הקמת מערכת אקולוגית של תמנון למחקר ביו-רפואי וביו-הנדסה

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי כי הוא מנחה חוקרים על שמירה על סביבת תמנון, להסביר כיצד להקים את האקווריום, טיפול יומיומי של תמנונים. טכניקה זו מנחה חוקרים חדשים ללא חוויות טיפול בתמנון להגדיר סביבת אקווריום לתמנונים במעבדה ושמירה על תמנונים בריאים למחקר. חשוב שחוקרים חדשים עם תמנונים יבינו שבעלי חיים אלה דורשים מחויבות חזקה.

הם דורשים טיפול יומיומי ואיכות המים צריכה להיות במעקב רציף במצב יציב לפני שבעלי החיים אפילו מגיעים. שבוע לאחר הבשלת מיכלי התמנון, הקימו מיכל שרימפס נפרד על ידי העברת שמונה גלונים של מים מלוחים בוגרים למיכל, ואז הוסיפו 15 ק"ג של אלמוגים כתוש לתחתית המיכל. הוסיפו גם כמה סלעים חיים כדי לספק מקומות מסתור להתכה.

לאחר מכן, חבר מסנן מיכל לקצה המיכל והגדר אותו לפי הוראות היצרן. הוסף משאבת אוויר ליד המיכל המחובר לצינור עם אבן אוויר מחוברת שהונחה במיכל. ברגע שמשקעי האלמוגים המרוסקים מתפוגגים ניתן להוסיף את השרימפס למיכל, כדי להוסיף את השרימפס עם ההגעה, תחילה להעביר את השרימפס ממי המשלוח למיכל המים המלוחים המתווך הקטן במשך חמש דקות כדי להסיר פסולת ביולוגית, ואז ניתן להוסיף את השרימפס ישירות למיכל.

ניתן להוסיף דגי יתושים ישירות למיכל השרימפס. להאכיל את השרימפס ואת הדגים עם פתיתי דגים, צמחייה מתה, או אצות. בכל שבוע, נקו את המסנן, החליפו את רפידות המסנן ושנו 25% מהמים.

באמצעות ערכות לבדיקת מים, בדוק פרמטרים של חנקן, pH וטמפרטורה מדי יום במיכלי המזון. אם הפרמטרים של חנקן מים נשארים גבוהים, החליפו את המים בתדירות גבוהה יותר והוסיפו שקית סופגת חנקן. אם הבעיות נמשכות יותר מחודש, העבר את השרימפס למיכל גדול יותר.

עבור מיכל הסרטנים, לערום 10 ק"ג של חלוקי נחל בצד אחד כדי ליצור אדמה יבשה, ולמלא את הצד השני עם גלון אחד של מים מלוחים. לאחר מכן, מוסיפים סרטני כנר ישירות למיכל. סרטנים יבלו את רוב חייהם על היבשה, אבל יכולים להיות מתחת למים במשך כמה ימים בכל פעם, מה שהופך טנק תת-מימי חלקי קריטי להישרדותם לטווח הארוך.

להאכיל את סרטני הכנר פעם ביום על ידי הוספת פתיתי דגים לתוך המנה על האזור של הטנק. נקה את המיכלים כל שבוע על ידי הסרת הסרטנים תחילה ולאחר מכן שינוי 100% ממי המלח וניקוי חלוקי האבן. מניחים רכיכות דו-שנתיות ימיות, כגון צדפות ומולים, בתוך מיכל המים המלוחים התמנון.

רכיכות אלה ייפתחו, מתן מנגנון סינון מים אחר. לפני הכנסת התמנון למיכל, ודא שרמות האמוניה, הניטריט והחנקות הן מתחת ל- 5, 25 ו - 10 חלקים למיליון, בהתאמה. יש משאבת יד מים זמין כדי להסיר דיו תמנון מן המיכל.

שני אנשים נדרשים להליך זה. עם ההגעה, מניחים את השקית על הסקאלה ומתעדים את משקל השקית עם התמנון. הוסף אבן אוויר לשקית כדי להגדיל את חמצון המים תוך העברת החיה למיכל שלהם.

למדוד את הטמפרטורה ואת המליחות של מי המשלוח ולתעד מקרים של מחלה ממושכת לאחר המשלוח. מבלי להעביר מים מהתיק למיכל, תלו את תיק התובלה מעל פינת המיכל כשהשקית שקועה חלקית במי המיכל כדי להתחיל לשנות את הטמפרטורה של תיק ההובלה. מוציאים 10% מהמים מהשקית וזורקים אותם במורד הכיור, ואז מוסיפים את אותה כמות מים מהמיכל לשקית.

חוזרים על הפעולה כל 10 דקות עד שטמפרטורת המים בשקית שונה לא יותר ממעלת אחת מטמפרטורת המים במיכל. לאחר מכן, ללבוש כפפות ומניחים את שתי הידיים מתחת לתמנון כדי לספק תמיכה במהלך ההעברה. האדם השני יצטרך למשוך בעדינות את זרועות היניקה מצד השקית.

ברגע שהתמנון יוצא מהשקית, העבירו אותו במהירות למים של בית הגידול החדש שלו, והעבירו כמה שפחות מים משקית המשלוח. השתמש במשאבת היד כדי להסיר כל דיו התמנון משחרר כאשר במיכל. עכשיו לשקול את השקית עם מים כדי לקבל את המשקל המשוער של החיה.

במשך השבועיים הראשונים לאחר ההגעה, לפקח על הצריכה היומית של התמנון, אשר צריך להיות סביב 4 עד 8% ממשקלו. התמנון צריך להיבדק ארבע פעמים ביום. זה יכול להיות מופחת פעמיים ביום לאחר שבועיים.

שקול את החיה כל שבועיים ולהתאים את צריכת המזון לפי הצורך. השתמש בערכת בדיקה למים מלוחים הזמינה מסחרית לרמות pH, אמוניה, ניטריט וחנקות. הוסיפו את כמות מי המיכל המוכוונת לערכה לארבע המבחנות המסופקות עם הערכה.

כפי שצוין בערכת הבדיקה, הוסף את כמות המגיב הקלורימטרי לצינור המתאים. אם רמות האמוניה, הניטריט והחנקות הן מעל 5, 25 ו - 10 חלקים למיליון, בהתאמה, שטפו את הביומסה ממסנן הגרביים, או החליפו למסנן גרביים חדש. בנוסף, לנקות ביומסה מראש הרחפן עם מברשת ולהוסיף חיידקים ג'ינס נוספים למיכל.

אם הבעיות נמשכות, ואז להחליף 25% מהמים עם מים מלוחים מתוקים. באמצעות משאבת יד, להסיר את כל סרטנים מתים פגרי שרימפס מן הטנק, כמו גם כל חומר צואה תמנון. מוציאים את כל הסרטנים החיים הנותרים מהמיכל ומעבירים אותם בחזרה למיכל האחסון.

לאחר מכן, סדר מחדש חפצים גדולים בתוך המיכל. לאחר מכן, הציגו מחצית ממספר הסרטנים שהתמנון יאכל מדי יום למיכל. להאכיל שרימפס מופשר או סרטני כנר זכר קטנים לתמנונים צעירים.

בהתאם לניסוי, סרטנים ושרימפס ניתן להציג בכל מקום במיכל, או לתמנון ישירות. תציע חמישה חסילונים רפאים מדי יום. כדי לספק מגוון רחב של מזון לתמנון, לתת צדפה חיה אחת או מולים פעם בשבוע, ותמיד לשמור על שלושה דגי יתושים בתוך הטנק.

עבור תברואה שבועית, כבה את אורות הרחפן, המשאבה ופח האצות לפני ניקוי מערכת המשאבה, ולאחר מכן כבה את השסתום האוטומטי של המערכת לפני הסרת מים. לבסוף, להסיר את הרחפן ואת כל המים רק ממערכת sump. לשפשף קלות את פח האצות כדי להסיר את רוב הביומסה מקירותיה ולנקות את שאר אזור הסיכום עם מברשת, ולאחר מכן להסיר את מסנן הגרביים, לנקות אותו עם חומץ, ולתת לו להתייבש.

לסובב עם מסנן גרביים אחר בכל שבוע, החלפה עם חדשים כל שלושה חודשים. לאחר ניקוי הביומסה מראש הרחפן, החזירו את הרחפן למערכת והתחילו למלא במי מלח. כאשר אזור המשאבה מתחיל להתמלא, הפעל שוב את כל המערכות.

הפסק להוסיף מים כאשר החלק העליון האוטומטי של שסתום צף הוא במצב כבוי. מבחנה ללא יצירה היא מבחן בעל ערך להבנת תפקוד החושים, כמו גם למידת יכולות הזיכרון של תמנונים. בדיקה זו בוצעה מדי יום בשלושה תמנונים, ולקח לתמנונים ארבעה ימים בממוצע ללמוד כיצד לפתוח את המבחנה.

מוצגות כאן תמונות MRI ברזולוציה מרחבית גבוהה במיוחד של המוח והזרועות של התמנון, אשר יחד, יוצרים מערכת עצבים המכילה מעל 500 מיליון נוירונים. זוהי תצוגה קורונל של הראש, מראה את המוח ואת האונות האופטיות. במבט הקורונלי של הזרועות, חבל הגרזן נראה בכל אחת משבע הזרועות, ומבט קשתי של הפראיירים מדגים מבנה עצבים היקפי מורכב.

הדמיית טומוגרפיה של קריו-פלואורסצנטיות, המייצרת תמונה מורפולוגית תלת-ממדית של החיה כולה, אפשרה הדמיה של המוח ושל הפראיירים הממוקמים לאורך הזרוע באורך הגל של 470 ננומטר. מערכת העיכול מדמיינת באורכי הגל של 555 ו-640 ננומטר. לאחר שטכניקה זו פותחה, ניתן היה להשתמש בכלי למידת מכונה למעקב וסיווג תנועות התמנון.