כדורי תאית בקטריאליים התכומסו בחומרים מוצקים

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי, כפי שהוא מתרחב על השיטות הנוכחיות של ייצור מתכלה, המתרחשים באופן טבעי biomaterial. השיטה שלנו שמה דגש על ייצור כדורי תאית חיידקיים הניתנים לשחזור. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא קלות הגישה לחומרים הדרושים: סוכר, מים, תה, חומץ, מתנע תרבות חיידקים, בקבוקון מבולבל, ושייקר מסלולית.

מי שמבצע טכניקה זו בפעם הראשונה לא יוכל לזהות כראוי את הספירות ולהסיר גושי תאית חיידקיים לא סדירים. הדגמנו את השלבים האלה בסרטון, אבל לא להיות מיואש אם זה לא עובד בפעם הראשונה. הדגמה חזותית של שיטה זו מועילה בדרך כלל לחוקרים לדמיין מה הגדלים, הכמויות וצורות של גושי תאית חיידקיים עדיפים ולא מועדפים.

התחל על ידי רותחים 350 מיליליטר של מים deionized באמצעות קומקום תה. ואז להעביר את המים החמים לכופת 500 מיליליטר. השתמש כפפות הגנה מפני חום, ולוודא כי בר זכוכית יכול לעמוד בטמפרטורות המים הרותחים.

ממיסים לחלוטין 42.5 גרם של סוכרוז מגורען לתוך המים החמים באמצעות מוט ערבוב. תלול שקית עם 2.54 גרם של תה שחור בבקבוק המכיל פתרון סוכרוז במשך שעה אחת. מוציאים את שקית התה עם מוט הערבוב מבלי לשבור אותה, ונפטרים ממנה לפח.

מוסיפים 100 מיליליטר של חומץ לבן מזוקק לתוך הכוויה, ומערבבים ביסודיות את התערובת. מעבירים 80 מיליליטר של תערובת התה החומצי המוכן לבקבוק מבולבל של 250 מיליליטר, ומאפשרים לתערובת להתקרר ל-20 עד 25 מעלות צלזיוס. מוסיפים 20 מיליליטר של נוזל תרבות המתנע המיקרוביאלי לבקבוק המבולבל כאשר הנוזל נמצא בטמפרטורת החדר, ומכסים את הבקבוק בפרפילם.

מניחים את הבקבוק המבולבל על שולחן טלטול מסלולי, ומאפשרים לו לרעוד במהירות של 125 סיבובים לדקה במשך שלושה ימים ב-20 עד 25 מעלות צלזיוס כדי לייצר כדורי BC. הסר מסות BC לא רצויות של צורות לא כדוריות עם פינצטה כדי למנוע היווצרות מסות BC לא סדירות נוספות. לאחר ספירת BC נוצרו, בעדינות לשפוך אותם מן הבקבוק לשימוש נוסף.

בפרוטוקול זה, תחומי ה-BC הראו קצב צמיחה גבוה ב-48 השעות הראשונות של התרבות, והגודל נותר קבוע לאחר שהגיע למקסימום. ספירות BC החלו להיווצר קנוקנות סביב היום השמיני של התרבות. התפלגות הגודל של כדורים לאחר אנקפסולציה של מזהמים מוצקים כמו ביו-פחם, חרוזי פולימר ופסולת מכרה נבדקה.

צוין כי לתוספת המוצקים לספירות BC יש השפעה עקבית על גודל הכדור או על תדירותו. נראה כי מהירות הרעידות במסלול, טמפרטורת הסביבה והיווצרותם של חלקיקים לא סדירים הם הגורמים העיקריים המשפיעים על הצורה, הגודל והתדירות של חלקיקים כדוריים. זה היה שם לב כי גבוה מדי של טמפרטורת החדר או הסרה לא נכונה של מסות לא סדירות שינתה את הצורה של כדור BC שלם כדי כוכבי חלקיקים או גושים חוטיים.

כדי לקבוע את השבר של מוצקים עטופים בכדורי BC, ניתוח כבידתי תרמי נעשה. הערכה תרמית ומיקרוסקופית יחד אישרה את האנקפסולציה היעילה של חלקיקים מוצקים בתוך כדורי BC. פרופיל TGA הדיפרנציאלי של המטוס לפני הספירה הופיע בסדרי גודל כמעט זהים עם BC עם חרוזי פוליסטירן.

עם זאת, שיא נוסף המתאים פירוק תרמי של חרוזי פוליסטירן נצפתה. חשוב ביותר להוסיף את תרבות המתנע המיקרוביאלי כאשר התה התקרר לטמפרטורת החדר. בנוסף, עלינו להבטיח שלתרבות יש אורגניזמים פעילים ובריאים.

שיטה זו יכולה לשמש להסרת מזהם בתיקון סביבתי. הספירות יכולות לשמש גם לשחרור מבוקר של חומר מעניין. טכניקה זו מאפשרת לנו לתמצת חומרים סביבתיים בתוך כדורי תאית חיידקית.

אפשרות זו עשויה להיות שימושית עבור פלטפורמות שחרור או תיקון מבוקרות מתכלות.