עירוי בלוטת פרוטידים מדרדר דרך צינור סטנסן בפרימט לא אנושי לאספקת גנים וקטורית

בלוטות הרוק הוצעו כאתר יעד לרקמות לטיפול גנטי, במיוחד בתחום החיסון על ידי העברת גנים. אנו מדגימים אספקת גנים במודל פרימטים לא אנושיים המשתמש בעירוי פרוטידים מדרדר.

פרוטוקול זה חשוב כי זה מדגים את ההליך של עירוי בלוטת הרוק מדרדר בפירוט. ההליך יכול לשמש ממגוון סיבות רפואיות, כגון אימונופרופיליקסיס וקטורי או טיפול גנטי. טכניקה זו קלה ללמוד ולהתרבות.

המחברים הצליחו לבצע הליך זה בהצלחה בהזדמנויות רבות למרות שלא היו מנתחי פה, ולא היה להם רקע כזה. לאחר המרדים להשתמש זכוכית שיניים להגדלה ולזהות את papilla פרוטידי או את פתיחת צינור סטנסון על הלחי האחורית הסמוכה לטוחנת השנייה העליונה. מרחיבים בעדינות את הפפילה הפרוטידית על ידי הצבת הנקודה של מרחיב חרוט במרכז או בפתיחת הפפילה ומסובבים את המרחיב קדימה ואחורה למשך כ-20 עד 30 שניות.

לאחר מכן, באמצעות פינצטה להחזיק את הקצה המסומן של צינור פוליאתילן מחובר מזרק המכיל infusate בכ 0.5 ס"מ מן הקצה דיסטלי בעדינות להכניס את קצה הצינור לתוך הפפילה המופרכת. לקדם בעדינות את הצינור על ידי תנועות סיבוב קטנות כדי לעזור לצינורות להחליק, ואחריו הסתגלות מחדש של פינצטה 0.5 ס"מ קרוב לאחיזה הקודמת. חזור על תהליך זה עד שסימן שני הסנטימטרים מגיע לפפילה הפרוטידים.

לאחר מכן, כדי לאטום את הפפילה הפרוטידית ולהפחית את שפיכת החדירה בחזרה בחלל הפה, להחיל ציאנואקרילט על הלחי סביב הפפילה ועל הצינור המוחדר. ברגע הציאנואקרילאט מתייבש, הזריקו לאט לאט את החדירה במשך חמש דקות בקצב של 100 מיקרוליטרים לדקה. לאחר עירוי הושלם, להשאיר את הצינור במקום לפחות חמש דקות, ובכך לשמור על הצינור אטום ומאפשר infusate להישאר בבלוטה פרוטיד.

לבסוף, להסיר את הצינור עם המתיחה העדינה ואת cyanoacrylate ימשוך חופשי עם הצינור. פלואורוסקופיה באמצעות עירוי ניגודיות רדיו הדגים הסתעפות של הפתרון דרך צינור סטנסון לתוך בלוטת הפרוטיד. אימונו כניתוח הכימי של בלוטת הפרוטידים גילה כתמים חיוביים עבור EGFP הן בתאי הרקיע והן בתאי האצין המצביעים על טרנסדוקציה ותעתיק מוצלחים בשני סוגי התאים.

האתגר העיקרי בהליך זה הוא כנראה החדרת צינור פוליאתילן לתוך הפפילה, אשר צריך להיעשות בעדינות רבה לאט.