Name: שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 26 s
Description: למד את פרוטוקול שבץ MCAo בעכברים באמצעות טכניקת הסיב. מודל זה מחקה שחזור זרימת דם מלאה לאחר חסימת כלי דם, ומשפר את השחזוריות במחקר פרה-קליני של שבץ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לכל שותפינו לשיתוף הפעולה של קונסורציום ImmunoStroke (עבור 2879, מתאי מערכת החיסון ועד לשחזור שבץ) על הצעות ודיונים. עבודה זו מומנה על ידי דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG, קרן המחקר הגרמנית) במסגרת אשכול מינכן לנוירולוגיה של מערכות (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) ותחת המענקים LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ו- LL-112/1-1.

הניסויים שדווחו בסרטון זה נערכו בעקבות ההנחיות הלאומיות לשימוש בבעלי חיים ניסיוניים, והפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדות הממשלתיות הגרמניות (Regierung von Oberbayern, מינכן, גרמניה). עכברי C57Bl/6J זכרים בני עשרה שבועות שימשו ושוכנו בטמפרטורה מבוקרת (22 ± 2 מעלות צלזיוס), עם תקופת מחזור של 12 שעות בהירות-כהה וגישה למזון גלולה ומים עד ליביטום.
1. הכנת החומר והמכשירים
<ol><li>חבר את שמיכת החום כדי לשמור על הטמפרטורה של אזור הניתוח ואת טמפרטורת גוף העכבר במהלך הרדמה ב 37 °C (50 °F).</li>
	<li>אוטומטית מספריים ומלקחיים, להכין 70% פתרון אתנול ולשמור על משחת עיניים dexpanthenol זמין, כמה חתיכות כותנה, 5-0 מצופה פוליאסטר תפר מוכן לשימוש. הכן מזרק 1 מ"ל עם תמיסת מלח 0.9% (ללא מחט) כדי לשמור על אתר ההסתה של החיה hydrated. הכן את גז ההרדמה (100% O2 + איזופלוריין).</li>
	<li>הכן מחזיק עבור גשושית דופלר לייזר על ידי חיתוך הקצה של קצה צינור 10 μL (3-5 מ"מ אורך). הערה: כל המכשירים מעוקרים באמצעות מחטא חרוזים חם. משטחים מחוטאים גם לפני ואחרי הניתוח עם תרסיס חיטוי מיקרוביאלי. לפני הניתוח, האזורים המקיפים את הראש והחזה של עכברים מחוטאים בתרסיס חיטוי פצעים.</li>
</ol>2. הכנת דופלר הלייזר
<ol><li>הזרקת מפרך לבער 30 דקות לפני הניתוח (4 מ"ג/ק"ג קרפפן ו-0,1 מ"ג/ק"ג בופרנורפין, תוך-פריטון).</li>
	<li>להרגיז את העכבר על ידי הצבתו בתא האינדוקציה עם קצב זרימת איזופלוראן של 4% עד להפסקת תנועת הגוף הספונטנית והוויבריס.</li>
	<li>מניחים את העכבר במצב נוטה באזור הניתוח עם האף שלו במסכת ההרדמה. לשמור על ריכוז איזופלוראן ב 4% במשך דקה נוספת, ולאחר מכן להפחית אותו ולשמור אותו ב 2%.</li>
	<li>הגדר את כרית החימום המשויכת לשליטת משוב לשמירה על טמפרטורת גוף העכבר ב-37 °C (70 °F), והכנס בעדינות את הבדיקה רקטלית כדי לפקח על הטמפרטורה לאורך כל ההליכים הכירורגיים.</li>
	<li>יש למרוח משחת עיניים של דקסנתנול על שתי העיניים.</li>
	<li>לחטא את העור והשיער המקיפים את העין והאוזן השמאלית עם 70% אתנול.</li>
	<li>חותכים את הקרקפת בין האוזן השמאלית לעין (באורך 1 ס"מ) כדי לחשוף את עצם הגולגולת.</li>
	<li>לחתוך ולפרוש את שריר הזמן כדי לדמיין את MCA מתחת לגולגולת.</li>
	<li>תקן עם הדבק את החלק החיצוני של הקצה מחזיק את לייזר דופלר בדיקה / סיבים על גבי MCA שמאל עם דבק. לאחר מכן, להדביק את העור כדי לסגור את הפצע סביב מחזיק הקצה. יש למרוח 2-3 טיפות של דבק מתקשה כדי להאיץ את התהליך. ודא כי סיבי דופלר לייזר אינו מודבק וניתן להסיר בקלות מבעל הקצה בכל עת.</li>
</ol>3. מודל MCAo חולף (אוסיפה)
<ol><li>הפוך את העכבר לתנוחה על-ביתית. שים את החוטם לתוך חרוט ההרדמה ולתקן את כפות עם קלטת.</li>
	<li>לחטא את העור והשיער המקיפים את החזה ולבצע חבטה בקו האמצע באורך 2 ס"מ בצוואר.</li>
	<li>השתמש במלקחיים כדי למשוך את העור ואת הבלוטות submandibular לגזרים. השתמש מפסקים להחזיק את שריר sternomastoid, לחשוף את השדה הכירורגי ולמצוא את העורק הראשי המשותף השמאלי (CCA). לנתח את CCA ללא רקמת חיבור והעצבים שמסביב (מבלי לפגוע בעצב vagal) ולבצע קשירה חולפת לפני bifurcation.</li>
	<li>לנתח את העורק הראשי החיצוני (ECA) ולקשור קשר קבוע בחלק הנראה ביותר דיסטלי. מניחים תפר נוסף מתחת ל- ECA, קרוב לביפורציה, והכנו קשר רופף לשימוש מאוחר יותר.</li>
	<li>לנתח את העורק הראשי הפנימי (ICA) ולהניח קליפ מיקרו וסקולרי על זה, 5 מ"מ מעל bifurcation. הקפד לא לפגוע בעצב הוואגל.</li>
	<li>חותכים חור קטן לתוך ECA בין קשירה הדוקה ורופפת; תיזהר לא לחתוך את כל ECA.</li>
	<li>הציגו את חוט ההסתה וקדמותו לכיוון ה- CCA. הדק את הקשירה הרופפת ב- ECA סביב הלומן כדי לאבטח בקרוב את חוט התנוחה במצב זה ולהימנע מדימום בעת הסרת קליפ המיקרו-וסקולרי.</li>
	<li>הסר את קליפ microvascular ולהכניס את חוט דרך ICA עד המקור של MCA הוא הגיע על ידי זיהוי ירידה חדה (>80%) בזרימת הדם המוחי כפי שנמדד על ידי דופלר לייזר. תקן את חוט במצב זה על ידי הידוק נוסף של הקשר סביב ECA. הערה: כאשר חוט הולך לכיוון המתאים, הוא מתקדם בצורה חלקה, ואין לצפות בהתנגדות.</li>
	<li>הקלט ערכי דופלר לייזר לפני ואחרי הכנסת חוט.</li>
	<li>הסר את המפסק ולהעביר את השריר sternomastoid ואת בלוטות submandibular לפני תפירת הפצע. הסר את גשושית דופלר לייזר, ומניחים את החיה בתא התאוששות ב 37 °C (1 שעה (עד להסרת חוט).</li>
</ol>4. דגם MCAo חולף (רפרפוזיה)
<ol><li>להרגיז את העכבר על ידי הצבתו בתא האינדוקציה עם קצב זרימת איזופלוראן של 4% עד להפסקת תנועת הגוף הספונטנית והוויבריס.</li>
	<li>יש למרוח משחת עיניים של דקסנתנול על שתי העיניים.</li>
	<li>מניחים את העכבר במצב נוטה באזור הפעולה עם חוטמו במסכת ההרדמה. לשמור על ריכוז איזופלוראן ב 4% במשך דקה נוספת, ולאחר מכן להפחית אותו ולשמור אותו ב 2%. תקן את כפותיה של החיה עם סרט הדבקה.</li>
	<li>הכנס את גשושית דופלר הלייזר למחזיק הגשוש.</li>
	<li>הסר את התפר הפצע, להשתמש במלקחיים כדי למשוך את העור ואת בלוטות submandibular לגזרים. השתמש במפסקים כדי למשוך בעדינות את שריר החזה ולחשוף את השדה הכירורגי.</li>
	<li>שחררו את תיל ה-ECA המהדק את הסיב, ומושכים בעדינות את חוט ההנעה. הימנע מפגיעה בציפוי גומי הסיליקון של חוט במהלך ההסרה.</li>
	<li>קשרו היטב את תיל ECA.</li>
	<li>אשר את העלייה בזרימת הדם המוחית במכשיר דופלר הלייזר (>80% מהערך ההתחלתי לפני reperfusion).</li>
	<li>הקלט ערכי דופלר לייזר לפני ואחרי הסרת חוט.</li>
	<li>פתח את קשירת החולף לפני ההסמכה מה- CCA.</li>
	<li>הסר את המפסק, ולהעביר את השריר סטרנומסטטואיד ואת בלוטות submandibular לפני תפירת הפצע. מניחים את החיה בתא התאוששות ב 37 °C (50 °F) עבור 1 שעה כדי להתאושש מהרדמה.</li>
	<li>לאחר ההחלמה, החזירו את העכברים לכלובים שלהם בחדר מבוקר טמפרטורה.</li>
	<li>שמור על בעלי החיים על ידי הוספת כדורי מזון רטוב הידרוג'ל בצלחות פטרי קטנות על רצפת הכלוב עד היום 3 לאחר הניתוח.</li>
	<li>הזריקו שמן כל 12 שעות ל-3 ד' לאחר הניתוח (4 מ"ג/ק"ג קרפפן ו-0.1 מ"ג/ק"ג בופרנורפין).</li>
</ol>5. מבצע מזויף
<ol><li>בצע את כל ההליכים כמתואר לעיל, כולל קשירת העורקים והכנסת חוט (שלבים 1-3.7).</li>
	<li>הסר את חוט מיד לאחר הכנסתו. לאחר מכן, מניחים את החיה בתא ההתאוששות למשך שעה.</li>
	<li>מניחים את החיה באזור הניתוח שוב, ולהסיר את קשירת ארעית של CCA כדי להבטיח שיקום זרימת דם מוחית מלאה.</li>
	<li>לתל את הפצע, ולהניח את החיה בתא התאוששות ב 37 °C (50 °F) עבור 1 שעה להתאושש הרדמה. לאחר ההחלמה, החזירו את העכברים לכלובים שלהם בחדר מבוקר טמפרטורה.</li>
	<li>שמור על בעלי החיים על ידי הוספת כדורי מזון רטוב הידרוג'ל בצלחות פטרי קטנות על רצפת הכלוב עד היום 3 לאחר הניתוח.</li>
	<li>הזריקו שמן כל 12 שעות ל-3 ד' לאחר הניתוח (4 מ"ג/ק"ג קרפפן ו-0.1 מ"ג/ק"ג בופרנורפין).</li>
</ol>6. נוירוסקופ
<ol><li>בצע את Neuroscore תמיד באותו זמן של היום, ולהשתמש בבגדים כירורגיים כדי לשמור על "ריח נייטרלי" בין מנתחים בודדים.</li>
	<li>תן לעכברים לנוח במשך 30 דקות בחדר עם כלוב "פתוח" לפני הבדיקה.</li>
	<li>שים לב לכל פריט בטבלה 1 ובטבלה 2 במשך 30 s.</li>
</ol>7. זלוף תוך-לבבי
<ol><li>הכן מזרק 20 מ"ל המכיל תמיסת מלח חוצץ פוספט (PBS)-הפרין (2 U/mL) והנח אותו 1 מ 'מעל הספסל כדי להקל על זלוף מונחה כבידה. (אופציונלי: לבצע זלוף תוך-לבבי עם 4% paraformaldehyde (PFA) באמצעות מזרק 20 מ"ל המכיל 4% PFA ב- PBS, pH 7.4).</li>
	<li>הזריקו אינtrperitoneally 100 μL של קטמין וקסילאצין (120 ו 16 מ"ג / קילוגרם משקל גוף, בהתאמה). המתן 5 דקות ואשר את הפסקת תנועת הגוף הספונטנית והוויבריס.</li>
	<li>תקן את החיה בתנוחת עלון, ולחטא את פני השטח של גוף הבטן עם 70% אתנול.</li>
	<li>הפוך 3 ס"מ ארוך ין לתוך הבטן; חותכים את הסרעפת, הצלעות ודק האשכים כדי לדמיין את הלב לחלוטין.</li>
	<li>לעשות קיסם קטן באטריום הימני, ולהכניס את צינורית זלוף לתוך החדר השמאלי.</li>
	<li>לטבול עם 20 מ"ל של PBS-הפרין.</li>
	<li>לאחר זלוף, לערוף את ראש החיה ולהסיר את המוח.</li>
	<li>להקפיא את המוח על אבקת קרח יבש ולאחסן ב -80 °C (80 °F) עד לשימוש נוסף.</li>
</ol>8. נפח אוטם
<ol><li>עבור cryosectioning, להשתמש cryostat לחתוך את המוח לחלקים בעובי 20 מיקרומטר כל 400 מיקרומטר. מקם את המקטעים בשקופיות ואחסן את השקופיות ב- −80 °C (70 °F) עד לשימוש.</li>
	<li>כתם סגול קרסיל (קורות)<ol>
<li>הכן את פתרון הכתמים על ידי ערבוב וחימום (60 °C) 0.5 גרם של אצטט CV ב 500 מ"ל של H2O עד הגבישים נמסים. לאחר שהתמיסה התקררה, יש לאחסן אותו בבקבוק כהה. מחממים ל-60 מעלות ומסננים לפני כל שימוש.</li>
		<li>תן לשקופיות להתייבש בטמפרטורת החדר במשך 30 דקות. לטבול אותם 95% אתנול במשך 15 דקות, ב 70% אתנול במשך 1 דקות, ולאחר מכן ב 50% אתנול במשך 1 דקות.</li>
		<li>לטבול את המגלשות במים מזוקקים במשך 2 דקות; לרענן את המים המזוקקים ולהניח את המגלשות במים במשך 1 דקות. לאחר מכן, לטבול את השקופיות בתמיסת כתמים מחומם מראש במשך 10 דקות ב 60 °C (70 °F). לשטוף את המגלשות פעמיים במים מזוקקים במשך 1 דקות.</li>
		<li>לטבול את השקופיות ב 95% אתנול במשך 2 דקות. מניחים אותם ב 100% אתנול במשך 5 דקות; לרענן את 100% אתנול ומניחים את השקופיות שוב באתנול במשך 2 דקות. לאחר מכן, לכסות את השקופיות עם מדיום הרכבה.</li>
		<li>ניתוח (איור 4C)<ol>
<li>סרוק את השקופיות וניתח את אמצעי האחסון העקיף של האוטם בשיטת סוונסון12 כדי לתקן בצקת באמצעות המשוואה הבאה: (אזור איסכמי) = (אזור איסכמי)-((חצי הכדור ipsilateral)-(חצי הכדור contralateral))</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Stroke.</a> Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).</li>
<li>O'Collins, V. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((1%2C026+experimental+treatments+in+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">1,026 experimental treatments in acute stroke.</a> Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).</li>
<li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia%3A+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> Journal of Neuroscience Methods. 139 (2), 203-207 (2004).</li>
<li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+rat+model+of+thrombotic+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A new rat model of thrombotic focal cerebral ischemia.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 17 (2), 123-135 (1997).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (47), e2423(2011).</li>
<li>Dirnagl, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+concerted+appeal+for+international+cooperation+in+preclinical+stroke+research%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research.</a> Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).</li>
<li>McNutt, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Journals+unite+for+reproducibility%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Journals unite for reproducibility.</a> Science. 346 (6210), 679(2014).</li>
<li>Llovera, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+a+preclinical+randomized+controlled+multicenter+trial+%28pRCT%29%3A+Anti-CD49d+treatment+for+acute+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Results of a preclinical randomized controlled multicenter trial (pRCT): Anti-CD49d treatment for acute brain ischemia.</a> Science Translational Medicine. 7 (299), (2015).</li>
<li>Llovera, G., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+next+step+in+translational+research%3A+lessons+learned+from+the+first+preclinical+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">The next step in translational research: lessons learned from the first preclinical randomized controlled trial.</a> Journal of Neurochemistry. 139, Suppl 2 271-279 (2016).</li>
<li>Swanson, G. M., Satariano, E. R., Satariano, W. A., Threatt, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Racial+differences+in+the+early+detection+of+breast+cancer+in+metropolitan+Detroit%2C+1978+to+1987%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Racial differences in the early detection of breast cancer in metropolitan Detroit, 1978 to 1987.</a> Cancer. 66 (6), 1297-1301 (1990).</li>
<li>Lourbopoulos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inadequate+food+and+water+intake+determine+mortality+following+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Inadequate food and water intake determine mortality following stroke in mice.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (6), 2084-2097 (2017).</li>
<li>Clark, W. M., Lessov, N. S., Dixon, M. P., Eckenstein, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monofilament+intraluminal+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Monofilament intraluminal middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Neurological Research. 19 (6), 641-648 (1997).</li>
<li>Jackman, K., Kunz, A., Iadecola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+focal+cerebral+ischemia+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Modeling focal cerebral ischemia in vivo.</a> Methods in Molecular Biology. 793, 195-209 (2011).</li>
<li>Kitano, H., Kirsch, J. R., Hurn, P. D., Murphy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalational+anesthetics+as+neuroprotectants+or+chemical+preconditioning+agents+in+ischemic+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Inhalational anesthetics as neuroprotectants or chemical preconditioning agents in ischemic brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 27 (6), 1108-1128 (2007).</li>
<li>Rousselet, E., Kriz, J., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+intraluminal+MCAO%3A+cerebral+infarct+evaluation+by+cresyl+violet+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Mouse model of intraluminal MCAO: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (69), e4038(2012).</li>
<li>Rha, J. H., Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+recanalization+on+ischemic+stroke+outcome%3A+a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The impact of recanalization on ischemic stroke outcome: a meta-analysis.</a> Stroke. 38 (3), 967-973 (2007).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+filament+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+rats%3A+does+the+reperfusion+method+matter+24+hours+after+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Transient filament occlusion of the middle cerebral artery in rats: does the reperfusion method matter 24 hours after perfusion.</a> BMC Neuroscience. 13, 154(2012).</li>
<li>Sommer, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+stroke%3A+experimental+models+and+reality%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Ischemic stroke: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 245-261 (2017).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rotarod+suitable+for+quantitative+measurements+of+motor+incoordination+in+naive+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn-Schmiedebergs+Archiv+f%C3%BCr+Experimentelle+Pathologie+und+Pharmakologie%22%5BJournal%5D)">A rotarod suitable for quantitative measurements of motor incoordination in naive mice.</a> Naunyn-Schmiedebergs Archiv für Experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 259 (2), 211(1968).</li>
<li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adhesive+removal+test%3A+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4 (10), 1560-1564 (2009).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+test+for+detecting+long-term+sensorimotor+dysfunction+in+the+mouse+after+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A test for detecting long-term sensorimotor dysfunction in the mouse after focal cerebral ischemia.</a> Journal of Neuroscience Methods. 117 (2), 207-214 (2002).</li>
<li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke%2C+cortical+ablation%2C+parkinsonism+and+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).</li>
<li>Roth, S., Yang, J., Cramer, J., Malik, R., Liesz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+cytokine-induced+sickness+behavior+after+ischemic+stroke+by+an+optimized+behavioral+assessment+battery%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Detection of cytokine-induced sickness behavior after ischemic stroke by an optimized behavioral assessment battery.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 91, 668-672 (2021).</li>
</ol>

למחברים אין אינטרסים מתחרים לחשוף.

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל שבץ ניסיוני המבוסס על הסכם הקונצנזוס של קונסורציום מחקר רב מרכזי גרמני ("ImmunoStroke") כדי להקים מודל MCAo ארעי סטנדרטי. מודל MCAo החולף שהוקם על ידי החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA למקור ה- MCA הוא אחד מדגמי השבץ הנפוצים ביותר להשגת רפרופוזיה עורקית לאחר תקופת חסימה מופרדת. לכן, הליך זה יכול להיחשב מודל קו רלוונטי תרגום.
ל"מודל הסיבים" המוצג בסרטון יש כמה יתרונות בהשוואה לדגמי שבץ אחרים שתוארו בעבר, כגון אי-צורך בגולגולת והשגת רפרפוזיה מלאה של כלי השיט הנידח. עם זא...

שבץ מוחי הוא אחד הגורמים השכיחים ביותר למוות ונכות ברחבי העולם. למרות שיש בעיקר שתי צורות שונות של שבץ, איסכמי ודימומי, 80-85% מכלל מקרי השבץ הם איסכמיים1. נכון לעכשיו, רק שני טיפולים זמינים עבור חולים עם שבץ איסכמי: טיפול תרופתי עם מפעיל פלסמינוגן רקמה רקומביננטי (rtPA) או פקקת מכנית. עם זאת, בשל חלון הזמן הטיפולי הצר וקריטריוני אי הכללה מרובים, רק מספר נבחר של חולים יכולים ליהנות מאפשרויות טיפול ספציפיות אלה. במהלך שני העשורים האחרונים, מחקר שבץ פרה-אקליני ותרגום התמקד בחקר גישות נוירו-הגנתיות. עם זאת, כל התרכובות שהגיעו לניסויים קליניים לא הראו עד כה שיפורים עבור המטופל2.
מכיוון שמודלים במבחנה אינם יכולים לשחזר במדויק את כל האינטראקציות במוח ומנגנונים פתולוגיים של שבץ, מודלים של בעלי חיים חיוניים למחקר שבץ פרה-אקליני. עם זאת, חיקוי כל ההיבטים של שבץ איסכמי אנושי במודל של חיה אחת אינו ריאלי, שכן שבץ איסכמי הוא מחלה מורכבת והטרוגנית מאוד. מסיבה זו, מודלים שונים של שבץ איסכמי פותחו לאורך זמן במינים שונים. פוטוטרומבוזיס של עורקים מוחיים או חסם דיסטלי קבוע של העורק המוחי האמצעי (MCA) הם מודלים נפוצים הגורמים נגעים קטנים ומוגדרים באופן מקומי בנאוקורטקס3,4. מלבד אלה, מודל השבץ הנפוץ ביותר הוא כנראה מה שנקרא "מודל חוט", שבו מושגת אוסם חולף של MCA. מודל זה מורכב מהקדמה חולפת של חוט תפירה למקור ה- MCA, מה שמוביל לירידה פתאומית של זרימת הדם במוח ולאוטם הגדול הבא של אזורי מוח תת-קורטיקליים וקליפתיים5. למרות שרוב דגמי השבץ מחקים את החסימות של MCA 6, "מודל הסיב" מאפשר תיחום מדויק של הזמן האיסכמי. רפרפוזיה על ידי הסרת חוט מחקה את התרחיש הקליני האנושי של שחזור זרימת הדם המוחי לאחר ספונטני או טיפולי (rtPA או פקקת מכנית) תמיסת קריש. עד כה תוארו שינויים שונים של "מודל חוט" זה. בגישה הנפוצה ביותר, שתואר לראשונה על ידי לונגה ואח'. בשנת 19895,חוט מצופה סיליקון מוצג דרך העורק הראשי המשותף (CCA) למקורו של MCA7. למרות שזו גישה נפוצה, מודל זה אינו מאפשר שיקום מלא של זרימת הדם במהלך reperfusion, כמו CCA הוא קשור לצמיתות לאחר הסרת חוט.
בעשור האחרון, מספר גדל והולך של קבוצות מחקר התעניינו בדוגמנות שבץ בעכברים באמצעות "מודל חוט" זה. עם זאת, השונות ניכרת של מודל זה וחוסר התקינה של ההליכים הם חלק מהסיבות לשונות גבוהה ולשחזור לקוי של תוצאות הניסוי והממצאים המדעיים שדווחו עד כה2,8. גורם פוטנציאלי ל"משבר השכפול" הנוכחי, בהתייחסו להתרבות הנמוכה בקרב מעבדות המחקר, הוא נפחי אוטם השבץ הלא-דומים בין קבוצות מחקר המשתמשות באותה מתודולוגיה ניסיונית9. למעשה, לאחר ביצוע הראשון אקראי אקראי מבוקר ניסוי מחקרmulticenter 10, הצלחנו לאשר כי חוסר סטנדרטיזציה מספקת של מודל שבץ ניסיוני זה ואת הפרמטרים התוצאה הבאים היו הסיבות העיקריות לכישלון רבייה במחקרים פרה קליניים בין מעבדות עצמאיות11 . הבדלים דרסטיים אלה בגדלים האוטם הנובעים מכך, למרות השימוש באותו מודל שבץ, מהווים בצדק לא רק איום על מחקר מאשר, אלא גם על שיתופי פעולה מדעיים בשל היעדר מודלים חזקים וניתן לשחזור.
לאור אתגרים אלה, אנו שואפים לפתח ולתאר בפירוט את ההליך למודל MCAo ארעי סטנדרטי המשמש למאמצי המחקר השיתופיים בתוך קונסורציום המחקר "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/). קונסורציום זה נועד להבין את האינטראקציות בין המוח לחיסון שבבסיס העקרונות המכניסטיים של התאוששות שבץ. בנוסף, מוצגות שיטות היסתולוגיות ופונקציונליות הקשורות לניתוח תוצאות שבץ. כל השיטות מבוססות על נהלי הפעלה סטנדרטיים שנקבעו המשמשים בכל מעבדות המחקר של קונסורציום ImmunoStroke.

<table><tbody><tr><td>45&deg; רמפה</td><td>H& S Kunststofftechnik</td><td></td><td>גובה: 18 ס"מ</td></tr><tr><td>5/0 איום</td><td>Pearsalls</td><td>10C103000</td><td></td></tr><tr><td>5 מ"ל מזרק</td><td>בראון</td><td></td><td></td></tr><tr><td>חומצה אצטית</td><td>סיגמא מדעי החיים</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>מערכת הרדמה לאיזופלורן</td><td>Drager</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen פומייד</td><td>באייר</td><td></td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6J עכברים</td><td>צ'ארלס מהדק 000664</td><td></td><td></td>נהר</tr><tr><td></td><td>FST</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>קליפ</td><td>FST</td><td>18055-04</td><td></td></tr><tr><td>מחזיק קליפ</td><td>FST</td><td>18057-14</td><td></td></tr><tr><td>קוטון</td><td>NOBA Verbondmitel Danz</td><td>974116</td><td></td></tr><tr><td>Cresyl violet</td><td>Sigma Life Science</td><td>C5042-10G</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Thermo Scientific CryoStarNX70</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אתנול 70%</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>521005</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 96%</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>522078</td><td></td></tr><tr><td>אתנול 99%</td> <td>CLN Chemikalien Laborbedorf</td><td>ETO-5000-99-1</td><td></td></tr><tr><td>חוטים</td><td>Doccol</td><td>602112PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>עדין 45 מלקחיים זוויתיים</td><td>FST</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים עדינים</td><td>FST</td><td>11252-23</td><td></td></tr><tr><td>מספריים עדינים</td><td>FST</td><td>14094-11</td><td></td></tr><tr><td>דבק</td><td>Orechseln</td><td>BSI-112</td><td></td></tr><tr><td>דבק מקשיח</td><td>Drechseln & Mehr</td><td>BSI-151</td><td></td></tr><tr><td>שמיכת חימום</td><td>FHC DC בקר</td><td></td><td></td>טמפרטורה</tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbot</td><td>B506</td><td></td></tr><tr><td>Isopentane</td><td>Fluka</td><td>59070</td><td></td></tr><tr><td>קטמין</td><td>Inresa Arzneimittel GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>לייזר דופלר</td><td>Perimed</td><td>PF 5010 LDPM, מערכת פריפלוקס 5000</td><td></td></tr><tr><td>בדיקת דופלר לייזר</td><td>Perimed</td><td>91-00123</td><td></td></tr><tr><td>פוספט חוצץ מלח pH: 7.4</td><td>Apotheke Innestadt Uni Munchen</td><td>P32799</td><td></td></tr><tr><td>תא התאוששות</td><td>Mediheat</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Roti-Histokit הרכבה בינונית Roth</td><td></td><td>6638.1</td><td></td></tr><tr><td>תמיסת מלח</td><td>בראון</td><td>131321</td><td></td></tr><tr><td>נוצת</td><td>אזמל</td><td>02.001.30.011</td><td></td></tr><tr><td>חוטים מצופים סיליקון</td><td>Doccol</td><td>602112PK5Re</td><td></td></tr><tr><td>סטריאומיקרופסקופ</td><td>Leica</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus שקופיות</td><td>Thermo Scientific</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Vannas מספריים קפיציים</td><td>FST</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Xylacine</td><td>Albrecht</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

שבץ מוחי הוא הגורם השלישי בשכיחותו לתמותה והגורם המוביל לנכות בוגרת שנרכשה במדינות המפותחות. עד כה, אפשרויות טיפוליות מוגבלות לחלק קטן של חולי שבץ בשעות הראשונות לאחר השבץ. אסטרטגיות טיפוליות חדשניות נחקרות בהרחבה, במיוחד כדי להאריך את חלון הזמן הטיפולי. חקירות נוכחיות אלה כוללות את המחקר של מסלולים פתופיציולוגיים חשובים לאחר שבץ, כגון דלקת לאחר שבץ, אנגיוגנזה, פלסטיות עצבית, והתחדשות. בעשור האחרון גובר החשש מפני שכפול לקוי של תוצאות ניסוי וממצאים מדעיים בקרב קבוצות מחקר עצמאיות. כדי להתגבר על מה שמכונה "משבר השכפול", יש צורך דחוף במודלים סטנדרטיים מפורטים לכל ההליכים. כמאמץ בתוך קונסורציום המחקר "ImmunoStroke" (https://immunostroke.de/), מוצע מודל עכבר סטנדרטי של נעילת עורק המוח האמצעי החולף (MCAo). מודל זה מאפשר שחזור מלא של זרימת הדם עם הסרת חוט, המדמה את תמוגת קריש הדם הטיפולית או הספונטנית המתרחשת בחלק גדול של שבץ אנושי. ההליך הכירורגי של מודל שבץ "חוט" זה וכלים לניתוח הפונקציונלי שלו מוצגים בסרטון המצורף.

המודל המתואר כאן הוא שינוי של מודל שבץ "חוט" נפוץ, אשר מורכב החדרת חוט מצופה סיליקון דרך ECA כדי לחסום באופן חולף את מקורו של MCA (איור 1). לאחר הסרת חוט, רק זרימת הדם ב- ECA נפסקת לצמיתות, ומאפשרת recanalization מלא של CCA ו- ICA. זה מאפשר reperfusion נאות של המוח (איור 2), בדומה למצב שנצפו לאחר תרומבוליזה פרמקולוגית מוצלחת או פקקת מכנית בחולים אנושיים. יתר על כן, עבודה זו מתארת גם שיטה למדידת זרימת הדם במוח במהלך הליכי החסיקה וההסרה על ידי תיקון צינורית המחובר...

מודלים שונים של אומת עורק המוח האמצעי (MCAo) משמשים במחקר שבץ ניסיוני. כאן, מודל שבץ ניסיוני של MCAo חולף דרך העורק הראשי החיצוני (ECA) מתואר, שמטרתו לחקות שבץ אנושי, שבו פקקת המוח מוסרת עקב תמוגה קריש ספונטני או טיפול.

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

במודל הסיב המתואר כאן, שיקום מלא של זרימת הדם וההקלטה שלו, הן דרישות כדי להבטיח זרם ניתן לייצור בקרב עכברים, במיוחד במחקרי שבץ תרגומי. למודל זה יש שני יתרונות עיקריים בהשוואה למודלים אחרים שתוארו בעבר. אין צורך בגולגולת, וזיהוי מלא של כלי הדם מושג.מודל הסיב הוא התערבות כירורגית מורכבת המערבת מניפולציה בתהליך של עורקים שונים. ההדמיה וההסבר של כל אלה הם צעדים קטנים אך חשובים, עשויים להאיץ את תקופת הלמידה של נוירוכירורגים. חבר את שמיכת החום כדי לשמור על הטמפרטורה של אזור הניתוח ואת טמפרטורת גוף העכבר במהלך הרדמה ב 37 מעלות צלזיוס.הכינו מספריים ומלקחיים אוטומטיים, תמיסת אתנול 70% ומשחת עיניים של דקספנטנול, ושמרו על כמה חתיכות כותנה ותפר פוליאסטר קלוע בציפוי Five O, מוכנים לשימוש. הכן תמיסת תמיסת מלח 0.9% במזרק מיליליטר אחד ללא מחט כדי לשמור על אתר החתכים hydrated. הכן מחזיק לבדיקת דופלר הלייזר על ידי חיתוך הקצה של קצה פיפטה 10 מיקרוליטר.לאחר שהעכבר הוא מרדים לחלוטין, למקם אותו במצב נוטה באזור הפעולה. הכנס בעדינות את הבדיקה רקטלית כדי לפקח על הטמפרטורה לאורך כל ההליכים הכירורגיים. לאחר חיטוי האתר הכירורגי, לחתוך את הקרקפת בין האוזן השמאלית לעין כדי לחשוף את עצם הגולגולת.לאחר מכן, לחתוך ולפרוש את שריר הזמן כדי לדמיין את העורקים המוחיים מרובים או MCA מתחת לגולגולת. תקן את החלק החיצוני של הקצה מחזיק את הגשושית דופלר לייזר או סיבים על גבי MCA השמאלי עם דבק ולסגור את העור, כך העור מודבק גם כן. יש למרוח שתיים עד שלוש טיפות של דבק מתקשה כדי להאיץ את התהליך.ודא כי סיבי דופלר לייזר אינו מודבק וניתן להסיר בקלות מבעל הקצה בכל עת. סובבו את העכבר לתנוחת העל-פסי, ואז הכניסו את החוטם לקונוס ההרדמה ותקן את כפות הרגליים עם סרט הדבקה. לחטא את העור והשיער המקיפים את החזה ולעשות שרף קו האמצע באורך שני ס"מ בצוואר.השתמש במלקחיים כדי למשוך את בלוטת תת-האדם בעור ואת שריר סטרנוםוסטואיד לגזרים. השתמש במפסקים כדי לחשוף את השדה הכירורגי ולמצוא את העורק הראשי המשותף השמאלי או CCA. לנתח את CCA ללא רקמת חיבור והעצבים שמסביב מבלי לפגוע בעצב vagal ולבצע קשירה ארעית לפני bifurcation.לנתח את העורק הראשי החיצוני או ECA ולקשור קשר קבוע בחלק הנראה ביותר דיסטלי. מניחים תפר נוסף מתחת ל- ECA וקרוב לביפורציה, ולאחר מכן הכינו קשר רופף לשימוש מאוחר יותר. לנתח את העורק הראשי הפנימי או ICA ולהניח קליפ מיקרו וסקולרי על זה כחמישה מילימטרים מעל bifurcation.הקפד לא לפגוע בעצב הוואגל. ואז לחתוך חור קטן לתוך ECA בין קשירה הדוקה ורופפת, להבטיח לא לחתוך את ECA כולו. הציגו את חוט ההסתה וקדמותו לכיוון ה- CCA.הדק את הקשירה הרופפת ב- ECA סביב הלומן כדי להבטיח לרגע את חוט התנוחה במצב זה. הסרת קליפ מיקרווסקולרי ולמנוע דימום. לאחר הסרת קליפ microvascular, להכניס את חוט דרך ICA עד המקור של MCA הוא הגיע.תקן את חוט במצב זה על ידי הידוק נוסף של הקשר סביב ECA. הקלט ערכי דופלר לייזר לפני ואחרי הכנסת חוט. הסר את המפסק ולהעביר את שריר sternomastoid בבלוטה submandibular לפני תפירת הפצע.הסר את גשושית דופלר לייזר ומניחים את החיה בתא התאוששות ב 37 מעלות צלזיוס במשך כמה שעה. מניחים את העכבר במצב נוטה באזור הפעולה עם חוטמו במסכת ההרדמה, ולאחר מכן לתקן את כפותיו של החיה עם סרט הדבקה. הכנס את גשושית דופלר הלייזר למחזיק הגשוש.הסר את התפר הפצע ולהשתמש במלקחיים כדי למשוך את העור, את בלוטת submandibular ואת השריר sternomastoid לגזרים. השתמש במפסקים כדי לחשוף את התחום הכירורגי. שחררו את תיל ה-ECA המהדק את הסיב ומושכים בעדינות את חוט ההנעה.הימנע מפגיעה בציפוי גומי הסיליקון של חוט במהלך ההסרה. הקלט את ערכי דופלר הלייזר לפני ואחרי הסרת חוט. קשרו היטב את תפר ECA ואשרו את העלייה בזרימת הדם במוח במכשיר הלייזר דופלר.פתח את קשירת ארעי לפני bifurcation מן CCA כדי לשחזר את זרימת הדם המלאה. הסר את המפסק ולהעביר את שריר sternomastoid בבלוטה submandibular לפני תפירת הפצע. לאחר מכן, למקם את החיה בתא התאוששות ב 37 מעלות צלזיוס במשך שעה אחת להתאושש מהרדמה.לאחר ההחלמה להחזיר את העכברים לכלובים שלהם בחדר מבוקר טמפרטורה ולטפל בבעלי החיים על ידי הוספת כדורי מזון רטוב הידרוג'ל בצלחות פטרי קטנות על רצפת הכלוב ולהזריק משכך כל 12 שעות עד היום השלישי לאחר הניתוח. לאחר זרימת הדם ב CCA משוחזר לאחר הסרת חוט, זלוף מלא של המוח מתרחשת, אשר דומה למצב שנצפו לאחר פקקת מכנית מוצלחת בחולים אנושיים. חיות שבץ הציגו שינוי משמעותי בציון הנוירולוגי המורכב והמוקד, אך לא בציון הנוירו הכללי בהשוואה לחיות מזויפות.נפח אוטם שאוחזר בוצע גם באמצעות כתמים סגול קרסול של מקטעי מוח סדרתיים קורונל 24 שעות לאחר אינדוקציה שבץ. אזור הנגע כולל את קליפת המוח הסומטו-סנסורית ומוטורית, כמו גם מבנים תת-קליפתיים, כגון הסטריאטום. ממוצע נפח האוטם היה 61 עד 62 מילימטרים רבועים, המייצגים 48% מחצי הכדור המוחי שהושפע.חשוב לבצע ניתוח נאות של CCA, ECA ו- RCA מבלי לגרום נזק לרקמה הסמוכה, במיוחד עצב הוואגוס, כדי לקבל הדמיה טובה של כל המבנים, ולהיות מסוגל להכניס את חוט ולחנוק את מקור MCA.

modeling-stroke-mice-transient-middle-cerebral-artery-occlusion-via

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

פילמנטיות חסימה של עורק המוח התיכון הוא מודל משותף לחקר שבץ איסכמי בעכברים.

דוגמנות שבץ בעכברים - העורקים התיכון ספיגה מוחין עם דגם נימה

אנו מדגימים את הוידאו שיטה לייצור באמצע חסימה בעורק המוח בעכברים בוגרים באמצעות monofilament intraluminal. כמו כן, אנו מראים כיצד להעריך את מידת אוטם מוחי על ידי מכתים 2,3,5-triphenyltetrazolium כלוריד (TTC).

עכבר דגם ספיגה התיכון עורק מוחי

עורק המוח האמצעי intraluminal חסימה (MCAO) מודל הוא מודל בשימוש השכיח ביותר בקרב מודלים ניסיוניים שבץ איסכמי. להלן נדגים את המודל כולו בפירוט עם מדריך של flowmetry לייזר דופלר, והתוצאות מי מטעמה.

Intraluminal העורקים התיכון מוחין ספיגה (MCAO) מודל שבץ איסכמי עם הדרכה דופלר Flowmetry לייזר עכברים

מודל intraluminal המוח האמצעי, החסימה בעכברים מוצג במסמך זה. ההיקף אוטם מוחית מחושב על ידי ציון נוירולוגים וכתמים סגולים cresyl, מכתים חלופה לTTC, להציע את היתרון הגדול לבדיקה בסמני ריבית רבים במקביל.

מודל עכבר של MCAO intraluminal: הערכת אוטם מוחית על ידי כתמים סגולים Cresyl

סרטון זה מתאר את ההליך לפתח שבץ חולף במודל מורין באמצעות חסימה מבוססת נימה מצופה סיליקון של עורק המוח האמצעי. המודל שפותח מחקה שבץ אנושי, ובכך מסייע לחקור אסטרטגיות טיפוליות חדשניות לטיפול בשבץ.

מודל שבץ חולף מבוסס החדרת נימה: הליך כירורגי לביצוע חסימת עורק מוחי אמצעי במוח מורין

מודלים עכבריים שונים של חסימת עורק המוח אמצעית (MCAO) נמצאים בשימוש נרחב בחקר המוח ניסיוני. הנה, אנחנו מדגימים את המודל של MCAO דיסטלי הקבוע transcranial אשר מייצר אוטם קליפת המוח עקבי של גודל המתאים לנזק שהוטל על ידי הרוב המכריע של מקרי שבץ איסכמי אנושיים.

דוגמנות שבץ בעכברים: קרישה קבועה של עורקי דיסטלי התיכון מוחין

Intraluminal סגר נימה של עורק המוח התיכון הוא הדגם הנפוצות ביותר בשימוש ב- vivo של שבץ ניסויים בחולדות. גישה כירורגית חלופיים כדי לאפשר תיקון עורק הראש נפוצות מתבצע כאן, מה שמאפשר את פגיעה reperfusion של עורק תרדמני, של פגיעה reperfusion מלא אל השטח עורק המוח התיכון.

חסימה בעורק האמצעי המאפשר פגיעה Reperfusion באמצעות תיקון עורק הראש נפוצות בעכברים

פרוטוקול זה מדגים מודל שבץ עכבר ייחודי עם אוטם בגודל בינוני ושיעור הישרדות מצוין. מודל זה מאפשר לחוקרי שבץ פרה-קליניים להאריך את משך האיסכמיה, להשתמש בעכברים מזדקנים ולהעריך תוצאות תפקודיות ארוכות טווח.

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

פרוטוקול זה מתאר את המודל של איסכמיה מוחית מוקדית חולפת בעכברים באמצעות חסימה תוך לומינלית של עורק המוח האמצעי. בנוסף, דוגמאות להערכת תוצאות מוצגות באמצעות הדמיית תהודה מגנטית ומבחני התנהגות.

מודל חולף של חסימת עורק מוחי אמצעי חולף

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לביסוס מודל חסימת עורק מוחי אמצעי דיסטלי (dMCAO) באמצעות אלקטרוקואגולציה טרנס-גולגולתית בעכברי C57BL/6J ומעריכים את ההתנהגות הנוירולוגית והתכונות ההיסטופתולוגיות שלאחר מכן.

השראת שבץ איסכמי חריף בעכברים באמצעות טכניקת חסימת העורק האמצעי הדיסטלי

הפרוטוקול הנוכחי מתאר מודל חולדה של חסימה/רפרפוזיה של עורק המוח האמצעי המשמר את המבנה האנטומי של כלי המוח מבלי לגרום נזק.

מודל חולדה של חסימה/עירוי מחדש של עורק המוח האמצעי מבלי לפגוע במבנה האנטומי של כלי המוח

למד את פרוטוקול שבץ MCAo בעכברים באמצעות טכניקת הסיב. מודל זה מחקה שחזור זרימת דם מלאה לאחר חסימת כלי דם, ומשפר את השחזוריות במחקר פרה-קליני של שבץ.

שבץ דוגמנות בעכברים: אומת עורק מוחי אמצעי חולף דרך העורק הראשי החיצוני

גלה סרטונים נוספים