני אידיאלי, המאפשר לחוקרים לחשוף מושגים ועקרונות שמורים מבחינה אבולוציונית השולטים בזיהוי וצריכת מזון בממלכת החי.
כדי לחקור את תחושת הטעם בזבובים, חיוני להקים מבחנה מהירה וקפדנית למדידת העדפת מזון באופן אובייקטיבי. במהלך השנים, שיטות האכלה שונות, כגון מבחנים מבוססי צבע11,12,13,21,22,23, תגובת הארכת פרובוסיס זבוב24, מאכיל נימי (CAFE) assay25,26, מונה האינטראקציה של Fly Liquid-Food (FLIC) assay27, ושיטות קומבינטוריות אחרות פותחו כדי למדוד כמותית העדפת מזון ו / או צריכת מזון עבור זבובי פירות28,29,30,31. אחת מפרדיגמות ההאכלה הפופולריות היא מבחני האכלה דו-ברירה המבוססים על צבע באמצעות צלחת מיקרוטיטר רב-ערוצית12,21,32 או, כמתואר כאן, צלחת פטרי קטנה11,22 כתא האכלה. בדיקה זו מתוכננת על בסיס שקיפות הבטן של הזבוב. במהלך חקירה זו, זבובים ממוקמים לתוך תא ההאכלה ומוצגים עם שתי אפשרויות מזון מעורבב עם צבע אדום או צבע כחול. לאחר השלמת ההסמכה, הבטן לעוף מופיעים אדום או כחול תלוי איזה מזון הם צורכים.
הן צלחת פטרי והן מבחני האכלה מבוססי צבע רב-תכליתי הם חזקים מאוד ומניבים בערך את אותן תוצאות. באמצעות שתי מבחנים אלה, תגליות חשובות רבות פריצות דרך נעשו לקראת פענוח קולטנים מגוונים מאוד תאים האחראים על חישת טעמי מזון ומרקם מזון11,12,21,22,32,33. במהלך ההסמכה המבוססת על צבע, צעד ניסיוני אחד הדורש זמן ומאמץ ניכרים הוא הכנה והעמסה של מזון לתא ההזנה. כדי להפחית את זמן הכנת המזון והטעינה, מבחנה זו שונתה על ידי החלפת צלחת microtiter multiwell עם צלחת פטרי קטנה, אשר מחולק לשני תאים שווים. ב בדיקה המבוססת על צלחת פטרי, שני מזונות שונים בתוספת צבע כחול או אדום מתווספים שני חצאים של המנה. לאחר מכן, ~ 70 prestarved, זבובים 2-4 יום מונחים בצלחת מותר לבחור בין מאכלים כחולים ואדומים בחושך במשך כ 90 דקות. הבטן של כל זבוב נבדקת לאחר מכן, ומדד ההעדפות (PI) מחושב.
מבחני האכלה דו-ברירה המבוססים על פטרי הם זולים, פשוטים ומהירים. צלחת אחת multiwell דורש כ 110 s כדי למלא, ואילו כל צלחת פטרי לוקח רק ~ 20 s. בנוסף, צלחת multiwell דורש צינור כמויות קטנות של מזון לתוך מספר גדול של בארות קטנות (למשל, 60 או יותר בארות לכל צלחת), אשר דורש דיוק ניכר ותשומת לב. לעומת זאת, ההסתעפות המבוססת על צלחת פטרי דורשת רק שתי פעולות לכל צלחת. כמו מבחני האכלה יכול לכלול מספר רב של עותקים משוכפלים, Assay מבוסס צלחת פטרי חוסך כמות לא טריוויאלית של זמן ומאמץ. בדיקה זו נותנת תוצאות שוות ערך לאלה של הבדיקה מבוססת multiwell והוכיחה מוצלחת בהתמודדות עם שאלות בסיסיות רבות בתחושת הטעם, כולל קידוד טעם מלח11, פלסטיות טעם שונה על ידי ניסיון מזון22, ואת הבסיס המולקולרי של תחושת מרקם מזון33. לסיכום, זה פטרי-צלחת מבוסס שתי אפשרויות assay הוא כלי רב עוצמה כדי לחקור כיצד זבובים לתפוס milieus מים מזינים חיצוניים ופנימיים כדי לעורר התנהגות האכלה מתאימה.

<table><tbody><tr><td>צלחת פטרי 35 מ"מ</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>08-772E</td><td></td></tr><tr><td>אגרוז</td><td>תומאס סיינטיפיק</td><td>C756P56</td><td></td></tr><tr><td>דבק שקוף</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>NC9884114</td><td></td></tr><tr><td>צינורות צנטריפוגה חרוטית</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>05-527-90</td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ דיסקציה</td><td>אמסקופ</td><td>SM-2T-6WB-V331</td><td></td></tr><tr><td>FCF Brilliant Blue</td><td>Wako Chemical</td><td>3844-45-9</td><td></td></tr><tr><td>Fly CO2 הגדרת הרדמה</td><td>Genesee Scientfic</td><td>59-114/54-104M</td><td></td></tr><tr><td>חממת זבובים עם מחזור יום/לילה הניתן לתכנות</td><td>Powers Scientific Inc.</td><td>IS33SD</td><td></td></tr><tr>קווי <td></td><td></td><td></td><td>זבוב</td></tr><tr><td>צלחת זכוכית (בטוחה למיקרוגל)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Kimwipes</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666A</td><td></td></tr><tr><td>בקבוק אחסון מדיה</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>50-192-9998</td><td></td></tr><tr><td>מחיצה מפלסטיק חתוכה כך שתתאים לכלי מגיליון בעובי שאינו עולה על 5 מ"מ</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>בקבוקוני</td> <td>זבוב מפלסטיקGenesee Scientific</td><td>32-116</td><td></td></tr><tr><td>סוכרוז</td><td>Millipore Sigma</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td>Sulforhodamine B</td><td>Millipore Sigma</td><td>S9012</td><td></td></tr><tr><td>Tastant תרכובת עניין</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>מערבולת מערבל</td><td>Benchmark Scientific</td><td>BV1000</td><td></td></tr><tr><td>אמבט מים</td><td>פישר סיינטיפיק</td><td>FSGPD05</td><td></td></tr></tbody></table>

מבחני העדפת מזון מהירה בדרוסופילה

A Rapid Food-Preference Assay in Drosophila

כדי לבחור מזון בעל ערך תזונתי תוך הימנעות מצריכת חומרים מזיקים, בעלי חיים זקוקים למערכת טעם מתוחכמת וחזקה כדי להעריך את סביבת המזון שלהם. זבוב הפירות, Drosophila melanogaster, הוא אורגניזם מודל המתוח גנטית המשמש באופן נרחב לפענוח היסודות המולקולריים, התאיים והנוירונים של העדפת מזון. כדי לנתח העדפת מזון זבוב, יש צורך בשיטת האכלה חזקה. המתואר כאן הוא שתי אפשרויות האכלה, שהוא קפדני, חסכוני, ומהיר. ההסתעפות מבוססת פטרי-צלחת וכוללת תוספת של שני מזונות שונים בתוספת צבע כחול או אדום לשני חצאי המנה. לאחר מכן, ~ 70 prestarved, זבובים 2-4 יום מונחים בצלחת מותר לבחור בין מאכלים כחולים ואדומים בחושך במשך כ 90 דקות. בחינת הבטן של כל זבוב מלווה בחישוב מדד ההעדפות. בניגוד לצלחות multiwell, כל צלחת פטרי לוקח רק ~ 20 s כדי למלא וחוסך זמן ומאמץ. זה מבחני האכלה ניתן להעסיק כדי לקבוע במהירות אם זבובים כמו או לא אוהב מזון מסוים.

בחשבון זה חולקה מנה של 35 מ"מ לשני תאי האכלה שווים, כאשר כל מחצית מהתבשיל הכילה מזון אגרוז בשילוב צבע כחול או אדום(איור 1A). כדי לא לכלול הטיית צבע, ריכוזי הצבע הכחול והאדום שוכללו בקפידה כדי להניב PI "0" משוער כאשר רק שני צבעים אלה נוספו (איור 1B). לאחר שצלחת הפטרי הייתה עמוסה במזון שנבדק, הועברו למנה כ-70 זבובים בוגרים רטובים, בני יומיים-ארבעה ימים, המאפשרים להם לבחור בין שתי אפשרויות המזון בחושך. לאחר 90 דקות, צבע הבטן של הזבובים נבדק במיקרוסקופ ניתוק. בדרך כ...

אנחנו מציגים פרוטוקול לבדיקת האכלה של שתי אפשרויות לזבובים. מבחני האכלה אלה מהירים וקלים להפעלה ומתאימים לא רק למחקר מעבדה בקנה מידה קטן, אלא גם למסכים התנהגותיים בעלי תפוקה גבוהה בזבובים.

To select food with nutritional value while avoiding the consumption of harmful agents, animals need a sophisticated and robust taste system to evaluate ...

הפרוטוקול שלנו נועד לבצע בדיקה נאותה עבור זבוב הפירות, שהוא אורגניזם מודל רב עוצמה המאפשר לעצב עבור כל הגנים, הקולטנים, הנוירונים וראשי נוירו-פסיכיאטריה המעורבים בתחושת בדיקה וצריכת מזון. כמו בני אדם לטוס כמו מזון כי טעם:מתוק, מעט מלוח, מעט חמוץ או לדחות מזון כי טעם מריר, מלוח מדי או חמוץ מדי. העוצמה של טכניקה זו נובעת מהמהירות והנוחות.באפשרותך לבדוק זבובים רבים ושונים בזמן קצר PRH ללא התקנה מורכבת. השיטה שלנו היא מעולה, מעולה assay להבנה אם זבובים כמו, בדיוק כמו מזון מסוים, כמו גם איך מוצרים גנים מסוימים משפיעים על העדפת הטעם. קביעה אם בעלי חיים לקבל או לדחות מזונות מסוימים יכול להיות מאתגר.לכן חשוב לקבוע פרוטוקול סטנדרטי לבדיקת העדפת טעם של בעלי חיים. כדי להכין בקבוקונים רעבים לבדיקה, לדחוס באופן רופף חתיכת רקמה בתחתית כל בקבוקון זבוב פלסטיק ריק לכל סוג גן זבוב להיבדק. כך שהנייר ממלא את החלל הזה מבלי ליצור מסה צפופה, בערך שלושה מיליליטר של מים טהורים לכל בקבוקון כדי לרוויה מלאה של הרקמות ללא מים עומדים.דואג כי אין טיפות גדולות של מים עודפים על הקירות של בקבוקונים. לחלופין, ניתן להחליף חמישה מיליליטרים של 1%אגרו ללא סוכרוז בנייר הספוג, 24 שעות לפני הניסוי שהרדים זבובים בני יומיים עד ארבעה ימים ומיין את הזבובים לקבוצות של כ-70. לאחר מכן הוסף כל קבוצה של זבובים לרעב נתעב ולתייג כל בקבוקון עם הגנוטיפ ואת הזמן של חניכה רעב.לפני ביצוע ניסוי, להכין מגוון של דילול עבור כל צבע באמצעות אותו מזון עם כל צבע צבע שונה. בשילוב 0.5 גרם של אגרוס עם 50 מיליליטר של מים טהורים בכלי בטוח מיקרוגל לחמם את הפתרון אגרו עד שהוא מומס ערבוב לפי הצורך. ממיסים כל רכיב מזון, כולל סוכרוז וכל תרכובות ניסיוניות במים בריכוז של פי 100 ומעלה של הריכוז הסופי שנבדק.ומערבבים את צבע האגרו ותרכובת ניסיונית רצויה בצינורות צנטריפוגה חרוטים ופוליפרופילן. לאחר ערבוב מניחים את הצינורות באמבט המים של 60 מעלות צלזיוס עד להפצה ומוסיפים מיליליטר אחד של צבע אחד של פתרונות המזון והצבע הניסיוניים לצד אחד של צלחת ההספד הראשונה. אפשר אגרוס להתקרר עד המשרד לפני הוספת מיליליטר אחד של פתרון מזון שליטה, שכותרתו עם צבע צבע השני לצד השני של המנה.ואז לחזור על הכנת צלחת assay, עם שליטה הפוכה זוג פתרון צבע ניסיוני. השתמש בתוצאות כדי לזהות שני ריכוזי צבע המניבים מדד העדפה של אפס. כאשר לא מתווסף תרכובת ניסיונית.כדי לבצע מבחני הזנה דו-כיווניים. הראשון שיתק זמנית זבוב ניסיוני אחד נתעב במשך שלוש עד חמש דקות על קרח עד שלא נצפו פעילויות מוטוריות ברורות כגון טיסה וטיפוס. לאחר הזבובים כבר משותק, בעדינות להפוך את הבקבוקון ואת הקש כדי להעביר את הזבובים לתוך תא התחת ולאחר מכן הניח במהירות את המכסה על התא.כאשר כל הקבוצות הועברו להעביר את כל תאי ההסתערות לחלל חשוך וסגור במשך 90 דקות. בסוף התסדרית להפוך את התאים במינוס 20 מעלות צלזיוס מקפיא, במשך כשעה. לפני הצבת כל תא תחת מיקרוסקופ סטריאו כדי לבחון את צבע הבטן של הזבובים בכל קבוצת ניסוי.לספור זבוב, אם הבטן היא יותר מ 50% צבעוני המציין האכלה חזקה, להשליך את כל הזבובים שבהם הבטן מכילה רק נקודת מזון זעירה, אשר מעיד על אכילה לקויה. כאשר כל הזבובים נספרו, השתמש במשוואה כדי לכמת את מדד העדפות המזון עבור כל קבוצה. במהלך המהלך, מנה של 35 מ"מ חולקה לשבועיים נאכל בתאים המכילים את מזונו של אגרו, יחד עם צבע אדום או כחול.כדי לא לכלול הטיית צבע, ריכוזי הצבע הכחול והאדום שוכללו בקפידה כדי להניב העדפת אפס משוערת כאשר רק שני צבעים אלה נוספו, 90 דקות לאחר זבוב מבוגר מורעב רטוב טעינת צבעי בטן bly הופיע כחול או אדום. אם החיה צרכה בעיקר מזון כחול או אדום, בהתאמה, אם זבוב נצרך הן כחול ואדום, הבטן נראתה סגולה. רק זבובים שבלעו כמות ניכרת של מזון קיבלו ציון, בעוד זבובים עם צריכת מזון לא מספקת לא נספרו.השוואת צלחת פטרי זו המבוססת על מבחנים לצלחת מרובת הבארות, גילתה ששתי שיטות ההאכלה העניקו למעשה את אותן תוצאות האכלה בתגובה למזון מתוק, מר ומלוח בזבובים מסוג בר. יש לציין, עם זאת זה הרבה יותר מהר להכין ולהפיץ מזון בצלחת פטרי מאשר בצלחת רב באר 60 היטב. הקפד לזהות איזה ריכוז צבע להשתמש במיוחד לאחר ביצוע אצווה דיאטה חדשה.ריכוז זה יכול להיות שונה בין קווי זבוב. הזוג שלנו היום מבוסס על שתי אפשרויות מבחנים הוא חזק מאוד מדי. עבורך לשאול איך זבובים, לחוש הן מסגרת פנימית-חיצונית פגום למצב אמיתי האכלה והתנהגות מתאימה.

a-rapid-food-preference-assay-in-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

סרטון זה מתאר בדיקת האכלה לזבובי פירות שבה משתמשים במזון צבעוני כדי לפקח על האכלה ועל ההשפעה שעשויה להיות לתרכובות נוספות על פעילות ההאכלה. הפרוטוקול לדוגמה בודק את ההשפעות של מספר כימיקלים משבשים אנדוקריניים (EDC).

מבחן האכלה: הערכת העדפות האכלה בדרוזופילה מלנוגסטר

סרטון זה מתאר את מבחן העדפות הטעם, שיטה התנהגותית המשמשת למדידת משיכה או הימנעות כלפי תמיסות צבעוניות שטעמן שונה על ידי הערכת צבע הבטן של הזבוב לאחר בליעת החומר המועדף. הפרוטוקול המוצג מדגים את ההליך המשמש למדידת העדפת זבובים לתמיסות בריכוזי סוכרוז משתנים.

בדיקת העדפות טעם: שיטה למדידת התנהגות האכלה בדרוזופילה

סרטון זה מתאר את CApillary FEeder, או CAFE, assay, שיטה התנהגותית המודדת צריכת מזון והעדפה של זבובי פירות בלתי מרוסנים. הפרוטוקול המוצג מראה כיצד לבצע את הבדיקה עם אידוי מינימלי מהנימים המלאים בנוזל המשמשים להעברת המזון ולעקוב אחר צריכתו.

בדיקת CApillary FEeder (CAFE): שיטה למעקב אחר צריכת מזון והעדפתו בדרוזופילה

נקבות דרוזופילה בוחרות בין מצעים ובוחרות אתרים אטרקטיביים להטלת ביצים. סרטון זה מתאר בדיקה התנהגותית שבוחנת את קבלת ההחלטות שלהם, הנקראת בדיקת העדפת הטלת ביצים. הסרטון המוצג מדגים את ההליך עם מערך שנבנה בהתאמה אישית, המאפשר לחוקרים לא רק לבחון את התנהגותן של נקבות רבות בו זמנית, אלא גם תואם להקלטת וידאו והגדרות אופטוגנטיות.

דרוזופילה בדיקת העדפת הטלת ביצים: שיטה לבדיקת קבלת החלטות בזבובים

במאמר זה וידאו, אנו מתארים assay אוטומטי כדי למדוד את ההשפעה של רעב או שובע על התנהגות חיפוש מזון תלויה בריח הפירות המבוגרים לעוף melanogaster דרוזופילה.

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב דרוזופילה

בדיקות פשוטות למדידת רגישות לאתנול וסבילות מהירה בדרוזופילה מקלות על השימוש באורגניזם מודל זה לחקירת התנהגויות חשובות אלה הקשורות לאתנול. כאן מתוארת בדיקה פשוטה יחסית וניתנת להרחבה למדידת רגישות לאתנול וסבילות מהירה בזבובים.

Assay זול, Scalable התנהגות למדידת אתנול הרגעת רגישות וסובלנות מהירה ב<em&gt; דרוזופילה</em

פרוטוקול זה מתאר בדיקת תפוקה גבוהה לבדיקת העדפות הטלת ביצים של Drosophila melanogaster ברזולוציה של בעל חיים יחיד.  בדיקה זו מספקת פלטפורמה פשוטה, יעילה וניתנת להרחבה לזיהוי גנים ורכיבי מעגלים השולטים בתהליך קבלת החלטות פשוט.

Assay תפוקה גבוהה לבחינת העדפות הטלה של פרט<em&gt; תסיסנית</em

טעם הוא תהליך חושי חשוב המאפשר משיכה לחומרים מועילים והימנעות מחומרים רעילים.  פרוטוקול זה מתאר מבחן בליעה פשוט לקביעת העדפת טעם של דרוזופילה לתרכובת כימית נתונה.

Assay העדפות טעם למבוגרים<em&gt; תסיסנית</em

אנו מתארים פרוטוקול גרימת מתגמל nonrewarding חוויות בזבובי פירות (תסיסנית) באמצעות צריכת אתנול מרצון כאמצעי לשינויים במדינות גמול.

דרך פשוטה למדוד שינויים בהתנהגות שוחרת זכה שימוש<em&gt; תסיסנית</em

בדיקת FEeder (CAFE) היא שיטה פשוטה, ידידותית לתקציב ואמינה ביותר לחקירת מנגנונים העומדים בבסיס צריכת מזון. בשימוש עם אורגניזם המודל הגנטי הרב-תכליתי Drosophila melanogaster, הוא מספק אמצעי רב עוצמה להשגת תובנות חדשות לגבי מנגנוני ויסות צריכת מזון.

את assay נימי מזין מודד צריכת המזון ב<em&gt; תסיסנית</em

מבחני צריכת המזון כמותיים באוכל צבוע לספק חזקים, תפוקה גבוהה אומר להעריך את המוטיבציה האכלה. שילוב וזמינותו צריכת מזון עם thermogenetic ו optogenetic המסכים היא גישה רב-עוצמה כדי לחקור את המעגלים העצביים שבבסיס התיאבון למבוגרים melanogaster דרוזופילה.

שילוב של צריכת המזון כמותיים מבחני והפעלת בכפייה נוירונים ללמוד תיאבון בשנת דרוזופילה

למדו פרוטוקול מהיר להערכת העדפת מזון ב-Drosophila melanogaster באמצעות צלחת פטרי עם שני צבעי מאכל. השיטה מאפשרת סינון יעיל של השפעות גנטיות על התנהגות אכילה וחוסכת זמן רב בהשוואה למבחני רב-באר.

מבחני העדפת מזון מהירה בדרוסופילה

גלה סרטונים נוספים