עיצוב ניסיוני בתוך נושא באמצעות משימת מיקום אובייקט בחולדות

משימת מיקום האובייקט מאפשרת לנו לחקור מנגנונים שונים של היווצרות או שימור של זיכרון מרחבי על ידי ניצול ההתנהגות החוקרת הספונטנית במכרסמים. פרוטוקול זה מאפשר חזרה על משימת מיקום אובייקט עד ארבע פעמים המסייעת להגדיל את הכוח הסטטיסטי ואת היעילות והפלט של מחקרים הכוללים הליכים כירורגיים. כדי להתחיל להשיג זירה מרובעת עשויה פלסטיק קשה אטום, לא נקבובי עם מינימום של 60 ס"מ רוחב, וגובה 50 ס"מ.

להקלטה מוצלחת של תנועות חולדה על ידי התוכנה האוטומטית ודא כי צבע הרצפה מנוגד לזה של החולדה. מניחים את הזירה בתוך קופסה או על פלטפורמה המוקפת בוילון. ליצירת הקשר, הכנס שכבה שנייה של קירות הניתנים להוספה בצבעים או בתבניות שונות לזירה.

תלו רמזים מרחביים תלת-ממדיים בעלי צורות וצבעים גיאומטריים ברורים גבוהים מספיק כדי שהחולדות לא יוכלו להגיע אליהם. חבר זוגות שונים של אובייקטים שאינם נקבוביים, לא לעיסים וקלים לניקוי עם צורות ומרקמים גיאומטריים ברורים לרצפת הזירה. מלא דלי לא מרובע בחומר מצעים.

מקם באופן אקראי חמישה עד עשרה אובייקטים בצורות וגדלים שונים, השונים מהאובייקטים שישמשו בניסוי לתוך הדלי. לפגישה הראשונה, הביאו את כל הכלובים הביתה לחדר הניסויים ותנו לחולדות להסתגר בחדר ולהסתפק בלפחות 30 דקות. שים שתיים עד ארבע חולדות מאותו כלוב יחד בדלי במשך כ -20 דקות.

נקה את הדלי על ידי הסרת כל חומר צואתי בין כל קבוצה של חולדות. שים את כל החולדות בכלובי הבית שלהם והחזיר אותם לחדר הדיור. לפגישה השנייה, הביאו את כל הכלובים לחדר הניסויים והשאירו למשך 30 דקות לפחות.

שים כל חולדה בנפרד בדלי במשך 10 דקות. מניחים את החולדה בחזרה לכלוב הבית ולנקות את הדלי אחרי כל חולדה. כשתסיים, החזר את כל הכלובים לחדר הדיור.

לפגישה רביעית, הביאו את כל הכלובים לחדר הניסויים והשאירו למשך 30 דקות לפחות. מניחים שתיים עד ארבע חולדות מאותו כלוב יחד בזירה הריקה ללא הקשר או רמזים מרחביים במשך 20 דקות. מחזירים את כל החולדות לכלוב הביתי ומנגבים את הזירה עם 70% אתנול אחרי כל קבוצת חולדות.

שנה את הזירה הריקה כדי ליצור את ההקשר הראשון מבלי לשים את האובייקטים בזירה. לפגישה אחד של הרגלה הקשר להביא את כל הכלובים לחדר הניסוי ולהשאיר לפחות 30 דקות. התחל את הרשמקול, ולאחר מכן למקם את החולדה הראשונה במרכז הזירה ולאפשר לעכברוש לחקור את הזירה במשך 10 דקות.

ואז לעצור את הרשמקול ולהחזיר את החולדה לכלוב הביתי. החזר את כל הכלובים לחדר הדיור בסיום. עבור כל חולדה, חזור על תהליך זה עבור מפגשים שניים ושלושה על פני יומיים רצופים, כך שיש שלושה מפגשים של הרגלה הקשר לכל חולדה בסך הכל.

הביאו את כל הכלובים לחדר הניסויים והשאירו לפחות 30 דקות. באמצעות לוח הזמנים שהוכן מראש, מקם את זוג האובייקטים הזהים הראשונים במיקומים המיועדים לשימוש במחצלות דביקות או בסרט דו-צדדי. התחל את הרשמקול והצב את החולדה הראשונה בזירה במרחק שווה מכל חפץ הפונה לקיר או לפינה שאינה תפוסה על ידי שום חפץ.

עבור קידוד חלש לאפשר לחולדה לחקור את הזירה ואת האובייקטים במשך 20 דקות למשפט אחד. עבור קידוד חזק לאפשר לחולדה לחקור במשך חמש דקות עם שלושה ניסויים עבור אותו חולדה. עצור את הרשמקול.

מניחים את החולדה בחזרה לכלוב הבית, להסיר את האובייקטים ולנגב את הזירה עם אתנול לאחר כל הקלטה. הביאו את כל הכלובים לחדר הניסויים, והותירו מספיק זמן לפני המבחן הראשון, כך שניתן יהיה להשאיר את החולדות למשך 30 דקות לפחות. מקם את האובייקטים במיקומים המיועדים.

הפעל את הרשמקול והצב את החולדה הראשונה בזירה מול קיר או פינה שאינה תפוסה על ידי שום חפץ. אפשר לחולדה לחקור את הזירה ואת האובייקטים במשך חמש דקות. תחזיר את החולדה לכלוב הביתי.

הסר את האובייקטים ולנגב את שני האובייקטים ואת הזירה ביסודיות עם 70%אתנול. חזור על ההקלטה עבור כל חולדה ואז להחזיר את הכלובים בחזרה לחדר הדיור. עבור כל חולדה, הבקיע את זמן המחקר עבור כל אובייקט הן בקידוד והן במבחנים.

ניקוד ניסויים לכל אורך ולמשפטי המבחן במשך שתי דקות, לביצועי האפליה הטובים ביותר. חשב את אחוז החיפוש עבור כל אובייקט או את מדד האפליה עבור כל חולדה וחשב ערכים ממוצעים עבור הקבוצות. השתמש בבדיקת T מדגם אחד לזיהוי העדפה משמעותית מעל רמת הסיכוי.

פרוטוקול הקידוד החזק הוביל להעדפה של האובייקט במיקום החדש עם אחוזי חיפוש ממוצעים גבוהים משמעותית מאשר רמת הסיכוי של 50% במבחנים עם עיכובים של שעה ו-24 שעות. פרוטוקול הקידוד החלש הביא לעלייה משמעותית בהעדפה של האובייקט במיקום החדש, בהשוואה לרמת מקריות בבדיקות עם עיכוב של שעה, אך לא עיכוב של 24 שעות. יתרון משמעותי של פרוטוקול זה הוא שניתן לבצע אותו ארבע פעמים באמצעות ארבעה הקשרים נפרדים עם אותה קבוצה של חולדות.

התוצאות של דרך אפשרית אחת של שימוש באיזון נגדי עם שתי קבוצות ניסיוניות של זיכרון שעה אחת וזיכרון 24 שעות מודגמים כאן. שתי הקבוצות היו מאוזן על הקשרים 1 ו-2, אשר חזר על עצמו בשני הקשרים נוספים, שלוש וארבע. התוצאות מארבעת ההקשרים הללו מוצגות בנפרד כאשר הזיכרון עבור כל קבוצת ניסוי הוערך על ידי השוואת ההעדפה לרמת הסיכוי בכל הקשר.

בין ארבעת ההקשרים לא זוהה הבדל משמעותי. לקבלת ייצוג טוב יותר ובהשוואת נושאים של הנתונים, התוצאות משני הקשרים מאוזנים שולבו והושוו באמצעות השוואת נושאים, כלומר מבחן T מזווג. מאז משימה זו מסתמכת על סקרנות כי טיפול הרגלה הוא חיוני, כך החיה אינה המומה או מפחד במהלך הבדיקה.

מניפולציות נוספות כגון התערבות פרמקולוגית ואופטוגנטית ניתן ליישם בפרוטוקול זה, כמו גם הדמיית vivo לחקר זיכרונות לטווח קצר וארוך ולשיפור או פגיעה בזיכרונות אלה.