Name: השתלת איון מכוסה שומן באמצעות רקמת שומן לבן אפידידימלית (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: למדו שיטת השתלת איונים מכוסי שומן לתוך רקמת שומן לבן אפידידימלית בעכברים. שיטה זו מאפשרת זיהוי קל של האיונים המושתלים ללא חומרי קישור או תפרים, ומייעלת את מחקר השתלות האיונים בטיפול בסוכרת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה מומן על ידי מענק סיוע למחקר מדעי (C) (19K09839, NS) ממשרד החינוך, התרבות, הספורט, המדע והטכנולוגיה של יפן.

ההליך הבא מבוצע בשלושה שלבים. הצעד הראשון כולל השראת סוכרת בעכברים המקבלים ובידוד של איים תורמים. השלב השני כרוך בהכנת איים לפני ההשתלה. בשלב השלישי מתבצעת השתלת איון על רקמת השומן האפידידימלית וכיסוי האיים באמצעות רקמת השומן. לאחר מכן, ההשפעות הטיפוליות הוערכו. הטיפול בעכברים וההליכים הניסיוניים שבוצעו במחקר זה עולים בקנה אחד עם "עקרונות הטיפול בחיות מעבדה" (מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה, המכונים הלאומיים לבריאות מהדורה8, 2011), והפרוטוקול הניסויי אושר על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת פוקואוקה (מספר אישור: 186018).
1. הכנה כירורגית
<ol><li>אינדוקציה של סוכרת: לגרום לסוכרת במשקל גוף של 20-25 גרם, עכברים זכרים מושתלים בני 8-12 שבועות באמצעות הזרקה תוך ורידית של 18 מ"ג/מ"ל תמיסת סטרפטוזוטוצין שהוכנה בחיץ ציטראט של 0.1M (180 מ"ג/ק"ג משקל גוף). עכברים עם רמות גלוקוז בדם העולות על 400 מ"ג/דצ"ל נחשבים לחולי סוכרת. השתמש בעכברים סוכרתיים בתוך שבוע לאחר השראת סוכרת לפני ניוון מוגזם של רקמת השומן הלבן האפידידימלי לכיסוי איונים.</li>
	<li>בידוד איים: בצעו בידוד איון מורין יום אחד לפני ההשתלה בהתאם לשיטה27 של Gotoh לבידוד איון.</li>
	<li>בקצרה, לעכל רקמת הלבלב באמצעות פתרון collagenase. לבודד איונים על ידי צנטריפוגה הדרגתית צפיפות באמצעות פתרון הפרדת תאים מתאים. לאחר מכן איים תרבותיים לילה באינקובטור ב 22 °C ו 5% CO2 (תרבות ב <37 °C דווח כדי למנוע מוות איון 28,29,30,31). הערה: טפל בתרביות האיים המטוהרים בארון בטיחות. סנן-עקר את כל הפתרונות המשמשים לבידוד ותרבית איים באמצעות מסנן 0.22 מיקרומטר.</li>
</ol>2. הכנת איים להשתלה
<ol><li>אספו את המכשירים והחומרים המתאימים כפי שמצוין באיור 1A.</li>
	<li>מכיוון שאנזימי עיכול כמו עמילאז וליפאז עלולים לגרום לפגיעה באיים המבודדים והמושתלים, ואובדן של איונים יכול להתרחש כתוצאה מלהילכד ברקמות סיביות מזהמות בתוך צלחת התרבית, לפני ההשתלה, השתמשו במלקחיים כדי לבחור ידנית רכיבים חוץ-איונים מהלבלב, כולל אקסינאר ורקמות סיביות (איור 1B), תחת מיקרוסקופ מנתח. לאחר הקטיף, השתמש במסננת תאים כדי לסנן תאי אצנר בודדים.</li>
	<li>העבירו את האיים המסוננים לצלחת תרבית חדשה המכילה כל מדיום תרבית או תמיסת חיץ מתאימים (למשל, DMEM עם גלוקוז נמוך, RPMI1640, CMRL1066 או HBSS) בתוספת סרום בקר או אלבומין כדי למנוע חיבור איון לפלסטיק וסובבו את התבשיל כך שימקם את האיים במרכז המנה (איור 1C). באמצעות מיקרופיפטה P200 והמיקרוסקופ, בחרו את האיים הבודדים לתוך צינור איסוף מתאים (איור 1D).</li>
	<li>הניחו מסננת תאים חדשה בגודל 40 מיקרומטר על גבי צינור פלסטיק בנפח 50 מ"ל (איור 1E משמאל ובמרכז) ושטפו את המסנן במדיום טרי (איור 1E מימין).</li>
	<li>השתמשו בפיפטה של 1000 μL כדי להוסיף את האיים למסננת כדי להפריד בין האיים לתאי אצנר בודדים (איור 1 F1 ואיור 1F2). הערה: האיים המטוהרים במסננת התא יהיו טהורים בכ-100%.</li>
	<li>השתמשו במלקחיים כדי להפוך את המסננת על צלחת תרבית חדשה בגודל 60 או 100 מ"מ שאינה מטופלת, המכילה מדיום תרבית או תמיסת חיץ מתאימה בתוספת סרום בקר או אלבומין (איור 1 F3 ואיור 1F4). השתמשו במדיום/חיץ טרי כדי לשטוף את האיים למנת תרבות חדשה. לאחר מכן הוסיפו מספיק מדיום/חיץ למנת התרבית כדי להגיע לנפח כולל של כ-20 מ"ל.</li>
	<li>ספרו את האיים תחת מיקרוסקופ וחלקו את מספר האיים באופן שווה בין צינורות צנטריפוגות פלסטיק בודדים בגודל 1.5 מ"ל בהתאם למספר בעלי החיים התורמים (איור 1G). לדוגמה, מאתיים, 100-200 מיקרומטר שווה ערך איון (IEQ) משני עכברים יתווספו לכל אחד משני צינורות.</li>
	<li>צנטריפוגה של האיים ב 2,100 x גרם בתוך דקה אחת בטמפרטורת החדר ולהשליך את supernatant. כ-20-30 μL של תמיסה שיורית יישארו בדרך כלל בצינור (איור 1H).</li>
</ol>3. השתלת איון על רקמת שומן אפידידימלית וכיסוי ברקמת שומן לבנה אפידידימלית
<ol><li>לפני הניתוח, אספו מכונת הרדמה לבעלי חיים קטנים, מיקרוסקופ סטריאו, מקור אור, מיקרופיפט 50-200 μL עם קצוות מיקרופיפטה של 200 μL, מקלוני צמר גפן, ערכת תפירה של 4-0 וכלי ניתוח מחוטאים (איור 2A). אוטוקלאב את מספריים קופר, מספריים אופתלמיים, מלקחיים Pean מלקחיים, פינצטה, ומחזיקי מחטים. לאחר אוטוקלב, טבלו את הציוד בתמיסת 1% פובידון-יוד (איור 2A). השתמש צמר גפן לגיוס של רקמת השומן הלבן epididymal ועל hemostasis במקרים של דימום. השתמש micropipette עם 50-200 μL טיפים להשתלת איון.</li>
	<li>לספק הרדמה לעכבר מושתל סוכרת באמצעות חומר הרדמה בשאיפה (2% איזופלוראן בחמצן). יש למרוח חומר סיכה אופתלמי על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות. לאחר מכן הניחו את העכבר במצב שכיבה (איור 2B משמאל) והסירו את השיער מהבטן כדי למנוע זיהום באמצעות קוצצי שיער ו/או קרם דפילציה. חיטוי הבטן ואזור המפשעה באמצעות לפחות שלושה סיבובים מתחלפים של תמיסת פובידון-יוד ואחריה 70% אתנול (איור 2B מימין). לפני הניתוח יש לאשר את עומק ההרדמה באמצעות היעדר רפלקס צביטה בבוהן. ספק תמיכה תרמית תוך ניתוחית באמצעות כרית חימום והשתמש בווילון כירורגי כדי לאבטח את אזור הניתוח הסטרילי.</li>
	<li>חתכו את העור באזור החציוני התחתון (איור 2C משמאל). מומלץ לבצע חתך בעור שאורכו כ-2 ס"מ. הדקו את דופן הבטן השמאלית באמצעות מלקחיים מסוג Pean (ניתן להשתמש גם במלקחיים א-טראומטיים או במלקחיים) ומשכו את הרקמה לצד שמאל של העכבר כדי לאבטח את שדה הניתוח (איור 2C מימין). לאחר לפרוטומיה, להקטין את אחוז isoflurane ל 1.0-1.5% עבור תחזוקת הרדמה.</li>
	<li>השתמש בצמר גפן כדי לגייס את המעי הדק והגס לצד ימין של העכבר (כלומר, צד שמאל של המפעיל). רקמת השומן הלבנה האפידידימלית השמאלית בחלל הבטן ממוקמת באזור המפשעה השמאלי. גייסו את רקמת השומן הלבן האפידידימלי ואת האשך השמאלי אל מחוץ לבטן (איור 2D משמאל) ומתחו את הרקמה (2D מימין).</li>
	<li>השתמשו במיקרו-פיפטה P200 המצוידת בקצה פיפטה של 200 μL כדי לאסוף את כל נפח האיים מצינור אחד של 1.5 מ"ל עם פיפטינג עדין (איור 2E משמאל), ודאגו שלא יישארו איונים בצינור לאחר האיסוף. אפשרו לאיים שנאספו להתיישב בקצה הפיפטה באמצעות כוח הכבידה (איור 2E מימין).</li>
	<li>מניחים קלות את קצה המיקרופיפטה על רקמת השומן המנופחת. תוך הקפדה על מניעת שטיפה מוגזמת של המדיום/חיץ בקצה, זרעו בזהירות את האיים על הרקמה (איור 2F משמאל). לאחר הזריעה, אשרו מיקום נכון של האיים תחת מיקרוסקופ מנתח (איור 2F מימין).</li>
	<li>כסו את האיים ברקמת השומן הלבן האפידידימלי (איור 2G). אין צורך בשימוש בתפרים או בחומרים מחייבים ביולוגית.</li>
	<li>מקמו את האשך השמאלי מתחת לרקמת השומן הלבן האפידידימלי והחזירו את הרקמות לחלל התוך-צפק (איור 2H). סגרו את העור בשתי שכבות (פריטונאום, ואז שרירים ועור) באמצעות תפר 4-0 (ניתן להשתמש בתפרים כגון ניילון או תפרים נספגים) (איור 2I). להזריק חומצה אצטילסליצילית (300 מ"ג/ק"ג; SQ) ליד הפצע לשיכוך כאבים לאחר הניתוח. לאחר מכן הנח את העכבר מתחת למנורת חום ונטר עד להתאוששות מלאה.</li>
</ol>4. ניטור לאחר השתלת איון (סיכום)
<ol><li>הערך את ההשפעות הטיפוליות של השתלת איון על ידי ניטור רמת הגלוקוז בדם, בדיקת סבילות לגלוקוז והערכה היסטולוגית ביום שלאחר הניתוח (POD) 28.<ol><li>עקוב אחר רמת הגלוקוז בדם, כולל מדידות הגלוקוז בדם בבדיקת סבילות לגלוקוז, באמצעות מד סוכר קטן.</li>
		<li>לאסוף את דגימות הדם (קצת microliters) מווריד הזנב. לגבי הערכה היסטולוגית, אינסולין מורין (לאיתור איונים מושתלים) וגורם פון וילברנד (לגילוי כלי שיט, המהווה עדות לחריטת איים) התגלו באיים מושתלים ברקמת השומן האפידידימלית המשוחזרת על ידי אימונוהיסטוכימיה.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Barton, F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+outcomes+of+clinical+islet+transplantation%3A+1999-2010%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Improvement in outcomes of clinical islet transplantation: 1999-2010.</a> Diabetes Care. 35 (7), 1436-1445 (2012).</li>
<li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+product+characteristics+and+factors+related+to+successful+human+islet+transplantation+from+the+Collaborative+Islet+Transplant+Registry+%28CITR%29+1999-2010%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Islet product characteristics and factors related to successful human islet transplantation from the Collaborative Islet Transplant Registry (CITR) 1999-2010.</a> American Journal of Transplantation. 14 (11), 2595-2606 (2014).</li>
<li>Collaborative Islet Transplant Registry. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Collaborative+Islet+Transplant+Registry.+Annual+Report%22">Collaborative Islet Transplant Registry. Annual Report</a>. , (2017).</li>
<li>Rajab, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+Pancreatectomy+and+Islet+Autotransplantation+Following+Treated+Hepatitis+C+Infection%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Total Pancreatectomy and Islet Autotransplantation Following Treated Hepatitis C Infection.</a> Cell Transplantation. 27 (10), 1569-1573 (2018).</li>
<li>Mellgren, A., Schnell Landstrom, A. H., Petersson, B., Andersson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+renal+subcapsular+site+offers+better+growth+conditions+for+transplanted+mouse+pancreatic+islet+cells+than+the+liver+or+spleen%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">The renal subcapsular site offers better growth conditions for transplanted mouse pancreatic islet cells than the liver or spleen.</a> Diabetologia. 29 (9), 670-672 (1986).</li>
<li>Hiller, W. F., Klempnauer, J., Luck, R., Steiniger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+deterioration+of+endocrine+function+after+intraportal+but+not+kidney+subcapsular+rat+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Progressive deterioration of endocrine function after intraportal but not kidney subcapsular rat islet transplantation.</a> Diabetes. 40 (1), 134-140 (1991).</li>
<li>Yasunami, Y., Lacy, P. E., Finke, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+site+for+islet+transplantation--a+peritoneal-omental+pouch%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A new site for islet transplantation--a peritoneal-omental pouch.</a> Transplantation. 36 (2), 181-182 (1983).</li>
<li>Kin, T., Korbutt, G. S., Rajotte, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+and+metabolic+function+of+syngeneic+rat+islet+grafts+transplanted+in+the+omental+pouch%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Survival and metabolic function of syngeneic rat islet grafts transplanted in the omental pouch.</a> American Journal of Transplantation. 3 (3), 281-285 (2003).</li>
<li>Kasoju, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+a+pre-vascularized+pouch+for+subsequent+islet+transplantation+using+VEGF-loaded+polylactide+capsules%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials+Science%22%5BJournal%5D)">Bioengineering a pre-vascularized pouch for subsequent islet transplantation using VEGF-loaded polylactide capsules.</a> Biomaterials Science. 8 (2), 631-647 (2020).</li>
<li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White+Adipose+Tissue+as+a+Site+for+Islet+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantology%22%5BJournal%5D)">White Adipose Tissue as a Site for Islet Transplantation.</a> Transplantology. 1 (2), 55-70 (2020).</li>
<li>Osama Gaber, A., Chamsuddin, A., Fraga, D., Fisher, J., Lo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+independence+achieved+using+the+transmesenteric+approach+to+the+portal+vein+for+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Insulin independence achieved using the transmesenteric approach to the portal vein for islet transplantation.</a> Transplantation. 77 (2), 309-311 (2004).</li>
<li>Fujita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technique+of+endoscopic+biopsy+of+islet+allografts+transplanted+into+the+gastric+submucosal+space+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Technique of endoscopic biopsy of islet allografts transplanted into the gastric submucosal space in pigs.</a> Cell Transplantation. 22 (12), 2335-2344 (2013).</li>
<li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategy+for+clinical+setting+in+intramuscular+and+subcutaneous+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%2FMetabolism+Research+and+Reviews%22%5BJournal%5D)">Strategy for clinical setting in intramuscular and subcutaneous islet transplantation.</a> Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 30 (1), 1-10 (2014).</li>
<li>Cantarelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplant+Site+Influences+the+Immune+Response+After+Islet+Transplantation%3A+Bone+Marrow+Versus+Liver%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Transplant Site Influences the Immune Response After Islet Transplantation: Bone Marrow Versus Liver.</a> Transplantation. 101 (5), 1046-1055 (2017).</li>
<li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+risks+of+total+pancreatectomy+and+splenic+islet+autotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The risks of total pancreatectomy and splenic islet autotransplantation.</a> Cell Transplantation. 9 (1), 19-24 (2000).</li>
<li>Itoh, T., Nishinakamura, H., Kumano, K., Takahashi, H., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Spleen+Is+an+Ideal+Site+for+Inducing+Transplanted+Islet+Graft+Expansion+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The Spleen Is an Ideal Site for Inducing Transplanted Islet Graft Expansion in Mice.</a> PLoS One. 12 (1), 0170899(2017).</li>
<li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Spleen+as+an+Optimal+Site+for+Islet+Transplantation+and+a+Source+of+Mesenchymal+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">The Spleen as an Optimal Site for Islet Transplantation and a Source of Mesenchymal Stem Cells.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), (2018).</li>
<li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+rat-to-mouse+bioartificial+pancreas+xenotransplantation+on+diabetic+renal+damage+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">Effect of rat-to-mouse bioartificial pancreas xenotransplantation on diabetic renal damage and survival.</a> Pancreas. 32 (3), 249-257 (2006).</li>
<li>Nagaya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effectiveness+of+bioengineered+islet+cell+sheets+for+the+treatment+of+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Effectiveness of bioengineered islet cell sheets for the treatment of diabetes mellitus.</a> Journal of Surgical Research. 227, 119-129 (2018).</li>
<li>Weaver, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasculogenic+hydrogel+enhances+islet+survival%2C+engraftment%2C+and+function+in+leading+extrahepatic+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Vasculogenic hydrogel enhances islet survival, engraftment, and function in leading extrahepatic sites.</a> Science Advances. 3 (6), 1700184(2017).</li>
<li>Dufour, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+ectopic+site+for+islet+transplantation%2C+using+biodegradable+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Development of an ectopic site for islet transplantation, using biodegradable scaffolds.</a> Tissue Engineering. 11 (9-10), 1323-1331 (2005).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epididymal+fat+pad+as+a+transplant+site+for+minimal+islet+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The epididymal fat pad as a transplant site for minimal islet mass.</a> Transplantation. 84 (1), 122-125 (2007).</li>
<li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+Transplanted+Islet+Engraftment+in+Visceral+White+Adipose+Tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Mechanism of Transplanted Islet Engraftment in Visceral White Adipose Tissue.</a> Transplantation. 104 (12), 2516-2527 (2020).</li>
<li>Navarro-Requena, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PEG+hydrogel+containing+calcium-releasing+particles+and+mesenchymal+stromal+cells+promote+vessel+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">PEG hydrogel containing calcium-releasing particles and mesenchymal stromal cells promote vessel maturation.</a> Acta Biomaterialia. 67, 53-65 (2018).</li>
<li>Phelps, E. A., Headen, D. M., Taylor, W. R., Thule, P. M., Garcia, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasculogenic+bio-synthetic+hydrogel+for+enhancement+of+pancreatic+islet+engraftment+and+function+in+type+1+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Vasculogenic bio-synthetic hydrogel for enhancement of pancreatic islet engraftment and function in type 1 diabetes.</a> Biomaterials. 34 (19), 4602-4611 (2013).</li>
<li>Manzoli, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunoisolation+of+murine+islet+allografts+in+vascularized+sites+through+conformal+coating+with+polyethylene+glycol%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Immunoisolation of murine islet allografts in vascularized sites through conformal coating with polyethylene glycol.</a> American Journal of Transplantation. 18 (3), 590-603 (2018).</li>
<li>Gotoh, M., Maki, T., Kiyoizumi, T., Satomi, S., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+isolation+of+mouse+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">An improved method for isolation of mouse pancreatic islets.</a> Transplantation. 40 (4), 437-438 (1985).</li>
<li>Brandhorst, D., Brandhorst, H., Hering, B. J., Bretzel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival%2C+morphology+and+in+vitro+function+of+isolated+pig+islets+under+different+culture+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Long-term survival, morphology and in vitro function of isolated pig islets under different culture conditions.</a> Transplantation. 67 (12), 1533-1541 (1999).</li>
<li>Noguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-temperature+preservation+of+isolated+islets+is+superior+to+conventional+islet+culture+before+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Low-temperature preservation of isolated islets is superior to conventional islet culture before islet transplantation.</a> Transplantation. 89 (1), 47-54 (2010).</li>
<li>Itoh, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+temperature+condition+prevents+hypoxia-induced+islet+cell+damage+and+HMGB1+release+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Low temperature condition prevents hypoxia-induced islet cell damage and HMGB1 release in a mouse model.</a> Cell Transplantation. 21 (7), 1361-1370 (2012).</li>
<li>Komatsu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+Temperature+and+Oxygen+Supports+Long-term+Culture+of+Human+Islets%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Optimizing Temperature and Oxygen Supports Long-term Culture of Human Islets.</a> Transplantation. 103 (2), 299-306 (2019).</li>
<li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+overload+and+overflow%3A+metabolic+trauma+and+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Endocrinology%2C+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Lipid overload and overflow: metabolic trauma and the metabolic syndrome.</a> Trends in Endocrinology, Metabolism. 14 (9), 398-403 (2003).</li>
<li>Mao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+macroporous+heparin-releasing+silk+fibroin+scaffold+improves+islet+transplantation+outcome+by+promoting+islet+revascularisation+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomaterialia%22%5BJournal%5D)">A macroporous heparin-releasing silk fibroin scaffold improves islet transplantation outcome by promoting islet revascularisation and survival.</a> Acta Biomaterialia. 59, 210-220 (2017).</li>
<li>Wang, K., Wang, X., Han, C. S., Chen, L. Y., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-supported+Transplantation+of+Islets+in+the+Epididymal+Fat+Pad+of+Diabetic+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Scaffold-supported Transplantation of Islets in the Epididymal Fat Pad of Diabetic Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e54995(2017).</li>
<li>Wang, X., Wang, K., Zhang, W., Qiang, M., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+bilaminated+decellularized+scaffold+for+islet+transplantation%3A+Structure%2C+properties+and+functions+in+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A bilaminated decellularized scaffold for islet transplantation: Structure, properties and functions in diabetic mice.</a> Biomaterials. 138, 80-90 (2017).</li>
<li>Rios, P. D., Zhang, X., Luo, X., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mold-casted+non-degradable%2C+islet+macro-encapsulating+hydrogel+devices+for+restoration+of+normoglycemia+in+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Mold-casted non-degradable, islet macro-encapsulating hydrogel devices for restoration of normoglycemia in diabetic mice.</a> Biotechnology and Bioengineering. 113 (11), 2485-2495 (2016).</li>
</ol>

אין לנו ניגוד עניינים.

שיטת השתלת האיים המכוסים בשומן משלבת טכניקות משתי טכניקות השתלה שונות: השתלת איון תוך-צפקי והשתלת איון רקמת שומן. מכיוון שקרום פני השטח של רקמת השומן הלבן האפידידימלי נחשב לרקמת השומן הלבנה המכוסה על ידי הצפק ומחוברת לאפידידימיס, ניתן לסווג אנטומית את שיטת השתלת האיים המכוסים בשומן כסוג של השתלת איון תוך-צפקי. עם זאת, הטכניקה שבה האיים מועברים לבעל החיים המקבל דומה יותר לזו המשמשת בהשתלת איון תוך שומן. הנתונים שלנו מראים כי ההשפעה הטיפולית של שיטת השתלת האיים המכוסים בשומן עדיפה על זו של השתלת איון תוך-צפקי. המחקר הקודם ...

השתלת איים היא טיפול תחליפי תאים לחולים עם סוכרת קשה. דיווחים אחרונים הראו כי שיעורי עצמאות האינסולין בשלוש שנים לאחר ההשתלה משתפרים עד 44%1 וכי כ -80% מהמושתלים המקבלים יותר מ -600,000 שווה ערך לאיים בסך הכל משיגים עצמאות אינסולין2. יתר על כן, בדו"ח האחרון של מרשם השתלות האיים השיתופיים, התגלה כי רמות הגלוקוז בדם בצום נשמרו על 60-140 מ"ג/דצ"ל במשך תקופה של 5 שנים ביותר מ-70% מהחולים שעברו השתלת איון בלבד. המחקר גם קבע כי כ-90% מהחולים שקיבלו השתלת איון בלבד או השתלת איון לאחר השתלת כליה לא פיתחו אירועי היפוגליקמיה חמורים במשך למעלה מ-5 שנים3.
למרות שהתוצאות הקליניות של טיפול זה השתפרו, עדיין יש להתייחס לכמה מגבלות, כולל הצורך בהקמת אתר השתלה אופטימלי. הכבד הוא אתר השתלה טיפוסי להשתלת איונים קלינית מכיוון שהוא האיבר הגדול ביותר שיכול להכיל נפח גבוה של איונים. עם זאת, בחלק מהחולים הכבד אינו זמין (למשל, עקב יתר לחץ דם פורטלי, הפטיטיס ו / או שחמת4) ולכן אתרים אחרים, כולל החלל התת-קפסולרי הכלייתי5,6, שקית omental 7,8,9,10, mesentery 11, מערכת העיכול 12, שרירי השלד 13, רקמה תת עורית 13, מח עצם 14, וטחול 15 ,16,17, נחשבו כאתרי השתלה חלופיים.
למרות שהשתלת איון תוך-צפקית יכולה להתבצע בקלות בהרדמה מקומית, מה שהופך את החלל התוך-צפקי לאתר מושך להשתלת איון קלינית, עם ההשתלה, האיים מפוזרים לאורך כל החלל התוך-צפקי, מה שמקשה על זיהוי השתלת איון ואישור חריטה מוצלח. לכן, חלל intraperitoneal אינו מוכר באופן נרחב כאתר השתלה קליני אידיאלי. במקום זאת, הוא משמש לעתים קרובות כמודל בקרה למחקרים פרה-קליניים כדי לחקור את היעילות של 18 מושתלים18 ואיונים מהונדסים ביולוגית19. עם זאת, השוואה מדויקת בין איים מהונדסים ביולוגית לבין איי בקרה קשה להשיג בשל האתגרים בביצוע הערכת חריטה מדויקת.
לעומת זאת, השימוש ברקמת שומן לבנה תוך-צפקית בשקית האומנטלית8, במזנטריה ובמיקומים חוץ-כבדיים אחרים דווח היטב 10,20,21,22,23 ורבים מהמחקרים שבחנו את תפקודם של איים מהונדסים ביולוגית שהושתלו באמצעות רקמת שומן לבנה הצליחו לדווח על תוצאות טיפוליות מבטיחות20,24,25, 26. מכיוון שהשימוש ברקמת שומן אפידידימלית מקל על איתור איים מושתלים, פותחה "שיטת השתלת האיים המכוסים בשומן", תוך שימוש ברקמת שומן אפידידימלית, כדי להתגבר על המגבלות של השתלת איון תוך-צפקי. במאמר זה מתוארת השתלת איון מכוסה שומן באמצעות רקמת שומן אפידידימלית.

<table><tbody><tr><td>4-0 ניילון</td><td>אלפרסה</td><td>ER2004NA45-KF2</td><td>סגירת בטן</td></tr><tr><td>אלקסה 488 חמור מצומד אנטי שרקן</td><td>ג'קסון Immunoresearch</td><td>706-546-148</td><td>נוגדן משני לנוגדני אינסולין</td></tr><tr><td>אלקסה 647 חמור מצומד אנטי ארנב</td><td>ג'קסון Immunoresearch</td><td>711-606-152</td><td>נוגדן משני לנוגדני פקטור פון ווילברנד</td></tr><tr><td>DMEM, גלוקוז נמוך, פירובט</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11885084</td><td>איים תרבותיים, השתלת איים</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Fujifilm Wako Chemicals</td><td>051-06515</td><td>שימוש לצביעה של רקמות על ידי eosin</td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 1.5 מ"ל</td><td>Eppendorf</td><td>30120086</td><td>איי איסוף&nbsp;</td></tr><tr><td>פלקון 15 מ"ל צינורות צנטריפוגה חרוטיים</td><td>קורנינג</td><td>352095</td><td>איים איסוף</td></tr><tr><td>Falcon 40 ומיקרו; m מסננת תאים</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td>שימוש להפרדת איים מרקמת לבלב אחרת</td></tr><tr><td>Falcon 50 מ"ל צינורות צנטריפוגה חרוטיים</td><td>קורנינג</td><td>352070</td><td>השלכת מוגזם בינוני / חוצץ</td></tr><tr><td>שרקנים אנטי אינסולין</td><td>Agilent Technologies Japan, Ltd. (Dako)</td> <td>IR002</td><td>נוגדן ראשוני לאינסולין עכברים</td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Muto Pure Chemicals Co., Ltd.</td><td>30002</td><td>שימוש לצביעה של רקמות על ידי תמיסת המטוקסילין</td></tr><tr><td>איזודין 10%</td> <td>Shionogi & Co., Ltd.</td><td>אין מספר קטלוגי</td><td>שימוש לחיטוי</td></tr><tr><td>איזופלורן</td><td>פוג'יפילם וואקו כימיקלים</td><td>095-06573</td><td>שימוש להרדמה</td></tr><tr><td>Labcon 1000 ומיקרו; L ZapSilk קצות פיפטה עם שמירה נמוכה</td><td>Labcon</td><td>1177-965-008</td><td>שימוש להפרדת איים מרקמת לבלב אחרת</td></tr><tr><td>Labcon 200 ומיקרו; L ZapSilk Low Retention Pipette Tips</td><td>Labcon</td><td>1179-965-008</td><td>שימוש לזריעת איים על רקמת שומן לבנה אפידידימלית</td></tr><tr><td>Mintsensor</td><td>Sanwa Kagaku Kenkyusho Co. Ltd.,</td> <td>8AEB02E</td><td>שימוש לניטור רמת הגלוקוז בדם</td></tr><tr><td>Pipetteman P-1000</td><td>Gilson</td><td>F123602</td><td>שימוש להפרדת איים מרקמת לבלב אחרת</td></tr><tr><td>Pipetteman P-200</td><td>Gilson</td><td>F123601</td><td>שימוש לזריעת איים על רקמת שומן לבנה אפידידימלית</td></tr><tr><td>ארנב אנטי-vWF</td><td>Abcam</td><td>ab6994</td><td>נוגדן ראשוני לגורם עכברי פון ווילברנד</td></tr></tbody></table>

השתלת איון מכוסה שומן באמצעות רקמת שומן לבן אפידידימלית

Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue

השתלת איון היא טיפול חלופי תאי לסוכרת קשה. החלל התוך-צפקי הוא בדרך כלל אתר ההשתלה להליך זה. עם זאת, להשתלת איון תוך-צפקית יש כמה מגבלות, כולל יעילות השתלה ירודה, יכולת זיהוי שתלים קשה והיעדר יכולת השתלה לניתוח לאחר ההשתלה. במאמר זה, "השתלת איון מכוסה שומן", שיטת השתלת איון תוך-צפקית המשתמשת ברקמת שומן לבנה אפידידימלית, משמשת להערכת ההשפעות הטיפוליות של איים מהונדסים ביולוגית. פשטות השיטה טמונה בזריעת איים על רקמת שומן לבן אפידידימלי ושימוש ברקמה לכיסוי האיונים. בעוד שניתן לסווג שיטה זו כטכניקת השתלת איון תוך-צפקית, היא חולקת מאפיינים עם השתלת איון רקמת שומן. עם זאת, שיטת השתלת האיים המכוסים בשומן מדגימה השפעות טיפוליות חזקות יותר מאשר השתלת איון רקמת שומן תוך-שומנית, כולל שיפור רמות הגלוקוז בדם והאינסולין בפלזמה והפוטנציאל להסרת שתלים. אנו ממליצים על אימוץ שיטה זו להערכת המנגנונים של השתלת איונים ברקמת שומן לבנה ואת ההשפעות הטיפוליות של איים מהונדסים ביולוגית.

כדי להשוות את יעילות ההשתלה של השתלת איון מכוסה שומן לזו שלאחר השתלת איון תוך-צפקי, אותו מספר של איים הושתל על הצפק בחלל הפרקולי השמאלי של בעלי חיים סוכרתיים מושתלי בקרה. רמות הגלוקוז בדם של עכברים עם השתלת איון מכוסה שומן נצפו לרדת בהדרגה ובאופן משמעותי בהשוואה לעכברים מושתלים באיון תוך-צפקי (p = 0.0023; איור 3A). חודש לאחר ההשתלה, רמת הגלוקוז בדם בעכברים עם השתלת איון מכוסה שומן נשמרה ברמות נמוכות יותר מזו שנצפתה בעכברים מושתלים באיים תוך-צפקיים, כפי שהוערך על ידי בדיקת סבילות לגלוקוז תוך-...

שיטת השתלת איונים מכוסה שומן זו מתאימה לאיתור איים מושתלים בחלל התוך-צפק. יש לציין כי היא אינה דורשת שימוש בחומרים מחייבים ביולוגיים או בתפירה.

Islet transplantation is a cellular replacement therapy for severe diabetes mellitus. The intraperitoneal cavity is typically the transplant site for this ...

פרוטוקול זה מאפשר להעריך את המנגנון של השתלת איון לתוך רקמת שומן לבן. היתרון העיקרי של שיטת השתלת איון מכוסה שומן זו הוא שקל מבחינה טכנית לשכפל. השיטה יכולה להיות מיושמת על מודלים אחרים של מחלות.לדוגמה זה יכול לשמש כדי ליצור מודל עכבר של סרטן. מי שידגים את ההליך יהיה נאואקי סאקאטה, פרופסור חבר באוניברסיטת פוקואוקה. תחת מיקרוסקופ מנתח, השתמש במיקרו-פיפטה P 200 כדי להסיר כל רכיב איון נוסף מעיכול הלבלב, כולל אקסינאר ורקמות סיביות.לאחר מכן השתמש במסננת תאים כדי לסנן תאי אצנר בודדים. העבירו את האיים המסוננים לצלחת תרבית חדשה המכילה את מדיום התרבית המתאים או תמיסת חיץ בתוספת סרום בקר או אלבומין, וסובבו את המנה כדי למקם את האיים במרכז. באמצעות מיקרו פיפטה P 200, בחר את האיים הבודדים לתוך צינור איסוף מתאים.הניחו מסננת תאים חדשה בקוטר 40 מיקרומטר על גבי צינור פלסטיק בקוטר 50 מיליליטר. השתמש פיפטה של 1000 מיקרוליטר כדי להוסיף את האיים למסננת כדי להפריד בין האיים לבין תאי האסינאר הבודדים. השתמשו במלקחיים כדי להפוך את המסננת על צלחת תרבית חדשה בגודל 60 או 100 מיליליטר שאינה מטופלת המכילה מדיום תרבית או תמיסת חיץ מתאימה, בתוספת סרום בקר או אלבומין.השתמשו במדיום טרי, או בופר כדי לשטוף את האיים למנת תרבית חדשה, ולאחר מכן הוסיפו מספיק מדיום או חיץ למנת התרבית כדי להגיע לנפח כולל של כ-20 מיליליטר. סופרים את האיים תחת מיקרוסקופ ומחלקים את מספר האיים באופן שווה בין צינורות צנטריפוגות פלסטיק בודדים של 1.5 מיליליטר בהתאם למספר בעלי החיים התורמים. צנטריפוגה של האיים ב 2, 100 גרם במשך דקה אחת בטמפרטורת החדר ולהשליך את supernatant.כ-20 עד 30 מיקרוליטרים של תמיסה שיורית יישארו בדרך כלל בצינור. לאחר הסרת השיער מהבטן כדי למנוע זיהום מניחים את העכבר במצב שכיבה. לאחר חיטוי הבטן ואזור המפשעה חותכים את העור באזור החציוני התחתון, ויוצרים חתך בעור שאורכו כשני סנטימטרים.מהדק את דופן הבטן השמאלית עם מלקחיים או retractors ולמשוך את הרקמה לצד שמאל של העכבר כדי לאבטח את שדה הניתוח. השתמש צמר גפן כדי לגייס את המעי הדק והגס לצד ימין של העכבר. רקמת השומן הלבנה באפידרמיס השמאלי בחלל הבטן ממוקמת באזור המפשעה השמאלי.גייסו את רקמת השומן הלבנה באפידרמיס ואת האשך השמאלי לחלק החיצוני של הבטן ומתחו את הרקמה. השתמש במיקרו פיפטה P 200 כדי לאסוף את כל נפח האיים מצינור אחד של 1.5 מיליליטר, תוך הקפדה על כך שלא יישארו איונים בצינור בעת האיסוף. אפשרו לאיים שנאספו להתיישב בקצה הפיפטה על ידי כוח הכבידה.מניחים את קצה המיקרו פיפטה קלות על רקמת השומן המנופחת, תוך הקפדה על מניעת שטיפה מוגזמת של המדיום או החיץ בקצה. בזהירות זרע את האיים על הרקמה. לאחר הזריעה, לאשר את המיקום הנכון של האיים תחת מיקרוסקופ ניתוח.לכסות את האיים עם רקמת השומן הלבן האפידרמלי, ולאחר מכן למקם את האשך השמאלי מתחת לרקמת השומן הלבן האפיזומלי ולהחזיר את הרקמות לחלל intraperitoneal. סגרו את העור בשתי שכבות בעזרת תפר 4. בסיום, הנח את העכבר מתחת למנורת חום ונטר אותו עד להתאוששות מלאה.כדי להשוות את יעילות ההשתלה של השתלת איון מכוסה שומן לזו שלאחר השתלת איון תוך-צפקי, אותו מספר של איונים הושתל על הצפק בחלל הפרקולי השמאלי של בעלי חיים סוכרתיים מושתלי בקרה. רמות הגלוקוז בדם של עכברים עם השתלת איון מכוסה שומן נצפו לרדת בהדרגה ובאופן משמעותי בהשוואה לעכברים מושתלים באיון תוך-צפקי. בדיקת סבילות לגלוקוז תוך-צפקית בוצעה חודש לאחר ההשתלה.רמת הגלוקוז בדם בעכברים עם השתלת איון מכוסה שומן נשמרה ברמות נמוכות יותר מזו שנצפתה בעכברים מושתלים באיון תוך-צפקי. בדיקה היסטולוגית שימשה להערכת השתלת איון ברקמת השומן הלבן באפידרמיס. בבעלי חיים מושתלי איונים מכוסים שומן, כתם hematoxylin eocene חשף את נוכחותם של איים בתוך רקמת השומן הלבנה באפידרמיס.בנוסף, צביעת נוגדנים מצומדת פלואורסצנטית של איים חיוביים לאינסולין הקלה על זיהוי של כלי מיקרו חיוביים של גורם פון וילברנד בתוך רקמת השומן הלבנה באפידרמיס של כל העכברים המקבלים. כדי להצליח בהליך זה הקפידו לאפשר לאיונים להתיישב בקצה הפיפטה לחלוטין, ולזרוע אותם על רקמת השומן מבלי להישפך.

fat-covered-islet-transplantation-using-epididymal-white-adipose

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

פרוטוקול שלנו פותחה כדי נקייה בקלות לספק איים או תאים תחת הקפסולה הכליה של עכברים. תאים מרוכזים לתוך כדורי בצינור הסופי משמש השתלת התאים תחת הקפסולה כליות. הקלות של טכניקה זו מפחיתה את הלחץ על התאים ואת העכבר.

השתלת איי הלבלב לקופסית הכליה בעכברים סוכרתיים של

השתלה של איים מבודדים הוצע להיות טיפול פוטנציאלי עבור סוכרת מסוג 1. כאן אנו מתארים שיטה לבודד איים מהעכבר pancreata ואת השתלת אותם למרחב subcapsular של הכליה.

שיטה בידוד איילט Murine והשתלות כליה Subcapsular

פרוטוקול זה מדגים בידוד איים Murine וזרע על פיגום decellularized. איים נתמך פיגומים הושתלו לתוך כרית שומן האפידידימלי של streptozotocin (STZ), המושרה עכברים סוכרתית. איים שרדו באתר ההשתלות והפכו את מצב ההיפרגליקמיה.

פיגום נתמך השתלת איים בשומן השומן האפידידימלי של עכברים סוכרתית

שיטה השתלת עם פגיעה של איים ב עכבר הוא הציג. איים מבודדים מעורבבים עם הידרוג, התערובת ימוקם לתיק עם פגיעה של עכבר סוכרתית. לאחר מכן, הסוכר מנוטר, מבוצע ניתוח חיסונית-פתולוגיה.

שיטת השתלת איון כדי Omentum העכבר

השתלת הלבלב איון היא דרך להשיג normoglycemia על סוכרת מסוג 1. מאמר זה מתמקד בטכניקה השתלת מהנתיב intraportal כדי לשמור על רמות גלוקוז נורמלי בעכברים סוכרתיים.

השתלת intraportal של לנגרהנס במודל עכבר

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לאימות ויוו של טיפול מבוסס הידרוג תא, שממחישים את הדוגמה של השתלת איון. h-עם פגיעה איון מטריקס ממלאת השרשה (ביות) מאפשר השתלה של תערובת תא-הידרוג בין השכבות עם פגיעה, ליד כלי הדם, כדי למקסם את engraftment בסביבה מטבולי תקין.

השתלת איון עם פגיעה אינטרה באמצעות h-עם פגיעה מטריקס איון מילוי (יונת)

בפרוטוקול זה, שיטה של מורטין איון בידוד והשתלת לתוך רקמת השומן הלבן התת עורית מתוארת. האיים המבודדים של מורנה ממורג מושתלים לתוך המטופל מורין באמצעות קרום מרתף הידרוג'ל. רמת הגלוקוז בדם של המטופלים מנוטרים, ו ניתוח היסטולוגיה של שתלי איון מבוצע.

השתלת מודל שומן לבן תת-עורית (ISWAT) מדגם ההשתלה של איויין מורנה

כאן אנו מציגים הליכים כירורגיים מעודנים על ביצוע מוצלח של השתלת איים תוך-ספורטיביים, הליך כירורגי רלוונטי מבחינה קלינית אך מאתגר מבחינה טכנית, בעכברים.

מזעור דימום וריד פורטל לאחר עירוי במהלך השתלת איים תוך-הפטיים בעכברים

אנו מספקים פרוטוקול זעיר-פולשני להשתלה תוך-שרירית של איי תאי גזע לבלב שמקורם בתאי גזע אנושיים לעכברים חסרי חיסון, לצורך השתלה ב-in vivo וניתוח בהמשך הזרם.

השתלה תוך-שרירית של תאי גזע פלוריפוטנטיים במקור תאי גזע בלבלב בעכברים

על מנת להבין את המנגנונים התאיים ומולקולריים שבבסיס neotissue היווצרות והתפתחות היצרות במסתמי לב רקמה מהונדסת, מודל עכברי של השתלת שסתום לב heterotopic פותח. שסתום לב ריאה הושתל לנמען באמצעות טכניקת השתלת לב heterotopic.

השתלה של הריאה Valve שימוש במודל עכבר של Heterotopic לב והשתלות

למדו שיטת השתלת איונים מכוסי שומן לתוך רקמת שומן לבן אפידידימלית בעכברים. שיטה זו מאפשרת זיהוי קל של האיונים המושתלים ללא חומרי קישור או תפרים, ומייעלת את מחקר השתלות האיונים בטיפול בסוכרת.

השתלת איון מכוסה שומן באמצעות רקמת שומן לבן אפידידימלית

גלה סרטונים נוספים